Steroid-responsive myelitis in dogs - comparison with steroid-responsive meningitis-arteritis

Background: Myelitis is the inflammation of the spinal cord parenchyma alone, whereas meningitis is the inflammation of the meninges. Steroid-responsive meningitis-arteritis (SRMA) is a meningomyelitis in which the major lesions involve the meninges, not the spinal cord parenchyma, and respond well to glucocorticoid treatment. However, myelitis in dogs has rarely been reported, and myelitis with a good response to glucocorticoid treatment without relapse has not been reported. This report describes 5 cases of steroid-responsive myelitis (SRM) in dogs. Cases: Case 1. A 8-year-old intact female Cocker Spaniel presented with progressive nonambulatory paraplegia. Whole spinal parenchymal lesions were identified using magnetic resonance imaging (MRI) scan. Mononuclear pleocytosis with increased total protein levels was the only abnormal finding on cerebrospinal fluid (CSF) analysis. Prednisolone (PDS) was administered followed by dose tapering according to therapeutic response. Cyclosporine was administered until the termination of PDS. Since then, no recurrence of neurological symptoms has been observed. Follow-up MRI and CSF analysis revealed resolution of previously observed abnormal findings. Case 2. A 2-year-old intact female Maltese presented with non-progressive paraparesis. A spinal parenchymal lesion in the lumbosacral region was observed on MRI. PDS was administered and slowly tapered at approximately 3-week intervals. No recurrence of neurological symptoms was observed after the treatment. Case 3. A 6-year-old intact female Miniature Pinscher presented with neck pain, along with leukocytosis and neutrophilia. Cervical spinal parenchyma lesions were revealed through MRI. Increased total protein concentration with mixed cell pleocytosis was observed on CSF analysis. Immunomodulatory therapy, similar to that in case 2, was initiated. A second MRI and CSF analysis revealed an improvement in the previously observed abnormalities. Case 4. A 2-year-old, intact female Toy Poodle presented with acute paraplegia and back pain. Lesions were observed in the spinal parenchyma at the T12-L3 levels on MRI. The treatment was conducted as in case 2. During treatment, neurological symptoms, including paraplegia and back pain, were not observed. Follow-up MRI revealed improvement in the spinal lesion. Case 5. A 6-month-old, castrated male Standard Poodle presented with progressive paraparesis. On MRI, lesions were observed in the T11-T13 regions. Immunomodulation therapy, similar to that in case 2, was initiated. No recurrence of neurological symptoms was observed after treatment initiation Discussion: SRM is similar to SRMA in terms of good steroid-responsiveness and noninfectious inflammation etiology; however, it does not exactly satisfy the diagnostic criteria for SRMA, nor does it progress similarly. The characteristics of SRM that do not satisfy the diagnostic criteria of SRMA include the absence of fever, C-reactive protein elevation, hyperglobulinemia, and relapse, and the presence of spinal parenchymal lesions without parenchymal or meningeal enhancement on MRI. It is also a seemingly different from spinal cord-only meningoencephalomyelitis of unknown origin due to its better treatment response and prognosis. However, the dogs in the present report with SRM satisfied the diagnostic criteria for transverse myelitis in human patients. Therefore, SRM, including good steroid responsiveness and good prognosis without relapse, may represent a novel type of meningomyelitis.

Gonadotropin inhibitory hormone downregulates steroid hormone secretion and genes expressions in duck granulosa cells

Abstract The mechanisms by which GnIH regulates the steroid synthesis pathway in duck granulosa cells remain poorly understood. In this study, we measured steroid hormone secretion by ELISA and reproduction-associated gene expression by quantitative real-time Polymerase Chain Reaction (qPCR) in duck granulosa cells treated with different concentrations of GnIH (0, 0.1, 1, 10, and 100 ng/mL) for 24 h. The genome-wide expression profiles of GnIH-treated cells (0 and 10 ng/mL) were evaluated by high-throughput RNA sequencing. Compared with untreated cells, the secretion of the steroid hormones E2, E1, P4, and T was downregulated, with that of E1 and P4 reaching statistical significance (P<0.05); in contrast, the secretion of ACV and INH was significantly upregulated (P<0.05) after treatment with 10 and 100 ng/mL GnIH. The expression of encoding steroidogenic proteins and enzymes genes (STAR, CYP11A1, CYP17A1, CYP19A1, and 3-β-HSD) and encoding gonadotropin receptors genes (FSHR, LHR) were significantly declined (P<0.05) in the 10 and 100 ng/mL GnIH treatments. Transcriptome sequencing identified 348 differentially expressed genes (DEGs), including 253 upregulated and 95 downregulated genes. The DEGs were mainly involved in cell growth and death, immune response, and steroid biosynthesis pathways. We identified four novel DEGs (MROH5, LOC113840576, SDR42E1, and LOC113841457) with key roles in the regulation of steroid hormone biosynthesis. Our study revealed changes in gonadal steroid hormone secretion and steroid biosynthesis pathway-related gene expression in duck granulosa cells under the inhibitory effect of GnIH. These data contribute to our understanding of the molecular and genetic mechanisms underlying reproduction in ducks.

Gonadotropin inhibitory hormone downregulates steroid hormone secretion and genes expressions in duck granulosa cells

The mechanisms by which GnIH regulates the steroid synthesis pathway in duck granulosa cells remain poorly understood. In this study, we measured steroid hormone secretion by ELISA and reproduction-associated gene expression by quantitative real-time Polymerase Chain Reaction (qPCR) in duck granulosa cells treated with different concentrations of GnIH (0, 0.1, 1, 10, and 100 ng/mL) for 24 h. The genome-wide expression profiles of GnIH-treated cells (0 and 10 ng/mL) were evaluated by high-throughput RNA sequencing. Compared with untreated cells, the secretion of the steroid hormones E2, E1, P4, and T was downregulated, with that of E1 and P4 reaching statistical significance (P<0.05); in contrast, the secretion of ACV and INH was significantly upregulated (P<0.05) after treatment with 10 and 100 ng/mL GnIH. The expression of encoding steroidogenic proteins and enzymes genes (STAR, CYP11A1, CYP17A1, CYP19A1, and 3-β-HSD) and encoding gonadotropin receptors genes (FSHR, LHR) were significantly declined (P<0.05) in the 10 and 100 ng/mL GnIH treatments. Transcriptome sequencing identified 348 differentially expressed genes (DEGs), including 253 upregulated and 95 downregulated genes. The DEGs were mainly involved in cell growth and death, immune response, and steroid biosynthesis pathways. We identified four novel DEGs (MROH5, LOC113840576, SDR42E1, and LOC113841457) with key roles in the regulation of steroid hormone biosynthesis. Our study revealed changes in gonadal steroid hormone secretion and steroid biosynthesis pathway-related gene expression in duck granulosa cells under the inhibitory effect of GnIH. These data contribute to our understanding of the molecular and genetic mechanisms underlying reproduction in ducks.(AU)

The effect of different hormones and antibiotics on activity of ast enzyme and its isozymes in Wistar rats

Background: One of the valuable tests for diagnosis of cardiovascular and liver diseases is measuring of AST activity. One of the main enzymes of transaminases group is aspartate aminotransferase. Previous Studies have shown that some alteration may occur in mitochondria function as the result of different disease or taking different medication; these changes in mitochondrial and cytosolic AST isozymes can be the sign of disorders. According to the role of steroid hormone in induction of its effects on protein synthesis genes, this study is conducted to shed some light on mechanisms and the interference of steroid hormones and antibiotics.Materials, Methods & Results: In this study, male Wistar rats were injected intramuscularly with Testosterone, progesterone and estradiol; while tetracycline and streptomycin injections were intraperitoneal. Testosterone, progesterone and estradiol injections were carried out in a short-term (15 days) and long-term (45 days) periods. Steroid hormones were dissolved in sesame in a way that by each injection, 0.2 mL sesame oil (containing specific amount of hormone) was injected to the rat. Control group was kept in the same condition except that their sesame oil injection contained no hormone. Tetracycline and Streptomycin injection was carried out for 5 days at 7 am and pm, at 50 mg/kg dosage intraperitoneally. In short- and long-term periods, rats were divided into four groups of 6-member. The concentrations were the same in the periods and 0.2 mL sesame oil was injected intramuscularly. 1 mg testosterone, 12 mg progesterone and 0.2 mg estradiol were intramuscularly injected to rats in group 2, 3 and 4, respectively [10]. Rats were divided into 9 six-member groups as follows:[...]

The effect of different hormones and antibiotics on activity of ast enzyme and its isozymes in Wistar rats

Background: One of the valuable tests for diagnosis of cardiovascular and liver diseases is measuring of AST activity. One of the main enzymes of transaminases group is aspartate aminotransferase. Previous Studies have shown that some alteration may occur in mitochondria function as the result of different disease or taking different medication; these changes in mitochondrial and cytosolic AST isozymes can be the sign of disorders. According to the role of steroid hormone in induction of its effects on protein synthesis genes, this study is conducted to shed some light on mechanisms and the interference of steroid hormones and antibiotics.Materials, Methods & Results: In this study, male Wistar rats were injected intramuscularly with Testosterone, progesterone and estradiol; while tetracycline and streptomycin injections were intraperitoneal. Testosterone, progesterone and estradiol injections were carried out in a short-term (15 days) and long-term (45 days) periods. Steroid hormones were dissolved in sesame in a way that by each injection, 0.2 mL sesame oil (containing specific amount of hormone) was injected to the rat. Control group was kept in the same condition except that their sesame oil injection contained no hormone. Tetracycline and Streptomycin injection was carried out for 5 days at 7 am and pm, at 50 mg/kg dosage intraperitoneally. In short- and long-term periods, rats were divided into four groups of 6-member. The concentrations were the same in the periods and 0.2 mL sesame oil was injected intramuscularly. 1 mg testosterone, 12 mg progesterone and 0.2 mg estradiol were intramuscularly injected to rats in group 2, 3 and 4, respectively [10]. Rats were divided into 9 six-member groups as follows:[...](AU)

17,20 beta-P and cortisol are the main in vitro metabolites of 17-hydroxy-progesterone produced by spermiating testes of Micropogonias furnieri (Desmarest, 1823) (Perciformes Sciaenidae)

The aim was to investigate the major C21 steroids produced by spermiating white croaker Micropogonias furnieri (Sciaenidae) in order to establish the potential mediator of gamete maturation in males of this species. The testes steroid production at the spawning season was identified incubating the 3H-17-hydroxy-4-pregnene-3,20-dione precursor through thin layer chromatography, high pressure liquid chromatography, enzymatic oxydation, acetylation and immunochemistry analyses. 17,20β-Dihydroxy-4-pregnen-3-one (17,20β-P) and 11β,17,21-Trihydroxy-4-pregnene-3,20-dione (cortisol) were the main metabolites produced. Contrary to what we expected, 17,20β,21-Trihydroxy-4-pregnen-3-one was not detected. Circulating levels of 17,20β-P were undetectable in immature testes and in those at the first spermatogenesis stages, while a clear increase was observed during the whole spermatogenesis and spermiation phases (from undetectable to 1047 pg mL-1). In vitro studies together with plasma detection suggest that 17,20β-P is a good steroid candidate involved in M. furnieri testes maturation. The role of cortisol during late phases of testes development needs further studies.(AU)

El objetivo fue investigar cuales eran los esteroides C21 más importantes producidos por los testículos en espermiación de la corvina blanca Micropogonias furnieri (Sciaenidae) para poder identificar los potenciales mediadores de la maduración gamética de los machos de esta especie. Los esteroides producidos por los testículos en espermiación fueron identificados después de su incubación con el precursor 3H-17-hidroxi-4-pregnene-3,20-diona a través de cromatografía de capa fina y cromatografía líquida de alta presión y posteriormente por oxidación enzimática, acetilación e inmunoquímica. Los principales metabolitos producidos por los testículos en espermiación fueron la 17,20β-Dihidroxi-4-pregnen-3-ona (17,20β-P) y la 11β,17,21-Trihidroxi-4-pregnene-3,20-diona (cortisol). Contrariamente a lo esperado, no se encontró el derivado tri-hidroxilado de la progesterona llamado 17,20β,21-Trihidroxi-4-pregnen-3-ona. Los niveles circulantes de 17,20β-P fueron no detectable en los testículos inmaduros y en aquellos en inicios de espermatogénesis, mientras que un aumento claro en las concentraciones circulantes fue detectada en corvinas en plena espermatogénesis y en espermiación (desde no detectable a 1047 pg mL-1). Los resultados obtenidos in vitrojunto a los cambios a nivel plasmático sugieren que la 17,20β-P es un buen candidato a proponer como esteroide involucrado en la regulación del proceso de maduración testicular de la corvina. La función del cortisol a nivel testicular debería ser mejor estudiada en las etapas finales del desarrollo testicular de esta especie.(AU)

EFEITO DA PROPORÇÃO SEXUAL E DA DENSIDADE DE ESTOCAGEM SOBRE O DESEMPENHO REPRODUTIVO DO LAMBARI Astyanax altiparanae(Characiformes: Characidae) EM SISTEMA SEMI-NATURAL

Nosso objetivo foi avaliar o efeito das diferentesdensidades de estocagem e proporções sexuais sobre o desempenho reprodutivo da espécie Astyanax altiparanaeem sistema semi-natural. Foram realizados dois experimentos distintos, para o primeiro objetivo testamos quatro densidades de estocagem (3; 6; 12; 24 indivíduos) com quatro réplicas, mantendo sempre a proporção sexual de dois machos para uma fêmea. Quando o efeito da proporção sexual foi avaliado, utilizamos cinco proporções diferentes (1:1; 2:1; 3:1; 1;2; 1:3; macho: fêmea) e dois controles com três repetições, respeitando a densidade de 12 indivíduosem cada unidade experimental. Em ambos os experimentos os tratamentos foramcomparados pelo desempenho reprodutivo por meio de variáveiscomo: a sobrevivência dos reprodutores,aproporção de réplicas com desovas, o volume de desova,percentual médio de fêmeas desovadas por réplica,taxas de fertilidade eeclosão,número de embriões obtidos por tratamento, histologia dos ovários e concentrações plasmáticas dos esteroides sexuais. A densidade não influenciou de forma negativa no desempenho reprodutivo da espécie, sendo observados os melhores desempenhos para as variáveis: volume médio de desova considerando apenas as réplicas onde houve desova131,50±33,17ml e no número médio de embriões viáveis 73819,2±20462,1, nas unidades com maior densidade (24) animais. Notamos desempenhos muito semelhantes quando as diferentes proporções foram testadas, sendo a variável volume relativo de desovana qual a proporção de (3 machos: 1 fêmea) se mostrou mais eficiente que as demais 1,41±0,84ml/g. Sugerimos a utilização da densidade de 24 animais e a proporção de (3 machos: 1 fêmea) visando maior produtividade em um curto período de tempo e trabalho aliada a um menor consumo de hormônio, respeitando as condições aqui propostas.

Our objective was to evaluate the effect of different storage densitiesand sexual proportions on the reproductive performance of the species Astyanax altiparanaein a semi-natural system. Two different experiments were carried out. For the first objective, we tested four stocking densities (3; 6; 12; 24 individuals) with four replicates, always maintaining the sex ratio of two males to one female. When the sex ratio effect was evaluated, we used five different ratios (1: 1, 2: 1, 3: 1, 1, 2, 1: 3, male: female) and two controls with three replicates, respecting the density of12 individuals in each experimental unit. In both experiments the treatments were compared by reproductive performance using variables such as: reproductive survival, proportion of replicates with spawning, spawning volume, mean percentage of spawned females per replicate, fertility and hatching rates, number treatment embryos, ovarian histology, and plasma steroid plasma concentrations. The density did not negatively influence the reproductive performance of the species, with the best performances for thevariables: average spawning volume considering only spawning replicates of 131.50 ± 33.17 ml and the average number of viable embryos 73819.2 ± 20462.1, in the units with higher density (24) animals. We observed very similar performances when the different proportions were tested, being the relative variable spawning volume in which the proportion of (3 males: 1 female) was more efficient than the other 1.41 ± 0.84 ml / g. We suggest the use of the density of 24 animals and the proportion of (3 males: 1 female) aiming for a greater production in a short period of time and work combined witha lower consumption of hormone, respecting the conditions proposed here.

Efeito de vitaminas e esterol como aditivos foliares no desenvolvimento de Bombyx mori L. e influência do modo de aplicação / Effect of vitamins and sterol as foliar additives in the development of Bombyx mori L. and influence of the application mode

O objetivo deste estudo foi avaliar os efeitos e os métodos de aplicação dos aditivos foliares decanoato de nandrolona (esteroide anabolizante) a 0,5%, ácido ascórbico (vitamina C) a 0,5%, palmitato de retinol (vitamina A) a 0,5% e acetato de retinol (vitamina A) a 1,0% em alguns parâmetros biológicos do bicho-da-seda. No experimento do modo de aplicação (pulverização foliar antes do fornecimento, depois do fornecimento e por imersão antes do fornecimento) foram utilizados: decanoato de nandrolona 0,5%; ácido ascórbico 0,5%; e palmitato de retinol 0,5%. No ensaio de desenvolvimento do inseto foram avaliados: duração e viabilidade larval; peso de casulo; taxa de encasulamento; teor líquido de seda; longevidade de adultos; número de ovos por fêmea; e duração do período de subida ao bosque. Para o modo de aplicação determinaram-se: ganho de peso, comprimento, diâmetro do tórax e diâmetro do abdome de lagartas de 5º ínstar, assim como comprimento, diâmetro e peso de glândula sericígena. Os resultados mostraram que, apesar de o ácido ascórbico proporcionar os melhores valores para o desenvolvimento corpóreo das lagartas, este não corresponde a incrementos significativos na produção; o palmitato de retinol não melhora o desenvolvimento das lagartas; o acetato de retinol e o palmitato de retinol prolongam o período larval, sem, no entanto, alterar significativamente os parâmetros de produção; a imersão de folhas antes do fornecimento às lagartas é mais viável para a aplicação dos aditivos.(AU)

The present study was aimed to evaluate the effects of different methods of foliar application of the additives nandrolone decanoate (anabolic steroid) 0,5%; ascorbic acid (vitamin C) 0,5%; retinol palmitate (vitamin A) 0,5%; and retinol acetate (vitamin A) 1,0% on some biological parameters of the silkworm. The experiment of application method (foliar spray prior to delivery, after delivery and soaking before feeding) used: nandrolone decanoate 0.5%, ascorbic acid 0.5%, and retinol palmitate 0.5%. The test of insect development evaluated: duration and larval viability, weight of cocoon, cocooning rate, liquid silk content, adult longevity, number of eggs per female and rising up time. For the application of foliar additives, the following were determined: weight gain, length, diameter and abdomen diameter of fifth instar larvae, and length, diameter and weight of silk gland. The results showed that although ascorbic acid provided the best value for the development of the caterpillars body, it did not correspond to significant increase in production; retinol palmitate did not affect the larvae body development; retinol acetate and retinol palmitate prolong the larval period, without, however, significantly altering the production parameters. The immersion method of leaves before being delivered to the caterpillars is the most feasible for the foliar application of additives.(AU)

Efeito de vitaminas e esterol como aditivos foliares no desenvolvimento de Bombyx mori L. e influência do modo de aplicação / Effect of vitamins and sterol as foliar additives in the development of Bombyx mori L. and influence of the application mode

O objetivo deste estudo foi avaliar os efeitos e os métodos de aplicação dos aditivos foliares decanoato de nandrolona (esteroide anabolizante) a 0,5%, ácido ascórbico (vitamina C) a 0,5%, palmitato de retinol (vitamina A) a 0,5% e acetato de retinol (vitamina A) a 1,0% em alguns parâmetros biológicos do bicho-da-seda. No experimento do modo de aplicação (pulverização foliar antes do fornecimento, depois do fornecimento e por imersão antes do fornecimento) foram utilizados: decanoato de nandrolona 0,5%; ácido ascórbico 0,5%; e palmitato de retinol 0,5%. No ensaio de desenvolvimento do inseto foram avaliados: duração e viabilidade larval; peso de casulo; taxa de encasulamento; teor líquido de seda; longevidade de adultos; número de ovos por fêmea; e duração do período de subida ao bosque. Para o modo de aplicação determinaram-se: ganho de peso, comprimento, diâmetro do tórax e diâmetro do abdome de lagartas de 5º ínstar, assim como comprimento, diâmetro e peso de glândula sericígena. Os resultados mostraram que, apesar de o ácido ascórbico proporcionar os melhores valores para o desenvolvimento corpóreo das lagartas, este não corresponde a incrementos significativos na produção; o palmitato de retinol não melhora o desenvolvimento das lagartas; o acetato de retinol e o palmitato de retinol prolongam o período larval, sem, no entanto, alterar significativamente os parâmetros de produção; a imersão de folhas antes do fornecimento às lagartas é mais viável para a aplicação dos aditivos.(AU)

The present study was aimed to evaluate the effects of different methods of foliar application of the additives nandrolone decanoate (anabolic steroid) 0,5%; ascorbic acid (vitamin C) 0,5%; retinol palmitate (vitamin A) 0,5%; and retinol acetate (vitamin A) 1,0% on some biological parameters of the silkworm. The experiment of application method (foliar spray prior to delivery, after delivery and soaking before feeding) used: nandrolone decanoate 0.5%, ascorbic acid 0.5%, and retinol palmitate 0.5%. The test of insect development evaluated: duration and larval viability, weight of cocoon, cocooning rate, liquid silk content, adult longevity, number of eggs per female and rising up time. For the application of foliar additives, the following were determined: weight gain, length, diameter and abdomen diameter of fifth instar larvae, and length, diameter and weight of silk gland. The results showed that although ascorbic acid provided the best value for the development of the caterpillars body, it did not correspond to significant increase in production; retinol palmitate did not affect the larvae body development; retinol acetate and retinol palmitate prolong the larval period, without, however, significantly altering the production parameters. The immersion method of leaves before being delivered to the caterpillars is the most feasible for the foliar application of additives.(AU)

Efeito de vitaminas e esterol como aditivos foliares no desenvolvimento de Bombyx mori L. e influência do modo de aplicação

The present study was aimed to evaluate the effects of different methods of foliar application of the additives nandrolone decanoate (anabolic steroid) 0,5%; ascorbic acid (vitamin C) 0,5%; retinol palmitate (vitamin A) 0,5%; and retinol acetate (vitamin A) 1,0% on some biological parameters of the silkworm. The experiment of application method (foliar spray prior to delivery, after delivery and soaking before feeding) used: nandrolone decanoate 0.5%, ascorbic acid 0.5%, and retinol palmitate 0.5%. The test of insect development evaluated: duration and larval viability, weight of cocoon, cocooning rate, liquid silk content, adult longevity, number of eggs per female and rising up time. For the application of foliar additives, the following were determined: weight gain, length, diameter and abdomen diameter of fifth instar larvae, and length, diameter and weight of silk gland. The results showed that although ascorbic acid provided the best value for the development of the caterpillars body, it did not correspond to significant increase in production; retinol palmitate did not affect the larvae body development; retinol acetate and retinol palmitate prolong the larval period, without, however, significantly altering the production parameters. The immersion method of leaves before being delivered to the caterpillars is the most feasible for the foliar application of additives.

O objetivo deste estudo foi avaliar os efeitos e os métodos de aplicação dos aditivos foliares decanoato de nandrolona (esteroide anabolizante) a 0,5%, ácido ascórbico (vitamina C) a 0,5%, palmitato de retinol (vitamina A) a 0,5% e acetato de retinol (vitamina A) a 1,0% em alguns parâmetros biológicos do bicho-da-seda. No experimento do modo de aplicação (pulverização foliar antes do fornecimento, depois do fornecimento e por imersão antes do fornecimento) foram utilizados: decanoato de nandrolona 0,5%; ácido ascórbico 0,5%; e palmitato de retinol 0,5%. No ensaio de desenvolvimento do inseto foram avaliados: duração e viabilidade larval; peso de casulo; taxa de encasulamento; teor líquido de seda; longevidade de adultos; número de ovos por fêmea; e duração do período de subida ao bosque. Para o modo de aplicação determinaram-se: ganho de peso, comprimento, diâmetro do tórax e diâmetro do abdome de lagartas de 5º ínstar, assim como comprimento, diâmetro e peso de glândula sericígena. Os resultados mostraram que, apesar de o ácido ascórbico proporcionar os melhores valores para o desenvolvimento corpóreo das lagartas, este não corresponde a incrementos significativos na produção; o palmitato de retinol não melhora o desenvolvimento das lagartas; o acetato de retinol e o palmitato de retinol prolongam o período larval, sem, no entanto, alterar significativamente os parâmetros de produção; a imersão de folhas antes do fornecimento às lagartas é mais viável para a aplicação dos aditivos.

Dynamics of ovarian maturation during the reproductive cycle of Metynnis maculatus, a reservoir invasive fish species (Teleostei: Characiformes)

In this study, we evaluated the dynamics of ovarian maturation and the spawning processes during the reproductive cycle of Metynnis maculatus. Adult females (n = 36) were collected bimonthly between April 2010 and March 2011. The mean gonadosomatic index (GSI) was determined, ovarian and blood samples were submitted for morphometric evaluation and the steroid plasma concentration was determined by ELISA. This species demonstrated asynchronous ovarian development with multiple spawns. This study revealed that, although defined as a multiple spawning species, the ovaries of M. maculatus have a pattern of development with a predominance of vitellogenesis between April and August and have an intensification in spawning in September; in October, a drop in the mean GSI values occurred, and the highest frequencies of post-ovulatory follicles (POFs) were observed. We observed a positive correlation between the POF and the levels of 17α-hydroxyprogesterone. Metynnis maculatus has the potential to be used as a source of pituitary tissue for the preparation of crude extracts for hormonal induction; the theoretical period for use is from September to December, but specific studies to determine the feasibility of this approach must be conducted.(AU)

Neste estudo, avaliamos a dinâmica da maturação ovariana a desova durante o ciclo reprodutivo de Metynnis maculatus. Fêmeas adultas (n = 36) foram coletadas bimestralmente entre abril de 2010 e março de 2011. O índice gonadossomático (IGS) foi calculado e amostras de ovário e de sangue foram submetidas à avaliação morfométrica e das concentrações plasmáticas dos esteroides por ELISA, respectivamente. A espécie apresenta desenvolvimento ovariano assincrônico, com múltiplas desovas. Neste estudo revelamos que mesmo sendo de desova parcelada, os ovários do M. maculatus mostraram um padrão de desenvolvimento com predomínio de atividade vitelogênica entre abril a agosto e intensificação da desova em setembro. Em outubro houve uma diminuição nos valores médios de IGS, bem como registramos as maiores frequências de folículos pós-ovulatórios (FPOs). Observamos uma correlação positiva entre a frequência de FPOs e a concentração plasmática de 17 α-OHP. O M. maculatus tem potencial para ser usado como fonte para uso de hipófise para preparo de extrato bruto para indução hormonal, sendo o período teórico para coleta de hipófises de setembro a outubro, mas estudos específicos para esta finalidade ainda precisam ser desenvolvidos.(AU)

Dynamics of ovarian maturation during the reproductive cycle of Metynnis maculatus, a reservoir invasive fish species (Teleostei: Characiformes)

In this study, we evaluated the dynamics of ovarian maturation and the spawning processes during the reproductive cycle of Metynnis maculatus. Adult females (n = 36) were collected bimonthly between April 2010 and March 2011. The mean gonadosomatic index (GSI) was determined, ovarian and blood samples were submitted for morphometric evaluation and the steroid plasma concentration was determined by ELISA. This species demonstrated asynchronous ovarian development with multiple spawns. This study revealed that, although defined as a multiple spawning species, the ovaries of M. maculatus have a pattern of development with a predominance of vitellogenesis between April and August and have an intensification in spawning in September; in October, a drop in the mean GSI values occurred, and the highest frequencies of post-ovulatory follicles (POFs) were observed. We observed a positive correlation between the POF and the levels of 17-hydroxyprogesterone. Metynnis maculatus has the potential to be used as a source of pituitary tissue for the preparation of crude extracts for hormonal induction; the theoretical period for use is from September to December, but specific studies to determine the feasibility of this approach must be conducted.

Neste estudo, avaliamos a dinâmica da maturação ovariana a desova durante o ciclo reprodutivo de Metynnis maculatus. Fêmeas adultas (n = 36) foram coletadas bimestralmente entre abril de 2010 e março de 2011. O índice gonadossomático (IGS) foi calculado e amostras de ovário e de sangue foram submetidas à avaliação morfométrica e das concentrações plasmáticas dos esteroides por ELISA, respectivamente. A espécie apresenta desenvolvimento ovariano assincrônico, com múltiplas desovas. Neste estudo revelamos que mesmo sendo de desova parcelada, os ovários do M. maculatus mostraram um padrão de desenvolvimento com predomínio de atividade vitelogênica entre abril a agosto e intensificação da desova em setembro. Em outubro houve uma diminuição nos valores médios de IGS, bem como registramos as maiores frequências de folículos pós-ovulatórios (FPOs). Observamos uma correlação positiva entre a frequência de FPOs e a concentração plasmática de 17 -OHP. O M. maculatus tem potencial para ser usado como fonte para uso de hipófise para preparo de extrato bruto para indução hormonal, sendo o período teórico para coleta de hipófises de setembro a outubro, mas estudos específicos para esta finalidade ainda precisam ser desenvolvidos.

Adição de quercetina e progesterona ao sêmen equino

As variações e dificuldades em manter os parâmetros espermáticos da célula equina após manipulação (resfriamento e congelamento) nos leva a uma busca por substâncias que possam ser adicionadas aos meios de diluição de sêmen com o intuito de manter ou ainda melhorar a viabilidade celular. Com esse intuito, a presente dissertação testou, em dois experimentos, a adição de quercetina e progesterona ao sêmen equino. No experimento referente a adição da quercetina foram utilizados 10 cavalos da raça Crioula com idades entre 4 e 8 anos; a coleta de sêmen foi realizada com vagina artificial e 3 ejaculados de cada animal foi obtido (totalizando 30 ejaculados). As amostras foram submetidas a 5 diferentes tratamentos (0; 0,25mM; 0,5mM; 0,75mM e 1mM) de quercetina adicionadas previamente ao diluente de congelamento. As análises referentes aos parâmetros cinéticos da célula foram avaliadas de maneira subjetiva por uma pessoa treinada em microscópio contraste-fase e os parâmetros referentes a viabilidade da população espermática foram obtidos através de citometria de fluxo. A análise estatística realizada a partir dos dados obtidos não demonstrou diferença significativa entre os tratamentos e o controle (P > 0,05). O experimento referente a adição de progesterona foi realizado em duas etapas; a primeira etapa consistiu na realização de um teste de toxicidade do sêmen as diferentes concentrações do hormônio. A coleta do sêmen foi realizada com vagina artificial de um total de 10 cavalos da raça Crioula com idades entre 4 e 10 anos; posteriormente a isso as amostras foram submetidas a resfriamento até a temperatura de 5°C e adicionados os tratamentos contendo 7 diferentes concentrações de progesterona (0; 1; 2,5; 5; 10; 100 e 1000 ng/mL) em 3 tempos de exposição (0,5h; 3h e 24h). A segunda etapa consistiu na criopreservação do sêmen obtidos através de vagina artificial de 15 cavalos da raça Crioula com idades entre 4 e 10 anos. Os ejaculados foram submetidos aos tratamentos com 5 concentrações diferentes de progesterona (0; 1; 5; 10 e 100 ng/mL) adicionados ao meio diluente de criopreservação previamente ao congelamento. As análises em ambas as fases do experimento, dos parâmetros cinéticos espermáticos foram feitas pelo Sistema Computadorizado de Análise de Sêmen (CASA), bem como em ambas as avaliações feitas por citometria de fluxo referentes a viabilidade da população espermática.A análise estatística realizada posteriormente ao teste de toxicidade, ou seja, com o sêmen resfriado demonstrou melhora estatística (P < 0,05) nas concentrações de 5 e 1000 ng/mL no período de 3h de exposição em parâmetros relacionados com velocidade e distância percorrida do espermatozoide (DAP, DCL, DSL, VAP, VCL, VSL). Houve também aumento significativo na reação de acrossoma após 24 horas de exposição na concentração de 5 ng/mL e diminuição significativa (P < 0,05) da peroxidação lipídica (LPO) nas concentrações de 10, 100 e 1000 ng/mL também no período de 24 horas. Os dados obtidos das amostras pós-descongelamento demonstraram uma diminuição (P <0,05) da produção de espécies reativas de oxigênio (ROS), entretanto os outros parâmetros avaliados não diferiram estatisticamente do controle. A partir de todos os dados obtidos nos dois experimentos é possível afirmar que a adição de quercetina e progesterona ao meio de diluição, previamente a criopreservação não é interessante, uma vez que não impõe melhoras significativas na qualidade espermáticas; entretanto a adição de progesterona ao sêmen fresco resfriado demonstrou ações benéficaspara imediata utilização do sêmen, como hiperativação,capacitação e ação anti-oxidante.

The variations and difficulties on maintaining the equine sperm parameters after manipulation (cooling and cryopreservation) take the scientists in a journey researching for substances that are able to be added to the dilution semen medium in order to keep or improve sperm viability. That being said, the present study has tested, in two different experiments, the addition of quercetin and progesterone to the equine semen. In the quercetin experiment, 10 Crioulo horses with ages between 4 and 10 years old were used, semen collection were performed with artificial vagina and 3 ejaculates of each animal were obtained (totalizing 30 ejaculates). The samples were submitted to 5 different treatments (0; 0,25mM; 0,5mM; 0,75mM and 1mM) of quercetin added in the freezing medium before the cryopreservation process. The analyzes concerning kinect sperm parameters were assessed in a subjective manner by a trained person in phase-contrast microscope and the parameters related to sperm population viability were examined by flow cytometry. Statistical analysis made from data obtained did not showed significant difference between treatments and the control (P > 0,05). The progesterone addition experiment was performed in two phases; the first phase consisted in the realization of a sperm toxicity test to the different hormonal concentrations. Semen collection was also realized with artificial vagina in a total of 10 Crioulo horses in ages between 4 to 10 years; posteriorly semen samples were submitted to cooling process until reach 5°C and adding the treatments containing 7 different progesterone concentrations (0; 1; 2,5; 5; 10; 100 e 1000 ng/mL) in 3 different times of exposition (0,5h; 3h e 24h). The second phase consisted in the sperm cryopreservation from 15 Crioulo horses collected with artificial vagina and with ages between 4 to 10 years. The ejaculates undergone to 5 different concentrations of progesterone (0; 1; 5; 10 e 100 ng/mL) added to freezingmedium previously to the cryopreservation process. In both analysis concerning progesterone experiment, kinect parameters were obtained by the Computer Assistant Sperm Analysis (CASA), as well as the flow cytometer tests regarding viable sperm population were utilized. The statistical data showed that after the toxicity test, with cooled semen, a significant improvement (P < 0,05) with the concentrations of 5 and 1000 ng/mL for 3-hour of exposition in velocity and average distance sperm parameters (DAP, DCL, DSL, VAP VCL, VSL). There was a significant raising on acrosome reaction at the 24-hour exposition time with the 5 ng/mL concentration treatment and also a significant decrease (P < 0,05) of lipid peroxidation (LPO) in the concentrations of 10, 100 and 1000 ng/mL in the 24-hour time of exposition. Information collected from thawing samples demonstrated an impairment (P < 0,05) in the reactive oxygen species, however the other parameters assessed did not differ from the control. From these data obtained in both experiments it is possible for us to conclude that the addition of quercetin to the freezing medium before the cryopreservation it is not interesting, once it does not presents significant improvements in sperm quality. On the other hand, the addition of progesterone to the fresh cooled semen demonstrated beneficial actions for the immediate use of semen, such as hyperactivation, capacitation and anti-oxidant effects.

Caracterização da dominância e subordinação na estrutura hierárquica de camundongos Swiss Webster em biotério / Characterization of dominant and subordinate social status and the structure of the social hierarchy in Swiss Webster mice

Os camundongos utilizados em biotérios pertencem à família Muridae, subfamília Murinae, ordem Rodentia, gênero Mus e espécie Mus musculus. São animais sociais e territoriais. Diversas linhagens foram desenvolvidas em laboratório porém apresentam comportamento agressivo semelhante ao de camundongos selvagens. O objetivo deste estudo foi caracterizar a estrutura hierárquica, características corporais e os níveis de hormônios em camundongos dominantes, subordinadas e não-agressivos. O modelo de avaliação do padrão de comportamento agressivo (PCA) classificou os animais da seguinte forma: LAg - indivíduos com comportamento agressivo baixo, HAg - dominante (altamente agressivo) e Sb - subordinado. O reagrupamento de camundongos macho adulto promove um efeito estressor considerável e influencia a formação de sua estrutura hierárquica. Comparações comportamentais antes (BfR) e após reagrupamento mostrou que o percentual de peso perdido por animais nas categorias especificadas foram as seguintes: Lag - 68,1% , HAg - 86,9% e Sb - 90,5% ; os níveis médios de corticosterona por categoria foram BfR : 43,5 ± 17,5, LAg: 177,0 ± 40,4, Hag: 72,8±23,8 e Sb: 136,4±51,2 ng/mL. Camundongos dominantes apresentaram diferenças nas características do corpo (principalmente a relação corpo/ cauda) em relação aos indivíduos subordinados. Também foram observadas duas posições hierárquicas adicionais: “indivíduo neutro” (sem comportamento agressivo) e “subordinado alvo”.

The mice used in animal facilities belong to the family Muridae, subfamily Murinae, order Rodentia, genus Mus and species Mus musculus. They are social and territorial animals. Several lineages developed in the laboratory show aggressive behavior similar to that of wild mice. The aim of this study was characterize the hierarchical structure, body characteristics and hormonal levels in dominant, subordinate and non-aggressive mice. The model established for spontaneous aggression (MSA) evaluates the pattern of aggressive behavior (PBA) and categorizes the animals as follows: LAg - individuals with low aggressive behavior, HAg – dominant (highly aggressive) and Sb - subordinate. The regrouping of adult male mice produces substantial stress and influences the formation of their hierarchical structure. Behavioral comparisons before regrouping (BfR) and after regrouping showed that the percentage of body weight lost in mice was dependent of the specific categories as follows: LAg - 68.1%, HAg - 86.9% and Sb - 90.5%; the average corticosterone levels by category were BfR: 43.5±17.5, LAg: 177.0±40.4, HAg: 72.8±23.8 and Sb: 136.4±51.2 ng/mL. Dominant mice showed differences in body characteristics (primarily the body/tail relationship) relative to subordinate mice. Two additional hierarchical positions were observed: “neutral individual” (without aggressive behavior) and “subordinate target” (an animal that receives approximately 30% of the total number of attacks made by dominant animals).

Caracterização da dominância e subordinação na estrutura hierárquica de camundongos Swiss Webster em biotério / Characterization of dominant and subordinate social status and the structure of the social hierarchy in Swiss Webster mice

Os camundongos utilizados em biotérios pertencem à família Muridae, subfamília Murinae, ordem Rodentia, gênero Mus e espécie Mus musculus. São animais sociais e territoriais. Diversas linhagens foram desenvolvidas em laboratório porém apresentam comportamento agressivo semelhante ao de camundongos selvagens. O objetivo deste estudo foi caracterizar a estrutura hierárquica, características corporais e os níveis de hormônios em camundongos dominantes, subordinadas e não-agressivos. O modelo de avaliação do padrão de comportamento agressivo (PCA) classificou os animais da seguinte forma: LAg - indivíduos com comportamento agressivo baixo, HAg - dominante (altamente agressivo) e Sb - subordinado. O reagrupamento de camundongos macho adulto promove um efeito estressor considerável e influencia a formação de sua estrutura hierárquica. Comparações comportamentais antes (BfR) e após reagrupamento mostrou que o percentual de peso perdido por animais nas categorias especificadas foram as seguintes: Lag - 68,1% , HAg - 86,9% e Sb - 90,5% ; os níveis médios de corticosterona por categoria foram BfR : 43,5 ± 17,5, LAg: 177,0 ± 40,4, Hag: 72,8±23,8 e Sb: 136,4±51,2 ng/mL. Camundongos dominantes apresentaram diferenças nas características do corpo (principalmente a relação corpo/ cauda) em relação aos indivíduos subordinados. Também foram observadas duas posições hierárquicas adicionais: “indivíduo neutro” (sem comportamento agressivo) e “subordinado alvo”. (AU)

The mice used in animal facilities belong to the family Muridae, subfamily Murinae, order Rodentia, genus Mus and species Mus musculus. They are social and territorial animals. Several lineages developed in the laboratory show aggressive behavior similar to that of wild mice. The aim of this study was characterize the hierarchical structure, body characteristics and hormonal levels in dominant, subordinate and non-aggressive mice. The model established for spontaneous aggression (MSA) evaluates the pattern of aggressive behavior (PBA) and categorizes the animals as follows: LAg - individuals with low aggressive behavior, HAg dominant (highly aggressive) and Sb - subordinate. The regrouping of adult male mice produces substantial stress and influences the formation of their hierarchical structure. Behavioral comparisons before regrouping (BfR) and after regrouping showed that the percentage of body weight lost in mice was dependent of the specific categories as follows: LAg - 68.1%, HAg - 86.9% and Sb - 90.5%; the average corticosterone levels by category were BfR: 43.5±17.5, LAg: 177.0±40.4, HAg: 72.8±23.8 and Sb: 136.4±51.2 ng/mL. Dominant mice showed differences in body characteristics (primarily the body/tail relationship) relative to subordinate mice. Two additional hierarchical positions were observed: “neutral individual” (without aggressive behavior) and “subordinate target” (an animal that receives approximately 30% of the total number of attacks made by dominant animals). (AU)

Gonadal steroids levels and vitellogenesis in the formation of oocytes in Prochilodus lineatus (Valenciennes) (Teleostei: Characiformes)

The objective of this study was to obtain information about the possible mechanisms related to poor reproductive performance in tropical rheophilic fish. To that effect, cages (Cs) and earthen ponds (EPs) were used as experimental systems to provide unsuitable and suitable conditions, respectively, for curimbatá (Prochilodus lineatus) breeders. Fish were maintained under experimental conditions for 18 months, and during this period females were randomly sampled every two months for biometric analysis (n=30), blood (n=5/sampling) and ovary (n=5/sampling). After this period EPs females (EPFs) and Cs females (CFs) were submitted to the induced breeding experiments. The results showed that rearing curimbatá for such long time in a cage at this stocking density, reduces its growth, plasma E2 levels and vitellogenesis. During vitellogenesis, the mean plasma estradiollevels of CFs were three times lower than those of EPFs (P<0.01). CFs presented poorer results than EPFs for all the examined parameters of reproductive performance. Taken together these data showed that the reduced estradiol levels during vitellogenesis (and the consequently less intense transition from the previtellogenic to vitellogenic phase) and reduced amounts of yolk are mechanisms associated with the formation of low quality oocytes and shortened and delayed breeding season in this species. Moreover, our data showed that the onset of vitellogenesis (six months before the spawning season) must be considered as a key period related to the formation of oocytes of good quality, and adequate management should be provided throughout the year.(AU)

Este estudo teve como objetivo gerar informações básicas sobre os possíveis mecanismos relacionados com os resultados desfavoráveis obtidos com o desempenho reprodutivo em peixes reofílicos tropicais. Para isso tanques-rede (Cs) e viveiros escavados (EPs) foram utilizados como sistemas experimentais para propociar respectivamente condições inadequadas e adequadas para reprodutores de Prochilodus lineatus. Os peixes foram mantidos por 18 meses em viveiros escavados (EPs) e tanques-rede (Cs), e durante este período, foram aleatoriamente coletados a cada dois meses para análise biométrica (n=30), coleta de sangue (n=5/tratamento) e amostragem do ovário (n=5/tratamento). Após este período as fêmeas mantidas em EPs (EPFs) e as fêmeas mantidas em Cs (CFs) foram submetidas aos experimentos de reprodução induzida. Os resultados mostraram que manter curimbatás por este período em Cs, na densidade de estocagem utilizada, reduz seu crescimento, níveis plasmáticos de E2 e vitelogênese. Durante a vitelogênese, os níveis plasmáticos de estradiol das CFs foram três vezes menores do que os das EPFs (P <0,01). As CFs apresentaram resultados inferiores aos das EPFs para todos os parâmetros analisados de desempenho reprodutivo. Em conjunto, estes dados mostram que os níveis reduzidos de estradiol durante a vitelogênese (bem como o consequente atraso na transição da fase previtelogênica para a vitelogênica) e as quantidades reduzidas de vitelo são mecanismos associados com a formação de ovócitos de baixa qualidade; redução e atraso na época de desova nesta espécie. Além disso, nossos dados mostraram que o início da vitelogênese (seis meses antes da época de desova) é um período-chave para formação de ovócitos de boa qualidade, e o manejo adequado deve ser aplicado durante todo o ano.(AU)

Avaliação da capacidade esteroidogênica dos embriões de preá (Galea spixii): imunomarcação e expressão gênica das enzimas do complexo citocromo P450

A síntese dos hormônios esteroides é feita através da ação de um complexo enzimático chamado citocromo P450. As enzimas 3-HSD (3-hidroxiesteroide desidrogenase), P450c17 (citocromo P450 17-hidroxilase/17,20-liase) e P450arom (citocromo P450 aromatase), fazem parte desse complexo e são responsáveis pela síntese dos hormônios progestágenos, andrógenos e estrógenos, respectivamente. Essas enzimas já foram identificadas em inúmeros tecidos, inclusive em embriões em período pré-implantação. Por isso, acredita-se que o blastocisto seja uma fonte de produção de progesterona e estrógeno, hormônios essenciais para implantação e manutenção da gestação. Em roedores, as informações sobre a capacidade esteroidogênica dos embriões são controversas e também restritas apenas a estudos com espécies laboratoriais. Para trazer mais informações sobre a capacidade esteroidogênica em blastocistos de roedores utilizamos o preá (Galea spixii), uma espécie de roedor silvestre encontrada nas regiões de Caatinga e Semiárido do Nordeste brasileiro e muito utilizado na alimentação de famílias de baixa renda como fonte proteica. Diante o exposto, o objetivo deste trabalho é fazer um apanhado histórico sobre os dados publicados a cerca da capacidade dos embriões de diversas espécies de produzir os hormônios esteroides além de identificar e quantificar a expressão das enzimas esteroidogênicas em embriões de preá através das técnicas de imunohistoquímica e PCR em tempo real. As análises morfológicas indicam que o desenvolvimento inicial do preá se assemelha com os demais roedores, porém o tempo de desenvolvimento difere das espécies usadas em laboratório. As marcações da imunohistoquímica foram positivas nos tecidos maternos, mas os embriões não tiveram marcação para nenhuma das três enzimas do estudo. No entanto, os dados obtidos pelo PCR indicam que os genes CYP11, CYP17 e CYP19 foram expressos nos embriões e, portanto, o concepto de G. spixii tem capacidade de produzir hormônios esteroides, assim como visto em várias outras espécies que já foram estudadas.

The synthesis of steroid hormones is made through the action of an enzyme complex called cytochrome P450. 3-HSD (3-hydroxysteroid dehydrogenase), P450c17 (cytochrome P450 17 -hydroxylase/17,20-lyase) and P450arom (cytochrome P450 aromatase), are present in this complex and are are responsible for the synthesis of progestins, androgens and estrogens hormones, respectively. These enzymes have been identified in numerous tissues, including embryos in pre-implantation period. Therefore, it is believed that the blastocyst is a source of production of progesterone and estrogen, hormones essential for the implementation and maintenance of pregnancy. In rodents, the information about the steroidogenic capacity of embryos are controversial and confined to studies with laboratory species. To get more information about the steroidogenic capacity in blastocysts of rodents we used the spix yellow-toothed cavy (Galea spixii), a species of wild rodent found in the northeastern of Brazil, and used in the feeding of low-income families as a source of protein. On the above, the aim of this work is to make a historic about the data published about the ability of embryos of various species to produce steroid hormones and identify and quantify the expression of steroidogenics enzymes in embryos of spix yellow-toothed cavy by immunohistochemical and real-time PCR techniques. The morphological analyses indicate that the G. spixii early development resembles other rodents, but development time differs from the species used in laboratory. The immunohistochemical stainning was positive in maternal tissues, but the embryos did not have stainnig for any of the three enzymes of the study. However, the data obtained by PCR indicate that CYP11, CYP17 and CYP19 genes were expressed in embryos and, therefore, the concept of G. spixii has capacity to produce steroid hormones, as seen in several other species that have been studied.

Lipid peroxidation in rats treated with vincristine sulphate and nandrolone decanoate / Peroxidação lipídica em ratos tratados com sulfato de vincristina e decanoato de nandrolona

Brain and serum lipid peroxidation was studied in rats treated with vincristine sulphate and different doses of nandrolone decanoate. Thirty rats were distributed into six groups (n=5). The treatments were applied once a week for two weeks. Sample collection was performed in the third week. Treatments during the first week were: G1 (control) - physiologic solution, G2 - vincristine sulphate (4mg/m²), G3 - physiologic solution, G4 - physiologic solution, G5- vincristine sulphate (4mg/m²), and G6 - vincristine sulphate (4mg/m²). In the second week, they were: G1 (control) - physiologic solution, G2- physiologic solution, G3 - nandrolone decanoate (1.8mg/kg-1), G4 - nandrolone decanoate (10mg/kg-1), G5 - nandrolone decanoate (1.8mg/kg-1), and G6 - nandrolone decanoate (10mg/kg-1). Lipid peroxidation increased with the isolated use of vincristine and nandrolone decanoate, and with vincristine associated to the highest dose of the ester as well. These results suggest that vincristine sulphate and nandrolone decanoate increase free radical production. Therapeutic dose of nandrolone decanoate when associated with vincristine sulphate proved to be beneficial, as it was able to protect the organism from damaging processes involved in free radical production.(AU)

Este estudo teve por objetivo detectar a peroxidação lipídica presente no cérebro e no soro de ratos tratados com sulfato de vincristina e diferentes doses de decanoato de nandrolona. Trinta ratos foram distribuídos em seis grupos (n=5). Os tratamentos foram aplicados uma vez por semana, durante duas semanas, e a coleta de amostras foi realizada na terceira semana. Na primeira semana, os tratamentos consistiram de: G1(controle) - solução fisiológica; G2 - sulfato de vincristina (4mg/m 2 ); G3 - solução fisiológica; G4 - solução fisiológica; G5 - sulfato de vincristina (4mg/m 2 ) e G6 - sulfato de vincristina (4mg/m 2 ). Na segunda semana: G1(controle) - solução fisiológica; G2 - solução fisiológica; G3 - decanoato de nandrolona (1.8mg/kg-1 ); G4 - decanoato de nandrolona (10mg/kg-1 ); G5 - decanoato de nandrolona (1.8mg/kg-1 ) e G6 - decanoato de nandrolona (10mg/kg-1 ). A peroxidação lipídica aumentou com o uso isolado tanto da vincristina quanto do decanoato de nandrolona e com a associação da vincristina à dose mais alta do éster. Estes resultados sugerem que o sulfato de vincristina e o decanoato de nandrolona aumentam a produção de radicais livres. A dose terapêutica do decanoato de nandrolona, quando associada ao sulfato de vincristina, provou ser benéfica, já que foi capaz de proteger o organismo dos processos prejudiciais induzidos pela produção de radicais livres.(AU)

Physiological bases for understanding estrous cycle differences between Bos taurus and Bos indicus

Background: Although there is some information in the literature discussing differences of the estrous cycle of Bos taurus and Bos indicus cattle, most of the data derive from studies performed in temperate climate countries, under environmental and nutritional conditions very different than those found in tropical countries. Moreover, the physiological basis for understanding the differences between Bos taurus and Bos indicus estrous cycles are still unknown. This review explores the physiological and metabolic bases for understanding the key differences between the Bos taurus and Bos indicus estrous cycle. Moreover, it presents recent results of studies that have directly compared reproductive variables between Zebu and European cattle. Review: The knowledge of reproductive physiology, especially the differences between Bos taurus and Bos indicus, is important for the development and application of different techniques of reproductive management in cattle. In this regard, overall, Bos indicus have a greater number of small ovarian follicles and ovulatory follicles are smaller as compared to Bos taurus. Consequently, Zebu cattle also have smaller corpus luteum (CL). Nevertheless, circulating concentrations of steroid and metabolic hormones are not necessarily higher in European cattle. In fact, some studies have shown that despite ovulating smaller follicles and having smaller CL, Bos indicus cows or heifers have higher circulating concentrations of estradiol, progesterone, insulin and IGF-I compared to Bos taurus females. In addition, there are also substantial differences between Bos indicus and Bos taurus cattle in relation to follicle size at the time of selection of the dominant follicle. Conclusion: Data from very recent studies performed in Brazil have corroborated results from previous reports that have observed substantial differences in the estrous cycle variables of Bos indicus versus Bos taurus cattle. Those differences are probably related to distinct metabolism and metabolic hormone concentrations between Zebu and European cattle. This increased knowledge will allow for the establishment of more adequate reproductive management protocols in both breeds of cattle.

O ambiente endócrino periovulatório modula a expressão gênica e o funcionamento do endométrio no início do ciclo estral em bovinos

O estabelecimento gestacional é determinado por interações entre o perfil endócrino e o trato reprodutivo materno. Eventos endócrinos são primariamente mediados pela ligação do hormônio a receptores específicos e subsequente transcrição de genes alvos. O endométrio bovino é um tecido dinâmico que passa por alterações espaçotemporais dirigidas pelos hormônios ovarianos, estradiol (E2) e progesterona (P4). A hipótese é que os efeitos combinados das concentrações plasmáticas de E2 e P4 à abundância tecidual de seus respectivos receptores estabelecem um tônus de esteroides sexuais que dirige funções do endométrio durante o período periovulatório em vacas. Os objetivos foram comparar diferentes tônus de esteroides na (1) expressão de receptores específicos e sua distribuição tecidual, (2) expressão de genes de resposta que regulam a função uterina, e (3) abundância e distribuição de mucina pelo epitélio, uma glicoproteína que indica pobre receptividade endometrial. Vacas Nelore (Bos indicus) foram farmacologicamente manipuladas para ovular um folículo pequeno (FP-CLP) ou grande (FG-CLG) e produzir, respectivamente, menores ou maiores concentrações plasmáticas de E2 no proestro e de P4 no diestro. O grupo FG-CLG representa um modelo de maior fertilidade. Tecido endometrial foi coletado através de biópsia transvaginal no dia zero (D0; FPCLP, n=4; FG-CLG, n=5) e post mortem no D4 (n=8 por grupo; Experimento 1) ou D7 (FP-CLP, n=8; FG-CLG, n=9; Experimento 2) após indução da ovulação com GnRH. Para estudar a regulação endometrial dos receptores de esteroides, a abundância de transcritos para receptores nucleares e de membrana de esteroides foi mesurada por qPCR: receptor de estrógenos alpha (ESR1) e beta (ESR2), receptor de estrógeno acoplado a proteína G (GPER), receptor de P4 isoformas A (PGR1), B (PGR2) e C (PGR3), receptor de P4 componente de membrana 1 (PGRMC1) e 2 (PGRMC2). Genes previamente mostrados estarem envolvidos em vias de resposta ao E2 foram selecionados: GREB1, CCND1, WNT5a, FGF2 (proliferação), SERPINA14, LTF, NRIP1 (atividade secretória), MMP2 (remodelamento de matriz extracelular), AQP4 (transporte de água) e MUC1 (adesão celular). Os dados foram analisados por one-way ANOVA para efeito de tratamento. O tamanho do POF, subsequente CL, concentrações plasmáticas de E2 (D0) e P4 (D4 e D7) foram significativamente maiores no grupo FG-CLG. No D0, a abundância de mRNA para ESR1, PGR1, PGR2 e PGR3 foi significativamente maior no tecido endometrial de vacas do grupo FG-CLG. A abundância de transcritos envolvidos na proliferação e remodelamento de matriz extracelular sugeriu maior atividade proliferativa e remodelamento no endométrio do grupo FG-CLG no D0. No D4, a expressão de PGR1 e PGRMC2 foi menor no grupo FG-CLG. A abundância de mRNA para AQP4 foi maior no grupo FG-CLG e positivamente correlacionada com a concentração de E2 pré-ovulatório. No D7, a abundância de mRNA foi maior para ESR2, PGRMC1 e PGRMC2, e reduzida para PGR2 e PGR3 em vacas do grupo FG-CLG. Abundância de mRNA para OXTR e MUC1 foi menor neste grupo. Análise histológica de amostras endometriais revelaram que o sinal para mucinas anti-adesivas no epitélio do grupo FG-CLG foi consistentemente menor quando comparado ao grupo FP-CLP (33.3% vs. 62.0%) no D7. A menor expressão de mucinas transmembranas indica a condição receptiva do endométrio. Estes resultados confirmam que a complexa modulação da expressão dos receptores de esteroides pelo ambiente endócrino periovulatório altera a transcrição de genes alvos de maneira tempo-específica para regular a receptividade uterina ao embrião em desenvolvimento.

Establishment of pregnancy depends on a well-balanced interplay between the endocrine profiles and the maternal reproductive tract. Endocrine actions are primarily mediated by binding to specific receptors and subsequent transcription of responsive genes. The bovine endometrium is a dynamic tissue that undergoes spatiotemporal functional changes directed by ovarian hormones, estradiol (E2) and progesterone (P4). Hypothesis is that the combined effects of plasma concentrations of E2 and P4 and tissue abundance of their respective receptors establish a sex steroid tone that directs endometrial function during the periovulatory period in cattle. Therefore, the aims were to compare different sex steroid tones on (1) steroid receptors gene expression and protein distribution, (2) expression of steroid responsive genes that regulate uterine function and (3) abundance and distribution of epithelial mucin, a glycoprotein that indicates poor endometrial receptivity. Nelore (Bos indicus) cows were pharmacologically manipulated to ovulate small (SFSCL) or large (LFLCL) follicles. Consequently, LF-LCL group was associated with greater proestrus concentrations of E2 and diestrus concentrations of P4, which were previously associated with greater receptivity and fertility. Endometrial tissue was collected by transvaginal biopsy on day zero (D0; SF-SCL, n=4; LF-LCL, n=5), and post mortem on D4 (n=8 per group; Experiment 1) or D7 (SF-SCL, n=8; LF-LCL, n=9; Experiment 2) after GnRH-induced ovulation. To study the regulation of endometrial steroid receptors, abundance of the following transcripts for nuclear and membrane receptor for steroids was measure by qPCR: estrogen receptor alpha (ESR1) and beta (ESR2), G protein-coupled estrogen receptor (GPER), progesterone receptor isoforms A (PGR1), B (PGR2) and C (PGR3), progesterone receptor membrane component 1 (PGRMC1) and 2 (PGRMC2). A subset of genes previously shown to be involved with estrogen-dependent pathways was also studied: GREB1, CCND1, WNT5a, FGF2 (proliferation), SERPINA14, LTF, NRIP1 (secretory activity), MMP2 (extracellular matrix remodeling), AQP4 (aqueous transport) and MUC1 (celladhesion pathways). Data were analyzed by one-way ANOVA for the effect of treatment. The POF, subsequent CL size, plasmatic E2 (D0) and P4 concentrations (D4 and D7) were significantly greater in the LFLCL group. On D0, the abundance of mRNA for ESR1, PGR1, PGR2 and PGR3 genes was significantly up-regulated in the endometrial tissue from LFLCL cows compared to the SFSCL counterparts. Abundance of transcripts for growth-related and extracellular matrix remodelingrelated genes suggested greater proliferative and remodeling activity on LF-LCL than SF-SCL endometrial tissue at D0. On D4, expression of PGR1 and PGRMC2 was down-regulated in the LFLCL group. The AQP4 mRNA abundance was greater in LF-LCL group and it was positively correlated with preovulatory E2 concentration. On D7, mRNA abundance was greater for ESR2, PGRMC1 and PGRMC2, while it was reduced for PGR2 and PGR3 in the LF-LCL cows. Abundance of mRNA for secretory activity-related genes was increased in LF-LCL group. Abundance of mRNA for OXTR and MUC1 was down-regulated in the LF-LCL group. Histology of endometrial samples revealed that the signal for anti-adhesive mucin at the LF-LCL epithelium was consistently lower than that of the SF-SCL tissue (33.3% vs. 62.0%) at D7. A down-regulated expression of the transmembrane mucin indicates a receptive condition of the endometrium. These results confirm that complex modulation of receptor expression by the periovulatory steroid milieu alters transcription of responsive genes in a time-specific manner to regulate uterine receptivity to the developing embryo.