Minimum inhibitory concentration of essential oils against Staphylococcus aureus isolated from dogs with external otitis / Concentração inibitória mínima de óleos essenciais contra Staphylococcus aureus isolados de cães com otite externa

Canine otitis externa is a disease that affects the external acoustic meatus of about 20% of dogs at some point in life, without predilection for race, age, or sex. It is a multifactorial disease whose etiology involves several microorganisms, detaching Staphylococcus aureus. Antimicrobials are the basis for treating this illness; however, due to the increase in antimicrobial resistance, conventional drugs have become ineffective, requiring the search for alternative therapies. In this context, essential oils (EOs) have great therapeutic potential due to their broad antimicrobial action. This study aimed to evaluate the minimum inhibitory concentration (MIC) in order to measure the MIC50 and MIC90 of gentamicin and EOs of Eugenia caryophyllata, Thymus vulgaris, Cymbopogon winterianus, Cymbopogon citratus, and Cinnamomum cassia against 62 Staphylococcus aureus strains isolated from the external acoustic meatus of dogs. All EOs showed antibacterial action against the studied microorganisms, and their MIC50 and MIC90 were as follows: Eugenia caryophyllata, 2.42 mg mL-1 and 7.25 mg mL-1; Thymus vulgaris, 9.51 mg mL-1 and 22.94 mg mL-1; Cymbopogon winterianus, 26.78 mg mL-1 and 157.79 mg mL-1; Cinnamomum cassia and Cymbopogon citratus, lower than 16.48 and 27.81 mg mL-1, with the same MIC for all isolates. The MIC50 and MIC90 found for gentamicin were 1µg mL-1 and 8 µg mL-1. The MIC range found to antibiotic in this assay was 0.5 µg mL-1 to 128 µg mL-1, and the isolates were classified as susceptible [48 strains (77.41%) - MIC range of 0.5-4.0 µg mL-1], intermediate [eight strains (12.90%) - (MIC = 8.0 µg mL-1], or resistant [six strains (9.68%) - MIC ≥ 16 µg mL-1]. The results, according to the in vitro assays, showed that resistance to gentamicin, one of the antimicrobials most commonly used to treat canine otitis, is present in the Staphylococcus aureus population evaluated. Additionally, the tested EOs have great potential for therapeutic use, however future studies should be carried out to evaluate their in vivo efficacy.(AU)

A otite canina externa é uma doença que afeta o meato acústico externo de até 20% dos cães em algum período de suas vidas, sem predileção por raça, idade ou sexo. Trata-se de uma doença multifatorial que tem Staphylococcus aureus como um dos principais agentes etiológicos. Antimicrobianos constituem a base para o tratamento desta enfermidade, entretanto, devido ao incremento da resistência antimicrobiana, os fármacos convencionais tem se tornado pouco eficazes, o que requer a busca por terapias alternativas. Neste contexto, os óleos essenciais (OE) apresentam grande potencial terapêutico devido a sua ampla ação antimicrobiana. Este trabalho visou detectar a concentração inibitória mínima (CIM), a partir da qual foram obtidos os índices de MIC50 e MIC90 para a gentamicina e para os OE de Eugenia caryophyllata, Thymus vulgaris, Cymbopogon winterianus, Cymbopogon citratus e Cinnamomum cassia contra 62 Staphylococcus aureus isolados do meato acústico externo de cães otopatas. Todos os OE mostraram ação antibacteriana contra os microrganismos estudados e foram detectadas as seguintes CIM50 e CIM90: Eugenia caryophyllata, 2,42 mg mL-1 e 7,45 mg mL-1; Thymus vulgaris, 9,51 mg mL-1 e 22,94 mg mL-1; Cymbopogon winterianus, 26,78 mg mL-1 e 157,79 mg mL-1; Cinnamomum cassia e Cymbopogon citratus com CIM menores que 16,48 e 27,81 mg mL-1, respectivamente já que estes apresentaram CIM única para todos os isolados testados. Para a gentamicina, foram obtidas CIM50 e CIM90 1µg mL-1 e 8 µg/m, respectivamente. Ademais, a faixa de CIM encontrada para o antibiótico variou de 0,5 a 128 µg mL-1, e os isolados foram classificados em susceptíveis [48 isolados (77,41%) - CIM na faixa de 0,5-4 µg mL-1], intermediários [8 isolados (12,90%) - (CIM = 8µg mL-1] e resistentes [6 isolados (9,68%) - CIM ≥16]. Os resultados encontrados mostraram que os micro-organismos testados tem potencial para desenvolver resistência antimicrobiana a terapêutica tradicional e que os OE, de acordo com os resultados in vitro, apresentam potencial de uso terapêutico, entretanto futuros estudos devem ser realizados para avaliar a eficácia dos OE in vivo.(AU)

Atividade do óleo essencial de Cinnamomum cassia contra Staphylococcus aureus- revisão / Cinnamomum cassia essential oil activity against Staphylococcus aureus ­ review

O objetivo deste trabalho foi apresentar uma revisão sobre a atividade do óleo essencial de Cinnamomum. cassia contra Staphylococcus aureus por meio de pesquisas nas bases Web of Science, Science Direct, Scopus, Lilacs e Medline. Para tanto, foram utilizados artigos que abordam os componentes químicos do óleo essencial (OE) de Cinnamomum cassia e sua atividade contra Staphylococcus aureus por meio de dados de diâmetro de inibição, Concentração Inibitória Mínima (CIM) e Concentração Bactericida Mínima (CBM), publicados entre 2011 a 2021. De 98 estudos identificados, 26 preencheram os critérios de inclusão. Os componentes químicos mais comumente encontrados no óleo essencial de C. cassia foram nesta ordem; cinamaldeído, na forma Trans/E, acetato de cinamila/ benzaldeido e cumarina/ eugenol. Os resultados mostraram que a parte da planta mais utilizada para a produção do óleo essencial foi a casca. Os resultados de CIM indicam que a maioria dos trabalhos apresentou atividade antimicrobiana do OE de C. cassia contra S. aureus e tiveram como principal resultado o uso deste óleo como um agente antimicrobiano natural no controle de patógenos de origem alimentar. Nas bases Scopus e Web of Science foi obtido o maior número de artigos.(AU)

The aim of this work was to present a review on the activity of Cinnamomum cassia essential oil against Staphylococcus aureus through research in the Web of Science, Science Direct, Scopus, Lilacs and Medline databases. Therefore, articles that address the chemical components of Cinnamomum cassia essential oil and its activity against Staphylococcus aureus were used through inhibition diameter data, Minimum Inhibitory Concentration (MIC) and Minimum Bactericidal Concentration (CBM), published between 2011 to 2021 Of 98 identified studies, 26 met the inclusion criteria. The chemical components most commonly found in C. cassia essential oil were in this order; Cinnamaldehyde in the form Trans/E, cinnamyl acetate/ benzaldehyde and coumarin/eugenol. The results showed that the most used part of the plant for the production of essential oil was the bark. The MIC results indicate that most of the works showed the antimicrobial activity of C. cassia essential oil against S. aureus and had as main result the use of this oil as a natural antimicrobial agent in the control of foodborne pathogens. The results showed the Scopus and Web of Science as the databases where more articles were found.(AU)

Antimicrobial properties of heterocyclic compounds against clinical mastitis isolates

ABSTRACT: Mastitis causes significant economic losses to the dairy cattle industry. The present study aimed to evaluate the antibacterial properties of 39 heterocyclic derivatives (1,3-thiazoles and 4-thiazolidinones) against clinical mastitis isolates from dairy cows. Milk samples were collected from cows with clinical mastitis and the bacterial species were identified by PCR. Antibacterial activity was assessed using the broth microdilution method. First, 39 heterocyclic compounds were tested against four bacterial isolates (Staphylococcus aureus, Streptococcus agalactiae, Corynebacterium bovis and Escherichia coli) randomly chosen from those recovered from the milk samples (Study 1). Subsequently, the compounds with the strongest antibacterial activity were tested against all the bacterial isolates recovered from the milk samples (Study 2). 1,3-thiazoles showed the strongest antibacterial activity, specially compounds 30 and 38, which also showed bactericidal properties according to their minimal inhibitory concentration (MIC) and minimal bactericidal concentration (MBC) values. Corynebacterium spp. and Enterobacteriaceae isolates were the most susceptible to compounds 30 and 38. Compounds 30 and 38 are promising targets for new antimicrobial agents.

RESUMO: A mastite causa significativas perdas econômicas à indústria leiteira bovina. O presente estudo teve como objetivo avaliar as propriedades antibacterianas de 39 derivados heterocíclicos (1,3-tiazóis e 4-tiazolidinonas) contra isolados clínicos de mastite em vacas leiteiras. Amostras de leite foram coletadas de vacas com mastite clínica e as espécies bacterianas isoladas foram identificadas por PCR. A atividade antibacteriana foi avaliada pelo método de microdiluição em caldo. Primeiramente, os 39 compostos heterocíclicos foram testados contra quatro isolados bacterianos (Staphylococcus aureus, Streptococcus agalactiae, Corynebacterium bovis e Escherichia coli) escolhidos aleatoriamente dentre os recuperados das amostras de leite (Estudo 1). Posteriormente, compostos com atividade antibacteriana mais forte foram testados contra todos os isolados bacterianos recuperados das amostras de leite (Estudo 2). Os compostos 1,3-tiazóis apresentaram a maior atividade antibacteriana, principalmente os compostos 30 e 38, que também apresentaram propriedades bactericidas de acordo com seus valores de concentração inibitória mínima (CIM) e concentração bactericida mínima (CBM). Os isolados Corynebacterium spp. e Enterobacteriaceae foram os mais suscetíveis aos compostos 30 e 38. Os compostos 30 e 38 mostraram-se promissores como novos agentes antimicrobianos.

Antimicrobial properties of heterocyclic compounds against clinical mastitis isolates / Propriedades antimicrobianas de compostos heterocíclicos contra isolados de mastite clínica

Mastitis causes significant economic losses to the dairy cattle industry. The present study aimed to evaluate the antibacterial properties of 39 heterocyclic derivatives (1,3-thiazoles and 4-thiazolidinones) against clinical mastitis isolates from dairy cows. Milk samples were collected from cows with clinical mastitis and the bacterial species were identified by PCR. Antibacterial activity was assessed using the broth microdilution method. First, 39 heterocyclic compounds were tested against four bacterial isolates (Staphylococcus aureus, Streptococcus agalactiae, Corynebacterium bovis and Escherichia coli) randomly chosen from those recovered from the milk samples (Study 1). Subsequently, the compounds with the strongest antibacterial activity were tested against all the bacterial isolates recovered from the milk samples (Study 2). 1,3-thiazoles showed the strongest antibacterial activity, specially compounds 30 and 38, which also showed bactericidal properties according to their minimal inhibitory concentration (MIC) and minimal bactericidal concentration (MBC) values. Corynebacterium spp. and Enterobacteriaceae isolates were the most susceptible to compounds 30 and 38. Compounds 30 and 38 are promising targets for new antimicrobial agents.(AU)

A mastite causa significativas perdas econômicas à indústria leiteira bovina. O presente estudo teve como objetivo avaliar as propriedades antibacterianas de 39 derivados heterocíclicos (1,3-tiazóis e 4-tiazolidinonas) contra isolados clínicos de mastite em vacas leiteiras. Amostras de leite foram coletadas de vacas com mastite clínica e as espécies bacterianas isoladas foram identificadas por PCR. A atividade antibacteriana foi avaliada pelo método de microdiluição em caldo. Primeiramente, os 39 compostos heterocíclicos foram testados contra quatro isolados bacterianos (Staphylococcus aureus, Streptococcus agalactiae, Corynebacterium bovis e Escherichia coli) escolhidos aleatoriamente dentre os recuperados das amostras de leite (Estudo 1). Posteriormente, compostos com atividade antibacteriana mais forte foram testados contra todos os isolados bacterianos recuperados das amostras de leite (Estudo 2). Os compostos 1,3-tiazóis apresentaram a maior atividade antibacteriana, principalmente os compostos 30 e 38, que também apresentaram propriedades bactericidas de acordo com seus valores de concentração inibitória mínima (CIM) e concentração bactericida mínima (CBM). Os isolados Corynebacterium spp. e Enterobacteriaceae foram os mais suscetíveis aos compostos 30 e 38. Os compostos 30 e 38 mostraram-se promissores como novos agentes antimicrobianos.(AU)

Antimicrobial properties of heterocyclic compounds against clinical mastitis isolates / Propriedades antimicrobianas de compostos heterocíclicos contra isolados de mastite clínica

Mastitis causes significant economic losses to the dairy cattle industry. The present study aimed to evaluate the antibacterial properties of 39 heterocyclic derivatives (1,3-thiazoles and 4-thiazolidinones) against clinical mastitis isolates from dairy cows. Milk samples were collected from cows with clinical mastitis and the bacterial species were identified by PCR. Antibacterial activity was assessed using the broth microdilution method. First, 39 heterocyclic compounds were tested against four bacterial isolates (Staphylococcus aureus, Streptococcus agalactiae, Corynebacterium bovis and Escherichia coli) randomly chosen from those recovered from the milk samples (Study 1). Subsequently, the compounds with the strongest antibacterial activity were tested against all the bacterial isolates recovered from the milk samples (Study 2). 1,3-thiazoles showed the strongest antibacterial activity, specially compounds 30 and 38, which also showed bactericidal properties according to their minimal inhibitory concentration (MIC) and minimal bactericidal concentration (MBC) values. Corynebacterium spp. and Enterobacteriaceae isolates were the most susceptible to compounds 30 and 38. Compounds 30 and 38 are promising targets for new antimicrobial agents.(AU)

A mastite causa significativas perdas econômicas à indústria leiteira bovina. O presente estudo teve como objetivo avaliar as propriedades antibacterianas de 39 derivados heterocíclicos (1,3-tiazóis e 4-tiazolidinonas) contra isolados clínicos de mastite em vacas leiteiras. Amostras de leite foram coletadas de vacas com mastite clínica e as espécies bacterianas isoladas foram identificadas por PCR. A atividade antibacteriana foi avaliada pelo método de microdiluição em caldo. Primeiramente, os 39 compostos heterocíclicos foram testados contra quatro isolados bacterianos (Staphylococcus aureus, Streptococcus agalactiae, Corynebacterium bovis e Escherichia coli) escolhidos aleatoriamente dentre os recuperados das amostras de leite (Estudo 1). Posteriormente, compostos com atividade antibacteriana mais forte foram testados contra todos os isolados bacterianos recuperados das amostras de leite (Estudo 2). Os compostos 1,3-tiazóis apresentaram a maior atividade antibacteriana, principalmente os compostos 30 e 38, que também apresentaram propriedades bactericidas de acordo com seus valores de concentração inibitória mínima (CIM) e concentração bactericida mínima (CBM). Os isolados Corynebacterium spp. e Enterobacteriaceae foram os mais suscetíveis aos compostos 30 e 38. Os compostos 30 e 38 mostraram-se promissores como novos agentes antimicrobianos.(AU)

Antimicrobial susceptibility profile of historical and recent Brazilian pig isolates of Pasteurella multocida / Perfil de suscetibilidade a antimicrobianos de isolados históricos e contemporâneos de Pasteurella multocida de suínos no Brasil

Pasteurella (P.) multocida is the causative agent of pneumonic pasteurellosis in swine, which is commonly associated with the final stages of enzootic pneumonia or porcine respiratory disease complex. Although this syndrome is one of the most common and important diseases of pigs, data on antimicrobial susceptibility of P. multocida isolates are uncommon in Brazil. Therefore, the present study was carried out to determine and to compare antimicrobial susceptibility profile of Brazilian P. multocida isolated from pigs with lesions of pneumonia or pleuritis during two-time periods. Historical isolates (period of 1981 to 1997; n=44) and recent isolates (period of 2011 to 2012; n=50) were used to determine the MIC of amoxicillin, enrofloxacin, florfenicol and tetracycline by microbroth dilution. Florfenicol had the lowest level of resistance for both historical and recent isolates (0% and 6%, respectively), while tetracycline had the highest (20.5% and 34%, respectively). Multi-drug resistance (MDR) to amoxicillin/florfenicol/tetracycline was observed in 6% of recent isolates. There was a significant increase (p˂0.05) in resistance for amoxicillin and enrofloxacin in recent isolates compared with historic isolates (3.8% and 18%, respectively), most likely due to the selective pressure of antimicrobial usage to treat and prevent P. multocida infections. The results of this study showed an increase of isolates resistant to important drugs used in treatment of P. multocida infections in pigs, demonstrating the need for the implementation of rational use of antimicrobials in Brazilian swine industry.(AU)

Pasteurella (P.) multocida é o agente da pasteurelose pneumônica em suínos, a qual é comumente associada com o estágio final da pneumonia enzoótica suína ou complexo das doenças respiratórias dos suínos. Apesar de ser uma das doenças mais comuns e importantes na suinocultura, dados sobre suscetibilidade antimicrobiana de isolados de P. multocida são raros no Brasil. Dessa forma, o presente estudo foi realizado para determinar e comparar o perfil de suscetibilidade de isolados de P. multocida de suínos com lesões de pneumonia ou pleurite no Brasil durante dois períodos. Isolados históricos (período de 1981 a 1997; n=44) e contemporâneos (período de 2011 a 2012; n=50) foram usados para determinar a concentração inibitória mínima (CIM) de amoxicilina, enrofloxacina, florfenicol e tetraciclina através do teste de microdiluição em caldo. Florfenicol apresentou o menor nível de resistência para ambos os isolados históricos e contemporâneos (0% e 6%, respectivamente), enquanto que tetraciclina apresentou o maior nível de resistência (20.5% e 34%, respectivamente). Resistência a múltiplos antimicrobianos (amoxicilina, florfenicol e tetraciclina) foi observada em 6% dos isolados recentes. Foi observado aumento significativo (p˂0.05) na resistência a amoxicilina e enrofloxacina em isolados recentes comparado com isolados históricos (3.8% e 18%, respectivamente), provavelmente devido à pressão de seleção de antimicrobianos usados no tratamento e prevenção de infecções causadas por P. multocida. Os resultados deste trabalho demostraram o aumento de isolados resistentes a importantes drogas utilizadas no tratamento de infecções causadas por P. multocida em suínos, evidenciando a necessidade da implementação do uso racional de antimicrobianos na suinocultura brasileira.(AU)

Antimicrobial susceptibility profile of historical and recent Brazilian pig isolates of Pasteurella multocida / Perfil de suscetibilidade a antimicrobianos de isolados históricos e contemporâneos de Pasteurella multocida de suínos no Brasil

Pasteurella (P.) multocida is the causative agent of pneumonic pasteurellosis in swine, which is commonly associated with the final stages of enzootic pneumonia or porcine respiratory disease complex. Although this syndrome is one of the most common and important diseases of pigs, data on antimicrobial susceptibility of P. multocida isolates are uncommon in Brazil. Therefore, the present study was carried out to determine and to compare antimicrobial susceptibility profile of Brazilian P. multocida isolated from pigs with lesions of pneumonia or pleuritis during two-time periods. Historical isolates (period of 1981 to 1997; n=44) and recent isolates (period of 2011 to 2012; n=50) were used to determine the MIC of amoxicillin, enrofloxacin, florfenicol and tetracycline by microbroth dilution. Florfenicol had the lowest level of resistance for both historical and recent isolates (0% and 6%, respectively), while tetracycline had the highest (20.5% and 34%, respectively). Multi-drug resistance (MDR) to amoxicillin/florfenicol/tetracycline was observed in 6% of recent isolates. There was a significant increase (p˂0.05) in resistance for amoxicillin and enrofloxacin in recent isolates compared with historic isolates (3.8% and 18%, respectively), most likely due to the selective pressure of antimicrobial usage to treat and prevent P. multocida infections. The results of this study showed an increase of isolates resistant to important drugs used in treatment of P. multocida infections in pigs, demonstrating the need for the implementation of rational use of antimicrobials in Brazilian swine industry.(AU)

Pasteurella (P.) multocida é o agente da pasteurelose pneumônica em suínos, a qual é comumente associada com o estágio final da pneumonia enzoótica suína ou complexo das doenças respiratórias dos suínos. Apesar de ser uma das doenças mais comuns e importantes na suinocultura, dados sobre suscetibilidade antimicrobiana de isolados de P. multocida são raros no Brasil. Dessa forma, o presente estudo foi realizado para determinar e comparar o perfil de suscetibilidade de isolados de P. multocida de suínos com lesões de pneumonia ou pleurite no Brasil durante dois períodos. Isolados históricos (período de 1981 a 1997; n=44) e contemporâneos (período de 2011 a 2012; n=50) foram usados para determinar a concentração inibitória mínima (CIM) de amoxicilina, enrofloxacina, florfenicol e tetraciclina através do teste de microdiluição em caldo. Florfenicol apresentou o menor nível de resistência para ambos os isolados históricos e contemporâneos (0% e 6%, respectivamente), enquanto que tetraciclina apresentou o maior nível de resistência (20.5% e 34%, respectivamente). Resistência a múltiplos antimicrobianos (amoxicilina, florfenicol e tetraciclina) foi observada em 6% dos isolados recentes. Foi observado aumento significativo (p˂0.05) na resistência a amoxicilina e enrofloxacina em isolados recentes comparado com isolados históricos (3.8% e 18%, respectivamente), provavelmente devido à pressão de seleção de antimicrobianos usados no tratamento e prevenção de infecções causadas por P. multocida. Os resultados deste trabalho demostraram o aumento de isolados resistentes a importantes drogas utilizadas no tratamento de infecções causadas por P. multocida em suínos, evidenciando a necessidade da implementação do uso racional de antimicrobianos na suinocultura brasileira.(AU)

Determinação da concentração inibitória mínima e bactericida da amoxicilina para bactéria S. agalactiae isolada de tilápia do nilo

Uma qualidade desejada do antimicrobiano é que este apresente eficácia na menor concentração possível do princípio ativo. Devemos atentarmos que quanto menor a concentração do fármaco a ser utilizado menor será resíduo ambiental. Como fase inicial do estudo de eficácia há necessidade de verificar a sensibilidade ao princípio ativo. Neste sentido, utilizou-se 10 concentrações do fármaco amoxicilina com redução progressiva da concentração na razão de 2: 11,98; 5,99; 2,99; 1,49; 0,74; 0,37; 0,18; 0,09, 0,045 e 0,022 μg.mL

Determinação da concentração inibitória mínima e bactericida da amoxicilina para bactéria S. agalactiae isolada de tilápia do nilo

Uma qualidade desejada do antimicrobiano é que este apresente eficácia na menor concentração possível do princípio ativo. Devemos atentarmos que quanto menor a concentração do fármaco a ser utilizado menor será resíduo ambiental. Como fase inicial do estudo de eficácia há necessidade de verificar a sensibilidade ao princípio ativo. Neste sentido, utilizou-se 10 concentrações do fármaco amoxicilina com redução progressiva da concentração na razão de 2: 11,98; 5,99; 2,99; 1,49; 0,74; 0,37; 0,18; 0,09, 0,045 e 0,022 μg.mL <->1. Para cada teste, foram ensaiados 3 tubos por concentração e o teste foi repetido 4 vezes. O meio utilizado foi caldo Mueller-Hinton com cátions ajustados suplementado com sangue lisado de cavalo a 5%. Para cada tubo teste havia a concentração final de 2,0 x 10 UFC de bactéria de Streptococcus agalactiae. Os mesmos foram incubados a 28°C por 48 horas. Após este período, uma alíquota de 100 μL de cada tubo foi dispersa em superfície em placa de petri com ágar sangue seletivo para S. agalactiae, incubados nas mesmas condições dos tubos. Realizado após 48 horas a contagem de unidades formadoras de colônia por mL (UFC.mL-1. Assim, os resultados para CIM 99,9% para todas as repetições realizadas oscilou de 0,09 a 0,18 μg.mL-1 e o CBM 100% oscilou entre 1,5 a 2 ,5 μg.mL-1. A média encontrada para controle positivo foi de 1,04 x 107 UFC.mL-1 e os tubos pertencentes ao controle negativo não apresentaram nenhuma multiplicação bacteriana. Em comparação a literatura de referência, amoxicilina triidratada apresentou para o isolado de S. agalactiae um valor de CIM e CBM baixo, considerando assim sensível e adequado para o ensaio.(AU)

Performance of rapid tests for carbapenemase detection among Brazilian Enterobacteriaceae isolates

The global emergence of carbapenemases led to the need of developing new methods for their rapid detection. The aim of this study was to evaluate the performance of the rapid tests for carbapenemase-producing and non-producing Enterobacteriaceae. Carbapenem non-susceptible Enterobacteriaceae from a surveillance study submitted to a multiplex real time PCR for carbapenemase detection were included in this study. The isolates were subjected to the rapid phenotypic tests Carba NP, Blue-Carba and Carbapenem Inactivation Method (CIM). A total of 83 carbapenemase-producing (43) and non-producing (40) isolates were included in the study. The sensitivity/specificity were 62.7%/97.5%, 95.3%/100%, and 74.4%/97.5% for Carba NP, Blue-Carba and CIM, respectively. Both Carba NP and Blue-Carba presented their final results after 75 min of incubation; the final results for CIM were obtained only after 8 h. Failure to detect OXA-370 carbapenemase was the main problem for Carba NP and CIM assays. As the Blue-Carba presented the highest sensitivity, it can be considered the best screening test. Conversely, CIM might be the easiest to perform, as it does not require special reagents. The early detection of carbapenemases aids to establish infection control measures and prevent carbapenemases to spread reducing the risk of healthcare associated infections and therapeutic failure.(AU)

In vitro antimicrobial susceptibility and genetic resistance determinants of Streptococcus agalactiae isolated from mastitic cows in Brazilian dairy herds / Suscetibilidade in vitro a antimicrobianos e determinantes genéticos de resistência em Streptococcus agalactiae isolados de mastite em rebanhos bovinos brasileiros

Streptococcus agalactiae is one of the main causative agents of bovine mastitis and is associated with several economic losses for producers. Few studies have evaluated antimicrobial susceptibility and the prevalence of genetic resistance determinants among isolates of this bacterium from Brazilian dairy cattle. This work aimed to evaluate the frequency of the antimicrobial resistance genes ermA, ermB, mefA, tetO, tetM, aphA3, and aad-6, and in vitro susceptibility to the antimicrobials amikacin, erythromycin, clindamycin, tetracycline, gentamicin, penicillin, ceftiofur, and cefalotin, and the associations between resistance genotypes and phenotypes among 118 S. agalactiae isolates obtained from mastitic cows in Brazilian dairy herds. Of the resistance genes examined, ermB was found in 19 isolates (16.1%), tetO in 23 (19.5%), and tetM in 24 (20.3%). The genes ermA, mefA, aphA3, and aad-6 were not identified. There was an association between the presence of genes ermB, tetM, and tetO and phenotypic resistance to erythromycin, clindamycin, and tetracycline. Rates of resistance to the tested antibiotics varied, as follows: erythromycin (19.5%), tetracycline (35.6%), gentamicin (9.3%), clindamycin (20.3%), penicillin (3.4%), and amikacin (38.1%); conversely, all isolates were susceptible to ceftiofur and cefalotin. Antimicrobial resistance testing facilitates the treatment decision process, allowing the most judicious choice of antibiotics. Moreover, it enables regional and temporal monitoring of the resistance dynamics of this pathogen of high importance to human and animal health.

Streptococcus agalactiae é um dos principais agentes causadores de mastite em bovinos e de consequentes perdas econômicas aos produtores. Poucos estudos que avaliaram a susceptibilidade a antimicrobianos e a presença de determinantes genéticos de resistência para este agente em bovinos leiteiros do Brasil. Este trabalho teve por objetivo avaliar a frequência dos genes de resistência a antimicrobianos ermA, ermB, mefA, tetO, tetM, aphA3, aad-6, bem como a susceptibilidade in vitro aos antimicrobianos amicacina, eritromicina, clindamicina, tetraciclina, gentamicina, penicilina, ceftiofur e cefalotina, e as associações entre genótipos e fenótipos de resistência em 118 isolados de S. agalactiae provenientes de casos de mastite em rebanhos bovinos brasileiros. Dentre os genes de resistência pesquisados, ermB foi encontrado em 19 isolados (16,1%), tetO em 23 (19,5%) e tetM em 24 (20,3%). Os genes ermA, mefA, apha3 e aad6 não foram detectados. Verificou-se associação entre a presença dos genes ermB, tetM e tetO e os fenótipos de resistência à eritromicina, clindamicina e tetraciclina. Foram encontrados diferentes índices de resistência aos antibióticos testados: Eritromicina (19,5%), tetraciclina (35,6%), gentamicina (9,3%), clindamicina (20,3%), penicilina (3,4%) e amicacina (38,1%). Todos os isolados foram susceptíveis ceftiofur e cefalotina. Os testes de resistência aos antimicrobianos auxiliam na tomadade decisões relacionadas aos tratamentos, permitindo a escolha mais criteriosa dos antimicrobianos e oacompanhamento espaço-temporal da dinâmica de resistência para este patógeno tão relevante na saúdehumana e animal.

In vitro antimicrobial susceptibility and genetic resistance determinants of Streptococcus agalactiae isolated from mastitic cows in Brazilian dairy herds / Suscetibilidade in vitro a antimicrobianos e determinantes genéticos de resistência em Streptococcus agalactiae isolados de mastite em rebanhos bovinos brasileiros

Streptococcus agalactiae is one of the main causative agents of bovine mastitis and is associated with several economic losses for producers. Few studies have evaluated antimicrobial susceptibility and the prevalence of genetic resistance determinants among isolates of this bacterium from Brazilian dairy cattle. This work aimed to evaluate the frequency of the antimicrobial resistance genes ermA, ermB, mefA, tetO, tetM, aphA3, and aad-6, and in vitro susceptibility to the antimicrobials amikacin, erythromycin, clindamycin, tetracycline, gentamicin, penicillin, ceftiofur, and cefalotin, and the associations between resistance genotypes and phenotypes among 118 S. agalactiae isolates obtained from mastitic cows in Brazilian dairy herds. Of the resistance genes examined, ermB was found in 19 isolates (16.1%), tetO in 23 (19.5%), and tetM in 24 (20.3%). The genes ermA, mefA, aphA3, and aad-6 were not identified. There was an association between the presence of genes ermB, tetM, and tetO and phenotypic resistance to erythromycin, clindamycin, and tetracycline. Rates of resistance to the tested antibiotics varied, as follows: erythromycin (19.5%), tetracycline (35.6%), gentamicin (9.3%), clindamycin (20.3%), penicillin (3.4%), and amikacin (38.1%); conversely, all isolates were susceptible to ceftiofur and cefalotin. Antimicrobial resistance testing facilitates the treatment decision process, allowing the most judicious choice of antibiotics. Moreover, it enables regional and temporal monitoring of the resistance dynamics of this pathogen of high importance to human and animal health.(AU)

Streptococcus agalactiae é um dos principais agentes causadores de mastite em bovinos e de consequentes perdas econômicas aos produtores. Poucos estudos que avaliaram a susceptibilidade a antimicrobianos e a presença de determinantes genéticos de resistência para este agente em bovinos leiteiros do Brasil. Este trabalho teve por objetivo avaliar a frequência dos genes de resistência a antimicrobianos ermA, ermB, mefA, tetO, tetM, aphA3, aad-6, bem como a susceptibilidade in vitro aos antimicrobianos amicacina, eritromicina, clindamicina, tetraciclina, gentamicina, penicilina, ceftiofur e cefalotina, e as associações entre genótipos e fenótipos de resistência em 118 isolados de S. agalactiae provenientes de casos de mastite em rebanhos bovinos brasileiros. Dentre os genes de resistência pesquisados, ermB foi encontrado em 19 isolados (16,1%), tetO em 23 (19,5%) e tetM em 24 (20,3%). Os genes ermA, mefA, apha3 e aad6 não foram detectados. Verificou-se associação entre a presença dos genes ermB, tetM e tetO e os fenótipos de resistência à eritromicina, clindamicina e tetraciclina. Foram encontrados diferentes índices de resistência aos antibióticos testados: Eritromicina (19,5%), tetraciclina (35,6%), gentamicina (9,3%), clindamicina (20,3%), penicilina (3,4%) e amicacina (38,1%). Todos os isolados foram susceptíveis ceftiofur e cefalotina. Os testes de resistência aos antimicrobianos auxiliam na tomadade decisões relacionadas aos tratamentos, permitindo a escolha mais criteriosa dos antimicrobianos e oacompanhamento espaço-temporal da dinâmica de resistência para este patógeno tão relevante na saúdehumana e animal.(AU)

USO INTRAMAMÁRIO DE ÓLEO ESSENCIAL DE MELALEUCA (Melaleuca alternifolia) EM VACAS BOVINAS E BUBALINAS LEITEIRAS

A mastite é um dos principais problemas encontrados em propriedades pecuárias leiteiras, afetando diretamente a produção e a lucratividade da atividade pela perda da saúde. Para prevenir ou tratar as infecções da mama usam-se antibióticos, todavia, o uso sem critério contribui com a resistência antimicrobiana um problema de saúde única. Mediante a pressão para uma redução do uso de antibióticos, cresce a busca por alternativas, entre essas o uso de medicamentos derivados de extratos vegetais. Objetivou-se investigar a eficácia do uso óleo essencial de melaleuca (OEM), derivado da árvore Melaleuca alternifolia na secagem de vacas bovinas Holandesas e bubalinas Murrah, assim como para o tratamento de mastites em vacas bovinas Jersey em lactação. Formulou-se um medicamento com uma concentração de 5% de OEM (M5), equivalente a 200mg de OEM por aplicação para proteção de vacas bovinas e bubalinas durante o período seco, e uma concentração de 10% (M10), equivalente a 400mg de OEM por aplicação para tratamento da mastite em vacas Jersey em lactação. Para a avaliação do OEM 5% (M5) determinou-se a concentração inibitória mínima (CIM) e a concentração bactericida mínima (CBM). Verificou-se a inocuidade por meio de exame físico específico (EF), ultrassonografia (US) e termografia infravermelha de tetos (TRI). A eficácia da proteção durante o período seco, foi avaliada pela comparação de exame de secreção por meio do California mastitis test (CMT) no momento da secagem (CMTs) e o CMT no pós-parto (CMTpp) e contagem de células somáticas (CCS) no momento antes da secagem (CCSs) e durante 100 dias de lactação (DEL) no pós-parto (CCSpp), assim como foi avaliada a ocorrência de mastite clínica (MC) durante os 100 DEL. Os valores experimentais foram comparados com grupo controle positivo (GCSEC, n=9), com terapia da vaca seca (TVS) com antibiótico comercial a base de cefalônio anidro 0,25g e excipiente q.s.p. 3,00g (Cepravin®) e sulfato de neomicina 400 mg, bacitracina 5.000 UI e veículo q.s.p. (Neomastic®). No estudo com búfalas Murrah (n= 12), comparou-se os resultados de forma retrospectiva perante dados históricos de lactação anterior. As vacas foram examinadas físico-clinicamente, por ultrassonografia e termografia. A saúde do úbere foi também monitorada nos primeiros 100 DEL posterior ao tratamento e indiretamente por meio da CCS e o CMT. No uso do óleo de melaleuca 10% (M10), em experimento duplo cego, no tratamento de vacas infectadas (CSS > 200.000 CCS/mL) no grupo com óleo de melaleuca (GOMAS, n=9), grupo placebo (GPMAS, n=10) e grupo controle negativo (GCMAS, n= 9), a avaliação da eficácia do tratamento, foi determinada por meio das taxas de cura bacteriológica (TCB) avaliadas comparadas antes do início do tratamento, no dia 0 (D0), 24 horas após o fim do tratamento, no dia 3 (D3) e 14 dias após o início do tratamento (D14) com aplicação do M10. A comparação entre grupos em relação ao estudo de secagem de vacas bovinas, revelou uma diferença (P<0,05) nos valores CCS, superiores para o grupo com OEM (GOSEC, n= 11) em relação ao GCSEC. Entretanto, o M5 demonstrou-se eficaz na prevenção de mastite clínica no pós-parto. Para o estudo de secagem de vacas bubalinas, não foram observadas diferenças de valores de CCS e CMT diferenças (P>0,05) entre as lactações. Para o estudo de tratamento de mastite inaparente, o exame físico (EF) não apresentou diferenças (P>0,05) na comparação entre e intragrupos; porém, observaram-se maiores ocorrências de MC para o GP (P=0,0019). Para o M10 observou-se um efeito bacteriostático, verificado pelo aumento transitório da cultura negativa no D3 (P=0,0338). O OEM, apesar de indicativos de inflamação aguda, mostrou-se seguro para uso por via intramamária nas concentrações testadas, sem efeitos adversos graves. O produto mostrou-se efetivo para proteção de vacas durante o período seco, porém ineficaz para o tratamento de vacas com mastite inaparente, apesar de observados uma ação bacteriostática, que deverá ser melhor investigada.

Mastitis is one of the main problems found in dairy farms, directly affecting the production and profitability of the activity due to loss of health. To prevent or treat intramammary infections, antibiotics are used, however the use without criteria, contributes to antimicrobial resistance a unique health problem. Through pressure to reduce the use of antibiotics, the search for alternatives is growing, including the use of medicines derived from plant extracts. The objective was to investigate the effectiveness of using tea tree oil (TTO), derived from the Melaleuca alternifolia tree in the dry-off Holstein-Friesian cattle and Murrah buffalo cows, as well as for the treatment of mastitis in lactating Jersey cows. A drug was formulated with a concentration of 5% of TTO (M5), equivalent to 200mg of TTO per application to protect bovine and buffalo cows during the dry period, and a concentration of 10% (M10), equivalent to 400mg of TTO by application for the treatment of mastitis in lactating Jersey cows. For the evaluation of the OEM 5% (M5) the minimum inhibitory concentration (MIC) and minimum bactericidal concentration (CBM) were determined. Innocuousness was verified by means of specific physical examination (PE), ultrasound (US) and infrared teat thermography (IRT). The effectiveness of protection during the dry period was assessed by comparing the secretion exam using the California mastitis test (CMT) at the time of drying (CMTdry) and the postpartum CMT (CMTpp) and somatic cell count (SCC) in the moment before drying (SCCdry) and during 100 days in milking (DIM) in the postpartum period (SCCpp), as well as the occurrence of clinical mastitis (CM) during the 100 DIM. The experimental values were compared with a positive control group (GCDRY, n = 9), with dry cow therapy (DCT) with commercial antibiotic based on 0.25g anhydrous cephalonium and excipient q.s.p. 3.00g (Cepravin®) and neomycin sulfate 400 mg, bacitracin 5,000 IU and vehicle q.s.p. (Neomastic®). In the Murrah buffalo study (n=12), the results were compared retrospectively against historical data on previous lactation. The cows were examined physically-clinically, by ultrasound and thermography. Udder health was also monitored in the first 100 DIM after treatment and indirectly through SCC and CMT. In the use of tea tree oil 10% (M10), in a double blind experiment, in the treatment of infected cows (SCC> 200,000 SCC/mL) in the group with tea tree oil (OGMAS, n=9), placebo group (PGMAS, n=10) and negative control group (CGMAS, n=9), the evaluation of treatment efficacy, was determined by means of the bacteriological cure rates (BTR) evaluated compared before the start of treatment, on day 0 (D0), 24 hours after the end of treatment, on day 3 (D3) and 14 days after the start of treatment (D14) with application of M10. The comparison between groups in relation to the drying study of bovine cows, revealed a difference (P <0.05) in the SCC values, higher for the group with TTO (OGDRY, n=11) in relation to the CGDRY. However, M5 has been shown to be effective in preventing clinical mastitis in the postpartum period. For the study dry-off buffalo cows, no differences in SCC and CMT values were observed (P> 0.05) between lactations. For the study of treatment of subclinical mastitis, the physical examination (FE) showed no differences (P> 0.05) in the comparison between and within groups; however, there were higher occurrences of CM for the PG (P = 0.0019). For M10, a bacteriostatic effect was observed, verified by the transient increase of the negative culture in D3 (P=0,0338). The TTO, despite being indicative of acute inflammation, proved to be safe for intramammary use at the concentrations tested, without serious adverse effects. The product proved to be effective for protecting cows during the dry period, but ineffective for the treatment of cows with subclinical mastitis, despite the observation of a bacteriostatic action, which should be further investigated.

SUSCEPTIBILIDADE DE LEVEDURAS ISOLADAS DE MASTITE BOVINA A ANTIMICROBIANOS

A mastite bovina é uma das doenças mais prevalentes e impactantes na pecuária leiteira em nível mundial. Trata-se de uma enfermidade de cunho multifatorial, causada por diferentes microrganismos. Entre estes, as leveduras são agentes incomuns, mas considerados emergentes por diversos pesquisadores. Considerando a importância crescente que estes agentes apresentam na etiologia da mastite nos rebanhos, é de grande relevância determinar o perfil de suscetibilidade dos mesmos aos antimicrobianos, buscando aprofundar o conhecimento da epidemiologia das mastites ocasionadas por estes agentes e de novas alternativas para o seu tratamento e controle. No presente estudo, 56 cepas de leveduras isoladas de casos de mastite em rebanhos bovinos de Minas Gerais foram avaliadas quanto aos perfis de suscetibilidade a antimicrobianos, utilizando-se a técnica de concentração inibitória mínima (CIM). Foram testados os antifúngicos anfotericina B, fluconazol, 5-FC flucitosina, itraconazol, posaconazol, ravuconazol, e voriconazol. Altos níveis de resistência e multirresistência foram observados para os antimicrobianos na população estudada. Os índices globais de resistência verificados foram: anfotericina B (89,28%), itraconazol (76,78%), ravuconazol (67,85%), fluconazol (51,78%), posaconazol (41,07%), fluocitocina (37,5%) e voriconazol (28,57%). Verificou-se que 21,42% dos isolados foram multidroga-resistentes. O estudo aponta a necessidade de permanente monitoramento da resistência entre os agentes micóticos causadores da mastite, a fim de mitigar o problema da resistência e suas implicações na saúde coletiva.

Bovine mastitis is one of the most prevalent and impacting diseases in dairy farming worldwide. The disease is considered to have multifactorial nature and is caused by different microorganisms. Among these organisms, yeasts are uncommon agents but they can be considered emerging agents by several researchers. Considering the growing importance that these agents have in the etiology of mastitis in herds, it is of great importance to determine their susceptibility profile against to antimicrobials, seeking to deepen the knowledge related to epidemiology of mastitis caused by these agents and of new alternatives for its treatment and control. In the present study, 56 yeasts strains isolated from cases of mastitis in cattle herds from Minas Gerais were evaluated for antimicrobial susceptibility profiles, using the minimal inhibitory concentration (MIC) technique. The isolates were tested against amphotericin B, fluconazole, 5-FC flucytosine, itraconazole, miconazole, natamycin, posaconazole, ravuconazole and voriconazole. High levels of resistance and multidrug resistance were observed for antimicrobials in the studied population. The overall resistance rates observed were: amphotericin B (89.28%), itraconazole (76.78%), ravuconazole (67.85%), fluconazole (51.78%), posaconazole (41.07%), fluocytocin (37.5%) and voriconazole (28.57%), and. It was found that 21.42% of the isolates were multidrug-resistant. The study points to the need for permanent monitoring of resistance among mycotic agents that cause mastitis, to mitigate the problem of resistance and its implications to public health.

RELAÇÃO FILOGENÉTICA, VIRULÊNCIA E RESISTÊNCIA AOS ANTIMICROBIANOS DE Salmonella spp ISOLADAS DE ALIMENTOS E PACIENTES CLÍNICOS: INTERFACE ENTRE SEGURANÇA ALIMENTAR E SAÚDE PÚBLICA

A salmonelose é uma das doenças transmitidas por alimentos mais prevalentes no mundo, com impacto na economia e saúde pública. Dentre os vários sorovares, destacamos S. Typhimirum por ser um dos mais envolvidos em surtos de origem alimentar e S. Heidelberg por ser um sorovar emergente associado a surtos humanos. A tese foi dividida em três capítulos. O primeiro, considerações gerais, relata os temas gerais e considerados importantes para contextualização do leitor sobre o que foi abordado nos capítulos seguintes. As cepas analisadas nos capítulos II e III foram isoladas de alimentos e pacientes humanos em diversos estados do Brasil entre 2011 e 2017, provenientes da coleção de culturas de Enteropatógenos Bacterianos do Instituto Oswaldo Cruz (IOC/FIOCRUZ-RJ), que também forneceu as informações sobre a sua origem. No segundo capítulo foram avaliadas 43 cepas de S. Typhimurium quanto a presença de genes de virulência (sefA, invA, agfA, avrA, lpfA, sivH, hilA, spvC, sopE) e genes associados a resistência aos antimicrobianos (qnrS e qnrA fluoroquinolonas; blaTEM e blaSHV - -lactâmicos) pela técnica de PCR. A concentração inibitória mínima (CIM) determinou a resistência fenotípica às classes de antimicrobianos consideradas importantes: meropenem: lactâmicos/ carbapenêmicos; colistina: polimixinas; ciprofloxacina: fluoroquinolonas; ceftriaxona: -lactâmicos/cefalosporinas de 3ª geração. Os resultados da PCR e CIM foram utilizados para construção de perfis de virulência e resistência. A disseminação e associação dos perfis de resistência e virulência foram discutidas após a genotipagem pela técnica do Pulsed Field Gel Electrophoresis (PFGE). No terceiro capítulo foram analisadas 36 cepas de S. Heidelberg, com objetivos e metodologia idênticas às do capítulo II, adicionado do sequenciamento do genoma completo de duas cepas filogeneticamente distintas realizado pelo Illumina HiSeq 2500, com o intuito de identificar o potencial virulento, de resistência, dificuldades de tratamento e risco a saúde pública.

Salmonellosis is one of the most prevalent foodborne diseases in the world, with an impact on the economy and public health. Among the various serovars, we highlight S. Typhimirum for being one of the most involved in food-borne outbreaks and S. Heidelberg for being an emerging serovar associated with human outbreaks. The thesis was divided into three chapters. The first, general considerations, reports the general themes considered important for the reader's contextualization of what was discussed in the following chapters. The strains analyzed in chapters II and III were isolated from food and human patients in several states of Brazil, between 2011 and 2017, from the collection of Bacterial Enteropathogens cultures of the Oswaldo Cruz Institute (IOC / FIOCRUZ-RJ), which also provided the information about its origin. In the second chapter, 43 strains of S. Typhimurium were evaluated for the presence of virulence genes (sefA, invA, agfA, avrA, lpfA, sivH, hilA, spvC, sopE) and genes associated with antimicrobial resistance (qnrS and qnrA - fluoroquinolones; blaTEM and blaSHV - -lactams) by the PCR technique. The minimum inhibitory concentration (MIC) determined the phenotypic resistance to the classes of antimicrobials considered important: meropenem: lactam / carbapenem; colistin: polymyxins; ciprofloxacin: fluoroquinolones; ceftriaxone: -lactams / 3rd generation cephalosporins. The PCR and CIM results were used to build virulence and resistance profiles. The dissemination and association of resistance and virulence profiles were discussed after genotyping using the Pulsed Field Gel Electrophoresis (PFGE) technique. In the third chapter, 36 strains of S. Heidelberg were analyzed, with objectives and methodology identical to those of chapter II, added by the sequencing of the complete genome of two phylogenetically distinct strains carried out by Illumina HiSeq 2500, in order to identify the virulent, resistance potential, treatment difficulties and public health risk.

Antimicrobial resistance profile of Streptococcus suis type 2 isolates from tonsils of slaughter pigs / Perfil de resistência a antimicrobianos de Streptococcus suis tipo 2 isolados a partir de tonsilas de suínos de abate

Background: Streptococcus suis is an emerging micro-organism responsible for causing meningitis, septicemia, arthritis, endocarditis and pneumonia, in addition to being an occupational zoonosis. In healthy pigs S. suis is located asymptomatically in the tonsils and may be disseminators sources pigs susceptible to the pathogen. To reduce these losses it is necessary to have effective control and treatment agent, however, it is known that antimicrobial resistance is a risk point for the success of the therapy. Thus, the aim of this study was to determine the resistance profile and the minimum inhibitory concentration of antimicrobial isolates of Streptococcus suis type 2 from tonsils of pigs at slaughter.Materials, Methods & Results: Tonsil samples from 302 slaughtered pigs were from three slaughterhouses, they were isolated and typified 219 S. suis type 2. The antibiogram was performed using the technique of Disk Diffusion and Agar 209 isolates in the following antimicrobials were tested: amoxicillin (10 µg), ampicillin (10 mcg), ceftiofur (30 mcg), ciprofloxacin (5 µg), doxycycline (30 mcg), enrofloxacin (5 mcg), erythromycin (15 µg), florfenicol (30 mcg), norfloxacin (10 µg), penicillin G (10 U) and tetracycline (30 µg). And 117 isolates were subjected to minimum inhibitory concentration (MIC), the following concentrations amoxicillin...(AU)

Antimicrobial resistance profile of Streptococcus suis type 2 isolates from tonsils of slaughter pigs / Perfil de resistência a antimicrobianos de Streptococcus suis tipo 2 isolados a partir de tonsilas de suínos de abate

Background: Streptococcus suis is an emerging micro-organism responsible for causing meningitis, septicemia, arthritis, endocarditis and pneumonia, in addition to being an occupational zoonosis. In healthy pigs S. suis is located asymptomatically in the tonsils and may be disseminators sources pigs susceptible to the pathogen. To reduce these losses it is necessary to have effective control and treatment agent, however, it is known that antimicrobial resistance is a risk point for the success of the therapy. Thus, the aim of this study was to determine the resistance profile and the minimum inhibitory concentration of antimicrobial isolates of Streptococcus suis type 2 from tonsils of pigs at slaughter.Materials, Methods & Results: Tonsil samples from 302 slaughtered pigs were from three slaughterhouses, they were isolated and typified 219 S. suis type 2. The antibiogram was performed using the technique of Disk Diffusion and Agar 209 isolates in the following antimicrobials were tested: amoxicillin (10 µg), ampicillin (10 mcg), ceftiofur (30 mcg), ciprofloxacin (5 µg), doxycycline (30 mcg), enrofloxacin (5 mcg), erythromycin (15 µg), florfenicol (30 mcg), norfloxacin (10 µg), penicillin G (10 U) and tetracycline (30 µg). And 117 isolates were subjected to minimum inhibitory concentration (MIC), the following concentrations amoxicillin...

Caracterização de Salmonella enterica subespécie enterica sorovar Cholerasuis provenientes de suínos no Brasil

Salmonella Choleraesuis é o agente causador de um quadro septicêmico em suínos que pode apresentar altas taxas de mortalidade nos animais infectados. No presente estudo foram avaliadas 93 estirpes de S. Choleraesuis provenientes de suínos com sinais clínicos de infecção. Foram avaliadas estirpes originadas de sete granjas localizadas nos Estados de São Paulo, Paraná, Santa Catarina e Minas Gerais obtidas durantes os anos de 2015, 2016 e 2017. As estirpes de Salmonella foram submetidas a reação em cadeia pela polimerase para confirmação do sorovar pela amplificação do gene fliC, em seguida foram caracterizadas quanto ao perfil de resistência a antimicrobianos e a caracterização genotípica pelo polimorfismo do comprimento de fragmentos amplificados (AFLP). A determinação do perfil de resistência a antimicrobianos revelou que as 93 estirpes foram resistentes a penicilina, doxiciclina, sulfadimetoxina, clindamicina, tilosina, tilmicosina e tiamulina, sendo, portanto, todas multirresistentes. Os antimicrobianos com menores taxas de resistência foram cefitiofur (0%), marbofloxacina (1,1%), neomicina (10,8%) e enrofloxacina (18,3%). As estirpes foram discriminadas em 17 perfis de resistência diferentes, o perfil mais frequente reuniu 39 estirpes (42%) resistentes a penicilina, ampicilina, doxiciclina, oxitetraciclina, florfenicol, sulfadimetoxina, gentamicina, tulatromicina, tilosina, tilmicosina, tiamulina e clindamicina. A análise das estirpes pelo AFLP indicou todas as 93 estirpes foram agrupadas em um único perfil com mais de 94% de similaridade. A partir dos dados obtidos é possível verificar que as estirpes de S. Choleraesuis isoladas de suínos apresentaram baixa variabilidade genética e alta frequência de resistência aos antimicrobianos mais usados em suinocultura.

Salmonella Choleraesuis is the causative agent of septicemia in pigs and may present high mortality rates in infected animals. In the present study, 93 strains of S. choleraesuis from pigs with clinical signs of infection were evaluated. Strains from seven farms located in the states of São Paulo, Paraná, Santa Catarina and Minas Gerais obtained during the years 2015, 2016 and 2017 were evaluated. Salmonella strains were submitted to polymerase chain reaction for confirmation of serovar by amplification of the fliC gene were then characterized for antimicrobial resistance profile and genotype characterization by amplified fragment length polymorphism (AFLP). The determination of the antimicrobial resistance profile revealed that the 93 strains were resistant to penicillin, doxycycline, sulfadimethoxine, clindamycin, tylosin, tilmicosin and tiamulin, and were therefore multiresistant. The antimicrobials with the lowest resistance rates were cefitiofur (0%), marbofloxacin (1.1%), neomycin (10.8%) and enrofloxacin (18.3%). The strains were discriminated in 17 different resistance profiles, the most frequent profile consisted of 39 strains (42%) resistant to penicillin, ampicillin, doxycycline, oxytetracycline, florfenicol, sulfadimetoxin, gentamicin, tulathromycin, tylosin, tilmicosin, tiamulin and clindamycin. Analysis of the strains by AFLP indicated that all 93 strains were grouped into a single profile with more than 94% similarity. From the data obtained it is possible to verify that the strains of S. Choleraesuis isolated from pigs presented low genetic variability and high frequency of resistance to the antimicrobials most used in swine production systems.

POTENCIAL ANTIOXIDANTE E ANTIMICROBIANO DOS EXTRATOS AQUOSO E ETANÓLICO DA POLPA DOS FRUTOS DE Hymenaea stigonocarpa

O estudo de plantas medicinais nos proporcionam uma vasta aprendizagem para o uso associado a medicações hoje conhecidas. Nos últimos anos vem se observando o aumento das pesquisas para produtos derivados destas plantas se mostrando um crescente e promissor mercado. A Hymenaea stigonocarpa Mart. ex Hayne, uma árvore de nome popular jatobá-do-cerrado, tendo uso comum para o tratamento de problemas respiratórios, como vermífugo, antifúngico e antioxidante. A maioria dos estudos com esta árvore volta-se para a casca e as folhas, porém tem mais uma parte dessa planta que tem uso tradicional, o fruto, este é um legume seco que apresenta frutificação no mês de agosto e é popularmente utilizada para o desenvolvimento de farinha e como antioxidante. O objetivo do presente estudo foi avaliar a atividade antibacteriana e antioxidante do extrato da polpa do fruto da H. stigonocarpa. Os frutos foram coletados em Uberlândia - MG e os extratos preparados a partir da farinha do fruto, obtendo-se extratos etanólico e aquoso. As concentrações inibitórias mínimas (CIM) foram determinadas frente a Staphylococcus aureus, nas concentrações de 100, 50, 25, 12,5, 6,25 e 3,125%. Para as atividades antioxidantes foram realizados três testes o primeiro é a capacidade antioxidante em sistema modelo de co-oxidação do -caroteno/ácido linoléico nas concentrações de 1,0; 0,75; 0,5 e 0,25 mg mL-1, tendo sido utilizado o trolox como padrão-referência. O segundo é o método de sequestro dos radicais livre (DPPH), realizado com as concentrações do primeiro procedimento, tendo como controle negativo o metanol. O terceiro método foi o de redução do ferro (FRAP), em que a percentagem de atividade antioxidante foi calculada em relação a uma curva padrão de sulfato ferroso. O valor do CIM foi determinado após 24 h observando a inibição do crescimento bacteriano até 25% para o extrato aquoso e 12,5% para o extrato etanólico, o que sugere uma alta atividade antibacteriana por ambos extratos, sendo esse, por ser produto de um fruto, muito provável a produção de um medicamento fitoterápico sem toxicidade. Pelo método da co-oxidação do -caroteno/ácido linoleico o extrato etanólico a uma concentração 1 mg mL-1 no tempo de 120 minutos apresentou 71,86% de potencial antioxidante, o extrato aquoso a uma concentração 1 mg mL-1 no tempo de 120 minutos apresentou 66,08% desse mesmo potencial utilizando esse método, classificando assim a atividade antioxidante, como alta. De modo geral o extrato etanólico da polpa H. stigonocarpa apresentou maior capacidade antioxidante pelos métodos DPPH e FRAP, essa diferença pode ser atribuída a diferenças nos componentes extraídos pelo extrato etanólico. Conclui-se que nas condições experimentais avaliadas o extrato etanólico e aquoso de jatobá apresentaram alto potencial antioxidante, também apresentaram alta atividade frente a bactéria Staphylococcus aureus, esses resultados são muito promissores e abrem portas para mais estudos objetivando o desenvolvimento de um medicamento fitoterápico.

The study of medicinal plants provides us with extensive learning for the use associated with today's known medications. In recent years, it has been observing the increase of research for products derived from these plants showing a growing and promising market. The Hymenaea stigonocarpa Mart. Ex Hayne, a popular name tree Jatobá, having common use for the treatment of respiratory problems, such as vermifuge, antifungal and antioxidant. Most studies with this tree turn to the bark and the leaves, but there is one more part of that plant that has traditional use, the fruit, this is a dried vegetable that presents fruition in August and is popularly used for the development of flour and as an antioxidant. The objective of this study was to evaluate the antibacterial and antioxidant activity of the pulp extract of the fruit of H. Stigonocarpa. The fruits were collected in Uberlândia-MG and the extracts prepared from the flour of the fruit, obtaining ethanoic and aqueous extracts. The minimum injunctions concentrations (MIC) were determined in the face of Staphylococcus aureus, in the concentrations of 100, 50, 25, 12.5, 6.25 and 3.125%. For the antioxidant activities three tests were performed the first is the antioxidant capacity in co-oxidation model system of -carotene/linoleic acid in concentrations of 1.0; 0.75; 0.5 and 0.25 mg mL-1, the Trolox was used as standard reference. The second is the method of kidnapping of free radicals (DPPH), carried out with the concentrations of the first procedure, having as negative control the methanol. The third method was the iron reduction (fraps), in which the percentage of antioxidant activity was calculated in relation to a standard curve of ferrous sulfate. The value of the CIM was determined after 24 h observing the inhibition of bacterial growth up to 25% for the aqueous extract and 12.5% for the ethanoic extract, which suggests a high antibacterial activity by both statements, being the product of a fruit, very likely the production of an herbal medicine without toxicity. By the co-oxidation method of the -carotene/linoleic acid, the ethanoic extract to a concentration 1 mg mL-1 in the time of 120 minutes presented 71.86% of antioxidant potential, the aqueous extract to a concentration 1 mg ml-1 in the time of 120 minutes presented 66.08% of this same potential using this method, thus classifying the antioxidant activity as high. In general, the pulp ethanoic extract H. Stigonocarpa presented greater antioxidant capacity by the DPPH and fraps methods, this difference can be attributed to differences in the components extracted by the ethanoic extract. It is concluded that in the experimental conditions evaluated the ethanoic and aqueous extract of jatobá presented high antioxidant potential, also presented high activity in front of the bacterium Staphylococcus aureus, these results are very promising and open doors for further studies aiming at the development of a herbal medicine.

Antibacterial activity tannin-rich fraction from leaves of Anacardium humile

In vitro tests conducted with extracts rich in tannins have identified several biological activities of this class of substance. Thus, this paper intends to evaluate the antibacterial activity of tannin-rich fraction obtained from leaf extracts of Anacardium humile A.St.-Hil. Extracts of A. humile leaves in 70% acetone were semi-purified with ethyl acetate and butanol. We quantified the total tannins of the semi-purified fractions, of the crude extract and of aqueous residues and then performed tests of the antibacterial activity of the tannins against Staphylococcus aureus ATCC 6538, Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 and Enterococcus faecalis ATCC 29212. All positive extracts underwent tannin isolation using a Sephadex LH-20 column. The tannins isolated from the samples were quantified and tested for the minimal inhibitory concentrations (MIC) and minimum bactericidal concentrations (MBC). The tannins from crude extracts, semi-purifications and residues showed inhibition of S. aureus growth with MIC=500 g mL-1. All tannin fractions showed MIC against all strains and MBC, except against E. faecalis. The tannin fractions from Anacardium humile have antibacterial activity against Staphylococcus aureus, Pseudomononas aeruginosa and Enterococcus faecalis and, therefore, may be promising for future synthesis of new antibacterial agents.

Testes in vitro realizados com extratos ricos em taninos têm identificado muitas atividades biológicas dessa classe de substâncias. Nesse contexto, esse artigo propõe a avaliação da atividade antibacteriana de frações tânicas, obtidas de extratos de folhas de Anacardium humile A.St.-Hil. Extratos de A. humile em acetona 70% foram particionados com acetato de etila e butanol. Foram quantificados taninos totais das frações particionadas, do extrato bruto e dos resíduos aquosos, e foi realizado teste de atividade antibacteriana dos taninos contra Staphylococcus aureus ATCC 6538, Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 e Enterococcus faecalis ATCC 29212. Todos os extratos positivos foram submetidos ao isolamento de taninos, utilizando-se coluna de Sephadex LH-20. Os taninos isolados das amostras foram quantificados e testados sua concentração inibitória mínima (CIM) e concentração bactericida mínima (CBM). Os taninos do extrato bruto, partições e resíduos apresentaram inibição do crescimento de S.aureus com CIM =500 g mL-1. As frações tânicas apresentaram CIM contra todas as cepas e CBM, exceto contra E. faecalis. As frações tânicas de Anacardium humile possuem atividade antibacteriana contra Staphylococcus aureus, Pseudomononas aeruginosa e Enterococcus faecalis e, portanto, podem ser promissoras em sínteses futuras de novos agentes antimicrobianos.