Temporal association between antibiotic use and resistance in Gram-negative bacteria / Associação temporal entre o uso de antibióticos e resistência em bactérias gram-negativas

The β-lactam/lactamase inhibitors (BLBLIs) combination drugs are considered an effective alternative to carbapenems. However, there is a growing concern that the increased use of BLBLIs may lead to increased resistance. This study determined the temporal association between the consumption of BLBLI and the antimicrobial resistance in Gram-negative bacteria. In this retrospective study, electronic data on the Gram-negative bacterial isolates, including A. baumannii, P. aeruginosa, E. coli, and K. pneumoniae from in-patients and susceptibility testing results were retrieved from the medical records of the clinical laboratory. A linear regression and cross-correlation analysis were performed on the acquired data. Increasing trends (p<0.05) in the consumption of BIBLI and carbapenem with a median use of 27.68 and 34.46 DDD/1000 PD per quarter were observed, respectively. A decreased trend (p=0.023) in the consumption of fluoroquinolones with a median use of 29.13 DDD/1000 PD per quarter was observed. The resistance rate of K. pneumoniae was synchronized with the BIBLI and carbapenem consumptions with a correlation coefficient of 0.893 (p=0.012) and 0.951 (p=0.016), respectively. The cross-correlation analysis against the consumption of BIBLI and meropenem resistant K. pneumoniae was peaked at 0-quarter lag (r=951, p=0.016). There was an increasing trend in the consumption of BLBLI and carbapenems. The increasing trend in the rates of resistance to piperacillin/tazobactam, in line with the increasing consumption of BLBLI, suggests that BLBLI has to be used with caution and cannot be directly considered as a long-term alternative to carbapenems.

Os medicamentos combinados de β-lactâmicos / inibidores da lactamase (BLBLIs) são considerados uma alternativa eficaz aos carbapenêmicos. No entanto, existe uma preocupação crescente de que o aumento do uso de BLBLIs pode levar ao aumento da resistência. Este estudo determinou a associação temporal entre o consumo de BLBLI e a resistência antimicrobiana em bactérias gram-negativas. Neste estudo retrospectivo, os dados eletrônicos sobre as bactérias gram-negativas isoladas, incluindo A. baumannii, P. aeruginosa, E. coli e K. pneumoniae de pacientes internados e os resultados dos testes de suscetibilidade foram recuperados dos registros médicos do laboratório clínico. Uma regressão linear e análise de correlação cruzada foram realizadas nos dados adquiridos. Foram observadas tendências crescentes (p < 0,05) no consumo de BIBLI e carbapenem com uma mediana de uso de 27,68 e 34,46 DDD/1000 PD por trimestre, respectivamente. Foi observada uma tendência de diminuição (p = 0,023) no consumo de fluoroquinolonas com uma mediana de uso de 29,13 DDD/1000 PD por trimestre. A taxa de resistência de K. pneumoniae foi sincronizada com os consumos de BIBLI e carbapenem com coeficiente de correlação de 0,893 (p = 0,012) e 0,951 (p = 0,016), respectivamente. A análise de correlação cruzada contra o consumo de BIBLI e K. pneumoniae resistente ao meropenem atingiu o pico no intervalo de 0 quarto (r = 951, p = 0,016). Houve uma tendência de aumento no consumo de BLBLI e carbapenêmicos. A tendência crescente nas taxas de resistência a piperacilina/tazobactam, em linha com o consumo crescente de BLBLI, sugere que BLBLI deve ser usado com cautela e não pode ser considerado diretamente como alternativa de longo prazo aos carbapenêmicos.

Temporal association between antibiotic use and resistance in Gram-negative bacteria

Abstract The -lactam/lactamase inhibitors (BLBLIs) combination drugs are considered an effective alternative to carbapenems. However, there is a growing concern that the increased use of BLBLIs may lead to increased resistance. This study determined the temporal association between the consumption of BLBLI and the antimicrobial resistance in Gram-negative bacteria. In this retrospective study, electronic data on the Gram-negative bacterial isolates, including A. baumannii, P. aeruginosa, E. coli, and K. pneumoniae from in-patients and susceptibility testing results were retrieved from the medical records of the clinical laboratory. A linear regression and cross-correlation analysis were performed on the acquired data. Increasing trends (p 0.05) in the consumption of BIBLI and carbapenem with a median use of 27.68 and 34.46 DDD/1000 PD per quarter were observed, respectively. A decreased trend (p=0.023) in the consumption of fluoroquinolones with a median use of 29.13 DDD/1000 PD per quarter was observed. The resistance rate of K. pneumoniae was synchronized with the BIBLI and carbapenem consumptions with a correlation coefficient of 0.893 (p=0.012) and 0.951 (p=0.016), respectively. The cross-correlation analysis against the consumption of BIBLI and meropenem resistant K. pneumoniae was peaked at 0-quarter lag (r=951, p=0.016). There was an increasing trend in the consumption of BLBLI and carbapenems. The increasing trend in the rates of resistance to piperacillin/tazobactam, in line with the increasing consumption of BLBLI, suggests that BLBLI has to be used with caution and cannot be directly considered as a long-term alternative to carbapenems.

Resumo Os medicamentos combinados de -lactâmicos / inibidores da lactamase (BLBLIs) são considerados uma alternativa eficaz aos carbapenêmicos. No entanto, existe uma preocupação crescente de que o aumento do uso de BLBLIs pode levar ao aumento da resistência. Este estudo determinou a associação temporal entre o consumo de BLBLI e a resistência antimicrobiana em bactérias gram-negativas. Neste estudo retrospectivo, os dados eletrônicos sobre as bactérias gram-negativas isoladas, incluindo A. baumannii, P. aeruginosa, E. coli e K. pneumoniae de pacientes internados e os resultados dos testes de suscetibilidade foram recuperados dos registros médicos do laboratório clínico. Uma regressão linear e análise de correlação cruzada foram realizadas nos dados adquiridos. Foram observadas tendências crescentes (p 0,05) no consumo de BIBLI e carbapenem com uma mediana de uso de 27,68 e 34,46 DDD/1000 PD por trimestre, respectivamente. Foi observada uma tendência de diminuição (p = 0,023) no consumo de fluoroquinolonas com uma mediana de uso de 29,13 DDD/1000 PD por trimestre. A taxa de resistência de K. pneumoniae foi sincronizada com os consumos de BIBLI e carbapenem com coeficiente de correlação de 0,893 (p = 0,012) e 0,951 (p = 0,016), respectivamente. A análise de correlação cruzada contra o consumo de BIBLI e K. pneumoniae resistente ao meropenem atingiu o pico no intervalo de 0 quarto (r = 951, p = 0,016). Houve uma tendência de aumento no consumo de BLBLI e carbapenêmicos. A tendência crescente nas taxas de resistência a piperacilina/tazobactam, em linha com o consumo crescente de BLBLI, sugere que BLBLI deve ser usado com cautela e não pode ser considerado diretamente como alternativa de longo prazo aos carbapenêmicos.

Temporal association between antibiotic use and resistance in Gram-negative bacteria / Associação temporal entre o uso de antibióticos e resistência em bactérias gram-negativas

Abstract The β-lactam/lactamase inhibitors (BLBLIs) combination drugs are considered an effective alternative to carbapenems. However, there is a growing concern that the increased use of BLBLIs may lead to increased resistance. This study determined the temporal association between the consumption of BLBLI and the antimicrobial resistance in Gram-negative bacteria. In this retrospective study, electronic data on the Gram-negative bacterial isolates, including A. baumannii, P. aeruginosa, E. coli, and K. pneumoniae from in-patients and susceptibility testing results were retrieved from the medical records of the clinical laboratory. A linear regression and cross-correlation analysis were performed on the acquired data. Increasing trends (p<0.05) in the consumption of BIBLI and carbapenem with a median use of 27.68 and 34.46 DDD/1000 PD per quarter were observed, respectively. A decreased trend (p=0.023) in the consumption of fluoroquinolones with a median use of 29.13 DDD/1000 PD per quarter was observed. The resistance rate of K. pneumoniae was synchronized with the BIBLI and carbapenem consumptions with a correlation coefficient of 0.893 (p=0.012) and 0.951 (p=0.016), respectively. The cross-correlation analysis against the consumption of BIBLI and meropenem resistant K. pneumoniae was peaked at 0-quarter lag (r=951, p=0.016). There was an increasing trend in the consumption of BLBLI and carbapenems. The increasing trend in the rates of resistance to piperacillin/tazobactam, in line with the increasing consumption of BLBLI, suggests that BLBLI has to be used with caution and cannot be directly considered as a long-term alternative to carbapenems.

Resumo Os medicamentos combinados de β-lactâmicos / inibidores da lactamase (BLBLIs) são considerados uma alternativa eficaz aos carbapenêmicos. No entanto, existe uma preocupação crescente de que o aumento do uso de BLBLIs pode levar ao aumento da resistência. Este estudo determinou a associação temporal entre o consumo de BLBLI e a resistência antimicrobiana em bactérias gram-negativas. Neste estudo retrospectivo, os dados eletrônicos sobre as bactérias gram-negativas isoladas, incluindo A. baumannii, P. aeruginosa, E. coli e K. pneumoniae de pacientes internados e os resultados dos testes de suscetibilidade foram recuperados dos registros médicos do laboratório clínico. Uma regressão linear e análise de correlação cruzada foram realizadas nos dados adquiridos. Foram observadas tendências crescentes (p < 0,05) no consumo de BIBLI e carbapenem com uma mediana de uso de 27,68 e 34,46 DDD/1000 PD por trimestre, respectivamente. Foi observada uma tendência de diminuição (p = 0,023) no consumo de fluoroquinolonas com uma mediana de uso de 29,13 DDD/1000 PD por trimestre. A taxa de resistência de K. pneumoniae foi sincronizada com os consumos de BIBLI e carbapenem com coeficiente de correlação de 0,893 (p = 0,012) e 0,951 (p = 0,016), respectivamente. A análise de correlação cruzada contra o consumo de BIBLI e K. pneumoniae resistente ao meropenem atingiu o pico no intervalo de 0 quarto (r = 951, p = 0,016). Houve uma tendência de aumento no consumo de BLBLI e carbapenêmicos. A tendência crescente nas taxas de resistência a piperacilina/tazobactam, em linha com o consumo crescente de BLBLI, sugere que BLBLI deve ser usado com cautela e não pode ser considerado diretamente como alternativa de longo prazo aos carbapenêmicos.

Temporal association between antibiotic use and resistance in Gram-negative bacteria / Associação temporal entre o uso de antibióticos e resistência em bactérias gram-negativas

The β-lactam/lactamase inhibitors (BLBLIs) combination drugs are considered an effective alternative to carbapenems. However, there is a growing concern that the increased use of BLBLIs may lead to increased resistance. This study determined the temporal association between the consumption of BLBLI and the antimicrobial resistance in Gram-negative bacteria. In this retrospective study, electronic data on the Gram-negative bacterial isolates, including A. baumannii, P. aeruginosa, E. coli, and K. pneumoniae from in-patients and susceptibility testing results were retrieved from the medical records of the clinical laboratory. A linear regression and cross-correlation analysis were performed on the acquired data. Increasing trends (p<0.05) in the consumption of BIBLI and carbapenem with a median use of 27.68 and 34.46 DDD/1000 PD per quarter were observed, respectively. A decreased trend (p=0.023) in the consumption of fluoroquinolones with a median use of 29.13 DDD/1000 PD per quarter was observed. The resistance rate of K. pneumoniae was synchronized with the BIBLI and carbapenem consumptions with a correlation coefficient of 0.893 (p=0.012) and 0.951 (p=0.016), respectively. The cross-correlation analysis against the consumption of BIBLI and meropenem resistant K. pneumoniae was peaked at 0-quarter lag (r=951, p=0.016). There was an increasing trend in the consumption of BLBLI and carbapenems. The increasing trend in the rates of resistance to piperacillin/tazobactam, in line with the increasing consumption of BLBLI, suggests that BLBLI has to be used with caution and cannot be directly considered as a long-term alternative to carbapenems.(AU)

Os medicamentos combinados de β-lactâmicos / inibidores da lactamase (BLBLIs) são considerados uma alternativa eficaz aos carbapenêmicos. No entanto, existe uma preocupação crescente de que o aumento do uso de BLBLIs pode levar ao aumento da resistência. Este estudo determinou a associação temporal entre o consumo de BLBLI e a resistência antimicrobiana em bactérias gram-negativas. Neste estudo retrospectivo, os dados eletrônicos sobre as bactérias gram-negativas isoladas, incluindo A. baumannii, P. aeruginosa, E. coli e K. pneumoniae de pacientes internados e os resultados dos testes de suscetibilidade foram recuperados dos registros médicos do laboratório clínico. Uma regressão linear e análise de correlação cruzada foram realizadas nos dados adquiridos. Foram observadas tendências crescentes (p < 0,05) no consumo de BIBLI e carbapenem com uma mediana de uso de 27,68 e 34,46 DDD/1000 PD por trimestre, respectivamente. Foi observada uma tendência de diminuição (p = 0,023) no consumo de fluoroquinolonas com uma mediana de uso de 29,13 DDD/1000 PD por trimestre. A taxa de resistência de K. pneumoniae foi sincronizada com os consumos de BIBLI e carbapenem com coeficiente de correlação de 0,893 (p = 0,012) e 0,951 (p = 0,016), respectivamente. A análise de correlação cruzada contra o consumo de BIBLI e K. pneumoniae resistente ao meropenem atingiu o pico no intervalo de 0 quarto (r = 951, p = 0,016). Houve uma tendência de aumento no consumo de BLBLI e carbapenêmicos. A tendência crescente nas taxas de resistência a piperacilina/tazobactam, em linha com o consumo crescente de BLBLI, sugere que BLBLI deve ser usado com cautela e não pode ser considerado diretamente como alternativa de longo prazo aos carbapenêmicos.(AU)

Identification of enterobacteria in free-living nonhuman primates in an urban park in the northern Region of the State of Paraná, Brazil / Identificação de enterobactérias em primatas não-humanos de vida livre em um parque urbano na Região Norte do Estado do Paraná, Brasil

Populations of nonhuman primates are often considered to be a link in the chain of emerging infectious diseases, as they are reservoirs for different zoonotic pathogens. The objective of this study was to identify the presence of bacteria from the family Enterobacteriaceae in free-living nonhuman primates. The research was carried out in an urban park located in a city in the northern region of the State of Paraná, Brazil. The animals were captured in Tomahawk-type traps and chemically restrained, being oral and rectal samples collected with sterile swabs. For bacterial isolation, the samples were seededon MacConkey agar plates and grown under anaerobic conditions. The subsequent identification was conducted using a commercial biochemical kit. Sixteen primates identified as black-capuchin-monkeys (Sapajus nigritus) were captured. Seven different enterobacterial species were identified from the oral cavity swabs: six Escherichia coli (42.9%), three Kluyvera species (21.40%), one Serratia rubidaea(7.14%), one Enterobacter aerogenes (7.14%), one Enterobacter cloacae (7.14%), one Hafnia alvei (7.14%), and one Erwinia herbicola (7.14%). Seven different species were identified from the rectal swabs: six Escherichia coli (40%), three Kluyvera species (20%), two Enterobacter aerogenes (13.32%),one Erwinia herbicola (6.67%), one Serratia rubidaea (6.67%), one Pragia fontium (6.67%), and one Edwardsiella tarda (6.67%). The results indicate that the isolated bacteria belong mainly to the human microbiota and had crossed the interspecific barrier, contaminating the nonhuman primates.(AU)

As populações de primatas não humanos frequentemente são consideradas um elo na cadeia de doenças infecciosas emergentes, por constituírem reservatórios que propiciam o surgimento de diferentes patógenos zoonóticos. O objetivo deste trabalho foi identificar a presença de bactérias da família Enterobacteriaceae em primatas não humanos de vida livre. O estudo foi realizado em um parque urbano localizado em uma cidade da região norte do Estado do Paraná. Os animais foram capturados em armadilhas do tipo Tomahawk e submetidos a contenção farmacológica para colheita de amostras da microbiota oral e retal com zaragatoas estéreis. Para o isolamento bacteriano as amostras foram semeadas pela técnica de esgotamento em placas contendo ágar MacConkey, com posterior identificação por testes bioquímicos utilizando kit comercial. Foram capturados 16 primatas não humanos identificados como Sapajus nigritus (macaco-prego). Na cavidade oral foi possível identificar sete diferentes espécies de bactérias, sendo seis (42,9%) Escherichia coli, três espécies de Kluyvera (21,40%), uma (7,14%) Serratia rubidae, uma (7,14%) Enterobacter aerogenes, uma (7,14%) Enterobacter cloacae, uma (7,14) Hafnia alvei e uma (7,14%) Erwinia herbicola. No reto foi possível identificar sete diferentes espécies de bactérias, sendo seis (40%) Escherichia coli, três espécies de Kluyvera (20%), duas (13,32%) Enterobacter aerogenes, uma (6,67%) Erwinia herbicola, uma (6,67%) Serratia rubidae, uma (6,67%) Pragla fotiun e uma (6,67%) Edwardsiella tarda. Os resultados indicam que as bactérias isoladas são pertencentes principalmente à microbiota humana, e estão ultrapassando a barreira interespecífica e contaminando os primatas.(AU)

REDUÇÃO DE BACTÉRIAS GRAM NEGATIVAS EM CAMAS DE AVIÁRIO TRATADAS COM LONA NA SUPERFÍCIE E GÁS AMÔNIA

A reutilização da cama de aviário é uma prática comum na produção de frangos de corte no Brasil. Essa prática reduz significativamente o custo de produção e contribui na preservação do meio ambiente. Contudo, esse manejo na cama pode veicular de um lote para outro microrganismos, como as Salmonellas, que são prejudiciais à saúde das aves e dos humanos. Os métodos atuais de desinfecção de cama (adição de cal, lona na superfície e enleiramento) não garantem a eliminação dos microrganismos patogênicos. O método lona na superfície tem demonstrado, perante os outros métodos, maior eficácia na redução de microrganismos patogênicos porque gera aumento do gás amônia na cama quando coberta por uma lona num período acima de 10 dias. Entretanto, a baixa quantidade de gás amônia produzido pela fermentação bacteriana não garante a desinfecção da cama. O objetivo deste trabalho foi comparar os métodos lona na superfície (T1) e lona na superfície com injeção de 0,22% de gás amônia (T2), utilizando o aplicador Aveclean®, e verificar a eficácia do sistema Aveclean® em condições de campo, avaliando a redução de bactérias Gram negativas em camas de aviário reaproveitadas. O tratamento T2 e o experimento feito a campo reduziram significativamente as bactérias Gram negativas na cama aviária, enquanto o tratamento T1 não foi eficaz no período avaliado de 48 horas. Desta forma, o aprimoramento do método lona na superfície com a injeção de 0,22% de gás amônia, utilizando o sistema Aveclean® mostrou-se eficiente no controle de microrganismos Gram negativos em camas de aviário.

The reuse of poultry litter is a common practice in the production of broilers in Brazil. This practice significantly reduces the cost of production and contributes to the preservation of the environment. However, this handling in the litter can transmit from one batch to another microorganisms, such as Salmonellas, which are harmful to the health of birds and humans. Current methods of disinfecting bedding (adding lime, shallow fermentation and windrowing) do not guarantee the elimination of pathogenic microorganisms. The tarpaulin on the surface method has shown, compared to other methods, greater effectiveness in reducing pathogenic microorganisms because it generates an increase in the ammonia gas in the bed when covered by a tarpaulin over a period of 08 days. However, the low amount of ammonia gas produced by bacterial fermentation does not guarantee the disinfection of the bed. The objective of this work was to compare the shallow fermentation (T1) and shallow fermentation with injection of 0.22% ammonia gas (T2), using the Aveclean® applicator, and to verify the effectiveness of the Aveclean® system in field conditions, evaluating the reduction of Gram negative bacteria in reused aviary beds. The T2 treatment and the field experiment significantly reduced Gram negative bacteria in the avian litter, while the T1 treatment was not effective in the evaluated period of 48 hours. In this way, the improvement of the shallow fermentation with the injection of 0.22% of ammonia gas, using the Aveclean® system proved to be efficient in the control of Gram negative microorganisms in poultry beds.

CARACTERIZAÇÃO QUÍMICA E ATIVIDADE BIOLÓGICA DE EXTRATOS ETANÓLICOS DE Curcuma longa E Bixa orellana

O objetivo deste estudo foi investigar a composição química e as atividades antimicrobiana e antioxidante dos extratos etanólicos de Curcuma longa e Bixa orellana, na busca por substituintes aos aditivos sintéticos utilizados na indústria de alimentos. Pela espectrometria de massa (GC-MS) foram identificados bisdemetoxicurcumina, demetoxicurcumina e curcumina no extrato de C. longa e prunina e naringenina no extrato de B. orellana. C. longa apresentou atividade antimicrobiana frente a Clostridium sporogenes e Staphylococcus aureus, com concentração bactericida mínima (CBM) de 25 mg/mL e 156 µg/mL, respectivamente. O extrato de B. orellana apresentou CBM de 50 mg/mL para C. sporogenes e 625 µg/mL para S. aureus. Nenhum dos extratos apresentou atividade bactericida para Escherichia coli e Salmonella Typhimurium. A atividade antioxidante dos extratos foi evidenciada pelos métodos Poder Antioxidante por Redução Férrica (FRAP) e Capacidade de Absorção do Radical Oxigênio (ORAC). O extrato de B. orellana apresentou maior atividade antioxidante pelos métodos FRAP e ORAC (277,70 e 455,17 mM trolox equivalente/g, respectivamente) do que o extrato de C. longa (129,74 e 217,98 mM trolox equivalente/g, respectivamente). Os efeitos biológicos dos extratos etanólicos de C. longa e B. orellana revelados no presente estudo apontaram seu potencial para a utilização na indústria de alimentos como uma alternativa aos aditivos sintéticos.

The objective of this study was to investigate the chemical composition and the antimicrobial and antioxidant activities of Curcuma longa and Bixa orellana ethanolic extracts, in the search for alternatives to the synthetic additives used in the food industry. Mass spectrometry (GC-MS), identified bisdemethoxycurcumin, demethoxycurcumin and curcumin in the extract of C. longa and prunin and naringenin in the extract of B. orellana. C. long showed antimicrobial activity against Clostridium sporogenes and Staphylococcus aureus, with a minimum bactericidal concentration (MBC) of 25 mg/mL and 156 g/mL, respectively. MBC of B. orellana extract was 50 mg/mL for C. sporogenes and 625 g/mL for S. aureus. None of the extracts showed bactericidal activity against Escherichia coli and Salmonella Typhimurium. The antioxidant activity of the extracts was evidenced by the methods Iron Reduction Antioxidant Power (FRAP) and Oxygen Radical Absorption Capacity (ORAC). B. orellana extract had higher antioxidant activity by FRAP and ORAC (277.70 and 455.17 mM trolox equivalent/g, respectively) than C. longa extract (129.74 and 217.98 mM trolox equivalent/g, respectively). The biological effects of C. longa and B. orellana ethanolic extracts revealed in this study indicated their potential as an alternative to synthetic additives used in the food industry.

Condição microbiológica de cama tratada com Impact P® em matrizes de frangos de corte

This study aimed to evaluate the utilization of Impact P® in used litter from floor pens of broiler breeders through the monitoring of microbiological parameters. Impact P® is a commercial product obtained from Bacillus subtillis and it enzymes. Using animal litter and organic matter as a feed source, the product was designed to improve the quality of floor pens of broiler breeders. When hens aged 58 weeks, all used floor pens material was replaced with a new one and the following treatments were tested: T1 - control; T2 - 2.5g Impact P® m-2 litter; T3- 5.0g Impact P® m-2 litter. Counting of number of enterobacterium colonies in agar Mac-ConcKey was performed in a sample of new floor pens material and after 3, 10, 17, 24 and 31 days of litter treatment with Impact P®. The statistical analysis was accomplished with the General Linear Models - GLM procedure, using the minimum square method in a 3x4 factorial (treatment vs. time of floor pens utilization), in a completely randomized design with four replications. The averages were compared by Tukey test. The utilization of 5.0g Impact P® m-2 litter was efficient to reducing approximately 13% logarithmic total counting of the enterobacterium in comparison to the untreated group (2.89 versus 3.31log10 (CFU), respectively, P 0.05).

Foram avaliados os efeitos da aplicação de Impact P® sobre a cama de aviário de matrizes de corte mediante o monitoramento de parâmetros microbiológicos. O Impact P® é um produto formulado através de Bacillus subtillis e suas enzimas que atuam sobre os dejetos animais e matéria orgânica, utilizando-os como fonte alimentar, visando melhorar as condições da cama dentro de aviários. Na 58ª semana de idade das matrizes foi trocado todo material de cama e então aplicados os seguintes tratamentos: T1- controle; T2 - Impact P® na dosagem de 2,5gm-2 de cama; T3 - Impact P® na dosagem de 5,0g m-2 de cama. Foram realizadas contagens de enterobactérias totais em agar McConkey em amostra de cama nova e após 3, 10, 17, 24 e 31 dias de uso da cama pelas aves e tratamentos com Impact P®. A análise estatística foi realizada no procedimento General Linear Models - GLM que utiliza o método dos quadrados mínimos, em um esquema fatorial 3x4 (tratamento x tempo de uso da cama) em delineamento completamente casualizado, com quatro repetições por tratamento, sendo as médias comparadas pelo teste de Tukey. A dosagem de 5,0g de Impact P® por m² de cama foi eficiente para reduzir em aproximadamente 13% a contagem logarítmica total de enterobactérias em comparação com o grupo não tratado (2,89 versus 3,31log10 (UFC), respectivamente, P 0,05).

Condição microbiológica de cama tratada com Impact P® em matrizes de frangos de corte

This study aimed to evaluate the utilization of Impact P® in used litter from floor pens of broiler breeders through the monitoring of microbiological parameters. Impact P® is a commercial product obtained from Bacillus subtillis and it enzymes. Using animal litter and organic matter as a feed source, the product was designed to improve the quality of floor pens of broiler breeders. When hens aged 58 weeks, all used floor pens material was replaced with a new one and the following treatments were tested: T1 - control; T2 - 2.5g Impact P® m-2 litter; T3- 5.0g Impact P® m-2 litter. Counting of number of enterobacterium colonies in agar Mac-ConcKey was performed in a sample of new floor pens material and after 3, 10, 17, 24 and 31 days of litter treatment with Impact P®. The statistical analysis was accomplished with the General Linear Models - GLM procedure, using the minimum square method in a 3x4 factorial (treatment vs. time of floor pens utilization), in a completely randomized design with four replications. The averages were compared by Tukey test. The utilization of 5.0g Impact P® m-2 litter was efficient to reducing approximately 13% logarithmic total counting of the enterobacterium in comparison to the untreated group (2.89 versus 3.31log10 (CFU), respectively, P 0.05).

Foram avaliados os efeitos da aplicação de Impact P® sobre a cama de aviário de matrizes de corte mediante o monitoramento de parâmetros microbiológicos. O Impact P® é um produto formulado através de Bacillus subtillis e suas enzimas que atuam sobre os dejetos animais e matéria orgânica, utilizando-os como fonte alimentar, visando melhorar as condições da cama dentro de aviários. Na 58ª semana de idade das matrizes foi trocado todo material de cama e então aplicados os seguintes tratamentos: T1- controle; T2 - Impact P® na dosagem de 2,5gm-2 de cama; T3 - Impact P® na dosagem de 5,0g m-2 de cama. Foram realizadas contagens de enterobactérias totais em agar McConkey em amostra de cama nova e após 3, 10, 17, 24 e 31 dias de uso da cama pelas aves e tratamentos com Impact P®. A análise estatística foi realizada no procedimento General Linear Models - GLM que utiliza o método dos quadrados mínimos, em um esquema fatorial 3x4 (tratamento x tempo de uso da cama) em delineamento completamente casualizado, com quatro repetições por tratamento, sendo as médias comparadas pelo teste de Tukey. A dosagem de 5,0g de Impact P® por m² de cama foi eficiente para reduzir em aproximadamente 13% a contagem logarítmica total de enterobactérias em comparação com o grupo não tratado (2,89 versus 3,31log10 (UFC), respectivamente, P 0,05).

Condição microbiológica de cama tratada com Impact P® em matrizes de frangos de corte

This study aimed to evaluate the utilization of Impact P® in used litter from floor pens of broiler breeders through the monitoring of microbiological parameters. Impact P® is a commercial product obtained from Bacillus subtillis and it enzymes. Using animal litter and organic matter as a feed source, the product was designed to improve the quality of floor pens of broiler breeders. When hens aged 58 weeks, all used floor pens material was replaced with a new one and the following treatments were tested: T1 - control; T2 - 2.5g Impact P® m-2 litter; T3- 5.0g Impact P® m-2 litter. Counting of number of enterobacterium colonies in agar Mac-ConcKey was performed in a sample of new floor pens material and after 3, 10, 17, 24 and 31 days of litter treatment with Impact P®. The statistical analysis was accomplished with the General Linear Models - GLM procedure, using the minimum square method in a 3x4 factorial (treatment vs. time of floor pens utilization), in a completely randomized design with four replications. The averages were compared by Tukey test. The utilization of 5.0g Impact P® m-2 litter was efficient to reducing approximately 13% logarithmic total counting of the enterobacterium in comparison to the untreated group (2.89 versus 3.31log10 (CFU), respectively, P 0.05).

Foram avaliados os efeitos da aplicação de Impact P® sobre a cama de aviário de matrizes de corte mediante o monitoramento de parâmetros microbiológicos. O Impact P® é um produto formulado através de Bacillus subtillis e suas enzimas que atuam sobre os dejetos animais e matéria orgânica, utilizando-os como fonte alimentar, visando melhorar as condições da cama dentro de aviários. Na 58ª semana de idade das matrizes foi trocado todo material de cama e então aplicados os seguintes tratamentos: T1- controle; T2 - Impact P® na dosagem de 2,5gm-2 de cama; T3 - Impact P® na dosagem de 5,0g m-2 de cama. Foram realizadas contagens de enterobactérias totais em agar McConkey em amostra de cama nova e após 3, 10, 17, 24 e 31 dias de uso da cama pelas aves e tratamentos com Impact P®. A análise estatística foi realizada no procedimento General Linear Models - GLM que utiliza o método dos quadrados mínimos, em um esquema fatorial 3x4 (tratamento x tempo de uso da cama) em delineamento completamente casualizado, com quatro repetições por tratamento, sendo as médias comparadas pelo teste de Tukey. A dosagem de 5,0g de Impact P® por m² de cama foi eficiente para reduzir em aproximadamente 13% a contagem logarítmica total de enterobactérias em comparação com o grupo não tratado (2,89 versus 3,31log10 (UFC), respectivamente, P 0,05).

Detecção e caracterização de bactérias gram-negativas produtoras de b-lactamases de espectro estendido (ESBL) e AmpC plasmidial isoladas de animais de companhia e búfalos no Estado de São Paulo / Detection and characterization of gram-negative bacteria producers extended spectrum b- lactamases (ESBL) and pAmpC isolated from pets and buffalo in São Paulo

O presente trabalho teve como objetivo realizar um estudo de vigilância epidemiológica de bactérias MR em isolados obtidos de amostras de búfalo de bubalinocultura e em animais de estimação apresentando sinais e sintomas clínicos de infecção urinária. O estudo relata resultados inéditos referentes à disseminação de bactérias MR, com alto índice de resistência a antimicrobianos de uso clínico e do agronegócio, constituindo o primeiro reporte mundial da emergência de cepas de Escherichia coli produtoras de ESBL do tipo CTX-M-15, CTX-M-8 e CTX-M-2, e pAmpC CMY-1, CMY-2 e DHA-1 em animais de companhia é relatada pela primeira vez no Brasil Nos isolados de E. coli ESBL positivos, não foi constatada relação clonal. As cepas isoladas de búfalos pertencem aos grupos A e B1 e em animais de companhia foram identificados predominantemente os grupos filogenéticos de alta virulência B2 e D

This study aimed to conduct an epidemiological surveillance on MDR among Gram-negative bacilli recovered from samples from buffalo and in pets exhibiting signs and symptoms related to urinary tract infection.The study reports the spread of MDR bacteria exhibiting a high resistance profile to veterinary- and human-use b-lactams and quinolones, in livestock of buffalos and in pets, constituting the first worldwide report of CTX-M-8-type extended-spectrum b-lactamase (ESBL)- and CMY-2-type plasmid AmpC (pAmpC)-producing E. coli strains in buffalo. Moreover, to the best of knowledge, this is the first report of CTX-M-15-, CTXM-8-, CTX-M-2, CMY-1, CMY-2- and DHA-1-producing E. coli strains in pets in Brazil. With respect to the origin of resistance, we found no clonal relatedness among MDR. E. coli isolates from buffalos belonging to groups A and B1 and in companion animals, the phylogenetic analysis of virulence in E. coli denoted the predominance of the highly virulent phylogenetic groups B2 and D

Detecção e caracterização de bactérias gram-negativas produtoras de b-lactamases de espectro estendido (ESBL) e AmpC plasmidial isoladas de animais de companhia e búfalos no Estado de São Paulo / Detection and characterization of gram-negative bacteria producers extended spectrum b- lactamases (ESBL) and pAmpC isolated from pets and buffalo in São Paulo

O presente trabalho teve como objetivo realizar um estudo de vigilância epidemiológica de bactérias MR em isolados obtidos de amostras de búfalo de bubalinocultura e em animais de estimação apresentando sinais e sintomas clínicos de infecção urinária. O estudo relata resultados inéditos referentes à disseminação de bactérias MR, com alto índice de resistência a antimicrobianos de uso clínico e do agronegócio, constituindo o primeiro reporte mundial da emergência de cepas de Escherichia coli produtoras de ESBL do tipo CTX-M-15, CTX-M-8 e CTX-M-2, e pAmpC CMY-1, CMY-2 e DHA-1 em animais de companhia é relatada pela primeira vez no Brasil Nos isolados de E. coli ESBL positivos, não foi constatada relação clonal. As cepas isoladas de búfalos pertencem aos grupos A e B1 e em animais de companhia foram identificados predominantemente os grupos filogenéticos de alta virulência B2 e D (AU)

This study aimed to conduct an epidemiological surveillance on MDR among Gram-negative bacilli recovered from samples from buffalo and in pets exhibiting signs and symptoms related to urinary tract infection.The study reports the spread of MDR bacteria exhibiting a high resistance profile to veterinary- and human-use b-lactams and quinolones, in livestock of buffalos and in pets, constituting the first worldwide report of CTX-M-8-type extended-spectrum b-lactamase (ESBL)- and CMY-2-type plasmid AmpC (pAmpC)-producing E. coli strains in buffalo. Moreover, to the best of knowledge, this is the first report of CTX-M-15-, CTXM-8-, CTX-M-2, CMY-1, CMY-2- and DHA-1-producing E. coli strains in pets in Brazil. With respect to the origin of resistance, we found no clonal relatedness among MDR. E. coli isolates from buffalos belonging to groups A and B1 and in companion animals, the phylogenetic analysis of virulence in E. coli denoted the predominance of the highly virulent phylogenetic groups B2 and D (AU)

Aspectos ictiopatológicos de bijupirás (Rachycentron canadum) criados em tanques-rede no litoral norte do Estado de São Paulo, Brasil

Na natureza os bijupirás estão sujeitos à infecção por bactérias, vírus, parasitos e às doenças de origem nutricional. No entanto, dados a respeito dessas doenças em bijupirás em cativeiro são escassos no Brasil e em outros países. As infecções podem causar grandes perdas econômicas, seja pela redução no crescimento, custo de tratamento e morte dos peixes. O presente trabalho teve como objetivo caracterizar os aspectos ictiopatológicos de bijupirás (Rachycentron canadum) criados em tanques-rede no litoral norte do estado de São Paulo (23°48'54"S 45°22'14"O) durante o ano de 2011. As investigações avaliaram a ocorrência de doenças caracterizando sinais clínicos e achados anatomopatológicos de 46 bijupirás coletados nos meses de março, maio, julho e setembro de 2011. Nos resultados do exame bacteriológico foram caracterizados e isolados micro-organismos compatíveis com a bactéria gram-negativa, Photobacterium damselae piscicida. No exame parasitológico foram identificados Neobenedenia melleni e Tuxophorus caligodes. Na análise histopatológica, órgãos como fígado, rins, baço, intestino e cecos pilóricos apresentaram lesões granulomatosas. No fígado e rins prevaleceram lesões como esteatose e degeneração tubular, respectivamente. No baço e nos intestinos foram identificados centros de melanomacrófagos e enterite crônica. As brânquias exibiram áreas de hiperplasia epitelial acompanhada de fusão lamelar, edema subepitelial e proliferação de células mucosas no ápice das lamelas primárias. Neste período houve 97,21% mortalidade atribuída à infecção por Photobacterium damselae piscicida, caracterizada e isolada pelos exames microbiológico e molecular

In nature cobias are subject to infection by bacteria, viruses, parasites and diseases of nutritional origin. However, data about these diseases in cobias in captivity are rare in Brazil and other countries. The infections can cause major economic losses, either by reduced growth, cost of treatment and death of fish. The objective of this current study was to characterize ictiopathological aspects of cobias (Rachycentron canadum) farmed in net tanks in north coast of state of São Paulo (23°48'54"S 45°22'14"W) during the year 2011. The research evaluated the occurrence of diseases characterized clinical signs and pathological findings of 46 cobias collected in March, May, July and September 2011. In the results of the bacteriological analysis were characterized and isolated micro-organisms compatible with gram-negative bacterium, Photobacterium damselae piscicida. In parasitological examination was identified Neobenedenia melleni and Tuxophorus caligodes. In the histopathological analysis, organs like liver, kidneys, spleen, intestine and pyloric caecum showed granulomatous lesions. In the liver and kidney prevailed lesions as tubular degeneration and steatosis, respectively. In the spleen and intestines were identified melanomacrophages centers and chronic enteritis. The gills exhibited areas of epithelial hyperplasia accompanied fusion lamellar, subepithelial edema and proliferation of mucosal cells at the apex of the primary lamellae. In this period there was 97,21% mortality attributed to infection by Photobacterium damselae piscicida, isolated and characterized by molecular and microbiological examinations

Avaliação da expressão gênica em leucócitos de eqüinos : análise pela técnica do microarray em modelo ex vivo de endotoxemia

Endotoxemia é distúrbio sistêmico que se origina da resposta do hospedeiro a um componente da membrana celular das bactérias Gram- negativas. Esta resposta se dá através da exposição dos receptores celulares TLR-4 e TLR-2 ao LPS. Os objetivos deste estudo foram investigar as alterações na expressão gênica da exposição ao LPS em leucócitos de equinos utilizando a técnica de microarray, avaliar a eficiência do modelo ex vivo para os estudos envolvendo a endotoxemia pela mesma técnica, avaliar a expressão global de genes em vias envolvidas, identificar componentes da cascata metabólica com potenciais para novas terapias, e fornecer subsídio para futuros estudos. Amostras de sangue total (15mL) de cavalos saudáveis (n=6) foram incubadas durante 4 horas a 37°C com 5% de CO2 na presença (1 ou 10 ng/mL) ou ausência de LPS (0 ng/mL). Alíquotas de 500µL de sangue foram coletadas nos momentos 0, 2 e 4 horas após o estímulo do LPS. O RNA, extraído das mostras, foi utilizado para a transcrição do cDNA. A hibridização do cDNA marcado com Cy-3 foi realizada em lâminas 4x44K v2 de humanos contendo sequências homólogas com a espécie equina para os genes de interesse. Após a leitura das lâminas, com filtro para genes 30x mais ou menos expressos, verificou-se um aumento da expressão do TLR-2 na concentração de 10 ng LPS/mL no momento 4 em relação ao momento 2. Este resultado sugere que, embora o receptor TLR-4 seja o principal receptor no reconhecimento do LPS, o receptor TLR-2 também tem um papel no reconhecimento destas moléculas

Endotoxemia is systemic disturbance that origins from the host response to a component of the cellular membrane of Gram-negative bacterias. This response occurs through exposure of cellular receptors TLR-4 and TLR-2 to LPS. The objectives of this study were to investigate changes in gene expression of exposure to LPS in horses leukocytes using the microarray technique, to evaluate the efficiency of the ex vivo model for studies of endotoxemia by the same technique, to evaluate the global expression of genes in the metabolic pathways involved, identify components of the metabolic cascade with potential for new therapies, and provide allowance for future studies. Whole blood samples (15mL) of healthy horses (n=6) were incubated for 4 hours at 37°C with 5% of CO2 in the presence (1 or 10 ng/ml) or absence of LPS (0 ng/ml). Aliquots of 500?L of blood were collected at 0,2 and 4 hours after LPS stimulation. The RNAs, extracted from the samples, were used for the transcription of the cDNAs. Hybridization of labeled cDNAs with Cy-3 were performed in 4x44K v2 slides containing human sequences homologous to the equine species for the genes of interest. After the reading of the slides with filter for genes 30x up regulation or down regulation expression, it was observed an increased expression of the TLR-2 concentration of 10 ng LPS/mL at time 4 compared to time 2. This result suggests that, although the TLR-4 receptor is the main LPS recognition receptor, the receptor TLR-2 also plays a role in recognition of these molecules

Identification of enterobacteria in free-living nonhuman primates in an urban park in the northern Region of the State of Paraná, Brazil / Identificação de enterobactérias em primatas não-humanos de vida livre em um parque urbano na Região Norte do Estado do Paraná, Brasil

Populations of nonhuman primates are often considered to be a link in the chain of emerging infectious diseases, as they are reservoirs for different zoonotic pathogens. The objective of this study was to identify the presence of bacteria from the family Enterobacteriaceae in free-living nonhuman primates. The research was carried out in an urban park located in a city in the northern region of the State of Paraná, Brazil. The animals were captured in Tomahawk-type traps and chemically restrained, being oral and rectal samples collected with sterile swabs. For bacterial isolation, the samples were seededon MacConkey agar plates and grown under anaerobic conditions. The subsequent identification was conducted using a commercial biochemical kit. Sixteen primates identified as black-capuchin-monkeys (Sapajus nigritus) were captured. Seven different enterobacterial species were identified from the oral cavity swabs: six Escherichia coli (42.9%), three Kluyvera species (21.40%), one Serratia rubidaea(7.14%), one Enterobacter aerogenes (7.14%), one Enterobacter cloacae (7.14%), one Hafnia alvei (7.14%), and one Erwinia herbicola (7.14%). Seven different species were identified from the rectal swabs: six Escherichia coli (40%), three Kluyvera species (20%), two Enterobacter aerogenes (13.32%),one Erwinia herbicola (6.67%), one Serratia rubidaea (6.67%), one Pragia fontium (6.67%), and one Edwardsiella tarda (6.67%). The results indicate that the isolated bacteria belong mainly to the human microbiota and had crossed the interspecific barrier, contaminating the nonhuman primates.

As populações de primatas não humanos frequentemente são consideradas um elo na cadeia de doenças infecciosas emergentes, por constituírem reservatórios que propiciam o surgimento de diferentes patógenos zoonóticos. O objetivo deste trabalho foi identificar a presença de bactérias da família Enterobacteriaceae em primatas não humanos de vida livre. O estudo foi realizado em um parque urbano localizado em uma cidade da região norte do Estado do Paraná. Os animais foram capturados em armadilhas do tipo Tomahawk e submetidos a contenção farmacológica para colheita de amostras da microbiota oral e retal com zaragatoas estéreis. Para o isolamento bacteriano as amostras foram semeadas pela técnica de esgotamento em placas contendo ágar MacConkey, com posterior identificação por testes bioquímicos utilizando kit comercial. Foram capturados 16 primatas não humanos identificados como Sapajus nigritus (macaco-prego). Na cavidade oral foi possível identificar sete diferentes espécies de bactérias, sendo seis (42,9%) Escherichia coli, três espécies de Kluyvera (21,40%), uma (7,14%) Serratia rubidae, uma (7,14%) Enterobacter aerogenes, uma (7,14%) Enterobacter cloacae, uma (7,14) Hafnia alvei e uma (7,14%) Erwinia herbicola. No reto foi possível identificar sete diferentes espécies de bactérias, sendo seis (40%) Escherichia coli, três espécies de Kluyvera (20%), duas (13,32%) Enterobacter aerogenes, uma (6,67%) Erwinia herbicola, uma (6,67%) Serratia rubidae, uma (6,67%) Pragla fotiun e uma (6,67%) Edwardsiella tarda. Os resultados indicam que as bactérias isoladas são pertencentes principalmente à microbiota humana, e estão ultrapassando a barreira interespecífica e contaminando os primatas.

Detection of non-fermenting Gram-negative bacteria in treated water for dialysis procedure purpose / Detecção de bactérias Gram-negativas não fermentadoras em água tratada para diálise

In Brazil, 90% of patients with renal failure depend on the hemodialysis procedures in order to remove the metabolic degradation products, water and mineral salts excesses from the organism, restoring the electrolyte and acid-base balance. Water is the main component of the dialysis therapy, and its chemical and microbiology quality is essential to avoid additional risks to patient. Dialysis solutions and equipments provide suitable environments for the microbial growth, particularly Gram-negative bacteria. In addition to bacteremia, Gram-negative microorganisms can be related to pyrogenic reactions. The objective of this study was to investigate the occurrence of non-fermenting Gram-negative bacteria in 97 dialysis water samples, and 27 dialysates analyzed from June 2005 to December 2006. Non-fermenting Gram-negative bacteria were detected in 29.6% of dialysates and in 49.5% of treated water samples. Nine bacteria species were isolated and identified; the Burkholderia cepacia complex was the most frequent (59.0%), followed by Stenotrophomonas maltophilia (13.1%).

No Brasil, 90% dos pacientes renais crônicos dependem dos procedimentos de hemodiálise para remover produtos de degradação metabólica, excesso de água e de sais minerais do organismo, e para restaurar o equilíbrio ácido-base e eletrolítico. A água é o principal componente do tratamento por diálise e suas qualidades química e microbiológica são essenciais para evitar riscos adicionais ao paciente. As soluções para diálise e os equipamentos proporcionam ambientes adequados ao desenvolvimento microbiano, especialmente bactérias Gram-negativas. Além de bacteremias, os microrganismos Gram-negativos podem estar relacionados à ocorrência de reações pirogênicas. Este estudo teve por objetivo verificar a ocorrência de bactérias Gram-negativas não fermentadoras de glicose em 97 amostras de água tratada para diálise e 27 amostras de dialisatos, avaliadas entre junho de 2005 e dezembro de 2006. As bactérias Gram-negativas não fermentadoras de glicose foram detectadas em 29,6% das amostras de dialisatos e em 49,5% das amostras de água tratada. Nove espécies foram isoladas e identificadas, sendo a mais freqüente o complexo Burkholderia cepacia (59,0%), seguido de Stenotrophomonas maltophilia (13,1%).

Enterobactérias e fatores de virulência em cepas de Escherichia coli isoladas de psitacídeos

A microbiota intestinal de Psitaciformes é composta principalmente por bactérias Gram positivas, não se considerando saudável a presença de bactérias Gram negativas. As aves silvestres possuem importância para a saúde pública por albergarem patógenos passíveis de transmissão zoonótica. O deslocamento territorial dessas aves, como o que ocorre no tráfico de animais selvagens, constitui um mecanismo de propagação de novos focos endêmicos de agentes infecciosos a grandes distâncias dos locais onde foram adquiridos. Neste trabalho analisamos a presença de enterobactérias em psitacídeos utilizando amostras de órgãos de aves recebidas para necropsia na rotina do Laboratório Central de Diagnóstico de Patologias Aviárias (LCDPA) situado no Departamento de Medicina Veterinária Preventiva (DMVP) do Centro de Ciências Rurais (CCR) da Universidade Federal de Santa Maria (UFSM). Também foi realizada coleta de suabes cloacais e de inglúvio em aves vivas mantidas em cativeiro visando monitorar a presença de possíveis bactérias patogênicas. Escherichia coli foi considerada a bactéria predominante na maioria das amostras, então após análise microbiológica e confirmação dos isolados de E. coli, selecionamos 28 colônias, as quais foram testadas para os fatores de virulência iss, relacionado com a capacidade da cepa em resistir aos efeitos líticos do soro, e iutA, sendo este gene um receptor de membrana externa dos compostos sideróforos da aerobactina (genes iuc) que é um sistema de captação de ferro pelo qual E. coli expressa afinidade. Espera-se que os dados obtidos nessa pesquisa contribuam no estabelecimento do estado sanitário de psitaciformes auxiliando na manutenção da espécie e prevenindo riscos à saúde pública

Expressão heteróloga do gene opgD de Xylella fastidiosa e obtenção de mutantes opgH

Glicanas periplasmáticas osmorreguladas (OPGs) são importantes componentes do envelope celular das bactérias Gram-negativas. Como papel biológico tem se demonstrado que possuem função fundamental na organização geral do envelope celular e que atuam na adaptação a alterações osmóticas do meio. Em Xylella fastidiosa foram detectadas seqüências similares àquelas de genes que codificam para OPGs em Escherichia coli. Neste trabalho estudou-se a expressão heteróloga do gene opgD de X. fastidiosa em mutantes de E. coli, assim como, obteve-se mutantes de X. fastidiosa para o gene opgH por dupla recombinação homóloga. As glicanas produzidas pelos mutantes de E. coli, resultaram na expressão heteróloga do gene de X. fastidiosa, que foram analisadas pela medida de fixação de D-[U-14C] glicose e separação em colunas de BioGel P4 e DEAE. A restauração da produção de glicanas nos mutantes de E. coli apontam o papel biológico destes genes em X. fastidiosa, informando a participação deste sistema no processo da patogenicidade desta bactéria. Para a obtenção de mutantes de X. fastidiosa foram construídos dois vetores contendo a seqüência do gene opgH de X. fastidiosa interrompida de duas formas diferentes: i) pela inserção de um gene de canamicina controlado pelo promotor de E. coli; ii) pela inserção do gene de canamicina controlado pelo promotor de X. fastidiosa. Os mesmos foram inseridos, por eletroporação, na linhagem Temécula de X. fastidiosa e confirmou-se por PCR e southern blot a ocorrência do envento de dupla recombinação homóloga

Diferenciação genômica de bactérias gram-negativas e gram-positivas pela análise do gene rDNA 16S erep-PCR

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Efeito da adição de antimicrobianos eou prebiótico na ração sobre a microbiota intestinal e cecal de frangos

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