Staining fungal structures with artificial dyes used in the industry of juices

ABSTRACT: The objective of this research was to evaluate the efficiency of artificial dyes, sunset yellow and red bordeaux S, and the use of glycerol in different concentrations to consistently stain fungal structures in slides containing spores of Oidium sp., Albugo ipomoeae-panduratae, Pochonia chlamydosporia and hyphae of Phytopythium helicoides. Commercial product mixtures of the artificial dyes at 0.5, 1.0, 1.5, 2.0, 3.0 and 5.0% (w/v) added with glycerol at 0.25, 0.5 and 1.0% were evaluated. To stain chlamydospores, the suspension was placed in the staining solution or heated at 80ºC for 5 minutes. The slides were prepared by the wet mount slide method. Fungal spores were consistently stained starting at a concentration of 2% of the staining solution. The addition of glycerol to the staining solution improved the contrast of the sporangia, hyphae and chlamydospores. Higher intensity and uniformity of chlamydospores staining was verified using 3% dye solution and 1% heated glycerol, when compared to the unheated and blue-cotton solution.

RESUMO: Neste trabalho, objetivou-se avaliar a eficiência dos corantes artificiais, amarelo crepúsculo e vermelho bordeaux S, e o uso do glicerol em diferentes concentrações, na montagem de lâminas com esporos de Oidium sp., Albugo ipomoeae-panduratae, Pochonia chlamydosporia e hifas de Phytopythium helicoides. Foram avaliadas as concentrações de 0,5, 1,0, 1,5, 2,0, 3,0 e 5,0% (p/v) do produto comercial da mistura dos corantes artificiais e adição de glicerol nas concentrações de 0,25, 0,5 e 1,0%. Para coloração de clamidósporos, a suspensão foi colocada na solução corante ou aquecida a 80ºC por 5 minutos e as lâminas preparadas com líquido de montagem. A partir da concentração de 2% da mistura dos corantes houve maior coloração dos esporos. A adição de glicerol na solução corante melhorou o contraste dos esporângios, hifas e clamidósporos. Maior intensidade e uniformidade de coloração de clamidósporos ocorreram na solução corante 3% e glicerol 1% aquecida, em comparação com a solução sem aquecimento e azul-de-algodão.

Staining fungal structures with artificial dyes used in the industry of juices / Coloração de estruturas de fungos com corantes artificiais usados na fabricação de sucos

The objective of this research was to evaluate the efficiency of artificial dyes, sunset yellow and red bordeaux S, and the use of glycerol in different concentrations to consistently stain fungal structures in slides containing spores of Oidium sp., Albugo ipomoeae-panduratae, Pochonia chlamydosporia and hyphae of Phytopythium helicoides. Commercial product mixtures of the artificial dyes at 0.5, 1.0, 1.5, 2.0, 3.0 and 5.0% (w/v) added with glycerol at 0.25, 0.5 and 1.0% were evaluated. To stain chlamydospores, the suspension was placed in the staining solution or heated at 80ºC for 5 minutes. The slides were prepared by the wet mount slide method. Fungal spores were consistently stained starting at a concentration of 2% of the staining solution. The addition of glycerol to the staining solution improved the contrast of the sporangia, hyphae and chlamydospores. Higher intensity and uniformity of chlamydospores staining was verified using 3% dye solution and 1% heated glycerol, when compared to the unheated and blue-cotton solution.(AU)

Neste trabalho, objetivou-se avaliar a eficiência dos corantes artificiais, amarelo crepúsculo e vermelho bordeaux S, e o uso do glicerol em diferentes concentrações, na montagem de lâminas com esporos de Oidium sp., Albugo ipomoeae-panduratae, Pochonia chlamydosporia e hifas de Phytopythium helicoides. Foram avaliadas as concentrações de 0,5, 1,0, 1,5, 2,0, 3,0 e 5,0% (p/v) do produto comercial da mistura dos corantes artificiais e adição de glicerol nas concentrações de 0,25, 0,5 e 1,0%. Para coloração de clamidósporos, a suspensão foi colocada na solução corante ou aquecida a 80ºC por 5 minutos e as lâminas preparadas com líquido de montagem. A partir da concentração de 2% da mistura dos corantes houve maior coloração dos esporos. A adição de glicerol na solução corante melhorou o contraste dos esporângios, hifas e clamidósporos. Maior intensidade e uniformidade de coloração de clamidósporos ocorreram na solução corante 3% e glicerol 1% aquecida, em comparação com a solução sem aquecimento e azul-de-algodão.(AU)

Caracterização de corantes solvatocrômicos como marcadores físico-químicos de medicamentos homeopáticos e de amostras biológicas de sobrenadantes

O presente estudo tem a finalidade de determinar se corantes solvatocrômicos podem ser utilizados como método de escolha de medicamentos homeopáticos para tratamento de sistemas vivos infectados com diferentes agentes infecciosos. Tal método permite analisar possíveis alterações no momento dipolo da água quando em contato com diluições homeopáticas de diferentes origens. Métodos: A pesquisa se desenvolveu a partir de sobrenadantes (SNs) colhidos de macrófagos RAW 264.7 estimulados com bacilos Calmette-Guérin (BCG) (cepa vacinal) e tratados com Silicea terra 6, 30, 200 cH, Zincum metallicum 6, 30, 200 cH e controles; desafiados com Encephalitozoon cuniculi (E. cuniculi) e tratados com Phosphorus 6, 30, 200 cH e controles; ou ainda ativados com LPS (mimetizando infecção por bactérias Gram negativas) e tratados com Aspirina 15 cH e controles. Os SNs descongelados foram diluídos 1:10 em água pura estéril e 1:100 em solução hidro-alcooólica 30%, sendo sucussionados por 100 vezes em braço mecânico automático (Autic®). Os respectivos medicamentos também foram preparados em solução hidro- alcooólica 30% do mesmo lote e sucussionados da mesma forma. Todas as amostras foram codificadas aleatoriamente, em números consecutivos, por um técnico não envolvido com a experimentação. Os códigos só foram quebrados após a análise estatística, de forma que todo o estudo foi realizado em cego. Antes de cada experimento, as amostras foram submetidas a 40 agitações verticais manuais, filtradas em filtro de malha 0.22 micrômetros e adicionadas aos corantes na proporção 1:60. Seis diferentes corantes solvatocrômicos (BDN, NNDMIA, Cumarina, Rodanina, Violeta metileno e Vermelho do Nilo) foram testados, a fim de cobrir todo o espectro de luz visível. A leitura em espectrofotômetro foi feita em cubetas descartáveis e a concentração dos corantes foi definida segundo padrões previamente estabelecidos, utilizando álcool absoluto como solvente. Todas as preparações foram feitas em capela de fluxo laminar e com o mínimo de incidência de luz possível sobre os corantes, até o momento da leitura. As condições ambientais foram controladas diariamente, sendo medidas temperatura, umidade e fluxo magnético. Antes de cada série de medidas, o equipamento foi calibrado com o mesmo álcool absoluto usado na preparação dos corantes e o comprimento de onda correspondente ao pico de absorbância foi registrado. As amostras foram analisadas em triplicata, em três séries experimentais consecutivas (N=9). O perfil de absorbância de cada medicamento foi comparado com a absorbância dos respectivos SNs. O método estatístico usado foi a ANOVA de uma via, seguido de Tukey, sendo os valores de p<0,05 considerados significantes. Testes de normalidade foram feitos por Shapiro- Wilk e eventuais outliers foram removidos após inspeção do QQ plot. Conclusão: Concluiu-se, portanto, que a Rodanina é um bom marcador de solventes submetidos à sucussão, provavelmente em função da atividade oxidativa associada; Cumarina é marcador de Phosphorus 6cH e de sobrenadantes tratados com Aspirina 15 cH e LPS; BDN é marcador de Silicea terra 6 cH, 30 cH e 200 cH, Zincum metallicum 30 cH e 200cH e Aspirina 15cH; Violeta metileno é marcador de sobrenadantes tratados com Silicea terra 30 cH e 200cH, bem como Zincum metallicum 6 cH e 200cH. Os demais corantes não apresentaram interações específicas com as amostras estudadas.

The present study aims to determine whether solvatochromic dyes can be used as a method of choice for homeopathic medicines to treat living systems infected with different infectious agents. This method allows analyzing possible changes in the dipole moment of water when in contact with homeopathic dilutions of different origins. The research was developed from supernatants (SNs) collected from RAW 264.7 macrophages stimulated with bacilli Calmette-Guérin (BCG) (vaccinal strain) and treated with Silicea terra 6, 30, 200 cH, Zincum metallicum 6, 30, 200 cH, and controls. Supernatants challenged with Encephalitozoon cuniculi (E. cuniculi) and treated with Phosphorus 6, 30, and 200 cH and controls, or even from macrophages activated with LPS (mimicking infection by Gram-negative bacteria) treated with Aspirin 15 cH and controls. The thawed SNs were diluted 1:10 in sterile water, then 1:100 in 30% hydro-alcoholic solution and submitted to 100 succussions in a robotic mechanical arm (Autic®). The respective medicines were also prepared in 30% hydro- alcoholic solution from the same batch, being succussed in the same way. All samples were randomly coded in consecutive numbers by a technician not involved in the experiment. The codes were only broken after statistical analysis; thus, the study was performed entirely blind. Before each experiment, the samples were submitted to 40 manual vertical agitations, filtered in a 0.22- micrometer mesh filter, and added to the dyes in a 1:60 ratio. Six different solvatochromic dyes (BDN, NNDMIA, Coumarin, Rhodanine, Methylene Violet, and Nile Red) were tested to cover the whole visible light spectrum. The reading was done in a spectrophotometer in disposable cuvettes, and the concentration of the dyes was defined according to previously established standards, using absolute alcohol as a solvent. All preparations were carried out in a laminar flow hood, with an as little light incidence as possible on the dyes, until the moment of reading. The environmental conditions were controlled daily, being measured temperature, humidity, and magnetic flux. Before each series of measurements, the equipment was calibrated with the same absolute alcohol used in the preparation of the dyes, and the wavelength corresponding to the peak of absorbance was recorded. The samples were analyzed in triplicate, in three consecutive experimental series (N=9). The absorbance profile of each drug was compared with the absorbance of the respective SNs. The statistical method used was one-way ANOVA, followed by Tukey, with p<0.05 being considered significant. The Shapiro-Wilk test checked normality, and eventual outliers were removed after inspection of the QQ plot. Therefore, it was concluded that Rodanine is a good marker of solvents subjected to succussion, probably due to its associated oxidative activity; Coumarin is a marker of Phosphorus 6cH and of supernatants treated with Aspirin 15cH and LPS; BDN is a marker of Silicea terra 6 cH, 30 cH and 200 cH, Zincum metallicum 30 cH and 200cH and Aspirin 15cH; Methylene violet is a marker of supernatants treated with Silicea terra 30 cH and 200cH, as well as Zincum metallicum 6 cH and 200cH. The other dyes did not show specific interactions with the samples studied.

Desempenho e qualidade dos ovos de poedeiras alimentadas com semente de urucum / Performance and quality of eggs from laying hens fed with annatto seed / Rendimiento y calidad de los huevos de gallinas ponedoras alimentadas con semillas de achiote

Objetivou-se avaliar o efeito da adição de níveis de semente de urucum moída nas rações sobre o desempenho e a qualidade dos ovos de poedeiras comerciais de ovos vermelhos. Os tratamentos foram constituídos por cinco dietas, sendo quatro experimentais contendo níveis de inclusão de semente de urucum moída (0,5; 1,0; 1,5 e 2,0%) e um grupo controle. Adotou-se um delineamento inteiramente casualizado, com quatro repetições e oito aves por unidade experimental. As variáveis analisadas foram: consumo de ração, porcentagem de postura, massa de ovos, conversão alimentar (kg/kg e kg/dz), peso médio do ovo, unidade Haugh, índice de gema, cor, gravidade específica, pH de gema e de albúmen, porcentagem e espessura da casca. As variáveis de desempenho e qualidade dos ovos não foram influenciadas (P>0,05) pelos níveis de semente de urucum estudados, exceto a coloração da gema que apresentou efeito quadrático (Y=5,93+5,86X-1,51X2), demonstrando que a coloração da gema crua foi intensificada com a inclusão de 1,94% de semente de urucum às rações. Conclui-se que adição de semente de urucum moída em níveis de até 2,0% na ração de poedeiras comerciais de ovos vermelhos não influencia o desempenho e a inclusão de 1,94% intensifica a coloração da gema.(AU)

This paper had the aim of evaluating the effect of adding annatto seeds ground in the feeds on the performance and quality of the eggs from red-egg laying hens. The treatments consisted of five diets, four experimental ones containing the inclusion of ground annatto seeds (0.5, 1.0, 1.5 and 2.0%) and a control group. A completely randomized design was adopted, with four replicates and eight birds per experimental unit. The variables analyzed were feed intake, egg production, egg mass, feed conversion (kg/kg and kg/dozen), average egg weight, Haugh unit, yolk index, color, specific gravity, pH yolk and albumen, shell percentage and thickness. The performance variables and egg quality were not affected (P>0.05) by the levels of annatto seed studied, except the color of the yolk, which presented a quadratic effect (Y=5.93+5,86x-1,51x2) demonstrating that the staining of the raw egg yolk was enhanced with the addition of 1.94% annatto seed to the feeds. It can be concluded that the addition of ground annatto seed at levels up to 2.0% in the feed of red-egg laying hens does not influence the performance, and the inclusion of 1.94% intensifies the color of the yolk.(AU)

Este estudio tuvo como objetivo evaluar el efecto de la adición de niveles de semillas de achiote molidas en piensos, sobre el rendimiento y la calidad de los huevos de gallinas ponedoras de huevos rojos. Los tratamientos se han constituido por cinco dietas, siendo cuatro experimentales conteniendo niveles de inclusión de semillas de achiote molidas (0,5, 1,0, 1,5 y 2,0%) y un grupo control. Se adoptó un diseño completamente al azar, con cuatro repeticiones y ocho aves por unidad experimental. Las variables analizadas fueron: consumo de alimento, producción de huevos, masa de huevos, conversión alimenticia (kg/kg y kg/dz), peso promedio del huevo, la unidad Haugh, índice de la yema, color, densidad, pH de yema y de albumen y grosor de la cáscara. Las variables de rendimiento y calidad de los huevos no se vieron afectados (P>0,05) por los niveles de semillas de achiote estudiados, excepto el color de la yema que mostró un efecto cuadrático (Y=5,93+5,86x-1,51x2), lo que demuestra que la tinción de la yema cruda fue intensificada con la adición de 1,94% de semillas de achiote a los piensos. Se concluye que la adición de semillas de achiote molidas a niveles de hasta 2,0% en la dieta de las gallinas ponedoras de huevos rojos no influye en el rendimiento y la inclusión de 1,94% intensifica el color de la yema.(AU)

Development and validation of analytical method for determining the artificial dyes in breakfast cereals by means of high performance liquid chromatography / Desenvolvimento e validação de método analítico para determinação de corantes artificiais em cereais matinais utilizando cromatogafia líquida de alta eficiência

Validation of analytical methodology is an important tool to ensure the applicability and scope of a technique for laboratory routine, establishing the limits of the quality parameters of instrumental measurements and the statistical reliability by estimating the procedure performance. There are several normative documents for establishing the figures of merit, namely, limit of detection (LOD), limit of quantification (LOQ), linearity, selectivity, repetitivity, intermediate precision and recovery. This work aimed at developing and validating an analytical methodology for quantifying the artificial dyes in cereal by means of high performance liquid chromatography (HPLC). All of the validation process of this study was performed according to the recommendations by Thompson et al, and following the guidance stated in the document INMETRO DOQ-CGCRE-08 and the harmonized Guidelines IUPAC. After completing all of the validation steps, the methodology showed to be precise, exact, linear over a wide concentration range and its analysis has not being influenced by the food matrix for HPLC determination. Moreover, the methodology has shown as an important contribution since no official methodologies have been available for determining artificial dyes in breakfast cereals.(AU)

A validação de metodologia analítica é uma importante ferramenta para assegurar a aplicabilidade e a abrangência de uma técnica na rotina laboratorial, estabelecendo-se os limites dos parâmetros de qualidade das medidas instrumentais e da confiabilidade estatística, por meio de estimativa das figuras de mérito. Existem vários documentos normativos que estabelecem essas figuras de mérito, sendo: limite de detecção (LD), limite de quantificação (LQ), linearidade, efeito matriz, repetitividade, precisão intermediária e recuperação. Neste trabalho foi feita a elaboração e validação de um método analítico para quantificar corantes artificiais em cereal matinal por cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE). Todo o processo de validação desta pesquisa foi realizado de acordo com o preconizado por Thompson et al utilizando-se as recomendações contidas no documento do INMETRO DOQ-CGCRE-08 e no Guia harmonizado IUPAC. Após o cumprimento de todas as etapas, o método mostrou ser preciso, exato, linear em ampla faixa de concentração, e sua análise não foi influenciada pela matriz alimentar na determinação por CLAE. Além disso, o método mostrou-se como contribuição importante em vista de não existirem metodologias oficiais para realizar a determinação de corantes artificiais em cereais matinais.(AU)

CONTRIBUIÇÃO PARA FARMACOLOGIA DIAGNÓSTICA NA OFTALMOLOGIA VETERINÁRIA

A farmacologia diagnóstica é um importante nicho de pesquisa dentro da oftalmologia veterinária, tamanha sua importância e impacto de suas descobertas. A gama de possibilidades e de drogas disponíveis aumenta na mesma velocidade em que as pesquisas avançam rumo à precisão da localização do foco da doença. Para isso, a compreensão dos diferentes mecanismos de ação, bem como limitações e possíveis alterações no organismo ou do meio que o cerca, são de suma importância para evitar distorções na interpretação dos resultados. No primeiro capítulo aborda-se uma modalidade farmacológica relativamente nova no que diz respeito ao diagnóstico, principalmente na oftalmologia veterinária. Trata-se de uma ideia de aplicação ocular de uma solução de microbolhas que já vinha sendo empregada como contraste na ultrassonografia de outros órgãos ou no próprio bulbo ocular mas com outras finalidades. Nesta proposta foram abordadas diferentes espécies de aves, as quais receberam uma injeção intravenosa da solução de microbolhas para evidenciar o pecten, uma iniciativa até então inédita no meio científico. Constatou-se que o pecten foi evidenciado pelo contraste sem extravasamento deste para o corpo vítreo e sem efeitos colaterais para as aves na dose utilizada. No segundo capítulo, os principais corantes vitais utilizados na oftalmologia médica e veterinária foram testados para sua capacidade de inibição ou permissibilidade do crescimento de determinadas espécies bacterianas. Testes de Kirk-Bauer e de eficácia antimicrobiana foram realizados a fim de verificar as capacidades citadas anteriormente em diferentes formulações para os mesmos corantes, ora em strips, ora em soluções, neste caso com ou sem conservantes. Os resultados mostraram que cuidados devem ser tomados principalmente com fluoresceína sem conservante para evitar o crescimento de Escherichia coli e Pseudomonas aeruginosa, sendo aconselhável não utilizar este corante nesta condição. Concluiu-se também que coletas para cultura e antibiograma devem ser realizadas antes de se corar a superfície ocular devido ao potencial antimicrobiano de alguns corantes

Diagnostic pharmacology is an important research niche within veterinary ophthalmology due to its importance and impact of its findings. The range of possibilities and drugs available increases at the same rate as research advances toward the precise location of the disease's focus. For this, the understanding of the different mechanisms of action, as well as limitations and possible alterations in the organism or the surrounding environment, are extremely important to avoid distortions in the interpretation of the results. The first chapter covers a relatively new pharmacological modality regarding diagnosis, especially in veterinary ophthalmology. It is an idea of ocular application of a microbubble solution that has already being used as a contrast in the ultrasound of other organs or in the eye bulb itself but for other purposes. Different species of birds, which received an intravenous injection of the microbubbles solution to highlight the pecten were approached in this proposal, an initiative previously unheard of in the scientific environment. It was found that pecten was evidenced without extravasation by the contrast from it to the vitreous body and without side effects to the birds at the dose used. In the second chapter, the main vital dyes used in medical and veterinary ophthalmology were tested for their ability to inhibit or allow the growth of certain bacterial species. Kirk-Bauer and antimicrobial efficacy tests were performed to verify the aforementioned capabilities in different formulations for the same dyes, time in strips, time in solutions, in this case with or without preservatives. The results showed that care should be taken mainly with preservative-free fluorescein to prevent the growth of Escherichia coli and Pseudomonas aeruginosa. It is advisable not to use this dye in this condition. It was also concluded that sample collection for culture and sensitivity should be performed before staining the ocular surface due to the antimicrobial potential of some dyes.

Animal model for training in sentinel lymph node biopsy of the stomach through combined methods / Modelo animal para treinamento em pesquisa de linfonodo sentinela em estômago mediante métodos combinados

PURPOSE: Create and validate a proposed animal model for training in sentinel lymph node biopsy of the stomach. METHODS: In thirty-two rabbits, through a laparotomy, they received a subserosal injection of 0.1 ml of phytate labeled with technetium-99m (0.2 mCi) in the anterior wall of the gastric corpus, followed by 0.2 ml of Blue Patent V® 2.5%, through the same puncture site. Suspicious lymph nodes were searched in vivo at five, ten and 20 minutes, both visually (Blue Patent stained lymph nodes) and with a manual gamma radiation detector (to detect suspected radioactive lymph nodes). After 20 minutes, was performed resection of these for further evaluation of radioactivity (ex vivo) and histological study. RESULTS: Lymph nodes were identified in 30 rabbits (Average of 2.2 lymph nodes per animal). Of the 90 suspected lymph nodes that occurred in the study, 70 cases (77.8%) were histologically confirmed for lymphoid tissue. Of these, the majority were located in the periesophageal region of the gastric fundus. The sample presented a mortality rate of 6.25% and nine complications related to the method, which interfered in the identification of the lymph nodes. CONCLUSION: The animal model for sentinel node biopsy in rabbit stomachs proved to be feasible, with low complexity and reproduced the difficulties encountered for gastric lymph node biopsy in humans, being adequate for surgical training.(AU)

OBJETIVO: Criar e validar uma proposta de modelo animal para o treinamento em pesquisa de linfonodos sentinelas no estômago. MÉTODOS: Em trinta e dois coelhos, mediante laparotomia, foi injetado na subserosa da parede anterior do corpo gástrico, 0,1 ml de fitato marcado com tecnécio-99m (0,2 mCi), seguido pelo mesmo orifício, de 0,2 ml de Azul Patente V® 2,5%. A cavidade abdominal foi avaliada, in vivo, por meio de inspeção para pesquisa de suspeitas de linfonodos azuis e com detector manual de radiação gamma aos cinco, dez e 20 minutos para pesquisa de suspeitas de linfonodos radioativas. Após 20 minutos, foi realizada a ressecção dessas para posterior avaliação da radioactividade (ex vivo) e estudo histológico. RESULTADOS: Foram identificados linfonodos em 30 coelhos (Média de 2,2 linfonodos por animal). Das 90 suspeitas de linfonodos ocorridas no estudo, em 70 casos (77,8%) obteve-se confirmação histológica para tecido linfóide. Destas, a maioria estava localizada na região periesofágica do fundo gástrico. A amostra apresentou taxa de mortalidade de 6,25% e nove intercorrências relacionadas ao método, que interferiram na identificação dos linfonodos. CONCLUSÃO: O modelo animal para pesquisa de linfonodos sentinelas em estômago de coelhos mostrou-se factível, pouco complexo e reproduziu as dificuldades encontradas para a pesquisa de linfonodos gástricos em humanos, sendo adequado para o treinamento cirúrgico.(AU)

AVALIAÇÃO DO ENDOTÉLIO CORNEANO DE EQUINOS APÓS EXPOSIÇÃO AO CORANTE AZUL BRILHANTE 0,05% - ESTUDO IN VITRO

Os corantes vitais têm sido utilizados em diversas áreas da oftalmologia para melhorar a visibilização de diferentes tecidos. Com o objetivo de avaliar os efeitos imediatos do corante Azul brilhante a 0,05% no endotélio da córnea de equinos, foram utilizadas 38 córneas de 19 cavalos, machos ou fêmeas, de diferentes idades e provenientes de abatedouro comercial licenciado. As córneas foram aleatoriamente divididas em dois grupos. Grupo1: o endotélio da córnea foi exposto a solução salina balanceada por 60 segundos. Grupo 2: o endotélio da córnea foi exposto ao corante Azul brilhante 0,05% (Opht-Blue, Ophthalmos, São Paulo, Brazil) por 60 segundos seguido por lavagem com solução salina balanceada (BSS, Ophthalmos, São Paulo, Brazil). As córneas então foram excisadas com trépano de 8mm e preparadas para avaliação com microscopia óptica (24 córneas) e microscopia eletrônica de varredura (14 córneas). As áreas de dano endotelial foram mensuradas. Devido ao aparecimento de resíduos não normais na utilização de comparação de médias via ANOVA, optou-se pelo modelo linear generalizado e, com 5% de significância, o teste Qui-quadrado demonstrou que o fator tratamento não difere do controle. Conclui-se que o corante Azul brilhante em concentração de 0,05% não provocou danos ao endotélio da córnea de equinos.

Vital dyes have been used in many areas of ophthalmology for improving visualization of different tissues. With the objective of evaluating the immediate effects of 0,05% brilliant blue on corneal endothelium of horses, 38 corneas of 19 horses, both male and female of different ages obtained from a licensed Brazilian commercial slaughterhouse were studied. Corneas were randomly divided into two groups. In group 1, corneal endothelium was perfused with BSS for 60 seconds. In group 2, corneal endothelium was perfused with 0.3 mL of brilliant blue 0.05% (Opht-Blue, Ophthalmos, São Paulo, Brazil) for 60 seconds followed by rinsing with a balanced salt solution (BSS, Ophthalmos, São Paulo, Brazil). The corneas were, subsequently, excised with an 8mm trephine and prepared to analyze posterior endothelial surface using a light microscope (24 corneas) and a scanning electron microscope (14 corneas). Due to non-normal residuals at ANOVA mean comparison, a generalized linear model was utilized at 5% level of significance. Qui-square test stated that treatment and control group were not different statistically. The 0.05 % brilliant blue did not damage equine corneal endothelium.

AVALIAÇÃO DO POTENCIAL ANTIMICROBIANO E ANTIOXIDANTE DO EXTRATO DE JABUTICABA (Myrciaria cauliflora) MICROENCAPSULADO ADICIONADO EM LINGUIÇA FRESCAL E MORTADELA

O objetivo do presente estudo foi utilizar o extrato de jabuticaba microencapsulado como corante e avaliar o seu potencial antimicrobiano e antioxidante em produtos cárneos embutidos do tipo linguiça frescal e mortadela, em substituição ao corante tradicionalmente utilizado carmim de cochonilha. Uma primeira etapa consistiu na avaliação in vitro da capacidade antioxidante e antimicrobiana do extrato de jabuticaba aquoso e microencapsulado. O extrato de jabuticaba foi obtido a partir do resíduo do despolpamento da fruta, com posterior desidratação (microencapsulação) por spray dryer, utilizando maltodextrina como agente carreador. A caracterização foi efetuada por determinação do teor de antocianinas e identificação destas por cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE) e espectrometria de massas (MS), determinação da sua capacidade antioxidante pelos métodos Folin-Ciocalteu, capacidade redutora do ferro no plasma (FRAP) e capacidade antioxidante pelo radical DPPH. As características físicas avaliadas no extrato aquoso foram o valor de pH e o teor de sólidos solúveis. O potencial antimicrobiano foi determinado pelo método da concentração inibitória mínima (CIM) sobre as bactérias Staphylococcus aureus, Escherichia coli e Salmonella Enteritidis. O extrato de jabuticaba microencapsulado(EJM) foi utilizado para a elaboração de linguiça frescal e mortadela em duas diferentes concentrações: 2 e 4% de EJM para a linguiça frescal e 2% para mortadela. A linguiça frescal (à base de carne suína) e a mortadela (à base de carne bovina e carne mecanicamente separada de frango) foram avaliadas quanto à estabilidade durante armazenamento refrigerado a 1±1 e 4±1°C, por 15 e 56 dias, respectivamente. Os produtos foram caracterizados quanto à composição centesimal e foram realizadas análises físico-químicas, microbiológicas e sensoriais. Os resultados encontrados para a linguiça frescal confirmaram que o uso de 2% e 4% de EJM contribuíram para reduzir a oxidação lipídica durante os 15 dias de armazenamento e nas análises microbiológicas o EJM contribuiu para reduzir a contagem de microrganismos por quatro dias quando comparado com a linguiça controle (sem adição de EJM). A análise sensorial comprovou que 2% de EJM não comprometeu a maioria dos atributos sensoriais avaliados, com exceção da coloração mais escura. Recomenda-se, portanto, a utilização de 2% de EJM na produção de linguiça frescal. Nas mortadelas, os resultados não diferiram quando se comparou os produtos com 2% de EJM e sem adição do extrato (controle), porém, a utilização de 2% de EJM pode ser considerada uma alternativa interessante devido as demandas atuais por novas fontes de baixo custo e a utilização de pigmentos naturais que possam ser benéficos à saúde. Com estes resultados, pode-se dizer que o aproveitamento de cascas de jabuticaba oriundos do processamento da fruta, na forma de extrato microencapsulado, pode representar uma boa alternativa como corante natural, trazendo uma nova concepção da utilização de produtos mais saudáveis em linguiça frescal e mortadela.

The objective of this study was to use jabuticaba extract microencapsulated as dye and evaluate its antimicrobial and antioxidant potential in fresh sausage and mortadella, replacing the traditionally used dye cochineal carmine. The first step was to evaluate in vitro antioxidant and antimicrobial properties of aqueous and microencapsulated jabuticaba extract. The extract was obtained from the the waste of fruit pulping, with subsequent dehydration (microencapsulation) by spray dryer using maltodextrin as carrier agent. The characterization was carried out by determining and identifying anthocyanins by high-performance liquid chromatography (CLAE) and mass spectrometry (MS), determining the antioxidant capacity by the Folin-Ciocalteu method, reducing capacity of iron in plasma (FRAP) and antioxidant activity by DPPH radical. Physical characteristics evaluated in the aqueous extract were pH value and soluble solids content. The antimicrobial potential was determined by the minimum inhibitory concentration (MIC) for the bacteria Staphylococcus aureus, Escherichia coli and Salmonella Enteritidis. Microencapsulated jabuticaba extract (MJE) was used for the preparation of fresh sausage and mortadella in two different concentrations: 2 and 4% EJM for fresh sausage and 2% for mortadella. The fresh sausage (pork) and mortadella (beef and mechanically separated meat chicken) were evaluated for stability during refrigerated storage at 1±1 and 4±1°C for 15 and 56 days, respectively. The products were characterized for centesimal composition and were carried out physical-chemical, microbiological and sensorial analysis. The results for fresh sausage confirmed that the use of 2% and 4% EJM contributed to reduce lipid oxidation during the 15 days of storage and MJE contributed to reduce the microorganisms counts for four days when compared to the control sausage. Sensory analysis proved that 2% MJE did not compromise the majority of sensory attributes evaluated, but the darker color. It is recommended, therefore, the use of 2% MJE for producing fresh sausages. Regarding mortadella, the results did not differ when compared 2% EJM and control, attesting that the 2% EJM can be considered an interesting alternative because of the current demands for new low-cost sources and using natural pigments, what can be beneficial to health. Considering the results, it can be state that the use of jabuticaba peel from fruit processing as microencapsulated extract can represent a good alternative as a natural dye, bringing a new conception of healthier products in fresh sausage and mortadella.

GENOTOXICIDADE E CITOTOXICIDADE DE CORANTES AZÓICOS EM ENSAIO DO MICRONÚCLEO IN VIVO (SWISS ALBINUS)

A adição de corantes em alimentos e rações assume papel importante na indústria alimentícia sob o ponto de vista tecnológico. Corantes naturais são difíceis de serem utilizados em produtos padronizados, portanto, foram criados corantes sintéticos. Dentre os corantes sintéticos artificiais permitidos por lei, estão aqueles do grupo Azo e seu uso é um dos avanços mais controversos no setor. A utilização destas substâncias continua levantando uma série de dúvidas quanto à toxicidade, uma vez que, na literatura, trabalhos com esse ímpeto são escassos e controversos. Neste contexto, objetivou-se, com este trabalho, avaliar o potencial genotóxico de corantes azóicos através do ensaio de micronúcleo (MN). O teste do MN é amplamente utilizado e aceito internacionalmente para avaliação de ações mutagênicas. O teste in vivo foi aplicado para investigação de genotoxicidade observada em Eritrócitos Policromáticos (PCE) extraídos da medula óssea do fêmur de 168 camundongos Swiss albinus, machos e fêmeas, submetidos a cinco tratamentos (N-Nitroso-N-etilureia: controle+; 150 mM NaCl: controle; corante a 1, 1,5 e 2 g.Kg-1), sendo utilizados quatro corantes azóicos (Tartrazina, Amarelo Crepúsculo, Vermelho 40, Ponceau 4R) nos tempos de 24h e 48h (após estes períodos foi executada eutanásia). Foi analisada também a relação PCE/NCE, cujo se trata de um importante biomarcador de citotoxicidade. Os dados obtidos no ensaio de MN foram submetidos à análise de variância (ANOVA), utilizando um esquema fatorial de 5 × 2 × 2 (tratamento × sexo × tempo), e comparação das médias pelo teste de Tukey (p < 0,05) usando o programa computacional SAS® versão 9.3. O corante Tartrazina apresentou genotoxicidade dose e sexo dependentes; Amarelo Crepúsculo foi genotóxico independente do sexo; Vermelho 40, a sua genotoxicidade foi dependente do tempo de exposição e do sexo do animal; a genotoxicidade do corante Ponceau 4R foi dependente da dose administrada e do tempo até a eutanásia. Contudo, pode-se concluir que estudos envolvendo estes aditivos alimentares devem ser realizados frequentemente com a finalidade de atualização constante de dados que ofereçam segurança para seu consumo, uma vez que todos os quatro corantes testados nesta pesquisa apresentaram algum grau de toxicidade. Lembrando que os mesmos possuem o uso regulamentado por legislação específica, que estabelece os Limites Máximos Permitidos (LMP) e padrões de Ingestão Diária Aceitável por humanos, extrapolados para animais. Porém, apesar do controle exigido pelas agências reguladoras, a utilização de corantes em alimentos continua levantando uma série de dúvidas, principalmente devido a escassez de trabalhos avaliando a toxicidade destes compostos o que reforça a atenção que lhes deve ser conferida.

The addition of the food coloring plays an important role in the food industry under the technological point of view. Natural dyes are difficult to navigate in standard products, so we were created synthetic dyes. Among artificial synthetic dyes allowed by law, are those of azo group and its use is one of the most controversial developments in the sector. The use of these substances is still raising a lot of questions as to toxicity, because in the literature, working with this momentum is limited and controversial. In this context, the aim, with this study was to evaluate the genotoxic potential of azo dyes by the micronucleus assay (MN). The MN test is widely used and internationally accepted for evaluation of mutagenic actions. The in vivo genotoxicity test was applied to research observed in erythrocytes Polychromatic (PCE) extracted from the bone marrow of the femur 168 Swiss mice Albinus, male and female, underwent five treatments (N-nitroso-N-ethylurea: control+; 150 mM NaCl: Control; dye at 1, 1.5 and 2 g.Kg-1) and used four azo dyes (Tartrazine, Sunset Yellow, Red 40, Ponceau 4R) for 24h and 48h (after this time euthanasia was performed). We analyzed also the PCE/NCE ratio, which it is an important marker of cytotoxicity. The data obtained in the MN assay were subjected to analysis of one-way variance (ANOVA) using a factorial scheme of 5 × 2 × 2 (treatment × sex × time), and average compared to Tukey's test (p < 0.05) using SAS® software version 9.3. The dye Tartrazine showed genotoxicity dose- and sex-dependent; Sunset Yellow was genotoxic sex-independent; Red 40, its genotoxicity was dependent on the exposure time and the sex of the animal; the dye Ponceau 4R genotoxicity depends on the dose and time until euthanasia. However, it can be concluded that studies of these food additives often must be performed in order to constantly update data that are safe for consumption, since all four dyes tested in this study showed some degree of toxicity. Recalling that they have the use regulated by specific legislation establishing the Maximum Allowable Limits (LMP) and patterns of Acceptable Daily Intake for humans, extrapolated to animals. However, despite the control required by regulatory agencies, the use of dyes in food continues to raise a number of questions, mainly due to lack of studies evaluating the toxicity of these compounds which reinforces the attention they should be given.

AVALIAÇÃO DO ENDOTÉLIO CORNEANO DE GALINHAS (Gallus gallus domesticus) APÓS EXPOSIÇÃO AO BESILATO DE ATRACÚRIO - ESTUDO IN VITRO

A musculatura iridiana de várias espécies de aves é estriada esquelética, dessa forma o controle da midríase transoperatória não é conseguida por agentes que atuem no sistema nervoso autônomo, como ocorre nos mamíferos. O besilato de atracúrio é um agente neurobloqueador que atua no miorrelaxamento esquelético. O uso intracameral deste fármaco tem sido realizado em aves e promove midríase imediata, a qual é fundamental em cirurgias para remoção da catarata. Objetivou-se avaliar a repercussão do uso de besilato de atracúrio no endotélio da córnea de galinhas. Utilizaram-se 20 córneas de 10 galinhas (Gallus gallus domesticus) que foram avaliadas após a excisão dos botões corneoesclerais e divididas em dois grupos: G1, composto pelas córneas dos bulbos oculares esquerdos, (grupo experimental) e G2, córneas dos bulbos oculares direitos (grupo controle). No grupo experimental foram aplicados 0,2 ml de besilato de atracúrio durante 3 minutos e após, as córneas foram lavadas com solução salina a 0,9%. As córneas do grupo controle receberam apenas solução salina a 0,9%. As córneas de ambos os grupos foram coradas com a técnica de coloração vital, primeiramente com vermelho de alizarina a 0,2% e após, com azul de tripano a 0,25% e visualizada por microscopia óptica. Foram obtidas 10 fotomicrografias aleatórias de cada amostra. Como resultado, observou-se que a área de desnudamento endotelial e exposição da membrana de Descemet no grupo experimental (G1) foi significativamente maior (22,23% +/- 13,67%) que a do grupo controle (G2) que foi de 0,75%. Foi possível concluir que o besilato de atracúrio induziu dano ao endotélio corneano de galinhas.

The iridian muscle of various species of birds is skeletal striated, this way, the control of intraoperative mydriasis is not achieved by agents that act in the autonomous nervous system, as in the case of mammals. The atracurium is a neuromuscular blocking agent that causes skeletal muscle relaxation. The intracameral use of atracuriu in the anterior chamber has been performed in birds and promotes immediate mydriasis, fundamental in cataract surgeries. Therefore this study aimed to check the effect of the use of atracurium in the corneal endothelium chickens. Twenty corneas of ten chickens (Gallus gallus domesticus) that have been evaluated after excision of the corneoesclerals buttons, were divided into two groups: G1, compound by corneas of the lefts eye bulbs (experimental group) and G2, corneas of the rights ocular bulbs (control group). In the experimental group there were 0.2 ml of atracurium besylate applied for three minutes and then the corneas were washed with 0.9% saline solution. The corneas of the control group received only 0.9% saline solution. The corneas of both of groups were then stained with the vital staining technique, first with alizarin red 0,2% and then, with trypan blue 0,25%, and, visualized by light microscopy and 10 random microphotographs were obtained were obtained of each sample. The results confirm that the area of endothelial denudation and Descemet's membrane exposure on the experimental group (G1) was significantly higher (22,23% +/- 13,67%) than in the control group (G2) that was 0,75%. It was concluded that the atracurium induced damage on the corneal endothelium of chickens.

O uso de corantes artificiais em alimentos e seus efeitos à saúde da população infantil / The use of food coloring and their effects on childhood health

Tendo em vista o crescimento dos serviços de alimentação coletiva e os perigos associados à mesma (como contaminações de alimentos), um aspecto que merece destaque diz respeito à manipulação e processamento de alimentos. Assim, esse estudo teve como propósito principal investigar a presença de Staphylococcus aureus nas mãos dos manipuladores de alimentos de uma Unidade de Alimentação e Nutrição (UAN). Para tanto, amostras coletadas das mãos de manipuladores de alimentos de diferentes setores do local analisado foram utilizadas. A coleta foi realizada com auxilio de placas de Petri, as quais continham um meio de cultura seletivo para Staphylococcus aureus (Agar manitol hipertônico). As análises mostraram a existência de apenas um portador do micro-organismo (14,28%). Esse resultado sugere que os manipuladores de alimentos são potencialmente capazes de causar intoxicação estafilocócica, por meio de contato direto com os alimentos sendo importantes fontes de contaminação. Há necessidade, portanto, de adotar boas práticas de manipulação dos alimentos para prevenir contaminação e intoxicação alimentar. (AU)

Given the food service growth and the risks associated with it (food contamination, for instance), the handling and food processing aspects must to be managed and supervised. Thus, this study aims to investigate the presence of Staphylococcus aureus in the hands of food handlers in a Food Service. For that, samples from the hands of food handlers from different sectors of the local studied were collected and, consequently, assessed. The data collection was performed by means of Petri dishes, which contained a medium selective for Staphylococcus aureus (Agar mannitol hypertonic). The analyses showed the existence of one carrier of the microorganism (14,28%). This result suggests that food handlers are potentially capable of causing staphylococcal food poisoning, through direct contact with the food being important sources of contamination. There is need, therefore, to adopt good manufacturing practices to prevent contamination and food poisoning. (AU)

Xenobiotics enhance laccase activity in alkali-tolerant -proteobacterium JB

Various genotoxic textile dyes, xenobiotics, substrates (10 µM) and agrochemicals (100 µg/ml) were tested for enhancement of alkalophilic laccase activity in-proteobacterium JB. Neutral Red, Indigo Carmine, Naphthol Base Bordears and Sulphast Ruby dyes increased the activity by 3.7, 2.7, 2.6 and 2.3 fold respectively. Xenobiotics/substrates like p-toluidine, 8-hydroxyquinoline and anthracine increased it by 3.4, 2.8 and 2.3 fold respectively. Atrazine and trycyclozole pesticides enhanced the activityby 1.95 and 1.5 fold respectively.

Vários corantes têxteis genotóxicos, xenobióticos, substratos (10 mM) e agroquímicos (100 mM/mL) foram testados quanto ao aumento da atividade de lacase em -Proteobacterium JB. Os corantes Neutral Red, Indigo Carmine, Naphtol Base Bordears e Sulphast Ruby aumentaram a atividade em 3,7, 2,7, 2,6 e 2,3 vezes, respectivamente. Xenobióticos/substratos como p-toluidina, 8-hidroxiquinolina e antracina aumentaram a atividade em 3,4, 2,8 e 2,3 vezes, respectivamente. Atrazina e pesticidas triciclozol aumentaram a atividade em 1,95 e 1,5 vezes, respectivamente.

Color change using HSB color system of dental resin composites immersed in different common Amazon region beverages

The purpose of this study is to evaluate in vitro the color stability of composite resins when exposed to beverages with high coloring contents from the Amazon region. 240 samples from four different composite brands (Natural Look, Z350, 4Seasons and Opallis) of hue A3 were fabricated using an acrylic matrix. The samples were stored in distilled water at 37ºC for 24 hours. The initial color (T0) was registered using a Canon EOS Rebel XTi 10 mp camera, and then the samples were divided into four groups (n=15): G1 (coffee), G2 (açaí juice), G3 (energetic guaraná) and G4 (control - distilled water). The samples were exposed to solutions of DES (6hs) and RE (18hs) and placed in a double boiler under constant agitation, at 37ºC for 30 days. The samples were immersed in the coloring solutions for 15 minutes daily. After 7, 15 and 30 days, new photographic registers were made (T1, T2 and T3). The images were analyzed using Corel PHOTO-PAINT 12 software to identify the colors through the HSB system. The Kruskal-Wallis and t tests (p 0.05) demonstrated significant differences in color (hue, saturation and brightness). The results revealed that none of the tested composites showed color stability when exposed to coloring solutions, and that the Amazon region beverages (açaí juice and energetic guaraná) showed to be less coloring than coffee.

Este estudo propôs avaliar in vitro a estabilidade de cor de alguns compósitos quando expostos a bebidas da Região Amazônica com alto teor de corante. Foram confeccionados 240 corpos de prova (CP) de quatro resinas (Natural Look, Z350, 4Seasons e Opallis) no matiz A3 utilizando uma matriz de acrílico. As amostras foram armazenadas em água deionizada a 37ºC por 24 horas. A cor inicial das resinas (T0) foi registrada utilizando a máquina Canon EOS Rebel XTi 10Mp, e em seguida os CP foram divididos em 4 grupos (n=15): G1 (café), G2 (suco de açaí), G3 (guaraná energético) e G4 (controle - água destilada). Os CP foram submetidos às soluções DES (6hs) e RE (18hs) e colocados em banho-maria, sob constante agitação, à temperatura de 37ºC durante 30 dias. Diariamente os corpos de prova foram imersos nas soluções corantes durante 15 minutos. Após 7, 15 e 30 dias realizaram-se novos registros fotográficos (T1, T2 e T3). As imagens foram analisadas pelo programa Corel PHOTO-PAINT 12 para a identificação das cores através do sistema HSB. O teste Kruskal-Wallis e teste t (p 0,05) demonstraram que a alteração de cor (matiz, saturação e brilho) indicou diferenças significantes. Foi concluído que nenhuma das resinas testadas apresentou estabilidade de cor quando em contato com as soluções corantes, e que as bebidas da região Amazônica (suco de açaí e guaraná energético) demonstraram ser menos colorantes que o café.

Color change using HSB color system of dental resin composites immersed in different common Amazon region beverages

The purpose of this study is to evaluate in vitro the color stability of composite resins when exposed to beverages with high coloring contents from the Amazon region. 240 samples from four different composite brands (Natural Look, Z350, 4Seasons and Opallis) of hue A3 were fabricated using an acrylic matrix. The samples were stored in distilled water at 37ºC for 24 hours. The initial color (T0) was registered using a Canon EOS Rebel XTi 10 mp camera, and then the samples were divided into four groups (n=15): G1 (coffee), G2 (açaí juice), G3 (energetic guaraná) and G4 (control - distilled water). The samples were exposed to solutions of DES (6hs) and RE (18hs) and placed in a double boiler under constant agitation, at 37ºC for 30 days. The samples were immersed in the coloring solutions for 15 minutes daily. After 7, 15 and 30 days, new photographic registers were made (T1, T2 and T3). The images were analyzed using Corel PHOTO-PAINT 12 software to identify the colors through the HSB system. The Kruskal-Wallis and t tests (p 0.05) demonstrated significant differences in color (hue, saturation and brightness). The results revealed that none of the tested composites showed color stability when exposed to coloring solutions, and that the Amazon region beverages (açaí juice and energetic guaraná) showed to be less coloring than coffee.

Este estudo propôs avaliar in vitro a estabilidade de cor de alguns compósitos quando expostos a bebidas da Região Amazônica com alto teor de corante. Foram confeccionados 240 corpos de prova (CP) de quatro resinas (Natural Look, Z350, 4Seasons e Opallis) no matiz A3 utilizando uma matriz de acrílico. As amostras foram armazenadas em água deionizada a 37ºC por 24 horas. A cor inicial das resinas (T0) foi registrada utilizando a máquina Canon EOS Rebel XTi 10Mp, e em seguida os CP foram divididos em 4 grupos (n=15): G1 (café), G2 (suco de açaí), G3 (guaraná energético) e G4 (controle - água destilada). Os CP foram submetidos às soluções DES (6hs) e RE (18hs) e colocados em banho-maria, sob constante agitação, à temperatura de 37ºC durante 30 dias. Diariamente os corpos de prova foram imersos nas soluções corantes durante 15 minutos. Após 7, 15 e 30 dias realizaram-se novos registros fotográficos (T1, T2 e T3). As imagens foram analisadas pelo programa Corel PHOTO-PAINT 12 para a identificação das cores através do sistema HSB. O teste Kruskal-Wallis e teste t (p 0,05) demonstraram que a alteração de cor (matiz, saturação e brilho) indicou diferenças significantes. Foi concluído que nenhuma das resinas testadas apresentou estabilidade de cor quando em contato com as soluções corantes, e que as bebidas da região Amazônica (suco de açaí e guaraná energético) demonstraram ser menos colorantes que o café.

Ligninases production by Basidiomycetes strains on lignocellulosic agricultural residues and their application in the decolorization of synthetic dyes

Wood rotting Basidiomycetes collected in the "Estação Ecológica do Noroeste Paulista", São José do Rio Preto, São Paulo State, Brazil, concerning Aphyllophorales order and identified as Coriolopsis byrsina SXS16, Lentinus strigellus SXS355, Lentinus sp SXS48, Picnoporus sanguineus SXS 43 and Phellinus rimosus SXS47 were tested for ligninases production by solid state fermentation (SSF) using wheat bran or rice straw as culture media. C. byrsina produced the highest laccase (200 U mL-1) and Lentinus sp produced the highest activities of manganese peroxidase (MnP) and lignin peroxidase (LiP) (7 and 8 U mL-1, respectively), when cultivated on wheat bran. The effect of N addition on enzyme production was studied in medium containing rice straw and the data showed an increase of 3 up to 4-fold in the laccase production compared to that obtained in SSF on wheat bran. The laccases presented optimum pH at 3.0-3.5 and were stable at neutral pH values. Optimum pH for MnP and LiP activities was at 3.5 and between 4.5 and 6.0, respectively. All the strains produced laccase with optimum activities between 55-60°C while the peroxidases presented maximum activity at temperatures of 30 to 55°C. The crude enzymes promoted decolorization of chemically different dyes with around 70% of decolorization of RBBR and cybacron blue 3GA in 6h of treatment. The data indicated that enzymes from these basidiomycetes strains are able to decolorize synthetic dyes.

Fungos decompositores de madeira, do grupo Basidiomicetes, coletados na "Estação Ecológica do Noroeste Paulista", São José do Rio Preto, São Paulo, Brasil, pertencentes a ordem Aphyllophorales e identificados como Coriolopsis byrsina SXS16, Lentinus strigellus SXS355, Lentinus sp. SXS48, Picnoporus sanguineus SXS 43 e Phellinus rimosus SXS47 foram estudados para a produção de ligninases por FES (fermentação em estado sólido) usando farelo de trigo ou palha de arroz como meio de cultura. A espécie C. byrsina produziu a maior quantidade de lacase (200 U mL-1) enquanto que Lentinus sp. foi o melhor produtor de manganês peroxidase (MnP) e lignina peroxidase (LiP) (7 e 8 U mL-1, respectivamente), quando cultivados em meio composto por farelo de trigo. A avaliação do efeito da suplementação de nitrogênio do substrato sólido lignocelulósico (palha de arroz) indicou um aumento de 3 a 4 vezes na produção de lacase. A caracterização das enzimas mostrou que as lacases apresentaram atividade ótima em pH 3,0-3,5 e foram estáveis em pH de neutro a alcalino. O pH ótimo para atividade de MnP e LiP foi de 3,5 e entre 4,5 e 6,0, respectivamente. Todas as linhagens produziram lacase com atividade ótima a 55-60°C, enquanto as peroxidases apresentaram atividades máximas entre temperaturas de 30 e 55°C. A aplicação das soluções enzimáticas brutas, obtidas pelo cultivo das linhagens em meio de farelo de trigo, em testes de descoloração de corantes sintéticos de diferentes grupos químicos levou a mais 70% de perda de cor dos corantes RBBR e de cybacron blue 3GA, em 6h de tratamento. Os dados obtidos indicaram que as soluções enzimáticas contendo ligninases produzidas pelas linhagens de basidiomicetos estudadas promoveram a descoloração de corantes sintéticos.

Biodegradation of reactive textile dyes by basidiomycetous fungi from brazilian ecosystems

The potential of Trametes villosa and Pycnoporus sanguineus to decolorize reactive textile dyes used for cotton manufacturing in the State of Minas Gerais, Brazil, was evaluated. Growth and decolorization halos were determined on malt extract agar containing 0.002g L-1 of the dye. T. villosa decolorized all 28 of the tested dyes while P. sanguineus decolorized only 9. The effect of culture conditions (shaking and dye and nitrogen concentration) on the degradation of Drimaren Brilliant Blue dye was evaluated during growth of the fungi in liquid synthetic medium. Shaking favored degradation and decolorization was not repressed by nitrogen. In pure culture, T. villosa and P. sanguineus decolorized synthetic effluent consisting of a mixture of 10 dyes. Higher decolorization of the synthetic effluent was observed when a mixed culture of the two fungi was used. This study demonstrated differences between tropical basidiomycete species in terms of their ability to degrade reactive dyes, and reinforces the potential of this group of fungi for the decolorization of textile effluents.

O potencial de Trametes villosa e Pycnoporus sanguineus de descolorir corantes têxteis reativos utilizados na manufatura de algodão no estado de Minas Gerais foi avaliado. Halos de crescimento e descoloração foram determinados em agar extrato malte (MEA) com 0,002g L-1 do corante. T. villosa descoloriu os 28 corantes testados e P. sanguineus apenas 9. A influência de condições de cultivo (agitação, concentração de corante e concentração de nitrogênio) na degradação do corante azul brilhante Drimaren foi avaliada durante crescimento dos fungos em meio líquido sintético. Agitação favoreceu a degradação e não foi observada repressão da descoloração pelo nitrogênio. Em cultura pura, T. villosa e P. sanguineus descoloriram efluente sintético constituído por uma mistura de dez corantes. Maior descoloração do efluente sintético foi observada no cultivo misto destes dois fungos. Este estudo evidenciou diferenças entre espécies de basidiomicetos tropicais na capacidade em degradar corantes reativos e reforçou o potencial deste grupo de fungos para a descoloração de efluentes têxteis.

Aplicação e contribuição da cromoendoscopia no trato digestório superior de cães, uilizando Lugol, Índigo Carmim e Azul de Metileno

A Cromoendoscopia é definida como a aplicação tópica de corantes aquosos na mucosa do trato gastrointestinal. Estes corantes evidenciam alterações precoces ou discretas que passariam despercebidas ao exame convencional, permitindo assim a coleta de tecido alterado ou o acompanhamento de doenças pré existentes. Na Medicina Veterinária, não foram encontrados trabalhos que tenham utilizado esta técnica, mas há muitas situações em que ela pode ser empregada como a pesquisa ou o acompanhamento de: esofagites (como esôfago de Barrett em humanos), lesões gástricas erosivas ou polipóides e lesões duodenais. Utilizando os corantes escolhidos, este trabalho teve como objetivos: demonstrar a aplicação da cromoendoscopia em cães e confirmar sua eficácia quanto à identificação e delimitação de lesões no trato digestório superior destes animais; descrever vantagens e desvantagens da cromoendoscopia no direcionamento e aquisição de amostras de biópsia do trato digestório superior de cães; e correlacionar os achados endoscópicos pré e pós aplicação da técnica com os resultados histopatológicos. O estudo utilizou 10 cães adultos provenientes do Canil Municipal de Botucatu, do Canil da UNESP FMVZ Botucatu e da rotina do Hospital Veterinário da UNESP FMVZ Botucatu. Todos os animais realizaram endoscopia digestiva alta (EDA) seguida de Cromoendoscopia (CRE) e coleta de biópsia da mucosa esofágica, gástrica e duodenal, quando acessível. As biópsias foram enviadas para exame histopatológico e identificação de presença ou ausência de lesão no material coletado. Os resultados demonstraram concordância importante na cromoendoscopia (CRE) de esôfago com acurácia de 83,33%. Concordância moderada na endoscopia convencional (E.C.) de esôfago e na CRE de fundo, corpo e antro piloro com acurácia de 83,33%, 70%, 70% e 70% respectivamente. Concordância razoável na CRE de estômago com acurácia

Chromoendoscopy is defined as the topical application of aqueous dye mucosa of the gastrointestinal tract. These dyes show early changes or mild they go unnoticed to the conventional examination, allowing the collection of tissue changes or monitoring pre-existing diseases. In Veterinary Medicine, there were no studies that have used this technique , but there are many situations in which it can be employed as research or monitoring esophagitis (such as humans Barrett's esophagus), erosive or polypoid gastric lesions and duodenal injuries . Using the colors chosen, this work was objectives: to demonstrate the technique of chromoendoscopy in dogs and evaluate its effectiveness as the identification and delineation of chronic or early lesions, often unapparent, in the upper digestive tract these animals; describe advantages and disadvantages of chromoendoscopy in targeting and acquisition of biopsy specimens of the upper digestive tract of dogs, and correlate the endoscopic findings before and after technique application with the histopathologic results. The study used 10 adult dogs from the Botucatu Municipal Kennel, UNESP kennel FMVZ Botucatu and routine FMVZ Veterinary Hospital of UNESP Botucatu. Every animals performed upper endoscopy (EGD) followed by Chromoendoscopy (CRE) and collecting biopsy of the esophageal mucosa, gastric and duodenal when available. Biopsies were sent for examination and identification of pathological presence or absence of lesions in the material collected. The results showed chromoendoscopy (CRE) important concordance of the esophagus with an accuracy of 83.33%. Moderate concordance in conventional endoscopy (CE) of the esophagus and CRE fundus, body and pyloric antrum with an accuracy of 83.33%, 70%, 70% e 70% respectively. Reasonable concordance in CRE stomach with an accuracy of 70%. Poor concordance in the EC and in the duodenum EC and CRE accurately 50%, 40% and 40%

Avaliação da qualidade de doces em massa tipo junino / Evaluation of the quality of candies in mass junino type

O presente trabalho teve como objetivo avaliar a qualidade de doces em massa tipo junino quanto à identidade, através da pesquisa de elementos histológicos e corantes orgânicos artificiais, bem como em relação á presença de matérias estranhas e à rotulagem. Verificou-se que, de um total de 15 amostras, 9 ( 60 por cento) foram condenadas, sendo 9 devido à presença de corantes orgânicos artificiais, 1 por conter fungos filamentosos e 2 por rotulagem em desacordo com a legislação em vigor. Em 7 amostras foram detectadas matérias estranhas microscópicas, como: inseto inteiro, fragmentos de insetos e ácaros, não classificados como vetores mecânicos prejudiciais à saúde humana. Embora não exista parâmetro legal para condenação, em 5 amostras foi constatada a presença de grãos de areia (não quantificados). Observou-se que todas as amostras condenadas continham corantes orgânicos artificiais, e que os quatro corantes detectados, utilizados tanto na forma individual quanto combinada, variavam conforme a marca comercial do produto. O Amarelo Crepúsculo foi o mais freqüente (23,3 por cento) , seguido do Ponceau 4R (13,3 por cento) e do Amarelo Tartrazina (10 por cento). A mistura de corantes apresentou a mesma freqüência de utilização (6,7 por cento). Em 6 (46,1 por cento) amostras declaradas na rotulagem como doce de batata foram encontrados corantes que conferiram ao produto coloração semelhante á do doce de abóbora, caracterizando fraude intencional. Outro tipo de fraude praticada pelos fabricantes, com a intenção de realçar a cor original do vegetal, foi observada em 44,4 por cento do total de amostras condenadas.(AU)

This study aimed to evaluate the quality of 'june' -type - Junino paste sweets as to identity, by surveying the histological plant features and synthetic organic deyes, as well as the presence of extraneous materials and labeling. Ii was found that, from a total of 15 samples, 9 (60%) were condemned, all 9 due to the presence of artificial organic coloring, 1 for containing filament type fungi and 2for labeling in disagreement with legislation in force. Seven (7) samples had microscopic extraneous material: an entire insect body, fragments of insects and mites, not classified as mechanical vectors harmful to human health. Even though there is no legal parameter for condemnation, 5 samples contained grains of sand (not quantified). It was seen that all the condemned samples contained artificial organic coloring and that the four coloring agents detected, used both individually and combined, varied according to the products' trademark. Sunset Yellow was the most frequent (23.3%),followed by Ponceau 4R (13.3%) and Tartrazine Yellow 00%). The mixture of the colorings showed the same frequency in use (6.7%). In 6 samples (46.1%), the label claimed them to be "Sweet Potato" sweets, but they contained coloring to give them an appearance similar to that of "Pumpkin sweets ". characterizing intentional fraud. Another type of fraud practiced by the manufacturers was found in 44.4% of the condemned samples: additives to enhance the original color of the vegetable material. (AU)