Phenotypic and genotypic characterization of Brucella abortus biovar 4 isolates from cattle in Brazil / Caracterização fenotípica e genotípica de isolados de Brucella abortus biovar 4 em bovinos no Brasil

ABSTRACT: The aim of the present study was to characterize (phenotypically and genotypically) two strains of Brucella abortus identified as belonging to biovar 4 isolated from cattle in Brazil. The strains were isolated from cervical bursitis from cattle in the states of Pará and Rio Grande do Sul, respectively. In the phenotypic identification, the isolates were positive in CO2 requirement, produced H2S, were resistant to basic fuchsin (20 µg / mL) and sensitive to thionin (20 µg / mL and 40 µg / mL) and presented M surface antigen, but A surface antigen is absent. The isolates were positive in the PCR for the bcsp31 gene (genus-specific) and in the AMOS-enhanced PCR, both isolates showed a band profile consistent with B. abortus biovar 1, 2 or 4. Moreover, both isolates also showed restriction patterns identical to the reference strain when tested by the omp2b PCR-RFLP. In genotyping using Multiple Locus Variable Number of Tandem Repeat (VNTR) Analysis - MLVA (MLVA16), the isolates showed differences in several loci (Bruce42, Bruce19, Bruce04, Bruce16 and Bruce30); by Multiple Locus Sequence Typing (MLST), they also exhibited differences in sequence type (ST), strain 16/02 ST1 (2-1-1-2-1-3-1-1-1) and strain 128/11 ST (22-1-1 -8-9-3-1-1-1). The extensive typing of B. abortus strains isolated from cattle in Brazil using different approaches confirmed the occurrence of rare B. abortus biovar 4 in the country.

RESUMO: O objetivo do presente estudo foi caracterizar (fenotipicamente e genotipicamente) duas cepas de Brucella abortus identificadas como pertencentes ao biovar 4 isolada de bovinos no Brasil. As cepas foram isoladas de bursite cervical de bovinos dos estados do Pará e Rio Grande do Sul, respectivamente. Na identificação fenotípica, os isolados foram positivos na exigência de CO2, produziram H2S, foram resistentes à fucsina básica (20 µg / mL) e sensíveis à tionina (20 µg / mL e 40 µg / mL) e apresentaram antígeno de superfície M, mas o antígeno de superfície A foi ausente. Os isolados foram positivos na PCR para o gene bcsp31 (gênero específico) e na PCR - AMOS, ambos os isolados apresentaram perfil de banda consistente com B. abortus biovar 1, 2 ou 4. Além disso, ambos os isolados também apresentaram padrões de restrição idêntica à cepa de referência quando testada pelo omp2b PCR-RFLP. Na genotipagem usando Multiple Locus Variable Number of Tandem Repeat (VNTR) - MLVA (MLVA16), os isolados apresentaram diferenças em vários loci (Bruce42, Bruce19, Bruce04, Bruce16 e Bruce30); no Multiple Locus Sequence Typing (MLST), os isolados também exibiram diferenças na sequência tipo (ST), amostra 16/02 ST1 (2-1-1-2-1-3-1-1-1) e amostra 128/11 ST (22-1-1-8-9-3-1-1-1). A extensa tipagem de cepas de B. abortus isoladas de bovinos no Brasil por diferentes abordagens confirmou a rara ocorrência de B. abortus biovar 4 no país.

Phenotypic and genotypic characterization of Brucella abortus biovar 4 isolates from cattle in Brazi / Caracterização fenotípica e genotípica de isolados de Brucella abortus biovar 4 em bovinos no Brasil

The aim of the present study was to characterize (phenotypically and genotypically) two strains of Brucella abortus identified as belonging to biovar 4 isolated from cattle in Brazil. The strains were isolated from cervical bursitis from cattle in the states of Pará and Rio Grande do Sul, respectively. In the phenotypic identification, the isolates were positive in CO2 requirement, produced H2S, were resistant to basic fuchsin (20 µg / mL) and sensitive to thionin (20 µg / mL and 40 µg / mL) and presented M surface antigen, but A surface antigen is absent. The isolates were positive in the PCR for the bcsp31 gene (genus-specific) and in the AMOS-enhanced PCR, both isolates showed a band profile consistent with B. abortus biovar 1, 2 or 4. Moreover, both isolates also showed restriction patterns identical to the reference strain when tested by the omp2b PCR-RFLP. In genotyping using Multiple Locus Variable Number of Tandem Repeat (VNTR) Analysis - MLVA (MLVA16), the isolates showed differences in several loci (Bruce42, Bruce19, Bruce04, Bruce16 and Bruce30); by Multiple Locus Sequence Typing (MLST), they also exhibited differences in sequence type (ST), strain 16/02 ST1 (2-1-1-2-1-3-1-1-1) and strain 128/11 ST (22-1-1 -8-9-3-1-1-1). The extensive typing of B. abortus strains isolated from cattle in Brazil using different approaches confirmed the occurrence of rare B. abortus biovar 4 in the country.

O objetivo do presente estudo foi caracterizar (fenotipicamente e genotipicamente) duas cepas de Brucella abortus identificadas como pertencentes ao biovar 4 isolada de bovinos no Brasil. As cepas foram isoladas de bursite cervical de bovinos dos estados do Pará e Rio Grande do Sul, respectivamente. Na identificação fenotípica, os isolados foram positivos na exigência de CO2, produziram H2S, foram resistentes à fucsina básica (20 µg / mL) e sensíveis à tionina (20 µg / mL e 40 µg / mL) e apresentaram antígeno de superfície M, mas o antígeno de superfície A foi ausente. Os isolados foram positivos na PCR para o gene bcsp31 (gênero específico) e na PCR - AMOS, ambos os isolados apresentaram perfil de banda consistente com B. abortus biovar 1, 2 ou 4. Além disso, ambos os isolados também apresentaram padrões de restrição idêntica à cepa de referência quando testada pelo omp2b PCR-RFLP. Na genotipagem usando Multiple Locus Variable Number of Tandem Repeat (VNTR) - MLVA (MLVA16), os isolados apresentaram diferenças em vários loci (Bruce42, Bruce19, Bruce04, Bruce16 e Bruce30); no Multiple Locus Sequence Typing (MLST), os isolados também exibiram diferenças na sequência tipo (ST), amostra 16/02 ST1 (2-1-1-2-1-3-1-1-1) e amostra 128/11 ST (22-1-1-8-9-3-1-1-1). A extensa tipagem de cepas de B. abortus isoladas de bovinos no Brasil por diferentes abordagens confirmou a rara ocorrência de B. abortus biovar 4 no país.

Antagonistic activity of lactic acid bacteria isolated from Minas artisanal cheeses against Brucella abortus / Atividade antagonista de bactérias lácticas isoladas de queijos Minas artesanais contra Brucella abortus

This study aimed to evaluate methods for studying the in vitro antimicrobial activity of lactic acid bacteria (LAB) against Brucella abortus and to evaluate the antagonistic effect of LAB on the viability of this pathogen. A total of 18 LAB strains (Lactobacillus plantarum, n = 11; Pediococcus acidilactici, n = 1; Lactobacillus rhamnosus, n = 4; and Lactobacillus brevis,n = 2), isolated from Minas artisanal cheeses produced in three regions (Canastra, Campos das Vertentes, and Araxá) of Minas Gerais State, Brazil, were tested for their antimicrobial activity against B. abortus using three methods: spot-on-lawn, agar well diffusion assay, and antagonistic activity of the culture supernatants. None of the tested LAB strains could inhibit B. abortus in the spot-on-lawn and agar-well diffusion assays. The supernatants produced by LAB had an acidic pH, with intensity depending on bacterial growth and strain, and could inhibit the growth of B. abortus. In contrast, pH-neutralized (pH 7.0) LAB supernatants did not suppress the growth of B. abortus. The results showed that the best technique to study the in vitro antagonism of LAB against B. abortus was the antagonistic activity of culture supernatants. The growth of B. abortus may have been inhibited by acid production.(AU)

Este estudo teve como objetivo avaliar métodos de estudo in vitro da atividade antimicrobiana de bactérias lácticas contra Brucella abortus e avaliar o efeito antagônico das mesmas sobre a viabilidade deste patógeno. Um total de 18 amostras de bactérias lácteas (Lactobacillus plantarum, n = 11; Pediococcus acidilactici, n = 1; Lactobacillus rhamnosus, n = 4; e Lactobacillus brevis, n = 2), isoladas de exemplares de Queijo Minas Artesanal produzidos em três regiões (Canastra, Campos das Vertentes e Araxá) do estado de Minas Gerais, Brasil, foram testados quanto à sua atividade antimicrobiana contra B. abortus usando três métodos: spot-on-lawn, ensaio de difusão em poço e atividade antagonista de sobrenadante de cultura. Nenhuma das cepas testadas foi capaz de inibir B. abortus nos ensaios spot-on-lawm e de difusão em poço. Os sobrenadantes produzidos pelas bactérias lácteas apresentaram pH ácido, com intensidade dependente do crescimento bacteriano e da amostra, podendo inibir o crescimento de B. abortus. Em contraste, os sobrenadantes com pH neutralizado (pH 7,0) não inibiram o crescimento de B. abortus. Os resultados mostraram que a melhor técnica para estudar o antagonismo in vitro de bactérias lácteas contra B. abortus foi a atividade antagonista de sobrenadante de cultura. O crescimento de B. abortus pode ter sido inibido pela produção de ácido.(AU)

Levantamento sorológico de brucelose em bovinos monitorados no estado da Bahia / Serological survey of brucellosis in cattle monitored in the estate of Bahia

A brucelose é uma doença bacteriana de grande importância para a economia pecuária e para a saúde pública por se tratar de uma zoonose. É uma doença infecto-contagiosa que tem com agente etiológico bactérias do gênero Brucella. Em bovinos, as espécies do gênero é a Brucella abortus, que são cocobacilos gram negativo, intracelulares facultativos, imóveis e não esporulado. A infecção apresenta evolução crônica e acomete animais de todas as idades, sendo mais frequente em indivíduos sexualmente maduros. O objetivo desse trabalho é investigar, por meio da sorologia para brucelose bovina, utilizando a técnica do ELISA indireto, amostras de animais reagentes abatidos em frigoríficos inspecionados no estado da Bahia. Foram utilizados 666 animais, selecionados aleatoriamente no momento do abate. O sangue foi coletado com finalidade de obtenção de soro, todas as amostras foram submetidas à prova de triagem do Antígeno Acidificado Tamponado (AAT), prova do 2mercaptoetanol (2-ME) e ELISA Indireto. Das amostras reagentes no teste do AAT, obteve-se uma prevalência estimada em 1,2%. A prevalência no teste do ELISA foi de 13,21% (n=86). Esse resultado sugere a ocorrência de falsos negativos quando se utiliza a prova do antígeno acidificado tamponado.

Brucellosis is a bacterial disease of great importance to the livestock economy and to public health because it is a zoonosis. It is an infectious disease that has etiologic agent with bacteria of the genus Brucella. In cattle, the species of the genus Brucella is Brucella abortus that are gram negative, facultative intracellular, real estate and not sporulated. The infection presents chronic and affects animals of all ages, being more frequent in sexually mature individuals. This study aimed to investigate through serology for brucellosis, using the technique of indirect ELISA, samples from positive animals slaughtered in slaughterhouses inspected in the state of Bahia. A total of 666 animals were used, randomly selected at the time of slaughter. Blood was collected in order to obtain serum, all samples were subjected to a screening test Antigen Buffered Acidified (AAT), proof of 2-mercaptoethanol (2-ME) and Indirect ELISA. Of reagents in the test samples of AAT obtained an estimated prevalence of 1.2%. The prevalence in the ELISA test was 13.21% (n = 86). This result suggests the occurrence of false negatives when using the buffered acidified antigen test.

Diversidade genética em Brucella canis: aplicação no desenvolvimento de vacinas / Diversidad genética en Brucella canis: aplicación en el desarrollo de vacunas / Genetic diversity in Brucella canis: application in vaccine development

La prevalencia de la brucelosis canina por B. canis, está aumentando a nivel mundial, al igual que los reportes en personas. La ausencia de vacunas y de programas de control, permiten predecir una rápida expansión de la enfermedad, con el consecuente impacto en la reproducción canina y en la Salud Pública. Por lo anterior, es urgente analizar candidatos vacunales que consideren las características genómicas de las cepas circulantes a nivel mundial, toda vez que se ha comprobado variabilidad genética, particularmente en genes asociados a factores de virulencia tales como proteínas de membrana externa y sistema de secreción tipo IV. La presencia de un conglomerado genético de cepas Latinoamericanas de B. canis debe ser considerado en estudios futuros de tal manera de generar productos vacunales sin limitaciones geográficas.(AU)

A prevalência da brucelose canina por B. canis está aumentando em todo o mundo, assim como os relatos em humanos. A falta de vacinas e programas de controle prevêem uma rápida disseminação da doença, com conseqüente impacto sobre a reprodução canina e a saúde pública. Portanto, é urgente analisar os candidatos a vacina que consideram as características genômicas das cepas que circulam pelo mundo, uma vez que a variabilidade genética foi comprovada, particularmente nos genes associados a fatores de virulência, como as proteínas da membrana externa e o sistema de secreção tipo IV. A presença de um grupo genético de linhagens latino-americanas de B. canis deve ser considerada em estudos futuros a fim de gerar produtos vacinais sem limitações geográficas.(AU)

Seroprevalence of antibodies against smooth Brucella in small ruminants in the states of Sergipe, Bahia, Ceará and Paraíba / Soroprevalência de anticorpos contra Brucella lisa em pequenos ruminantes dos estados de Sergipe, Bahia, Ceará e Paraíba

Brucellosis is a zoonotic disease widespread almost all over the world, representing a significant economic and public health problem. Brucella melitensis, B. suis and B. abortus are considered the most pathogenic species for humans. The most virulent species, B. melitensis is endemic in many parts of the world, particularly the biovar 3 in the Mediterranean and Eastern Europe. Some Latin American countries are seriously affected by biovar 1, especially Mexico, Peru and northern Argentina. Furthermore, while Brazil is considered free of this etiologic agent, one recurrent question is whether this infection really does not occur in Brazil or there is a lack of research/data on the subject. To answer this question, this study aims to investigate the occurrence of antibodies against smooth Brucella in goats and sheep in the states of Sergipe, Paraíba, Ceará and Paraíba. All samples were screened by the Rose Bengal test (RBT). The complement fixation (CFT) and the fluorescence polarization (FPT) tests were used as confirmatory tests. There were no positive samples in the confirmatory tests (both CFT and FPT). We, therefore, conclude that this result reinforces the previous knowledge regarding the exotic status of B. melitensis infection in Brazil.

A brucelose é uma das doenças de caráter zoonótico mais difundidas no mundo, representando um grande problema econômico e de saúde pública. A Brucella melitensis, a B. suis e a B. abortus são consideradas as mais patogênicas espécies para humanos. A espécie apontada como a mais virulenta é a B. melitensis, endêmica em várias partes do mundo, particularmente o biovar 3 na região do Mediterrâneo e na Europa Oriental. Alguns países da América Latina são seriamente afetados pelo biovar 1, especialmente México, Peru e norte da Argentina. O Brasil é considerado livre desse agente etiológico, porém sempre há o questionamento se a infecção não ocorre ou se falta pesquisa. Diante dessa questão, o objetivo deste trabalho foi investigar a ocorrência de anticorpos contra amostras lisas de Brucella em caprinos e ovinos dos estados de Sergipe, Bahia, Ceará e Paraíba. Todas as amostras foram submetidas triagem pelo teste do antígeno acidificado tamponado (AAT). Como testes confirmatórios, utilizou-se a reação de fixação de complemento (RFC) e também o teste de polarização fluorescente (TPF). Nenhuma amostra foi positiva nos testes confirmatórios (RFC e TPF). Esse resultado comprova que a infecção por B. melitensis é exótica no Brasil.

Seroprevalence of Toxoplasma gondii, Neospora caninum, and Brucella abortus in sheep from Toledo, Paraná, Brazil / Soroprevalência de Toxoplasma gondii, Neospora caninum e Brucella abortus em ovinos de Toledo, Paraná, Brasil

Toxoplasmosis is a cosmopolitan disease caused by Toxoplasma gondii and is of great significance in animal production and public health, as evidenced by the two major outbreaks of the disease that occurred in Brazil at the cities of Santa Izabel do Ivai, Paraná and Santa Maria, Rio Grande do Suu. Neospora caninum is the etiological agent of neosporosis, and Brucella spp. causes brucellosis, two of the major causes of reproductive failure in ruminants, causing problems such as abortion, and are responsible for significant economic losses in Brazilian sheep farming. Considering the scarcity of data available on the subject in the study region, the objective of our study was to evaluate seroprevalence of antibodies against T. gondii, N. caninum, and B. abortus in sheep in the municipality of Toledo, Paraná, Brazil. From August 2017 to July 2018, 22 properties were visited, and 240 blood samples were collected from females and males of reproductive age. For detecting antibodies against T. gondii and N. caninum, an Indirect Immunofluorescence technique was utilized, using cutoff points ≥64 and ≥50, respectively. For detecting antibodies against B. abortus, screening was conducted with Acidified Buffered Antigen and verification of reagent samples using the Slow Agglutination and 2-Mercaptoethanol test. Of the analyzed samples, 27.08% (65/240) had antibodies against T. gondii, which were distributed in 81.82% (18/22) of the properties; for N. caninum, there was a prevalence of 15.41% (37/240), and over 68.18% (15/22) of the properties. For B. abortus test results, all samples were considered negative. Our study demonstrated that most properties had animals positive for the protozoa, of which, majorly T. gondii, could cause abortion problems, it being one of the major agents. These epidemiological data provide a basis for strategic programs to implement monitoring and control measures to avoid economic losses in sheep farming.

A toxoplasmose é uma doença cosmopolita, causada pelo Toxoplasma gondii, com grande importância no contexto de produção animal e saúde pública como evidenciado nos dois maiores surtos da doença que ocorreram nas cidades brasileiras de em Santa Izabel do Ivai-PR e Santa Maria-RS. Enquanto o Neospora caninum é o agente causador da neosporose e a Brucella spp. causadora da brucelose, duas das principais causas de falhas reprodutivas em ruminantes, ocasionando problemas como abortamento, e responsáveis por significativas perdas econômicas na ovinocultura brasileira. Considerando a escassez de dados disponíveis sobre o tema para a região estudada, o objetivo do presente estudo foi avaliar a soroprevalência de anticorpos contra T. gondii, N. caninum e B. abortus em ovinos do município de Toledo, Paraná, Brasil. Durante o período de agosto de 2017 a julho de 2018 foram visitadas 22 propriedades e coletadas 240 amostras de sangue de fêmeas e machos em idade reprodutiva. Para a detecção de anticorpos contra o T. gondii e N. caninum foi utilizada a técnica de Imunofluorescência Indireta empregando ponto de corte ≥64 e ≥50, respectivamente. Para a detecção de anticorpos contra B. abortus foi realizada a triagem com o Antígeno Acidificado Tamponado e confirmação das amostras reagentes com o teste de Soroaglutinação Lenta e do 2-Mercaptoetanol. Das amostras analisadas, 27,08% (65/240) apresentaram anticorpos contra o T. gondii, estes se encontravam distribuídas em 81,82% (18/22) das propriedades, para N. caninum observou-se uma prevalência de 15,41% (37/240), distribuídas em 68,18% (15/22) das propriedades. Quanto ao resultado dos testes da B. abortus todas as amostras foram consideradas negativas. O presente estudo mostrou que a grande maioria das propriedades apresentaram animais positivos para os protozoários, os quais, principalmente T. gondii, poderiam estar causando problemas de abortamentos. Estes dados epidemiológicos fornecem embasamento para programas estratégicos a fim de realizar medidas de monitoramento e controle, evitando perdas econômicas na ovinocultura.

Fluorescent polarization assay, two versions of indirect and competitive enzyme- linked immunoassay for brucellosis diagnosis in vaccinated buffaloes (Bubalus bubalis) / Teste de polarização fluorescente, duas versões de imunoensaio enzimático indireto e imunoensaio competitivo para diagnóstico de brucelose em búfalos vacinados (Bubalus bubalis)

The fluorescence polarization assay (FPA), two variants (V) of the indirect enzyme-linked immunosorbent assay (I-ELISA) and the competitive enzyme-linked immunosorbent assay (C-ELISA) were evaluated in buffaloes to detect antibodies against Brucella spp. The V1 of I-ELISA identifies them through the monoclonal (M23) anti-bovine IgG (I-ELISAM23) and the V2 through the ProteinA / G (I-ELISA-A/G). Serum samples of 862 buffaloes (Bubalus bubalis) from the Northeast of Argentina (NEA) were analyzed using the complement fixation test (CFT) as the reference. Receiving Operator Characteristic (ROC) analysis defined for the area under the curve (AUC) determined the cutoff points, sensitivity (Se) and specificity (Sp) for each test. CFT identified 107 positive and 755 negative sera. The best AUC (0.986), Concordance with CFT (96.3%) and kappa value (0.843) was obtained by I-ELISA A/G test. This assay showed the highest Se (95.33%) and C-ELISA the highest Sp (97%). FPA failed to measure the antibodies in 23 (2.65%) serum samples due to unsuccessful reading. I-ELISA M23 proved to be ineffective to diagnose brucellosis in bubaline sera. The four serological tests showed cutoff points lower than those standardized for bovines. As conclusion, I-ELISA A/G, C-ELISA and FPA with its limitations would be effective techniques for the diagnosis of brucellosis in buffaloes in the NEA, requiring an appropriate cut-off point to guarantee their maximum performance in this species.

O ensaio de polarização de fluorescência (FPA), duas variantes (V) do ensaio imunoenzimático indireto (I-ELISA) e o ensaio imunoenzimático competitivo (C-ELISA), foram avaliados em búfalos para detectar anticorpos contra Brucella spp. O V1 do I-ELISA os identifica através do IgG monoclonal (M23) anti-bovino (I-ELISAM23) e o V2 ​​através da Proteína A / G (I-ELISA-A / G). Amostras de soro de 862 búfalos (Bubalus bubalis) do Nordeste da Argentina (NEA) foram analisadas usando o teste de fixação do complemento (CFT) como referência. A análise Receiving Operator Characteristic (ROC) definida pela área sob a curva (AUC) determinou os pontos de corte, sensibilidade (Se) e especificidade (Sp) de cada teste. A CFT identificou 107 soros positivos e 755 soros negativos. Os melhores valores de AUC (0.986), concordância com CFT (96.3%) e kappa (0.843) foram obtidos pelo teste I-ELISA A / G. Este ensaio mostrou a maior Se (95.33%) e C-ELISA a maior Sp (97%). O FPA falhou em medir os anticorpos em 23 (2,65%) amostras de soro devido à falha na leitura. O I-ELISA M23 provou ser ineficaz para o diagnóstico de brucelose em soros bubalinos. Os quatro testes sorológicos mostraram pontos de corte inferiores aos padronizados para bovinos. Em conclusão, I-ELISA A / G, C-ELISA e FPA com suas limitações seriam técnicas eficazes para o diagnóstico de brucelose em búfalos no NEA, exigindo um ponto de corte adequado para garantir seu desempenho máximo nesta espécie.

Risk factors and detection of brucella ovis in naturally infected rams and ewes / Fatores de risco e detecção de brucella ovis em carneiros e ovelhas naturalmente infectados

The objective of this study was to verify the occurrence of ovine brucellosis using Agar Gel Immunodiffusion (AGID) and Polymerase Chain Reaction (PCR) techniques, as well as to identify the main risk factors associated with infection in sheep flocks belonging to municipalities in the microregion from Teresina, PI, Brazil. A total of 100 urine and blood samples were collected from sheep aged 6 months or older. The urine samples were submitted to conventional PCR and the blood samples were examined by the AGID technique. Of the 100 blood samples, 17 (17%) were reactive to the AGID test. In conventional PCR of 100 urine samples, six (6%) were positive. Risk factors associated to infection by B. ovis included the rearing system (OR=0.19), feed management (OR=0.05), presence of dystotic births (OR=4.50), miscarriages (OR=3.75) and source of water offered to the animals (OR=0.19). Thus, it was concluded that it is possible to detect the occurrence of animals with ovine brucellosis since PCR is a reliable method to confirm infection. Furthermore, there are risk factors associated to infection by B. ovis in the municipalities studied.

Objetivou-se verificar a ocorrência da brucelose ovina através das técnicas de Imunodifusão em Gel de Ágar (IDGA) e Reação em Cadeia da Polimerase (PCR), bem como identificar os principais fatores de risco associados à infecção nos rebanhos ovinos pertencentes a municípios da microrregião de Teresina, PI, Brasil. Foram colhidas 100 amostras de urina e de sangue de ovinos com idade superior ou igual a seis meses. As amostras de urina foram submetidas a PCR convencional e as amostras de sangue à técnica de IDGA. Das 100 amostras de sangue 17 (17%) foram reagentes ao teste de IDGA. Já na PCR convencional das 100 amostras de urina, seis (6%) foram positivas. Ressalta-se que três animais foram positivos em ambos os testes. Como fatores associados à infecção por B. ovis, observou-se o tipo de sistema de criação (OR=0,19), o manejo alimentar (OR=0,05), presença de partos distócicos (OR=4,50), abortamentos (OR=3,75) e a fonte de água fornecida aos animais (OR=0,19). Assim, conclui-se que foi possível detectar a ocorrência de animais com brucelose ovina, uma vez que a PCR é um método confirmatório. Além disso, há fatores de risco associados à infecção por B. ovis nos municípios estudados.

Fluorescent polarization assay, two versions of indirect and competitive enzyme- linked immunoassay for brucellosis diagnosis in vaccinated buffaloes (Bubalus bubalis) / Teste de polarização fluorescente, duas versões de imunoensaio enzimático indireto e imunoensaio competitivo para diagnóstico de brucelose em búfalos vacinados (Bubalus bubalis)

ABSTRACT: The fluorescence polarization assay (FPA), two variants (V) of the indirect enzyme-linked immunosorbent assay (I-ELISA) and the competitive enzyme-linked immunosorbent assay (C-ELISA) were evaluated in buffaloes to detect antibodies against Brucella spp. The V1 of I-ELISA identifies them through the monoclonal (M23) anti-bovine IgG (I-ELISAM23) and the V2 through the ProteinA / G (I-ELISA-A/G). Serum samples of 862 buffaloes (Bubalus bubalis) from the Northeast of Argentina (NEA) were analyzed using the complement fixation test (CFT) as the reference. Receiving Operator Characteristic (ROC) analysis defined for the area under the curve (AUC) determined the cutoff points, sensitivity (Se) and specificity (Sp) for each test. CFT identified 107 positive and 755 negative sera. The best AUC (0.986), Concordance with CFT (96.3%) and kappa value (0.843) was obtained by I-ELISA A/G test. This assay showed the highest Se (95.33%) and C-ELISA the highest Sp (97%). FPA failed to measure the antibodies in 23 (2.65%) serum samples due to unsuccessful reading. I-ELISA M23 proved to be ineffective to diagnose brucellosis in bubaline sera. The four serological tests showed cutoff points lower than those standardized for bovines. As conclusion, I-ELISA A/G, C-ELISA and FPA with its limitations would be effective techniques for the diagnosis of brucellosis in buffaloes in the NEA, requiring an appropriate cut-off point to guarantee their maximum performance in this species.

RESUMO: O ensaio de polarização de fluorescência (FPA), duas variantes (V) do ensaio imunoenzimático indireto (I-ELISA) e o ensaio imunoenzimático competitivo (C-ELISA), foram avaliados em búfalos para detectar anticorpos contra Brucella spp. O V1 do I-ELISA os identifica através do IgG monoclonal (M23) anti-bovino (I-ELISAM23) e o V2 ​​através da Proteína A / G (I-ELISA-A / G). Amostras de soro de 862 búfalos (Bubalus bubalis) do Nordeste da Argentina (NEA) foram analisadas usando o teste de fixação do complemento (CFT) como referência. A análise Receiving Operator Characteristic (ROC) definida pela área sob a curva (AUC) determinou os pontos de corte, sensibilidade (Se) e especificidade (Sp) de cada teste. A CFT identificou 107 soros positivos e 755 soros negativos. Os melhores valores de AUC (0.986), concordância com CFT (96.3%) e kappa (0.843) foram obtidos pelo teste I-ELISA A / G. Este ensaio mostrou a maior Se (95.33%) e C-ELISA a maior Sp (97%). O FPA falhou em medir os anticorpos em 23 (2,65%) amostras de soro devido à falha na leitura. O I-ELISA M23 provou ser ineficaz para o diagnóstico de brucelose em soros bubalinos. Os quatro testes sorológicos mostraram pontos de corte inferiores aos padronizados para bovinos. Em conclusão, I-ELISA A / G, C-ELISA e FPA com suas limitações seriam técnicas eficazes para o diagnóstico de brucelose em búfalos no NEA, exigindo um ponto de corte adequado para garantir seu desempenho máximo nesta espécie.

Fluorescent polarization assay, two versions of indirect and competitive enzyme- linked immunoassay for brucellosis diagnosis in vaccinated buffaloes (Bubalus bubalis) / Teste de polarização fluorescente, duas versões de imunoensaio enzimático indireto e imunoensaio competitivo para diagnóstico de brucelose em búfalos vacinados (Bubalus bubalis)

The fluorescence polarization assay (FPA), two variants (V) of the indirect enzyme-linked immunosorbent assay (I-ELISA) and the competitive enzyme-linked immunosorbent assay (C-ELISA) were evaluated in buffaloes to detect antibodies against Brucella spp. The V1 of I-ELISA identifies them through the monoclonal (M23) anti-bovine IgG (I-ELISAM23) and the V2 through the ProteinA / G (I-ELISA-A/G). Serum samples of 862 buffaloes (Bubalus bubalis) from the Northeast of Argentina (NEA) were analyzed using the complement fixation test (CFT) as the reference. Receiving Operator Characteristic (ROC) analysis defined for the area under the curve (AUC) determined the cutoff points, sensitivity (Se) and specificity (Sp) for each test. CFT identified 107 positive and 755 negative sera. The best AUC (0.986), Concordance with CFT (96.3%) and kappa value (0.843) was obtained by I-ELISA A/G test. This assay showed the highest Se (95.33%) and C-ELISA the highest Sp (97%). FPA failed to measure the antibodies in 23 (2.65%) serum samples due to unsuccessful reading. I-ELISA M23 proved to be ineffective to diagnose brucellosis in bubaline sera. The four serological tests showed cutoff points lower than those standardized for bovines. As conclusion, I-ELISA A/G, C-ELISA and FPA with its limitations would be effective techniques for the diagnosis of brucellosis in buffaloes in the NEA, requiring an appropriate cut-off point to guarantee their maximum performance in this species.(AU)

O ensaio de polarização de fluorescência (FPA), duas variantes (V) do ensaio imunoenzimático indireto (I-ELISA) e o ensaio imunoenzimático competitivo (C-ELISA), foram avaliados em búfalos para detectar anticorpos contra Brucella spp. O V1 do I-ELISA os identifica através do IgG monoclonal (M23) anti-bovino (I-ELISAM23) e o V2 ​​através da Proteína A / G (I-ELISA-A / G). Amostras de soro de 862 búfalos (Bubalus bubalis) do Nordeste da Argentina (NEA) foram analisadas usando o teste de fixação do complemento (CFT) como referência. A análise Receiving Operator Characteristic (ROC) definida pela área sob a curva (AUC) determinou os pontos de corte, sensibilidade (Se) e especificidade (Sp) de cada teste. A CFT identificou 107 soros positivos e 755 soros negativos. Os melhores valores de AUC (0.986), concordância com CFT (96.3%) e kappa (0.843) foram obtidos pelo teste I-ELISA A / G. Este ensaio mostrou a maior Se (95.33%) e C-ELISA a maior Sp (97%). O FPA falhou em medir os anticorpos em 23 (2,65%) amostras de soro devido à falha na leitura. O I-ELISA M23 provou ser ineficaz para o diagnóstico de brucelose em soros bubalinos. Os quatro testes sorológicos mostraram pontos de corte inferiores aos padronizados para bovinos. Em conclusão, I-ELISA A / G, C-ELISA e FPA com suas limitações seriam técnicas eficazes para o diagnóstico de brucelose em búfalos no NEA, exigindo um ponto de corte adequado para garantir seu desempenho máximo nesta espécie.(AU)

Risk factors and detection of brucella ovis in naturally infected rams and ewes / Fatores de risco e detecção de brucella ovis em carneiros e ovelhas naturalmente infectados

The objective of this study was to verify the occurrence of ovine brucellosis using Agar Gel Immunodiffusion (AGID) and Polymerase Chain Reaction (PCR) techniques, as well as to identify the main risk factors associated with infection in sheep flocks belonging to municipalities in the microregion from Teresina, PI, Brazil. A total of 100 urine and blood samples were collected from sheep aged 6 months or older. The urine samples were submitted to conventional PCR and the blood samples were examined by the AGID technique. Of the 100 blood samples, 17 (17%) were reactive to the AGID test. In conventional PCR of 100 urine samples, six (6%) were positive. Risk factors associated to infection by B. ovis included the rearing system (OR=0.19), feed management (OR=0.05), presence of dystotic births (OR=4.50), miscarriages (OR=3.75) and source of water offered to the animals (OR=0.19). Thus, it was concluded that it is possible to detect the occurrence of animals with ovine brucellosis since PCR is a reliable method to confirm infection. Furthermore, there are risk factors associated to infection by B. ovis in the municipalities studied.(AU)

Objetivou-se verificar a ocorrência da brucelose ovina através das técnicas de Imunodifusão em Gel de Ágar (IDGA) e Reação em Cadeia da Polimerase (PCR), bem como identificar os principais fatores de risco associados à infecção nos rebanhos ovinos pertencentes a municípios da microrregião de Teresina, PI, Brasil. Foram colhidas 100 amostras de urina e de sangue de ovinos com idade superior ou igual a seis meses. As amostras de urina foram submetidas a PCR convencional e as amostras de sangue à técnica de IDGA. Das 100 amostras de sangue 17 (17%) foram reagentes ao teste de IDGA. Já na PCR convencional das 100 amostras de urina, seis (6%) foram positivas. Ressalta-se que três animais foram positivos em ambos os testes. Como fatores associados à infecção por B. ovis, observou-se o tipo de sistema de criação (OR=0,19), o manejo alimentar (OR=0,05), presença de partos distócicos (OR=4,50), abortamentos (OR=3,75) e a fonte de água fornecida aos animais (OR=0,19). Assim, conclui-se que foi possível detectar a ocorrência de animais com brucelose ovina, uma vez que a PCR é um método confirmatório. Além disso, há fatores de risco associados à infecção por B. ovis nos municípios estudados.(AU)

Risk factors and detection of brucella ovis in naturally infected rams and ewes / Fatores de risco e detecção de brucella ovis em carneiros e ovelhas naturalmente infectados

The objective of this study was to verify the occurrence of ovine brucellosis using Agar Gel Immunodiffusion (AGID) and Polymerase Chain Reaction (PCR) techniques, as well as to identify the main risk factors associated with infection in sheep flocks belonging to municipalities in the microregion from Teresina, PI, Brazil. A total of 100 urine and blood samples were collected from sheep aged 6 months or older. The urine samples were submitted to conventional PCR and the blood samples were examined by the AGID technique. Of the 100 blood samples, 17 (17%) were reactive to the AGID test. In conventional PCR of 100 urine samples, six (6%) were positive. Risk factors associated to infection by B. ovis included the rearing system (OR=0.19), feed management (OR=0.05), presence of dystotic births (OR=4.50), miscarriages (OR=3.75) and source of water offered to the animals (OR=0.19). Thus, it was concluded that it is possible to detect the occurrence of animals with ovine brucellosis since PCR is a reliable method to confirm infection. Furthermore, there are risk factors associated to infection by B. ovis in the municipalities studied.

Objetivou-se verificar a ocorrência da brucelose ovina através das técnicas de Imunodifusão em Gel de Ágar (IDGA) e Reação em Cadeia da Polimerase (PCR), bem como identificar os principais fatores de risco associados à infecção nos rebanhos ovinos pertencentes a municípios da microrregião de Teresina, PI, Brasil. Foram colhidas 100 amostras de urina e de sangue de ovinos com idade superior ou igual a seis meses. As amostras de urina foram submetidas a PCR convencional e as amostras de sangue à técnica de IDGA. Das 100 amostras de sangue 17 (17%) foram reagentes ao teste de IDGA. Já na PCR convencional das 100 amostras de urina, seis (6%) foram positivas. Ressalta-se que três animais foram positivos em ambos os testes. Como fatores associados à infecção por B. ovis, observou-se o tipo de sistema de criação (OR=0,19), o manejo alimentar (OR=0,05), presença de partos distócicos (OR=4,50), abortamentos (OR=3,75) e a fonte de água fornecida aos animais (OR=0,19). Assim, conclui-se que foi possível detectar a ocorrência de animais com brucelose ovina, uma vez que a PCR é um método confirmatório. Além disso, há fatores de risco associados à infecção por B. ovis nos municípios estudados.

First study of Brucella ovis antibodies in purebred sheep flocks in the State of Parana, Brazil / [Primeiro estudo de anticorpos para Brucella ovis em rebanhos de ovinos puros de Origem, no estado do Paraná, Brasil]

Brucella ovis, a non-zoonotic species, is the etiological agent of ovine brucellosis, an infectious disease of clinical or subclinical occurrence in sheep flocks. Until then, there is no serological study of anti-Brucella ovis antibodies in purebred sheep herds. This study aimed to determine the presence of anti-Brucella ovis antibodies in purebred sheep flocks with breeding purposes from Parana State. Blood samples from 728 animals, of which 563 were females and 165 males, between 8 and 56 months of age from the six major sheep producing mesoregions of Parana, were submitted to detection of anti-Brucella ovis antibodies by the Agar Gel Immunodiffusion technique using an antigen from the bacteria Brucella ovis (Reo 198). The results indicate the presence of this disease in purebred sheep from Parana State in a low occurrence of 0.27% (2/728). The only two positive animals were rams, Santa Inês breed, from the same flock in the East Center region of Parana, without clinical disease. In conclusion, Brucella ovis is present in purebred sheep in Parana State, Brazil, and this low occurrence may have occurred due to rigorous breeding systems that may contribute to reduce the transmission of this disease.(AU)

Brucella ovis, espécie não zoonótica, é o agente etiológico da brucelose ovina, doença infecciosa de ocorrência clínica ou subclínica. Atualmente, não existe estudo sorológico de anticorpos anti-Brucella ovis em rebanhos de ovinos puros de origem. Este estudo teve como objetivo determinar a presença de anticorpos anti-Brucella ovis em rebanhos ovinos de raça pura de origem, com fins reprodutivos do estado do Paraná. Amostras de sangue de 728 animais, sendo 563 fêmeas e 165 machos, entre oito e 56 meses de idade, pertencentes a seis principais mesorregiões produtoras de ovinos no Paraná, foram submetidas à detecção de anticorpos anti-Brucella ovis pela técnica de imunodifusão em ágar gel usando-se um antígeno da bactéria Brucella ovis (Reo 198). Os resultados indicam a presença da doença em ovinos puros de origem do estado do Paraná em baixa ocorrência de 0,27% (2/728). Os dois únicos animais positivos foram reprodutores da raça Santa Inês, do mesmo rebanho da região Centro Leste do Paraná, sem manifestação clínica. Em conclusão, Brucella ovis está presente em ovinos puros de origem no estado do Paraná, e essa baixa ocorrência pode ter ocorrido devido a sistemas rigorosos de criação, que podem contribuir para a redução da transmissão dessa doença.(AU)

Antibody prevalence of Leptospira spp. and Brucella abortus in domestic cats from Araguaína, Tocantins, North Region of Brazil / Prevalência de anticorpos para Leptospira spp. e Brucella Abortus em gatos domésticos de Araguaína, Tocantins, Região Norte do Brasil

Leptospira spp. and Brucella abortus are bacterial pathogens that can infect humans and animals. The present study aimed to detect anti-Leptospira and anti-B. abortus antibodies and verified the presence of factors associated with seropositivity in cats. One hundred and eighty serum samples were collected from domestic cats (Felis silvestris catus) from the urban area of the municipality of Araguaína-Tocantins by phlebocentesis of the cephalic and jugular veins. The samples were subjected to detection of anti-Leptospira and anti-B.abortus antibodies, respectively, by microscopic seroagglutination and buffered acidified antigen testing, followed by confirmation by the 2-mercaptoethanol test and slow seroagglutination in tubes. Data from the epidemiological questionnaire (the age, sex, origin, breed, and presence of clinical signs) were analyzed using Epi Info® software with seropositivity data found to search for associated factors using the chi-square test. In the present study, the prevalence of Leptospira spp. was 5.56% (10/180). However, no sample was reactive to B. abortus. None of the studied variables were associated with seropositivity for the pathogens evaluated. Therefore, there is contact between Leptospira spp. and the feline population of the municipality, indicating the possibility of the circulation of pathogenic serovars and that the presence of anti-Leptospira antibodies does not depend on the variables analyzed.

Leptospira spp. e Brucella abortus são patógenos bacterianos que podem infectar humanos e animais. O presente estudo teve como objetivo detectar anticorpos anti-Leptospira e anti-B.abortus e verificar a presença de fatores associados com a soropositividade em gatos. Foram coletadas 180 amostras de soro de gatos domésticos (Felis silvestris catus) da zona urbana do município de Araguaína-Tocantins por flebocentese das veias cefálica e jugular. As amostras foram submetidas à detecção de anticorpos anti-Leptospira e anti-B. abortus, respectivamente, por soroaglutinação microscópica e teste do antígeno acidificado tamponado, seguido de confirmação pelo teste de 2-mercaptoetanol e soroaglutinação lenta em tubos. Os dados do questionário epidemiológico (idade, sexo, procedência, raça e presença de sinais clínicos) foram analisados no software Epi Info® com os dados de soropositividade encontrados para pesquisa de fatores associados pelo teste do qui-quadrado. No presente estudo, a prevalência de Leptospira spp. foi de 5,56% (10/180). No entanto, nenhuma amostra foi reativa para B. abortus. Nenhuma das variáveis estudadas foi associada com a soropositividade para os patógenos avaliados. Portanto, há contato entre Leptospiraspp. e a população felina do município, indicando a possibilidade de circulação de sorovares patogênicos e que a presença de anticorpos anti-Leptospira independe das variáveis analisadas.

Antibody prevalence of Leptospira spp. and Brucella abortus in domestic cats from Araguaína, Tocantins, North Region of Brazil / Prevalência de anticorpos para Leptospira spp. e Brucella Abortus em gatos domésticos de Araguaína, Tocantins, Região Norte do Brasil

Leptospira spp. and Brucella abortus are bacterial pathogens that can infect humans and animals. The present study aimed to detect anti-Leptospira and anti-B. abortus antibodies and verified the presence of factors associated with seropositivity in cats. One hundred and eighty serum samples were collected from domestic cats (Felis silvestris catus) from the urban area of the municipality of Araguaína-Tocantins by phlebocentesis of the cephalic and jugular veins. The samples were subjected to detection of anti-Leptospira and anti-B.abortus antibodies, respectively, by microscopic seroagglutination and buffered acidified antigen testing, followed by confirmation by the 2-mercaptoethanol test and slow seroagglutination in tubes. Data from the epidemiological questionnaire (the age, sex, origin, breed, and presence of clinical signs) were analyzed using Epi Info® software with seropositivity data found to search for associated factors using the chi-square test. In the present study, the prevalence of Leptospira spp. was 5.56% (10/180). However, no sample was reactive to B. abortus. None of the studied variables were associated with seropositivity for the pathogens evaluated. Therefore, there is contact between Leptospira spp. and the feline population of the municipality, indicating the possibility of the circulation of pathogenic serovars and that the presence of anti-Leptospira antibodies does not depend on the variables analyzed.(AU)

Leptospira spp. e Brucella abortus são patógenos bacterianos que podem infectar humanos e animais. O presente estudo teve como objetivo detectar anticorpos anti-Leptospira e anti-B.abortus e verificar a presença de fatores associados com a soropositividade em gatos. Foram coletadas 180 amostras de soro de gatos domésticos (Felis silvestris catus) da zona urbana do município de Araguaína-Tocantins por flebocentese das veias cefálica e jugular. As amostras foram submetidas à detecção de anticorpos anti-Leptospira e anti-B. abortus, respectivamente, por soroaglutinação microscópica e teste do antígeno acidificado tamponado, seguido de confirmação pelo teste de 2-mercaptoetanol e soroaglutinação lenta em tubos. Os dados do questionário epidemiológico (idade, sexo, procedência, raça e presença de sinais clínicos) foram analisados no software Epi Info® com os dados de soropositividade encontrados para pesquisa de fatores associados pelo teste do qui-quadrado. No presente estudo, a prevalência de Leptospira spp. foi de 5,56% (10/180). No entanto, nenhuma amostra foi reativa para B. abortus. Nenhuma das variáveis estudadas foi associada com a soropositividade para os patógenos avaliados. Portanto, há contato entre Leptospiraspp. e a população felina do município, indicando a possibilidade de circulação de sorovares patogênicos e que a presença de anticorpos anti-Leptospira independe das variáveis analisadas.(AU)

Epidemiological characterization and risk factors associated with Brucella ovis infection in sheep from the states of Rio Grande do Norte, Paraíba, and Sergipe / Caracterização epidemiológica e fatores de risco associados à infecção por Brucella ovis em ovinos dos estados do Rio Grande do Norte, Paraíba e Sergipe

This study aimed to determine the prevalence of ovine brucellosis in the states of Rio Grande do Norte, Paraíba, and Sergipe. A seroepidemiological survey was carried out in 121 properties under 23 municipalities between 2011 and 2012. The 1,034 serological samples collected from the sheep were subjected to the agar gel immunodiffusion (AGID) test using kits produced by the Paraná Institute of Technology (TECPAR). Anti-Brucella ovis antibodies were observed in 5.37% (70/1,304) of the animals evaluated, and the difference in the incidence of brucellosis between the adults and young animals of both sexes, and between the males and females was statistically significant (p < 0.05). The prevalence of brucellosis in Rio Grande do Norte, Paraíba, and was Sergipe 7.66% (36/470), 5.40% (13/241) and 3.54% (21/593), respectively. Of the municipalities visited, 91.30% (21/23) harbored herds with positive serology, and 42.15% (51/121) of the properties had at least one seropositive animal. The lack of training among the workers (p ? 0.05) (odds ratio = 3.68; 95% CI = 1.08-12.60; p = 0.038) was identified as a risk factor. The results obtained in this study indicate that the sheep from Rio Grande do Norte, Paraíba, and Sergipe are infected by B. ovis, thus necessitating the adoption of proper sanitary measures for preventing the spread of the disease in the herds.(AU)

O estudo teve como objetivo determinar a prevalência da Brucelose Ovina nos Estados do Rio Grandedo Norte, Paraíba e Sergipe. Foi realizado o levantamento soroepidemiológico em 121 propriedadesde 23 municípios durante os anos de 2011 e 2012. As 1.034 amostras sorológicas de ovinos foramsubmetidas à técnica de Imunodifusão em Gel de Ágar (IDGA), utilizando o kit produzido pelo Institutode Tecnologia do Paraná (TECPAR). Anticorpos anti-Brucella ovis foram observados em 5,37%(70/1.304) dos animais testados, havendo diferença estatística significativa (p < 0,05) para adultos ejovens de ambos os sexos, e entre machos e fêmeas. A prevalência encontrada no Estado do Rio Grandedo Norte, Paraíba e Sergipe foi de 7,66% (36/470), 5,40% (13/241) e 3,54% (21/593), respectivamente.Dos municípios visitados, 91,30% (21/23) eram compostos por rebanhos com sorologia positiva e42,15% (51/121) das propriedades possuíam pelo menos um animal soropositivo. A falta de capacitaçãode trabalhadores (p ≤ 0,05) (odds ratio = 3,68; IC 95% = 1,08-12,60; p = 0, 038) foi identificada comofator de risco. Os resultados obtidos neste trabalho indicam que a infecção por B. ovis encontra-sepresente nos ovinos dos estados do Rio Grande do Norte, Paraíba e Sergipe, sendo necessária a adoçãode medidas sanitárias para evitar a propagação da doença nos rebanhos.(AU)

Spatial and temporal trend analysis of bovine brucellosis in Brazil, 2014 to 2018 / Análise espacial e temporal da brucelose bovina no Brasil, 2014 a 2018

Bovine brucellosis, a zoonotic disease endemic to Brazil, is a serious public health problem. It is a notifiable disease that, like tuberculosis, is regulated through a national control and eradication program. The epidemiological status of bovine brucellosis must be characterized in order to direct measures aimed at controlling the disease. This study focused on analyzing the spatial and temporal distribution of bovine brucellosis in Brazil. An ecological and time series study was conducted based on secondary data reported by the National Animal Health Information System for cases of bovine brucellosis diagnosed in Brazil (2014 - 2018). The gross and average incidence rate of brucellosis was estimated per state. Joinpoint regression was applied to calculate the annual percentage change (APC) in incidence and to identify states with significant trend changes. Spatial analysis of animals with brucellosis was performed using Kernel density estimation. A total of 19,631 animals with bovine brucellosis were confirmed, and the average incidence rate varied from 0.03 to 33.93/100,000 cattle in Brazil. The highest density of positive animals was found in the states of Santa Catarina and Paraná, which can be considered areas of greater transmission of Brucella abortus. Reductions in gross incidence rates were observed in Paraná (APC: -13.2; 95% confidence interval [CI]: -20.3 ­ -5.4; p=0.01), Rondônia (APC: -44.7; 95%CI: -62.0 - -19.4; p=0.01), Mato Grosso do Sul (APC: -59.0; 95%CI: -77.7 - -24.5; p=0.01), Acre (APC: -40.0; 95%CI: -50.0 - -28.0; p=0.00), and Ceará (APC: -37.9; 95%CI: -50.9 - -21.4; p=0.00). The incidence rate significantly increased in Tocantins (APC: 122.1; 95%CI: 4.5 - 372.2; p=0.04). The findings of this study will be helpful in guiding surveillance and prevention measures aimed at reducing the incidence of bovine brucellosis in Brazil.(AU)

A brucelose bovina é uma zoonose endêmica no Brasil, constituindo um grave problema de saúde pública. É uma doença de notificação obrigatória e regulamentada nacionalmente por programa de controle e erradicação em conjunto com a tuberculose. A caracterização da situação epidemiológica da brucelose bovina é um aspecto importante para direcionar as ações de controle desta zoonose. O objetivo deste estudo foi analisar a distribuição espacial e temporal da brucelose bovina no Brasil. Foi realizado um estudo ecológico e de séries temporais com base em dados secundários relatados pelo Sistema de Informação em Saúde Animal para casos de brucelose bovina diagnosticados no Brasil (2014 - 2018). A incidência bruta e média da brucelose por unidade federativa foi estimada. A regressão joinpoint foi aplicada para calcular a variação percentual anual (APC) da incidência e identificar as unidades federativas com mudanças significativas de tendência. A análise espacial dos animais com brucelose foi realizada usando a estimativa de densidade de Kernel. Foram confirmados 19.631 animais com brucelose bovina e a incidência média variou entre 0,03 a 33,93/100.000 bovinos no Brasil. A maior densidade de animais positivos foi observada nos estados de Santa Catarina e Paraná, considerados áreas de maior transmissão para Brucella abortus. Reduções nas taxas de incidência bruta foram observadas no Paraná (APC: -13.2; intervalo de confiança [IC]95%: -20.3 - -5.4; p=0.01), Rondônia (APC: -44.7; IC95%: -62.0 - -19.4; p=0.01), Mato Grosso do Sul (APC: -59.0; IC95%: -77.7 - -24.5; p=0.01), Acre (APC: -40.0; IC95%: -50.0 - -28.0; p=0.00) e Ceará (APC: -37.9; IC95%: -50.9 - -21.4; p=0.00). Aumento significativo da tendência foi constatado em Tocantins (APC: 122.1; IC95%: 4.5 - 372.2; p=0.04). Espera-se que os resultados obtidos neste estudo auxiliem no direcionamento de ações de vigilância e de prevenção para reduzir a incidência da brucelose bovina no Brasil.(AU)

Seroprevalence and intercurrence of reproductive pathogens in cattle from family farms in North of Minas Gerais, Brazil / Soroprevalência e intercorrência de patógenos reprodutivos em bovinos da agricultura familiar no Norte de Minas Gerais, Brasil

The aims of the present study were: to estimate the seroprevalence of Bluetongue vírus (BTV), bovine alphaherpesvirus 1 (BoHV-1), bovine viral diarrhea virus (BVDV), Brucella abortus and Leptospira spp. in cattle from family farms in North of Minas Gerais; to determine the intercurrence and association among these pathogens; and to assess the possible associated factors to seropositive herds and animals. For this, 476 cows from 46 farms were sampled and evaluated serologically. The seroprevalence in herds and cattle was, respectively, for BTV 100% and 52.0%, for BoHV-1 95.7% and 48.6%, for BVDV 78.3% and 46.1%, for Leptospira spp. 76.1% and 29.1%, and for B. abortus was 0% in herd and cattle. More than 65% of the herds was simultaneously seropositive for BTV, BoHV-1, BVDV and Leptospira spp. Seropositivity for BoHV-1, Leptospira spp. serovar Autumnalis and serovar Hardjoprajitno were associated with abortion, whereas seropositivity for BVDV was associated with BoHV-1. Moreover, association among seropositivity for BVDV, BoHV-1 and Leptospira spp. was also observed. In conclusion, BTV, BoHV-1, BVDV and Leptospira spp. are highly seroprevalent and occurred simultaneously in cattle from family farms in Minas Gerais, indicating the need for the implementation of control measures to avoid economic losses related to these diseases.

Os objetivos do presente estudo foram: i) estimar a soroprevalência de Bluetongue virus (BTV), bovine alphaherpesvirus 1 (BoHV-1), bovine viral diarrhea virus (BVDV), Brucella abortus e Leptospira spp. em bovinos da agricultura familiar no Norte de Minas Gerais, Brasil; ii) determinar a intercorrência e associação entre esses patógenos; iii) e avaliar os possíveis fatores associados aos rebanhos e animais soropositivos. Para isso, 476 vacas de 46 fazendas foram amostradas e avaliadas sorologicamente. A soroprevalência de rebanhos e animais foi, respectivamente, para BTV de 100% e 52.0%, para BoHV-1 de 95.7% e 48.6%, para BVDV de 78.3% e 46.1%, para Leptospira spp. de 76.1% e 29.1% e para B. abortus de 0% para ambos rebanhos e bovinos. Mais de 65% dos rebanhos foram simultaneamente soropositivos para BTV, BoHV-1, BVDV e Leptospira spp. A soropositividade para BoHV-1, Leptospira spp. sorovar Autumnalis e sorovar Hardjoprajitno foram fatores associados com aborto, enquanto soropositividade para BVDV foi fator associado com BoHV-1. Além disso, associação entre a soropositividade para BVDV, BoHV-1 e Leptospira spp. foi observada. Em conclusão, BTV, BVDV, BoHV-1 e Leptospira spp. são altamente soroprevalentes e ocorrem simultaneamente em bovinos da agricultura familiar de Minas Gerais, indicando a necessidade da implementação de medidas de controle para evitar perdas econômicas relacionadas a essas doenças.

Seroprevalence of Brucella ovis-epididymitis, smooth-Brucella, leptospirosis, toxoplasmosis, and Maedi-Visna in sheep slaughtered in Minas Gerais State, Brazil / Soroprevalência de Brucella ovis, Brucella lisa, leptospirose, toxoplasmose e Maedi-Visna em ovinos abatidos em Minas Gerais, Brasil

The present study aimed to estimate the prevalence of antibodies against Brucella ovis-epididymitis, smooth-Brucella, leptospirosis, toxoplasmosis and Maedi-visna in sheep slaughtered in Minas Gerais, Brazil and to study their simultaneous occurrence, including caseous lymphadenitis, at sheep and flock levels. The study was conducted at a sheep slaughterhouse with Federal Inspection Service. Sera from 594 animals from 21 flocks were collected, in 2007. The agar gel immunodiffusion (AGID) was employed to detect anti-B. ovis and anti-Maedi Visna antibodies, whereas Rose Bengal (RB) and the 2-mercaptoethanol test (2ME) were used to test anti-smooth Brucella antibodies. For the detection of anti-Leptospiraantibodies, sera were examined by microscopic agglutination test (MAT), while for the detection of IgG antibodies to Toxoplasma gondii ELISA was used. Prevalence of antibodies against smooth Brucella, B. ovis-epididimitis, Leptospiraspp., toxoplasmosis and Maedi-Visna found in sheep from Minas Gerais was 0.00%, 24.04%, 25.96%, 10.46% and 3.08%, respectively; whereas the seroprevalence in flocks was 0.00%, 80.95%, 90.48%, 71.43% and 23.81%, respectively. Moreover, when data on antibodies anti-Corynebacterium pseudotuberculosis, previously obtained, were included, about 60% of the flocks showed animals that were exposed to four or more of the studied agents. However, only 25.47% of the sheep exhibited simultaneously antibodies against more than one pathogen. Thus, data from the present study on sheep slaughtered in Minas Gerais, Brazil, showed no antibodies to smooth-Brucella and a low frequency of antibodies anti-Maedi Visna lentivirus, and a high and widespread seroprevalence of B. ovis, Leptospira spp., and T. gondii among animals and flocks.(AU)

O presente estudo teve como objetivo estimar a prevalência de anticorpos contra Brucella ovis (epididimite ovina), Brucellalisa, leptospirose, toxoplasmose e Maedi-visna em ovinos abatidos em Minas Gerais, Brasil, e estudar sua ocorrência simultânea, incluindo linfadenite caseosa, nos ovinos e nos rebanhos. O estudo foi realizado em um abatedouro de ovinos com Serviço de Inspeção Federal. Soros de 594 animais de 21 rebanhos foram coletados, em 2007. A imunodifusão em gel de ágar (IDGA) foi empregada para detectar anticorpos anti-B. ovis e anticorpos anti-Maedi Visna, enquanto o teste do antígeno acidificado tamponado (AAT) e o teste de 2-mercaptoetanol (2ME) foram utilizados para testar anticorpos anti-Brucella lisa. Para a detecção de anticorpos anti-Leptospira, os soros foram examinados pelo teste de aglutinação microscópica (MAT), enquanto que para a detecção de anticorpos IgG para Toxoplasma gondii, foi usado o ELISA. A prevalência de anticorpos anti-Brucella lisa, B. ovis, Leptospira spp., toxoplasmose e Maedi-Visna encontrados em ovinos de Minas Gerais foi de 0,00%, 24,04%, 25,96%, 10,46% e 3,08%, respectivamente; enquanto a soroprevalência em rebanhos foi de 0,00%, 80,95%, 90,48%, 71,43% e 23,81%, respectivamente. Além disso, quando dados de anticorpos anti-Corynebacterium pseudotuberculosis, previamente obtidos, foram incluídos, cerca de 60% dos rebanhos apresentaram animais expostos a quatro ou mais dos agentes estudados. No entanto, apenas 25,47% dos ovinos exibiram simultaneamente anticorpos contra mais de um patógeno. Assim, os dados do presente estudo sobre ovinos abatidos em Minas Gerais, Brasil, mostram que ausência de anticorpos anti-Brucella lisa e baixa frequência de anticorpos anti-Maedi Visna, e uma soroprevalência alta e generalizada de B. ovis, Leptospira spp. e T. gondii entre animais e rebanhos.(AU)