Systemic phaeohyphomycosis in a dog caused by Cladophialophora bantiana

Background: Cladophialophora bantiana is a dematiaceous fungus that causes phaeohyphomycosis, a generic term used to describe a variety of unusual mycoses caused by fungi that have melanin in their cell wall. C. bantiana targets the central nervous system, commonly causing localized brain infections that may result in disseminated infections. In Brazil, minimal phaeohyphomycosis data are available, and information about C. bantiana infections in animals, especially canines, is scarce. Thus, the aim of this study was to describe the clinical and pathological aspects of systemic phaeohyphomycosis caused by C. bantiana in a dog. Case: A 1-year-old female Pit Bull presented with weight loss, reduced appetite, and a history of cutaneous lesions on the right thoracic limb; however, clinical evolution was not reported. The bitch had reportedly given birth recently. Physical examination revealed thinness, pale ocular and oral mucosa, submandibular lymph nodes, and enlarged popliteal lymph nodes. The bitch died after convulsive crises during hospitalization. At necropsy, white-yellowish multifocal nodules were observed in the liver and right kidney. The brain featured left cerebral hemisphere asymmetry with blood vessel congestion in the leptomeninges and an irregular brownish focal area on the surface of the right occipital cortex. Cross-sections of the formalin-fi xed brain exhibited compression of the left lateral ventricle and the presence of grayish and friable multifocal areas in the gray matter of the left parietal and right occipital cortices. Fragments of the lesions were collected for histopathological and microbiological examination. Histologically, the lesions were similar, characterized by hepatitis, nephritis, and granulomatous and necrotizing...

Morphological and molecular identification of Cladosporium sphaerospermum isolates collected from tomato plant residues / Identificação morfológica e molecular de isolados de Cladosporium sphaerospermum coletados de resíduos de plantas de tomate

This study was conducted at the Agriculture College University of Karbala, Iraq to isolate and morphologically and molecularly diagnose thirteen Cladosporium isolates collected from tomato plant residues present in desert regions of Najaf and Karbala provinces, Iraq. We diagnosed the obtained isolates by PCR amplification using the ITS1 and ITS4 universal primer pair followed by sequencing. PCR amplification and analysis of nucleotide sequences using the BLAST program showed that all isolated fungi belong to Cladosporium sphaerospermum. Analysis of the nucleotide sequences of the identified C. sphaerospermum isolates 2, 6, 9, and 10 showed a genetic similarity reached 99%, 98%, 99%, and 99%, respectively, with those previously registered at the National Center for Biotechnology Information (NCBl). By comparing the nucleotide sequences of the identified C. sphaerospermum isolates with the sequences belong to the same fungi and available at NCBI, it was revealed that the identified C. sphaerospermum isolates 2, 6, 9, and 10 have a genetic variation with those previously recorded at the National Center for Biotechnology Information (NCBl); therefore, the identified sequences of C. sphaerospermum isolates have been registered in GenBank database (NCBI) under the accession numbers MN896004, MN896107, MN896963, and MN896971, respectively.

Este estudo foi conduzido na Agriculture College University of Karbala, Iraque, para isolar e diagnosticar morfológica e molecularmente treze isolados de Cladosporium coletados de resíduos de plantas de tomate presentes nas regiões desérticas das províncias de Najaf e Karbala, no Iraque. Diagnosticamos os isolados obtidos por amplificação por PCR usando o par de primers universais ITS1 e ITS4 seguido de sequenciamento. A amplificação por PCR e a análise de sequências de nucleotídeos usando o programa BLAST mostraram que todos os fungos isolados pertencem a Cladosporium sphaerospermum. A análise das sequências de nucleotídeos dos isolados 2, 6, 9 e 10 de C. sphaerospermum identificados mostrou similaridade genética de 99%, 98%, 99% e 99%, respectivamente, com aqueles previamente registrados no National Center for Biotechnology Informações (NCBl). Ao comparar as sequências de nucleotídeos dos isolados de C. sphaerospermum identificados com as sequências pertencentes aos mesmos fungos e disponíveis no NCBI, foi revelado que os isolados 2, 6, 9 e 10 de C. sphaerospermum identificados têm variação genética com aqueles anteriormente registrados no National Center for Biotechnology Information (NCBl). Portanto, as sequências identificadas de isolados de C. sphaerospermum foram registradas no banco de dados GenBank (NCBI) sob os números de acesso MN896004, MN896107, MN896963 e MN896971, respectivamente.

Morphological and molecular identification of Cladosporium sphaerospermum isolates collected from tomato plant residues

Abstract This study was conducted at the Agriculture College University of Karbala, Iraq to isolate and morphologically and molecularly diagnose thirteen Cladosporium isolates collected from tomato plant residues present in desert regions of Najaf and Karbala provinces, Iraq. We diagnosed the obtained isolates by PCR amplification using the ITS1 and ITS4 universal primer pair followed by sequencing. PCR amplification and analysis of nucleotide sequences using the BLAST program showed that all isolated fungi belong to Cladosporium sphaerospermum. Analysis of the nucleotide sequences of the identified C. sphaerospermum isolates 2, 6, 9, and 10 showed a genetic similarity reached 99%, 98%, 99%, and 99%, respectively, with those previously registered at the National Center for Biotechnology Information (NCBl). By comparing the nucleotide sequences of the identified C. sphaerospermum isolates with the sequences belong to the same fungi and available at NCBI, it was revealed that the identified C. sphaerospermum isolates 2, 6, 9, and 10 have a genetic variation with those previously recorded at the National Center for Biotechnology Information (NCBl); therefore, the identified sequences of C. sphaerospermum isolates have been registered in GenBank database (NCBI) under the accession numbers MN896004, MN896107, MN896963, and MN896971, respectively.

Resumo Este estudo foi conduzido na Agriculture College University of Karbala, Iraque, para isolar e diagnosticar morfológica e molecularmente treze isolados de Cladosporium coletados de resíduos de plantas de tomate presentes nas regiões desérticas das províncias de Najaf e Karbala, no Iraque. Diagnosticamos os isolados obtidos por amplificação por PCR usando o par de primers universais ITS1 e ITS4 seguido de sequenciamento. A amplificação por PCR e a análise de sequências de nucleotídeos usando o programa BLAST mostraram que todos os fungos isolados pertencem a Cladosporium sphaerospermum. A análise das sequências de nucleotídeos dos isolados 2, 6, 9 e 10 de C. sphaerospermum identificados mostrou similaridade genética de 99%, 98%, 99% e 99%, respectivamente, com aqueles previamente registrados no National Center for Biotechnology Informações (NCBl). Ao comparar as sequências de nucleotídeos dos isolados de C. sphaerospermum identificados com as sequências pertencentes aos mesmos fungos e disponíveis no NCBI, foi revelado que os isolados 2, 6, 9 e 10 de C. sphaerospermum identificados têm variação genética com aqueles anteriormente registrados no National Center for Biotechnology Information (NCBl). Portanto, as sequências identificadas de isolados de C. sphaerospermum foram registradas no banco de dados GenBank (NCBI) sob os números de acesso MN896004, MN896107, MN896963 e MN896971, respectivamente.

Morphological and molecular identification of Cladosporium sphaerospermum isolates collected from tomato plant residues / Identificação morfológica e molecular de isolados de Cladosporium sphaerospermum coletados de resíduos de plantas de tomate

This study was conducted at the Agriculture College University of Karbala, Iraq to isolate and morphologically and molecularly diagnose thirteen Cladosporium isolates collected from tomato plant residues present in desert regions of Najaf and Karbala provinces, Iraq. We diagnosed the obtained isolates by PCR amplification using the ITS1 and ITS4 universal primer pair followed by sequencing. PCR amplification and analysis of nucleotide sequences using the BLAST program showed that all isolated fungi belong to Cladosporium sphaerospermum. Analysis of the nucleotide sequences of the identified C. sphaerospermum isolates 2, 6, 9, and 10 showed a genetic similarity reached 99%, 98%, 99%, and 99%, respectively, with those previously registered at the National Center for Biotechnology Information (NCBl). By comparing the nucleotide sequences of the identified C. sphaerospermum isolates with the sequences belong to the same fungi and available at NCBI, it was revealed that the identified C. sphaerospermum isolates 2, 6, 9, and 10 have a genetic variation with those previously recorded at the National Center for Biotechnology Information (NCBl); therefore, the identified sequences of C. sphaerospermum isolates have been registered in GenBank database (NCBI) under the accession numbers MN896004, MN896107, MN896963, and MN896971, respectively.

Este estudo foi conduzido na Agriculture College University of Karbala, Iraque, para isolar e diagnosticar morfológica e molecularmente treze isolados de Cladosporium coletados de resíduos de plantas de tomate presentes nas regiões desérticas das províncias de Najaf e Karbala, no Iraque. Diagnosticamos os isolados obtidos por amplificação por PCR usando o par de primers universais ITS1 e ITS4 seguido de sequenciamento. A amplificação por PCR e a análise de sequências de nucleotídeos usando o programa BLAST mostraram que todos os fungos isolados pertencem a Cladosporium sphaerospermum. A análise das sequências de nucleotídeos dos isolados 2, 6, 9 e 10 de C. sphaerospermum identificados mostrou similaridade genética de 99%, 98%, 99% e 99%, respectivamente, com aqueles previamente registrados no National Center for Biotechnology Informações (NCBl). Ao comparar as sequências de nucleotídeos dos isolados de C. sphaerospermum identificados com as sequências pertencentes aos mesmos fungos e disponíveis no NCBI, foi revelado que os isolados 2, 6, 9 e 10 de C. sphaerospermum identificados têm variação genética com aqueles anteriormente registrados no National Center for Biotechnology Information (NCBl). Portanto, as sequências identificadas de isolados de C. sphaerospermum foram registradas no banco de dados GenBank (NCBI) sob os números de acesso MN896004, MN896107, MN896963 e MN896971, respectivamente.

Morphological and molecular identification of Cladosporium sphaerospermum isolates collected from tomato plant residues / Identificação morfológica e molecular de isolados de Cladosporium sphaerospermum coletados de resíduos de plantas de tomate

This study was conducted at the Agriculture College University of Karbala, Iraq to isolate and morphologically and molecularly diagnose thirteen Cladosporium isolates collected from tomato plant residues present in desert regions of Najaf and Karbala provinces, Iraq. We diagnosed the obtained isolates by PCR amplification using the ITS1 and ITS4 universal primer pair followed by sequencing. PCR amplification and analysis of nucleotide sequences using the BLAST program showed that all isolated fungi belong to Cladosporium sphaerospermum. Analysis of the nucleotide sequences of the identified C. sphaerospermum isolates 2, 6, 9, and 10 showed a genetic similarity reached 99%, 98%, 99%, and 99%, respectively, with those previously registered at the National Center for Biotechnology Information (NCBl). By comparing the nucleotide sequences of the identified C. sphaerospermum isolates with the sequences belong to the same fungi and available at NCBI, it was revealed that the identified C. sphaerospermum isolates 2, 6, 9, and 10 have a genetic variation with those previously recorded at the National Center for Biotechnology Information (NCBl); therefore, the identified sequences of C. sphaerospermum isolates have been registered in GenBank database (NCBI) under the accession numbers MN896004, MN896107, MN896963, and MN896971, respectively.(AU)

Este estudo foi conduzido na Agriculture College University of Karbala, Iraque, para isolar e diagnosticar morfológica e molecularmente treze isolados de Cladosporium coletados de resíduos de plantas de tomate presentes nas regiões desérticas das províncias de Najaf e Karbala, no Iraque. Diagnosticamos os isolados obtidos por amplificação por PCR usando o par de primers universais ITS1 e ITS4 seguido de sequenciamento. A amplificação por PCR e a análise de sequências de nucleotídeos usando o programa BLAST mostraram que todos os fungos isolados pertencem a Cladosporium sphaerospermum. A análise das sequências de nucleotídeos dos isolados 2, 6, 9 e 10 de C. sphaerospermum identificados mostrou similaridade genética de 99%, 98%, 99% e 99%, respectivamente, com aqueles previamente registrados no National Center for Biotechnology Informações (NCBl). Ao comparar as sequências de nucleotídeos dos isolados de C. sphaerospermum identificados com as sequências pertencentes aos mesmos fungos e disponíveis no NCBI, foi revelado que os isolados 2, 6, 9 e 10 de C. sphaerospermum identificados têm variação genética com aqueles anteriormente registrados no National Center for Biotechnology Information (NCBl). Portanto, as sequências identificadas de isolados de C. sphaerospermum foram registradas no banco de dados GenBank (NCBI) sob os números de acesso MN896004, MN896107, MN896963 e MN896971, respectivamente.(AU)

Standard area diagram set for scab quantification in trilobed leaves of the sour passion fruit / Escala diagramática para a quantificação da verrugose em folhas trilobadas do maracujazeiro azedo

The study aimed to develop and validate a standard area diagram set (SADs) to improve accuracy, precision, and reproducibility in the assessment of scab severity in trilobed leaves of the sour passion fruit. The SADs comprised six severity levels (1%; 3%; 6%; 11%; 21%; and 33%). The SADs increased the accuracy of the estimates by reducing the constant and systematic errors, and the tendency to overestimate the actual severity, limited the number of evaluators who presented this trend, in addition to increasing the bias correction factor. The inexperienced evaluators were the ones that benefited the most from the SADs use. Once the SADs was introduced, 80% and 100% evaluators gave estimates free from constant and systematic errors, respectively. The improvement in precision was verified by the increase in the coefficient of determination and Lins concordance correlation coefficient, by reducing absolute errors and increasing the reproducibility of the estimates.(AU)

O objetivo deste estudo foi desenvolver e validar uma escala diagramática para melhorar a acurácia, precisão e reprodutibilidade na avaliação da severidade da verrugose em folhas trilobadas do maracujazeiro azedo. A escala apresentou seis níveis de severidade (1; 3; 6; 11; 21 e 33%) e aumentou a acurácia das estimativas, reduzindo os erros constantes e sistemáticos, a tendência de superestimação em relação aos valores de severidade real e o número de avaliadores que apresentavam essa tendência, além de aumentar o fator de correção do desvio. Os avaliadores inexperientes foram os mais beneficiados pela utilização da escala, sendo que 80% e 100% destes avaliadores apresentaram estimativas livres de erros constantes e sistemáticos, respectivamente, quando a escala foi empregada. O aumento da precisão foi verificado pelo incremento dos coeficientes de determinação e de concordância de Lin, redução dos erros absolutos e aumento da reprodutibilidade das estimativas.(AU)

Cladosporium cladosporioides isolado de gato com carcinoma de células escamosas / Cladosporium cladosporioides isolated from a cat with squamous cell carcinoma

Este relato descreve o caso do Cladosporium cladosporioides isolado de uma lesão periocular de um felino atendido no Hospital Veterinário da Universidade Federal de Mato Grosso, em Cuiabá. A principal queixa do proprietário era uma lesão periocular, com piora no decorrer do tempo, havia aproximadamente quatro meses. Foi descrita a tentativa de tratamento da lesão com anti-inflamatórios e antibióticos, sem sucesso. Na anamnese foi relatado que o animal tinha acesso à rua e a hábitos de caça e que não havia outros animais da casa com lesão semelhante. O animal foi submetido à biópsia e citologia para um diagnóstico mais preciso do caso. Um fragmento foi encaminhado para o Laboratório de Patologia Veterinária e outro para o de Microbiologia Veterinária. Nas análises histopatológicas, houve compatibilidade com carcinoma de células escamosas e, nas lâminas de citologia, foi evidenciado um processo inflamatório agudo. Nas características macroscópicas e microscópicas da colônia, houve compatibilidade com Cladosporium sp. Posteriormente, o DNA foi extraído e sequenciado, confirmando a espécie Cladosporium cladosporioides. O objetivo deste relato foi descrever o isolamento dessa espécie em um felino com carcinoma de células escamosas.(AU)

This report describes a case of Cladosporium cladosporioides isolated from a cat with a periocular lesion at the Veterinary Hospital, Cuiaba- Brazil. Owner described his animal as having a periocular lesion treated unsuccessfully with anti-inflamatories and antibiotics. During anamnesis, it was reported that the animal has access to the street, hunting habits and none of the other animals of the house had a similar injury. The animal underwent biopsy and cytology for more accurate diagnosis of the case. A fragment was referred to the Veterinary Pathology Laboratory and another for Veterinary Microbiology. In the histopathological analysis of biopsy, it was compatible with squamous cell carcinoma and the cytology slides showed an acute inflammatory process. Microbiogical analysis isolated fungus with Cladosporium sp. Subsequently, DNA was extracted and sequenced confirming Cladosporium cladosporioides species. This paper reports the isolation of this species in a feline with squamous cell carcinoma.(AU)

Cladosporium cladosporioides isolado de gato com carcinoma de células escamosas / Cladosporium cladosporioides isolated from a cat with squamous cell carcinoma

Este relato descreve o caso do Cladosporium cladosporioides isolado de uma lesão periocular de um felino atendido no Hospital Veterinário da Universidade Federal de Mato Grosso, em Cuiabá. A principal queixa do proprietário era uma lesão periocular, com piora no decorrer do tempo, havia aproximadamente quatro meses. Foi descrita a tentativa de tratamento da lesão com anti-inflamatórios e antibióticos, sem sucesso. Na anamnese foi relatado que o animal tinha acesso à rua e a hábitos de caça e que não havia outros animais da casa com lesão semelhante. O animal foi submetido à biópsia e citologia para um diagnóstico mais preciso do caso. Um fragmento foi encaminhado para o Laboratório de Patologia Veterinária e outro para o de Microbiologia Veterinária. Nas análises histopatológicas, houve compatibilidade com carcinoma de células escamosas e, nas lâminas de citologia, foi evidenciado um processo inflamatório agudo. Nas características macroscópicas e microscópicas da colônia, houve compatibilidade com Cladosporium sp. Posteriormente, o DNA foi extraído e sequenciado, confirmando a espécie Cladosporium cladosporioides. O objetivo deste relato foi descrever o isolamento dessa espécie em um felino com carcinoma de células escamosas.(AU)

This report describes a case of Cladosporium cladosporioides isolated from a cat with a periocular lesion at the Veterinary Hospital, Cuiaba- Brazil. Owner described his animal as having a periocular lesion treated unsuccessfully with anti-inflamatories and antibiotics. During anamnesis, it was reported that the animal has access to the street, hunting habits and none of the other animals of the house had a similar injury. The animal underwent biopsy and cytology for more accurate diagnosis of the case. A fragment was referred to the Veterinary Pathology Laboratory and another for Veterinary Microbiology. In the histopathological analysis of biopsy, it was compatible with squamous cell carcinoma and the cytology slides showed an acute inflammatory process. Microbiogical analysis isolated fungus with Cladosporium sp. Subsequently, DNA was extracted and sequenced confirming Cladosporium cladosporioides species. This paper reports the isolation of this species in a feline with squamous cell carcinoma.(AU)

Antifungal activity of geraniol and citronellol against food-relevant dematiaceous fungi Cladosporium spp / Atividade antifúngica de geraniol e citronelol frente a fungos dematiáceos de importância para os alimentos do gênero Cladosporium spp

Cladosporium spp. is a group of dematiaceous food-relevant fungi which are well dispersed in the environment causing food spoilage and poisoning. Considering the importance of fungal contamination, natural drugs to control their growth have become important. Thus, the aim of this study was to evaluate the inhibitory effects of two monoterpenoids, (geraniol and citronellol), against strains of Cladosporium carrioni, C. cladosporioides,and C. oxysporum. Methods: The Minimum Inhibitory Concentration (MIC) and Minimum Fungicide Concentration (MFC) of the drugs were determined by microdilution. The effects of test drugs on mycelial dry weight, conidia germination, and conidiogenesis of Cladosporium spp. were also investigated using a hemacytometer. Respective MIC and MFC values of citronellol varied from 256 to 512 μg/mL, and from 256 to 2048 μg/mL. The MIC and MFC of geraniol varied similarly to citronellol. Conidia germination, mycelial dry weight, and conidiogenesis of Cladosporium spp. were reduced by the test-drugs at 1/2MIC, MIC and 2xMIC (p<0.05). These measurable cell events are essential for fungal infection and development in foods. The action of citronellol and geraniol against Cladosporium spp. suggest that the drugs may serve as effective agents for controlling fungal contamination and growth in foods.

Cladosporium spp. é um grupo de fungos dematiáceos relevantes para os alimentos, que podem ser dispersos pelo ambiente e causar deterioração e intoxicação alimentar. Considerando a importância da contaminação fúngica, os produtos naturais usados para controlar seu crescimento são importantes. neste contexto, o objetivo deste estudo foi avaliar os efeitos inibitórios de dois monoterpenoides, geraniol e citronelol, contra cepas de Cladosporium carrioni, C. cladosporioides e C. oxysporum. A Concentração Inibitória Mínima (CIM) e Concentração Fungicida Mínima (CFM) das drogas foram determinadas por microdiluição. os efeitos das drogas-teste sobre a massa micelial seca, a germinação de conídios e a conidiogênese de Cladosporium spp. também foram investigados utilizando um hemocitômetro. os valores de CIM e CFM do citronelol variaram de 256 a 512 μg/mL e de 256 a 2048 μg/mL, respectivamente. CIM e CFM de geraniol variaram de forma semelhante. A germinação de conídios, massa micelial seca e conidiogênese de Cladosporium spp. foram inibidas pelas drogas-teste 1/2CIM, CIM e 2xCIM (p<0,05). Esses eventos celulares são essenciais para a infecção e desenvolvimento fúngico em alimentos. A ação de citronelol e geraniol contra Cladosporium spp. sugere que podem servir como agentes eficazes para controlar a contaminação fúngica e seu crescimento em alimentos.

Antifungal activity of geraniol and citronellol against food-relevant dematiaceous fungi Cladosporium spp / Atividade antifúngica de geraniol e citronelol frente a fungos dematiáceos de importância para os alimentos do gênero Cladosporium spp

Cladosporium spp. is a group of dematiaceous food-relevant fungi which are well dispersed in the environment causing food spoilage and poisoning. Considering the importance of fungal contamination, natural drugs to control their growth have become important. Thus, the aim of this study was to evaluate the inhibitory effects of two monoterpenoids, (geraniol and citronellol), against strains of Cladosporium carrioni, C. cladosporioides,and C. oxysporum. Methods: The Minimum Inhibitory Concentration (MIC) and Minimum Fungicide Concentration (MFC) of the drugs were determined by microdilution. The effects of test drugs on mycelial dry weight, conidia germination, and conidiogenesis of Cladosporium spp. were also investigated using a hemacytometer. Respective MIC and MFC values of citronellol varied from 256 to 512 μg/mL, and from 256 to 2048 μg/mL. The MIC and MFC of geraniol varied similarly to citronellol. Conidia germination, mycelial dry weight, and conidiogenesis of Cladosporium spp. were reduced by the test-drugs at 1/2MIC, MIC and 2xMIC (p<0.05). These measurable cell events are essential for fungal infection and development in foods. The action of citronellol and geraniol against Cladosporium spp. suggest that the drugs may serve as effective agents for controlling fungal contamination and growth in foods.(AU)

Cladosporium spp. é um grupo de fungos dematiáceos relevantes para os alimentos, que podem ser dispersos pelo ambiente e causar deterioração e intoxicação alimentar. Considerando a importância da contaminação fúngica, os produtos naturais usados para controlar seu crescimento são importantes. neste contexto, o objetivo deste estudo foi avaliar os efeitos inibitórios de dois monoterpenoides, geraniol e citronelol, contra cepas de Cladosporium carrioni, C. cladosporioides e C. oxysporum. A Concentração Inibitória Mínima (CIM) e Concentração Fungicida Mínima (CFM) das drogas foram determinadas por microdiluição. os efeitos das drogas-teste sobre a massa micelial seca, a germinação de conídios e a conidiogênese de Cladosporium spp. também foram investigados utilizando um hemocitômetro. os valores de CIM e CFM do citronelol variaram de 256 a 512 μg/mL e de 256 a 2048 μg/mL, respectivamente. CIM e CFM de geraniol variaram de forma semelhante. A germinação de conídios, massa micelial seca e conidiogênese de Cladosporium spp. foram inibidas pelas drogas-teste 1/2CIM, CIM e 2xCIM (p<0,05). Esses eventos celulares são essenciais para a infecção e desenvolvimento fúngico em alimentos. A ação de citronelol e geraniol contra Cladosporium spp. sugere que podem servir como agentes eficazes para controlar a contaminação fúngica e seu crescimento em alimentos.(AU)

Thermoduric psychrotrophic proteolytic microbiota from refrigerated raw milk / Microbiota termodúrica psicrotrófica proteolítica do leite cru refrigerado

Thermoduric microorganisms may withstand high temperatures during the pasteurization of milk. Therefore, the microbiota in pasteurized milk consist of thermoduric microbes and directly influence the shelf-life of the milk. The aim of this study was to identify thermoduric psychrotrophic proteolytic microbiota in refrigerated raw milk. Twenty samples, previously heat-treated, were streaked and incubated at 7°C for 10 days. The strains isolated were streaked on milk agar to assess proteolytic activity and were initially analyzed morphologically by light microscopy and then by molecular techniques to identify the species. In 40% of the samples analyzed was observed only one bacterial growth and others 10 thermoduric psychrotrophic fungi. All isolates were proteolytic. The sequencing of 16S rRNA gene identified the bacterial strain as Bacillus pumilus and analysis of the ITS1-5.8S-ITS2 region of fungal isolates revealed the Cladosporium cladosporioides (60%), Curvularia geniculatus (10%), and the 3 remaining strains were identified as Geotrichum candidum (30%). This is a fist description of B. pumilus in Brazilian raw milk. Considering the spoilage potential of all isolates and of the fungi present in raw milk and their survival in pasteurized milk, it is extremely important to carry out further studies to your resistant to heat, their impact on the shelf-life of pasteurized milk, ultra-high temperature (UHT) milk and dairy products.(AU)

Os micro-organismos termodúricos são aqueles capazes de resistir ao processo de pasteurização do leite. Assim, a microbiota do leite pasteurizado é constituída por esses micro-organismos que podem influenciar diretamente na vida sua vida útil. O objetivo do presente trabalho foi identificar a microbiota termodurica psicrotrófica proteolítica do leite cru refrigerado. Foram avaliadas 20 amostras de leite cru refrigerado, plaqueadas e incubadas a 7°C por 10 dias. As cepas isolados foram repicadas em ágar leite para verificação da atividade proteolítica e inicialmente avaliadas microscopicamente e posteriormente identificadas por sequenciamento de DNA. Foi observado apenas um crescimento bacteriano e outros 10 isolados fúngicos termodúricos psicrotróficos em 40% das amostras avaliadas. Todos os isolados foram proteolíticos. O sequenciamento parcial do gene 16S rRNA da cepa bacteriana permitiu a identificação de Bacillus pumilus e a análise da região ITS1-5.8S-ITS2 dos isolados fúngicos os identificou como Cladosporium cladosporioides (60%), Curvularia geniculatus (10%), e Geotrichum candidum (30%). Não foram encontrados estudos anteriores sobre a presença de B. pumilus no leite cru brasileiro. Considerando o potencial deteriorante de todos os isolados e presença de fungos termodúricos psicrotróficos no leite cru, é importante a continuidade trabalhos que avaliem sua resistência térmica e seu impacto na vida útil do leite pasteurizado, longa vida e derivados.(AU)

Composição química e atividade antifúngica do óleo essencial de poejo em diferentes estágios de desenvolvimento / Chemical composition and antifungal activity of pennyroyal essential oil in different stages of development

O objetivo deste estudo foi comparar o rendimento, a composição química e a atividade antifúngica do óleo essencial de Mentha pulegium (poejo) em diferentes estágios de desenvolvimento, cultivada sob condições controladas no sul do Brasil. A hidrodestilação de folhas frescas de M. pulegium, coletadas aos 60, 70 e 85 dias após o transplante, apresentou rendimento de óleo essencial de 0,17 %, 0,23 % e 0,17 %, respectivamente. Todas as amostras de óleo apresentaram atividade contra Cladosporium herbarum. Através das análises de cromatografia gasosa (GC) e GC/MS do óleo essencial, foram identificados onze constituintes, sete (mentona, isomentona, neoisomentol, pulegona, piperitona, 1.1- dimetoxi-2- nonino e piperitenona) comuns às três amostras, enquanto dois outros (mentofurano, mirtenal) foram detectados somente nas amostras da primeira e segunda coletas. A pulegona foi o principal constituinte nas duas primeiras amostras (26,65 %), seguida pela piperitenona (20,41; 12,60 %). A concentração de pulegona aumentou para 31,05 % na última coleta, porém o constituinte majoritário foi a piperitenona (36,32 %). Os resultados demonstraram que o óleo essencial de M. pulegium apresenta potencial como agente antifúngico e sua composição química depende do estágio de desenvolvimento da planta.(AU)

The aim of this study was to compare the yield, chemical composition and antifungal activity of the essential oil that is obtained from Mentha pulegium in different developmental stages and cultivated under controlled conditions in southern Brazil. The hydrodistillation of fresh leaves that were collected at 60, 70 and 85 days resulted inessential oil yields of 0.17 %, 0.23 % and 0.17 %, respectively. All of the essential oil samples showed antifungal activity against Cladosporium herbarum. The gas chromatograph (GC) and GC/MS analysis revealed eleven constituents: seven (pulegone, piperitenone, menthone, isomenthone, neoisomenthol, piperitone and 1.1-dimethoxy-2-nonyne) were common to three samples, while menthofuran and myrtenal were detected only in samples of the first and second stages. Pulegone was the main constituent of the essential oil samples from the first and second stages (26.65 %), followed by piperitenone (20.41; 12.60 %). The pulegone concentration increased to 31.05 % in the last collection, while the major constituent was piperitenone (36.32 %). In conclusion, the results demonstrated that M. pulegium essential oil presents potential as an antifungal agent, and its chemical composition depends on the stage of development during which it was extracted.(AU)

Identification of the airborne fungal microbiota in a fruit pulp industry and antifungal susceptibility to terpenes / Identificação da microbiota fúngica anemófila em uma indústria de polpas de frutas e susceptibilidade antifúngica a terpenos

Airborne fungi are important food contaminants and spoiling agents, especially in fruits and their derivatives. This study aimed at identifying the main fungi in the airborne microbiota in a fruit pulp industry, located in Paraíba State, and to investigate the antifungal action of terpenes as an alternative for controlling fungal growth. The Petri plates containing Sabouraud dextrose agar with chloramphenicol (50 g/mL) were exposed for collecting the fungi. The plates were incubated at 28 C for seven days; then the colony forming unitscounting, and description were performed. The identification of fungi was performed by the morphological analysis of isolated colonies. The main group of fungi isolated throughout the industry was Cladosporium spp. Antifungal tests were performed by diffusion technique in solid medium with discs containing terpenes: carvacrol, citronellal, citral, linalool, thymol, terpinolene, p-cymene and -caryophyllene. The effectiveness of some of these terpenes against Cladosporium spp. strains was shown, especially citral and carvacrol. Based on these results, the fruit pulp industry shows vulnerable ambient air, notably with high contamination by Cladosporium spp. Thus, it is aimed at promoting further studies with natural drugs in order to reduce the fungal contamination in food.(AU)

Os fungos anemófilos são importantes agentes contaminantes e deteriorantes de alimentos, especialmente frutas e seus produtos. Neste estudo foram identificados os principais gêneros fúngicos presentes na microbiota anemófila de uma indústria de polpas de frutas, localizada no interior da Paraíba, e foi investigada a ação antifúngica de terpenos como possível alternativa de controle do crescimento fúngico. Os fungos foram coletados pela exposição de placas de Petri contendo meio Agar Sabouraud dextrose com cloranfenicol (50 g/mL). Após a incubação a 28 C durante sete dias, foram realizadas a contagem das unidades formadoras de colônias e sua descrição. Os fungos foram identificados pela análise morfológica das colônias isoladas. O principal gênero isolado em toda indústria foi o dematiáceo Cladosporium spp. Os ensaios de sensibilidade foram efetuados aplicando-se a técnica de difusão em meio sólido com discos contendo os terpenos: carvacrol, citronelal, citral, linalol, timol, terpinoleno, p-cimeno e -cariofileno. A efetividade de alguns destes terpenos frente a cepas do Cladosporium spp foi demonstrada, com destaque para o citral e carvacrol. A indústria de polpas de frutas apresenta ar de ambiente vulnerável, especialmente contaminação por Cladosporium spp. Pretende-se impulsionar novos estudos com produtos naturais na perspectiva de diminuir a contaminação fúngica em alimentos.(AU)

Epicoccum nigrum and Cladosporium sp. for the treatment of oily effluent in an air-lift reactor

The metalworking industry is responsible for one of the most complex and difficult to handle oily effluents. These effluents consist of cutting fluids, which provide refrigeration and purification of metallic pieces in the machining system. When these effluents are biologically treated, is important to do this with autochthonous microorganisms, the use of these microorganisms (bioaugmentation) tends to be more efficient because they are already adapted to the existing pollutants. For this purpose, this study aimed to use two indigenous microorganisms, Epicoccum nigrum and Cladosporium sp. for metalworking effluent treatment using an air-lift reactor, the fungus Aspergillus niger (laboratory strain) was used as a reference microorganism. The original effluent characterization presented considerable pollutant potential. The color of the effluent was 1495 mg Pt/L, and it contained 59 mg/L H2O2, 53 mg/L total phenols, 2.5 mgO2/L dissolved oxygen (DO), and 887 mg/L oil and grease. The COD was 9147 mgO2/L and the chronic toxicity factor was 1667. Following biotreatment, the fungus Epicoccum nigrum was found to be the most efficient in reducing (effective reduction) the majority of the parameters (26% COD, 12% H2O2, 59% total phenols, and 40% oil and grease), while Cladosporium sp. was more efficient in color reduction (77%).(AU)

Fungos Anemófilos e Leveduras isolados em ambientes de laboratórios de microbiologia em Instituição de Ensino Superior

Os fungos presentes no ar atmosférico são denominados anemófilos, sendo este habitat o meio de dispersão mais utilizado por esses microrganismos, que possuem a capacidade de colonizar diferentes substratos de forma singular e eficiente. Assim, dificilmente pode existir ambiente livre de contaminação fúngica. As concentrações de fungos no ambiente sofrem influências de diversos fatores, incluindo variáveis ambientais e fatores físicos que podem aumentar a quantidade de propágulos no ambiente. Os fungos anemófilos podem causar problemas como a deterioração de materiais, alergias, intoxicações e infecções. Assim, a presença desses microrganismos em laboratórios de microbiologia pode causar grandes problemas econômicos, de qualidade diagnóstica e relacionados à pesquisa, além das possibilidades de causar prejuízo à saúde das pessoas que trabalham no local. Ao fazer-se uso das normas de biossegurança, o monitoramento de fungos torna-se, então, necessário para um adequado controle ambiental, evitando assim contaminações e infecções. O objetivo deste trabalho foi realizar o isolamento e identificação da microbiota fúngica ambiental presente em nove laboratórios de ensino, pesquisa e extensão da Universidade Federal de Pelotas (UFPel) durante o período de fevereiro a novembro de 2015, abrangendo as quatro estações. A técnica utilizada foi de sedimentação em placa de Petri contendo meio Ágar Sabouraud dextrose com adição de cloranfenical. Durante o estudo foram coletadas 228 placas mensais provenientes de coletas semanais dos nove laboratórios totalizando 912 placas no final do experimento, das quais foram isoladas um total de 5101 Unidades Formadoras de Colônias (UFC). Conforme a sazonalidade, o outono foi a estação que apresentou maior número de UFC, correspondendo a 35% (1808/5101) do total encontrado, já no inverno obteve-se apenas 17,3% (884/5101). Em relação ao isolamento fúngico, o gênero Cladosporium representou 46,3% do total de UFC, seguido de Penicillium e de fungos não caracterizados quanto ao gênero, em decorrência da ausência de micélio reprodutivo, sendo então classificados como micélio aéreo estéril. Não houve diferença significativa entre o número de UFC encontradas nos distintos laboratórios, assim como também não houve diferença no número de UFC encontradas nos distintos ambientes pertencentes aos laboratórios. Os gêneros prevalentes foram Cladosporium e Penicillium.

The fungi present in atmospheric air are called airborne, which is the dispersion medium habitat most used by these microorganisms, which have the ability to colonize different natural substrates and efficiently. Thus, there can hardly fungal contamination-free environment. Fungal concentrations in the environment are influenced by several factors, including environmental factors and physical factors that can increase the number of propagules in the environment. The airborne fungi can cause problems such as deterioration of materials, allergies, poisoning and infections. Thus, the presence of these microorganisms in microbiology laboratories can cause major economic problems, diagnostic and research related to quality, and the potential to cause harm to the health of the people working on site. When making up the use of bio-security standards, monitoring of fungi becomes then necessary for proper environmental control, thus avoiding contamination and infections. The aim of this study was the isolation and identification of the fungal microbiota present in nine teaching laboratories, research and extension of the Federal University of Pelotas (UFPel) during the period from February to November 2015, covering the four seasons. The technique used was settling in Petri dishes containing Sabouraud dextrose agar medium with added cloranfenical. During the study were collected 228 monthly cards from weeks collection of nine laboratories totaling 912 cards at the end of the experiment, which were isolated from a total of 5101 Colony Forming Units (CFU). As the seasonal, autumn was the season that had the highest number of CFU, corresponding to 35% (1808/5101) of the total found, already in winter yielded only 17.3 % (884/5101). Compared to fungal isolation, Cladosporium genre represented 46.3 % of the CFU, followed by Penicillium fungi and not characterized as gender, due to the absence of reproductive mycelium, then being classified as "sterile aerial mycelium". There was no significant difference between the number of CFU found in different laboratories, as well as there was no difference in the number of CFUs in different environments belonging to the laboratories. The prevalent genera were Cladosporium and Penicillium.

Action of mycoflora from agri-industrial effluents on different dyes and lignocellulosic substrates - doi: 10.4025/actascibiolsci.v33i4.6187 / Ação de Micoflora de efluentes agroindustriais sobre diferentes corantes e substratos lignocelulósicos - doi: 10.4025/actascibiolsci.v33i4.6187

Extracellular enzymes of fungi are important for survival in inhospitable environments, as they are able to degrade recalcitrant compounds. Filamentous fungi secrete hydrolases and phenoloxidases that are capable of degrading complexes of aromatic structures, such as certain xenobiotics. The purpose of this study was to test different dyes (methylene blue, Azure B, Malachite Green and Crystal Violet), replacing the compound Poly R478 in the method of selection of phenol decomposer microorganisms in solid medium, and compare this activity of the mycoflora of effluents from sugar-alcohol industry, to the ones of other fungi acquired in official collection. The tested dyes proved to be excellent substitutes for Poly R478. The isolate that showed more intense decolorant activity than the diameter of its growth (Cladosporium sp.) was then tested on two natural and one synthetic substrate (sugarcane bagasse, sawing wood, and methylene blue) in liquid medium. This isolate removed high concentrations of reducing sugars, proteins and total phenols, and reduced the COD in medium containing sawdust as natural substrate of phenols. This fungus, therefore, seems promising to form consortia for co-metabolism and bioremediation of effluents in which there is a presence of phenolic or other recalcitrant compounds with similar structure to lignin.

Enzimas extracelulares de fungos são importantes para sua sobrevivência em ambientes inóspitos, sendo capazes de degradar compostos recalcitrantes. Fungos filamentosos secretam hidrolases e fenoloxidases capazes de degradar complexos de estruturas aromáticas, como de alguns xenobióticos. O propósito deste trabalho foi testar diferentes corantes (Azul de Metileno, Azure B, Verde Malaquita e Cristal Violeta), em substituição ao composto Poly R478, no método de seleção de microrganismos degradadores de fenóis em meio sólido, além de comparar tal atividade de Micoflora isolada de efluentes de indústria sucroalcooleira com a de outros fungos adquiridos em coleção oficial. Os corantes testados revelaram-se ótimos substitutos do Poly R478. O isolado que apresentou atividade descolorante mais intenso do que a do diâmetro de seu crescimento (Cladosporium sp.) foi testado, então, em meio líquido frente a dois substratos naturais e um sintético (bagaço de cana, serragem de madeira e azul de metileno). Este removeu altas concentrações de glicídios redutores, proteínas e fenóis totais, além de reduzir a DQO em meio com serragem de madeira como substrato fenólico natural. Tal fungo, portanto, mostrou-se promissor para compor consórcios visando cometabolismo e biorremediação de efluentes nos quais há presença de compostos fenólicos ou outros recalcitrantes com estrutura semelhante à de lignin

Ação de Micoflora de efluentes agroindustriais sobre diferentes corantes e substratos lignocelulósicos / Action of mycoflora from agri-industrial effluents on different dyes and lignocellulosic substrates

Enzimas extracelulares de fungos são importantes para sua sobrevivência em ambientes inóspitos, sendo capazes de degradar compostos recalcitrantes. Fungos filamentosos secretam hidrolases e fenoloxidases capazes de degradar complexos de estruturas aromáticas, como de alguns xenobióticos. O propósito deste trabalho foi testar diferentes corantes (Azul de Metileno, Azure B, Verde Malaquita e Cristal Violeta), em substituição ao composto Poly R478, no método de seleção de microrganismos degradadores de fenóis em meio sólido, além de comparar tal atividade de Micoflora isolada de efluentes de indústria sucroalcooleira com a de outros fungos adquiridos em coleção oficial. Os corantes testados revelaram-se ótimos substitutos do Poly R478. O isolado que apresentou atividade descolorante mais intenso do que a do diâmetro de seu crescimento (Cladosporium sp.) foi testado, então, em meio líquido frente a dois substratos naturais e um sintético (bagaço de cana, serragem de madeira e azul de metileno). Este removeu altas concentrações de glicídios redutores, proteínas e fenóis totais, além de reduzir a DQO em meio com serragem de madeira como substrato fenólico natural. Tal fungo, portanto, mostrou-se promissor para compor consórcios visando cometabolismo e biorremediação de efluentes nos quais há presença de compostos fenólicos ou outros recalcitrantes com estrutura semelhante à de lignina.

Extracellular enzymes of fungi are important for survival in inhospitable environments, as they are able to degrade recalcitrant compounds. Filamentous fungi secrete hydrolases and phenoloxidases that are capable of degrading complexes of aromatic structures, such as certain xenobiotics. The purpose of this study was to test different dyes (methylene blue, Azure B, Malachite Green and Crystal Violet), replacing the compound Poly R478 in the method of selection of phenol decomposer microorganisms in solid medium, and compare this activity of the mycoflora of effluents from sugar-alcohol industry, to the ones of other fungi acquired in official collection. The tested dyes proved to be excellent substitutes for Poly R478. The isolate that showed more intense decolorant activity than the diameter of its growth (Cladosporium sp.) was then tested on two natural and one synthetic substrate (sugarcane bagasse, sawing wood, and methylene blue) in liquid medium. This isolate removed high concentrations of reducing sugars, proteins and total phenols, and reduced the COD in medium containing sawdust as natural substrate of phenols. This fungus, therefore, seems promising to form consortia for co-metabolism and bioremediation of effluents in which there is a presence of phenolic or other recalcitrant compounds with similar structure to lignin.

Control of the Alphitobius diaperinus (Panzer) (Coleoptera: Tenebrionidae) with entomopathogenic fungi

The beetle Alphitobius diaperinus (Panzer), considered a worldwide pest in the poultry industry, is difficult to control and it is a vector for pathogens. The objective of this study was to evaluate the biological control of the lesser mealworm, by strains of fungi Beauveria bassiana, Cladosporium sp. and Trichoderma sp. Larvae and adults of the A. diaperinus were inoculated with suspensions of conidia in the concentration of 10(7) conídia.mL-1. The B. bassiana isolate caused higher insect mortality as compared to Cladosporium sp. and Trichoderma sp. isolates, with the larvae being more susceptible than adults. The entomopathogenicity of B. bassiana was further evaluated with 200 larvae and 200 adults of A. diaperinus inoculated with suspensions 10(6), 10(7), and 10(8) conidia.mL-1, and observed for ten days. Larvae mortality started at the fourth day at the lowest concentration, and the adult mortality was only observed on the sixth day at the concentration of 10(8) conidia.mL-1.

Control of the Alphitobius diaperinus (Panzer) (Coleoptera: Tenebrionidae) with entomopathogenic fungi

The beetle Alphitobius diaperinus (Panzer), considered a worldwide pest in the poultry industry, is difficult to control and it is a vector for pathogens. The objective of this study was to evaluate the biological control of the lesser mealworm, by strains of fungi Beauveria bassiana, Cladosporium sp. and Trichoderma sp. Larvae and adults of the A. diaperinus were inoculated with suspensions of conidia in the concentration of 10(7) conídia.mL-1. The B. bassiana isolate caused higher insect mortality as compared to Cladosporium sp. and Trichoderma sp. isolates, with the larvae being more susceptible than adults. The entomopathogenicity of B. bassiana was further evaluated with 200 larvae and 200 adults of A. diaperinus inoculated with suspensions 10(6), 10(7), and 10(8) conidia.mL-1, and observed for ten days. Larvae mortality started at the fourth day at the lowest concentration, and the adult mortality was only observed on the sixth day at the concentration of 10(8) conidia.mL-1.

Thermoduric psychrotrophic proteolytic microbiota from refrigerated raw milk / Microbiota termodúrica psicrotrófica proteolítica do leite cru refrigerado

Thermoduric microorganisms may withstand high temperatures during the pasteurization of milk. Therefore, the microbiota in pasteurized milk consist of thermoduric microbes and directly influence the shelf-life of the milk. The aim of this study was to identify thermoduric psychrotrophic proteolytic microbiota in refrigerated raw milk. Twenty samples, previously heat-treated, were streaked and incubated at 7°C for 10 days. The strains isolated were streaked on milk agar to assess proteolytic activity and were initially analyzed morphologically by light microscopy and then by molecular techniques to identify the species. In 40% of the samples analyzed was observed only one bacterial growth and others 10 thermoduric psychrotrophic fungi. All isolates were proteolytic. The sequencing of 16S rRNA gene identified the bacterial strain as Bacillus pumilus and analysis of the ITS1-5.8S-ITS2 region of fungal isolates revealed the Cladosporium cladosporioides (60%), Curvularia geniculatus (10%), and the 3 remaining strains were identified as Geotrichum candidum (30%). This is a fist description of B. pumilus in Brazilian raw milk. Considering the spoilage potential of all isolates and of the fungi present in raw milk and their survival in pasteurized milk, it is extremely important to carry out further studies to your resistant to heat, their impact on the shelf-life of pasteurized milk, ultra-high temperature (UHT) milk and dairy products.

Os micro-organismos termodúricos são aqueles capazes de resistir ao processo de pasteurização do leite. Assim, a microbiota do leite pasteurizado é constituída por esses micro-organismos que podem influenciar diretamente na vida sua vida útil. O objetivo do presente trabalho foi identificar a microbiota termodurica psicrotrófica proteolítica do leite cru refrigerado. Foram avaliadas 20 amostras de leite cru refrigerado, plaqueadas e incubadas a 7°C por 10 dias. As cepas isolados foram repicadas em ágar leite para verificação da atividade proteolítica e inicialmente avaliadas microscopicamente e posteriormente identificadas por sequenciamento de DNA. Foi observado apenas um crescimento bacteriano e outros 10 isolados fúngicos termodúricos psicrotróficos em 40% das amostras avaliadas. Todos os isolados foram proteolíticos. O sequenciamento parcial do gene 16S rRNA da cepa bacteriana permitiu a identificação de Bacillus pumilus e a análise da região ITS1-5.8S-ITS2 dos isolados fúngicos os identificou como Cladosporium cladosporioides (60%), Curvularia geniculatus (10%), e Geotrichum candidum (30%). Não foram encontrados estudos anteriores sobre a presença de B. pumilus no leite cru brasileiro. Considerando o potencial deteriorante de todos os isolados e presença de fungos termodúricos psicrotróficos no leite cru, é importante a continuidade trabalhos que avaliem sua resistência térmica e seu impacto na vida útil do leite pasteurizado, longa vida e derivados.