Molecular identification of pathogenic Escherichia coli virulence genes and histopathological analysis in chickens condemned for airsacculitis / Identificação molecular de genes de virulência de Escherichia coli e análise histopatológica em frangos condenados por aerossaculite

ABSTRACT: The present study identified virulence genes and pathological changes caused by Escherichia coli in chicken carcasses condemned for airsacculitis and assessed if the histopathological examination and polymerase chain reaction (PCR) were effective for studies like this. Trachea, liver, and lung were collected from 30 chickens with suspected airsacculitis that has been condemned in the inspection line. The samples were analyzed by PCR to simultaneously identify two virulence genes (iss and tsh genes) and for histopathological testing. PCR efficiently genotypically characterize the E. coli isolates, where the virulence genes iss and tsh were found in three birds simultaneously. The histopathological examination detected a predominance of heterophils and mononuclear cells in the trachea (100%), lung (90%), and liver (13.3%). The liver was the organ where practically no alteration was diagnosed. The results of multiplex PCR for the tsh and iss virulence genes indicate the great potential of the approach in the characterization of E. coli isolates. Unspecific identification did not occur, thus making it necessary to use technologies for the identification and prevention of this agent in aviaries and poultry abattoirs.

RESUMO: O objetivo do presente estudo foi identificar genes de virulência e alterações patológicas provocadas por Escherichia coli em carcaças de frango condenadas por aerossaculite e se o exame histopatológico e uma Reação em Cadeia da Polimerase (PCR) são eficazes para os estudos dessa natureza. Para isso, foram coletados traqueia, fígado e pulmão de 30 frangos condenados na linha de inspeção, com suspeita de aerossaculite. As amostras foram submetidas a PCR para a identificação de dois genes de virulência de modo simultâneo (genes iss e tsh) e ao teste histopatológico. A PCR foi eficiente para caracterizar genotipicamente os isolados de E. coli, em que se constatou em três aves os genes de virulência iss e tsh simultaneamente. No exame histopatológico detectou-se a predominância de heterófilos e mononucleares na traqueia 100%, no pulmão 90% e no fígado 13,3%. O fígado foi o órgão onde praticamente não foi diagnosticada nenhuma alteração. Diante dos resultados obtidos, foi possível observar que a PCR multiplex para os genes de virulência tsh e iss apresenta um grande potencial na caracterização de isolados de E. coli, já que não gerou identificação inespecífica, com isso faz-se necessária a utilização de tecnologias para identificação e prevenção desse agente nos aviários e matadouros avícolas.

Analysis of nuclear maturation, DNA damage and repair gene expression of bovine oocyte and cumulus cells submitted to ionizing radiation'

Radiotherapy causes destruction of tumor cells, but also threatens the integrity and survival of surrounding normal cells. Then, woman submitted to irradiation for cancer treatment may present permanent ovary damage, resulting in impaired fertility. The objective of this study was to investigate the effects of therapeutic doses of ionizing radiation (IR), used for ovarian cancer treatment in humans, on bovine cumulus-oocyte complexes (COCs) as experimental model. Bovine ovaries were exposed to 0.9 Gy, 1.8 Gy, 3.6 Gy or 18.6 Gy IR, and then COCs were collected and used to evaluate: (a) oocyte nuclear maturation; (b) presence of phosphorylated H2A.X (γH2AX), as an indicator of DNA double-strand breaks (DSBs); and (c) expression of genes involved in DNA repair (TP53BP1, RAD52, ATM, XRCC6 and XRCC5) and apoptosis (BAX). The radiation doses tested in this study had no detrimental effects on nuclear maturation and did not increase γH2AX in the oocytes. However, IR treatment altered the mRNA abundance of RAD52 (RAD52 homolog, DNA repair protein) and BAX (BCL2-associated X protein). We conclude that although IR doses had no apparent effect on oocyte nuclear maturation and DNA damage, molecular pathways involved in DNA repair and apoptosis were affected by IR exposure in cumulus cells.(AU)

In vitro cytotoxicity of curcuminoids against head and neck cancer HNO97 cell line / Citotoxicidade in vitro de curcuminoides contra a linhagem de células HNO97 de câncer de cabeça e pescoço

Oral squamous cell carcinoma (OSCC) is a malignant tumour of Head and Neck Cancer (HNC). The recent therapeutic approaches used to treat cancer have adverse side effects. The natural agents exhibiting anticancer activities are generally considered to have a robust therapeutic potential. Curcuminoids, one of the major active compounds of the turmeric herb, are used as a therapeutic agent for several diseases including cancer. In this study, the cytotoxicity of curcuminoids was investigated against OSCC cell line HNO97. Our data showed that curcuminoids significantly inhibits the proliferation of HNO97 in a time and dose-dependent manner (IC50=35 μM). Cell cycle analysis demonstrated that curcuminoids increased the percentage of G2/M phase cell populations in the treated groups. Treating HNO97 cells with curcuminoids led to cell shrinking and increased detached cells, which are the typical appearance of apoptotic cells. Moreover, flow cytometry analysis revealed that curcuminoids significantly induced apoptosis in a time-dependent manner. Furthermore, as a response to curcuminoids treatment, comet tails were formed in cell nuclei due to the induction of DNA damage. Curcuminoids treatment reduced the colony formation capacity of HNO97 cells and induced morphological changes. Overall, these findings demonstrate that curcuminoids can in vitro inhibit HNC proliferation and metastasis and induce apoptosis.

O carcinoma de células escamosas oral (OSCC) é um tumor maligno do câncer de cabeça e pescoço (HNC). As recentes abordagens terapêuticas usadas para tratar o câncer têm efeitos colaterais adversos. Os agentes naturais que exibem atividades anticâncer são geralmente considerados como tendo um potencial terapêutico robusto. Curcuminoides, um dos principais compostos ativos da erva cúrcuma, são usados como agente terapêutico para várias doenças, incluindo câncer. Neste estudo, a citotoxicidade dos curcuminoides foi investigada contra a linha de células OSCC HNO97. Nossos dados mostraram que os curcuminoides inibem significativamente a proliferação de HNO97 de forma dependente do tempo e da dose (IC50 = 35 μM). A análise do ciclo celular demonstrou que os curcuminoides aumentaram a porcentagem de populações de células da fase G2 / M nos grupos tratados. O tratamento das células HNO97 com curcuminoides levou ao encolhimento celular e ao aumento das células destacadas, que são a aparência típica das células apoptóticas. Além disso, a análise de citometria de fluxo revelou que os curcuminoides induziram significativamente a apoptose de uma maneira dependente do tempo. Além disso, em resposta ao tratamento com curcuminoides, caudas de cometa foram formadas nos núcleos das células devido à indução de danos ao DNA. O tratamento com curcuminoides reduziu a capacidade de formação de colônias das células HNO97 e induziu alterações morfológicas. No geral, esses achados demonstram que os curcuminoides podem inibir in vitro a proliferação e metástase de HNC e induzir apoptose.

In vitro cytotoxicity of curcuminoids against head and neck cancer HNO97 cell line

Abstract Oral squamous cell carcinoma (OSCC) is a malignant tumour of Head and Neck Cancer (HNC). The recent therapeutic approaches used to treat cancer have adverse side effects. The natural agents exhibiting anticancer activities are generally considered to have a robust therapeutic potential. Curcuminoids, one of the major active compounds of the turmeric herb, are used as a therapeutic agent for several diseases including cancer. In this study, the cytotoxicity of curcuminoids was investigated against OSCC cell line HNO97. Our data showed that curcuminoids significantly inhibits the proliferation of HNO97 in a time and dose-dependent manner (IC50=35 M). Cell cycle analysis demonstrated that curcuminoids increased the percentage of G2/M phase cell populations in the treated groups. Treating HNO97 cells with curcuminoids led to cell shrinking and increased detached cells, which are the typical appearance of apoptotic cells. Moreover, flow cytometry analysis revealed that curcuminoids significantly induced apoptosis in a time-dependent manner. Furthermore, as a response to curcuminoids treatment, comet tails were formed in cell nuclei due to the induction of DNA damage. Curcuminoids treatment reduced the colony formation capacity of HNO97 cells and induced morphological changes. Overall, these findings demonstrate that curcuminoids can in vitro inhibit HNC proliferation and metastasis and induce apoptosis.

Resumo O carcinoma de células escamosas oral (OSCC) é um tumor maligno do câncer de cabeça e pescoço (HNC). As recentes abordagens terapêuticas usadas para tratar o câncer têm efeitos colaterais adversos. Os agentes naturais que exibem atividades anticâncer são geralmente considerados como tendo um potencial terapêutico robusto. Curcuminoides, um dos principais compostos ativos da erva cúrcuma, são usados como agente terapêutico para várias doenças, incluindo câncer. Neste estudo, a citotoxicidade dos curcuminoides foi investigada contra a linha de células OSCC HNO97. Nossos dados mostraram que os curcuminoides inibem significativamente a proliferação de HNO97 de forma dependente do tempo e da dose (IC50 = 35 M). A análise do ciclo celular demonstrou que os curcuminoides aumentaram a porcentagem de populações de células da fase G2 / M nos grupos tratados. O tratamento das células HNO97 com curcuminoides levou ao encolhimento celular e ao aumento das células destacadas, que são a aparência típica das células apoptóticas. Além disso, a análise de citometria de fluxo revelou que os curcuminoides induziram significativamente a apoptose de uma maneira dependente do tempo. Além disso, em resposta ao tratamento com curcuminoides, caudas de cometa foram formadas nos núcleos das células devido à indução de danos ao DNA. O tratamento com curcuminoides reduziu a capacidade de formação de colônias das células HNO97 e induziu alterações morfológicas. No geral, esses achados demonstram que os curcuminoides podem inibir in vitro a proliferação e metástase de HNC e induzir apoptose.

Spintherobolus papilliferus in the rio Ribeira de Iguape basin: implications for the biogeography and conservation of an endangered species (Ostariophysi: Characiformes)

Spintherobolus papilliferus is an endangered characid endemic of the Atlantic Rainforest, known from sparse locations in the upper rio Tietê basin around the metropolitan area of São Paulo city, and from an affluent of rio Itapanhaú, a coastal stream in Bertioga, São Paulo State. In 2020, S. papilliferus was sampled from the rio Ribeira de Iguape basin in Juquitiba, São Paulo State, representing a new distributional record. We compared 17 morphometric and six meristic characters from all specimens with data from the rios Tietê and Itapanhaú. An overlap in the morphological data from the three populations was detected, except for five measure whose values are lower in rio Ribeira de Iguape. MANOVA and LDA revealed that this population differs significantly from the other two, showing shallower body and caudal peduncle, among other features. These morphological differences may be due to environmental selective pressures since rio Ribeira de Iguape drainage is marked by fast waters which can influence the shape of fish bodies over time. DNA-barcoding of all Spintherobolus species corroborate that the rio Ribeira de Iguape population belongs to S. papilliferus. We also present a hypothesis for the disjunct distribution of S. papilliferus involving headwater capture and discuss the implications for the conservation of this endangered species.

Spintherobolus papilliferus é um caracídeo endêmico da Mata Atlântica e ameaçado de extinção, conhecido de localidades esparsas na bacia do alto rio Tietê, região metropolitana da cidade de São Paulo, e de um afluente do rio Itapanhaú, um riacho costeiro em Bertioga, Estado de São Paulo. Em 2020, S. papilliferus foi amostrada na bacia do rio Ribeira de Iguape em Juquitiba, São Paulo, representando um novo registro de distribuição. Comparamos 17 caracteres morfométricos e seis merísticos dos exemplares com dados dos rios Tietê e Itapanhaú. Houve sobreposição nos valores dos dados exceto em cinco medidas cujos valores são menores no rio Ribeira de Iguape. MANOVA e LDA revelaram que esta população difere significativamente das demais populações, sendo estes exemplares caracterizados pelas menores alturas do corpo e pedúnculo caudal, dentre outras características. Estas diferenças morfológicas possivelmente decorrem de pressões ambientais, pois a drenagem do rio Ribeira de Iguape possui ambientes de corredeiras velozes que podem influenciar no formato do corpo dos peixes. DNA-barcoding de todas as espécies de Spintherobolus corroborou que a população do rio Ribeira de Iguape pertence à S. papilliferus. Apresentamos também uma hipótese para a distribuição disjunta de S. papilliferus envolvendo captura de cabeceiras e discutimos implicações para a conservação dessa espécie ameaçada.

Dimethyl acetamide and dimethyl sulfoxide associated at glucose and egg yolk for cryopreservation of Pseudoplatystoma corruscans semen

This study aimed to develop a protocol for the cryopreservation of Pseudoplatystoma corruscans semen. For this, mature males were hormonally induced with a single dose of carp pituitary extract (5 mg/kg body weight). Semen was collected and evaluated. Two cryoprotectants were tested to compose the diluents: dimethyl acetamide (DMA) and dimethyl sulfoxide (Me2SO), in two concentrations (8% and 10%), + 5.0% glucose + 10% egg yolk. The semen was diluted in a 1: 4 ratio (semen: extender), packed in 0.5 mL straws and frozen in a dry shipper container in liquid nitrogen vapors. After thawing, sperm kinetics, sperm morphology and DNA integrity of cryopreserved sperm were evaluated. Pseudoplatystoma corruscans males produced semen with sperm motility > 80%. After thawing, all treatments provided semen with total sperm motility > 40%, with no significant difference (P < 0.05) between them, as well as between the other sperm kinetic parameters evaluated. The treatments with DMA provided a smaller fragmentation of the DNA of the gametes. Sperm malformations were identified in both fresh and cryopreserved semen, with a slight increase in these malformations being identified in sperm from thawed P. corruscans semen samples.(AU)

Este estudo teve como objetivo desenvolver um protocolo para a criopreservação do sêmen de Pseudoplatystoma corruscans. Para tal, machos maduros foram induzidos hormonalmente com uma dose única de extrato de hipófise de carpa (5 mg/kg de peso vivo). O sêmen foi coletado e avaliado. Sendo testados para compor os diluentes, dois crioprotetores: dimetil acetamida (DMA) e dimetil sulfóxido (Me2SO), em duas concentrações (8% e 10%), + 5,0% glicose + 10% gema de ovo. O sêmen foi diluído na proporção 1: 4 (sêmen: extensor), embalado em palhetas de 0,5 mL e congelado em container dryshipper em vapores de nitrogênio líquido. Após o descongelamento, foram avaliados os aspectos cinéticos espermáticos, a morfologia espermática e a integridade do DNA dos espermatozoides criopreservados. Os machos de P. corruscans produziram sêmen com motilidade espermática > 80%. Todos os tratamentos proporcionaram após o descongelamento sêmen com motilidade espermática total > 40%, sem diferença significativa (P < 0,05) entre eles, como também entre os demais parâmetros cinéticos espermáticos avaliados. Os tratamentos com DMA proporcionaram uma menor fragmentação do DNA dos gametas. Malformações espermáticas foram identificadas, tanto no sêmen fresco, como no criopreservado, sendo identificado um aumento discreto dessas malformações nos espermatozoides das amostras de sêmen descongeladas de P. corruscans.(AU)

In vitro cytotoxicity of curcuminoids against head and neck cancer HNO97 cell line / Citotoxicidade in vitro de curcuminoides contra a linhagem de células HNO97 de câncer de cabeça e pescoço

Oral squamous cell carcinoma (OSCC) is a malignant tumour of Head and Neck Cancer (HNC). The recent therapeutic approaches used to treat cancer have adverse side effects. The natural agents exhibiting anticancer activities are generally considered to have a robust therapeutic potential. Curcuminoids, one of the major active compounds of the turmeric herb, are used as a therapeutic agent for several diseases including cancer. In this study, the cytotoxicity of curcuminoids was investigated against OSCC cell line HNO97. Our data showed that curcuminoids significantly inhibits the proliferation of HNO97 in a time and dose-dependent manner (IC50=35 μM). Cell cycle analysis demonstrated that curcuminoids increased the percentage of G2/M phase cell populations in the treated groups. Treating HNO97 cells with curcuminoids led to cell shrinking and increased detached cells, which are the typical appearance of apoptotic cells. Moreover, flow cytometry analysis revealed that curcuminoids significantly induced apoptosis in a time-dependent manner. Furthermore, as a response to curcuminoids treatment, comet tails were formed in cell nuclei due to the induction of DNA damage. Curcuminoids treatment reduced the colony formation capacity of HNO97 cells and induced morphological changes. Overall, these findings demonstrate that curcuminoids can in vitro inhibit HNC proliferation and metastasis and induce apoptosis.(AU)

O carcinoma de células escamosas oral (OSCC) é um tumor maligno do câncer de cabeça e pescoço (HNC). As recentes abordagens terapêuticas usadas para tratar o câncer têm efeitos colaterais adversos. Os agentes naturais que exibem atividades anticâncer são geralmente considerados como tendo um potencial terapêutico robusto. Curcuminoides, um dos principais compostos ativos da erva cúrcuma, são usados como agente terapêutico para várias doenças, incluindo câncer. Neste estudo, a citotoxicidade dos curcuminoides foi investigada contra a linha de células OSCC HNO97. Nossos dados mostraram que os curcuminoides inibem significativamente a proliferação de HNO97 de forma dependente do tempo e da dose (IC50 = 35 μM). A análise do ciclo celular demonstrou que os curcuminoides aumentaram a porcentagem de populações de células da fase G2 / M nos grupos tratados. O tratamento das células HNO97 com curcuminoides levou ao encolhimento celular e ao aumento das células destacadas, que são a aparência típica das células apoptóticas. Além disso, a análise de citometria de fluxo revelou que os curcuminoides induziram significativamente a apoptose de uma maneira dependente do tempo. Além disso, em resposta ao tratamento com curcuminoides, caudas de cometa foram formadas nos núcleos das células devido à indução de danos ao DNA. O tratamento com curcuminoides reduziu a capacidade de formação de colônias das células HNO97 e induziu alterações morfológicas. No geral, esses achados demonstram que os curcuminoides podem inibir in vitro a proliferação e metástase de HNC e induzir apoptose.(AU)

Phylogeography of cliff racer (Platyceps rhodorachis Jan, 1865) from Punjab, Pakistan / Filografia de penhasco (Platyceps rhodorachis Jan, 1865) de Punjab, Paquistão

The present study reports the existence of cliff racer, Platyceps rhodorachis from the plains of Punjab, Pakistan. A total of 10 specimens were captured during the field surveys from June to September, 2018 from different sites of Punjab. Platyceps rhodorachis was identify on the basis of morphology and confirmed through COI gene sequences. The obtained DNA sequences have shown reliable and exact species identification. Newly produced DNA sequences of Platyceps rhodorachis were submitted to GenBank and accession numbers were obtained (MK936174.1, MK941839.1 and MT790210.1). N-J tree based on COI sequences of Platyceps rhodorachis clearly separated as out-group with other members of family Colubridae based on p-distance. The intra-specific genetic variation ranges from 12% to 18%. The DNA sequences of Platyceps rhodorachis kashmirensis, Platyceps rhodorachis ladacensis, Platyceps ventromaculatus, Platyceps ventromaculatus bengalensis and Platyceps ventromaculatus indusai are not available at NCBI to validate their taxonomic positions. In our recommendations, a large scale molecular based identification of Pakistan’s herpetofauna is required to report more new or subspecies from country.

O presente estudo relata a existência de um corredor de penhasco, Platyceps rhodorachis, das planícies de Punjab, Paquistão. Um total de 10 espécimes foi capturado durante os levantamentos de campo de junho a setembro de 2018 em diferentes locais de Punjab. Platyceps rhodorachis foi identificada com base na morfologia e confirmada por meio de sequências do gene COI. As sequências de DNA obtidas mostraram identificação de espécies confiável e exata. Sequências de DNA de Platyceps rhodorachis recém-produzidas foram submetidas ao GenBank e os números de acesso foram obtidos (MK936174.1, MK941839.1 e MT790210.1). Árvore N-J baseada em sequências COI de Platyceps rhodorachis claramente separadas como out-group com outros membros da família Colubridae com base na distância-p. A variação genética intraespecífica varia de 12% a 18%. As sequências de DNA de Platyceps rhodorachis kashmirensis, Platyceps rhodorachis ladacensis, Platyceps ventromaculatus, Platyceps ventromaculatus bengalensis e Platyceps ventromaculatus indusai não estão disponíveis no NCBI para validar suas posições taxonômicas. Em nossas recomendações, uma identificação de base molecular em grande escala da herpetofauna do Paquistão é necessária para relatar mais novas ou subespécies do país.

Effects of Gundelia tournefortii L. on biochemical parameters, antioxidant activities and DNA damage in a rat model of experimental obesity / Efeitos de Gundelia tournefortii L. em parâmetros bioquímicos, atividades antioxidantes e danos ao DNA em um modelo de obesidade experimental de rato

The present study was designed to investigate the effects of Gundelia tournefortii L. plant extract on different tissues in terms of DNA damage, biochemical and antioxidant parameter values in rats with high-calorie diets. With this aim, Wistar albino male rats were divided into 4 groups containing 6 rats each and the study was completed over 12 weeks duration. At the end of the implementation process over the 12 weeks, rats were sacrificed and blood and tissue samples were obtained. Analyses were performed on blood and tissue samples. According to results for DNA damage (8-OHdG), in brain tissue the OG2 group was significantly reduced compared to the NC group. For MDA results in liver tissue, OG1 and OG2 groups were determined to increase by a significant degree compared to the control group, while the OG2 group was also increased significantly compared to the obese group. In terms of the other parameters, comparison between the groups linked to consumption of a high calorie diet (HCD) and administration of Gundelia tournefortii L. in terms of antioxidant activities and serum samples obtained statistically significant results. Gundelia tournefortii L. plant extracts had effects that may be counted as positive on antioxidant parameter activity and were especially identified to improve DNA damage and MDA levels in brain tissues. Additionally, consumption of Gundelia tournefortii L. plant extract in the diet may have antiobesity effects; thus, it should be evaluated for use as an effective weight-loss method and as a new therapeutic agent targeting obesity.

O presente estudo foi desenhado para investigar os efeitos do extrato da planta Gundelia tournefortii L. em diferentes tecidos em termos de danos ao DNA, valores de parâmetros bioquímicos e antioxidantes em ratos com dietas hipercalóricas. Com esse objetivo, ratos Wistar albinos machos foram divididos em 4 grupos contendo 6 ratos cada e o estudo foi concluído ao longo de 12 semanas de duração. No final desse processo de implementação, os ratos foram sacrificados e amostras de sangue e tecido foram obtidas. As análises foram realizadas em amostras de sangue e tecido. De acordo com os resultados para danos ao DNA (8-OHdG), no tecido cerebral o grupo OG2 foi significativamente reduzido em comparação com o grupo NC. Para os resultados de MDA no tecido hepático, os grupos OG1 e OG2 aumentaram significativamente em comparação ao grupo controle, enquanto o grupo OG2 também aumentou significativamente em comparação ao grupo obeso. Quanto aos demais parâmetros, a comparação entre os grupos ligados ao consumo de dieta hipercalórica (DC) e à administração de Gundelia tournefortii L. em termos de atividades antioxidantes e amostras de soro obteve resultados estatisticamente significativos. Os extratos de plantas de Gundelia tournefortii L. tiveram efeitos que podem ser considerados positivos na atividade dos parâmetros antioxidantes e foram especialmente identificados para melhorar os danos ao DNA e os níveis de MDA nos tecidos cerebrais. Além disso, o consumo de extrato vegetal de Gundelia tournefortii L. na dieta pode ter efeitos antiobesidade; portanto, deve ser avaliado para uso como um método eficaz de perda de peso e como um novo agente terapêutico voltado para a obesidade.

Phylogeography of cliff racer (Platyceps rhodorachis Jan, 1865) from Punjab, Pakistan

Abstract The present study reports the existence of cliff racer, Platyceps rhodorachis from the plains of Punjab, Pakistan. A total of 10 specimens were captured during the field surveys from June to September, 2018 from different sites of Punjab. Platyceps rhodorachis was identify on the basis of morphology and confirmed through COI gene sequences. The obtained DNA sequences have shown reliable and exact species identification. Newly produced DNA sequences of Platyceps rhodorachis were submitted to GenBank and accession numbers were obtained (MK936174.1, MK941839.1 and MT790210.1). N-J tree based on COI sequences of Platyceps rhodorachis clearly separated as out-group with other members of family Colubridae based on p-distance. The intra-specific genetic variation ranges from 12% to 18%. The DNA sequences of Platyceps rhodorachis kashmirensis, Platyceps rhodorachis ladacensis, Platyceps ventromaculatus, Platyceps ventromaculatus bengalensis and Platyceps ventromaculatus indusai are not available at NCBI to validate their taxonomic positions. In our recommendations, a large scale molecular based identification of Pakistans herpetofauna is required to report more new or subspecies from country.

Resumo O presente estudo relata a existência de um corredor de penhasco, Platyceps rhodorachis, das planícies de Punjab, Paquistão. Um total de 10 espécimes foi capturado durante os levantamentos de campo de junho a setembro de 2018 em diferentes locais de Punjab. Platyceps rhodorachis foi identificada com base na morfologia e confirmada por meio de sequências do gene COI. As sequências de DNA obtidas mostraram identificação de espécies confiável e exata. Sequências de DNA de Platyceps rhodorachis recém-produzidas foram submetidas ao GenBank e os números de acesso foram obtidos (MK936174.1, MK941839.1 e MT790210.1). Árvore N-J baseada em sequências COI de Platyceps rhodorachis claramente separadas como out-group com outros membros da família Colubridae com base na distância-p. A variação genética intraespecífica varia de 12% a 18%. As sequências de DNA de Platyceps rhodorachis kashmirensis, Platyceps rhodorachis ladacensis, Platyceps ventromaculatus, Platyceps ventromaculatus bengalensis e Platyceps ventromaculatus indusai não estão disponíveis no NCBI para validar suas posições taxonômicas. Em nossas recomendações, uma identificação de base molecular em grande escala da herpetofauna do Paquistão é necessária para relatar mais novas ou subespécies do país.

Effects of Gundelia tournefortii L. on biochemical parameters, antioxidant activities and DNA damage in a rat model of experimental obesity

Abstract The present study was designed to investigate the effects of Gundelia tournefortii L. plant extract on different tissues in terms of DNA damage, biochemical and antioxidant parameter values in rats with high-calorie diets. With this aim, Wistar albino male rats were divided into 4 groups containing 6 rats each and the study was completed over 12 weeks duration. At the end of the implementation process over the 12 weeks, rats were sacrificed and blood and tissue samples were obtained. Analyses were performed on blood and tissue samples. According to results for DNA damage (8-OHdG), in brain tissue the OG2 group was significantly reduced compared to the NC group. For MDA results in liver tissue, OG1 and OG2 groups were determined to increase by a significant degree compared to the control group, while the OG2 group was also increased significantly compared to the obese group. In terms of the other parameters, comparison between the groups linked to consumption of a high calorie diet (HCD) and administration of Gundelia tournefortii L. in terms of antioxidant activities and serum samples obtained statistically significant results. Gundelia tournefortii L. plant extracts had effects that may be counted as positive on antioxidant parameter activity and were especially identified to improve DNA damage and MDA levels in brain tissues. Additionally, consumption of Gundelia tournefortii L. plant extract in the diet may have antiobesity effects; thus, it should be evaluated for use as an effective weight-loss method and as a new therapeutic agent targeting obesity.

Resumo O presente estudo foi desenhado para investigar os efeitos do extrato da planta Gundelia tournefortii L. em diferentes tecidos em termos de danos ao DNA, valores de parâmetros bioquímicos e antioxidantes em ratos com dietas hipercalóricas. Com esse objetivo, ratos Wistar albinos machos foram divididos em 4 grupos contendo 6 ratos cada e o estudo foi concluído ao longo de 12 semanas de duração. No final desse processo de implementação, os ratos foram sacrificados e amostras de sangue e tecido foram obtidas. As análises foram realizadas em amostras de sangue e tecido. De acordo com os resultados para danos ao DNA (8-OHdG), no tecido cerebral o grupo OG2 foi significativamente reduzido em comparação com o grupo NC. Para os resultados de MDA no tecido hepático, os grupos OG1 e OG2 aumentaram significativamente em comparação ao grupo controle, enquanto o grupo OG2 também aumentou significativamente em comparação ao grupo obeso. Quanto aos demais parâmetros, a comparação entre os grupos ligados ao consumo de dieta hipercalórica (DC) e à administração de Gundelia tournefortii L. em termos de atividades antioxidantes e amostras de soro obteve resultados estatisticamente significativos. Os extratos de plantas de Gundelia tournefortii L. tiveram efeitos que podem ser considerados positivos na atividade dos parâmetros antioxidantes e foram especialmente identificados para melhorar os danos ao DNA e os níveis de MDA nos tecidos cerebrais. Além disso, o consumo de extrato vegetal de Gundelia tournefortii L. na dieta pode ter efeitos antiobesidade; portanto, deve ser avaliado para uso como um método eficaz de perda de peso e como um novo agente terapêutico voltado para a obesidade.

Morphological and molecular characterization of Contracaecum australe (Nematoda: Anisakidae) parasitizing Phalacrocorax brasilianus (Aves: Phalacrocoracidae) on the north coast of Brazil / Caracterização morfológica e molecular de Contracaecum australe (Nematoda: Anisakidae) parasitando Phalacrocorax brasilianus (Aves: Phalacrocoracidae) no litoral norte do Brasil

For the first time in Brazil, Contracaecum australe is recorded parasitizing Phalacrocorax brasilianus (Aves, Suliformes, Phalacrocoracidae) from the Marine Extractive Reserve of Soure on Marajó Island, Brazilian Amazon. Its morphology revealed a body with a transversally striated cuticle, smooth or slightly cleft interlabia, lips with auricles, labial papillae, and conspicuous amphids. In males, the presence of the median papilla on the upper lip of the cloaca and spicules that reach almost half of the body of the parasite. These morphological characters, added to the number and distribution of the pre- and postcloacal papillae of the male specimens, and supported by the molecular phylogeny from the analysis of the ITS-1, 5.8S and ITS-2 genes, allowed the identification of these parasites.(AU)

Pela primeira vez no Brasil, Contracaecum australe é registrado parasitando Phalacrocorax brasilianus (Aves, Suliformes, Phalacrocoracidae) da Reserva Extrativista Marinha de Soure na Ilha de Marajó, Amazônia brasileira. Sua morfologia revelou corpo com cutícula estriada transversalmente, interlábios lisos ou levemente fendidos, lábios com aurículas, papilas labiais e anfídeos conspícuos. Nos machos, observa-se a presença da papila mediana no lábio superior da cloaca e espículos que atingem quase a metade do corpo do parasito. Esses caracteres morfológicos, somados ao número e distribuição das papilas pré e pós-cloacais dos espécimes machos, e apoiados pela filogenia molecular a partir da análise dos genes ITS-1, 5.8S e ITS-2, permitiram a identificação desses parasitos.(AU)

Morphological and molecular characterization of Contracaecum australe (Nematoda: Anisakidae) parasitizing Phalacrocorax brasilianus (Aves: Phalacrocoracidae) on the north coast of Brazil / Caracterização morfológica e molecular de Contracaecum australe (Nematoda: Anisakidae) parasitando Phalacrocorax brasilianus (Aves: Phalacrocoracidae) no litoral norte do Brasil

Abstract For the first time in Brazil, Contracaecum australe is recorded parasitizing Phalacrocorax brasilianus (Aves, Suliformes, Phalacrocoracidae) from the Marine Extractive Reserve of Soure on Marajó Island, Brazilian Amazon. Its morphology revealed a body with a transversally striated cuticle, smooth or slightly cleft interlabia, lips with auricles, labial papillae, and conspicuous amphids. In males, the presence of the median papilla on the upper lip of the cloaca and spicules that reach almost half of the body of the parasite. These morphological characters, added to the number and distribution of the pre- and postcloacal papillae of the male specimens, and supported by the molecular phylogeny from the analysis of the ITS-1, 5.8S and ITS-2 genes, allowed the identification of these parasites.

Resumo Pela primeira vez no Brasil, Contracaecum australe é registrado parasitando Phalacrocorax brasilianus (Aves, Suliformes, Phalacrocoracidae) da Reserva Extrativista Marinha de Soure na Ilha de Marajó, Amazônia brasileira. Sua morfologia revelou corpo com cutícula estriada transversalmente, interlábios lisos ou levemente fendidos, lábios com aurículas, papilas labiais e anfídeos conspícuos. Nos machos, observa-se a presença da papila mediana no lábio superior da cloaca e espículos que atingem quase a metade do corpo do parasito. Esses caracteres morfológicos, somados ao número e distribuição das papilas pré e pós-cloacais dos espécimes machos, e apoiados pela filogenia molecular a partir da análise dos genes ITS-1, 5.8S e ITS-2, permitiram a identificação desses parasitos.

Effects of Gundelia tournefortii L. on biochemical parameters, antioxidant activities and DNA damage in a rat model of experimental obesity / Efeitos de Gundelia tournefortii L. em parâmetros bioquímicos, atividades antioxidantes e danos ao DNA em um modelo de obesidade experimental de rato

Abstract The present study was designed to investigate the effects of Gundelia tournefortii L. plant extract on different tissues in terms of DNA damage, biochemical and antioxidant parameter values in rats with high-calorie diets. With this aim, Wistar albino male rats were divided into 4 groups containing 6 rats each and the study was completed over 12 weeks duration. At the end of the implementation process over the 12 weeks, rats were sacrificed and blood and tissue samples were obtained. Analyses were performed on blood and tissue samples. According to results for DNA damage (8-OHdG), in brain tissue the OG2 group was significantly reduced compared to the NC group. For MDA results in liver tissue, OG1 and OG2 groups were determined to increase by a significant degree compared to the control group, while the OG2 group was also increased significantly compared to the obese group. In terms of the other parameters, comparison between the groups linked to consumption of a high calorie diet (HCD) and administration of Gundelia tournefortii L. in terms of antioxidant activities and serum samples obtained statistically significant results. Gundelia tournefortii L. plant extracts had effects that may be counted as positive on antioxidant parameter activity and were especially identified to improve DNA damage and MDA levels in brain tissues. Additionally, consumption of Gundelia tournefortii L. plant extract in the diet may have antiobesity effects; thus, it should be evaluated for use as an effective weight-loss method and as a new therapeutic agent targeting obesity.

Resumo O presente estudo foi desenhado para investigar os efeitos do extrato da planta Gundelia tournefortii L. em diferentes tecidos em termos de danos ao DNA, valores de parâmetros bioquímicos e antioxidantes em ratos com dietas hipercalóricas. Com esse objetivo, ratos Wistar albinos machos foram divididos em 4 grupos contendo 6 ratos cada e o estudo foi concluído ao longo de 12 semanas de duração. No final desse processo de implementação, os ratos foram sacrificados e amostras de sangue e tecido foram obtidas. As análises foram realizadas em amostras de sangue e tecido. De acordo com os resultados para danos ao DNA (8-OHdG), no tecido cerebral o grupo OG2 foi significativamente reduzido em comparação com o grupo NC. Para os resultados de MDA no tecido hepático, os grupos OG1 e OG2 aumentaram significativamente em comparação ao grupo controle, enquanto o grupo OG2 também aumentou significativamente em comparação ao grupo obeso. Quanto aos demais parâmetros, a comparação entre os grupos ligados ao consumo de dieta hipercalórica (DC) e à administração de Gundelia tournefortii L. em termos de atividades antioxidantes e amostras de soro obteve resultados estatisticamente significativos. Os extratos de plantas de Gundelia tournefortii L. tiveram efeitos que podem ser considerados positivos na atividade dos parâmetros antioxidantes e foram especialmente identificados para melhorar os danos ao DNA e os níveis de MDA nos tecidos cerebrais. Além disso, o consumo de extrato vegetal de Gundelia tournefortii L. na dieta pode ter efeitos antiobesidade; portanto, deve ser avaliado para uso como um método eficaz de perda de peso e como um novo agente terapêutico voltado para a obesidade.

Effects of Gundelia tournefortii L. on biochemical parameters, antioxidant activities and DNA damage in a rat model of experimental obesity / Efeitos de Gundelia tournefortii L. em parâmetros bioquímicos, atividades antioxidantes e danos ao DNA em um modelo de obesidade experimental de rato

The present study was designed to investigate the effects of Gundelia tournefortii L. plant extract on different tissues in terms of DNA damage, biochemical and antioxidant parameter values in rats with high-calorie diets. With this aim, Wistar albino male rats were divided into 4 groups containing 6 rats each and the study was completed over 12 weeks duration. At the end of the implementation process over the 12 weeks, rats were sacrificed and blood and tissue samples were obtained. Analyses were performed on blood and tissue samples. According to results for DNA damage (8-OHdG), in brain tissue the OG2 group was significantly reduced compared to the NC group. For MDA results in liver tissue, OG1 and OG2 groups were determined to increase by a significant degree compared to the control group, while the OG2 group was also increased significantly compared to the obese group. In terms of the other parameters, comparison between the groups linked to consumption of a high calorie diet (HCD) and administration of Gundelia tournefortii L. in terms of antioxidant activities and serum samples obtained statistically significant results. Gundelia tournefortii L. plant extracts had effects that may be counted as positive on antioxidant parameter activity and were especially identified to improve DNA damage and MDA levels in brain tissues. Additionally, consumption of Gundelia tournefortii L. plant extract in the diet may have antiobesity effects; thus, it should be evaluated for use as an effective weight-loss method and as a new therapeutic agent targeting obesity.(AU)

O presente estudo foi desenhado para investigar os efeitos do extrato da planta Gundelia tournefortii L. em diferentes tecidos em termos de danos ao DNA, valores de parâmetros bioquímicos e antioxidantes em ratos com dietas hipercalóricas. Com esse objetivo, ratos Wistar albinos machos foram divididos em 4 grupos contendo 6 ratos cada e o estudo foi concluído ao longo de 12 semanas de duração. No final desse processo de implementação, os ratos foram sacrificados e amostras de sangue e tecido foram obtidas. As análises foram realizadas em amostras de sangue e tecido. De acordo com os resultados para danos ao DNA (8-OHdG), no tecido cerebral o grupo OG2 foi significativamente reduzido em comparação com o grupo NC. Para os resultados de MDA no tecido hepático, os grupos OG1 e OG2 aumentaram significativamente em comparação ao grupo controle, enquanto o grupo OG2 também aumentou significativamente em comparação ao grupo obeso. Quanto aos demais parâmetros, a comparação entre os grupos ligados ao consumo de dieta hipercalórica (DC) e à administração de Gundelia tournefortii L. em termos de atividades antioxidantes e amostras de soro obteve resultados estatisticamente significativos. Os extratos de plantas de Gundelia tournefortii L. tiveram efeitos que podem ser considerados positivos na atividade dos parâmetros antioxidantes e foram especialmente identificados para melhorar os danos ao DNA e os níveis de MDA nos tecidos cerebrais. Além disso, o consumo de extrato vegetal de Gundelia tournefortii L. na dieta pode ter efeitos antiobesidade; portanto, deve ser avaliado para uso como um método eficaz de perda de peso e como um novo agente terapêutico voltado para a obesidade.(AU)

Phylogeography of cliff racer (Platyceps rhodorachis Jan, 1865) from Punjab, Pakistan / Filografia de penhasco (Platyceps rhodorachis Jan, 1865) de Punjab, Paquistão

The present study reports the existence of cliff racer, Platyceps rhodorachis from the plains of Punjab, Pakistan. A total of 10 specimens were captured during the field surveys from June to September, 2018 from different sites of Punjab. Platyceps rhodorachis was identify on the basis of morphology and confirmed through COI gene sequences. The obtained DNA sequences have shown reliable and exact species identification. Newly produced DNA sequences of Platyceps rhodorachis were submitted to GenBank and accession numbers were obtained (MK936174.1, MK941839.1 and MT790210.1). N-J tree based on COI sequences of Platyceps rhodorachis clearly separated as out-group with other members of family Colubridae based on p-distance. The intra-specific genetic variation ranges from 12% to 18%. The DNA sequences of Platyceps rhodorachis kashmirensis, Platyceps rhodorachis ladacensis, Platyceps ventromaculatus, Platyceps ventromaculatus bengalensis and Platyceps ventromaculatus indusai are not available at NCBI to validate their taxonomic positions. In our recommendations, a large scale molecular based identification of Pakistans herpetofauna is required to report more new or subspecies from country.(AU)

O presente estudo relata a existência de um corredor de penhasco, Platyceps rhodorachis, das planícies de Punjab, Paquistão. Um total de 10 espécimes foi capturado durante os levantamentos de campo de junho a setembro de 2018 em diferentes locais de Punjab. Platyceps rhodorachis foi identificada com base na morfologia e confirmada por meio de sequências do gene COI. As sequências de DNA obtidas mostraram identificação de espécies confiável e exata. Sequências de DNA de Platyceps rhodorachis recém-produzidas foram submetidas ao GenBank e os números de acesso foram obtidos (MK936174.1, MK941839.1 e MT790210.1). Árvore N-J baseada em sequências COI de Platyceps rhodorachis claramente separadas como out-group com outros membros da família Colubridae com base na distância-p. A variação genética intraespecífica varia de 12% a 18%. As sequências de DNA de Platyceps rhodorachis kashmirensis, Platyceps rhodorachis ladacensis, Platyceps ventromaculatus, Platyceps ventromaculatus bengalensis e Platyceps ventromaculatus indusai não estão disponíveis no NCBI para validar suas posições taxonômicas. Em nossas recomendações, uma identificação de base molecular em grande escala da herpetofauna do Paquistão é necessária para relatar mais novas ou subespécies do país.(AU)

Experimental infection by Trypanosoma vivax in goats in the Brazilian semiarid: detection of T. vivax DNA in colostrum and assessment of lactogenic transmission / Infecção experimental por Trypanosoma vivax em caprinos no semiárido brasileiro: detecção de DNA de Trypanosoma vivax no colostro e avaliação da transmissão lactogênica

This study aimed to identify the presence of Trypanosoma vivax DNA in the colostrum of infected goats and to explore the possibility of transmission for neonates fed using colostrum collected from infected goats. We used twelve goats in the final third of gestation with an age of approximately 24 months. Six goats were inoculated intravenously with 0.5mL of blood containing approximately 1.25x105 trypomastigotes of T. vivax, and six remained uninfected. The presence of T. vivax in colostrum was evaluated by Polymerase Chain Reaction (PCR). The possibility of T. vivax transmission by colostrum was assessed by feeding six neonates born of serologically negative goats using colostrum from infected goats. Peripheral blood from neonates was collected daily for thirty days to assess the T. vivax presence through the examination of Giemsa-stained smears of leukocyte layers with the buffy coat technique (BCT) and by PCR. The results of a direct examination of colostrum were negative, but PCR confirmed the presence of T. vivax DNA in all infected goats. Additionally, lactogenic transmission by colostrum was not demonstrated once both BCT and PCR of neonate peripheral blood were negative.

Este estudo teve como objetivo identificar a presença de DNA de Trypanosoma vivax no colostro de cabras infectadas experimentalmente e verificar a possibilidade de transmissão para neonatos alimentados com colostro coletado de cabras infectadas. Foram utilizadas doze cabras no terço final de gestação com idade aproximada de 24 meses. Seis cabras foram inoculadas intravenosamente com 0,5mL de sangue contendo aproximadamente 1,25x105 tripomastigotas de T. vivax, e seis permaneceram não infectadas. A presença de T. vivax no colostro foi avaliada por Reação em Cadeia da Polimerase (PCR). A possibilidade de transmissão de T. vivax pelo colostro foi avaliada através da alimentação de seis neonatos nascidos de cabras sorologicamente negativas com colostro de cabras infectadas. Foi coletado diariamente o sangue periférico dos neonatos, por trinta dias para avaliar a presença de T. vivax através do exame de esfregaços de camadas leucocitárias coradas por giemsa, pela técnica BCT e por PCR. Os resultados do exame direto do colostro foram negativos, mas a PCR confirmou a presença de DNA de T. vivax no colostro em todas as cabras infectadas. Além disso, a transmissão lactogênica pelo colostro não foi demonstrada, uma vez que tanto a BCT quanto a PCR do sangue periférico do neonato foram negativas.

A new species of Rineloricaria (Siluriformes: Loricariidae) from coastal drainages of Rio de Janeiro, southeastern Brazil

A new species of Rineloricaria is described from the Iguaçu, Magé, Saracuruna, Guapiaçu, Macacu, Macaé, and Paraíba do Sul River basins in southeastern Brazil based on morphological and molecular data. The new species is diagnosed among congeners by the combination of the following characters: absence of plates in most of the ventral surface of pectoral girdle; snout tip with elliptical naked area reaching posteriorly the anteriormost pore of the infraorbital ramus of sensory canal; dorsal-fin spinelet present; supraoccipital and predorsal plates with smooth keels; five series of lateral plates below the dorsal fin; median and mid-ventral series of plates with well-developed keels. The new species is distinguished from congeners that inhabit the rivers draining the Serra do Mar in Rio de Janeiro state by the partial plate coverage of the ventral surface of the pectoral girdle and the abdomen (vs. pectoral girdle and abdomen completely covered by plates in Rineloricaria nigricauda, R. steindachneri,and R. zawadzkii). The new species shares the absence of plates on the abdominal surface with other species from the Paraná, Uruguay, and other Brazilian coastal river basins.(AU)

Uma nova espécie de Rineloricaria é descrita das bacias dos rios Iguaçu, Magé, Saracuruna, Guapiaçu, Macacu, Macaé e Paraíba do Sul, no sudeste do Brasil, com base em caracteres morfológicos e moleculares. A nova espécie é diagnosticada entre as congêneres pela combinação dos seguintes caracteres: ausência de placas na maior parte da superfície ventral da cintura peitoral; extremidade do focinho com área nua elíptica estendida posteriormente, alcançando o poro mais anterior do canal sensorial infraorbital; presença de spinelet na origem da nadadeira dorsal; placas supraoccipitais e pré-dorsais com quilhas pouco proeminentes; cinco séries de placas laterais abaixo da origem da nadadeira dorsal; placas das séries mediana e médio-ventral com quilhas bem desenvolvidas. A nova espécie distingue-se das congêneres que habitam os rios que drenam a Serra do Mar no Estado do Rio de Janeiro pela cobertura parcial de placas da superfície ventral da cintura peitoral e do abdômen (vs. cintura peitoral e abdômen completamente cobertos por placas em Rineloricaria nigricauda, R. steindachneri e R. zawadzkii). A nova espécie compartilha a ausência de placas na superfície abdominal com outras espécies das bacias hidrográficas dos rios Paraná e Uruguai e rios costeiros do Brasil.(AU)

Detection of adaptive genetic diversity and chemical composition in date palm cultivars and their implications in controlling red palm weevil, Rhynchophorus ferrugineus Oliver / Detecção da diversidade genética adaptativa e composição química em cultivares de tamareira e implicações no controle do bicudo vermelho da palmeira, Rhynchophorus ferrugineus Oliver

This study, about RPW and date palms, is under the scope of date palm bioecology and nutrition (nutritional ecology) which includes the integration of several areas of research such as date palm biochemistry, genetics, and RPW infestation behavior through various date palm cultivars. Date palm (Phoenix dactylifera L.; Arecaceae) production is under threat from the red palm weevil (RPW), Rhynchophorus ferrugineus Oliver. A better understanding of genetic diversity within date palm cultivars can be useful for its implementation within the insect IPM program in the future. Three indices, namely simple-sequence repeats (SSR) markers to elucidate genetic diversity, chemical components, and a natural infestation index of RPW, were used to evaluate the resistant or susceptible date palm cultivars in Qassim. Based on a field survey of RPW infestation within 79 date palm farms involving 11 cultivars at Qassim, the sensitivity and resistance cultivars were determined. The resistant date palm cultivars were Nabtat Ali, Shakrah, red Sukary, and um Kobar which had the lowest degree of RPW abundance %. Values of the essential minerals, nitrogen, phosphorus, potassium, and calcium within the date palm cultivars were also estimated. RPW abundance % was negatively correlated with the calcium content of date palm cultivars. The principal component analysis (PCA) revealed that the calcium content and RPW abundance % were highly affected by the cultivars. SSR markers of the date palm cluster tree divided genotypes into two main groups at similarity coefficients between 0.56 and 0.91. The 1st group included; Nabtet Ali, Red Sukary, Um Kobar, and Shakrah with similarity coefficients between 0.56, this group was the most resistant cultivars. Therefore, SSR markers were able to characterize and resolve genetic diversity in date palm cultivars for RPW resistance. When SSR markers coupled with higher calcium (Ca) content can efficiently replace indices in characterizing resistant date-palm genotypes with a high confidence level. Integration between date palm genetic diversity, chemical structures, and RPW infestations rates promoted the understanding of the interplay between the diversity of RPW management (short-time scale), and the resistance genes, plant nutrition, and dynamics of the diversity of RPW through domestication and diversification (long-timescale). Therefore, our results may lead to a change in RPW control strategies by switching to using safe alternative pesticide control methods (Resistant cultivars of date palm), which are underestimated and may reveal the impact of low-cost, but highly effective agricultural practices in the field of date production in the world. Understanding the genetic structure and calcium content of date palm cultivars mechanisms could help to predict date palm resistance against RPW populations in the new IPM strategy in RPW control.

Este estudo, sobre RPW e tamareiras, está no âmbito da bioecologia e nutrição da tamareira (ecologia nutricional) que inclui a integração de várias áreas de pesquisa, como bioquímica da tamareira, genética e comportamento de infestação de RPW através de vários cultivares de tamareira. A produção da tamareira (Phoenix dactylifera L.; Arecaceae) está ameaçada pelo gorgulho vermelho da palmeira (RPW), Rhynchophorus ferrugineus Oliver. A compreensão mais aprofundada da diversidade genética dentro dos cultivares de tamareiras pode ser útil para sua implementação no futuro programa de MIP de insetos. Três índices, ou seja, marcadores de sequência simples (SSR) para elucidar a diversidade genética, componentes químicos e um índice de infestação natural de RPW, foram utilizados para avaliar as cultivares de tamareiras resistentes ou suscetíveis em Qassim. Com base em uma pesquisa de campo da infestação de RPW em 79 fazendas de tamareiras envolvendo 11 cultivares em Qassim, as cultivares de sensibilidade e resistência foram determinadas. As cultivares de tamareiras resistentes foram Nabtat Ali, Shakrah, red Sukary e um Kobar, que apresentaram o menor grau de abundância de RPW. Também foram estimados os valores dos minerais essenciais, nitrogênio, fósforo, potássio e cálcio nas cultivares de tamareira. A porcentagem de abundância de RPW correlacionou-se negativamente com o teor de cálcio das cultivares de tamareira. A análise de componentes principais (PCA) revelou que o teor de cálcio e a abundância de RPW % foram altamente afetados pelas cultivares. Marcadores SSR da tamareira dividiram os genótipos em dois grupos principais com coeficientes de similaridade entre 0,56 e 0,91. O 1º grupo incluiu; Nabtet Ali, Red Sukary, Um Kobar e Shakrah com coeficientes de similaridade entre 0,56, este grupo foi o de cultivares mais resistentes. Portanto, os marcadores SSR foram capazes de caracterizar e resolver a diversidade genética em cultivares de tamareiras para resistência a RPW. Quando os marcadores SSR associados ao maior teor de cálcio (Ca) podem substituir com eficiência os índices na caracterização de genótipos de tamareiras resistentes com alto nível de confiança. A integração entre diversidade genética da tamareira, estruturas químicas e taxas de infestação de RPW promoveu a compreensão da interação entre a diversidade de manejo de RPW (escala de tempo curto) e os genes de resistência, nutrição de plantas e dinâmica da diversidade de RPW por meio da domesticação e diversificação (longo prazo). Portanto, nossos resultados podem levar a uma mudança nas estratégias de controle de RPW, passando a usar métodos alternativos seguros de controle de pesticidas (cultivares resistentes de tamareira), sendo subestimados e podem revelar o impacto de práticas agrícolas de baixo custo, mas altamente eficazes no campo de produção de tâmaras no mundo. Compreender a estrutura genética e o teor de cálcio dos mecanismos dos cultivares de tamareira pode ajudar a prever a resistência da tamareira contra populações de RPW na nova estratégia de IPM no controle de RPW.

Cell culture and variations in the comet assay do not affect the genomic integrity of adipose-derived stem cells

The application of quality control tests, such as the comet assay, are essential when adipose-derived stem cells are cultured for therapeutic purposes. However, the steps involved in the development of this assay should be investigated, in order to reduce their influence on genomic damage in cells. The study aimed to evaluate if the cell culture process causes DNA damage, and if variations in the lysis time and pH of the electrophoresis buffer interfere in the genotoxicity results. Four different comet assay protocols were evaluated, and the effects of lysis time and pH conditions of the electrophoresis buffer solution were stated as follows: 2 hours and pH 12; 24 hours and pH 12; 2 hours and pH ≥ 13 and 24 hours and pH ≥ 13. The tail moment was analyzed, and results indicated that at the time cells were detached from the flasks, there was little damage to the DNA in the adipose-derived stem cells, which was confirmed by evaluation of the expression of mRNA genes involved in damage and repair processes of genetic material. Also, the tail moment values ​​did not show significant differences among the four evaluated protocols (p < 0.05), with no indication of damage when compared to the positive control (p < 0.05). Thus, any of the tested protocols can be applied in genotoxicity tests with adipose-derived stem cells, without causing damage to them.(AU)