Carbúnculo sintomático em bovino: evolução clínica e terapêutica / Symptomatic blackleg in bovine: clinical and therapeutic evolution

As clostridioses são infecções comuns em rebanhos bovinos, causadas por microrganismos do gênero Clostridium e que afetam principalmente animais mais jovens. O objetivo deste estudo é relatar a evolução clínica e tratamento de um bovino acometido com carbúnculo sintomático. A paciente não apresentava histórico vacinal para clostridiose, e pertencia a um lote de animais em que já haviam ocorrido três mortes súbitas em curto período de tempo. Na avaliação física do animal em decúbito esternal, foram constatados sinais clínicos típicos de carbúnculo sintomático, edema e crepitação em membro pélvico e região escapular, além de claudicação quando colocado em estação. Também foi observado edema na região da cabeça, porém este sinal clínico não é frequentemente relatado em literatura científica. Mesmo com prognóstico desfavorável devido à manifestação grave da doença e grande parte das pesquisas mostrarem taxa de letalidade de quase 100%, optou-se pela tentativa de realizar as medidas terapêuticas necessárias. Foi realizado tratamento suporte e administração de fármacos, destacando-se a antibioticoterapia com penicilina. Além disso, também foi conduzido o procedimento cirúrgico por meio de confecção de incisões na pele e no subcutâneo do membro afetado (método ainda não descrito na literatura científica) com objetivo de reduzir a proliferação do Clostridium. Após 32 dias de tratamento, o animal obteve a cura clínica completa. As medidas terapêuticas foram suficientes para recuperar da saúde da paciente.

Clostridial diseases are common infections in cattle herds, caused by microorganisms of the genus Clostridium that mainly affect younger animals. This study aims to report the clinical evolution and treatment of a bovine affected with symptomatic blackleg. The patient had no vaccination history for clostridial disease and belonged to a group of animals in which three sudden deaths had already occurred in a short time. In the physical evaluation of the animal in sternal recumbency, typical clinical signs of blackleg, edema and crackling in the pelvic limb and scapular region and lameness when placed in the station were determined. Edema was also observed in the head region, but this clinical sign is not frequently reported in the scientific literature. Even with an unfavorable prognosis due to the severe manifestation of the disease and a large part of the studies showing a lethality rate of almost 100%, it was decided to try to carry out the necessary therapeutic methods. Support treatment and drug administration were performed, especially antibiotic therapy with penicillin. In addition, a surgical procedure was carried out by making incisions in the skin and subcutaneous tissue of the affected limb (a method not yet described in the scientific literature) to reduce the proliferation of Clostridium. After thirty-two days of treatment, the animal got a complete clinical cure. Therapeutic measures were sufficient to recover the patient's health.

Characterization of coccidiosis and evaluation of suggestive cases of subclinical necrotic enteritis in broilers / Caracterização de coccidiose e avaliação de casos sugestivos de enterite necrótica subclínica em frangos de corte

This study performed the characterization of coccidiosis in broilers and evaluated the occurrence of suggestive cases of necrotic enteritis (NE), seeking if there is an association between the diseases in Brazilian flocks. Two hundred and fifty-six birds from 32 flocks were evaluated. Macroscopic and histopathological lesions were graduated for coccidiosis and NE. Intestinal content was investigated by polymerase chain reaction (PCR) for seven species of Eimeria and by selective anaerobic culture for Clostridium perfringens and identification of the NetB gene. Flocks positive for coccidiosis represented 93.8%. Macroscopic lesions of coccidiosis were Grade 1 for E. acervulina (27%); E. tenella (9.7%) and E. maxima (8.9%). Histopathological evaluation showed Grade 1 in duodenum (38.2%); jejunum (21.4%); cecum (9.3%) and ileum (5%). PCR demonstrated positivity for E. tenella (21.9%), E. maxima (18.8%), and E. acervulina (3.1%). Suggestive macroscopic lesions of necrotic enteritis ranged from Grade 1 (16%), 2 (23%) and 3 (10,9%). Histopathology indicated the absence of necrosis, showing only hemorrhage in the mucosa and submucosa, with the presence of Eimeria spp. Clostridium perfringens type A netB+ was not isolated, demonstrating that macroscopic lesions found mostly in the jejunum did not characterize NE, based on histopathology and negativity of the NetB gene. The study suggests that, due to the high occurrence of coccidiosis, many macroscopic findings suggestive of NE are, in fact, attributed to atypical lesions caused by the reproduction of Eimeria spp.

Este estudo realizou a caracterização de coccidiose em frangos de corte e avaliou a ocorrência de casos sugestivos de enterite necrótica (EN), buscando se há alguma associação entre estas duas enfermidades em lotes de frango de corte no Brasil. Foram avaliadas 256 aves de 32 lotes. Lesões macroscópicas e histopatológicas foram graduadas para coccidiose e EN. O conteúdo intestinal foi investigado por reação em cadeia da polimerase (PCR) para sete espécies de Eimeria e por cultura anaeróbia seletiva para Clostridium perfringens e identificação do gene NetB. Os lotes positivos para coccidiose representaram 93,8%. Lesões macroscópicas de coccidiose foram de Grau 1 para E. acervulina (27%); E. tenella (9,7%) e E. maxima (8,9%). A avaliação histopatológica mostrou Grau 1 no duodeno (38,2%); jejuno (21,4%); ceco (9,3%) e íleo (5%). A PCR demonstrou positividade para E. tenella (21,9%), E. maxima (18,8%) e E. acervulina (3,1%). Lesões macroscópicas sugestivas de enterite necrótica variaram de grau 1 (16%), 2 (23%) e 3 (10,9%). A histopatologia indicou ausência de necrose, apresentando apenas hemorragia em mucosa e submucosa, com presença de Eimeria spp. Clostridium perfringens tipo A netB + não foi isolado, demonstrando que lesões macroscópicas encontradas principalmente no jejuno não caracterizaram NE, com base na histopatologia e negatividade do gene NetB. O estudo sugere que, em virtude da alta ocorrência de coccidiose nos lotes, muitos achados macroscópicos sugestivos de EN são, na verdade, atribuídos a lesões atípicas provocadas pela reprodução de Eimeria spp.

Systemic clostridiosis due to Clostridium perfringens infection in Equus asinus - case report / Clostridiose sistêmica devido a infecção de Clostridium perfringens em Equus asinus - relato de caso

Clostridial infections, particularly clostridial myonecrosis, can be fulminant and fatal; they often arise without an obvious history of trauma. The majority of equine clostridial myonecrosis cases are associated with intramuscular injection. This paper presents the first report of clostridial myositis by C. perfringens in a donkey after an injection of flunixin meglumine on the neck, describing the clinical, necroscopic, and histopathological events. Bacterial isolation and biochemical tests confirmed the definitive diagnosis of C. perfringens.

Clostridioses, particularmente a mionecrose clostridial, podem ser fulminantes e fatais; elas geralmente surgem sem um histórico óbvio de trauma. A maioria dos casos de mionecrose clostridial equina está associada à injeção intramuscular. Este artigo apresenta o primeiro relato de miosite clostridial por C. perfringens em jumento após injeção de flunixina meglumina no pescoço, descrevendo os achados clínicos, necroscópicos e histopatológicos. Isolamento bacteriano e testes bioquímicos confirmaram o diagnóstico definitivo de C. perfringens.

Protective efficacy of commercial vaccines against a virulent field strain of Clostridium chauvoei / Eficácia protetiva de vacinas comerciais contra uma cepa de campo virulenta de Clostridium chauvoei

Blackleg is an acute and frequently fatal infection that mainly affects cattle and is caused by Clostridium chauvoei. Formalin-killed, whole-cell vaccines are commonly used to control blackleg. The aim of this study was to verify the protective efficacy of two commercial vaccines against the infection of guinea pigs with two strains of C. chauvoei, a virulent field strain (SBP 07/09) and the reference strain used in official tests (Manguinhos-Teixeira or MT). The strains used in the challenge were characterized by whole genome sequencing, and the minimal inhibitory concentrations of 15 antimicrobials were determined. To assess the protective efficacy, guinea pigs were vaccinated and subsequently challenged with C. chauvoei. All four vaccinated and challenged groups seroconverted after vaccination, while the control group remained seronegative, as determined by indirect ELISA. The identical performance of the two C. chauvoei strains in terms of virulence after challenge and their inability to infect vaccinated animals was correlated with their high genetic homology. Both commercial vaccines showed good protective efficacy against both the reference and field strains. Although C. chauvoei vaccination failures have been reported, the results from our study and others reported high similarity among C. chauvoei strains from all over the world, which suggests that the vaccine failures are not due to antigenic variability but inadequate vaccine management.(AU)

O carbúnculo sintomático é uma infecção aguda e frequentemente fatal que afeta principalmente os bovinos, causada pelo Clostridium chauvoei. A administração de vacinas formolizadas compostas pelas células bacterianas inteiras é comumente utilizada no controle desta doença. O objetivo deste estudo foi verificar, em cobaios, a eficácia protetiva de duas vacinas comerciais contra duas cepas de Clostridium chauvoei, uma cepa de campo virulenta (SBP 07/09) e a cepa de referência utilizada nos testes oficiais (MT, Manguinhos-Teixeira). Adicionalmente, realizar a caracterização das cepas utilizadas no desafio pelo sequenciamento completo do genoma e pela determinação da concentração inibitória mínima frente a 15 antimicrobianos. Para tanto, os cobaios foram vacinados e subsequentemente desafiados com. Os quatro grupos vacinados e desafiados soroconverteram, enquanto que o grupo controle permaneceu soronegativo pelo teste de ELISA indireto. O desempenho idêntico das duas cepas de C. chauvoei após o desafio in vivo e a incapacidade de infectar os animais vacinados está correlacionado com a homologia genética das cepas. Além disso, ambas as vacinas comerciais demonstraram uma adequada eficácia protetiva contra as cepas de campo e de referência. Embora o insucesso das vacinações contra C. chauvoei tenha sido previamente relatado, os resultados deste estudo, juntamente com a alta similaridade genética reportada previamente em cepas provenientes de diferentes continentes sugerem que as falhas vacinais não estão relacionadas à variabilidade antigênica, mas sim ao manejo vacinal inadequado.(AU)

Protective efficacy of commercial vaccines against a virulent field strain of Clostridium chauvoei / Eficácia protetiva de vacinas comerciais contra uma cepa de campo virulenta de Clostridium chauvoei

Blackleg is an acute and frequently fatal infection that mainly affects cattle and is caused by Clostridium chauvoei. Formalin-killed, whole-cell vaccines are commonly used to control blackleg. The aim of this study was to verify the protective efficacy of two commercial vaccines against the infection of guinea pigs with two strains of C. chauvoei, a virulent field strain (SBP 07/09) and the reference strain used in official tests (Manguinhos-Teixeira or MT). The strains used in the challenge were characterized by whole genome sequencing, and the minimal inhibitory concentrations of 15 antimicrobials were determined. To assess the protective efficacy, guinea pigs were vaccinated and subsequently challenged with C. chauvoei. All four vaccinated and challenged groups seroconverted after vaccination, while the control group remained seronegative, as determined by indirect ELISA. The identical performance of the two C. chauvoei strains in terms of virulence after challenge and their inability to infect vaccinated animals was correlated with their high genetic homology. Both commercial vaccines showed good protective efficacy against both the reference and field strains. Although C. chauvoei vaccination failures have been reported, the results from our study and others reported high similarity among C. chauvoei strains from all over the world, which suggests that the vaccine failures are not due to antigenic variability but inadequate vaccine management.

O carbúnculo sintomático é uma infecção aguda e frequentemente fatal que afeta principalmente os bovinos, causada pelo Clostridium chauvoei. A administração de vacinas formolizadas compostas pelas células bacterianas inteiras é comumente utilizada no controle desta doença. O objetivo deste estudo foi verificar, em cobaios, a eficácia protetiva de duas vacinas comerciais contra duas cepas de Clostridium chauvoei, uma cepa de campo virulenta (SBP 07/09) e a cepa de referência utilizada nos testes oficiais (MT, Manguinhos-Teixeira). Adicionalmente, realizar a caracterização das cepas utilizadas no desafio pelo sequenciamento completo do genoma e pela determinação da concentração inibitória mínima frente a 15 antimicrobianos. Para tanto, os cobaios foram vacinados e subsequentemente desafiados com. Os quatro grupos vacinados e desafiados soroconverteram, enquanto que o grupo controle permaneceu soronegativo pelo teste de ELISA indireto. O desempenho idêntico das duas cepas de C. chauvoei após o desafio in vivo e a incapacidade de infectar os animais vacinados está correlacionado com a homologia genética das cepas. Além disso, ambas as vacinas comerciais demonstraram uma adequada eficácia protetiva contra as cepas de campo e de referência. Embora o insucesso das vacinações contra C. chauvoei tenha sido previamente relatado, os resultados deste estudo, juntamente com a alta similaridade genética reportada previamente em cepas provenientes de diferentes continentes sugerem que as falhas vacinais não estão relacionadas à variabilidade antigênica, mas sim ao manejo vacinal inadequado.

Clostridial diseases diagnosed in cattle from the South of Rio Grande do Sul, Brazil. A forty-year survey (1978-2018) and a brief review of the literature / Clostridioses diagnosticadas em bovinos no sul do Rio Grande do Sul. Uma pesquisa de quarenta anos (1978-2018) e breve revisão da literatura

Clostridial diseases are important causes of livestock losses in the southern Rio Grande do Sul. Since 1978 annual surveys conducted at the "Laboratório Regional de Diagnóstico" of the "Universidade Federal de Pelotas" (LRD-UFPel) have shown that clostridial diseases represent 10.40% of the bacterial diseases diagnosed in cattle and 1.65% of all diseases diagnosis in cattle over a 40-year period. The purpose of this study is to review the clinical, epidemiological and pathological aspects of the clostridial diseases diagnosed in cattle from January 1978 to December 2018 at the LRD-UFPel in the hopes that it will constitute a useful guide for field veterinary practitioners and interested farmers. We assessed and review the necropsy protocols of 6,736 cattle; these necropsies were performed either by LRD-UFPel faculty or by field veterinary practitioners; 111 outbreaks (1.65%) were diagnosed as clostridial disease, distributed as follows: 35 outbreaks of tetanus, 34 of blackleg, 23 of bacillary hemoglobinuria, 11 of malignant edema (gas gangrene), and eight of botulism. Approximately 904, from a total of 42,480 cattle at risk, died in these outbreaks.(AU)

Clostridioses são doenças produzidas por alguma das espécies do gênero Clostridium e são importantes causas de perdas pecuárias no sul do Rio Grande do Sul. Pesquisas anuais realizadas no Laboratório Regional de Diagnóstico da Faculdade de Veterinária da Universidade Federal de Pelotas (LRD-UFPel) desde 1978 demonstraram que as clostridioses representaram 11,1% das doenças bacterianas diagnosticadas em bovinos e 1,65% de todos os diagnósticos de doenças em bovinos ao longo de 40 anos. O objetivo deste estudo é revisar os aspectos clínicos, epidemiológicos e patológicos das clostridioses diagnosticadas de janeiro de 1978 a dezembro de 2018, pelo LRD/UFPel com a intenção de que esse trabalho possa servir de guia útil para os veterinários de campo e fazendeiros interessados. Foram avaliados e revisados os protocolos de necropsia de 6.736 bovinos; essas necropsias foram realizadas pelo pessoal do LRD/UFPel ou por veterinários de campo. Cento e quatro (1,16%) casos foram diagnosticados como clostridioses, distribuídos da seguinte forma: 35 surtos de tétano, 34 de carbúnculo sintomático, 23 de hemoglobinúria bacilar, 11 de edema maligno (gangrena gasosa) e oito de botulismo. Aproximadamente 904, de um total de 42.480 bovinos sob-risco, morreram nesses surtos.(AU)

Clostridial diseases diagnosed in cattle from the South of Rio Grande do Sul, Brazil. A forty-year survey (1978-2018) and a brief review of the literature / Clostridioses diagnosticadas em bovinos no sul do Rio Grande do Sul. Uma pesquisa de quarenta anos (1978-2018) e breve revisão da literatura

Clostridial diseases are important causes of livestock losses in the southern Rio Grande do Sul. Since 1978 annual surveys conducted at the "Laboratório Regional de Diagnóstico" of the "Universidade Federal de Pelotas" (LRD-UFPel) have shown that clostridial diseases represent 10.40% of the bacterial diseases diagnosed in cattle and 1.65% of all diseases diagnosis in cattle over a 40-year period. The purpose of this study is to review the clinical, epidemiological and pathological aspects of the clostridial diseases diagnosed in cattle from January 1978 to December 2018 at the LRD-UFPel in the hopes that it will constitute a useful guide for field veterinary practitioners and interested farmers. We assessed and review the necropsy protocols of 6,736 cattle; these necropsies were performed either by LRD-UFPel faculty or by field veterinary practitioners; 111 outbreaks (1.65%) were diagnosed as clostridial disease, distributed as follows: 35 outbreaks of tetanus, 34 of blackleg, 23 of bacillary hemoglobinuria, 11 of malignant edema (gas gangrene), and eight of botulism. Approximately 904, from a total of 42,480 cattle at risk, died in these outbreaks.(AU)

Clostridioses são doenças produzidas por alguma das espécies do gênero Clostridium e são importantes causas de perdas pecuárias no sul do Rio Grande do Sul. Pesquisas anuais realizadas no Laboratório Regional de Diagnóstico da Faculdade de Veterinária da Universidade Federal de Pelotas (LRD-UFPel) desde 1978 demonstraram que as clostridioses representaram 11,1% das doenças bacterianas diagnosticadas em bovinos e 1,65% de todos os diagnósticos de doenças em bovinos ao longo de 40 anos. O objetivo deste estudo é revisar os aspectos clínicos, epidemiológicos e patológicos das clostridioses diagnosticadas de janeiro de 1978 a dezembro de 2018, pelo LRD/UFPel com a intenção de que esse trabalho possa servir de guia útil para os veterinários de campo e fazendeiros interessados. Foram avaliados e revisados os protocolos de necropsia de 6.736 bovinos; essas necropsias foram realizadas pelo pessoal do LRD/UFPel ou por veterinários de campo. Cento e quatro (1,16%) casos foram diagnosticados como clostridioses, distribuídos da seguinte forma: 35 surtos de tétano, 34 de carbúnculo sintomático, 23 de hemoglobinúria bacilar, 11 de edema maligno (gangrena gasosa) e oito de botulismo. Aproximadamente 904, de um total de 42.480 bovinos sob-risco, morreram nesses surtos.(AU)

Clostridial diseases diagnosed in cattle from the South of Rio Grande do Sul, Brazil. A forty-year survey (1978-2018) and a brief review of the literature

ABSTRACT: Clostridial diseases are important causes of livestock losses in the southern Rio Grande do Sul. Since 1978 annual surveys conducted at the Laboratório Regional de Diagnóstico of the Universidade Federal de Pelotas (LRD-UFPel) have shown that clostridial diseases represent 10.40% of the bacterial diseases diagnosed in cattle and 1.65% of all diseases diagnosis in cattle over a 40-year period. The purpose of this study is to review the clinical, epidemiological and pathological aspects of the clostridial diseases diagnosed in cattle from January 1978 to December 2018 at the LRD-UFPel in the hopes that it will constitute a useful guide for field veterinary practitioners and interested farmers. We assessed and review the necropsy protocols of 6,736 cattle; these necropsies were performed either by LRD-UFPel faculty or by field veterinary practitioners; 111 outbreaks (1.65%) were diagnosed as clostridial disease, distributed as follows: 35 outbreaks of tetanus, 34 of blackleg, 23 of bacillary hemoglobinuria, 11 of malignant edema (gas gangrene), and eight of botulism. Approximately 904, from a total of 42,480 cattle at risk, died in these outbreaks.

RESUMO: Clostridioses são doenças produzidas por alguma das espécies do gênero Clostridium e são importantes causas de perdas pecuárias no sul do Rio Grande do Sul. Pesquisas anuais realizadas no Laboratório Regional de Diagnóstico da Faculdade de Veterinária da Universidade Federal de Pelotas (LRD-UFPel) desde 1978 demonstraram que as clostridioses representaram 11,1% das doenças bacterianas diagnosticadas em bovinos e 1,65% de todos os diagnósticos de doenças em bovinos ao longo de 40 anos. O objetivo deste estudo é revisar os aspectos clínicos, epidemiológicos e patológicos das clostridioses diagnosticadas de janeiro de 1978 a dezembro de 2018, pelo LRD/UFPel com a intenção de que esse trabalho possa servir de guia útil para os veterinários de campo e fazendeiros interessados. Foram avaliados e revisados os protocolos de necropsia de 6.736 bovinos; essas necropsias foram realizadas pelo pessoal do LRD/UFPel ou por veterinários de campo. Cento e quatro (1,16%) casos foram diagnosticados como clostridioses, distribuídos da seguinte forma: 35 surtos de tétano, 34 de cartbúnculo sintomático, 23 de hemoglobinúria bacilar, 11 de edema maligno (gangrena gasosa) e oito de botulismo. Aproximadamente 904, de um total de 42.480 bovinos sob-risco, morreram nesses surtos.

Botulismo em búfalos / Botulism in buffaloes / Botulismo en búfalos

O Botulismo é uma doença causada pela ação da toxina produzida pelo Clostridium botulinumque age no sistema nervoso periférico causando paralisia flácida devido à interrupção da transmissão neuromuscular. Adiciona-se aos sintomas: o decúbito externa ou lateral, visão dupla, turva, além de anorexia, falta de coordenação e ataxia. Em ruminantes, a transmissão dessa doença ocorre principalmente pela ingestão de toxina via alimentos incorretamente armazenados (silagem, ração e feno) e carcaças abandonada nas pastagens. Está diretamente relacionada à osteofagia, decorrente da deficiência mineral (fósforo) nos solos e consequentemente nas forrageiras. O diagnóstico é baseado no histórico e quadro clínico-patológico e o tratamento no fornecimento, o mais breve possível, de solução saturada de hidróxido de magnésio e a administração de soro antibotulínico a fim de facilitar a eliminação da toxina circulante na musculatura do animal. Entretanto, nos quadros mais graves da doença a letalidade em geral pode chegar a 100%. Sendo assim, o objetivo desse trabalho é fornecer informações descritivas sobre as principais causas, sintomas, tratamento e prevenção do Botulismo em búfalos.(AU)

Botulism is a disease caused by the toxin produced by Clostridium botulinumthat acts on the peripheral nervous system causing flaccid paralysis due to the interruption of the neuromuscular transmission. Adds to the symptoms: external or lateral decubitus, doube vision, blurred, besides anorexia, lack of coordination and ataxia. In ruminants, the transmission of this disease occurs mainly by the ingestion of toxin via improperly stored food (silage, feed and hay) and abandoned carcasses in the pastures. It is directly related to osteophage, due to mineral deficiency (phosphorus) in soils and consequently in forages. Thus, the spore develops producing toxins that permeate the porous bones, tendons and ligaments which are later ingested by the animals. The diagnosis is based on the history and clinical-pathological picture and treatment in the shortest possible supply of saturated magnesium hydroxide solution and the administration of antibotulin serum in order to facilitate the elimination of the circulating toxin in the musculature of the animal. However, in the most severe cases of the disease, lethality in general can reach 100%. Thus, the objective of this work is to provide descriptive information on the main causes, symptoms, treatment and prevention of botulism in buffaloes.(AU)

El botulismo es una enfermedad causada por la acción de la toxina producida por el Clostridium botulinum que actúa en el sistema nervioso periférico causando parálisis flácida debido a la interrupción de la transmisión neuromuscular. Se agrega a los síntomas: el decúbito externo o lateral, visión doble, turbia, además de anorexia, falta de coordinación y ataxia. En rumiantes, la transmisión de esta enfermedad ocurre principalmente por la ingestión de toxina vía alimentos incorrectamente almacenados (silaje, ración y heno) y canales abandonadas en los pastizales. Está directamente relacionada a la osteofagia, derivada de la deficiencia mineral (fósforo) en los suelos y consecuentemente en las forrajeras. Así, la espora se desarrolla produciendo toxinas que impregnan en los huesos porosos, tendones y ligamentos que serán posteriormente ingeridos por los animales. El diagnóstico se basa en el historial y cuadro clínico-patológico y el tratamiento en el suministro lo más breve posible de solución saturada de hidróxido de magnesio y la administración de suero antibotulínico para facilitar la eliminación de la toxina circulante en la musculatura del animal. Sin embargo, en los cuadros más graves de la enfermedad la letalidad en general puede llegar al 100%. Por lo tanto, el objetivo de este trabajo es proporcionar información descriptiva sobre las principales causas, síntomas, tratamiento y prevención del botulismo en búfalos.(AU)

Botulismo em búfalos / Botulism in buffaloes / Botulismo en búfalos

O Botulismo é uma doença causada pela ação da toxina produzida pelo Clostridium botulinumque age no sistema nervoso periférico causando paralisia flácida devido à interrupção da transmissão neuromuscular. Adiciona-se aos sintomas: o decúbito externa ou lateral, visão dupla, turva, além de anorexia, falta de coordenação e ataxia. Em ruminantes, a transmissão dessa doença ocorre principalmente pela ingestão de toxina via alimentos incorretamente armazenados (silagem, ração e feno) e carcaças abandonada nas pastagens. Está diretamente relacionada à osteofagia, decorrente da deficiência mineral (fósforo) nos solos e consequentemente nas forrageiras. O diagnóstico é baseado no histórico e quadro clínico-patológico e o tratamento no fornecimento, o mais breve possível, de solução saturada de hidróxido de magnésio e a administração de soro antibotulínico a fim de facilitar a eliminação da toxina circulante na musculatura do animal. Entretanto, nos quadros mais graves da doença a letalidade em geral pode chegar a 100%. Sendo assim, o objetivo desse trabalho é fornecer informações descritivas sobre as principais causas, sintomas, tratamento e prevenção do Botulismo em búfalos.

Botulism is a disease caused by the toxin produced by Clostridium botulinumthat acts on the peripheral nervous system causing flaccid paralysis due to the interruption of the neuromuscular transmission. Adds to the symptoms: external or lateral decubitus, doube vision, blurred, besides anorexia, lack of coordination and ataxia. In ruminants, the transmission of this disease occurs mainly by the ingestion of toxin via improperly stored food (silage, feed and hay) and abandoned carcasses in the pastures. It is directly related to osteophage, due to mineral deficiency (phosphorus) in soils and consequently in forages. Thus, the spore develops producing toxins that permeate the porous bones, tendons and ligaments which are later ingested by the animals. The diagnosis is based on the history and clinical-pathological picture and treatment in the shortest possible supply of saturated magnesium hydroxide solution and the administration of antibotulin serum in order to facilitate the elimination of the circulating toxin in the musculature of the animal. However, in the most severe cases of the disease, lethality in general can reach 100%. Thus, the objective of this work is to provide descriptive information on the main causes, symptoms, treatment and prevention of botulism in buffaloes.

El botulismo es una enfermedad causada por la acción de la toxina producida por el Clostridium botulinum que actúa en el sistema nervioso periférico causando parálisis flácida debido a la interrupción de la transmisión neuromuscular. Se agrega a los síntomas: el decúbito externo o lateral, visión doble, turbia, además de anorexia, falta de coordinación y ataxia. En rumiantes, la transmisión de esta enfermedad ocurre principalmente por la ingestión de toxina vía alimentos incorrectamente almacenados (silaje, ración y heno) y canales abandonadas en los pastizales. Está directamente relacionada a la osteofagia, derivada de la deficiencia mineral (fósforo) en los suelos y consecuentemente en las forrajeras. Así, la espora se desarrolla produciendo toxinas que impregnan en los huesos porosos, tendones y ligamentos que serán posteriormente ingeridos por los animales. El diagnóstico se basa en el historial y cuadro clínico-patológico y el tratamiento en el suministro lo más breve posible de solución saturada de hidróxido de magnesio y la administración de suero antibotulínico para facilitar la eliminación de la toxina circulante en la musculatura del animal. Sin embargo, en los cuadros más graves de la enfermedad la letalidad en general puede llegar al 100%. Por lo tanto, el objetivo de este trabajo es proporcionar información descriptiva sobre las principales causas, síntomas, tratamiento y prevención del botulismo en búfalos.

INTESTINAL HEALTH ASSESSMENT OF BROILERS SUPPLEMENTED WITH BACILLUS SUBTILIS DSM 29784

A saúde intestinal dos frangos de corte é um fator importante que influencia a produtividade na avicultura de forma que, uma mucosa intestinal prejudicada tem baixa digestão e absorção de nutrientes e isso afetará as funções fisiológicas do hospedeiro, resultando em um sistema imunológico enfraquecido, mais susceptível a doenças e, consequentemente, causará perda econômica e de bem-estar animal. Desde que os antibióticos foram banidos na produção animal de vários países, métodos alternativos foram desenvolvidos para melhorar a performance dos frangos, como por exemplo os probióticos, que estimulam o crescimento de bactérias produtoras de ácido-lático consideradas benéficas para o intestino, aumentam o ganho de peso, promovem o equilíbrio da microbiota, melhoram a morfologia intestinal e modulam a imunidade intestinal. Neste trabalho foi realizado um estudo sobre probióticos e um experimento específico sobre os efeitos do Bacillus subtilis DSM 29784. O experimento foi realizado com frangos de corte desafiados com C. perfringens e Eimeria spp. ou não desafiados, e suplementados com B. subtilis DSM 29784, enramicina ou não-suplementados. Aos 7, 14 e 21 dias de idade foi avaliada a performance das aves, a saúde intestinal com o método histológico I See Inside (ISI) e a reposta imunológica com quantificação celular de linfócitos T (CD4+, CD8+ e macrófagos). Não foi encontrado diferença estatística para resultado de performance em aves suplementadas com o probiótico ou com a Enramicina, apenas entre desafiados e não desafiados. O resultado do ISI demonstrou maior escore de índice histológico em aves desafias, quando comparadas com não desafiadas em todos os períodos. O grupo desafiado e suplementado com B. subtilis DSM 29784 apresentou menor escore total ISI aos 7 e 14 dias quando comparado com o desafiado e não-suplementado. Aos 21 dias, o grupo não-desafiado e suplementado com Enramicina teve o menor escore total ISI dentre todos os grupos. Aves suplementadas com o probiótico tiveram um menor escore de células CD4+ e CD8+ aos 7 dias, um pico aos 14 e posterior queda aos 21 dias. A contagem de macrófagos foi elevada em aves não desafiadas aos 7 dias de idade. Os resultados deste experimento demonstraram que o probiótico teve um impacto positivo na saúde intestinal de frangos de corte desafiados.

Chicken intestinal health is an important factor that concerns aviculture productivity somehow that disruptive mucosa has poorer nutrient digestion and absorption that will physiologically affect the host resulting in weaker immunological system, more susceptible to diseases and, consequently will cause economical losses and failed animal well-being. Since antibiotic ban in animal production of many countries, alternative methods have been developed to enhance broiler chicken performance, for instance probiotics stimulate the grown of lactic-acid producer bacterias considered beneficial for intestinal health, improving body weight gain, promoting microbiota balance, enhancing intestinal morphology and modulating intestinal immunity. In this dissertation it was accomplished a study about probiotics and then it was performed a trial specifically on Bacillus subtilis DSM 29784. In the experiment it was evaluated broiler chickens challenged or not with C. perfringens e Eimeria spp. and supplemented with B. subtilis DSM 29784 or Enramycin or not supplemented at all. At 7, 14 and 21 days of age it was evaluated birds performance, intestinal health with the histological method I See Inside (ISI) and immunological response through lymphocyte T cell (CD4+, CD8+ and macrophage) quantification. No statistical difference was found on performance in birds supplemented or not with probiotic or Enramycin, except among challenged or non-challenged birds. ISI results demonstrated higher total score in challenged birds when compared to non-challenge ones at all ages. The challenged group supplemented with B. subtilis DSM 29784 presented lower ISI total score at 7 and 14 days, when compared to challenged and non-supplemented group. At 21 days, the non-challenged and supplemented with Enramycin group had the lowest ISI total score among all groups. Birds supplemented with the probiotic had a lower CD4+ and CD8+ cell counts at 7 days, followed by a peak at 14 days and posterior decrease at 21 days. Macrophage cell counts was higher in non-challenged birds at 7 days of age. Results demonstrated that B. subtilis DSM 29784 had a positive impact over intestinal health of challenged birds.

Clostridium difficile infection: main features and occurrence in domestic species in Brazil

Clostridium difficile is an emerging enteropathogen of humans and domestic animals. The bacterium was recently confirmed to be present in foals and dogs in Brazil, with some recent studies suggesting that C. difficile is one of the most important causes of piglet diarrhea in the country. Moreover, some reports also suggest the transmission of this microorganism between animals and humans, raising the possibility that C. difficile is a zoonotic disease. Therefore, the aim of the present review is to describe the main features of C. difficile infection in domestic animals and outline the occurrence of the disease in horses, dogs and pigs in Brazil.

Clostridium difficile é considerado um enteropatógeno emergente que acomete humanos e animais domésticos. A presença da doença em equinos e cães já foi relatada no Brasil e trabalhos sugerem que atualmente C. difficile seja um dos principais causadores de diarreia neonatal em suínos no país. Além disso, relatos recentes sugerem a transmissão do agente entre o homem e animais, gerando a hipótese de C. difficile ser um agente zoonótico. Com isso, o presente trabalho tem como objetivo revisar as principais características da doença, além de fornecer dados recentes sobre a ocorrência no Brasil da infecção por C. difficile nas principais espécies de animais domésticos.

Clostridium difficile infection: main features and occurrence in domestic species in Brazil

Clostridium difficile is an emerging enteropathogen of humans and domestic animals. The bacterium was recently confirmed to be present in foals and dogs in Brazil, with some recent studies suggesting that C. difficile is one of the most important causes of piglet diarrhea in the country. Moreover, some reports also suggest the transmission of this microorganism between animals and humans, raising the possibility that C. difficile is a zoonotic disease. Therefore, the aim of the present review is to describe the main features of C. difficile infection in domestic animals and outline the occurrence of the disease in horses, dogs and pigs in Brazil.

Clostridium difficile é considerado um enteropatógeno emergente que acomete humanos e animais domésticos. A presença da doença em equinos e cães já foi relatada no Brasil e trabalhos sugerem que atualmente C. difficile seja um dos principais causadores de diarreia neonatal em suínos no país. Além disso, relatos recentes sugerem a transmissão do agente entre o homem e animais, gerando a hipótese de C. difficile ser um agente zoonótico. Com isso, o presente trabalho tem como objetivo revisar as principais características da doença, além de fornecer dados recentes sobre a ocorrência no Brasil da infecção por C. difficile nas principais espécies de animais domésticos.

Clostridium difficile infection: main features and occurrence in domestic species in Brazil

Clostridium difficile is an emerging enteropathogen of humans and domestic animals. The bacterium was recently confirmed to be present in foals and dogs in Brazil, with some recent studies suggesting that C. difficile is one of the most important causes of piglet diarrhea in the country. Moreover, some reports also suggest the transmission of this microorganism between animals and humans, raising the possibility that C. difficile is a zoonotic disease. Therefore, the aim of the present review is to describe the main features of C. difficile infection in domestic animals and outline the occurrence of the disease in horses, dogs and pigs in Brazil.

Clostridium difficile é considerado um enteropatógeno emergente que acomete humanos e animais domésticos. A presença da doença em equinos e cães já foi relatada no Brasil e trabalhos sugerem que atualmente C. difficile seja um dos principais causadores de diarreia neonatal em suínos no país. Além disso, relatos recentes sugerem a transmissão do agente entre o homem e animais, gerando a hipótese de C. difficile ser um agente zoonótico. Com isso, o presente trabalho tem como objetivo revisar as principais características da doença, além de fornecer dados recentes sobre a ocorrência no Brasil da infecção por C. difficile nas principais espécies de animais domésticos.

Kinetics of epsilon antitoxin antibodies in different strategies for active immunization of lambs against enterotoxaemia / Cinética dos anticorpos antitoxina epsilon em diferentes estratégias de imunização ativa em cordeiros contra a enterotoxemia

Enterotoxaemia, a common disease that affects domestic small ruminants, is mainly caused by the epsilon toxin of Clostridium perfringens type D. The present study tested four distinct immunization protocols to evaluate humoral response in lambs, a progeny of non-vaccinated sheep during gestation. Twenty-four lambs were randomly allocated into four groups according to age (7, 15, 30 and 45 days), receiving the first dose of epsilon toxoid commercial vaccine against clostridiosis with booster after 30 days post vaccination. Indirect ELISA was performed after the first vaccine dose and booster to evaluate the immune response of the lambs. Results showed that for the four protocols tested all lambs presented serum title considered protective (≥0.2UI/ml epsilon antitoxin antibodies) and also showed that the anticipation of primovaccination of lambs against enterotoxaemia conferred serum title considered protective allowing the optimization of mass vaccination of lambs.(AU)

Enterotoxemia, uma das mais comuns enfermidades que acomete os pequenos ruminantes domésticos, é causada principalmente pela toxina épsilon de Clostridium perfringens tipo D. O presente estudo avaliou a resposta humoral conferida por quatro protocolos distintos de primovacinação na progênie de ovelhas não vacinadas durante a gestação. Vinte e quatro cordeiros foram aleatoriamente divididos em quatro grupos de acordo com a idade (dias) que receberam a primeira dose da vacina comercial contra clostridiose contendo toxóide epsilon na sua formulação. Todos os cordeiros foram vacinados aos 7, 15, 30 ou 45 dias de idade e receberam um reforço da dose 30 dias após a vacinação. A avaliação sorológica dos cordeiros pelo teste de ELISA indireto foi realizada por ocasião da administração da primeira dose da vacina. Os resultados elucidaram não haver comprometimento da resposta imune de cordeiros vacinados tanto aos 7, 15, 30 ou 45 dias de idade associada ao reforço da dose 30 dias após, demonstrando assim que a antecipação da primeira vacinação conferiu proteção aos cordeiros contra a enterotoxemia, permitindo otimizar o planejamento da vacinação em massa dos cordeiros.(AU)

INFECÇÃO EXPERIMENTAL E AVALIAÇÃO DE VIAS DE TRANSMISSÃO DE Clostridium difficile EM LEITÕES JOVENS

A infecção por Clostridium difficile é na maioria das vezes de manifestação subclínica em leitões jovens. E como atualmente este agente tem tido grande importância na medicina veterinária e possivelmente potencial zoonótico, o objetivo desta pesquisa foi avaliar a transmissão de C. difficilepor via naso-nasal e aerógena em leitões jovens, utilizando analises microbiológicas, histopatológicas e moleculares. Leitões foram divididos em três grupos (Infectado, Sentinela e Controle), e distribuídos em baias isoladoras. Os grupos Infectados receberam inóculo 109 UFC.mL-1 e 108UFC.mL-1 de C. difficile 096 para via de transmissão naso-nasal e aerógena, respectivamente. Suabes anorretais foram colhidos diariamente para análises microbiológicas e moleculares da excreção nas fezes, utilizou-se técnica de PCR com iniciadores oligonucleotídeos que codificam os genes das toxinas TcdB e TcdA de Clostridium difficile para identificação molecular. Realizou-se eutanásia dos leitões, após 18 dias de infecção experimental, para avaliações histopatológicas e microbiológicos de intestino delgado, cólon, fígado, baço, tonsilas palatinas e linfonodos. Os grupos Infectado e Sentinela da via naso-nasal desenvolveram sinais clínicos de enfermidade, enquanto os animais da via aerógena não apresentaram sinais de infecção. Os leitões avaliados por via naso-nasal foram positivos para o gene TcdB nos grupos Infectado e Sentinela, enquanto os leitões desafiados por via aerógena foram positivos para TcdB apenas no grupo Infectado. Nas análises histopatológicas dos leitões da via naso-nasal foram observadas diversas lesões nos órgãos alvos tanto dos animais do grupo Infectado quanto no Sentinela; nos leitões da via aerógena avaliados histologicamente, apenas o grupo Infectado apresentou lesões nos órgãos, sendo que em ambas as vias, as lesões mais notáveis foram no intestino delgado. A transmissão de Clostridium difficile foi confirmada com a técnica de PCR apenas na via naso-nasal, inclusive com sinais clínicos durante período experimental no grupo Sentinela. Com isso, destaca-se a importância do controle preventivo deste agente nas granjas, a fim de minimizar a ocorrência de infecções em leitões jovens. Conclui-se que experimentalmente o Clostridium difficile pode ser transmitido entre leitões jovens pelo contato focinho-focinho, desencadeando doença clínica. Por outro lado, a transmissão pela via aerógena não ocorreu entre suínos jovens em situação experimental.

Clostridium difficile infection is most often of subclinical manifestation in young piglets. As this agent has been of great importance in veterinary medicine and also zoonotic potential, the objective of this research was to evaluate the naso-nasal and aerogenic transmission of C. difficile in young pigs, using microbiological, histopathological and molecular analyzes. Piglets were divided into three groups (Infected, Sentinel and Control), and distributed in isolation bays. The infected group received inoculum 109 CFU.mL-1 and 108 CFU.mL-1 of C. difficile 096 for the naso-nasal and aerogenic transmission route, respectively. Anorectal swabs were harvested for microbiological and molecular analyzes of faecal excretion, a PCR technique was used with primers that encode the TcdB and TcdA toxin genes of Clostridium difficile for molecular identification. Euthanasia of piglets after 18 days of experimental infection was performed for histopathological and microbiological evaluations of small intestine, colon, liver, spleen, palatine tonsils and lymph nodes. The Infected and Sentinel groups of the naso-nasal route developed clinical signs of disease, whereas the animals in the aerogenic showed no signs of infection. The naso-nasal piglets were positive for the TcdB gene in the Infected and Sentinel groups, while the pigs challenged by the aerogenic route were positive for TcdB only in the Infected group. In the histopathological analyzes of piglets of the naso-nasal route, several lesions were observed in the target organs of both the Infected group and the Sentinel; in the piglets of the aerogenic histologically evaluated, only the Infected group presented lesions in the organs, and in both routes, the most notable lesions were in the small intestine. Only the naso-nasal route confirmed transmission of Clostridium difficile, including clinical signs during the experimental period in the Sentinel group. With this, it stands out as a preventive control of this agent in the farms, in order to minimize an occurrence of infections in young piglets. It is concluded that experimentally, Clostridium difficile can be transmitted between young piglets the snout-snout contact, triggering clinical disease. On the other hand, aerial transmission did not occur among young experimental pigs.

Vaccination protocol and bacterial strain affect the serological response of beef calves against blackleg / Esquemas de vacinação e cepa bacteriana influenciam na resposta sorológica contra o carbúnculo sintomático em bezerros de corte

The serological response of beef calves was evaluated with different vaccination regimens against blackleg, using an official strain (MT) and a field-collected strain of Clostridium chauvoei as antigens. Sixty calves were randomly allocated to four different groups and were submitted to distinct vaccination protocols with a commercial polyvalent vaccine. Group G1 was first vaccinated at four months of age and a booster shot was given after weaning, at eight months. Group G2 was given the first dose at eight months and a booster shot 30 days later. Group G3 was vaccinated only once at eight months and the control group was not vaccinated. These alternative vaccination regimens were proposed in an effort to adequately protect cattle under open-field farming conditions. Serological evaluations were made by Elisa at 4, 8, 9 and 10 months of age. Both groups receiving booster shots had a significantly increased serological response 30 days later. However, the serum IgG levels against C. chauvoei were significantly higher in the calves that were first vaccinated at four months. At 10 months, the two booster shot groups (G1 and G2) had similar serological responses, while the calves that were treated with a single dose of vaccine at weaning (G3) had a response that was similar to that of the control group. The serological response of the calves was significantly inferior at several of the evaluation times when the field strain of the bacteria was used as a challenge antigen instead of the official MT strain. The serological response of calves that are vaccinated twice was found to be satisfactory, independent of the first injection being made at four or eight months of age. It was also concluded that it would be useful to include local bacterial strains in commercial vaccine production.(AU)

Foi avaliada a resposta sorológica de bezerros de corte submetidos a diferentes esquemas de vacinação contra o carbúnculo sintomático, empregando-se como antígenos duas cepas distintas de Clostridium chauvoei: uma oficial (MT) e a outra uma cepa de campo. Os animais (n=60) foram randomizados em quatro grupos (G1, G2, G3 e Controle) e submetidos a três protocolos distintos de vacinação com um produto comercial polivalente. O G1 foi primovacinado aos 4 meses de idade e recebeu o reforço após desmama (8 meses de idade). O G2 recebeu a primeira dose aos 8 meses de idade e reforço 30 dias após. O G3 foi vacinado somente aos 8 meses de idade e o Controle não foi vacinado. As avaliações sorológicas pelo ensaio imunoenzimático (Elisa) foram realizadas aos 4, 8, 9 e 10 meses de idade dos bezerros. Nos dois esquemas em que os animais receberam o booster (G1 e G2), houve um aumento significativo (p<0,05) da resposta sorológica quando foram avaliados 30 dias após. No entanto, os valores séricos de IgG contra C. chauvoei foram significativamente maiores nos animais primovacinados aos 4 meses de idade. Aos 10 meses, os dois grupos que receberam o reforço vacinal (G1 e G2) não diferiram entre si na resposta sorológica e os bezerros que receberam uma única dose de vacina na desmama (G3) não diferiu do Controle. A resposta sorológica dos bezerros foi significativamente inferior (p<0,05) em diversos momentos da avaliação, quando a cepa de campo foi empregada como antígeno e quando comparada à da cepa MT. Pode-se deduzir que a resposta sorológica dos bezerros vacinados aos 4 e 8 meses de idade foi satisfatória e que existiram diferenças significativas nos valores séricos de anticorpos contra C. chauvoei quando na avaliação foi empregada cepa de campo.(AU)

Relação parasito-hospedeiro na infecção de macrófagos por Clostridium chauvoei

Clostridium chauvoei é o agente etiológico do carbúnculo sintomático, doença com alta taxa de letalidade e mortalidade que acomete bovinos jovens. Apesar da reconhecida importância dessa doença, a sua patogênese e os mecanismos de virulência do agente etiológico ainda não foram completamente elucidados. Dentre as lacunas de conhecimento, destaca-se o mecanismo envolvido no tráfego de C. chauvoei do intestino para a musculatura. Essa etapa, essencial para a deposição do esporo no sítio de infecção, permitiria que o agente permanecesse latente até que encontrasse condições favoráveis para germinar e multiplicar. Diante do exposto, o presente trabalho teve como objetivo avaliar a capacidade de sobrevivência de C. chauvoei após internalização de macrófagos murinos da linhagem RAW 264.7 e macrófagos bovinos. Buscouse avaliar as diferenças quanto às taxas de sobrevivência da forma vegetativa com a esporulada, bem como o perfil de transcritos de citocinas induzidos pela infecção por uma dessas duas formas. Para isso, macrófagos da linhagem RAW 264.7 e macrófagos derivados de monócitos periféricos bovinos foram infectados com C. chauvoei na multiplicidade de infecção (MOI) 1:50 com uma das seguintes formas bacterianas: vegetativa ou esporo. A sobrevivência de C. chauvoei foi avaliada após 1 (T1), 24 (T24), 48 (T48) e 72 (T72) horas de infecção. Para se avaliar o perfil de transcritos de citocinas exibido por macrófagos bovinos infectados com C. chauvoei, os macrófagos foram infectados com C. chauvoei na MOI 1:50, sendo avaliados os tempos de T1, 6 (T6), 12 (T12) e T24 horas de infecção. Os transcritos de citocinas dosados foram: interleucina 10 (IL-10), IL-4, IL-12, IL-23 e fator de crescimento beta (TGF-beta). C. chauvoei, tanto na forma esporulada quanto vegetativa, é capaz de resistir ao processo microbicida dos macrófagos por até 72 horas de infecção. Contudo, o prolongamento da infecção com a forma vegetativa resultou em um decréscimo (p<0,01) do número de bactérias internalizadas viáveis a partir do T48 de infecção. Ao contrário, o número de esporos internalizados viáveis permaneceu constante ao longo dos tempos de infecção avaliados. Essa diferença de sobrevivência entre as formas infectantes (vegetativa e esporo) não foi demonstrada no modelo de infecção com macrófagos bovinos, no qual ambas as formas bacterianas permaneceram igualmente viáveis durante todo o período avaliado (T72). Com relação ao perfil de transcritos de citocinas, observou-se que os macrófagos bovinos infectados com C. chauvoei na forma predominantemente vegetativa detinham um perfil de transcritos de citocinas pró-inflamatórias como IL-12 e IL-23 (p<0,001). Esse perfil de transcritos de citocinas poderia contribuir para os efeitos microbicidas desses fagócitos. Ao contrário, quando os macrófagos bovinos foram infectados com C. chauvoei na esporulada, observou-se um perfil de citocinas anti-inflamátorias, como IL-10 e TGF-beta. Esse perfil de transcritos de citocinas poderia determinar a latência dessa forma bacteriana após internalização por macrófagos. Os resultados apresentados indicam que C. chauvoei na forma vegetativa e na forma esporulada são capazes de resistir aos efeitos microbicidas dos macrófagos, sendo a forma esporulada mais resistente à morte mediada por macrófagos por um período maior de infecção. Essa é a primeira evidência de que C. chauvoei é capaz de resistir aos efeitos microbicidas dos macrófagos e de que as formas infectantes (vegetativa e esporulada) exibem um perfil de transcritos de citocinas divergente.

Clostridium chauvoei is the etiologic agent of blackleg, a high mortality disease that affects calves. Despite the recognized importance of this disease, its pathogenesis and microorganism virulence factors have not been fully elucidated. Among the knowledge absences, there is the mechanism involved in C. chauvoei bowel traffic to the muscles. This step is essential for spore deposition in infection site, the agent would remain dormant until they find favorable conditions to germinate and multiply. In light of this, the aim of this study was to evaluate the survivability of C. chauvoei after internalization of murine macrophage RAW 264.7 lineage and bovine macrophage. It was evaluated the differences in survival rates of vegetative and spore C. chauvoei and the cytokine profile of transcripts induced by infection with one of these two bacterial form. The RAW 264.7 macrophages and bovine macrophages derived from peripheral monocytes were infected with C. chauvoei at multiplicity of infection (MOI) 1:50 with one of bacterial forms: vegetative or spore. The survival of C. chauvoei was assessed after 1 (T1), 24 (T24), 48 (T48) and 72 (T72) hours of infection. To assess the cytokine transcripts profile from bovine macrophages infected with C. chauvoei at MOI 1:50, it was evaluated the times T1, 6 (T6), 12 (T12) and T24 hours of infection. Cytokine transcripts that were measured: interleukin 10 (IL- 10), IL-4, IL-12, IL-23 and growth factor beta (TGF-beta). C. chauvoei, both the spore and vegetative form, resist to microbicide macrophages process for 72 hours for infection. However, the lengthening of infection with vegetative form resulted in a decrease (p <0.01) in the number of viable internalized bacteria at T48. In contrast, the number of viable spores internalized was constant over the time of infection evaluated. There were any differences in survival between the infective forms (vegetative and spore) in infection with bovine macrophages throughout the study period (T72). Regarding the cytokine transcripts profile, it was observed that bovine macrophages infected with vegetative C. chauvoei owned a pro-inflammatory cytokines profile, such as IL-12 IL-23 (p <0.001). This profile could contribute to the microbicidal effects of these phagocytes. Contrariwise, when bovine macrophages were infected with spores of C. chauvoei, it was observed an anti-inflammatory cytokines profile, such as IL-10 and TGF-beta. This profile could cause the latency of this bacterial medium after macrophages internalization. The present results indicate that C. chauvoei the vegetative and sporulated form are able to resist to microbicidal macrophages effects. Nevertheless, spore form showed to be more resistant to death mediated by macrophages over a longer period infection. This is the first evidence that C. chauvoei is able of resisting the microbicidal effects of macrophages and the infectious forms (vegetative and spore) exhibit a diverging cytokine transcripts profile.

PESQUISA DE CLOSTRIDIUM PERFRINGENS EM CARNES BOVINAS EMBALADAS A VÁCUO COMERCIALIZADAS NA REGIÃO DISTRITO FEDERAL E ENTORNO.

O objetivo deste trabalho foi pesquisar a presença de Clostridium perfringens em 54 amostras de carne bovina embaladas a vácuo comercializadas no Distrito Federal e Entorno, bem como detectar a produção da toxina cpe por PCR, ainda avaliar os meios de cultivo agar SPS® e agar TSC®, com e sem etapa de pré-enriquecimento das amostras em caldo infusão de cérebro e coração (BHI), e incubação tanto em jarra de anaerobiose quanto em câmara de anaerobiose. Na análise da incubação em Agar SPS® e TSC®, sem a etapa de pré-enriquecimento em caldo BHI, observou-se o crescimento em apenas uma (1,85%) das 54 amostras analisadas, em ambos os meios de cultivo e formas de incubação. Com a etapa de pré-enriquecimento com caldo BHI em câmara de anaerobiose, observou-se crescimento em todas as 54 amostras (100%), em ambos os meios de cultivo e formas de incubação. Na reação em cadeia de polimerase (PCR) nenhuma das cepas oriundas das amostras analisadas apresentaram a amplificação de fragmento do gene da toxina cpe. Os resultados evidenciam a presença de C. perfringens em carnes embaladas a vácuo comercializadas no Distrito Federal e Entorno, porém não foi detectada a toxina cpeem nenhuma cepa isolada analisada. Na comparação estatística aplicando o teste qui-quadrado de McNemar, observou-se que houve diferença significativa (p<0,001) entre as análises sem e com a etapa de pré-enriquecimento em caldo BHI, verificando-se a influencia positiva do meio na recuperação de esporos, destacando desta forma a importância do enriquecimento prévio em meio BHI e a incubação em câmara de anaerobiose, na recuperação de esporos deste microrganismo.

The objective of this study was to evaluate the presence of Clostridium perfringens in vaccum packed beef samples commercialized at Distrito Federal and the Entorno area, as well as to detect the presence of the cpe toxin producing gene by Polymerase chain reaction (PCR), also evaluate the culture medium SPS® agar and TSC® agar, with and without pre-enrichment step of the samples in Brain Heart Infusion (BHI) broth, and to promote the incubation in anaerobic jar and anaerobic chamber. The results of the incubation on SPS® agar and TSC® agar, without the pre-enrichment step in BHI, growth was observed at only 1 (1,85%) of the 54 analyzed samples, in both culture media and incubation methods. With the pre-enrichment step in BHI broth at the anaerobic chamber, growth was observed in all of the 54 samples (100%), in both culture media and incubation methods. At the PCR, none of the strains detected from the analyzed samplespresented amplification of the fragment of the cpe toxin gene. The results showed the presence of C. perfringens in vaccum packed beef samples commercialized at the Distrito Federal and Entorno area, however the cpe toxin wasnt detected in none of the analyzed samples. In statistical analysis, using McNemars qui-square test, a significant difference (p<0,001) was observed between the analysis with and without pre-enrichment step in BHI broth, verifying the positive influence of the medium in spore recovery, therefore to enhance the importance of the pre-enrichment stage in BHI broth and the incubation in anaerobic chamber in spore recovery for this microorganism.

Edema maligno em suíno

Malignant edema is a fatal infection of skeletal muscles and subcutaneous tissue of ruminants and other animal species, caused mainly by Clostridium septicum, but can occur in association with Clostridium chauvoei, Clostridium sordellii, Clostridium novyi type A and Clostridium perfringens tipo A. The definitive diagnosis of malignant edema must consider clinical data and necropsy lesions, microscopic features, isolation of the agent, direct immunofluorescence, immunohistochemistry and PCR. There are few reports in the literature concerning malignant edema in swine, and, the C. septicum, has been associated with most of the cases. This paper reports a case of myonecrosis and subcutaneous edema in a piglet caused by Clostridium septicum.

Edema maligno em suíno é uma infecção fatal da musculatura esquelética e tecido subcutâneo de ruminantes e outras espécies animais, causada principalmente por Clostridium septicum, embora possa ocorrer em associação com Clostridium chauvoei, Clostridium sordellii, Clostridium novyi tipo A e Clostridium perfringens tipo A. O diagnóstico efetivo do edema maligno deve levar em consideração, além dos dados clínicos e lesões de necropsia, os achados microscópicos, isolamento do agente, imunofluorescência direta, imunoistoquímica e PCR. Embora haja poucos relatos de edema maligno em suínos na literatura, o C. septicum tem sido associado à maioria dos casos. Este trabalho relata um caso de mionecrose e edema subcutâneo em um leitão causado por C. septicum.