Sepsis due to Yersinia enterocolitica in an aborted equine fetus: case report / Sepse por Yersinia enterocolitica em um feto equino abortado: relato de caso

Yersinia enterocolitica is a bacterium with zoonotic potential and there are no previous records of this bacteria being isolated from aborted foals. This report aims to describe a case of sepsis due to Y. enterocolitica in a seven month old aborted equine. The fequinoetus was submitted to necropsy and samples of all the organs were collected for the histological exam. Samples of liver, lung, placenta, and stomach contents were collected for bacterial culture. Macroscopically, the liver was enlarged with yellowish heterogeneous color, heart with pale myocardial areas; lungs not collapsed, heavy and shiny, thickened umbilical cord covered with fibrin and pus. Histopathologically, there was moderate multifocal necrosuppurative myocarditis and thrombosis, moderate diffuse suppurative bronchopneumonia, mild multifocal fibrinonecrotic hepatitis, and moderate diffuse necrosuppurative omphalitis with intralesional bacterial myriads and thrombosis. Mild multifocal suppurative placentitis, nephritis, myositis, cystitis, and dermatitis were also observed, in addition to mild diffuse lymphoid rarefaction. The microbiological evaluation identified Y. enterocolitica in the liver, lung, and stomach fluid. This is the first report of sepsis due to Y. enterocolitica causing an abortion in a horse. This bacterium has zoonotic importance; therefore, it should be investigated in abortion in this species, serving as a differential diagnosis in reproductive disorders.(AU)

Yersinia enterocolitica é uma bactéria com potencial zoonótico, e não há informações desse agente como causa de abortamento em equinos. O objetivo deste relato é descrever um caso de sepse por Y. enterocolitica em um feto equino abortado aos sete meses. O feto foi submetido à necropsia, e amostras de todos os órgãos foram processadas para histopatologia. Para microbiologia, foram coletadas amostras de fígado, pulmão, placenta e conteúdo estomacal. Macroscopicamente, observou-se fígado aumentado com coloração amarelada heterogênea; coração com áreas pálidas no miocárdio; pulmões não colabados, pesados e brilhantes; e cordão umbilical espessado e recoberto por fibrina e pus. Na análise histopatológica, havia miocardite necrossupurativa multifocal moderada e trombose, broncopneumonia supurativa difusa moderada, hepatite fibrinonecrótica multifocal discreta e onfalite necrossupurativa difusa moderada com miríades bacterianas intralesionais e trombose. Observou-se também placentite, nefrite, miosite, cistite e dermatite supurativa multifocal discreta, além de rarefação linfoide difusa discreta. A avaliação microbiológica identificou Y. enterocolitica no fígado, no pulmão e no líquido estomacal. Este é o primeiro relato de sepse por Y. enterocolitica causando abortamento na espécie equina. Essa bactéria tem importância zoonótica, portanto deve ser investigada em casos de abortamento nessa espécie, servindo como diagnóstico diferencial em tal distúrbio reprodutivo.(AU)

Isolation and identification of Yersinia enterocolitica in bovine milk samples of bulk tanks from dairy farms in São Paulo, Brazil / Isolamento e identificação de Yersinia enterocolitica em amostras de leite cru bovino a partir de tanques de expansão, São Paulo, Brasil

Milk and its derivatives are good substrates for the proliferation of pathogenic and quality-deteriorating microorganisms, demanding rigorous care with milking, processing, and storage. Among the various bacteria that can grow in raw refrigerated milk, Yersinia enterocolitica, is an invasive enteropathogen of humans. This bacterium can cause a number of intestinal and extraintestinal clinical symptoms, ranging from mild gastroenteritis to mesenteric lymphadenitis, similar to appendicitis. To evaluate the prevalence of pathogenic Yersinia enterocolitica in raw milk from bulk milk tanks located in the State of São Paulo, 102 bovine milk samples (one per dairy farm) were evaluated by microbiological analyses, followed by biochemical tests PCR and genetic sequencing. Microbiological testing did not isolate Y. enterocolitica. However, PCR analysis revealed six samples that were positive for Y. enterocolitica (5.9%), confirmed by genetic sequencing. Only the inv gene was detected, which is present in virulent and avirulent Y. enterocolitica strains. There was great difficulty in microbiological isolation due to the difficulty of competitiveness of Y. enterocolitica in a very rich microbiota of raw milk. Although virulence genes known to be present in potentially pathogenic strains of Y. enterocolitica have not been identified, the presence of this pathogen in milk from expansion tanks...(AU)

O leite e seus derivados possuem substratos que favorecem o desenvolvimento de micro-organismos patogênicos e deteriorantes, devido a isso, cuidados rigorosos são exigindo durante a ordenha, processamento e seu armazenamento. Dentre os vários grupos de bactérias que podem contaminar o leite refrigerado cru está Yersinia enterocolitica. Esta bactéria pode causar a uma série de sintomas clínicos intestinais e extraintestinais, variando de gastroenterite leve a linfadenite mesentérica, semelhante à apendicite. Para avaliar a prevalência de Y. enterocolitica patogênica no leite cru de tanques de expansão localizados no estado de São Paulo, foram avaliadas 102 amostras de leite bovino, por análises microbiológicas, seguido de provas bioquímicas; a Reação em Cadeia de Polimerase (PCR) e sequenciamento genético. Não houve o isolamento de Y. enterocolitica pelas provas microbiológicas clássicas. No entanto, a análise de PCR, realizada diretamente do leite, revelou seis (6) amostras positivas para Y. enterocolitica (5,9%), confirmadas por sequenciamento genético. Somente o gene inv, foi detectado, que pode estar presente em cepas virulentas e avirulentas. Houve dificuldade de isolamento microbiológico devido à dificuldade de competitividade da Y. enterocolitica em uma microbiota muito rica do leite cru. Ainda que não tenham sido identificados os genes de virulência que sabidamente estão...(AU)

ISOLAMENTO, IDENTIFICAÇÃO MOLECULAR E DETECÇÃO DE GENES DE VIRULÊNCIA DE Yersinia enterocolitica EM AMOSTRAS DE LEITE BOVINO DE TANQUES DE EXPANSÃO DE PROPRIEDADES DO CENTRO-OESTE PAULISTA

O leite e seus derivados são bons meios para o desenvolvimento de micro-organismos patogênicos e deteriorantes, exigindo cuidados rigorosos com a ordenha, processamento e armazenamento. Entre os vários grupos de bactérias que podem ser desenvolvidas em leite refrigerado cru, Yersinia enterocolitica, um enteropatógeno invasivo para humanos, é uma delas. Esta bactéria pode causar a uma série de sintomas clínicos intestinais e extraintestinais, variando de gastroenterite leve a linfadenite mesentérica, semelhante a apendicite. Para avaliar a prevalência de Yersinia enterocolitica patogênica no leite cru de tanques de expansão localizados no estado de São Paulo, foram avaliadas 102 amostras de leite bovino, pelas análises microbiológicas, seguido de provas bioquímicas; a Reação em Cadeia de Polimerase (PCR) e sequenciamento genético. Não houve o isolamento de Yersinia enterocolitica pelas provas microbiológicas. A análise de PCR revelou seis (6) amostras positivas para Yersinia enterocolitica (5,9%), confirmadas por sequenciamento genético. Somente o gene inv, foi detectado, presente em cepas virulentas e avirulentas. Portanto, ainda que o patógeno estudado não represente um risco potencial nas amostras de leite analisadas neste estudo, foram observados diversos fatores de risco nas fazendas visitadas e uma grande contaminação da microbiota presente no leite, podendo-se afirmar que a qualidade do leite cru em tanques de expansão das fazendas avaliadas é de risco para a saúde pública.

Milk and its byproducts are good means for the development of pathogenic and deteriorating microorganisms, demanding rigorous care with milking, processing and storage. Among the various groups of bacteria that can be grown in raw refrigerated milk, Yersinia enterocolitica, an invasive enteropathogen for humans, is one of them. This bacterium can cause a number of intestinal and extraintestinal clinical symptoms, ranging from mild gastroenteritis to mesenteric lymphadenitis, similar to appendicitis. To evaluate the prevalence of pathogenic Yersinia enterocolitica in raw milk from bulk tanks milk located in the state of São Paulo, 102 bovine milk samples were evaluated by microbiological analysis, followed by biochemical tests; the Polymerase Chain Reaction (PCR) and genetic sequencing. There was no isolation of Yersinia enterocolitica by microbiological tests. PCR analysis revealed six (6) positive samples for Yersinia enterocolitica (5.9%), confirmed by genetic sequencing and later, identification of virulence genes by PCR. Only the inv gene, present in virulent and avirulent strains, was found. Therefore, although the pathogen studied does not present a potential risk in the milk samples analyzed in this study, several risk factors were observed in the farms visited and a great contamination of the microbiota present in the milk, and it can be stated that the quality of raw milk in tanks of the farms evaluated is a risk to public health.

Rastreamento da contaminação por Yersinia enterocolitica em cadeia produtiva de suínos

O suíno doméstico pode atuar como reservatório natural de patógenos importantes para a saúde humana, como Yersinia enterocolitica, que é um enteropatógeno emergente, causador de yersiniose. Y. enterocolítica é carreada pelos suínos principalmente em tecidos linfáticos e fezes até as instalações de abate, quando em condições inadequadas de evisceração e manipulação pode ser disseminada para carcaças e produtos finais. A patogenicidade de Y. enterocolitica para humanos é determinada pela expressão de genes plasmidias e cromossômicos de virulência, eles são responsáveis pela codificação de proteínas que conferem capacidade de adesão, penetração nas células do hospedeiro e combate a resposta imune. Outro aspecto importante é a capacidade que as bactérias têm em adquirir resistência aos antimicrobianos empregados no tratamento de doenças. O monitoramento acerca do desenvolvimento de resistência aos antimicrobianos é fundamental, tendo em vista que o uso excessivo desses agentes na suinocultura, como promotores de crescimento e para a profilaxia em massa, é fator predisponente a resistência, principalmente frente aos antimicrobianos amplamente utilizados na medicina humana. Assim, o presente trabalho teve como objetivo rastrear a contaminação por Y. enterocolitica em diferentes etapas da cadeia produtiva de suínos e realizar a caracterização do perfil de virulência e de resistência a antimicrobianos nos isolados obtidos. O trabalho ocorreu em granjas de suínos em terminação e abatedouro-frigorífico localizados no Oeste do Paraná. Amostras de água, ração, superfície do piso de baias da granja e de pocilgas de espera, superfície de carcaças, equipamentos, utensílios, cortes finais in natura e amostras de tonsilas palatinas e linfonodos mesentéricos foram coletadas e Y. enterocolitica foi pesquisada pela metodologia ISO 10273 modificada. Os isolados foram confirmados por Reação em Cadeia da Polimerase (PCR) para os genes 16s rRNA e inv. Foram realizadas PCR para sorotipificação e indentificação dos genes de virulência ail, ystB, virF, myfA, ystA, ystC, fepA, fepD, fes, tccC, ymoA e hreP e de resistência emrD, yfhD e marC. Foi realizada também a caracterização fenotípica do perfil de resistência frente a 19 antimicrobianos pelo teste de disco-difusão. Foram analisados também os perfis de macrorrestrição dos isolados e comparados aos perfis de isolados de Y. enterocolitica sorotipo O:3 obtidos de suínos no estado de Minas Gerais. Das 800 amostras coletadas, Y. enterocolitica foi identificada em apenas uma tonsila palatina, representando uma ocorrência de 0,12%. Foram obtidos três isolados (104, 105 e 106) da amostra positiva, todos do sorotipo O:3 e positivos para os genes inv, ail, ystA, myfA, hrep, ymoA, sat, virF, emrD, yfhD e marC. Os perfis de macrorestrição dos isolados das duas regiões (Paraná e Minas Gerais) apresentaram alto grau de similaridade, mais de 92%. Isolados com perfis clonais (100% de similaridade) foram identificados nas amostras 104, 106 e 53UFV. Esses resultados indicam baixa variabilidade genética das cepas de Y. entercolitica sorotipo O:3 circulantes entre as duas regiões. Apesar da baixa ocorrência de Y. enterocolitica na cadeia produtiva de suínos na região oeste do Paraná identificada neste trabalho, foi verificado que os isolados obtidos apresentaram potencial de multirresistência a antimicrobianos e a presença de importantes fatores de virulência em seu material genético.

Domestic swine can be a natural reservoir of important pathogens for human health, such as Yersinia enterocolitica, which is an emerging enteropathogen, which causes yersiniosis. Pigs carry Y. enterocolitica mainly in their lymphatic tissues and feces to slaughter facilities, under inappropriate evisceration and handling conditions as a result it can be disseminated to carcasses and end products. The pathogenicity of Y. enterocolitica to humans is determined by the expression of virulence plasmid and chromosomal genes, that are responsible for the coding of proteins that confer adhesion capacity, penetration into the host cells, at the same time, it combats the immune response. Another important aspect is the ability of bacteria to acquire resistance to antimicrobials used in the treatment of diseases. The excessive use of antimicrobial agents to promote growth in swine breeding can be considered an important factor for the development of resistance, so it is fundamental that the development of resistance is monitored, especially against the antimicrobials most used in human medicine. Thus, the present work aimed to trace the contamination by Y. enterocolitica in different stages of the pig production chain and to characterize the profile of virulence and antimicrobial resistance in the isolates obtained. The work was carried out in pig farms and also in slaughterhouses located in the West of Paraná. Samples of water, feed, farm floor surfaces, stand pens, carcass surfaces, equipment, utensils, final cuts in Natura, samples of palatine tonsils and mesenteric lymph nodes were collected. Y. enterocolitica was investigated by the modified ISO 10273 methodology. The isolates were confirmed by Polymerase Chain Reaction (PCR) for the 16s rRNA and inv. PCRs were performed for serotyping and identification of the virulent genes ail, ystB, virF, myfA, ystA, ystC, fepA, fepD, fes, tccC, ymoA and hreP and of resistance emrD, fhD and marC. The phenotypic characterization of the resistance profile against 19 antimicrobials was also performed by the disc-diffusion test. The macrorrestrition profiles of the isolates were also analyzed and compared to the profiles of isolates of Y. enterocolitica serotype O:3 obtained from pigs in the state of Minas Gerais (UFV). Of the 800 samples collected, Y. enterocolitica was identified in only one palatine tonsil, representing an occurrence of 0.12%. From the positive sample, three isolates (104, 105 and 106), all of the O: serotype and positive for the genes inv, ail, mystA, myfA, hrep, ymoA, sat, virF, emrD, yfhD and marC were obtained. The macrorestricity profiles of the isolates from both regions (Parana and Minas Gerais) showed a high degree of similarity, more than 92%. Isolates of clonal profiles were identified in samples 104, 106 and 53UFV. These results indicate low genetic variability of the circulating serotype O:3 strains of Y. entercolitica between the two regions. Despite the low occurrence of Y. enterocolíca in the pig production chain in the western region of Paraná identified in this study, it was verified that the isolates obtained showed multiresistant potential to antimicrobials and the presence of important virulence factors in their genetic material.

Yersiniose em Trachinotus marginatus (pampo): diagnóstico histopatológico e imuno-histoquímico / Yersiniosis in Trachinotus marginatus (pampo): histopathological and immunohistochemical diagnostic

Descreveu-se um surto de yersiniose em uma criação de pampo Trachinotus marginatus estudado no Laboratório de Piscicultura Estuarina e Marinha da Universidade Federal do Rio Grande. A enfermidade manifestou-se por transtornos natatórios, exoftalmia com panoftalmite e pela clássica boca vermelha, nome pelo qual se denomina "enfermidade da boca vermelha" (EBV). Na necropsia, foram observados focos de hemorragia peritoneal, esplenomegalia e hepatomegalia. Microscopicamente, foi observada panoftalmite com infiltrados inflamatórios densos que afetavam quase todas as estruturas oculares. Esses infiltrados estavam constituídos por granulócitos, linfócitos, macrófagos e células granulares eosinofílicas. No exsudado, observaram-se estruturas pequenas, pouco coradas, de aspecto bacteriano Gram negativo. O estudo imuno-histoquímico, que se utilizou de um anticorpo monoclonal anti-Yersinia ruckeri, resultou positivo. Este é o primeiro surto conhecido de yersiniose em Trachinotus marginatus no Brasil.(AU)

In the "Laboratório de Piscicultura Estuarina e Marinha da Universidade Federal do Rio Grande" the rearing of Trachinotus marginatus (pompano) is studied, and in one of these rearing a yersioniosis outbreak occured. The disease was manifested by swimming disturbances, exophthalmiawith panophthalmitis and the classic red mouth, (red mouth disease (RMD). The necropsies revealed focus of peritoneal hemorrhage, esplenomegalyand hepatomegaly.Microscopically a panophthalmitis with dense inflammatory infiltrates was observed, which affected almost all ocular structures. These infiltrates were constituted by granulocytes, lymphocytes, macrophages and eosinophylicgranular cells (ECG), in the exudatessmall structures less colored with Gram negative bacteria aspect were observed. The immunohistochemical, which used a monoclonal antibody anti- Yersinia ruckeri waspositive. The RMD is caused by enterobacteriaGram negative, which affects both freshwater and saltwater fish, with predominance in salmonids. This is the first known yersiniosis outbreak in Trachinotus marginatus in Brazil and it is necessary to keep this disease in mind at the moment of rearing fish of this species.(AU)

PESQUISA DE YERSINIA ENTEROCOLITICA PATOGÊNICA EM TONSILAS DE SUÍNOS AO ABATE EM SANTA CATARINA

Yersinia enterocolitica é uma bactéria Gram-negativa emergente que possui potencial zoonótico e está associada a quadros de infecção alimentar em humanos. Os suínos são considerados o principal reservatório de Y. enterocolitica, abrigando-a principalmente nas tonsilas. Tendo em vista a carne suína como uma das mais consumidas no mundo e a importância deste agente zoonótico, o objetivo deste trabalho foi avaliar a ocorrência de Y. enterocolitica patogênica em tonsila de suínos no momento do abate no estado de Santa Catarina. Para isto, foi utilizada uma PCR convencional multiplex que detecta a presença de genes de virulência (ail, yadA e virF) e comparou-se esta técnica com a PCR quantitativa em tempo real (qPCR), somente para o gene ail. Foram coletadas aleatoriamente tonsilas de 400 suínos provenientes de quatro frigoríficos com inspeção federal em diferentes regiões do estado. Foi realizado o sequenciamento do DNA dos genes amplificados das amostras positivas na cPCR e posteriormente foi feita a análise filogenética. Apenas uma amostra foi positiva para os três genes pesquisados na PCR convencional, os quais foram confirmados por sequenciamento. A análise das sequências parciais dos três genes de virulência identificou três mudanças de aminoácidos exclusivas, sendo uma no gene virF e duas no gene yadA. Na qPCR esta amostra apresentou 11.058.398 moléculas/L. Ao comparar as duas técnicas, a qPCR foi 100 vezes mais sensível que a PCR convencional. Isso demonstra uma baixa ocorrência de Y. enterocolitica patogênica em suínos sadios ao abate em frigoríficos com inspeção federal em Santa Catarina.

Yersinia enterocolitica is a Gram-negative bacteria with zoonotic potential. It is associated with the occurrence of enteric diseases in humans. Pigs are considered the main source of Y. enterocolitica and the bacteria is mainly found in the pigs palatine tonsils. The objective of this study was to evaluate the occurrence of pathogenic Y. enterocolitica in palatine tonsils of healthy pigs from Santa Catarina, during the slaughter process. In order to achieve this goal, a multiplex PCR technique was performed so as to detect the presence of virulence genes (ail, yadA and virF). This technique was compared to quantitative real time PCR (qPCR), only for the ail gene. Palatine tonsils were randomly collected from 400 pigs from four federally inspected slaughterhouses of the state of Santa Catarina. One positive sample was found for the three studied virulence genes, which were confirmed by DNA sequencing. The analysis of partial sequences of the three virulence genes identified three unique amino acid changes, one in the virF gene and two in YadA gene. This sample had 11.058.398 molecules/L detected by qPCR. By comparing the two techniques, qPCR was 100 times more sensitive than standard PCR. This result shows low occurrence of pathogenic Y. enterocolitica in healthy pigs from federally inspected slaughterhouses in Santa Catarina.

PRESENÇA DE Yersínia enterocolitica EM SUÍNOS ABATIDOS NO MEIO OESTE DE SANTA CATARINA

BORTOLI, Elaine da Silva. Presença de Yersínia enterocolitica em suínos abatidos no meio oeste de Santa Catarina. 2015. 79 f. Dissertação (Mestrado em Ciência Animal - Área: Saúde Animal) - Universidade do Estado de Santa Catarina. Programa de Pós - Graduação em Ciência Animal, Lages, 2015. Yersinia enterocolitica é uma bactéria Gram negativa e pertencente à família Enterobacteriaceae. Trata-se de um patógeno emergente e já detectado em todo o mundo. Por ser uma bactéria psicrotrófica, torna-se importante fator de risco para o consumidor. Devido a importância de Y. enterocolitica, e a grande produção de carne suína na região do meio oeste catarinense, objetivou-se determinar a presença de Y. enterocolitica em suínos abatidos em frigoríficos da região. Para isso foram coletados materiais de 44 suínos, como tonsilas, linfonodos submandibulares, linfonodos mesentéricos, linfonodos inguinais e carne da cabeça, totalizando 220 amostras. No laboratório, as amostras foram preparadas com caldo de enriquecimento seletivo PSB, homogeneizadas por 2 minutos e após incubadas em temperatura entre 22 e 25ºC, por 72h com agitação, a amostra do Caldo PSB foi estriada por esgotamento em superfície de Agar CIN. Colônias características foram confirmadas com o Soro Yersinia enterocolitica Poli, e com teste bioquímico Bactray I e II. Y. enterocolitica foi isolada em 6 amostras de tonsilas, 3 de linfonodos mesentéricos, 2 de linfonodos submandibulares, 1 de linfonodo inguinal e 1 de amostra coletada da carne de cabeça, totalizando 13 amostras positivas (5,91%) das 220 coletadas. Em onze carcaças, (25%) Y. enterocolitica foi isolada em pelo menos um dos locais analisados. Os resultados mostraram que Y. enterocolitica está presente no rebanho deanimais clinicamente saudáveis da região meio oeste de Santa Catarina e que houve contaminação da carcaça em uma amostra de carne da cabeça o que sugere um risco para a saúde dos consumidores se ingerirem carne contaminada com esse patógeno.

Yersinia enterocolitica is a Gram-negative bacterium and belongs to the family Enterobacteriaceae. It is an emerging pathogen already been detected worldwide. As a psychrotrophic bacteria, it becomes important risk factor for the consumer. Because of the importance of Y. enterocolitica, and great pork production in Santa Catarina Midwest region aimed to determine the presence of Y. enterocolitica in pigs slaughtered in the region. To this material were collected from 44 pigs, such as tonsils, submandibular lymph nodes, mesenteric lymph nodes, inguinal lymph nodes and head meat, totaling 220 samples. In the laboratory, samples were prepared with selective enrichment broth PSB homogenized for 2 minutes and further incubated at a temperature between 22 and 25 ° C with stirring for 72 hours, the sample of the broth was PSB Exhaust striated surface Agar CIN. Colonies characteristics were confirmed with "Serum Yersinia enterocolitica Poly", and biochemical test Bactray I and II. Y. enterocolitica was isolated in 6 samples from tonsils, 3 mesenteric lymph nodes, submandibular lymph nodes 2, 1 inguinal lymph node and 1 sample collected of the head meat, totaling 13 positive samples (5.91%) of the 220 collected. In eleven of carcasses (25%) was isolated from Y. enterocolitica at least one of the locations analyzed. The results showed that Y. enterocolitica is present in clinically healthy herd of animals of the Midwest of Santa Catarina and that there were housing the contamination in a meat sample head suggesting a risk to consumer health if they eat contaminated meat with this pathogen.

Isolation of Yersinia pseudotuberculosis from buffalo (Bubalus bubalis) feces / Isolamento de Yersinia pseudotuberculosis de fezes de búfalo (Bubalus bubalis)

Fecal samples from 119 healthy buffaloes, from 5 farms, diluted in 10% brain heart infusion, were maintained for 3 weeks at 4C and subcultured weekly onto Mac Conckey agar and Yersinia selective agar with antimicrobial supplement. Yersinia pseudotuberculosis serotype Olll was isolated from only one farm, where an outbreak of yersiniosis was occurring. The bacteria was isolated in 21 of the 25 samples from adult, healthy females and in all the 9 samples from healthy calves. It was not isolated in the samples from other farms, 2 especially, where yersiniosis had been diagnosed 1 and 5 years before. Of the 30 isolates, 14 (46.7%) were recovered from both culture media, one (3.3%) only in Mac Conckey and 15 (50%) only in Yersinia selective agar. Of the 15 isolates recovered in Mac Conckey, 12 (80%) were isolated after 1 week of cold enrichment, 3 (20%) after 2 weeks and none after 3 weeks. Of the 29 isolates recovered in selective Yersinia agar, 22 (75.1%) were isolated after 1 week of cold enrichment, 6 (20.7%) after 2 weeks and 1 (3.4%) after 3 weeks.

Amostras de matérias fecais de 119 búfalos clinicamente sadios, de 5 propriedades, foram colocadas em enriquecimento a 10% em infusão de cérebro e coração por 3 semanas e semeadas semanalmente em meio seletivo para Yersinia spp (Yersinis Selective Agar com Yersinia Antimicrobial Supplement) e em agar Mac Conckey. Yersinia pseudotuberculosis sorotipo Olll foi isolada somente em amostras de uma propriedade em que estava ocorrendo um surto de yersiniose. A bactéria foi recuperada de 21 amostras de um total de 25 amostras de fêmeas adultas sadias e de todas as 9 amostras de bezerros sadios. Y. pseudotuberculosis não foi isolada das demais propriedades, incluindo2 naquelas em que haviam sido diagnosticados surtos de yersiniose 1 e 5 anos antes da coleta. Dos 30 isolamentos, 14 (46,7%) foram isolados nos 2 meios de cultura, 1 (3,3%) somente em agar Mac Conckey e 15 (50%) somente em meio seletivo, demonstrando a maior eficiência deste meio para a identificação de animais portadores. Dos 15 isolamentos obtidos em Mac Conckey, 12 (80%) foram isolados após 1 semana de crioenriquecimento, 3 (20%) após 2 semanas e nenhum após 3 semanas. Dos 29 isolamentos obtidos em meio seletivo, 22 (75,1%) foram isoladosapós 1 semana, 6 (20,7%) após 2 semanas e 1 (3,4%) após 3 semanas.

Isolation and identification of Yersinia enterocolitica in bovine milk samples of bulk tanks from dairy farms in São Paulo, Brazil / Isolamento e identificação de Yersinia enterocolitica em amostras de leite cru bovino a partir de tanques de expansão, São Paulo, Brasil

Milk and its derivatives are good substrates for the proliferation of pathogenic and quality-deteriorating microorganisms, demanding rigorous care with milking, processing, and storage. Among the various bacteria that can grow in raw refrigerated milk, Yersinia enterocolitica, is an invasive enteropathogen of humans. This bacterium can cause a number of intestinal and extraintestinal clinical symptoms, ranging from mild gastroenteritis to mesenteric lymphadenitis, similar to appendicitis. To evaluate the prevalence of pathogenic Yersinia enterocolitica in raw milk from bulk milk tanks located in the State of São Paulo, 102 bovine milk samples (one per dairy farm) were evaluated by microbiological analyses, followed by biochemical tests PCR and genetic sequencing. Microbiological testing did not isolate Y. enterocolitica. However, PCR analysis revealed six samples that were positive for Y. enterocolitica (5.9%), confirmed by genetic sequencing. Only the inv gene was detected, which is present in virulent and avirulent Y. enterocolitica strains. There was great difficulty in microbiological isolation due to the difficulty of competitiveness of Y. enterocolitica in a very rich microbiota of raw milk. Although virulence genes known to be present in potentially pathogenic strains of Y. enterocolitica have not been identified, the presence of this pathogen in milk from expansion tanks...

O leite e seus derivados possuem substratos que favorecem o desenvolvimento de micro-organismos patogênicos e deteriorantes, devido a isso, cuidados rigorosos são exigindo durante a ordenha, processamento e seu armazenamento. Dentre os vários grupos de bactérias que podem contaminar o leite refrigerado cru está Yersinia enterocolitica. Esta bactéria pode causar a uma série de sintomas clínicos intestinais e extraintestinais, variando de gastroenterite leve a linfadenite mesentérica, semelhante à apendicite. Para avaliar a prevalência de Y. enterocolitica patogênica no leite cru de tanques de expansão localizados no estado de São Paulo, foram avaliadas 102 amostras de leite bovino, por análises microbiológicas, seguido de provas bioquímicas; a Reação em Cadeia de Polimerase (PCR) e sequenciamento genético. Não houve o isolamento de Y. enterocolitica pelas provas microbiológicas clássicas. No entanto, a análise de PCR, realizada diretamente do leite, revelou seis (6) amostras positivas para Y. enterocolitica (5,9%), confirmadas por sequenciamento genético. Somente o gene inv, foi detectado, que pode estar presente em cepas virulentas e avirulentas. Houve dificuldade de isolamento microbiológico devido à dificuldade de competitividade da Y. enterocolitica em uma microbiota muito rica do leite cru. Ainda que não tenham sido identificados os genes de virulência que sabidamente estão...