Cryptosporidium occurrence in ruminants from the North Pioneer mesoregion of Paraná, Brazil / Ocorrência de Cryptosporidium em ruminantes da mesorregião norte pioneiro do Estado do Paraná, Brasil

The aim of this study was to investigate the occurrence of Cryptosporidium in cattle and sheep from the North Pioneer mesoregion of the state of Paraná. For this, 317 stool samples were collected from cattle and sheep on 16 properties in six municipalities in the North Pioneer mesoregion of Paraná. For detection of Cryptosporidium species, molecular analysis was performed using nested-PCR techniques targeting the 18S rRNA gene. Of the 37 beef cows and 115 calves analyzed, four (10.8%) and 14 (12.2%), respectively, were positive for Cryptosporidium. Of the 12 cows and 52 calves, one (8.3%) and 14 (26.9%), respectively, were positive for Cryptosporidium; and of the 42 ewes and 59 lambs, six (14.3%) and 12 (20.3%), respectively were positive for Cryptosporidium. Cattle (15.3%) and sheep (17.8%) were both susceptible to infection. All the properties of the municipalities of Assaí, Ibaiti and, Leópolis presented infected animals. The study showed that Cryptosporidium occurs in most municipalities assessed, that dairy calves had a higher risk (Odds Ratio=2,66, p-value=0,018) for infection than beef calves, and that sheep are just as susceptible to infection as are cattle, and that further Cryptosporidium studies are developed.(AU)

O objetivo deste estudo foi investigar a ocorrência de Cryptosporidium em bovinos e ovinos da mesorregião norte pioneiro do Estado do Paraná. Para tanto, 317 amostras de fezes destes ruminantes foram colhidas de 16 propriedades de seis municípios do Norte Pioneiro do Paraná. Para detecção de Cryptosporidium spp foi realizada análise molecular pela Técnica de nested-PCR direcionada ao gene 18S rRNA. Das 37 vacas de corte e 115 bezerros de corte analisados, quatro (10,8%) e 14 (12,2%) foram respectivamente positivos para Cryptosporidium . Das 12 vacas e 52 bezerros de leite, um (8,3%) e 14 (26,9%) foram positivos para Cryptosporidium e das 42 ovelhas e 59 cordeiros avaliados, seis (14,3%) e 12 (20,3%) amostras estavam positivas para Cryptosporidium, respectivamente. Bovinos (15,3%) e ovinos (17,8%) foram igualmente suscetíveis à infecção. Todas as propriedades dos municípios de Assaí, Ibaiti e Leópolis apresentaram animais infectados. Este estudo demonstrou que Cryptosporidium ocorre na maioria dos municípios avaliados, sendo que os bezerros de leite apresentam maior risco (Razão de chances=2,66, p-value=0,018) à infecção que os bezerros de corte e que os ovinos são tão suscetíveis à infecção quanto os bovinos e por isso, estudos nesta espécie animal devem ser mais desenvolvidos.(AU)

Molecular characterisation of Cryptosporidium spp. in lambs in the South Central region of the State of São Paulo / Caracterização molecular de Cryptosporidium spp. em cordeiros na região centro sul do Estado de São Paulo

Considering the proximity of sheep farmers to animals that are possibly diseased or releasing fecal oocysts into the environment and the marked pathogenicity in lambs, the aim of this study was to determine the occurrence and to molecularly characterize the infection by Cryptosporidium spp. in lambs in the South Central region of the state of São Paulo, Brazil. A total of 193 fecal samples were collected from sheep of several breeds, males and females, aged up to one year. Polymerase chain reaction (nested-PCR) was used to amplify DNA fragments from the subunit 18S rRNA gene and indicated 15% positivity; sequencing of amplified fragments was possible for 19 samples. Analysis of the obtained sequences showed that the identified species were Cryptosporidium xiaoi for 15 samples, constituting thus the first molecular characterization study of this Cryptosporidium species in Brazil. Cryptosporidium ubiquitum was identified for three samples and Cryptosporidium meleagridis for one sample; the latter two are considered zoonotic species.(AU)

Devido à proximidade de criadores de ovinos com animais possivelmente doentes e/ou eliminando oocistos fecais no ambiente e pela acentuada patogenicidade em cordeiros o objetivo foi, determinar a ocorrência e caracterizar molecularmente a infecção por Cryptosporidium spp. em cordeiros na região Centro Sul do Estado de São Paulo, Brasil. Num total de 193 amostras de fezes foram coletadas de ovinos de diversas raças, machos e fêmeas, com idade de até um ano. Por meio da reação em cadeia da polimerase (nested PCR) para a amplificação de fragmentos de DNA a partir do gene da subunidade 18S do rRNA houve positividade de 15% e o sequenciamento dos fragmentos amplificados foi possível em 19 amostras. A análise das sequências obtidas mostraram que as espécies identificadas nesses animais foram Cryptosporidium xiaoi em 15 amostras, sendo o primeiro estudo de caracterização molecular desta espécie de Cryptosporidium no Brasil. Cryptosporidium ubiquitum em três amostras, e Cryptosporidium meleagridis em uma amostra, sendo estas duas últimas consideradas espécies zoonóticas.(AU)

Molecular characterisation of Cryptosporidium spp. in lambs in the South Central region of the State of São Paulo / Caracterização molecular de Cryptosporidium spp. em cordeiros na região centro sul do Estado de São Paulo

Considering the proximity of sheep farmers to animals that are possibly diseased or releasing fecal oocysts into the environment and the marked pathogenicity in lambs, the aim of this study was to determine the occurrence and to molecularly characterize the infection by Cryptosporidium spp. in lambs in the South Central region of the state of São Paulo, Brazil. A total of 193 fecal samples were collected from sheep of several breeds, males and females, aged up to one year. Polymerase chain reaction (nested-PCR) was used to amplify DNA fragments from the subunit 18S rRNA gene and indicated 15% positivity; sequencing of amplified fragments was possible for 19 samples. Analysis of the obtained sequences showed that the identified species were Cryptosporidium xiaoi for 15 samples, constituting thus the first molecular characterization study of this Cryptosporidium species in Brazil. Cryptosporidium ubiquitum was identified for three samples and Cryptosporidium meleagridis for one sample; the latter two are considered zoonotic species.(AU)

Devido à proximidade de criadores de ovinos com animais possivelmente doentes e/ou eliminando oocistos fecais no ambiente e pela acentuada patogenicidade em cordeiros o objetivo foi, determinar a ocorrência e caracterizar molecularmente a infecção por Cryptosporidium spp. em cordeiros na região Centro Sul do Estado de São Paulo, Brasil. Num total de 193 amostras de fezes foram coletadas de ovinos de diversas raças, machos e fêmeas, com idade de até um ano. Por meio da reação em cadeia da polimerase (nested PCR) para a amplificação de fragmentos de DNA a partir do gene da subunidade 18S do rRNA houve positividade de 15% e o sequenciamento dos fragmentos amplificados foi possível em 19 amostras. A análise das sequências obtidas mostraram que as espécies identificadas nesses animais foram Cryptosporidium xiaoi em 15 amostras, sendo o primeiro estudo de caracterização molecular desta espécie de Cryptosporidium no Brasil. Cryptosporidium ubiquitum em três amostras, e Cryptosporidium meleagridis em uma amostra, sendo estas duas últimas consideradas espécies zoonóticas.(AU)

Frequência de ocorrência de Giardia sp. e de Cryptosporidium spp. em equídeos naturalmente infectados e abatidos em um frigorífico / Frequency of occurrence of Giardia sp. and Cryptosporidium spp. in equidae naturally infected and slaughtered in a slaughter house

Dentre os protozoários de maior importância em saúde pública estão Cryptosporidium spp. e Giardia sp. pelo potencial zoonótico. Pesquisou-se a frequência de ocorrência desses parasitas em equídeos abatidos em um frigorífico no município de Araguari, Minas Gerais, durante o período de fevereiro a março de 2008, correlacionando com o sexo, espécie e procedência dos animais. Foram coletadas 150 amostras de fezes, utilizando-se técnicas coproparasitológicas específicas para a detecção de Cryptosporidium spp. e Giardia sp. Os resultados revelaram a presença de cistos de Giardia sp. em 4 % (6/150) das amostras. A porcentagem de fêmeas positivas foi 4,23% (3/71) e machos 3,80% (3/79). Entre os equídeos a porcentagem de positivos foi 10,53% (2/19) em muares e 3,05% (4/131) em equinos. Quanto à procedência dos animais positivos por estados brasileiros, a frequência foi 16,67% (1/6) na Bahia; 7,69% (1/13) em Tocantins; 3,61% (3/83) em Minas Gerais e 2,08% (1/48) em Goiás. Oocistos de Cryptosporidium spp. não foram encontrados em nenhuma das 150 amostras de fezes analisadas. Conclui-se que é importante estudar a frequência desses protozoários em equídeos, acrescentando dados à literatura, bem como sugerir estudos moleculares para pesquisar o genótipo circulante e, desse modo, associar com a epidemiologia desses protozoários e a saúde pública.

Cryptosporidium spp. and Giardia sp are protozoan of larger importance by their zoonotic potential. We studied the frequency of occurrence of these parasites in equidae from Araguari - Minas Gerais, slaughtered during February to March of 2008 and correlated with sex, species and origin. A total of 150 fecal samples were collected and specific techniques were used. The results showed 4% (6/150) of Giardia sp. in all the samples. The positivity was 4.23% (3/71) in females and 3.80% (3/79) in males. The positivity was 10.53% (2/19) in mules and 3.05% (4/131) in horses. The positive samples from Brazilian states was 16.67% (1/6) in Bahia, 7.69% (1/13) in Tocantins, 3.61% (3/83) in Minas Gerais and 2.08% (1/48) in Goiás. Cryptosporidium spp. were not found in any samples analyzed (n=150). We concluded that it is very important to study the frequency of these protozoans in horses, adding data to the; we also suggest molecular studies to associate with epidemiology and public health.

Frequência de ocorrência de Giardia sp. e de Cryptosporidium spp. em equídeos naturalmente infectados e abatidos em um frigorífico / Frequency of occurrence of Giardia sp. and Cryptosporidium spp. in equidae naturally infected and slaughtered in a slaughter house

Dentre os protozoários de maior importância em saúde pública estão Cryptosporidium spp. e Giardia sp. pelo potencial zoonótico. Pesquisou-se a frequência de ocorrência desses parasitas em equídeos abatidos em um frigorífico no município de Araguari, Minas Gerais, durante o período de fevereiro a março de 2008, correlacionando com o sexo, espécie e procedência dos animais. Foram coletadas 150 amostras de fezes, utilizando-se técnicas coproparasitológicas específicas para a detecção de Cryptosporidium spp. e Giardia sp. Os resultados revelaram a presença de cistos de Giardia sp. em 4 % (6/150) das amostras. A porcentagem de fêmeas positivas foi 4,23% (3/71) e machos 3,80% (3/79). Entre os equídeos a porcentagem de positivos foi 10,53% (2/19) em muares e 3,05% (4/131) em equinos. Quanto à procedência dos animais positivos por estados brasileiros, a frequência foi 16,67% (1/6) na Bahia; 7,69% (1/13) em Tocantins; 3,61% (3/83) em Minas Gerais e 2,08% (1/48) em Goiás. Oocistos de Cryptosporidium spp. não foram encontrados em nenhuma das 150 amostras de fezes analisadas. Conclui-se que é importante estudar a frequência desses protozoários em equídeos, acrescentando dados à literatura, bem como sugerir estudos moleculares para pesquisar o genótipo circulante e, desse modo, associar com a epidemiologia desses protozoários e a saúde pública.(AU)

Cryptosporidium spp. and Giardia sp are protozoan of larger importance by their zoonotic potential. We studied the frequency of occurrence of these parasites in equidae from Araguari - Minas Gerais, slaughtered during February to March of 2008 and correlated with sex, species and origin. A total of 150 fecal samples were collected and specific techniques were used. The results showed 4% (6/150) of Giardia sp. in all the samples. The positivity was 4.23% (3/71) in females and 3.80% (3/79) in males. The positivity was 10.53% (2/19) in mules and 3.05% (4/131) in horses. The positive samples from Brazilian states was 16.67% (1/6) in Bahia, 7.69% (1/13) in Tocantins, 3.61% (3/83) in Minas Gerais and 2.08% (1/48) in Goiás. Cryptosporidium spp. were not found in any samples analyzed (n=150). We concluded that it is very important to study the frequency of these protozoans in horses, adding data to the; we also suggest molecular studies to associate with epidemiology and public health.(AU)

EPIDEMIOLOGIA MOLECULAR DE CRYPTOSPORIDIUM SPP EM FRANGOS (GALLUS GALLUS DOMESTICUS LINNAEUS, 1758) CRIADOS SOB O SISTEMA COLONIAL/CAIPIRA

O Cryptosporidium é um protozoário que infecta os seres humanos e uma grande variedade de animais vertebrados, e pode ser adquirido através de várias vias: contato pessoa-a-pessoa, contato com animais de companhia e animais de produção, ingestão de alimentos contaminados, água de consumo e água de recreio. Em aves, este parasita já foi diagnosticado em diferentes espécies, incluindo frangos. Dentre as espécies encontradas em aves podemos citar o Cryptosporidium baileyi, C. meleagridis e C. galli, além de 11 genótipos. O objetivo deste estudo foi determinar a prevalência de espécies e genótipos de Cryptosporidium em frangos criados em sistema Colonial/caipira. 351 amostras de fezes foram coletadas em 20 propriedades. As amostras foram obtidas a partir do intestino grosso de frangos abatidos para consumo, e armazenadas congeladas até a extração do DNA. Análises moleculares foram realizadas utilizando nested-PCR para a amplificação de fragmentos da subunidade 18S do rRNA. O sequenciamento foi realizado para determinar as espécies. As fitas reverse e forward foram sequenciadas. As sequências foram comparadas com as sequências padrão de Cryptosporidium depositados no Genbank, utilizando o sistema BLAST e alinhadas manualmente pelo programa BioEdit. Um questionário epidemiológico foi aplicado em todas as propriedades para determinar os fatores associados à infecção por Cryptosporidium. Observou-se a amplificação de fragmentos de DNA de Cryptosporidium em 25,6% (90/351) das amostras. O sequenciamento de fragmentos amplificados permitiu a identificação de duas espécies que infectam aves: C. meleagridis em 60 (67,7%), uma espécie zoonótica, e C. baileyi em 15 (16,6%) amostras. Além disso, foram identificadas duas espécies que infectam mamíferos: o C. parvum em 3 (3,3%) e C. bovis em 3 (3,3%) amostras. A identificação de C. bovis em aves é inédita. No questionário epidemiológico, a liberação de pintainhos com mais de 30 dias apresentou diferenças estatisticamente significativas como fator de risco, aumentando as chances de infecção animal.

Cryptosporidium are protozoans that infect humans and a wide variety of vertebrate animals, and can be acquired through several routes: person-to-person contact, contact with companion animals and livestock, ingestion of contaminated food, drinking water and recreational water. In birds, the infection has been diagnosed in different species, including chicken. Among the species found in birds we can mention the Cryptosporidium baileyi, C. meleagridis and C. galli, and 11 genotypes. The aim of this study was to determine the prevalence of Cryptosporidium species and genotypes in chickens raised under free-range system in Brazil. A total of 351 fecal samples were collected from 20 properties. The fecal samples were obtained from the large intestine of slaughtered chicken, and stored at freezer temperature until DNA extraction. Molecular analyses were performed using nested-PCR for amplification of fragments of the 18S subunit of rRNA gene. Sequencing was performed to determine the species in both direction. Nucleotide sequences were compared to standard sequences of Cryptosporidium deposited in Genbank using BLAST system and manual alignment by BioEdit program. An epidemiological survey was applied to all properties to determine the factors associated with Cryptosporidium infection. It was observed amplification for Cryptosporidium DNA fragments in 90 (25.6%) samples. Sequencing of amplified fragments allowed the identification of two species that infect birds: C. meleagridis in 61 (67.7%), an zoonotic specie, and C. baileyi, in 15 (16.6%) samples. Besides, were identified two species that infect mammal: C. parvum in 3 (3.3%) and C. bovis in 3 (3.3%) samples. Its the first.identification of C. bovis in birds. At the epidemiological survey, the release of chicks over 30 days showed statistically significant differences as a risk factor, increasing the chances of animal infection.

Cracterização morfométrica dos oocistos de Cryptosporidium tyzer 1907(Apicomplexa: Cryptosporidae) oriundos de cães e gatos naturalmente infectados

Objetivando-se avaliar a morfometria de oocistos de Cryptosporidium e a freqüência de parasitos gastrointestinais de amostras fecais de cães e gatos do Município do Rio de Janeiro, foram coletadas e analisadas no Laboratório de Coccídios e Coccidioses, do Departamento de Parasitologia Animal. Os exames parasitológicos foram processados segundo a técnica de centrífugo sedimentação em formol-éter, coloração pela técnica de Safranina?Azul de Metileno e Ziehl-Neelsen Modificado. De um total de 100 amostras fecais de animais, 43 eram procedentes de cães e 57 de gatos, foi possível observar oocistos em 10,53% material fecal de gatos e em 11,63% em cães. Os oocistos oriundos do material fecal de gatos corados pela Safranina-Azul de Metileno foram diferentes dos oocistos de Cryptosporidium procedentes de fezes de cães, enquanto que na coloração de Ziehl-Neelsen Modificado os oocistos do material fecal de gatos foram menores que os oocistos observados nas fezes dos cães. Verificou-se que, das amostras fecais de cães examinadas, 12 (27,9%) estavam positivas para parasitas intestinais. Sendo que, 9,30% estavam positivos para parasitos do gênero Giardia e 11,63% estavam positivos para Cryptosporidium, seguido de 6,98% por Trichuris vulpis; 9,30% por parasitos da família Ancylostomatidae, 6,98% por Blastocystis, 2,33% por Cystoisospora canis e 2,33% de gênero Sarcocystis. Das fezes de gatos examinadas, 35,09% estavam positivas para parasitos intestinais. Dentre os principais enteroparasitas encontrados, 10,53% foram do gênero Cryptosporidium; 8,77% para gênero Giardia; seguido por 7,02% de parasitos da família Ancylostomatidae; 5,26% por Dyphylidium caninum; 7,02% por Blastocystis; 3,51% por Taenia taeniforme, 3,52% por C. rivolta, 1,75% por C. felis e 1,75% por ascarídeos