Resumo
Yersinia enterocolitica is a bacterium with zoonotic potential and there are no previous records of this bacteria being isolated from aborted foals. This report aims to describe a case of sepsis due to Y. enterocolitica in a seven month old aborted equine. The fequinoetus was submitted to necropsy and samples of all the organs were collected for the histological exam. Samples of liver, lung, placenta, and stomach contents were collected for bacterial culture. Macroscopically, the liver was enlarged with yellowish heterogeneous color, heart with pale myocardial areas; lungs not collapsed, heavy and shiny, thickened umbilical cord covered with fibrin and pus. Histopathologically, there was moderate multifocal necrosuppurative myocarditis and thrombosis, moderate diffuse suppurative bronchopneumonia, mild multifocal fibrinonecrotic hepatitis, and moderate diffuse necrosuppurative omphalitis with intralesional bacterial myriads and thrombosis. Mild multifocal suppurative placentitis, nephritis, myositis, cystitis, and dermatitis were also observed, in addition to mild diffuse lymphoid rarefaction. The microbiological evaluation identified Y. enterocolitica in the liver, lung, and stomach fluid. This is the first report of sepsis due to Y. enterocolitica causing an abortion in a horse. This bacterium has zoonotic importance; therefore, it should be investigated in abortion in this species, serving as a differential diagnosis in reproductive disorders.(AU)
Yersinia enterocolitica é uma bactéria com potencial zoonótico, e não há informações desse agente como causa de abortamento em equinos. O objetivo deste relato é descrever um caso de sepse por Y. enterocolitica em um feto equino abortado aos sete meses. O feto foi submetido à necropsia, e amostras de todos os órgãos foram processadas para histopatologia. Para microbiologia, foram coletadas amostras de fígado, pulmão, placenta e conteúdo estomacal. Macroscopicamente, observou-se fígado aumentado com coloração amarelada heterogênea; coração com áreas pálidas no miocárdio; pulmões não colabados, pesados e brilhantes; e cordão umbilical espessado e recoberto por fibrina e pus. Na análise histopatológica, havia miocardite necrossupurativa multifocal moderada e trombose, broncopneumonia supurativa difusa moderada, hepatite fibrinonecrótica multifocal discreta e onfalite necrossupurativa difusa moderada com miríades bacterianas intralesionais e trombose. Observou-se também placentite, nefrite, miosite, cistite e dermatite supurativa multifocal discreta, além de rarefação linfoide difusa discreta. A avaliação microbiológica identificou Y. enterocolitica no fígado, no pulmão e no líquido estomacal. Este é o primeiro relato de sepse por Y. enterocolitica causando abortamento na espécie equina. Essa bactéria tem importância zoonótica, portanto deve ser investigada em casos de abortamento nessa espécie, servindo como diagnóstico diferencial em tal distúrbio reprodutivo.(AU)
Assuntos
Animais , Yersinia enterocolitica/isolamento & purificação , Yersiniose/veterinária , Sepse/embriologia , Aborto Animal/etiologia , Cavalos/embriologia , Infecções Bacterianas/veterináriaResumo
Proliferative enteropathy (PE), also known as ileitis, is a disease caused by the bacterium Lawsonia intracellularis. This disease is characterized by diarrhea and ill-thrift. The aim of this study is to describe a PE outbreak in rabbits that occurred in Southern Brazil. The farm had 700 rabbits at the time the outbreak occurred. The clinical signs were severe diarrhea, dehydration, and apathy. Necropsy was performed in 33 rabbits, and the most evident macroscopic findings were thickening of the intestinal wall, intestinal loops distended by large amounts of gas, and liquid feces. Histopathological examination demonstrated a marked proliferation of enterocytes in intestinal crypts, decrease number of goblet cells, and crypts microabscesses. Silver impregnation technique (Warthin-Starry) demonstrated in intestinal crypts inside of enterocytes cytoplasm, curved vibrioid bacteria compatible with L. intracellularis. Immunohistochemical staining with anti-L. intracellularis confirmed the agent presence. PCR was performed and L. intracellularis was confirmed as the etiological agent.
A enteropatia proliferativa (EP), também conhecida como ileíte, é uma doença causada pela bactéria Lawsonia intracellularis, que é caracterizada por diarreia com redução do ganho de peso. O objetivo deste trabalho é descrever um surto de EP em coelhos na região sul do Brasil. A propriedade possuía 700 coelhos, durante o período do surto. O quadro clínico caracterizava-se por diarreia severa, desidratação e apatia. Realizou-se o exame de necropsia em 33 coelhos, e as alterações macroscópicas mais evidentes eram: alças intestinais acentuadamente distendidas por gás e fezes líquidas, além de serosa rugosa e parede intestinal moderadamente espessada. Na análise histopatológica do intestino delgado visualizou se marcada hiperplasia de enterócitos de criptas, moderada diminuição do número de células caliciformes e microabscessos de criptas. A etiologia das lesões foi confirmada pela técnica de impregnação pela prata (Warthin-Starry), evidenciando bactérias vibrioides compatíveis com L. intracellularis no ápicede enterócitos das criptas intestinais. Ainda, foi obtida imunomarcação positiva de enterócitos de criptas na imuno-histoquímica com anticorpo anti-L. intracellularis e a PCR positiva em amostras de intestino.
Assuntos
Animais , Coelhos , Coelhos , Enteropatias/epidemiologia , Enteropatias/mortalidade , Enteropatias/patologia , Enteropatias/veterinária , Ileíte/diagnóstico , Ileíte/veterináriaResumo
Proliferative enteropathy (PE), also known as ileitis, is a disease caused by the bacterium Lawsonia intracellularis. This disease is characterized by diarrhea and ill-thrift. The aim of this study is to describe a PE outbreak in rabbits that occurred in Southern Brazil. The farm had 700 rabbits at the time the outbreak occurred. The clinical signs were severe diarrhea, dehydration, and apathy. Necropsy was performed in 33 rabbits, and the most evident macroscopic findings were thickening of the intestinal wall, intestinal loops distended by large amounts of gas, and liquid feces. Histopathological examination demonstrated a marked proliferation of enterocytes in intestinal crypts, decrease number of goblet cells, and crypts microabscesses. Silver impregnation technique (Warthin-Starry) demonstrated in intestinal crypts inside of enterocytes cytoplasm, curved vibrioid bacteria compatible with L. intracellularis. Immunohistochemical staining with anti-L. intracellularis confirmed the agent presence. PCR was performed and L. intracellularis was confirmed as the etiological agent.(AU)
A enteropatia proliferativa (EP), também conhecida como ileíte, é uma doença causada pela bactéria Lawsonia intracellularis, que é caracterizada por diarreia com redução do ganho de peso. O objetivo deste trabalho é descrever um surto de EP em coelhos na região sul do Brasil. A propriedade possuía 700 coelhos, durante o período do surto. O quadro clínico caracterizava-se por diarreia severa, desidratação e apatia. Realizou-se o exame de necropsia em 33 coelhos, e as alterações macroscópicas mais evidentes eram: alças intestinais acentuadamente distendidas por gás e fezes líquidas, além de serosa rugosa e parede intestinal moderadamente espessada. Na análise histopatológica do intestino delgado visualizou se marcada hiperplasia de enterócitos de criptas, moderada diminuição do número de células caliciformes e microabscessos de criptas. A etiologia das lesões foi confirmada pela técnica de impregnação pela prata (Warthin-Starry), evidenciando bactérias vibrioides compatíveis com L. intracellularis no ápicede enterócitos das criptas intestinais. Ainda, foi obtida imunomarcação positiva de enterócitos de criptas na imuno-histoquímica com anticorpo anti-L. intracellularis e a PCR positiva em amostras de intestino.(AU)
Assuntos
Animais , Coelhos , Coelhos , Ileíte/diagnóstico , Ileíte/veterinária , Enteropatias/epidemiologia , Enteropatias/mortalidade , Enteropatias/patologia , Enteropatias/veterináriaResumo
Trueperella pyogenes é uma bactéria oportunista que causa mastite, metrite e abortos esporádicos em bovinos. Este trabalho relata um caso incomum de abort em uma vaca por Trueperella pyogenes. Um feto bovino, fêmea, mestiço Brahman, com oito meses de gestação, foi encaminhado para exame anatomopatológico e exames complementares. Na necropsia, evidenciou-se grande quantidade de líquido serossanguinolento e moderada quantidade de fibrina recobrindo a pleura visceral e o saco pericárdico. Os pulmões estavam difusamente avermelhados e consolidados, com áreas firmes esbranquiçadas ao corte de não mais de 1cm. No exame histopatológico, observou-se pneumonia necrossupurativa, pleurite fibrinopurulenta e placentite purulenta. No exame microbiológico, isolou-se T. pyogenes nas amostras de fígado, pulmões, conteúdo abomasal do feto e placenta. O feto foi negativo na PCR para Neospora caninum, Toxoplasma gondii e vírus da diarreia viral bovina (BVDV). Trueperella pyogenes geralmente causa broncopneumonia supurativa com formação de abscessos, porém, no presente feto abortado, observaram-se lesões macro e microscópicas comumente descritas em casos de aborto por Brucella abortus. Este estudo constata, então, a importância dessa bactéria como causa de aborto em bovinos, com lesões semelhantes à brucelose, destacando sua relevância dentro das causas de aborto em bovinos e o potencial zoonótico pouco explorado.(AU)
Trueperella pyogenes is an opportunistic bacterium associated with mastitis, metritis and occasional abortion in bovines. Here we report an uncommon case of abortion by T. pyogenes in a cow. An aborted female Brahman bovine fetus, at 8 months of gestational age was submitted for anatomopathological examination and complementary diagnostic tests. Macroscopic findings at necropsy included large amounts of free serum-blood fluid and moderate fibrin deposition covering both the visceral pleura and pericardial sack. The lungs were diffusely reddened and markedly consolidated, showing widespread smaller than 1cm, hard, white nodules. Necrosuppurative pneumonia, fibrinopurulent pleuritis, and purulent placentitis were the main histopathologic alterations observed. Trueperella pyogenes was isolated from liver, lungs, abomasa contents and placental samples. All tissue samples were PCR-negative for Neospora caninum, Toxoplasma gondii and bovine viral diarrhea virus (BVDV). Although T. pyogenes is often involved in suppurative bronchopneumonia and abscesses formation, macro and microscopic lesions in the present report were compatible with those commonly attributed to Brucella abortus fetal infections. Trueperella pyogenes is an important bovine pathogen with a neglected zoonotic potential being responsible for infections that can mimic other diseases' typical presentations.(AU)
Assuntos
Animais , Feminino , Bovinos , Infecções Bacterianas/complicações , Infecções Bacterianas/veterinária , Actinomycetaceae/isolamento & purificação , Aborto Animal/etiologiaResumo
Trueperella pyogenes é uma bactéria oportunista que causa mastite, metrite e abortos esporádicos em bovinos. Este trabalho relata um caso incomum de abort em uma vaca por Trueperella pyogenes. Um feto bovino, fêmea, mestiço Brahman, com oito meses de gestação, foi encaminhado para exame anatomopatológico e exames complementares. Na necropsia, evidenciou-se grande quantidade de líquido serossanguinolento e moderada quantidade de fibrina recobrindo a pleura visceral e o saco pericárdico. Os pulmões estavam difusamente avermelhados e consolidados, com áreas firmes esbranquiçadas ao corte de não mais de 1cm. No exame histopatológico, observou-se pneumonia necrossupurativa, pleurite fibrinopurulenta e placentite purulenta. No exame microbiológico, isolou-se T. pyogenes nas amostras de fígado, pulmões, conteúdo abomasal do feto e placenta. O feto foi negativo na PCR para Neospora caninum, Toxoplasma gondii e vírus da diarreia viral bovina (BVDV). Trueperella pyogenes geralmente causa broncopneumonia supurativa com formação de abscessos, porém, no presente feto abortado, observaram-se lesões macro e microscópicas comumente descritas em casos de aborto por Brucella abortus. Este estudo constata, então, a importância dessa bactéria como causa de aborto em bovinos, com lesões semelhantes à brucelose, destacando sua relevância dentro das causas de aborto em bovinos e o potencial zoonótico pouco explorado.(AU)
Trueperella pyogenes is an opportunistic bacterium associated with mastitis, metritis and occasional abortion in bovines. Here we report an uncommon case of abortion by T. pyogenes in a cow. An aborted female Brahman bovine fetus, at 8 months of gestational age was submitted for anatomopathological examination and complementary diagnostic tests. Macroscopic findings at necropsy included large amounts of free serum-blood fluid and moderate fibrin deposition covering both the visceral pleura and pericardial sack. The lungs were diffusely reddened and markedly consolidated, showing widespread smaller than 1cm, hard, white nodules. Necrosuppurative pneumonia, fibrinopurulent pleuritis, and purulent placentitis were the main histopathologic alterations observed. Trueperella pyogenes was isolated from liver, lungs, abomasa contents and placental samples. All tissue samples were PCR-negative for Neospora caninum, Toxoplasma gondii and bovine viral diarrhea virus (BVDV). Although T. pyogenes is often involved in suppurative bronchopneumonia and abscesses formation, macro and microscopic lesions in the present report were compatible with those commonly attributed to Brucella abortus fetal infections. Trueperella pyogenes is an important bovine pathogen with a neglected zoonotic potential being responsible for infections that can mimic other diseases' typical presentations.(AU)
Assuntos
Animais , Feminino , Bovinos , Infecções Bacterianas/complicações , Infecções Bacterianas/veterinária , Actinomycetaceae/isolamento & purificação , Aborto Animal/etiologiaResumo
A colibacilose é a principal causa infecciosa de condenação total de carcaça em frangos de corte no sul do Brasil. Esse trabalho tem por objetivo determinar o grau de concordância entre a condenação total por colibacilose de frangos de corte abatidos em estabelecimento sob Serviço de Inspeção Federal (SIF) com o diagnóstico anatomopatológico e bacteriológico. O estudo foi realizado com 45 frangos de corte condenados totalmente por colibacilose (caso) e seus respectivos 45 controles (frangos sem lesões). Em todos os frangos condenados pelo SIF havia lesões macroscópicas e, nos controles não se observou. Através do teste Kappa-Cohen´s essas duas variáveis apresentaram concordância quase perfeita. As aves condenadas apresentaram lesões em fígado (27/45); em fígado e sacos aéreos (11/45); em fígado e coração (2/45); fígado, sacos aéreos e coração (2/45); fígado, sacos aéreos e oviduto (1/45); fígado, sacos aéreos, coração e tecido subcutâneo (1/45); e fígado, sacos aéreos, oviduto e baço (1/45). Observou-se concordância quase perfeita entre condenação e lesão hepática. Histologicamente, em 41 casos e 12 controles observaram-se lesões, sendo os mais frequentes hepatite necrosante aleatória, bronquite fibrino-heterofílica, pericardite aguda e traqueíte linfoplasmocitária. Nas aves com hepatite identificou-se E. coli, Enterococcus sp. e Streptococcus sp. (10/38) e, nas aves com bronquite ou broncopneumonia isolou-se Escherichia coli e Staphylococcus coagulase positiva (9/14). O PCR em tempo real e a imuno-histoquímica para Mycoplasma gallisepticum e M. synoviae foram negativos. Nos casos de condenação total por colibacilose o fígado foi o principal órgão acometido, portanto, o critério de condenação deveria ser revisto, sugerindo condenação por hepatite nesses casos, já que outras bactérias podem causar hepatite, como foi demonstrado nesse estudo.(AU)
Colibacillosis is the main infectious cause of total carcass condemnation in broilers in southern Brazil. This study aims to determine the degree of agreement between the total carcass condemnation for colibacillosis in broilers slaughtered in establishments under Federal Inspection Service (SIF) with the pathological and bacteriological diagnosis. The study was conducted with 45 broilers totally condemned by colibacillosis (case) and theirs 45 respective controls (chickens without lesions). All broilers condemned had gross lesions and the controls had not. The Kappa-Cohen's test showed that these two variables had almost perfect agreement. Broilers condemned showed lesions in liver (27/45); liver and air sacs (11/45); liver and heart (2/45); liver, heart and air sacs (2/45); liver, air sacs and oviduct (1/45); liver, air sacs, heart and subcutaneous (1/45); and liver, air sacs, oviduct and spleen (1/45). There is almost perfect agreement between carcass condemnation and liver damage. Histologically, in 41 cases and 12 controls were observed lesions, the most frequent diagnoses were random necrotizing hepatitis, fibrinous-heterophilic bronchitis, acute pericarditis and lymphoplasmacytic tracheitis. In hepatitis cases was isolated Escherichia coli, Enterococcus sp. and Streptococcus sp. (10/38) and in bronchitis or bronchopneumonia E. coli and coagulase positive Staphylococcus (9/14). The polymerse chain reaction (PCR) and immunohistochemistry (IHC) tests for Mycoplasma gallisepticum and M. synoviae were negative. In cases of total carcass condemnation by Colibacillosis the liver was the main organ affected. Therefore, the condemnation criteria should be revised, suggesting conviction for hepatitis in these cases, because other bacteria can cause hepatitis, as demonstrated in this study.(AU)
Assuntos
Animais , Galinhas/microbiologia , Enterobacteriaceae/isolamento & purificação , Infecções por Enterobacteriaceae/veterinária , Inspeção Sanitária , Contaminação de Alimentos/legislação & jurisprudência , Reação em Cadeia da Polimerase/veterinária , Matadouros/legislação & jurisprudência , Programa Nacional de Inspeção de AlimentosResumo
A colibacilose é a principal causa infecciosa de condenação total de carcaça em frangos de corte no sul do Brasil. Esse trabalho tem por objetivo determinar o grau de concordância entre a condenação total por colibacilose de frangos de corte abatidos em estabelecimento sob Serviço de Inspeção Federal (SIF) com o diagnóstico anatomopatológico e bacteriológico. O estudo foi realizado com 45 frangos de corte condenados totalmente por colibacilose (caso) e seus respectivos 45 controles (frangos sem lesões). Em todos os frangos condenados pelo SIF havia lesões macroscópicas e, nos controles não se observou. Através do teste Kappa-Cohen´s essas duas variáveis apresentaram concordância quase perfeita. As aves condenadas apresentaram lesões em fígado (27/45); em fígado e sacos aéreos (11/45); em fígado e coração (2/45); fígado, sacos aéreos e coração (2/45); fígado, sacos aéreos e oviduto (1/45); fígado, sacos aéreos, coração e tecido subcutâneo (1/45); e fígado, sacos aéreos, oviduto e baço (1/45). Observou-se concordância quase perfeita entre condenação e lesão hepática. Histologicamente, em 41 casos e 12 controles observaram-se lesões, sendo os mais frequentes hepatite necrosante aleatória, bronquite fibrino-heterofílica, pericardite aguda e traqueíte linfoplasmocitária. Nas aves com hepatite identificou-se E. coli, Enterococcus sp. e Streptococcus sp. (10/38) e, nas aves com bronquite ou broncopneumonia isolou-se Escherichia coli e Staphylococcus coagulase positiva (9/14). O PCR em tempo real e a imuno-histoquímica para Mycoplasma gallisepticum e M. synoviae foram negativos. Nos casos de condenação total por colibacilose o fígado foi o principal órgão acometido, portanto, o critério de condenação deveria ser revisto, sugerindo condenação por hepatite nesses casos, já que outras bactérias podem causar hepatite, como foi demonstrado nesse estudo.(AU)
Colibacillosis is the main infectious cause of total carcass condemnation in broilers in southern Brazil. This study aims to determine the degree of agreement between the total carcass condemnation for colibacillosis in broilers slaughtered in establishments under Federal Inspection Service (SIF) with the pathological and bacteriological diagnosis. The study was conducted with 45 broilers totally condemned by colibacillosis (case) and theirs 45 respective controls (chickens without lesions). All broilers condemned had gross lesions and the controls had not. The Kappa-Cohen's test showed that these two variables had almost perfect agreement. Broilers condemned showed lesions in liver (27/45); liver and air sacs (11/45); liver and heart (2/45); liver, heart and air sacs (2/45); liver, air sacs and oviduct (1/45); liver, air sacs, heart and subcutaneous (1/45); and liver, air sacs, oviduct and spleen (1/45). There is almost perfect agreement between carcass condemnation and liver damage. Histologically, in 41 cases and 12 controls were observed lesions, the most frequent diagnoses were random necrotizing hepatitis, fibrinous-heterophilic bronchitis, acute pericarditis and lymphoplasmacytic tracheitis. In hepatitis cases was isolated Escherichia coli, Enterococcus sp. and Streptococcus sp. (10/38) and in bronchitis or bronchopneumonia E. coli and coagulase positive Staphylococcus (9/14). The polymerse chain reaction (PCR) and immunohistochemistry (IHC) tests for Mycoplasma gallisepticum and M. synoviae were negative. In cases of total carcass condemnation by Colibacillosis the liver was the main organ affected. Therefore, the condemnation criteria should be revised, suggesting conviction for hepatitis in these cases, because other bacteria can cause hepatitis, as demonstrated in this study.(AU)
Assuntos
Animais , Galinhas/microbiologia , Enterobacteriaceae/isolamento & purificação , Infecções por Enterobacteriaceae/veterinária , Inspeção Sanitária , Contaminação de Alimentos/legislação & jurisprudência , Reação em Cadeia da Polimerase/veterinária , Matadouros/legislação & jurisprudência , Programa Nacional de Inspeção de AlimentosResumo
ABSTRACT: Colibacillosis is the main infectious cause of total carcass condemnation in broilers in southern Brazil. This study aims to determine the degree of agreement between the total carcass condemnation for colibacillosis in broilers slaughtered in establishments under Federal Inspection Service (SIF) with the pathological and bacteriological diagnosis. The study was conducted with 45 broilers totally condemned by colibacillosis (case) and theirs 45 respective controls (chickens without lesions). All broilers condemned had gross lesions and the controls had not. The Kappa-Cohens test showed that these two variables had almost perfect agreement. Broilers condemned showed lesions in liver (27/45); liver and air sacs (11/45); liver and heart (2/45); liver, heart and air sacs (2/45); liver, air sacs and oviduct (1/45); liver, air sacs, heart and subcutaneous (1/45); and liver, air sacs, oviduct and spleen (1/45). There is almost perfect agreement between carcass condemnation and liver damage. Histologically, in 41 cases and 12 controls were observed lesions, the most frequent diagnoses were random necrotizing hepatitis, fibrinous-heterophilic bronchitis, acute pericarditis and lymphoplasmacytic tracheitis. In hepatitis cases was isolated Escherichia coli, Enterococcus sp. and Streptococcus sp. (10/38) and in bronchitis or bronchopneumonia E. coli and coagulase positive Staphylococcus (9/14). The polymerse chain reaction (PCR) and immunohistochemistry (IHC) tests for Mycoplasma gallisepticum and M. synoviae were negative. In cases of total carcass condemnation by Colibacillosis the liver was the main organ affected. Therefore, the condemnation criteria should be revised, suggesting conviction for hepatitis in these cases, because other bacteria can cause hepatitis, as demonstrated in this study.
RESUMO: A colibacilose é a principal causa infecciosa de condenação total de carcaça em frangos de corte no sul do Brasil. Esse trabalho tem por objetivo determinar o grau de concordância entre a condenação total por colibacilose de frangos de corte abatidos em estabelecimento sob Serviço de Inspeção Federal (SIF) com o diagnóstico anatomopatológico e bacteriológico. O estudo foi realizado com 45 frangos de corte condenados totalmente por colibacilose (caso) e seus respectivos 45 controles (frangos sem lesões). Em todos os frangos condenados pelo SIF havia lesões macroscópicas e, nos controles não se observou. Através do teste Kappa-Cohen´s essas duas variáveis apresentaram concordância quase perfeita. As aves condenadas apresentaram lesões em fígado (27/45); em fígado e sacos aéreos (11/45); em fígado e coração (2/45); fígado, sacos aéreos e coração (2/45); fígado, sacos aéreos e oviduto (1/45); fígado, sacos aéreos, coração e tecido subcutâneo (1/45); e fígado, sacos aéreos, oviduto e baço (1/45). Observou-se concordância quase perfeita entre condenação e lesão hepática. Histologicamente, em 41 casos e 12 controles observaram-se lesões, sendo os mais frequentes hepatite necrosante aleatória, bronquite fibrino-heterofílica, pericardite aguda e traqueíte linfoplasmocitária. Nas aves com hepatite identificou-se E. coli, Enterococcus sp. e Streptococcus sp. (10/38) e, nas aves com bronquite ou broncopneumonia isolou-se Escherichia coli e Staphylococcus coagulase positiva (9/14). O PCR em tempo real e a imuno-histoquímica para Mycoplasma gallisepticum e M. synoviae foram negativos. Nos casos de condenação total por colibacilose o fígado foi o principal órgão acometido, portanto, o critério de condenação deveria ser revisto, sugerindo condenação por hepatite nesses casos, já que outras bactérias podem causar hepatite, como foi demonstrado nesse estudo.
Resumo
A mastite é a principal doença que interfere na produção leiteira de ruminantes trazendo prejuízos econômicos ao produtor. O micro-organismo mais prevalente no rebanho é Staphylococcus aureus e no grupo dos coliformes destaca-se Escherichia coli, causadora frequente de mastite clínica. O tratamento, que é um dos principais desafios para o combate à doença, ocorre através da aplicação de antibióticos, que devido ao seu uso indiscriminado pode favorecer o aumento da resistência antimicrobiana e a formação de biofilmes, além de contribuir para o desenvolvimento de infecções crônicas e recidivas da doença. Dessa forma o uso de antibióticos deve ser realizado de forma criteriosa e a busca por compostos naturais, tem aumentado cada vez mais podendo contribuir para o combate de doenças causadas por micro-organismos. O objetivo do presente trabalho foi classificar a produção de biofilmes e verificar se o uso dos medicamentos enrofloxacina e gentamicina, e da benzofenona 2,24triidroxibenzofenona e o complexo 7-epiclusianona-cobre (7-epi-cu) interferem na produção e na erradicação de biofilmes produzidos por Staphylococcus aureus e Escherichia coli isolados de mastite clínica, subclínica e recidivante de caprinos. Foram utilizados no estudo 34 isolados, sendo 26 de S. aureus e oito de E. coli que foram classificados quanto à produção de biofilmes em fracos, moderados ou forte produtores, através da inoculação em microplaca de poliestireno de 96 poços medindo-se a absorvância em leitor de Elisa onde os valores de densidade óptica (D.O) e a média aritmética das duplicatas foram calculadas. Os isolados foram submetidos ao teste de concentração inibitória mínima (MIC) além de seis concentrações subinibitórias (1; 0,5; 0,25; 0,125; 0,06; 0,03×MIC) para verificar se essas concentrações induziriam a formação de biofilmes. A erradicação de biofilmes foi avaliada através de 1xMIC e 0,5xMIC por comparação com os controles. Os testes de Kolmogorov-Smirnov e de Bartlett foram utilizados para avaliar a normalidade dos erros e a homogeneidade de variâncias das médias calculadas. A comparação entre as médias foi realizada pelo teste de Tukey a 5% de probabilidade. O programa estatístico utilizado foi o Statistical Analysis System (SAS). Entre os isolados de S. aureus obtidos de mastite clínica, 83,3% (5/6) foram fortes produtores de biofilmes e 16,6% (1/6) moderados produtores. Quanto aos isolados de mastite subclínica 50% (6/12) foram fortes produtores de biofilmes, 33,3% (4/12) moderados e 16,6% (2/12) fracos produtores. Para a mastite recidivante, 12,5% (1/8) foram considerados fortes produtores, enquanto 87,5% (7/8) considerados moderados produtores de biofilme. Os maiores valores de MICs encontrados foram superiores a 250 µg/mL. Os menores valores de MIC foram observados para o antibiótico gentamicina. Para a enrofloxacina e o complexo 7-epi-cu, os valores de MIC variaram de 3,9 a 125 µg/mL. Para os isolados de E. coli, nenhum apresentou-se como forte produtor de biofilmes. Os isolados de mastite clínica 66,7% (2/3) foram moderados produtores de biofilme e 33,3% (1/3), fraco produtor. Entre os E. coli isolados de mastite subclínica, 75% (3/4) foram moderados produtores, enquanto 25% (1/4) foi fraco produtor. Os isolados de E. coli apresentaram comportamento semelhante das MICs dos antibióticos e do complexo 7-epi-cu aos isolados de S. aureus. Os resultados demonstraram que independente do tipo de mastite, os antibióticos enrofloxacina e gentamicina, assim como o complexo 7-epi-cu, induziram a formação de biofilmes nas seis concentrações subinibitórias avaliadas e não erradicarem os biofilmes em 1×MIC e 0,5×MIC. Embora gentamicina e 7 epi-cu tenham apresentado valores de MIC satisfatórios não foi possível eliminar os biofilmes formados pelos isolados, sendo necessário mais estudos, principalmente em isolados caprinos, para melhor compreensão dos mecanismos envolvidos com a persistência da mastite principalmente ligada aos biofilmes.
Mastitis is the main disease that interferes with the milk production of a herd bringing economic losses to the producer. The most prevalent microorganism in the herd is Staphylococcus aureus and in the group of coliforms, Escherichia coli is a frequent cause of clinical mastitis. The treatment, which is one of the main challenges for the fight against the disease, occurs through the application of antibiotics that due to its indiscriminate use can favor the increase of antimicrobial resistance and the formation of biofilms, besides contributing to the development of chronic infections and recurrence of pathology. Thus, the use of antimicrobials must be performed in a careful way and the search for natural compounds, such as benzophenones, has been increasing and may contribute to the control of mastitis in the herd. The objective of the present study was to classify the production of biofilms and to verify if the use of enrofloxacin and gentamicin, and benzophenone 2,2'4-trihydroxybenzophenone and 7-epiclusianone-copper complex (7-epi-cu) interfere in the production and in the eradication of biofilms produced by Staphylococcus aureus and Escherichia coli isolated from clinical, subclinical and recurrent mastitis of goats. A total of 34 isolates were used in the study, of which 26 S. aureus and eight E. coli were classified as poor, moderate or strong biofilm producer by inoculation in a 96-well polystyrene microplate, by measuring the absorbance in ELISA reader where the optical density (OD) and arithmetic mean values were calculated. Subsequently, the isolates were submitted to the minimum inhibitory concentration (MIC) test for each antimicrobial and benzophenone. In addition, six subinhibitory concentrations (1, 0.5, 0.25, 0.125, 0.06, 0.03×MIC) were used to verify if these concentrations would induce the biofilm formation. Biofilm eradication was assessed through the MIC and 0.5×MIC by comparison with controls. The Kolmogorov-Smirnov and Bartlett tests were used to evaluate the normality of the errors and the homogeneity of variances of the means. The comparison between the means was performed by the Tukey test at 5% of probability. The statistical program used was the Statistical Analysis System (SAS). Among isolates of S. aureus obtained from clinical mastitis, 83.3% (5/6) were strong biofilm producers and 16.6% (1/6) moderate producers. Concerning the isolates of subclinical mastitis, 50% (6/12) were strong producers of biofilms, 33.3% (4/12) moderate and 16.6% (2/12) weak producers. For recurrent mastitis, 12.5% (1/8) were considered as strong producers, while 87.5% (7/8) considered moderate biofilm producers. Most isolates had MICs higher than 250 g/mL. The lowest MIC values were observed for the antimicrobial gentamicin. For enrofloxacin and benzophenone 7-epi-cu, MIC values ranged from 3.9 to 125 g/mL. For the E. coli isolates, none presented as a strong producer of biofilms. Isolates of clinical mastitis 66.7% (2/3) were moderate producers of biofilm and 33.3% (1/3) weak producer. Among E. coli isolates from subclinical mastitis, 75% (3/4) were moderate producers, while 25% (1/4) was weak producer. E. coli isolates showed similar behavior of antimicrobial and benzophenone MICs to S. aureus isolates. The results showed that regardless of the type of mastitis, the antimicrobials enrofloxacin and gentamicin as well as the benzophenone 7-epi-cu induced the formation of biofilms in the six subinhibitory concentrations evaluated and did not eradicate the biofilms in 1×MIC and 0,5×MIC. Although gentamicin and 7 epi-cu had satisfactory MIC values, it was not possible to eliminate the biofilms formed by the isolates, and further studies, mainly in goat isolates, are needed to better understand the mechanisms involved in the persistence of mastitis mainly related to biofilms.
Resumo
A utilização de probióticos surge como uma alternativa, para o uso de antibióticos em peixes, evitando que os mesmos adoeçam. O escopo deste trabalho foi avaliar os efeitos da alimentação adicionada de probiótico contendo Bacillus amyloliquefaciens na inflamação aguda contra A.hydrophila em tilápias-do-Nilo (Oreochromis niloticus). Para tanto foram utilizados 936 exemplares de tilápias-do-Nilo (30g), distribuídas uniformemente em 12 tanques-rede sendo 78 peixes em cada. Os peixes foram alimentados durante 60 dias com ração adicionada com a bactéria probiótica em diferentes concentrações, sendo constituídos os seguintes grupos; Grupo 1 (controle) alimentado com ração basal sem adição de probiótico: Grupo 2 (T1) suplementados com 0,75 gramas de probiótico/kg de ração; Grupo 3 (T2) suplementados com 1,5 gramas de probiótico/kg de ração; Grupo 4 (T3) suplementados com 3 gramas de probiótico/kg de ração. Para o estímulo inflamatório inoculou-se na bexiga natatória dos peixes 0,5 ml de solução salina 0,65% no grupo controle e 0,5 ml x106 de uma solução, contendo A. hydrophila inativada nos demais grupos. As coletas de sangue e exsudato inflamatório foram realizadas nos tempos de 12, 24 e 48 horas após estímulo inflamatório (HPE), para as seguintes análises: variáveis hematológicas, índices de glicose basal, atividade respiratória dos leucócitos sanguíneos (burst oxidativo), características qualitativas e quantitativas do exsudato, atividade lítica das proteases do soro e atividade de aglutinação bacteriana. Os resultados foram comparados por meio de análise de variância (ANOVA) ao nível de 5% de probabilidade e a diferença entre as médias foi comparada pelo teste de Tukey. Não foram observadas variações hematológicas significativas entre os grupos de tilápias-do-Nilo tratadas e estimuladas e o grupo controle, o mesmo pode ser observados nos índices glicêmicos e atividade respiratória de leucócitos do sangue. O exsudato inflamatório foi caracterizado pelo acúmulo predominante de granulócitos seguido de linfócitos em todos os grupos tratados e estimulados quando comparados aos grupos controles ao longo do período experimental. Na análise da atividade litica do soro dos os grupos tratados e estimulados apresentaram maior capacidade lítica (P <0,05) quando comparados aos grupos nos tempos de (12, 24 e 48 HPE). A atividade de aglutinação bacteriana não apresentou diferenças significativas entre os grupos tratados e estimulados e os grupos controles. Assim os resultados apresentados por este trabalho demonstraram que a alimentação com adição de probiótico contendo B. amyloliquefaciens nos grupos tratados e estimulados inferiu em um aumento de granulócitos e linfócitos no sangue e exsudato inflamatório, mas não interferem no desenvolvimento e crescimento das tilápias-do-Nilo criadas em tanques-rede.
The use of probiotics arises as an alternative to the use of antibiotics in fishes, preventing them from becoming sick. The scope of this study was to evaluate the effects of food with added probiotic containing Bacillus amyloliquefaciens in acute inflammation against A.hydrophila in the Nile-tilapia (Oreochromis niloticus). To that end, there were used 936 copies of the Nile-tilapia (30g), evenly distributed in 12 net tanks with 78 fish in each. The fishes were fed for 60 days with food added with the probiotic bacteria in different concentrations, with the following groups being formed; Group 1 (control) fed with basal food without added probiotic: Group 2 (T1) supplemented with 0.75 grams of probiotic / kg food; Group 3 (T2) supplemented with 1.5 grams of the probiotic / kg food; Group 4 (T3) supplemented with 3 grams of probiotic / kg food. For the inflammatory stimulus it was inoculated in the swimming bladder of fish 0.5 ml of saline solution 0.65% in the control group and 0.5 ml x106 of a solution containing inactivated A. hydrophila in the other groups. Blood collections and inflammatory exudate were held in the periods of 12, 24 and 48 hours after the inflammatory stimulus (HPE), for the following analysis: haematological variables, basal glucose levels, respiratory activity of sanguine leukocytes (oxidative burst), qualitative and quantitative characteristics of the exudate, lytic activity of serum proteases and agglutination bacterial activity. The results were compared using analysis of variance (ANOVA) at 5% probability and the difference between the means was compared by Tukey test. There were no significant hematological changes between the groups of Nile-tilapia treated and stimulated and the control group, the same thing can be observed in glycemic indeces and respiratory activity of blood leucocytes. The inflammatory exudate was characterized by the predominant accumulation of granulocytes followed by lymphocytes in all treated and stimulated groups when compared to control groups throughout the experimental period. In the analysis of serum lytic activity of treated and stimulated groups, greater lytic capacity (P <0.05) was detected when compared to groups in the periods of (12, 24 and 48 HPE). Bacterial agglutination activity showed no significant differences between the treated and stimulated groups and the control groups. Thereby, the results presented in this work demonstrated that food with added probiotic containing B. amyloliquefaciens in the treated and stimulated groups inferred in an increase of granulocytes and lymphocytes in the blood and inflammatory exudate, but do not interfere with the development and growth of Nile-tilapia raised in net tanks.