Causes of abortion in dairy cows in Uruguay / Causas de aborto em bovinos de leite no Uruguai

A case series study was conducted to determine the frequency of causes of abortion in dairy cattle in Uruguay. The sample size of 102 cases was composed of 53 fetuses, 35 fetuses with placentas, and 14 placentas without an associated fetus. All cases underwent gross and microscopic pathologic examinations as well as microbiological and serological testing. The etiology was determined in 54 (53%) of cases, 51 of which were caused by infectious agents. Within the observed 102 cases, 30 (29%) were caused by Neospora caninum, six (6%) by Coxiella burnetii and two (2%) by Campylobacter fetus subsp. venerealis. Bovine Parainfluenza-3 virus and Salmonella enterica serovar Newport caused one abortion each. Opportunistic bacteria (Escherichia coli, Streptococcus sp., Staphylococcus sp., Mannheimia sp., Trueperella pyogenes, and Providencia stuartii) were associated with 11 abortions. In two cases the fetal death was attributed to dystocia, and in one case the fetus had a congenital mesothelioma. Bovine viral diarrhea virus (BVDV) infection was identified in three fetuses; two of which were co-infected with and had typical lesions of N. caninum. No lesions were observed in the other fetus infected by BVDV. Leptospira interrogans was identified in one fetus without lesions. Despite the relatively low overall success rate in establishing an etiological diagnosis in cases of abortion in cattle, a systemic workup of bovine abortion is necessary to establish prevention and control strategies. This also facilitates monitoring and surveillance of reproductive diseases in dairy cattle, some of which represent a risk to public health.(AU)

Uma série de casos foi estudada para determinar a frequência de causas do aborto em bovinos leiteiros no Uruguai. A amostra, de 102 casos, foi composta por 53 fetos, 35 fetos com placentas e 14 placentas sem feto associado. Todos os casos foram submetidos a exames patológicos macroscópicos e microscópicos, além de testes microbiológicos e sorológicos. A etiologia foi determinada em 54 (53%) dos casos, 51 dos quais foram causados por agentes infecciosos. Nos 102 casos observados, 30 (29%) foram causados por Neospora caninum, seis (6%) por Coxiella burnetii e dois (2%) por Campylobacter fetus subsp. venerealis. O vírus da Parainfluenza-3 e Salmonella enterica serovar Newport causaram um aborto cada. Bactérias oportunistas (Escherichia coli, Streptococcus sp., Staphylococcus sp., Mannheimia sp., Trueperella pyogenes e Providencia stuartii) foram associadas a 11 abortos. Em dois casos, a morte fetal foi atribuída a distocia e, em um caso, o feto apresentava mesotelioma congênito. A infecção pelo vírus da diarreia viral bovina (BVDV) foi identificada em três fetos; dois dos quais foram co-infectados e apresentavam lesões típicas de N. caninum. Não foram observadas lesões no outro feto infectado pelo BVDV. Leptospira interrogans foi identificada em um feto sem lesões. Apesar da relativamente baixa taxa de sucesso no diagnóstico etiológico nos casos de aborto em bovinos, é necessário o diagnóstico sistemático dos abortos para estabelecer estratégias de prevenção e controle. Isso também facilita o monitoramento e a vigilância de doenças reprodutivas em bovinos leiteiros, algumas das quais representam um risco para a saúde pública.(AU)

Bovine genital campylobacteriosis: main features and perspectives for diagnosis and control / Campilobacteriose genital bovina: principais características e perspectivas para o diagnóstico e controle

Bovine genital campylobacteriosis (BGC) is a venereal disease caused by Campylobacter fetus subsp. venerealis. In countries with large cattle herds, such as Brazil, where the use of natural breeding as a reproductive strategy is a common practice, BGC is considered an important cause of reproductive failure and economic losses. In these cases, the bull is the asymptomatic carrier of the bacterium and the infected females can have infertility and even abortions. The techniques for the diagnosis of C. fetus are isolation in culture medium and identification by biochemical tests, immunofluorescence, immunoenzymatic assays and molecular techniques. Disease control is based on vaccination with bacterins. This review described the epidemiology, etiology, pathogenesis, and advances in the diagnosis and control of BGC.(AU)

A campilobacteriose genital bovina (CGB) é uma importante enfermidade de caráter venéreo causada por Campylobacter fetus subsp. venerealis. Em países com grandes rebanhos bovinos, como o Brasil, onde o uso da monta natural como estratégia reprodutiva é uma prática corrente, a CGB é considerada uma importante causa de falhas reprodutivas e perdas econômicas. Nestes casos, o touro é o portador assintomático da bactéria e as fêmeas infectadas podem apresentar infertilidade e até mesmo abortos. As técnicas para o diagnóstico de C. fetus são o isolamento em meio de cultura e identificação por testes bioquímicos; imunofluorescência; ensaios imunoenzimáticos e técnicas moleculares. O controle da doença é baseado em vacinação. Neste sentido, esta revisão consiste em uma abordagem sobre a epidemiologia, a etiologia, a patogenia, os avanços no diagnóstico e controle da CGB.(AU)

Causes of abortion in dairy cows in Uruguay / Causas de aborto em bovinos de leite no Uruguai

A case series study was conducted to determine the frequency of causes of abortion in dairy cattle in Uruguay. The sample size of 102 cases was composed of 53 fetuses, 35 fetuses with placentas, and 14 placentas without an associated fetus. All cases underwent gross and microscopic pathologic examinations as well as microbiological and serological testing. The etiology was determined in 54 (53%) of cases, 51 of which were caused by infectious agents. Within the observed 102 cases, 30 (29%) were caused by Neospora caninum, six (6%) by Coxiella burnetii and two (2%) by Campylobacter fetus subsp. venerealis. Bovine Parainfluenza-3 virus and Salmonella enterica serovar Newport caused one abortion each. Opportunistic bacteria (Escherichia coli, Streptococcus sp., Staphylococcus sp., Mannheimia sp., Trueperella pyogenes, and Providencia stuartii) were associated with 11 abortions. In two cases the fetal death was attributed to dystocia, and in one case the fetus had a congenital mesothelioma. Bovine viral diarrhea virus (BVDV) infection was identified in three fetuses; two of which were co-infected with and had typical lesions of N. caninum. No lesions were observed in the other fetus infected by BVDV. Leptospira interrogans was identified in one fetus without lesions. Despite the relatively low overall success rate in establishing an etiological diagnosis in cases of abortion in cattle, a systemic workup of bovine abortion is necessary to establish prevention and control strategies. This also facilitates monitoring and surveillance of reproductive diseases in dairy cattle, some of which represent a risk to public health.(AU)

Uma série de casos foi estudada para determinar a frequência de causas do aborto em bovinos leiteiros no Uruguai. A amostra, de 102 casos, foi composta por 53 fetos, 35 fetos com placentas e 14 placentas sem feto associado. Todos os casos foram submetidos a exames patológicos macroscópicos e microscópicos, além de testes microbiológicos e sorológicos. A etiologia foi determinada em 54 (53%) dos casos, 51 dos quais foram causados por agentes infecciosos. Nos 102 casos observados, 30 (29%) foram causados por Neospora caninum, seis (6%) por Coxiella burnetii e dois (2%) por Campylobacter fetus subsp. venerealis. O vírus da Parainfluenza-3 e Salmonella enterica serovar Newport causaram um aborto cada. Bactérias oportunistas (Escherichia coli, Streptococcus sp., Staphylococcus sp., Mannheimia sp., Trueperella pyogenes e Providencia stuartii) foram associadas a 11 abortos. Em dois casos, a morte fetal foi atribuída a distocia e, em um caso, o feto apresentava mesotelioma congênito. A infecção pelo vírus da diarreia viral bovina (BVDV) foi identificada em três fetos; dois dos quais foram co-infectados e apresentavam lesões típicas de N. caninum. Não foram observadas lesões no outro feto infectado pelo BVDV. Leptospira interrogans foi identificada em um feto sem lesões. Apesar da relativamente baixa taxa de sucesso no diagnóstico etiológico nos casos de aborto em bovinos, é necessário o diagnóstico sistemático dos abortos para estabelecer estratégias de prevenção e controle. Isso também facilita o monitoramento e a vigilância de doenças reprodutivas em bovinos leiteiros, algumas das quais representam um risco para a saúde pública.(AU)

Campylobacter fetus subespécie fetus: abortamento e natimortalidade em ovinos

The bacteria of genus Campylobacter spp, is commonly involved in outbreaks of ovine abortion in many countries. In Brazil, until now, there has been no report on the occurrence of abortion in sheep caused by C. fetus subsp. fetus. In this paper, we report the detection this bacteria in ovine fetuses naturally infected. Thus, alert for possible cases of abortion in sheep caused by C. fetus subsp. fetus.

A bactéria do gênero Campylobacter está comumente envolvida em surtos de abortos ovinos em muitos países. No Brasil, até o presente momento, ainda não houve relato sobre a ocorrência de aborto em ovinos causado pelo C. fetus, subespécie fetus (C. fetus ssp. fetus). No presente trabalho, relata-se a detecção deste agente em fetos e natimortos ovinos naturalmente infectados. Desse modo, alerta-se para a possibilidade de novos casos de aborto em ovinos causados por C. fetus ssp. fetus.

Campylobacter fetus subespécie fetus: abortamento e natimortalidade em ovinos

The bacteria of genus Campylobacter spp, is commonly involved in outbreaks of ovine abortion in many countries. In Brazil, until now, there has been no report on the occurrence of abortion in sheep caused by C. fetus subsp. fetus. In this paper, we report the detection this bacteria in ovine fetuses naturally infected. Thus, alert for possible cases of abortion in sheep caused by C. fetus subsp. fetus.

A bactéria do gênero Campylobacter está comumente envolvida em surtos de abortos ovinos em muitos países. No Brasil, até o presente momento, ainda não houve relato sobre a ocorrência de aborto em ovinos causado pelo C. fetus, subespécie fetus (C. fetus ssp. fetus). No presente trabalho, relata-se a detecção deste agente em fetos e natimortos ovinos naturalmente infectados. Desse modo, alerta-se para a possibilidade de novos casos de aborto em ovinos causados por C. fetus ssp. fetus.

Prevalência da campilobacteriose e da tricomonose genitais bovinas no Distrito Federal e em seu entorno / Prevalence of bovine genital Campylobacteriosis and Trichomoniasis in the Federal District and its surroundings

Objetivou-se estudar a prevalência da campilobacteriose genital bovina (CGB) e da tricomonose genital bovina (TGB) no Distrito Federal e em seu entorno. A estimativa da prevalência de cada doença foi realizada com base no exame de útero e vagina ou prepúcio de 385 animais abatidos em frigoríficos no DF e em seu entorno. O diagnóstico de C. fetus foi feito por imunofluorescência direta (IFD). Para diagnóstico de T. foetus, swabs de útero e vagina ou prepúcio foram lavados em meio de Diamond, mantidos em temperatura ambiente e protegidos da luz até a incubação a 37ºC por até oito dias e examinados diariamente ao microscópio utilizando-se objetiva de 40X. Dos 398 animais testados (258 fêmeas e 140 machos), 44 foram positivos ao teste de IFD, o que corresponde a uma prevalência de 11,1% de animais positivos para CGB, com intervalo de confiança (95%) de 7,97 a 14,14%. Não foi isolado T. foetus de nenhuma das amostras. Os resultados confirmam a presença da infecção por C. fetus em rebanhos bovinos do Distrito Federal e de seu entorno.(AU)

The aim of this study was to investigate the prevalence of bovine genital campylobacteriosis (BGC) and bovine genital trichomoniasis (TGB) in Federal District and surroundings. The estimated prevalence of each disease was based on examination of the uterus and vagina or prepuce of 385 animals at slaughterhouses in Federal District and its surroundings. The diagnosis of C. fetus was done by direct immunofluorescence (DIF). For diagnosis of T. fetus swabs from vagina and uterus/prepuce were washed in Diamonds medium, kept at room temperature and protected from light until incubation at 37°C for 8 days and examined daily by microscopy using a 40x objective. Of the 398 animals tested (258 females and 140 males), 44 were positive by DIF test, corresponding to a prevalence of 11.1% of animals positive for CGB, (95% probability interval: 7.97 - 14.14%). T. fetus was not isolated from any of the samples. The results confirm the presence of infection by C. fetus in cattle herds in the Federal District and surrounding areas. (AU)

Prevalência da campilobacteriose e da tricomonose genitais bovinas no Distrito Federal e em seu entorno / Prevalence of bovine genital Campylobacteriosis and Trichomoniasis in the Federal District and its surroundings

Objetivou-se estudar a prevalência da campilobacteriose genital bovina (CGB) e da tricomonose genital bovina (TGB) no Distrito Federal e em seu entorno. A estimativa da prevalência de cada doença foi realizada com base no exame de útero e vagina ou prepúcio de 385 animais abatidos em frigoríficos no DF e em seu entorno. O diagnóstico de C. fetus foi feito por imunofluorescência direta (IFD). Para diagnóstico de T. foetus, swabs de útero e vagina ou prepúcio foram lavados em meio de Diamond, mantidos em temperatura ambiente e protegidos da luz até a incubação a 37ºC por até oito dias e examinados diariamente ao microscópio utilizando-se objetiva de 40X. Dos 398 animais testados (258 fêmeas e 140 machos), 44 foram positivos ao teste de IFD, o que corresponde a uma prevalência de 11,1% de animais positivos para CGB, com intervalo de confiança (95%) de 7,97 a 14,14%. Não foi isolado T. foetus de nenhuma das amostras. Os resultados confirmam a presença da infecção por C. fetus em rebanhos bovinos do Distrito Federal e de seu entorno.

The aim of this study was to investigate the prevalence of bovine genital campylobacteriosis (BGC) and bovine genital trichomoniasis (TGB) in Federal District and surroundings. The estimated prevalence of each disease was based on examination of the uterus and vagina or prepuce of 385 animals at slaughterhouses in Federal District and its surroundings. The diagnosis of C. fetus was done by direct immunofluorescence (DIF). For diagnosis of T. fetus swabs from vagina and uterus/prepuce were washed in Diamond’s medium, kept at room temperature and protected from light until incubation at 37°C for 8 days and examined daily by microscopy using a 40x objective. Of the 398 animals tested (258 females and 140 males), 44 were positive by DIF test, corresponding to a prevalence of 11.1% of animals positive for CGB, (95% probability interval: 7.97 - 14.14%). T. fetus was not isolated from any of the samples. The results confirm the presence of infection by C. fetus in cattle herds in the Federal District and surrounding areas.

Production and characterization of monoclonal antibodies against Campylobacter fetus subsp. venerealis / Produção e caracterização de anticorpos monoespecíficos contra Campylobacter fetus subsp. venerealis

Myeloma cells Sp2/0-Ag14 and spleen cells from BALB/c mouse immunized with sonicated Campylobacter fetus subsp. venerealis NCTC 10354 were fused with polyethylene glycol (PEG) for the selection of clones producing antibodies. Clones were obtained by limiting dilution and screened for the production of specific antibodies to C. fetus subsp. venerealis NCTC 10354 by indirect ELISA and western blot against a panel of bacteria: C. fetus subsp. venerealis NCTC 10354, C. fetus subsp fetus ADRI 1812, C. sputorum biovar sputorum LMG 6647, C. lari NCTC 11352, and Arcobacter skirrowii LMG 6621 for the ELISA and C. fetus subsp. venerealis NCTC 10354 and C. sputorum biovar sputorum LMG 6647 for the western blotting. Fifteen clones producing monoclonal antibodies (MAbs) anti-C. fetus subsp. venerealis of the IgM (1) and IgG (14) classes were further screened for species-specificity. Four clones of the 15 obtained were producers of species-specific monoclonal antibodies (MAbs): two were specific for C. fetus subsp. venerealis and two were specific for C. fetus subsp. fetus. None of the clones were reactive against C. sputorum biovar sputorum LMG 6647. All clones recognized a protein with molecular mass of approximately 148 kDa from lysed C. fetus subsp. venerealis NCTC 10354.(AU)

Para a produção de anticorpos monoclonais contra Campylobacter fetus subsp. venerealis foram utilizadas as linhagens de células de mieloma Sp2/0-Ag14 e células de baço de camundongos BALB/c imunizados com sonicado de C. fetus subsp. venerealis NCTC 10354. A detecção dos anticorpos monoclonais foi realizada por ELISA indireto utilizando antígeno sonicado de C. fetus subsp. venerealis NCTC 10354. A clonagem foi realizada por diluição limitante e os clones foram caracterizados por ELISA indireto utilizando um painel de bactérias escolhidas em função da prevalência e habitats: C. fetus subsp. venerealis NCTC 10354, C. fetus subsp. fetus ADRI 1812, C. sputorum biovar sputorum LMG 6647, C. lari NCTC 11352 e Arcobacter skirrowii LMG 6621; e no "western blotting" utilizando antígenos sonicados de C. fetus subsp. venerealis NCTC 10354 e C. sputorum biovar sputorum LMG 6647. Foram obtidos 15 clones produtores de anticorpos anti- C. fetus subsp. venerealis das classes IgM (1) e IgG (14). Quatro clones dentre os 15 clones obtidos foram produtores de anticorpos monoclonais espécie-específicos: dois clones reagiram com maior especificidade contra C. fetus subsp. venerealis NCTC 10354 e dois clones reagiram com maior especificidade contra C. fetus subsp. fetus ADRI 1812. Nenhum dos clones reagiu contra C. sputorum biovar sputorum LMG 6647, comprovando a especificidade dos anticorpos monoclonais testados. Todos os clones reconheceram uma proteína de massa molecular de aproximadamente 148 kDa no sonicado de C. fetus subsp. venerealis NCTC 10354.(AU)

The use of enzyme-linked immunosorbent assay and immunoblotting for the detection of Campylobacter fetus immunoglobulins in the cervico-vaginal mucus of female cattle / Uso do ensaio imunoenzimático e imunoblotting para detecção de imunoglobulinas contra Campylobacter fetus em muco cérvico-vaginal de fêmeas bovinas

Foi padronizado um ensaio imunoenzimático do tipo indireto para detecção de imunoglobulina A (ELISA IgA) anti- Campylobacter fetus subp. venerealis em muco cérvico- vaginal bovino utilizando um extrato protéico de Campylobacter fetus subsp. venerealis produzido pelo método de extração ácida pelo tampão de glicina (0,2M; pH2,2). A média dos valores de densidade ótica (DO450) foi de 0,143±0,09. As bandas protéicas dos antígenos de Campylobacter fetus subsp. venerealis e de Campylobacter fetus subsp. fetus melhor reconhecidas pela IgA do muco cérvico- vaginal migraram em 42,6 kDa mas a proteina evidenciada em 93 kDa foi reconhecida exclusivamente pelo Campylobacter fetus subsp. venerealis. Os anticorpos presentes na amostra de muco vaginal testada no “immunoblotting” que apresentou resultado positivo no ELISA IgA, reconheceu antígenos de C. jejuni subsp. jejuni e C. fetus subsp. fetus.(AU)

An indirect enzyme-linked immunosorbent assay was developed to detect antigenspecific secretory IgA antibodies to Campylobacter fetus subsp. venerealis in bovine vaginal mucus with a protein extract of the Campylobacter fetus subsp. venerealis by the acid glycine extraction method. Mean optical density measurement (λ=450 nm) was 0.143±0.9. The most immunoreactive protein bands of the Campylobacter fetus subsp. venerealis or Campylobacter fetus subsp. fetus recognized by IgA in immunoblotting, using bovine vaginal mucus samples, migrate at 42.6 kDa. The protein that migrates at 93 kDa was recognized exclusively for C. fetus subsp. venerealis. A positive vaginal mucus sample of a cow from negative herd recognized antigens of C. jejuni subsp. jejuni e C. fetus subsp. fetus.(AU)

Campilobacteriose genital bovina e tricomonose genital bovina: epidemiologia, diagnóstico e controle / Bovine genital campylobacteriosis and bovine genital trichomonosis: epidemiology, diagnosis and control

A presente atualização trata de duas das mais importantes doenças sexualmente transmitidas de bovinos, a campilobacteriose genital bovina e a tricomonose genital bovina. São abordados aspectos relacionados à epidemiologia destas doenças, principalmente em relação a sua distribuição no Brasil. Também são revisados aspectos importantes de diagnóstico, incluindo as técnicas e interpretação dos resultados, além de medidas de controle para ambas as doenças.(AU)

The present update deals with two of the most important sexually transmitted diseases of cattle: bovine genital campylobacteriosis and bovine genital trichomonosis. Epidemiological aspects, mainly their distribution in Brazil, alongside with their diagnosis in cattle are presented and commented. The main points in their diagnoses, including the description of the techniques and the interpretation of the results are also reviewed. Finally the control and prevention of both diseases are discussed.(AU)

Quantitative analysis of Campylobacter fetus venerealis adhesion to bovine reproductive tract cell cultures / Análise quantitativa da adesão de Campylobacter fetus venerealis em culturas de células do aparelho reprodutor bovino

Campylobacter fetus is the etiological agent of bovine genital campylobacteriosis, a sexually transmitted disease which is associated with reproductive losses in bovines. Campylobacter colonizes the vagina and the uterus and then infects the epithelial cells of the endometrium. The objective of this work was to develop an ex vivo model to quantify the adhesion of Campylobacter to its natural specific target cells; this is a key step for the establishment of infection and studies regarding the adherence and cytotoxicity on the natural host cells are not available. The assays were carried out by seeding Campylobacter fetus venerealis on bovine vaginal and uterine epithelial cell cultures. HeLa cells were used as control. Bacterial adhesion was corroborated by optical microscopy and determination of the percentage of adherent bacteria was performed on immunochemically-stained slides. Results are presented as percentage of cells with adherent Campylobacter and as number of bacteria per cell. In comparison to the control HeLa cells, the statistical analysis revealed that primary cultures show a higher percentage of infected cells and a lower variation of the evaluated parameters. This primary culture model might be useful for studies on cytopathogenicity and adhesion of different field strains of Campylobacter fetus. (AU)

Campylobacter fetus é o agente etiológico da campilobacteriose genital bovina, uma doença sexualmente transmissível que está associada com perdas reprodutivas em bovinos. Campylobacter coloniza a vagina e o útero e então infecta as células epiteliais do endométrio. O objetivo deste trabalho foi desenvolver um modelo ex vivo para quantificar a adesão de Campylobacter às células-alvo naturais específicas; este é um passo fundamental para o estabelecimento da infecção e estudos acerca da adesão e citotoxicidade sobre as células do hospedeiro natural não estão disponíveis. Os ensaios foram realizados a través da semeadura de Campylobacter fetus venerealis em culturas celulares epiteliais vaginais e uterinas.Células HeLa foram utilizadas como controle.A aderência bacteriana foi confirmada por microscopia óptica e a determinação da porcentagem de bactérias aderidas foi realizada em lâminas tingidas imunoquimicamente. Os resultados são apresentados como porcentagem de células com Campylobacter aderente e como o número de bactérias por células. Em comparação com as células HeLa controle, a análise estatística revelou que as culturas primárias mostram uma maior porcentagem de células infectadas e uma menor variação dos parâmetros avaliados. Este modelo de cultura primária pode ser útil para estudos sobre citopatogenicidade e adesão de diferentes cepas de campo de Campylobacter fetus. (AU)

Polymerase chain reaction for the diagnosis of bovine genital campylobacteriosis / Reação em cadeia da polimerase para o diagnóstico de campilobacteriose genital bovina

Bovine genital campylobacteriosis is a common venereal disease of cattle; the prevalence of this disease can be underestimated mostly because of the nature of the etiological agent, the microaerobic Campylobacter fetus subspecies venerealis. The purpose of the current study was to evaluate the utilization of polymerase chain reaction (PCR) in the diagnosis of genital campylobacteriosis in samples obtained from bull prepuce aspirate, cow cervical mucus, and abomasum contents of aborted fetuses, collected into enrichment medium. Five different DNA extraction protocols were tested: thermal extraction, lysis with proteinase K, lysis with guanidine isothiocyanate, lysis with DNAzol, and lysis with hexadecyltrimethylammonium bromide (CTAB). The specificity, sensitivity, and technical application of the PCR assay were also evaluated with clinical samples and compared to bacterial isolation by standard culture. DNA extraction by the CTAB protocol provided better results in PCR, and it was able to detect 63 colony-forming units per ml of C. fetus. Out of 277 clinical samples tested, 68 (24 percent) were positive for Campylobacter fetus using PCR, while only 8 (2.8 percent) of the samples were positive by bacterial isolation in solid medium, proving the superiority of the PCR technique when compared to the standard isolation method, and providing evidence for its usefulness as a better screening test in cattle for the diagnosis of bovine genital campylobacteriosis.(AU)

Campilobacteriose genital bovina é uma doença venérea comum em bovinos. A prevalência desta doença pode ser subestimada na maioria das vezes pela natureza microaeróbica do agente etiológico, Campylobacter fetus subspecies venerealis. O propósito do presente estudo foi avaliar a utilização da reação de polimerase em cadeia (PCR) no diagnóstico de campilobacteriose genital em amostras obtidas de aspirado prepucial de touros, muco cervical de vacas e conteúdo abomasal de fetos abortados, coletados em meio enriquecido. Cinco protocolos diferentes de extração de DNA foram testados: termo extração, lise com proteinase K, lise com guanidine isothiocyanate, lise com DNAzol e lise com hexadeciltrimetilamônio brometo (CTAB). A especificidade, sensibilidade e a aplicação da técnica da PCR foram também avaliadas com amostras clínicas e comparadas com bactérias isoladas por cultura padrão. DNA extraído pelo protocolo de CTAB demonstrou os melhores resultados na PCR, e foi capaz de detectar 63 unidades formadoras de colônias de C. fetus por ml de meio. Das 277 amostras clínicas testadas, 68 (24 por cento) foram positivas para Campylobacter fetus pela PCR, enquanto 8 (2,8 por cento) das amostras foram positivas por isolamento bacteriológico, provando a superioridade da técnica de PCR quando comparada com métodos padrão de isolamento, e fornecendo evidências de sua utilização como um teste de melhor projeção para diagnóstico em campilobacteriose genital bovina.(AU)

Investigação de Campylobacter fetus e Tritrichomonas foetus na mucosa prepucial de touros da região do Médio Paraíba, RJ

Thirty nine breeding bulls from dairy farms (n=9) and beef farms (n=30) located in Médio Paraíba region at Rio de Janeiro - Brazil state were investigated for the presence of Campylobacter fetus and Tritrichomonas foetus. For Campylobacter investigation, smegma samples were examined by culture and prepucial washings were examined by direct immunofluorescence technique (DIF). The prepucial washings were also examined for Tritrichomonas foetus presence by direct examination. C. fetus was identified in 14 samples (35.9 %) by DIF technique and C. fetus subspecies venerealis was isolated from four samples (10.3%). T. foetus was not detected in bull samples. The high frequency of C. fetus observed in bull samples suggests the occurrence of Campylobacteriosis among herds which have reproductive problems at the Médio Paraíba region.

Trinta e nove touros provenientes de propriedades de pecuária leiteira (n=9) e de pecuária de corte (n=30), situadas na região do Médio Paraíba, Rio de Janeiro (RJ), foram investigados para a presença de Campylobacter fetus e Tritrichomonas foetus. Para a pesquisa de Campylobacter, amostras de esmegma foram coletadas e submetidas à técnica de cultivo e isolamento e amostras de lavado prepucial ao teste de Imunofluorescência Direta (IFD). Para a pesquisa de Tritrichomonas, foi utilizada a técnica de exame direto a partir de lavado prepucial. Foi observada a presença de C. fetus em 14 amostras (35,9 %), por meio da IFD, e o isolamento de C. fetus, subespécie venerealis, foi obtido a partir de quatro amostras (10,3%). T. foetus não foi identificado nas amostras investigadas. A alta freqüência de C. fetus observada nos animais investigados sugere a presença da campilobacteriose na região do Médio Paraíba, em rebanhos com problemas reprodutivos.

Investigação de Campylobacter fetus e Tritrichomonas foetus na mucosa prepucial de touros da região do Médio Paraíba, RJ

Thirty nine breeding bulls from dairy farms (n=9) and beef farms (n=30) located in Médio Paraíba region at Rio de Janeiro - Brazil state were investigated for the presence of Campylobacter fetus and Tritrichomonas foetus. For Campylobacter investigation, smegma samples were examined by culture and prepucial washings were examined by direct immunofluorescence technique (DIF). The prepucial washings were also examined for Tritrichomonas foetus presence by direct examination. C. fetus was identified in 14 samples (35.9 %) by DIF technique and C. fetus subspecies venerealis was isolated from four samples (10.3%). T. foetus was not detected in bull samples. The high frequency of C. fetus observed in bull samples suggests the occurrence of Campylobacteriosis among herds which have reproductive problems at the Médio Paraíba region.

Trinta e nove touros provenientes de propriedades de pecuária leiteira (n=9) e de pecuária de corte (n=30), situadas na região do Médio Paraíba, Rio de Janeiro (RJ), foram investigados para a presença de Campylobacter fetus e Tritrichomonas foetus. Para a pesquisa de Campylobacter, amostras de esmegma foram coletadas e submetidas à técnica de cultivo e isolamento e amostras de lavado prepucial ao teste de Imunofluorescência Direta (IFD). Para a pesquisa de Tritrichomonas, foi utilizada a técnica de exame direto a partir de lavado prepucial. Foi observada a presença de C. fetus em 14 amostras (35,9 %), por meio da IFD, e o isolamento de C. fetus, subespécie venerealis, foi obtido a partir de quatro amostras (10,3%). T. foetus não foi identificado nas amostras investigadas. A alta freqüência de C. fetus observada nos animais investigados sugere a presença da campilobacteriose na região do Médio Paraíba, em rebanhos com problemas reprodutivos.

Investigação de Campylobacter fetus e Tritrichomonas foetus na mucosa prepucial de touros da região do Médio Paraíba, RJ

Thirty nine breeding bulls from dairy farms (n=9) and beef farms (n=30) located in Médio Paraíba region at Rio de Janeiro - Brazil state were investigated for the presence of Campylobacter fetus and Tritrichomonas foetus. For Campylobacter investigation, smegma samples were examined by culture and prepucial washings were examined by direct immunofluorescence technique (DIF). The prepucial washings were also examined for Tritrichomonas foetus presence by direct examination. C. fetus was identified in 14 samples (35.9 %) by DIF technique and C. fetus subspecies venerealis was isolated from four samples (10.3%). T. foetus was not detected in bull samples. The high frequency of C. fetus observed in bull samples suggests the occurrence of Campylobacteriosis among herds which have reproductive problems at the Médio Paraíba region.

Trinta e nove touros provenientes de propriedades de pecuária leiteira (n=9) e de pecuária de corte (n=30), situadas na região do Médio Paraíba, Rio de Janeiro (RJ), foram investigados para a presença de Campylobacter fetus e Tritrichomonas foetus. Para a pesquisa de Campylobacter, amostras de esmegma foram coletadas e submetidas à técnica de cultivo e isolamento e amostras de lavado prepucial ao teste de Imunofluorescência Direta (IFD). Para a pesquisa de Tritrichomonas, foi utilizada a técnica de exame direto a partir de lavado prepucial. Foi observada a presença de C. fetus em 14 amostras (35,9 %), por meio da IFD, e o isolamento de C. fetus, subespécie venerealis, foi obtido a partir de quatro amostras (10,3%). T. foetus não foi identificado nas amostras investigadas. A alta freqüência de C. fetus observada nos animais investigados sugere a presença da campilobacteriose na região do Médio Paraíba, em rebanhos com problemas reprodutivos.

Pesquisa de campilobacteriose genital bovina em touros do triângulo mineiro

A campilobacteriose genital bovina é uma enfermidade infecciosa venérea causada pela bactéria Campylobacter fetus subsp. veneralis, que leva a infertilidade temporária da vaca devido a repetições de cios e abortos. As perdas econômicas são decorrentes do descarte e da reposição de animais inférteis, abortos e mortes embrionárias que provocam queda na produção de bezerros. Além disso, as produções de leite e carne também são afetadas pelo aumento do intervalo entre partos. Este agente possui uma larga distribuição mundial e no Brasil foi observada uma prevalência de 18,8% nos principais estados produtores de bovinos de corte. As novilhas e vacas jovens são mais susceptíveis, pois ainda não entraram em contato com o agente ou com touros contaminados; já os touros com mais de 5 anos se infectam mais, pois possuem as criptas no epitélio do pênis mais desenvolvidas. A transmissão da campilobacterio-se genital bovina se dá através do coito, pois o microorganismo instala-se no prepúcio dos machos e no trato genital das fêmeas. Na vaca, o agente causa uma reação inflamatória na mucosa uterina impossibilitando a implantação do zigoto e provo-cando conseqüente morte do embrião; ao passo que no touro, não se observa lesões. O objetivo do presente estudo foi avaliar a ocorrência da cam-pilobacteriose genital bovina em touros da região do Triângulo Mineiro-MG uma vez que tal doença provoca

PESQUISA DE CAMPILOBACTERIOSE GENITAL BOVINA EM TOUROS DO TRIÂNGULO MINEIRO

A campilobacteriose genital bovina é uma enfermidade infecciosa venérea causada pela bactéria Campylobacter fetus subsp. veneralis, que leva a infertilidade temporária da vaca devido a repetições de cios e abortos. As perdas econômicas são decorrentes do descarte e da reposição de animais inférteis, abortos e mortes embrionárias que provocam queda na produção de bezerros. Além disso, as produções de leite e carne também são afetadas pelo aumento do intervalo entre partos. Este agente possui uma larga distribuição mundial e no Brasil foi observada uma prevalência de 18,8% nos principais estados produtores de bovinos de corte. As novilhas e vacas jovens são mais susceptíveis, pois ainda não entraram em contato com o agente ou com touros contaminados; já os touros com mais de 5 anos se infectam mais, pois possuem as criptas no epitélio do pênis mais desenvolvidas. A transmissão da campilobacterio-se genital bovina se dá através do coito, pois o microorganismo instala-se no prepúcio dos machos e no trato genital das fêmeas. Na vaca, o agente causa uma reação inflamatória na mucosa uterina impossibilitando a implantação do zigoto e provo-cando conseqüente morte do embrião; ao passo que no touro, não se observa lesões. O objetivo do presente estudo foi avaliar a ocorrência da cam-pilobacteriose genital bovina em touros da região do Triângulo Mineiro-MG uma vez que tal doença provoca

Campilobacteriose genital bovina em rebanhos leiteiros com problemas reprodutivos da microrregião de Varginha - Minas Gerais / Bovine genital campylobacteriosis in dairy herds with reproductive problems of the microregion of Varginha, MG, Brazil

The frequency of bovine genital campylobacteriosis (BGC) in 157 cows from nine herds from the microregion of Varginha - Minas Gerais - Brazil was evaluated. Farmers use either artificial insemination and natural breeding after two insemination procedures or natural breeding. The diagnosis of BGC was performed by the direct fluorescent antibody test (DFAT) using vaginal mucus. All studied herds showed C. fetus infected animals and, of 157 animals, 40 (25.5 percent) were positive in DFAT: 7 (26.9 percent) from herds with natural breeding and 33 (25.1 percent) from herds with both artificial insemination and natural breeding after the second-to-third insemination. The high frequency of BGC found in this study shows that this disease is present among herds which have reproductive problems and the use of natural breeding after the second-to-third unsuccessful insemination could be a risk factor for the disease.(AU)

Occurrence of Campylobacter in the genitals of teaser bulls maintained at an embryo transfer center

Em central de transferência de embriões, após os procedimentos de reconhecimento do cio em 37 vacas receptoras, através de quatro rufiões vasectomizados, observou-se que 83% delas apresentavam retorno ao cio e algum corrimento serofibrinoso. Nos exames bacteriológicos realizados nos lavados prepuciais dos rufiões foi isolado o Campylobacter fetus subsp. venerealis em todos, fato que, analisado associadamente com o retorno ao cio das vacas receptoras, é indicativo da ocorrência de campilobacteriose no plantel. Essa ocorrência demonstra a necessidade de medidas eficazes de planejamento de saúde animal, pela utilização de rufiões com desvio lateral do pênis. Uma vez impossibilitado o contato sexual, seria impedida a transmissão do agente durante o coito. Torna-se imperioso consignar que a prática da prevenção racional de enfermidades continua sendo o procedimento mais econômico para uma produtividade animal mais rentável.

Fatores de risco e comparação de técnicas de diagnóstico para campilobacterose genital bovina em touros do município de Presidente Prudente - SP

Para verificar os fatores de risco e a viabilidade de métodos diagnósticos para a campilobacteriose genital bovina (CGB), amostras prepuciais de touros de 102 rebanhos leiteiros de Presidente Prudente, São Paulo, foram avaliadas por testes bacteriológicos, reação da polimerase em cadeia (PCR) e imunofluorescência direta (IFD). Durante a colheita de lavados prepuciais, um questionário sobre desordens reprodutivas nas fêmeas e condições sanitárias foi aplicado aos proprietários das fazendas. As amostras foram plaqueadas em ágar seletivo de Skirrow, ágar Brucella verde brilhante e ágar tioglicolato com 20% do sangue. As características seletivas dos três sistemas da cultura foram comparadas pela avaliação de escores de densidade de contaminantes bacterianos nas placas e a capacidade de suportar diferentes fontes de contaminantes. A PCR foi conduzida usando seqüências dos nucleotídeos que amplificam um fragmento com 835 pares das bases do DNA ribossomal bacteriano. A IFD foi executada usando o conjugado anti-C. fetus subesp. venerealis marcado com isotiocianato de fluoresceína. Resultados positivos foram obtidos para culturas microbianas, PCR e IFD de 7,8% , 5,8% e 1,9% das fazendas, respectivamente. Detectou-se associação significativa entre touros positivos e rebanhos cujas vacas apresentavam taxas de concepção abaixo de 85% (OR=7,6). A concordância entre a PCR e as culturas bacteriológicas foi considerada ótima (Kappa = 0,847), mas foi pobre entre a IFD e os outros testes. Apenas o ágar seletivo de Skirrow não foi influenciado por contaminantes do lavado prepucial. Conclui-se que a CGB está presente em rebanhos leiteiros de Presidente Prudente, onde é associada com os distúrbios reprodutivos

To verify the risk factors and viability of diagnostic methods for genital bovine campylobacteriosis (GBC), preputial samples from bulls from 102 dairy herds from Presidente Prudente, São Paulo State, were evaluated using bacteriological tests, polymerase chain reation (PCR) and direct immunofluorescence (DFA). During the preputial sampling, some questions were made about female reproductive disorders and sanitary conditions of the farms. The preputial samples were plated in Skirrowþs agar, Brucella Brilliant green agar and Thioglycolate agar with 20% of blood. The selective characteristic of the three systems of culture was compared by the evaluation of bacterial density scores in the plates and for the capacity to support bacterial contaminants of different sources. The PCR was conducted using sequences of nucleotides that amplify a fragment with 835 pairs of bases of the ribossomal DNA. Direct immunofluorescence was performed using anti-C. fetus subesp. venerealis conjugated with fluorescein isothiocyanate. Positive results were obtained by microbial cultures, PCR and DFA results of 7,8%, 5,8% and 1,9% of the farms, respectively. Statistical association between positive bulls and low fertility of the herd cows was detected (OR= 7,6). The overall agreement between the PCR and bacteriological cultures was excellent (Kappa = 0,847), but poor between DFA and the other tests. The Skirrowþs media was the only that was not influenced by contaminant characteristics of preputial fluid samples. It is concluded that GBC is present in dairy herds from Presidente Prudente, where was associated with reproductive disturbances