Resumo
Background: Anaplasmosis, also called gall sickness or tropical bovine ehrlichiosis, is an infectious disease caused by species belonging to the genus Anaplasma in domestic and wild animals in tropical and subtropical regions. Anaplasma ovis and A. phagocytophilum are important pathogens of sheep. A. ovis is considered the most common species affecting sheep. The infection is usually subclinical and progresses with high fever, anaemia, icterus, weight loss and abortions. This study aimed to investigate changes in cardiac damage markers, oxidative stress and antioxidant status, cytokines, and acute phase proteins in sheep naturally infected with A. ovis. Materials, Methods & Results: For this purpose, a total of 40 animals, including 20 healthy sheep and 20 sheep infected with anaplasmosis, were used. A. ovis was diagnosed based on clinical findings and peripheral blood smear. Blood smears were prepared from the ear vein. The smears were stained with Giemsa and examined for the presence of Anaplasma spp. Infection was also confirmed by polymerase chain reaction (PCR) analysis. The genomic DNA was isolated from blood, and the MSP-4 gene region was amplified as A. ovis specific target gene. Twenty clinically healthy sheep of the same age group, reared under the same conditions and testing negative in the molecular assessment were used as controls. Blood samples were collected from the cephalic vein and and centrifuged to obtain serum. The serum stored at -20°C until the analysis stage. Serum samples were used for the analysis of cardiac damage markers [troponin I (cTnI), creatine kinase MB (CK-MB), lactate dehydrogenase (LDH) and aspartate transaminase (AST)], oxidative stress parameters [malondialdehyde (MDA), total antioxidant status (TAS), superoxide dismutase (SOD), catalase (CAT) and glutathione peroxidase (GPx)], cytokines [interleukins IL-6, IL-1ß and IL-10, tumour necrosis factor α (TNF-α), and interferon-γ (IFN-γ)] and acute phase proteins [C-reactive protein (CRP), serum amyloid A (SAA) and haptoglobin (Hp)]. cTnI and CK-MB levels were measured using a chemiluminescent immunoassay. MDA, TAS, SOD, CAT, GPx, TNF-α, IL-1ß, IL-6, IL-10, IFN-γ, SAA and Hp levels were measured by an ELISA reader. LDH, AST and CRP levels were measured in an autoanalyzer. cTnI and LDH levels were significantly increased in the infected animals compared to the healthy ones (P < 0.05). The concentration of AST was decreased in infected animals. MDA, TAS, SOD, CAT and GPx levels were significantly increased in the infected animals compared to the healthy ones (P < 0.05). The levels of the inflammatory parameters such as TNF-α, IL-1ß, IL-10 and IFN-γ were significantly increased in the infected animals compared to the healthy ones (P < 0.05). Hp level were significantly increased in the infected group compared with the control group (P < 0.05). However, there was no significant change in CK-MB, SAA and CRP concentrations in the infected animals (P > 0.05). Discussion: Ovine anaplasmosis is an obligate intracellular arthropod disease that causes widespread changes in haematobiochemical, immune response and oxidative stress parameters. Cardiac damage is often overlooked in field conditions due to the lack of adequate knowledge about the pathophysiology of the disease. Our results showed that A. ovis infection leads to significant changes in cardiac biomarkers and that the parasite can cause cardiac dysfunction. This is the first report on cardiac damage markers in Anaplasma-infected sheep. Additionally, the levels of proinflammatory and oxidative stress markers that may cause functional disorders were also found to be increased. Thus, measuring markers of cardiac function, oxidative stress and inflammation can be a useful tool in the early diagnosis of ovine anaplasmosis.
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Animais , Ovinos , Citocinas/análise , Estresse Oxidativo , Anaplasma ovis/isolamento & purificação , Testes de Função Cardíaca/veterinária , Anaplasmose/diagnóstico , Proteínas de Fase Aguda/análiseResumo
The present work reviews the epidemiologic situation of Anaplasma marginale and Babesia spp. infections and the occurrence of cattle tick fever outbreaks in Brazil. In areas of tick fever enzootic instability, environmental conditions interfere with the development of Rhipicephalus (Boophilus) microplus: chilly winter in the southern region, floods in the Pantanal, and low humidity in the Caatinga. In contrast, the climatic conditions of stable zones (Cerrado, Amazon and Atlantic Forest biomes) favor tick development. In enzootic areas, tick fever is uncommon because the animals are in frequent contact with the parasite, acquiring immunity naturally during the period of innate resistance; however, outbreaks may occur when calves become infested by considerable numbers of infected ticks during this period or in adults raised in tick-free environments that become infested for the first time when transporting to stable areas. It is necessary to better understand the disease's risk factors under stable conditions and the implications of the mechanical and other vector transmission of A. marginale. To prevent tick fever outbreaks in Brazil, it is important to develop and use anaplasmosis and babesiosis vaccines in cattle from enzootic unstable regions, especially when animals are moved to stable areas.(AU)
O presente trabalho revisa a situação epidemiológica das infecções por Anaplasma marginale e Babesia spp. e a ocorrência de surtos de Tristeza parasitária bovina (TPB) no Brasil. Em áreas de instabilidade enzoótica, as condições ambientais interferem no desenvolvimento do Rhipicephalus (Boophilus) microplus: o frio do inverno na região Sul; as inundações no Pantanal; e a baixa umidade na Caatinga. Por outra parte, as condições climáticas das zonas de estabilidade (os biomas Cerrado, Amazônia e Mata Atlântica) favorecem o desenvolvimento do carrapato. A TPB não é comum nas áreas estáveis, porque os animais estão em contato frequente com os parasitas, adquirindo imunidade naturalmente. Podem, porém, ocorrer surtos quando um número considerável de carrapatos infectados infesta bezerros, durante o período de resistência inata, ou quando adultos que foram criados em ambientes livres de carrapatos infestam-se, pela primeira vez, ao serem transportados para áreas estáveis. É necessário entender melhor os fatores de risco da doença em condições de estabilidade e a implicação da transmissão de A. marginale de forma mecânica, ou por meio de vetores diferentes do carrapato. Para prevenir surtos de TPB, no Brasil, é necessário desenvolver e usar vacinas em bovinos de regiões de instabilidade, especialmente antes de transportá-los para áreas estáveis.(AU)
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Animais , Doenças Parasitárias em Animais/epidemiologia , Babesiose/epidemiologia , Bovinos/parasitologia , Anaplasmose/epidemiologia , Babesia , Brasil , Anaplasma marginaleResumo
Um canino da raça Poodle, 15 anos, macho, inteiro, foi atendido no Hospital Veterinário da Universidade Luterana do Brasil apresentando: hiporexia há cinco dias e anorexia nos dois últimos dias, hipodipsia, prostração, hipertermia, uveíte e um episódio de vômito. Ao exame físico, constatou-se 8% de desidratação, mucosas secas e hipocoradas, tempo de preenchimento capilar maior que dois segundos e presença de carrapatos (Rhipicephalus sanguineus). Devido à presença dos carrapatos, foi administrado afoxolaner. Realizou-se o exame parasitológico de sangue (EPS), colhido da ponta da orelha e o teste rápido (4Dx® IDEXX). Com o resultado positivo do teste rápido e visualização de mórula no interior das plaquetas compatíveis com Anaplasma platys, definiu-se o diagnóstico de anaplasmose trombocítica canina. A partir do diagnóstico, instituiu-se o tratamento com doxiciclina a cada 12 horas por via oral e, após 48 horas de tratamento, o cão recebeu alta e seguiu com tratamento em domicílio. Após 21 dias de antibioticoterapia, o paciente apresentou melhora clínica satisfatória. Realizou-se nova coleta para EPS, que apresentou resultado negativo.
A 15-year-old male Poodle canine was attended at the Veterinary Hospital of the Lutheran University of Brazil presenting: hyporexia of five days and anorexia for the last two days, hypodipsia, prostration, hyperthermia, uveitis and one episode of vomiting. Physical examination revealed 8% dehydration, dry and pale mucous membranes, capillary refill time greater than two seconds and the presence of ticks (Rhipicephalus sanguineus). Due to the presence of ticks, afoxolaner was administered. The parasitological blood test (EPS) was performed, collected from the ear vein, and a snap test (4Dx® - IDEXX). The positive result of the snap test and visualization of the morulae inside the platelets compatible with Anaplasma platys, the diagnosis of canine thrombocytic anaplasmosis was reached. The treatment with doxycycline was instituted every 12 hours orally and after 48 hours the dog was discharged and continued with treatment at home. After 21 days of antibiotic therapy, the patient showed satisfactory clinical improvement. A new collection for EPS was performed, which showed a negative result.
Un canino macho de 15 años, entero, fue atendido en el Hospital Veterinario de la Universidade Luterana do Brasil por presentar: hiporexia durante cinco días y anorexia durante los dos últimos días, hipodipsia, postración, hipertermia, uveitis y un episodio de vómitos. Al examen físico se encontró un 8% de deshidratación, mucosas secas y pálidas, tiempo de llenado capilar superior a dos segundos y presencia de garrapatas (Rhipicephalus sanguineus). Debido a la presencia de garrapatas, se administró afoxolaner. Se realizó el examen parasitológico de sangre (EPS), recogida de la punta de la oreja y la prueba rápida (4DX - IDEXX). Con el resultado positivo de la prueba rápida y visualización de mórula en el interior de las plaquetas compatible con Anaplasma platys, se definió el diagnóstico de anaplasmosis trombocítica canina. Tras el diagnóstico, se instauró tratamiento con doxiciclina cada 12 horas por vía oral y, a las 48 horas de tratamiento, se dio de alta al perro y se continuó con el tratamiento en casa. Después de 21 días de antibioticoterapia, la paciente mostró una mejoría clínica satisfactoria. Se realizó un nuevo cobro de EPS, que arrojó un resultado negativo.
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Animais , Masculino , Cães , Trombocitopenia/veterinária , Anaplasma/isolamento & purificação , Anaplasmose/tratamento farmacológico , Doxiciclina/uso terapêuticoResumo
The objective was to report an outbreak of tick-borne disease (TBD) on riverside property in the Western Amazon. The death of 25 Nellore cattle was reported on a rural property on the banks of the Purus River, state of Acre. The producer observed animals with staggering walking, drop in productivity, weight loss and evolution to death in approximately 30 days. Fifteen animals from the same batch were selected for clinical evaluation and the ear tip was punctured for hemoparasite research, in addition to blood collection for hematological, biochemical and molecular evaluation. The main laboratory findings were leukocytosis, thrombocytopenia, hypoproteinemia, elevated creatine kinase and reduced urea, creatinine and albumin, as well as visualization of forms suggestive of Anaplasma spp. in 13.33% of the samples. Through PCR, 20% positivity was observed for Anaplasmamarginale and 53.33% for Babesia sp. Hematological and biochemical changes, although highly suggestive, may suffer changes from other factors not related to TBD. Therefore, the presumptive identification of the etiological agent in the blood or confirmatory by molecular methods is essential in the diagnosis. Depending on the stage of the disease, low parasitemia occurs, making it difficult to see hemoparasites in blood smears. The Babesia sp. was the main agent of the outbreak of TBD in the population evaluated, which, when associated with early clinical and laboratory diagnosis, results in adequate therapeutic direction and prophylactic measures, promoting a balance between host, agent and vector.
Objetivou-se relatar um surto de tristeza parasitária bovina (TPB) em propriedade ribeirinha na Amazônia Ocidental. Foi notificado o óbito de 25 bovinos da raça Nelore, em uma propriedade rural às margens do rio Purus, estado do Acre. O produtor observou animais com andar cambaleante, queda na produtividade, perda de peso e evolução ao óbito em aproximadamente 30 dias. Quinze animais do mesmo lote foram selecionados para avaliação clínica e foi procedida a punção a ponta de orelha para pesquisa de hemoparasitos, além da coleta de sangue para avaliação hematológica, bioquímica e molecular. Os principais achados laboratoriais foram anemia, leucocitose, trombocitopenia, hipoproteinemia, elevação da creatina quinase e redução de ureia, creatinina e albumina, além da visualização de formas sugestivas de Anaplasma spp. em 13,33% das amostras. Por meio da PCR, foi observado 20% de positividade para Anaplasma marginale e 53,33% para Babesia sp. As alterações hematológicas e bioquímicas, embora bastante sugestivas, podem sofrer alterações de outros fatores não relacionados à TPB. Por isso, a identificação presuntiva do agente etiológico no sangue ou confirmatória por métodos moleculares é essencial no diagnóstico. A depender da fase da doença, ocorre baixa parasitemia, dificultando a visualização de hemoparasitos em esfregaços sanguíneos. A Babesia sp. foi o principal agente do surto de TPB na população avaliada, que, quando associado ao diagnóstico clínico e laboratorial precoce, resulta no direcionamento terapêutico adequado e medidas profiláticas, promovendo uma relação de equilíbrio entre hospedeiro, agente e vetor.
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Animais , Bovinos , Doenças Parasitárias em Animais , Babesiose/diagnóstico , Bovinos/parasitologia , Reação em Cadeia da Polimerase/veterinária , Doenças Transmitidas por Carrapatos/veterinária , Anaplasmose/diagnósticoResumo
Background: Anaplasma phagocytophilum is an obligate intracellular pathogen transmitted by the ticks that cause equinegranulocytic anaplasmosis (EGA). This pathogen is infects predominantly blood cells, principally granulocytes and especially neutrophils. A. phagocytophilum causes an acute febrile disease in horses accompanying with lethargy, loss ofappetite, lameness and hemorrhages. In horses, this disease should be considered in all acute symptoms accompaniedby thrombocytopenia and leukopenia identified by hematological test performed. Tick-borne pathogens have becomeincreasingly threatening for both animals and also public health since ticks mostly carry numerous well-documented andundocumented pathogens, and the geographical range of ticks has expanded in the recent years. This research has aimed toevaluate the impact of A. phagocytophilum infection on some oxidative/nitrosative stress parameters, antioxidant enzymeactivities, proinflammatory biomarkers and trace element levels in horses.Materials, Methods & Results: The present study has been carried out using blood samples collected from 93 horses aged1-year and older. The blood samples were centrifuged and sera were separated. Serum samples stored in the freezer (-20°C)until the day of analysis. The DNA was extracted from blood and analysed by nested-PCR technique targeting 16S rRNAgene of A. phagocytophilum and then positive PCR products were sequenced. A. phagocytophilum was 6 horses (6.4%)showed positive nested-PCR results. An infected group comprised of 6 positive horses according to PCR analysis results also6 healthy horses as control were selected. Serum SOD (Horse Superoxide Dismutase(Cu-Zn)) ELISA Kit, MPO (ELISAAssay Kit Horse Myeloperoxidase) and GPx (Horse glutathione peroxidase 1 ELISA Kit Assay), IL1 (Horse Interleukin 1Beta ELISA Kit), IL6 (Horse Interleukin 6 ELISA Kit), TNF α (Horse Tumor Necrosis...
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Animais , Anaplasma phagocytophilum , Anaplasmose/complicações , Anaplasmose/patologia , Biomarcadores , Cavalos/sangue , Estresse Nitrosativo , Estresse Oxidativo , OligoelementosResumo
Anaplasma marginale (A. marginale) is a worldwide pathogen that infects a variety of ruminants, but mostly cattle. The present study aimed to describe an isolation technique for A. marginale, using chicken embryo Þ broblast (CEF) cell culture. Blood and tick samples were collected from 5 calves from 2 to 3 months old, which were considered to be infected with A.marginale due to anemia, jaundiced mucous membranes, and prostration. DNA extraction and PCR were performed for diagnosis using blood and tick samples. All tick and blood samples tested positive in PCR. Additionally, ticks were crushed with the aid of a blender for inoculation in CEF cell culture. After inoculation, the cultures were kept at 37ºC and 5% CO2 for 15 days. The cell supernatant of cell cultures was again analyzed using PCR and Wright stain method to conÞ rm A. marginale isolation. Cell cultures tested positive in PCR, and the presence of the agent was demonstrated by Wright stain. Therefore, by using CEF cell culture it was possible to isolate and amplify the A. marginale in a concentration of 1.3 x 107.2 bodies per mL. The CEF cells are undemanding and easy to preserve; they are an option for isolation and production of A. marginale under laboratory conditions.(AU)
Anaplasma marginale (A. marginale) é um patógeno mundial que infecta uma variedade de ruminantes, mas principalmente bovinos. O presente estudo teve como objetivo descrever uma técnica de isolamento para A. marginale, utilizando cultivo celular de Þ broblastos de embriões (CFE) de galinhas. Para isso, foram coletadas amostras de sangue e de carrapatos de 5 bezerros, entre 2 e 3 meses de idade, os quais, devido a anemia, icterícia de mucosas e prostração, foram considerados supostamente infectados com A. marginale. Ethics Approval This study was approved by Credenciamento Institucional para Atividades com Animais em Ensino ou Pesquisa (CIAEP: 02.0420.2021). Consent to participate Not applicable Consent to publish Not applicable Data availability Not applicable Para o diagnóstico, realizaram-se extração de DNA e posterior PCR a partir das amostras de sangue e de carrapatos coletados. Todos os carrapatos e amostras de sangue foram positivas para o teste de PCR. Além disso, os carrapatos foram triturados com o auxílio de um liquidiÞ cador para inoculação em CFE. Após a inoculação, as culturas foram mantidas a 37ºC e a 5% de CO2 durante 15 dias. O sobrenadante celular das culturas foi novamente analisado por PCR e pela técnica de coloração de Wright para conÞ rmar o isolamento de Anaplasma marginale. As culturas celulares foram po sitivas por PCR, e a presença do agente foi comprovada por meio da coloração de Wright. Portanto, utilizando CFE, foi possível isolar e ampliÞ car o A. marginale em uma concentração de 1,3x107,2 bactérias por ml. As células da CEF são pouco exigentes, de fácil manutenção e uma boa opção para isolamento e produção de A. marginale em condição laboratorial.(AU)
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Animais , Bovinos , Bovinos/microbiologia , Anaplasma marginale/isolamento & purificação , Fibroblastos/microbiologia , Anaplasmose/diagnóstico , Células Cultivadas/imunologia , Embrião de Galinha/microbiologia , Reação em Cadeia da Polimerase/métodosResumo
Abstract Anaplasma marginale is an obligate intracellular Gram-negative bacterium found in ruminants' erythrocytes and is the etiological agent of bovine anaplasmosis. The bacterium's genetic diversity has been characterized based on sequences of major surface proteins (MSPs), such as MSP1α. The aim of the present study was to investigate the genetic diversity of A. marginale in cattle in the state of Maranhão, northeastern Brazil. To this end, 343 blood samples were harvested and subjected to iELISA assays using the recombinant surface protein MSP5. Out of 343 blood samples, 235 (68.5%) were randomly chosen and submitted to DNA extraction, qPCR and conventional PCR targeting the msp1α gene to determine amino acid sequences and classify the genotypes. The iELISA results showed 81.34% seropositivity (279/343), whereas qPCR revealed 224 positive samples (95.32%). Among these qPCR-positive samples, 67.4% (151/224) were also positive in the cPCR. Among the 50 obtained sequences, 21 strains had not been previously reported. Regarding the genotypes, H (26/50) and E (18/50) were identified most often, while genotypes F and C were only identified twice each and B and G once each. In conclusion, high prevalence and genetic diversity for A. marginale were observed in dairy cattle herds in the state of Maranhão.
Resumo Anaplasma marginale é uma bactéria Gram-negativa intracelular obrigatória de eritrócitos de ruminantes e responsável pela anaplasmose bovina. A diversidade genética de A. marginale tem sido caracterizada com base nas sequências das principais proteínas de superfície (MSPs), como a MSP1α. O objetivo deste estudo foi investigar a diversidade genética de A. marginale em bovinos no estado do Maranhão, Nordeste do Brasil. Dessa forma, 343 amostras de sangue foram submetidas ao ensaio iELISA, utilizando-se a proteína recombinante MSP5. Das 343 amostras de sangue, 235 (68,5%) foram escolhidas aleatoriamente e submetidas à extração de DNA, qPCR e PCR convencional para gene msp1α, para determinação das sequências de aminoácidos e classificação dos genótipos. Os resultados do iELISA mostraram 81,34% de soropositividade (279/343), enquanto qPCR revelou 224 amostras positivas (95,32%). Dentre estas na qPCR, 67,4% (151/224) mostraram-se positivas no PCR convencional. Das 50 sequências obtidas, 21 cepas não haviam sido relatadas anteriormente. Em relação aos genótipos, H (26/50) e E (18/50) foram os mais frequentes, enquanto os genótipos F e C foram identificados apenas duas vezes cada, e B e G uma vez cada. Em conclusão, alta prevalência e marcante diversidade genética de A. marginale foram observadas em rebanhos leiteiros no estado do Maranhão.
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Animais , Doenças dos Bovinos , Anaplasma marginale/genética , Anaplasmose , Variação Genética , Brasil , Bovinos , GenótipoResumo
The objective of this study was to obtain data on the occurrence of Babesia bigemina e Anaplasma marginale in cattle with characteristic clinical signs of the disease, in different properties in western Santa Catarina. For this, 149 blood sample were collected and slides smears were done and the staining with the Romanowsky kind dye subsequently. Of the 149 samples surveyed, 78 (52.35%) were positive for A. marginale, 04 (2.68%) for B. bigemina, and 03 (2.01%) samples showed co-infection. All described cases occurred in adult animals, from two years old, with Holstein females the highest occurrence represented 119/149 (79.86%). Regarding the presence of ectoparasites, hematophagous flies were observed in all properties and ticks in 58/149 (38.92%) animals. The results showed a higher occurrence of A. marginale, evidencing the need to seek strategies of control and prevention by the veterinary professionals, especially in moments of greater occurrence of the vectors. The confirmation as from laboratory support by stained blood smears beyond being cheaper practical is a method that helping professionals identify the suspected cases etiology. Moreover, based on this information, we can promote the elaboration of prevention and treatment strategies based on simple and fast diagnostic techniques, focused on especific disease agents.(AU)
O objetivo desse estudo foi obter dados de ocorrência B. bigemina. e A. marginale em bovinos com sinais clínicos característicos da doença em diferentes propriedades da região oeste de Santa Catarina. Para isso, foram coletadas 149 amostras de sangue, para posterior confecção de esfregaço em lâminas e a realização da coloração com o corante tipo Romanowsky. Das 149 amostras pesquisadas, 78 (52,35%) foram positivas para A. marginale, 04 (2,68%) para B. bigemina e 03 (2,01%) amostras apresentaram co-infecção. Todos os casos descritos ocorreram em animais adultos, a partir de dois anos de idade, com maior ocorrência em fêmeas da raça holandesa 119/149 (79,86%). Quanto à presença de ectoparasitas, foram observadas moscas hematófagas em todas as propriedades e carrapatos em 58/149 (38,92%) animais. Os resultados demonstram uma maior ocorrência de A. marginale evidenciando a necessidade dos profissionais buscarem estratégias de controle e prevenção, principalmente nas épocas de maior ocorrência dos vetores. A confirmação a partir do suporte laboratorial, por esfregaço de sangue corado, além de prático e barato, é um método que ajuda os profissionais a identificar a etiologia dos casos suspeitos. Além disso, com base nessas informações, podemos promover a elaboração de estratégias de prevenção e tratamento com base em técnicas simples e rápidas de diagnóstico, focadas em agentes específicos da doença.(AU)
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Animais , Bovinos , Babesiose/diagnóstico , Anaplasmose/diagnóstico , Bovinos/parasitologia , Anaplasma marginaleResumo
The objective of this study was to obtain data on the occurrence of Babesia bigemina e Anaplasma marginale in cattle with characteristic clinical signs of the disease, in different properties in western Santa Catarina. For this, 149 blood sample were collected and slides smears were done and the staining with the Romanowsky kind dye subsequently. Of the 149 samples surveyed, 78 (52.35%) were positive for A. marginale, 04 (2.68%) for B. bigemina, and 03 (2.01%) samples showed co-infection. All described cases occurred in adult animals, from two years old, with Holstein females the highest occurrence represented 119/149 (79.86%). Regarding the presence of ectoparasites, hematophagous flies were observed in all properties and ticks in 58/149 (38.92%) animals. The results showed a higher occurrence of A. marginale, evidencing the need to seek strategies of control and prevention by the veterinary professionals, especially in moments of greater occurrence of the vectors. The confirmation as from laboratory support by stained blood smears beyond being cheaper practical is a method that helping professionals identify the suspected cases etiology. Moreover, based on this information, we can promote the elaboration of prevention and treatment strategies based on simple and fast diagnostic techniques, focused on especific disease agents.
O objetivo desse estudo foi obter dados de ocorrência B. bigemina. e A. marginale em bovinos com sinais clínicos característicos da doença em diferentes propriedades da região oeste de Santa Catarina. Para isso, foram coletadas 149 amostras de sangue, para posterior confecção de esfregaço em lâminas e a realização da coloração com o corante tipo Romanowsky. Das 149 amostras pesquisadas, 78 (52,35%) foram positivas para A. marginale, 04 (2,68%) para B. bigemina e 03 (2,01%) amostras apresentaram co-infecção. Todos os casos descritos ocorreram em animais adultos, a partir de dois anos de idade, com maior ocorrência em fêmeas da raça holandesa 119/149 (79,86%). Quanto à presença de ectoparasitas, foram observadas moscas hematófagas em todas as propriedades e carrapatos em 58/149 (38,92%) animais. Os resultados demonstram uma maior ocorrência de A. marginale evidenciando a necessidade dos profissionais buscarem estratégias de controle e prevenção, principalmente nas épocas de maior ocorrência dos vetores. A confirmação a partir do suporte laboratorial, por esfregaço de sangue corado, além de prático e barato, é um método que ajuda os profissionais a identificar a etiologia dos casos suspeitos. Além disso, com base nessas informações, podemos promover a elaboração de estratégias de prevenção e tratamento com base em técnicas simples e rápidas de diagnóstico, focadas em agentes específicos da doença.
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Animais , Bovinos , Anaplasmose/diagnóstico , Babesiose/diagnóstico , Bovinos/parasitologia , Anaplasma marginaleResumo
This study investigated the seropositivity for five different tick-borne agents, namely Anaplasma marginale, Babesia bovis, Babesia bigemina, Coxiella burnetii, Anaplasma phagocytophilum, and Trypanosoma vivax in beef cattle in the Brazilian Pantanal. The serum samples collected from animals (200 cows; 200 calves) were used in indirect enzyme-linked immunosorbent assays (iELISA) to detect IgG antibodies against A. marginale, B. bovis, B. bigemina, and T. vivax, and Indirect Fluorescent Antibody Test (IFAT) for detecting IgG antibodies against C. burnetii and A. phagocytophilum. No correlation was observed between seropositivity for C. burnetii and A. phagocytophilum with other agents whereas moderate correlation was observed for A. marginalexB. bigemina x B. bovis. Cows were more seropositive for T. vivax whereas calves were more seropositive for B. bovis and B. bigemina. The highest number of seropositive animals by a single agent was observed for T. vivax (15.2%). Co-seropositivity for T. vivax + A. marginale was higher in cows (25.5%) and for T. vivax + B. bovis + B. bigemina + A. marginale was higher in calves (57.5%). The high seropositivity correlation for A. marginale x B. bovis x B. bigemina is probably due to the presence of the tick biological vector, Rhipicephalus microplus, in the studied farms. Common transmission pathways, mediated by hematophagous dipterans and fomites, may explain the high co-seropositivity of cows for A. marginale and T. vivax. Low seropositivity to C. burnetii is probably due to the type of breeding system employed (extensive). Seropositivity for A. phagocytophilum in only one animal suggests the occurrence of a cross-serological reaction with another agent of the genus Anaplasma.(AU)
Este estudo teve como objetivo determinar a co-soropositividade para agentes transmitidos por carrapatos, como Anaplasma marginale, Babesia bovis, Babesia bigemina, Coxiella burnetii, Anaplasma phagocytophilum, e Trypanosoma vivax em bovinos de corte do Pantanal Brasileiro. Amostras de soro foram colhidas de 400 animais (200 vacas; 200 bezerros) e submetidas a Ensaios Imunoenzimáticos Indiretos (iELISA) para detecção de anticorpos IgG anti- A. marginale, anti- B. bovis, anti- B. bigemina e anti- T. vivax, e à Reação de Imunofluorescência Indireta (RIFI) para detecção de anticorpos IgG anti -C. burnetii e anti- A. phagocytophilum. Ausência de correlação foi vista entre os animais soropositivos para C. burnetii e A. phagocytophilum com os outros agentes e correlação moderada ocorreu entre A. marginale x B. bigemina x B. bovis. Vacas foram mais soropositivas que bezerros para T. vivax e bezerros mais soropositivos que vacas para B. bovis e B. bigemina. Maior número de animais soropositivos para um único agente foi visto para T. vivax (15,2%). Vacas demonstraram maior co-soropositividade para T. vivax + A. marginale (25,5%) e bezerros para T. vivax + B. bovis + B. bigemina + A. marginale (57,5%). A alta correlação entre a soropositividade para A. marginale x B. bovis x B. bigemina é provavelmente devida à presença do vetor biológico, o carrapato Rhipicephalus microplus, nas fazendas estudadas. As vias de transmissão comuns, mediadas por dípteros hematófagos e fômites, podem explicar a alta co-soropositividade das vacas para A. marginale e T. vivax. A baixa soropositividade para C. burnetii é provavelmente devida ao tipo de sistema de criação empregado (extenso). A soropositividade para A. phagocytophilum em apenas um animal sugere a ocorrência de reação sorológica cruzada com outro agente do gênero Anaplasma.(AU)
Assuntos
Animais , Bovinos , Testes Sorológicos/veterinária , Bovinos/parasitologia , Carrapatos/parasitologia , Babesiose , Anaplasmose , TripanossomíaseResumo
A anaplasmose trombocítica em cães é uma hemoparasitose, cujo agente etiológico é bactéria gram-negativa. Em nossa região, ela não é diagnosticada rotineiramente. Dessa forma, objetivou-se relatar um caso de anaplasmose trombocítica em uma cadela resgatada na rua. Ao exame físico, a cadela apresentava-se em alerta. Após prescrição terapêutica, não houve melhora, solicitando-se hemograma e teste rápido para hemoparasitoses. Este mostrou-se positivo para anaplasmose. Verificou-se um quadro de anemia, trombocitopenia e linfopenia. Mas estas alterações não comprometeram o bem estar do animal, já que o diagnóstico foi precoce. Conclui-se que a anaplasmose trombocítica é uma realidade na rotina clínica veterinária.(AU)
Thrombocytic anaplasmosis in dogs is a hemoparasitosis, whose etiological agent is gram negative bacteria. In our region, it is not routinely diagnosed. Thus, we aimed to report a case of thrombocytic anaplasmosis in a rescued female dog in the street. On physical examination, the dog was alert. After therapeutic prescription, there was no improvement, requesting blood count and rapid test for hemoparasitoses. This was positive for anaplasmosis. Anemia, thrombocytopenia and lymphopenia have been reported. But these changes did not compromise the welfare of the animal, since the diagnosis was early. It is concluded that thrombocytic anaplasmosis is a reality in the veterinary clinical routine.(AU)
Assuntos
Animais , Feminino , Cães , Anaplasmose/diagnóstico , Anaplasmose/terapia , Trombocitose/veterinária , Técnicas Citológicas/veterináriaResumo
This study investigated the seropositivity for five different tick-borne agents, namely Anaplasma marginale, Babesia bovis, Babesia bigemina, Coxiella burnetii, Anaplasma phagocytophilum, and Trypanosoma vivax in beef cattle in the Brazilian Pantanal. The serum samples collected from animals (200 cows; 200 calves) were used in indirect enzyme-linked immunosorbent assays (iELISA) to detect IgG antibodies against A. marginale, B. bovis, B. bigemina, and T. vivax, and Indirect Fluorescent Antibody Test (IFAT) for detecting IgG antibodies against C. burnetii and A. phagocytophilum. No correlation was observed between seropositivity for C. burnetii and A. phagocytophilum with other agents whereas moderate correlation was observed for A. marginalexB. bigemina x B. bovis. Cows were more seropositive for T. vivax whereas calves were more seropositive for B. bovis and B. bigemina. The highest number of seropositive animals by a single agent was observed for T. vivax (15.2%). Co-seropositivity for T. vivax + A. marginale was higher in cows (25.5%) and for T. vivax + B. bovis + B. bigemina + A. marginale was higher in calves (57.5%). The high seropositivity correlation for A. marginale x B. bovis x B. bigemina is probably due to the presence of the tick biological vector, Rhipicephalus microplus, in the studied farms. Common transmission pathways, mediated by hematophagous dipterans and fomites, may explain the high co-seropositivity of cows for A. marginale and T. vivax. Low seropositivity to C. burnetii is probably due to the type of breeding system employed (extensive). Seropositivity for A. phagocytophilum in only one animal suggests the occurrence of a cross-serological reaction with another agent of the genus Anaplasma.(AU)
Este estudo teve como objetivo determinar a co-soropositividade para agentes transmitidos por carrapatos, como Anaplasma marginale, Babesia bovis, Babesia bigemina, Coxiella burnetii, Anaplasma phagocytophilum, e Trypanosoma vivax em bovinos de corte do Pantanal Brasileiro. Amostras de soro foram colhidas de 400 animais (200 vacas; 200 bezerros) e submetidas a Ensaios Imunoenzimáticos Indiretos (iELISA) para detecção de anticorpos IgG anti- A. marginale, anti- B. bovis, anti- B. bigemina e anti- T. vivax, e à Reação de Imunofluorescência Indireta (RIFI) para detecção de anticorpos IgG anti -C. burnetii e anti- A. phagocytophilum. Ausência de correlação foi vista entre os animais soropositivos para C. burnetii e A. phagocytophilum com os outros agentes e correlação moderada ocorreu entre A. marginale x B. bigemina x B. bovis. Vacas foram mais soropositivas que bezerros para T. vivax e bezerros mais soropositivos que vacas para B. bovis e B. bigemina. Maior número de animais soropositivos para um único agente foi visto para T. vivax (15,2%). Vacas demonstraram maior co-soropositividade para T. vivax + A. marginale (25,5%) e bezerros para T. vivax + B. bovis + B. bigemina + A. marginale (57,5%). A alta correlação entre a soropositividade para A. marginale x B. bovis x B. bigemina é provavelmente devida à presença do vetor biológico, o carrapato Rhipicephalus microplus, nas fazendas estudadas. As vias de transmissão comuns, mediadas por dípteros hematófagos e fômites, podem explicar a alta co-soropositividade das vacas para A. marginale e T. vivax. A baixa soropositividade para C. burnetii é provavelmente devida ao tipo de sistema de criação empregado (extenso). A soropositividade para A. phagocytophilum em apenas um animal sugere a ocorrência de reação sorológica cruzada com outro agente do gênero Anaplasma.(AU)
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Animais , Bovinos , Bovinos/parasitologia , Testes Sorológicos , Tripanossomíase , Anaplasmose , Babesiose , Febre Q , Áreas AlagadasResumo
A anaplasmose trombocítica em cães é uma hemoparasitose, cujo agente etiológico é bactéria gram-negativa. Em nossa região, ela não é diagnosticada rotineiramente. Dessa forma, objetivou-se relatar um caso de anaplasmose trombocítica em uma cadela resgatada na rua. Ao exame físico, a cadela apresentava-se em alerta. Após prescrição terapêutica, não houve melhora, solicitando-se hemograma e teste rápido para hemoparasitoses. Este mostrou-se positivo para anaplasmose. Verificou-se um quadro de anemia, trombocitopenia e linfopenia. Mas estas alterações não comprometeram o bem estar do animal, já que o diagnóstico foi precoce. Conclui-se que a anaplasmose trombocítica é uma realidade na rotina clínica veterinária.
Thrombocytic anaplasmosis in dogs is a hemoparasitosis, whose etiological agent is gram negative bacteria. In our region, it is not routinely diagnosed. Thus, we aimed to report a case of thrombocytic anaplasmosis in a rescued female dog in the street. On physical examination, the dog was alert. After therapeutic prescription, there was no improvement, requesting blood count and rapid test for hemoparasitoses. This was positive for anaplasmosis. Anemia, thrombocytopenia and lymphopenia have been reported. But these changes did not compromise the welfare of the animal, since the diagnosis was early. It is concluded that thrombocytic anaplasmosis is a reality in the veterinary clinical routine.
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Feminino , Animais , Cães , Anaplasmose/diagnóstico , Anaplasmose/terapia , Trombocitose/veterinária , Técnicas Citológicas/veterináriaResumo
Ehrlichia canis, Anaplasma platys, and Babesia vogeli are frequently detected in the veterinary routine with varied pathogenesis that can lead to death, mainly in co-infections. Although canine hemotropic mycoplasmas are considered of low clinical importance, they have recently gained prominence in molecular research. The present study aimed to analyze two hospital populations of dogs, randomly selected from the year 2013 and 2015, from the municipalities of Toledo (n=68) and Cascavel (n=107). Direct examination of blood smears, serology, and PCR were used to detect the presence of E. canis, A. platys, B. vogeli and Mycoplasma sp. Direct blood smear examination was negative for the investigated agents in all samples. Serum immunochromatography (SensPERT , VetAll Laboratories, Korea) in 175 animals showed that only 4% (n = 7) had anti-E. canis antibodies, while 60% (n = 105) were positive for Anaplasma sp. All PCR samples were negative for E. canis, while 18.28% (n = 32) were positive for A. platys, 3.42% (n = 6) positive for Babesia vogeli, and 7.41% (n = 13) positive for Mycoplasma sp. The study revealed the presence of A. platys in Toledo and Cascavel by PCR, which accentuates the need to monitor vector populations and usual hosts and to evaluate the potential risk of infection in humans.
Ehrlichia canis, Anaplasma platys e Babesia vogeli são frequentemente detectados na rotina veterinária com patogênese variada que pode levar à morte, principalmente em coinfecções. Embora os micoplasmas hemotrópicos caninos sejam considerados de baixa importância clínica, recentemente ganharam destaque na pesquisa molecular. O presente estudo teve como objetivo analisar duas populações hospitalares de cães, selecionadas aleatoriamente no ano de 2013 e 2015, dos municípios de Toledo (n = 68) e Cascavel (n = 107). O exame direto de esfregaços de sangue, sorologia e PCR foram usados para detectar a presença de E. canis, A. platys, B. vogeli e Mycoplasma sp. O esfregaço sanguíneo direto foi negativo para os agentes investigados em todas as amostras. A imunocromatografia sérica (SensPERT , VetAll Laboratories, Coréia) em 175 animais mostrou que apenas 4% (n = 7) tinham anticorpos contra E.canis, enquanto 60% (n = 105) foram positivos para Anaplasma sp. Todas as amostras de PCR foram negativas para E. canis, enquanto 18,28% (n = 32) foram positivas para A. platys, 3,42% (n = 6) positivas para Babesia vogeli e 7,41% (n = 13) positivas para Mycoplasma sp. O estudo revelou a presença de A. platys em Toledo e Cascavel por PCR, o que acentua a necessidade de monitorar populações de vetores e hospedeiros usuais e avaliar o risco potencial de infecção em humanos.
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Animais , Cães , Anaplasma/patogenicidade , Babesia/patogenicidade , Doenças do Cão/sangue , Ehrlichia/patogenicidade , Mycoplasma/patogenicidade , Reação em Cadeia da Polimerase/veterinária , Rhipicephalus/patogenicidade , Cromatografia de Afinidade/veterináriaResumo
Ehrlichia canis, Anaplasma platys, and Babesia vogeli are frequently detected in the veterinary routine with varied pathogenesis that can lead to death, mainly in co-infections. Although canine hemotropic mycoplasmas are considered of low clinical importance, they have recently gained prominence in molecular research. The present study aimed to analyze two hospital populations of dogs, randomly selected from the year 2013 and 2015, from the municipalities of Toledo (n=68) and Cascavel (n=107). Direct examination of blood smears, serology, and PCR were used to detect the presence of E. canis, A. platys, B. vogeli and Mycoplasma sp. Direct blood smear examination was negative for the investigated agents in all samples. Serum immunochromatography (SensPERT , VetAll Laboratories, Korea) in 175 animals showed that only 4% (n = 7) had anti-E. canis antibodies, while 60% (n = 105) were positive for Anaplasma sp. All PCR samples were negative for E. canis, while 18.28% (n = 32) were positive for A. platys, 3.42% (n = 6) positive for Babesia vogeli, and 7.41% (n = 13) positive for Mycoplasma sp. The study revealed the presence of A. platys in Toledo and Cascavel by PCR, which accentuates the need to monitor vector populations and usual hosts and to evaluate the potential risk of infection in humans.(AU)
Ehrlichia canis, Anaplasma platys e Babesia vogeli são frequentemente detectados na rotina veterinária com patogênese variada que pode levar à morte, principalmente em coinfecções. Embora os micoplasmas hemotrópicos caninos sejam considerados de baixa importância clínica, recentemente ganharam destaque na pesquisa molecular. O presente estudo teve como objetivo analisar duas populações hospitalares de cães, selecionadas aleatoriamente no ano de 2013 e 2015, dos municípios de Toledo (n = 68) e Cascavel (n = 107). O exame direto de esfregaços de sangue, sorologia e PCR foram usados para detectar a presença de E. canis, A. platys, B. vogeli e Mycoplasma sp. O esfregaço sanguíneo direto foi negativo para os agentes investigados em todas as amostras. A imunocromatografia sérica (SensPERT , VetAll Laboratories, Coréia) em 175 animais mostrou que apenas 4% (n = 7) tinham anticorpos contra E.canis, enquanto 60% (n = 105) foram positivos para Anaplasma sp. Todas as amostras de PCR foram negativas para E. canis, enquanto 18,28% (n = 32) foram positivas para A. platys, 3,42% (n = 6) positivas para Babesia vogeli e 7,41% (n = 13) positivas para Mycoplasma sp. O estudo revelou a presença de A. platys em Toledo e Cascavel por PCR, o que acentua a necessidade de monitorar populações de vetores e hospedeiros usuais e avaliar o risco potencial de infecção em humanos.(AU)
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Animais , Cães , Doenças do Cão/sangue , Ehrlichia/patogenicidade , Anaplasma/patogenicidade , Babesia/patogenicidade , Mycoplasma/patogenicidade , Rhipicephalus/patogenicidade , Reação em Cadeia da Polimerase/veterinária , Cromatografia de Afinidade/veterináriaResumo
The msp4 gene of A. marginale is unicodon, stable and mostly homogeneous, being considered as a useful marker for phylogeographic characterization of this bacterium. The objective of this work was to analyze the phylogeography of A. marginale based on the msp4 gene in beef cattle from the Brazilian Pantanal, compared to those found in other regions worldwide. The blood samples investigated were collected from 400 animals (200 cows and 200 calves) reared in five extensive breeding farms in this region. The results indicated that of the evaluated samples, 56.75% (227/400) were positive for A. marginale based on the msp1 gene by quantitatitve PCR (qPCR), while 8.37% (19/227) were positive for the msp4 gene in the conventional PCR. In the Network distance analysis, 14 sequences from the Brazilian Pantanal were grouped into a single group with those from Thailand, India, Spain, Colombia, Parana (Brazil), Mexico, Portugal, Argentina, China, Venezuela, Australia, Italy and Minas Gerais (Brazil). Among 68 sequences from Brazil and the world, 15 genotypes were present while genotype number one (/1) was the most distributed worldwide. Both Splitstree and network analyses showed that the A. marginale msp4 sequences detected in beef cattle from the Brazilian Pantanal showed low polymorphism, with the formation of one genogroup phylogenetically related to those found in ruminants from South and Central America, Europe, and Asia.(AU)
O gene msp4 de A. marginale é unicodon, estável e pouco heterogêneo, sendo considerado como um marcador útil para caracterização filogeográfica desta bactéria. Este trabalho teve como objetivo analisar a filogeografia de A. marginale com base no gene msp4 em bovinos de corte do Pantanal Brasileiro, comparativamente a outra regiões do mundo. Alíquotas de sangue foram colhidas de 400 bovinos (200 vacas e 200 bezerros) em cinco propriedades de cria e recria extensiva. Como resultado, 56,75% (227/400) mostraram-se positivas para A. marginale pela qPCR para o gene msp1 e destas, 8,37% (19/227) amostras foram positivas na PCR convencional para o gene msp4. Na análise de distância Network, 14 sequências do Pantanal brasileiro foram agrupadas em um único grupo com as da Thailândia, Índia, Espanha, Colômbia, Paraná (Brasil), México, Portugal, Argentina, China, Venezuela, Austrália, Italia e Minas Gerais (Brasil). Dentre 68 sequências do Brasil e do mundo, constatou-se a presença de 15 genótipos, sendo o genótipo número um (/1) o mais distribuído. As sequências msp4 de A. marginale detectadas em bovinos de corte no Pantanal brasileiro apresentaram baixo polimorfismo com formação de dois genogrupos filogeneticamente relacionados àqueles encontrados em ruminantes de países das América do Sul e Central, Europa e Ásia.(AU)
Assuntos
Animais , Bovinos , Filogeografia/classificação , Filogeografia/tendências , Anaplasma marginale/genéticaResumo
The study aimed to evaluate and compare the clinical, laboratory and pathological aspects of buffalo and bovine experimentally infected with AmRio 2 strain of Anaplasma marginale. Four Murrah buffaloes and four crossbred cattle were used in the experiment, which two animals of each species were splenectomized. Strain AmRio 2 of A. marginale was inoculated in all experimental animals. Clinical exams, Packed Cell Volume (PCV), blood counts, blood smears, rickettsemia, necropsy and histopathology were performed in all cases. Semi-Nested-PCR (snPCR) for the msp5 and snPCR for the msp1α target gene for identification of A. marginale in blood samples from animals was done. From positive samples for msp1α snPCR, samples were analyzed for the amino acid sequences of this gene. Two splenectomized cattle presented apathy, pale mucous membranes, jaundice, hyperthermia, and severe anemia. The remaining experimental animals did not show clinical signs. The rickettsemia in all animals was less than 1%. The mean PCV of the splenectomized cattle was below 20% at two-time points after infection. On the blood count, the main changes were observed in splenectomized calves and were characterized by a decrease in red blood cells, hemoglobin, PCV and platelets (p <0.05). All animals presented leukocyte elevation by increased lymphocytes, however, with no significant difference. The average prepatent period was two days in all the animals. The average incubation period in cattle that became ill was 25.5 days, and death occurred, on average, 63 days after inoculation of the strain. The necropsy findings were characterized by pale carcass, ascites, enlarged liver, distended gallbladder, and thick bile. Histopathological findings included infiltration of macrophages and lymphocytes in various organs, hepatic sinusoidal dilatation, and necrosis of the large intestine. In snPCR for the msp5 gene, 100% of the animals were positive in at least one evaluation. And in the snPCR for the infection of the msp1α target gene was also found in all animals in at least one sample evaluated. However, sequencing revealed only five animals, including the bovine which died, with a similarity of the amino acid sequences with AmRio 2 strain of A. marginale. It is concluded that the splenectomized cattle died due to anaplasmosis caused by the inoculated strain and the buffalo were more resistant compared to cattle. Buffaloes can be an alternative to cattle rearing in areas with a high occurrence of clinical cases of anaplasmosis.(AU)
O estudo teve como objetivo avaliar e comparar os aspectos clínicos, laboratoriais e patológicos de búfalos e bovinos infectados experimentalmente com estirpe AmRio 2 de Anaplasma marginale. Para isso, foram utilizados quatro bubalinos Murrah e quatro bovinos mestiços, sendo dois animais de cada espécie, esplenectomizados. Estirpe AmRio 2 de A. marginale foi inoculada em todos os animais. Foram realizados exames clínicos, hematócrito, hemograma, esfregaço sanguíneo com avaliação de riquetsemia, necropsia e histopatologia, além de, Semi-Nested-PCR (snPCR) para o gene alvo msp5 e snPCR para o gene alvo msp1α para identificação de A. marginale nas amostras de sangue dos ruminantes. A partir das amostras positivas na snPCR msp1α, foram selecionadas amostras para análise das sequências de aminoácidos deste gene. Dois bovinos esplenectomizados apresentaram apatia, mucosas pálidas, icterícia, hipertermia e anemia severa. O restante dos animais não apresentou sintomatologia clínica. A riquetsemia em todos os animais foi menor que 1%. A média do hematócrito dos bovinos esplenectomizados esteve abaixo de 20% em dois momentos após infecção. Ao hemograma, as principais alterações observadas foram nos bovinos esplenectomizados e caracterizaram-se por redução de hemácias, hemoglobina, hematócrito e plaquetas (p<0,05). Todos os animais apresentaram elevação de leucócitos por aumento de linfócitos, porém, sem diferença significativa. O período pré-patente médio foi de dois dias em todos os animais. O período de incubação médio nos bovinos que adoeceram foi de 25,5 dias e estes morreram em média 63 dias após inoculação da estirpe. Os achados de necropsia caracterizaram-se por carcaça pálida, ascite, aumento de volume do fígado, vesícula biliar distendida e bile espessa. À histopatologia, verificou-se infiltração de macrófagos e linfócitos em diversos órgãos, dilatação dos sinusoides hepáticos e necrose do intestino grosso. A snPCR para o gene msp5, revelou 100% dos animais positivos em pelo menos um momento de avaliação. E na snPCR para o gene alvo msp1α também verificou-se infecção em todos os animais em pelo menos uma amostra avaliada. Entretanto, o sequenciamento revelou apenas cinco animais, incluindo os bovinos que morreram, com similaridade das sequências de aminoácidos com estirpe AmRio 2 de A. marginale. Conclui-se que os bovinos esplenectomizados morreram em virtude de anaplasmose provocada pela estirpe inoculada e os bubalinos foram mais resistentes em comparação aos bovinos. Finalmente, os búfalos podem ser uma alternativa à criação de bovinos em áreas com alta ocorrência de casos clínicos de anaplasmose.(AU)
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Animais , Bovinos , Anaplasma marginale/isolamento & purificação , Anaplasmose/patologia , Esplenectomia/veterinária , Reação em Cadeia da Polimerase/veterináriaResumo
The study aimed to evaluate and compare the clinical, laboratory and pathological aspects of buffalo and bovine experimentally infected with AmRio 2 strain of Anaplasma marginale. Four Murrah buffaloes and four crossbred cattle were used in the experiment, which two animals of each species were splenectomized. Strain AmRio 2 of A. marginale was inoculated in all experimental animals. Clinical exams, Packed Cell Volume (PCV), blood counts, blood smears, rickettsemia, necropsy and histopathology were performed in all cases. Semi-Nested-PCR (snPCR) for the msp5 and snPCR for the msp1α target gene for identification of A. marginale in blood samples from animals was done. From positive samples for msp1α snPCR, samples were analyzed for the amino acid sequences of this gene. Two splenectomized cattle presented apathy, pale mucous membranes, jaundice, hyperthermia, and severe anemia. The remaining experimental animals did not show clinical signs. The rickettsemia in all animals was less than 1%. The mean PCV of the splenectomized cattle was below 20% at two-time points after infection. On the blood count, the main changes were observed in splenectomized calves and were characterized by a decrease in red blood cells, hemoglobin, PCV and platelets (p <0.05). All animals presented leukocyte elevation by increased lymphocytes, however, with no significant difference. The average prepatent period was two days in all the animals. The average incubation period in cattle that became ill was 25.5 days, and death occurred, on average, 63 days after inoculation of the strain. The necropsy findings were characterized by pale carcass, ascites, enlarged liver, distended gallbladder, and thick bile. Histopathological findings included infiltration of macrophages and lymphocytes in various organs, hepatic sinusoidal dilatation, and necrosis of the large intestine. In snPCR for the msp5 gene, 100% of the animals were positive in at least one evaluation. And in the snPCR for the infection of the msp1α target gene was also found in all animals in at least one sample evaluated. However, sequencing revealed only five animals, including the bovine which died, with a similarity of the amino acid sequences with AmRio 2 strain of A. marginale. It is concluded that the splenectomized cattle died due to anaplasmosis caused by the inoculated strain and the buffalo were more resistant compared to cattle. Buffaloes can be an alternative to cattle rearing in areas with a high occurrence of clinical cases of anaplasmosis.(AU)
O estudo teve como objetivo avaliar e comparar os aspectos clínicos, laboratoriais e patológicos de búfalos e bovinos infectados experimentalmente com estirpe AmRio 2 de Anaplasma marginale. Para isso, foram utilizados quatro bubalinos Murrah e quatro bovinos mestiços, sendo dois animais de cada espécie, esplenectomizados. Estirpe AmRio 2 de A. marginale foi inoculada em todos os animais. Foram realizados exames clínicos, hematócrito, hemograma, esfregaço sanguíneo com avaliação de riquetsemia, necropsia e histopatologia, além de, Semi-Nested-PCR (snPCR) para o gene alvo msp5 e snPCR para o gene alvo msp1α para identificação de A. marginale nas amostras de sangue dos ruminantes. A partir das amostras positivas na snPCR msp1α, foram selecionadas amostras para análise das sequências de aminoácidos deste gene. Dois bovinos esplenectomizados apresentaram apatia, mucosas pálidas, icterícia, hipertermia e anemia severa. O restante dos animais não apresentou sintomatologia clínica. A riquetsemia em todos os animais foi menor que 1%. A média do hematócrito dos bovinos esplenectomizados esteve abaixo de 20% em dois momentos após infecção. Ao hemograma, as principais alterações observadas foram nos bovinos esplenectomizados e caracterizaram-se por redução de hemácias, hemoglobina, hematócrito e plaquetas (p<0,05). Todos os animais apresentaram elevação de leucócitos por aumento de linfócitos, porém, sem diferença significativa. O período pré-patente médio foi de dois dias em todos os animais. O período de incubação médio nos bovinos que adoeceram foi de 25,5 dias e estes morreram em média 63 dias após inoculação da estirpe. Os achados de necropsia caracterizaram-se por carcaça pálida, ascite, aumento de volume do fígado, vesícula biliar distendida e bile espessa. À histopatologia, verificou-se infiltração de macrófagos e linfócitos em diversos órgãos, dilatação dos sinusoides hepáticos e necrose do intestino grosso. A snPCR para o gene msp5, revelou 100% dos animais positivos em pelo menos um momento de avaliação. E na snPCR para o gene alvo msp1α também verificou-se infecção em todos os animais em pelo menos uma amostra avaliada. Entretanto, o sequenciamento revelou apenas cinco animais, incluindo os bovinos que morreram, com similaridade das sequências de aminoácidos com estirpe AmRio 2 de A. marginale. Conclui-se que os bovinos esplenectomizados morreram em virtude de anaplasmose provocada pela estirpe inoculada e os bubalinos foram mais resistentes em comparação aos bovinos. Finalmente, os búfalos podem ser uma alternativa à criação de bovinos em áreas com alta ocorrência de casos clínicos de anaplasmose.(AU)
Assuntos
Animais , Bovinos , Anaplasma marginale/isolamento & purificação , Anaplasmose/patologia , Esplenectomia/veterinária , Reação em Cadeia da Polimerase/veterináriaResumo
ABSTRACT: The study aimed to evaluate and compare the clinical, laboratory and pathological aspects of buffalo and bovine experimentally infected with AmRio 2 strain of Anaplasma marginale. Four Murrah buffaloes and four crossbred cattle were used in the experiment, which two animals of each species were splenectomized. Strain AmRio 2 of A. marginale was inoculated in all experimental animals. Clinical exams, Packed Cell Volume (PCV), blood counts, blood smears, rickettsemia, necropsy and histopathology were performed in all cases. Semi-Nested-PCR (snPCR) for the msp5 and snPCR for the msp1 target gene for identification of A. marginale in blood samples from animals was done. From positive samples for msp1 snPCR, samples were analyzed for the amino acid sequences of this gene. Two splenectomized cattle presented apathy, pale mucous membranes, jaundice, hyperthermia, and severe anemia. The remaining experimental animals did not show clinical signs. The rickettsemia in all animals was less than 1%. The mean PCV of the splenectomized cattle was below 20% at two-time points after infection. On the blood count, the main changes were observed in splenectomized calves and were characterized by a decrease in red blood cells, hemoglobin, PCV and platelets (p 0.05). All animals presented leukocyte elevation by increased lymphocytes, however, with no significant difference. The average prepatent period was two days in all the animals. The average incubation period in cattle that became ill was 25.5 days, and death occurred, on average, 63 days after inoculation of the strain. The necropsy findings were characterized by pale carcass, ascites, enlarged liver, distended gallbladder, and thick bile. Histopathological findings included infiltration of macrophages and lymphocytes in various organs, hepatic sinusoidal dilatation, and necrosis of the large intestine. In snPCR for the msp5 gene, 100% of the animals were positive in at least one evaluation. And in the snPCR for the infection of the msp1 target gene was also found in all animals in at least one sample evaluated. However, sequencing revealed only five animals, including the bovine which died, with a similarity of the amino acid sequences with AmRio 2 strain of A. marginale. It is concluded that the splenectomized cattle died due to anaplasmosis caused by the inoculated strain and the buffalo were more resistant compared to cattle. Buffaloes can be an alternative to cattle rearing in areas with a high occurrence of clinical cases of anaplasmosis.
RESUMO: O estudo teve como objetivo avaliar e comparar os aspectos clínicos, laboratoriais e patológicos de búfalos e bovinos infectados experimentalmente com estirpe AmRio 2 de Anaplasma marginale. Para isso, foram utilizados quatro bubalinos Murrah e quatro bovinos mestiços, sendo dois animais de cada espécie, esplenectomizados. Estirpe AmRio 2 de A. marginale foi inoculada em todos os animais. Foram realizados exames clínicos, hematócrito, hemograma, esfregaço sanguíneo com avaliação de riquetsemia, necropsia e histopatologia, além de, Semi-Nested-PCR (snPCR) para o gene alvo msp5 e snPCR para o gene alvo msp1 para identificação de A. marginale nas amostras de sangue dos ruminantes. A partir das amostras positivas na snPCR msp1, foram selecionadas amostras para análise das sequências de aminoácidos deste gene. Dois bovinos esplenectomizados apresentaram apatia, mucosas pálidas, icterícia, hipertermia e anemia severa. O restante dos animais não apresentou sintomatologia clínica. A riquetsemia em todos os animais foi menor que 1%. A média do hematócrito dos bovinos esplenectomizados esteve abaixo de 20% em dois momentos após infecção. Ao hemograma, as principais alterações observadas foram nos bovinos esplenectomizados e caracterizaram-se por redução de hemácias, hemoglobina, hematócrito e plaquetas (p 0,05). Todos os animais apresentaram elevação de leucócitos por aumento de linfócitos, porém, sem diferença significativa. O período pré-patente médio foi de dois dias em todos os animais. O período de incubação médio nos bovinos que adoeceram foi de 25,5 dias e estes morreram em média 63 dias após inoculação da estirpe. Os achados de necropsia caracterizaram-se por carcaça pálida, ascite, aumento de volume do fígado, vesícula biliar distendida e bile espessa. À histopatologia, verificou-se infiltração de macrófagos e linfócitos em diversos órgãos, dilatação dos sinusoides hepáticos e necrose do intestino grosso. A snPCR para o gene msp5, revelou 100% dos animais positivos em pelo menos um momento de avaliação. E na snPCR para o gene alvo msp1 também verificou-se infecção em todos os animais em pelo menos uma amostra avaliada. Entretanto, o sequenciamento revelou apenas cinco animais, incluindo os bovinos que morreram, com similaridade das sequências de aminoácidos com estirpe AmRio 2 de A. marginale. Conclui-se que os bovinos esplenectomizados morreram em virtude de anaplasmose provocada pela estirpe inoculada e os bubalinos foram mais resistentes em comparação aos bovinos. Finalmente, os búfalos podem ser uma alternativa à criação de bovinos em áreas com alta ocorrência de casos clínicos de anaplasmose.
Resumo
A anaplasmose bovina é uma das principais causas de perdas produtivas e mortes no Rio Grande do Sul em rebanhos bovinos. O Anaplasma marginale é o principal agente causador da enfermidade e provoca hipertermia, anemia, prostração, abortos e perdas produtivas nos bovinos acometidos. Tendo em vista o controle deste hemoparasita em uma propriedade leiteira localizada no município de Eldorado do Sul no Rio Grande do Sul, na qual a incidência da doença era alta, 471 animais foram imunizados com Anaplasma centrale na busca de desenvolvimento cruzado para Anaplasma marginale. No experimento foi verificado que a incidência que normalmente era acima de 30% na propriedade passou para níveis inferiores a 5%. No entanto, foram verificados abortos decorrentes da imunização, principalmente nos animais que possuíam menos de 90 dias de prenhes. Já o número de mortes globais na fazenda caiu consideravelmente tendo em vista que a principal causa de morte era a anaplasmose bovina. Dos animais inoculados com A. centrale em torno de 15% apresentaram sintomatologia clínica da enfermidade e precisaram ser tratados com oxitetraciclina no período entre 15 e 30 dias após a imunização. O custo com tratamento empregado na propriedade posterior à imunização caiu em torno de 85% o que provocou impacto significativo economicamente na propriedade.(AU)
Bovine anaplasmosis is a major cause of production losses and deaths in Rio Grande do Sul cattle herds. Anaplasma sp. is the main causative agent of cattle disease. It causes hyperthermia, anemia, prostration, abortions and reduces milk production in affected animals. In order to control this hemoparasite on a dairy farm located in the municipality of Eldorado do Sul in Rio Grande do Sul, where the disease incidence was high, 471 animals were immunized with Anaplasma centrale in the search for cross-protectiv immunity for Anaplasma marginale. The property anaplasmosis incidence, which usually was above 30%, became 5% after the immunization. However, abortions were observed resulting from innoculaition, especially in animals that had less than 90 days of pregnancy. The global number of deaths on the farm dropped considerably given that the main cause of death was the bovine anaplasmosis. 15% of animals inoculated with A. centrale showed clinical symptoms of the disease between 15 and 30 days after immunization and had to be treated with oxytetracycline. The amount of money spent with anaplasmosis treatment decay 85% after the immunization, which caused significant economic impact on the property.(AU)