Patógenos transmitidos por vetores na reprodução canina / Vector-borne pathogens in canine reproduction

O artigo apresenta uma revisão sobre os efeitos reprodutivos da infecção pelos principais patógenos transmitidos por vetores que acometem cães, Leishmania spp., Babesia spp., Ehrlichia spp., Anaplasma spp. e Trypanosoma spp. São discutidas a patologia genital, fertilidade masculina e feminina, transmissão venérea, transmissão vertical, transmissão horizontal mãe-filho e sua relevância na epidemiologia das doenças.(AU)

The article presents a review of the reproductive effects of infection by main vector-borne pathogens of dogs, Leishmania spp., Babesia spp., Ehrlichia spp., Anaplasma spp. and Trypanosoma spp. Genital pathology, male and female fertility, venereal transmission, vertical transmission, horizontal mother-offspring transmission and their relevance to the epidemiology of the diseases are discussed.(AU)

Occurrence of tick-borne pathogens in dogs in a coastal region of the state of Ceará, northeastern Brazil / Ocorrência de patógenos transmitidos por carrapatos em cães em uma região litorânea do estado do Ceará, nordeste do Brasil

Abstract The aim of this study was to determine the occurrence of tick-borne pathogens (Ehrlichia canis, Babesia vogeli, Hepatozoon spp. and Rickettsia spp.) in dogs in Vila de Jericoacoara, coastal region of Ceará, Brazil. Blood samples were collected from 153 animals and analyzed using molecular and serological methods. Sixty animals were found to be infected or exposed to at least one of the pathogens studied. Babesia vogeli was the most prevalent pathogen (15%), followed by E. canis (13.7%) and Hepatozoon spp. (11.8%), which was identified as Hepatozoon canis through sequencing. Twenty dogs (13%) were seroreactive to Rickettsia spp. Rhipicephalus sanguineus sensu lato was observed on 11.8% of the animals. There were associations between age (< 3 years old) and positivity for B. vogeli, and between habitation (stray dogs) and positivity for H. canis. There were also associations between anemia and infection with H. canis, and between leukopenia and exposure to Rickettsia spp. No association was detected between clinical alterations and infection with or exposure to the pathogens studied. The results confirmed that pathogens of veterinary importance are circulating in northeastern Brazil and showed that dogs are exposed to Rickettsia species with zoonotic potential, thus indicating a need for vector control measures.

Resumo O objetivo deste estudo foi determinar a ocorrência de patógenos transmitidos por carrapatos (Ehrlichia canis, Babesia vogeli, Hepatozoon spp. e Rickettsia spp.) em cães na Vila de Jericoacoara, região costeira do Ceará, Brasil. Amostras de sangue foram coletadas de 153 animais e analisadas por métodos moleculares e sorológicos. Sessenta animais foram encontrados infectados ou expostos a pelo menos a um dos patógenos estudados. Babesia vogeli foi o patógeno mais prevalente (15%), seguido por E. canis (13,7%) e Hepatozoon spp. (11,8%), que foi identificado como Hepatozoon canis por sequenciamento. Vinte cães (13%) foram sororreativos à Rickettsia spp. Rhipicephalus sanguineus sensu lato foi observado em 11,8% dos animais. Houve associações entre idade (<3 anos) e positividade para B. vogeli, e entre habitação (cães de rua) e positividade para H. canis. Também houve associações entre anemia e infecção por H. canis, e entre leucopenia e exposição a Rickettsia spp. Não foi detectada associação entre alterações clínicas e infecção ou exposição aos patógenos estudados. Os resultados confirmaram que patógenos de importância veterinária estão circulando no nordeste do Brasil e mostraram que cães estão expostos a espécies de Rickettsia com potencial zoonótico, indicando a necessidade de medidas de controle do vetor.

Diagnóstico hematológico de coinfecção por Ehrlichia spp. e Hepatozoon canis em cães no semiárido da Paraíba / Hematogical diagnosis of coinfection by Ehrlichia spp. and Hepatozoon canis in dogs in the semi-arid of Paraiba

Dentre as hemoparasitoses com maior frequência de transmissão por carrapatos pode-se destacar a Erliquiose, a Hepatozoonose, a Anaplasmose e a Babesiose. A coinfecção por esses agentes são frequentes na rotina clínica; no entanto, poucas são as descrições sobre a ocorrência simultânea desses agentes em hemogramas. Sendo assim, o objetivo deste trabalho foi relatar os casos de quatro cães diagnosticados com coinfecção por Ehrlichia spp. e Hepatozoon canis, os quais foram atendidos no Hospital Veterinário Adílio Santos de Azevedo (HV-ASA) do Instituto Federal de Educação, Ciência e Tecnologia da Paraíba (IFPB), campus Sousa. Durante a avaliação clínica, relatou-se que os pacientes apresentavam, de maneira em comum, oligodipsia e hiporexia, além de histórico de presença de carrapatos. Em seguida, foram realizados hemogramas, que revelaram que todos os animais apresentavam anemia leve a moderada. Além disso, notou-se que o animal 1 estava com trombocitopenia e os animais 2 e 3, neutrofilia. Na pesquisa de hemoparasitas em esfregaço sanguíneo, observou-se coinfecção por H. canis e E. spp. nos quatro animais. Desta forma, este relato demonstrou a importância do uso do hemograma e da pesquisa dos agentes causadores das hemoparasitoses, através do esfregaço sanguíneo. Ressalte-se que o esfregaço sanguíneo, embora seja um método inespecífico e de baixa sensibilidade, pode e deve ser adotado como rotina, por ser uma técnica simples, rápida, barata, pouco invasiva e de diagnóstico definitivo.

Among the hemoparasitoses with the highest frequency of transmission by ticks, ehrlichiosis, hepatozoonosis, anaplasmosis, and babesiosis may be highlighted. The coinfection with these agents is frequent in clinical routine; however, there are few descriptions of the simultaneous occurrence of these agents in blood counts. Therefore, this work aimed to report the cases of four dogs diagnosed with Ehrlichia spp. and Hepatozoon canis, which were treated at the Adílio Santos de Azevedo Veterinary Hospital (HV-ASA), of the Federal Institute of Education, Science, and Technology of Paraíba (IFPB), Sousa campus. During the clinical evaluation, it was reported that the patients had oligodipsia and hyporexia in common, in addition to a history of tick presence. Then, blood counts were performed, which revealed that all animals had mild to moderate anemia. In addition, it was noted that animal 1 had thrombocytopenia and animals 2 and 3 had neutrophilia. In the investigation of hemoparasites in blood smears, co-infection with H. canis and E. spp. was observed in the four animals. Thus, this report demonstrated the importance of using the blood count and researching the causative agents of hemoparasitosis, through the blood smear. It should be noted that the blood smear, although it is a non-specific and low-sensitivity method, can and should be adopted as a routine, as it is a simple, fast, inexpensive, minimally invasive, and definitive diagnostic technique.

Ocorrência de Babesia sp, Ehrlichia canis e Hepatozoon canis em cães domiciliados, em dois municípios do estado do Espírito Santo - Brasil / Occurrence of Babesia sp, Ehrlichia canis and Hepatozoon canis in domiciled dogs in two municipalities of the state of Espírito Santo - Brazil / Ocurrencia de Babesia sp, Ehrlichia canis y Hepatozoon canis em perros domiciliados em dos municipios del estado de Espírito Santo - Brasil

As doenças transmitidas por carrapatos são afecções de grande importância na clínica médica de pequenos animais, devido à alta casuística e ampla distribuição vetorial no território brasileiro. Os principais agentes responsáveis pelas infecções em cães são Babesia sp., Ehrlichia canis e Hepatozoon canis. Os animais infectados são assintomáticos ou apresentam sinais clínicos inespecíficos, sendo necessário a utilização de testes diagnósticos para definição do agente etiológico, e diagnóstico seguro. O objetivo do presente estudo foi determinar a ocorrência desses micro-organismos em cães naturalmente infectados, domiciliados nos municípios de Vila Velha e Anchieta, Espírito Santo, utilizando diferentes testes de detecção: Reação em cadeia polimerase (PCR), sorologia para detecção de anticorpos anti Ehrlichia canis e pesquisa de hematozoários em esfregaço sanguíneo. Foram analisadas 65 amostras de sangue obtidas por venopunção da veia cefálica. No teste de PCR, 4,62% dos animais foram positivos para Babesia vogeli e 1,54% para Ehrlichia canis sendo os resultados para Hepatozoon canis negativos. No teste sorológico para E. canis 90,77% dos animais foram positivos para a presença de anticorpos, e na pesquisa em lâminas de esfregaço sanguíneo 3,02% apresentavam outros hemoparasitas. Os resultados indicam a dispersão desses hemoparasitas na população canina da região de estudo, entretanto com baixa ocorrência. O teste de PCR demonstrou-se como o mais sensível no qual Babesia vogeli foi o agente mais observado.

Tick-borne diseases are of great importance in the medical practice of small animals, due to the high casuistry and wide vectorial distribution in the Brazilian territory. The main agents responsible for infections in dogs are Babesia sp., Ehrlichia canis and Hepatozoon canis. Infected animals are asymptomatic or present nonspecific clinical signs, requiring the use of diagnostic tests to define the etiologic agent, and safe diagnosis. The objective of the present study was to determine the occurrence of these microorganisms in naturally infected dogs domiciled in the municipalities of Vila Velha and Anchieta, Espírito Santo, using different detection tests: polymerase chain reaction (PCR), serology to detect antibodies against Ehrlichia canis and research of hematozoa in blood smears. Sixty-five blood samples obtained by venipuncture of the cephalic vein were analyzed. In the PCR test, 4.62% of the animals were positive for Babesia vogeli and 1.54% for Ehrlichia canis, and the results for Hepatozoon canis were negative. In the serological test for E. canis, 90.77% of the animals were positive for the presence of antibodies, and in there search in blood smear slides, 3.02% presented other hemoparasites. The results indicate the dispersion of these hemoparasites in the canine population of the study region, however with low occurrence. The PCR test proved to be the most sensitive, in which Babesia vogeli was the most observed agent.

Las enfermedades transmitidas por garrapatas son enfermedades de gran importancia en la práctica médica de los pequeños animales, debido a la alta casuística y amplia distribución vectorial en el territorio brasileño. Los principales agentes responsables de las infecciones en los perros son Babesia sp., Ehrlichia canis y Hepatozoon canis. Los animales infectados son asintomáticos o presentan signos clínicos inespecíficos, siendo necesario el uso de pruebas diagnósticas para la definición del agente etiológico, y el diagnóstico seguro. El objetivo del presente estudio fue determinar la ocurrencia de estos microorganismos en perros infectados naturalmente, domiciliados en los municipios de Vila Velha y Anchieta, Espírito Santo, utilizando diferentes pruebas de detección: reacción en cadena de la polimerasa (PCR), serología para detectar anticuerpos anti Ehrlichia canis e investigación de hematozoos en frotis de sangre. Se analizaron sesenta y cinco muestras de sangre obtenidas por venopunción de la vena cefálica. En la prueba PCR, el 4,62% de los animales fueron positivos para Babesia vogeliyel 1,54% paraEhrlichia canis, y los resultados para Hepatozoon canis fueron negativos. En la prueba serológica para E. canis, el 90,77% de los animales fueron positivos a la presencia de anticuerpos, y en la investigación en láminas de frotis de sangre el 3,02% presentaron otros hemoparásitos. Los resultados indican la dispersión de estos hemoparásitos en la población canina de la región de estudio, aunque con una baja presencia. La prueba PCR resultó ser la más sensible, en la que Babesia vogeli fue el agente más observado.

Ocorrência de Babesia sp, Ehrlichia canis e Hepatozoon canis em cães domiciliados, em dois municípios do estado do Espírito Santo - Brasil / Occurrence of Babesia sp, Ehrlichia canis and Hepatozoon canis in domiciled dogs in two municipalities of the state of Espírito Santo - Brazil / Ocurrencia de Babesia sp, Ehrlichia canis y Hepatozoon canis em perros domiciliados em dos municipios del estado de Espírito Santo - Brasil

As doenças transmitidas por carrapatos são afecções de grande importância na clínica médica de pequenos animais, devido à alta casuística e ampla distribuição vetorial no território brasileiro. Os principais agentes responsáveis pelas infecções em cães são Babesia sp., Ehrlichia canis e Hepatozoon canis. Os animais infectados são assintomáticos ou apresentam sinais clínicos inespecíficos, sendo necessário a utilização de testes diagnósticos para definição do agente etiológico, e diagnóstico seguro. O objetivo do presente estudo foi determinar a ocorrência desses micro-organismos em cães naturalmente infectados, domiciliados nos municípios de Vila Velha e Anchieta, Espírito Santo, utilizando diferentes testes de detecção: Reação em cadeia polimerase (PCR), sorologia para detecção de anticorpos anti Ehrlichia canis e pesquisa de hematozoários em esfregaço sanguíneo. Foram analisadas 65 amostras de sangue obtidas por venopunção de veia cefálica de cães. No teste de PCR, 4,62% dos animais foram positivos para Babesia vogeli e 1,54% para Ehrlichia canis sendo os resultados para Hepatozoon canis negativos. No teste sorológico para E. canis 90,77% dos animais foram positivos para a presença de anticorpos, e na pesquisa em lâminas de esfregaço sanguíneo 3,02% apresentavam outros hemoparasitas. Os resultados indicam a dispersão desses hemoparasitas na população canina da região de estudo, entretanto com baixa ocorrência. O teste de PCR demonstrou-se como o mais sensível no qual Babesia vogeli foi o agente mais observado.(AU)

Tick-borne diseases are diseases of great importance in the medical practice of small animals, due to the high casuistry and wide vectorial distribution in the Brazilian territory. The main agents responsible for infections in dogs are Babesia sp., Ehrlichia canis and Hepatozoon canis. Infected animals are asymptomatic or present nonspecific clinical signs, requiring the use of diagnostic tests to define the etiologic agent, and safe diagnosis. The objective of the present study was to determine the occurrence of these microorganisms in naturally infected dogs domiciled in the municipalities of Vila Velha and Anchieta, Espírito Santo, using different detection tests: polymerase chain reaction (PCR), serology to detect antibodies against Ehrlichia canis and research of hematozoa in blood smears. Sixty-five blood samples obtained by venipuncture of the cephalic vein of dogs were analyzed. In the PCR test, 4.62% of the animals were positive for Babesia vogeli and 1.54% for Ehrlichia canis, and the results for Hepatozoon canis were negative. In the serological test for E. canis, 90.77% of the animals were positive for the presence of antibodies, and in the research in blood smear slides, 3.02% presented other hemoparasites. The results indicate the dispersion of these hemoparasites in the canine population of the study region, however with low occurrence. The PCR test proved to be the most sensitive, in which Babesia vogeli was the most observed agent.(AU)

Las enfermedades transmitidas por garrapatas son enfermedades de gran importancia en la práctica médica de los pequeños animales, debido a la alta casuística y amplia distribución vectorial en el territorio brasileño. Los principales agentes responsables de las infecciones en los perros son Babesia sp., Ehrlichia canis y Hepatozoon canis. Los animales infectados son asintomáticos o presentan signos clínicos inespecíficos, siendo necesario el uso de pruebas diagnósticas para la definición del agente etiológico, y el diagnóstico seguro. El objetivo del presente estudio fue determinar la ocurrencia de estos microorganismos en perros infectados naturalmente, domiciliados en los municipios de Vila Velha y Anchieta, Espírito Santo, utilizando diferentes pruebas de detección: reacción en cadena de la polimerasa (PCR), serología para detectar anticuerpos anti Ehrlichia canis e investigación de hematozoos en frotis de sangre. Se analizaron sesenta y cinco muestras de sangre obtenidas por venopunción de la vena cefálica de los perros. En la prueba PCR, el 4,62% de los animales fueron positivos para Babesia vogeli y el 1,54% para Ehrlichia canis, y los resultados para Hepatozoon canis fueron negativos. En la prueba serológica para E. canis, el 90,77% de los animales fueron positivos a la presencia de anticuerpos, y en la investigación en láminas de frotis de sangre el 3,02% presentaron otros hemoparásitos. Los resultados indican la dispersión de estos hemoparásitos en la población canina de la región de estudio, aunque con una baja presencia. La prueba PCR resultó ser la más sensible, en la que Babesia vogeli fue el agente más observado.(AU)

Perfil clínico e laboratorial de cadelas sororeativas para erliquiose tratadas em um Hospital Veterinário Universitário em Niterói, Estado do Rio de Janeiro, Brasil / Clinical and laboratory profile of dogs seroreactive to ehrlichiosis treated at the Veterinary Medical Teaching Hospital in Niterói, State of Rio de Janeiro, Brazil

Ehrlichiosis is a tick-borne disease highly prevalent in Brazil, and is relevant in canine clinical practice due to its high morbidity and mortality. Its clinical signs are nonspecific and its phases are acute, lasting 2 to 4 weeks; subclinical, i.e., asymptomatic; and chronic, resembling an autoimmune disease. The purpose of this study was to identify the occurrence of reactivity to Ehrlichia canis of bitches treated at the Veterinary Medical Teaching Hospital of the Universidade Federal Fluminense (UFF) - Niterói, RJ, Brazil, based on serological examination by iELISA, and to compare the hematological, biochemical, urinary protein-creatinine and urinary density profiles of reactive and non-reactive animals. This study involved solely bitches, regardless of breed, starting at 1 year of age. One hundred and thirty bitches, 1 to 16 year-old (mean age 7.02 ± 4.00), weighing 1.5 to 50 kg (mean weight 12.12 ± 10.65) were subjected to clinical examination and abdominal ultrasound. Complete blood count, biochemical measurements, urinalysis and serology for E. canis were also performed. The serum was used in the iELISA to identify immunoglobulin G (IgG), using a canine Ehrlichia Imunotest® diagnostic kit (Imunodot®, Jaboticabal, SP, Brazil) according to the manufacturer's instructions. Sixty animals (46.20%) were reactive to E. canis. According to their owners, only 5 (8.3%) of the 60 seroreactive animals had a history of tick-borne disease. The most common profile was that of mixed breed animals living with their owners, older than 7 years, who had not been treated preventatively with specific drugs against ectoparasites. Laboratory tests showed significant differences between groups in terms of total protein (TP), and calcium and urinary protein-creatinine ratio (UPC). TP and UPC were elevated in the non-reactive group, while the only significant change in the reactive group was mild hypocalcemia. In this study, 30% (18/60) of the bitches were seroreactive to E. canis and had hypocalcemia. Of these, 50% (9/18) had a UPC above 0.5. Furthermore, 66.7% (12/18) of this group with hypocalcemia also showed urine density (UD) of less than 1024. Among these 18 bitches, 5 had both alterations, i.e., UPC > 0.5 and UD < 1024. In this study, a high prevalence of bitches seroreactive to Ehrlichia canis was observed, despite the absence of clinical and/or laboratory signs indicative of the disease. In the investigation of IgG class antibodies, it is not possible to determine the exact time of infection, and titers may remain high for a period of more than 11 months, even after treatment and elimination of the bacterium. The fact that most seroreactive bitches showed no symptoms compatible with the disease either before or during the study suggests that they were in the subclinical phase of ehrlichiosis. The main reason for calcium metabolism disorders is a phosphorus imbalance, a condition that occurs in kidney diseases. Isosthenuria reflects the kidney's inability to concentrate urine. This finding may be one of the first clinical manifestations of chronic kidney disease (CKD), especially in dogs. On the other hand, the UPC ratio may increase with the progression of CKD. The presence of hypocalcemia, isosthenuria and increased UPC associated with seroreactivity suggests that infection by E. canis may be associated with the onset of CKD. Veterinarians should keep in mind the complexity of the pathophysiology of ehrlichiosis to ensure the disease is not underdiagnosed in any of its phases, thereby ensuring the correct treatment is provided. Such awareness is expected to reduce the chronicity of the disease and underlying sequelae among dogs.(AU)

Tick-borne pathogens infecting dogs from a highland swamp area / [Infecção em cães por patógenos transmitidos por carrapatos em uma área de brejo de altitude]

Objetivou-se neste estudo relatar a frequência e a identidade de patógenos transmitidos por carrapatos em cães residentes de uma área caracterizada por brejo de alta altitude. Amostras sanguíneas (n=203) foram coletadas e molecularmente analisadas via PCR (Babesia spp., Hepatozoon spp., Anaplasma spp. e Ehrlichia spp.) e sequenciamento de DNA. De todas as amostras analisadas, 8,87% (18/203) foram positivas a algum patógeno transmitido por carrapato. Especificamente, 5,42% (11/203) e 3,45% (7/203) foram positivos a Anaplasma platys e Ehrlichia canis, respectivamente. Este estudo fornece, pela primeira vez, evidência científica de infecção de cães por esses patógenos nessa área de alta altitude e reforça o provável papel de R. sanguineus s.l. como vetor de A. platys, principalmente considerando.se que muitos animais positivos eram infestados por essa espécie de carrapato.(AU)

Síndrome do eutireoideo doente e alterações nos hormônios tireoidianos em cães com hemoparasitoses / Euthyroid sick syndrome and changes in thyroid hormones in dogs with hemoparasitosis

Background: Hemoparasitoses are extremely important in the clinical routine because they affect a large number of dogs. In spite ofthe abundance of studies on this topic, hormonal alterations caused by infection with these agents are still poorly known. Therefore,the goal of this work was to assess the serum levels of thyroid hormones of dogs infected with Ehrlichia canis (E. canis) alone, anddogs infected with E. canis and Babesia canis vogeli (B. vogeli) and/or Anaplasma platys (A. platys) before and after treatment withdoxycycline chlorohydrate. This study also aimed at checking for presence of euthyroid sick syndrome (ESS) in these animals.Materials, Methods & Results: The concentrations of the thyroid hormones total triiodothyronine (TT3), total tetraiodothyronine (TT4),free tetraiodothyronine (FT4), and canine thyroid-stimulating hormone (cTSH) were assessed by chemiluminescence in 12 dogs. Nestedpolymerase chain reaction (nPCR) was used to confirm diagnoses. The dogs were divided into 2 groups: G1, which comprised animalsinfected by E. canis alone, and G2, which included animals simultaneously infected by E. canis and B. vogeli and/or A. platys. Theserum concentrations of the thyroid hormones were measured at two time points: before (D1) and after (D2) the 28-day treatment withgeneric doxycycline chlorohydrate (DC) at a dose of 10 mg/kg SID. On D2, another nPCR was carried out to check the efficacy of thetreatment. On D2, in both groups, all dogs became negative for E. canis; however, 8 animals remained infected or were reinfected byother hemoparasites. On D1, 4 dogs in G1 exhibited low TT3 in conjunction with low TT4; one of the dogs had increased TT3 alone,and another dog had an increased TT3 accompanied by decreased TT4. In G2, on D1, one dog exhibited high TT3 accompanied by adecreased concentration of TT4; 2 dogs had decreased TT4; 2 dogs had increased TT3; and one dog had both TT3 and TT4 decreased...

Síndrome do eutireoideo doente e alterações nos hormônios tireoidianos em cães com hemoparasitoses / Euthyroid sick syndrome and changes in thyroid hormones in dogs with hemoparasitosis

Background: Hemoparasitoses are extremely important in the clinical routine because they affect a large number of dogs. In spite ofthe abundance of studies on this topic, hormonal alterations caused by infection with these agents are still poorly known. Therefore,the goal of this work was to assess the serum levels of thyroid hormones of dogs infected with Ehrlichia canis (E. canis) alone, anddogs infected with E. canis and Babesia canis vogeli (B. vogeli) and/or Anaplasma platys (A. platys) before and after treatment withdoxycycline chlorohydrate. This study also aimed at checking for presence of euthyroid sick syndrome (ESS) in these animals.Materials, Methods & Results: The concentrations of the thyroid hormones total triiodothyronine (TT3), total tetraiodothyronine (TT4),free tetraiodothyronine (FT4), and canine thyroid-stimulating hormone (cTSH) were assessed by chemiluminescence in 12 dogs. Nestedpolymerase chain reaction (nPCR) was used to confirm diagnoses. The dogs were divided into 2 groups: G1, which comprised animalsinfected by E. canis alone, and G2, which included animals simultaneously infected by E. canis and B. vogeli and/or A. platys. Theserum concentrations of the thyroid hormones were measured at two time points: before (D1) and after (D2) the 28-day treatment withgeneric doxycycline chlorohydrate (DC) at a dose of 10 mg/kg SID. On D2, another nPCR was carried out to check the efficacy of thetreatment. On D2, in both groups, all dogs became negative for E. canis; however, 8 animals remained infected or were reinfected byother hemoparasites. On D1, 4 dogs in G1 exhibited low TT3 in conjunction with low TT4; one of the dogs had increased TT3 alone,and another dog had an increased TT3 accompanied by decreased TT4. In G2, on D1, one dog exhibited high TT3 accompanied by adecreased concentration of TT4; 2 dogs had decreased TT4; 2 dogs had increased TT3; and one dog had both TT3 and TT4 decreased...(AU)

Relationship between ocular abnormalities and hematologic alterations in patients infected naturally by Ehrlichia canis / Alterações hematológicas e sua relação com anormalidades oculares em pacientes infectados naturalmente com Ehrlichia canis

To determine the association between ocular abnormalities and hematologic findings in Ehrlichia canis-infected dogs, 120 dogs suspected of canine ehrlichiosis were studied. All patients were subjected to rapid serologic diagnostic test for Ehrlichia canis, and the diagnosis was confirmed by quantitative PCR. PCR-positive patients underwent ophthalmologic examination and a hemogram and were grouped into patients with thrombocytopenia and anemia (G1), patients with thrombocytopenia (G2), and patients without hematologic disorders (G3). For ophthalmic evaluation, the patients were grouped into those having mild, severe, both mild and severe, and no ocular alterations. All patients presented with uveitis (100%). Severe ocular disorders predominated in G1 and G2 patients. Dogs with anemia and leukopenia showed severe ocular disorders. In dogs with a greater number of leukocytes and copies/µl of the TRAG gene, the intraocular pressure (IOP) tends to decrease and vice versa (r = −0.23, r = −0.26). In conclusion, uveitis is the earliest ocular alteration of canine ehrlichiosis. The severity of ocular abnormalities in patients with ehrlichiosis is associated with thrombocytopenia and may be aggravated by anemia and leukopenia. The hemogram and IOP are useful tools for predicting eye involvement in Ehrlichia canis-infected patients. In regions where Ehrlichia canis is endemic, the use of the tonometer should be routinely in dog general consultation.

Para determinar a associação entre anormalidades oculares e achados hematológicos em cães infectados com Ehrlichia canis, foram estudados 120 cães com suspeita de erliquiose canina. Todos os pacientes foram submetidos a um teste diagnóstico sorológico rápido para Ehrlichia canis, e o diagnóstico foi confirmado por PCR quantitativa. Os pacientes com PCR positivo foram submetidos a exame oftalmológico e hemograma completo e foram agrupados em pacientes com trombocitopenia e anemia (G1), pacientes com trombocitopenia (G2) e pacientes sem distúrbios hematológicos (G3). Para avaliação oftalmológica, os pacientes foram agrupados em pacientes com alterações leves ou graves, leves e graves e sem anormalidades oculares. Todos os pacientes apresentaram uveíte (100%). Os distúrbios oculares graves predominaram nos pacientes do G1 e G2. Cães com anemia e leucopenia apresentaram distúrbios oculares graves. Em cães com maior número de leucócitos e cópias/µl do gene TRAG, a pressão intra-ocular tendeu a diminuir e vice-versa (r = -0.23, r = -0.26). Em conclusão, a uveíte é o primeiro distúrbio ocular da erliquiose canina. A gravidade das anormalidades oculares em pacientes com erliquiose está associada à trombocitopenia e pode ser agravada por anemia e leucopenia. Hemograma e PIO são ferramentas úteis para prever o envolvimento ocular em pacientes infectados com Ehrlichia canis. Nas regiões em que o Ehrlichia canis é endêmico, o uso do tonômetro deve ser rotineiro nas consultas gerais de cães.

Occurrence of tick-borne diseases in domestic dogs in Belém, Pará, Brazil / Ocorrência de doenças transmitidas por carrapatos em cães domésticos em Belém do Pará, Brasil

Tick-borne blood cell pathogens, which are challenging to diagnose, are primarily detected using molecular techniques. Therefore, this study aimed to detect the main infectious agents involved in 50 cases of suspected hemoparasitosis in dogs treated at the Veterinary Hospital Mário Dias Teixeira of the Federal Rural University of the Amazon. Hematological parameters were evaluated, and blood samples were subjected to polymerase chain reaction (PCR) assays for DNA amplification of the following species: Ehrlichia canis, Anaplasma platys, and Babesia canis. The PCR test results indicated that the most prevalent infectious agent was E. canis, present in 12% (6/50) infected animals, followed by A. platys and B. canis, present in 8% (4/50) and 2% (1/50) infected animals, respectively. Regarding hematological analysis, the most relevant changes were anemia, lymphopenia, thrombocytopenia, leukocytosis, and leukopenia. The availability of molecular techniques allows the management of the most appropriate treatment to infected animals in a rapid and specific way.

Patógenos de células sanguíneas transmitidos por carrapatos, cujo diagnóstico é desafiador, são detectados princi-palmente por meio de técnicas moleculares. Dessa forma, este estudo teve como objetivo detectar os principais agentes infec-ciosos envolvidos em 50 casos de suspeita de hemoparasitose em cães atendidos no Hospital Veterinário Mário Dias Teixeira da Universidade Federal Rural da Amazônia. Parâmetros hematológicos foram avaliados e amostras de sangue foram subme-tidas a ensaios de reação em cadeia da polimerase (PCR) para amplificação de DNA das seguintes espécies: Ehrlichia canis, Anaplasma platys e Babesia canis. Os resultados do teste de PCR indicaram que o agente infeccioso mais prevalente foi E. canis, presente em 12% (6/50) dos animais infectados, seguido por A. platys e B. canis, presente em 8% (4/50) e 2% (1/50) animais infectados, respectivamente. Em relação à análise hematológica, as alterações mais relevantes foram anemia, linfopenia, trom-bocitopenia, leucocitose e leucopenia. A disponibilidade de técnicas moleculares permite o manejo do tratamento mais ade-quado aos animais infectados de forma rápida e específica.

Serum protein profile as a biomarker in diagnosing leishmaniosis and monocytic ehrlichiosis in dogs / Perfil sérico de proteínas como biomarcador nos diagnósticos da leishmaniose e da erliquiose monocítica em cães

Diagnosing Canine Visceral Leishmaniosis is challenging for veterinarians given that its hematological and biochemical abnormalities greatly resemble those of other illnesses of dogs, such as canine ehrlichiosis, which is caused by Ehrlichia canis and is highly prevalent with high pathogenicity. The aim of this study was to determine occurrences of serological positivity for the antigens of Ehrlichia canis and Leishmania infantum and its relationship to globulin concentrations in samples from dogs. Out of 93 samples tested, 12.9% were negative for the antigens of both L. infantum and E. canis; 33.3% were seropositive for both antigens. Discordant results were found from 18.3% that were positive only for L. infantum, while 35.5% were positive only for E. canis. Hyperglobulinemia was observed in 88.2% and the statistical analysis showed that there was a significant relationship between the high levels of globulins and seropositivity for the antigen of E. canis. However, the relationship between positivity for the antigen of L. infantum and hyperglobulinemia, showed that there was no statistically significant relationship between the two laboratory findings. From these results, it can be concluded that concomitant infections occur frequently and that hyperglobulinemia is more closely related to ehrlichiosis than to leishmaniosis, in dogs.

O diagnóstico da leishmaniose canina é um desafio ao Médico Veterinário visto que anormalidades hematológicas e bioquímicas muito se assemelham à outras enfermidades dos cães, como a erliquiose canina, causada pela Ehrlichia canis, muito prevalente e de alta patogenicidade. O objetivo deste estudo foi determinar a positividade sorológica frente aos antígenos de Ehrlichia canis e Leishmania infantum e a sua relação com as concentrações de globulinas em amostras de cães. Das 93 amostras testadas, 12,9% foram negativas frente aos antígenos de E. canis e L. infantum e 33% foram soropositivas. Resultados discordantes foram encontradas em 18,3% positivas apenas para L. infantum, enquanto que 35,5% reagiram apenas frente a E. canis. Hiperglobulinemia foi observada em 88,2% das amostras e a análise estatística mostrou haver relação significante entre a soropositividade frente aos antígenos de E. canis e a hiperglobulinemia, e em contrapartida, a relação entre esse aumento de globulinas e a positividade para L. infantum foi insignificante. Pelos resultados apresentados, pode-se concluir que as infecções concomitantes são frequentes e que a hiperglobulinemia está mais intimamente relacionada a erliquiose quando comparada à leishmaniose em cães.

Relationship between ocular abnormalities and hematologic alterations in patients infected naturally by Ehrlichia canis / Alterações hematológicas e sua relação com anormalidades oculares em pacientes infectados naturalmente com Ehrlichia canis

To determine the association between ocular abnormalities and hematologic findings in Ehrlichia canis-infected dogs, 120 dogs suspected of canine ehrlichiosis were studied. All patients were subjected to rapid serologic diagnostic test for Ehrlichia canis, and the diagnosis was confirmed by quantitative PCR. PCR-positive patients underwent ophthalmologic examination and a hemogram and were grouped into patients with thrombocytopenia and anemia (G1), patients with thrombocytopenia (G2), and patients without hematologic disorders (G3). For ophthalmic evaluation, the patients were grouped into those having mild, severe, both mild and severe, and no ocular alterations. All patients presented with uveitis (100%). Severe ocular disorders predominated in G1 and G2 patients. Dogs with anemia and leukopenia showed severe ocular disorders. In dogs with a greater number of leukocytes and copies/µl of the TRAG gene, the intraocular pressure (IOP) tends to decrease and vice versa (r = −0.23, r = −0.26). In conclusion, uveitis is the earliest ocular alteration of canine ehrlichiosis. The severity of ocular abnormalities in patients with ehrlichiosis is associated with thrombocytopenia and may be aggravated by anemia and leukopenia. The hemogram and IOP are useful tools for predicting eye involvement in Ehrlichia canis-infected patients. In regions where Ehrlichia canis is endemic, the use of the tonometer should be routinely in dog general consultation.(AU)

Para determinar a associação entre anormalidades oculares e achados hematológicos em cães infectados com Ehrlichia canis, foram estudados 120 cães com suspeita de erliquiose canina. Todos os pacientes foram submetidos a um teste diagnóstico sorológico rápido para Ehrlichia canis, e o diagnóstico foi confirmado por PCR quantitativa. Os pacientes com PCR positivo foram submetidos a exame oftalmológico e hemograma completo e foram agrupados em pacientes com trombocitopenia e anemia (G1), pacientes com trombocitopenia (G2) e pacientes sem distúrbios hematológicos (G3). Para avaliação oftalmológica, os pacientes foram agrupados em pacientes com alterações leves ou graves, leves e graves e sem anormalidades oculares. Todos os pacientes apresentaram uveíte (100%). Os distúrbios oculares graves predominaram nos pacientes do G1 e G2. Cães com anemia e leucopenia apresentaram distúrbios oculares graves. Em cães com maior número de leucócitos e cópias/µl do gene TRAG, a pressão intra-ocular tendeu a diminuir e vice-versa (r = -0.23, r = -0.26). Em conclusão, a uveíte é o primeiro distúrbio ocular da erliquiose canina. A gravidade das anormalidades oculares em pacientes com erliquiose está associada à trombocitopenia e pode ser agravada por anemia e leucopenia. Hemograma e PIO são ferramentas úteis para prever o envolvimento ocular em pacientes infectados com Ehrlichia canis. Nas regiões em que o Ehrlichia canis é endêmico, o uso do tonômetro deve ser rotineiro nas consultas gerais de cães.(AU)

Occurrence of tick-borne diseases in domestic dogs in Belém, Pará, Brazil / Ocorrência de doenças transmitidas por carrapatos em cães domésticos em Belém do Pará, Brasil

Tick-borne blood cell pathogens, which are challenging to diagnose, are primarily detected using molecular techniques. Therefore, this study aimed to detect the main infectious agents involved in 50 cases of suspected hemoparasitosis in dogs treated at the Veterinary Hospital Mário Dias Teixeira of the Federal Rural University of the Amazon. Hematological parameters were evaluated, and blood samples were subjected to polymerase chain reaction (PCR) assays for DNA amplification of the following species: Ehrlichia canis, Anaplasma platys, and Babesia canis. The PCR test results indicated that the most prevalent infectious agent was E. canis, present in 12% (6/50) infected animals, followed by A. platys and B. canis, present in 8% (4/50) and 2% (1/50) infected animals, respectively. Regarding hematological analysis, the most relevant changes were anemia, lymphopenia, thrombocytopenia, leukocytosis, and leukopenia. The availability of molecular techniques allows the management of the most appropriate treatment to infected animals in a rapid and specific way.(AU)

Patógenos de células sanguíneas transmitidos por carrapatos, cujo diagnóstico é desafiador, são detectados princi-palmente por meio de técnicas moleculares. Dessa forma, este estudo teve como objetivo detectar os principais agentes infec-ciosos envolvidos em 50 casos de suspeita de hemoparasitose em cães atendidos no Hospital Veterinário Mário Dias Teixeira da Universidade Federal Rural da Amazônia. Parâmetros hematológicos foram avaliados e amostras de sangue foram subme-tidas a ensaios de reação em cadeia da polimerase (PCR) para amplificação de DNA das seguintes espécies: Ehrlichia canis, Anaplasma platys e Babesia canis. Os resultados do teste de PCR indicaram que o agente infeccioso mais prevalente foi E. canis, presente em 12% (6/50) dos animais infectados, seguido por A. platys e B. canis, presente em 8% (4/50) e 2% (1/50) animais infectados, respectivamente. Em relação à análise hematológica, as alterações mais relevantes foram anemia, linfopenia, trom-bocitopenia, leucocitose e leucopenia. A disponibilidade de técnicas moleculares permite o manejo do tratamento mais ade-quado aos animais infectados de forma rápida e específica.(AU)

Serum protein profile as a biomarker in diagnosing leishmaniosis and monocytic ehrlichiosis in dogs / Perfil sérico de proteínas como biomarcador nos diagnósticos da leishmaniose e da erliquiose monocítica em cães

Diagnosing Canine Visceral Leishmaniosis is challenging for veterinarians given that its hematological and biochemical abnormalities greatly resemble those of other illnesses of dogs, such as canine ehrlichiosis, which is caused by Ehrlichia canis and is highly prevalent with high pathogenicity. The aim of this study was to determine occurrences of serological positivity for the antigens of Ehrlichia canis and Leishmania infantum and its relationship to globulin concentrations in samples from dogs. Out of 93 samples tested, 12.9% were negative for the antigens of both L. infantum and E. canis; 33.3% were seropositive for both antigens. Discordant results were found from 18.3% that were positive only for L. infantum, while 35.5% were positive only for E. canis. Hyperglobulinemia was observed in 88.2% and the statistical analysis showed that there was a significant relationship between the high levels of globulins and seropositivity for the antigen of E. canis. However, the relationship between positivity for the antigen of L. infantum and hyperglobulinemia, showed that there was no statistically significant relationship between the two laboratory findings. From these results, it can be concluded that concomitant infections occur frequently and that hyperglobulinemia is more closely related to ehrlichiosis than to leishmaniosis, in dogs.(AU)

O diagnóstico da leishmaniose canina é um desafio ao Médico Veterinário visto que anormalidades hematológicas e bioquímicas muito se assemelham à outras enfermidades dos cães, como a erliquiose canina, causada pela Ehrlichia canis, muito prevalente e de alta patogenicidade. O objetivo deste estudo foi determinar a positividade sorológica frente aos antígenos de Ehrlichia canis e Leishmania infantum e a sua relação com as concentrações de globulinas em amostras de cães. Das 93 amostras testadas, 12,9% foram negativas frente aos antígenos de E. canis e L. infantum e 33% foram soropositivas. Resultados discordantes foram encontradas em 18,3% positivas apenas para L. infantum, enquanto que 35,5% reagiram apenas frente a E. canis. Hiperglobulinemia foi observada em 88,2% das amostras e a análise estatística mostrou haver relação significante entre a soropositividade frente aos antígenos de E. canis e a hiperglobulinemia, e em contrapartida, a relação entre esse aumento de globulinas e a positividade para L. infantum foi insignificante. Pelos resultados apresentados, pode-se concluir que as infecções concomitantes são frequentes e que a hiperglobulinemia está mais intimamente relacionada a erliquiose quando comparada à leishmaniose em cães.(AU)

Anti-Ehrlichia properties of the dichloromethane fraction of Ageratum conyzoides associated with doxycycline: In vitro study / Propriedades anti-Ehrlichia da fração diclorometânica de Ageratum conyzoides associada com doxiciclina: estudo in vitro

The increasing number of cases of canine ehrlichiosis caused by Ehrlichia canis in hospitals and veterinary clinics has demonstrated the need for a new drug protocol for this disease. Doxycycline is used to treat ehrlichiosis, but the resistance of the microorganism to this treatment protocol, as well as the various side effects to the animals, has become a concern. Several studies have shown a positive interaction with extracts of plants and drugs, which allow for the reduction of the concentration necessary to produce the desired effect, minimizing adverse effects. This study determined the efficiency of the combination of the dichloromethane (DCM) fraction of Ageratum conyzoides L. with anti-Ehrlichia activity and doxycycline by using the checkerboard assay. Plant material was collected in São Luís, northeastern Brazil, followed by extraction in MeOH: H2O (8:2) and partitioning of the DCM fraction. After determining the Minimum Inhibitory Concentration (MIC) of the fraction under study against DH82 cells infected with Ehrlichia canis, it was combined with doxycycline to derive the Fractional Inhibitory Concentration Index (CIF Index). A reduction of 5.83 times the doxycycline minimum inhibitory concentration was observed, showing that this fraction of A. conyzoides composed predominantly by the class of lignans, identified by mass spectrometry notably intensified the activity of doxycycline against E. canis, resulting in a synergistic effect.

O crescente número de casos de erliquiose canina por Ehrlichia canis em hospitais e clínicas veterinárias tem demonstrado a necessidade de um novo protocolo de medicamentos para essa doença. A doxiciclina é usada para tratar a erliquiose, mas a resistência do microrganismo a esse protocolo de tratamento, bem como os diversos efeitos colaterais para os animais, tornou-se uma preocupação. Vários estudos têm demonstrado interação positiva com extratos de plantas e fármacos, que permitem a redução da concentração necessária para produzir o efeito desejado, minimizando os efeitos adversos. Este estudo determinou a eficiência da combinação da fração diclorometânica (DCM) de Ageratum conyzoides L. com atividade anti-Ehrlichia canis associada com doxiciclina por meio do ensaio de Checkerboard. O material vegetal foi coletado em São Luís, Maranhão, nordeste do Brasil, seguido pela extração em MeOH:H2O (8:2) e partição da fração diclorometânica. Após a determinação da Concentração Inibitória Mínima (CIM) da fração em estudo frente às células DH82 infectadas com Ehrlichia canis, a mesma foi combinada com a doxiciclina para derivação do Índice de Concentração Inibitória da Fração (Índice CIF). Observou-se uma redução de 5,83 vezes a concentração inibitória mínima da doxiciclina mostrando que esta fração de A. conyzoides, composta predominantemente por lignanas identificadas por espectrometria de massas, notavelmente intensificou a atividade desse fármaco contra E. canis, resultando em um efeito sinérgico.

Anti-Ehrlichia properties of the dichloromethane fraction of Ageratum conyzoides associated with doxycycline: In vitro study / Propriedades anti-Ehrlichia da fração diclorometânica de Ageratum conyzoides associada com doxiciclina: estudo in vitro

ABSTRACT: The increasing number of cases of canine ehrlichiosis caused by Ehrlichia canis in hospitals and veterinary clinics has demonstrated the need for a new drug protocol for this disease. Doxycycline is used to treat ehrlichiosis, but the resistance of the microorganism to this treatment protocol, as well as the various side effects to the animals, has become a concern. Several studies have shown a positive interaction with extracts of plants and drugs, which allow for the reduction of the concentration necessary to produce the desired effect, minimizing adverse effects. This study determined the efficiency of the combination of the dichloromethane (DCM) fraction of Ageratum conyzoides L. with anti-Ehrlichia activity and doxycycline by using the checkerboard assay. Plant material was collected in São Luís, northeastern Brazil, followed by extraction in MeOH: H2O (8:2) and partitioning of the DCM fraction. After determining the Minimum Inhibitory Concentration (MIC) of the fraction under study against DH82 cells infected with Ehrlichia canis, it was combined with doxycycline to derive the Fractional Inhibitory Concentration Index (CIF Index). A reduction of 5.83 times the doxycycline minimum inhibitory concentration was observed, showing that this fraction of A. conyzoides composed predominantly by the class of lignans, identified by mass spectrometry notably intensified the activity of doxycycline against E. canis, resulting in a synergistic effect.

RESUMO: O crescente número de casos de erliquiose canina por Ehrlichia canis em hospitais e clínicas veterinárias tem demonstrado a necessidade de um novo protocolo de medicamentos para essa doença. A doxiciclina é usada para tratar a erliquiose, mas a resistência do microrganismo a esse protocolo de tratamento, bem como os diversos efeitos colaterais para os animais, tornou-se uma preocupação. Vários estudos têm demonstrado interação positiva com extratos de plantas e fármacos, que permitem a redução da concentração necessária para produzir o efeito desejado, minimizando os efeitos adversos. Este estudo determinou a eficiência da combinação da fração diclorometânica (DCM) de Ageratum conyzoides L. com atividade anti-Ehrlichia canis associada com doxiciclina por meio do ensaio de Checkerboard. O material vegetal foi coletado em São Luís, Maranhão, nordeste do Brasil, seguido pela extração em MeOH:H2O (8:2) e partição da fração diclorometânica. Após a determinação da Concentração Inibitória Mínima (CIM) da fração em estudo frente às células DH82 infectadas com Ehrlichia canis, a mesma foi combinada com a doxiciclina para derivação do Índice de Concentração Inibitória da Fração (Índice CIF). Observou-se uma redução de 5,83 vezes a concentração inibitória mínima da doxiciclina mostrando que esta fração de A. conyzoides, composta predominantemente por lignanas identificadas por espectrometria de massas, notavelmente intensificou a atividade desse fármaco contra E. canis, resultando em um efeito sinérgico.

Anti-Ehrlichia properties of the dichloromethane fraction of Ageratum conyzoides associated with doxycycline: In vitro study / Propriedades anti-Ehrlichia da fração diclorometânica de Ageratum conyzoides associada com doxiciclina: estudo in vitro

The increasing number of cases of canine ehrlichiosis caused by Ehrlichia canis in hospitals and veterinary clinics has demonstrated the need for a new drug protocol for this disease. Doxycycline is used to treat ehrlichiosis, but the resistance of the microorganism to this treatment protocol, as well as the various side effects to the animals, has become a concern. Several studies have shown a positive interaction with extracts of plants and drugs, which allow for the reduction of the concentration necessary to produce the desired effect, minimizing adverse effects. This study determined the efficiency of the combination of the dichloromethane (DCM) fraction of Ageratum conyzoides L. with anti-Ehrlichia activity and doxycycline by using the checkerboard assay. Plant material was collected in São Luís, northeastern Brazil, followed by extraction in MeOH: H2O (8:2) and partitioning of the DCM fraction. After determining the Minimum Inhibitory Concentration (MIC) of the fraction under study against DH82 cells infected with Ehrlichia canis, it was combined with doxycycline to derive the Fractional Inhibitory Concentration Index (CIF Index). A reduction of 5.83 times the doxycycline minimum inhibitory concentration was observed, showing that this fraction of A. conyzoides composed predominantly by the class of lignans, identified by mass spectrometry notably intensified the activity of doxycycline against E. canis, resulting in a synergistic effect.(AU)

O crescente número de casos de erliquiose canina por Ehrlichia canis em hospitais e clínicas veterinárias tem demonstrado a necessidade de um novo protocolo de medicamentos para essa doença. A doxiciclina é usada para tratar a erliquiose, mas a resistência do microrganismo a esse protocolo de tratamento, bem como os diversos efeitos colaterais para os animais, tornou-se uma preocupação. Vários estudos têm demonstrado interação positiva com extratos de plantas e fármacos, que permitem a redução da concentração necessária para produzir o efeito desejado, minimizando os efeitos adversos. Este estudo determinou a eficiência da combinação da fração diclorometânica (DCM) de Ageratum conyzoides L. com atividade anti-Ehrlichia canis associada com doxiciclina por meio do ensaio de Checkerboard. O material vegetal foi coletado em São Luís, Maranhão, nordeste do Brasil, seguido pela extração em MeOH:H2O (8:2) e partição da fração diclorometânica. Após a determinação da Concentração Inibitória Mínima (CIM) da fração em estudo frente às células DH82 infectadas com Ehrlichia canis, a mesma foi combinada com a doxiciclina para derivação do Índice de Concentração Inibitória da Fração (Índice CIF). Observou-se uma redução de 5,83 vezes a concentração inibitória mínima da doxiciclina mostrando que esta fração de A. conyzoides, composta predominantemente por lignanas identificadas por espectrometria de massas, notavelmente intensificou a atividade desse fármaco contra E. canis, resultando em um efeito sinérgico.(AU)

Molecular diagnosis and risk factors of canine ehrlichiosis in the municipality of Itabuna-Bahia, Brazil / Diagnóstico molecular e fatores de risco da erliquiose canina no município de Itabuna-Bahia

Ehrlichiosis is an emerging zoonosis worldwide and has had several adverse effects on public health. Canine monocytic ehrlichiosis (CME), caused by Ehrlichia canis, has the tick Rhipicephalus sanguineus as the vector. The main clinical signs in affected dogs are fever, apathy, anorexia, weight loss, and neurological signs. The diagnosis is made through the association of clinical signs with parasitological, serological, and molecular tests. The aim of this study was to evaluate the occurrence of E. canis infection in dogs from the city of Itabuna-Bahia, as well as to identify the risk factors related to infection. For this, 405 dogs from the Center for Zoonoses Control (CCZ), non-governmental organizations (NGOs), and dogs domiciled and semi-domiciled in the city of Itabuna, southern Bahia, were evaluated. After initial physical evaluation of the dogs, blood samples were collected by venipuncture for subsequent DNA extraction and E. canis testing using the nested Polymerase Chain Reaction (nested-PCR) technique. In addition, an epidemiological questionnaire that included questions related to the animals was administered to the dog owners to identify the risk factors for exposure to the etiological agent and to the vector. Approximately 17% of the dogs in the municipality of Itabuna-Bahia tested positive for E. canis by nested-PCR, a result higher than that found in other studies conducted in the same municipality. Among the factors associated with E. canis infection, contact with other dogs (p = 0.0226) was an important factor for the dissemination of CME, since dogs are reported to be reservoirs of E. canis. Male dogs (p = 0.0016) presented lower risk for E. canis infection. Other studies, however, describe no association between animal gender and infection by E. canis. Preventive measures to reduce exposure to the vector of ehrlichiosis are necessary.

A erliquiose é uma zoonose emergente em todo o mundo e tem acarretado diversos transtornos para a saúde pública. A erliquiose monocítica canina (EMC), causada pela Ehrlichia canis, tem como vetor o carrapato Rhipicephalus sanguineus. Os principais sinais clínicos nos cães afetados são febre, apatia, anorexia, perda de peso e sinais neurológicos. O diagnóstico é feito através da associação dos sinais clínicos, exames parasitológicos, sorológicos e moleculares. Objetivou-se através deste estudo avaliar a ocorrência de infecção por E. canis em cães do município de Itabuna-Bahia, bem como identificar os fatores de risco relacionados à infecção. Para tanto, foram avaliados 405 cães provenientes do Centro de Controle de Zoonoses (CCZ), Organizações não governamentais (ONGs), cães domiciliados e semi-domiciliados da cidade de Itabuna-Bahia. Após avaliação física inicial dos cães, procedeu-se em seguida a coleta de amostras de sangue por punção venosa, para posterior extração de DNA e pesquisa de E. canis pela técnica de nested-Reação em Cadeia de Polimerase (nested-PCR). Adicionalmente, um questionário epidemiológico foi aplicado junto aos responsáveis, no qual constavam questões relacionadas aos animais, com a finalidade de identificar os fatores de risco de exposição destes ao agente etiológico e ao vetor. Em suma, este estudo mostrou que aproximadamente 17% dos cães do município de Itabuna-Bahia foram positivos para E. canis pela nested-PCR, resultado superior ao encontrado em outros estudos realizados no mesmo município. Dos fatores associados à infecção por E. canis, foi significativo o contato com outros cães (p=0,0226), um fator importante para a disseminação da EMC, pois os cães são relatados como reservatórios da E. canis. O gênero macho (p=0,0016) apresentou menor risco para a infecção por E. canis. Outros estudos, no entanto, descrevem que não há nenhuma associação entre o gênero do animal e a infecção por...

Expression and antigenic analysis of the recombinant TRP36 protein from Ehrlichia canis São Paulo strain for serologic tests / Expressão e análise antigênica da proteína RTP36 recombinante da amostra São Paulo de Ehrlichia canis para testes sorológicos

Ehrlichia canis is the main etiological agent of canine monocytic ehrlichiosis (CME), a globally canine infectious disease. In Brazil, CME is considered to be endemic, and its prevalence can reach 65% in some states. The diagnosis of ehrlichiosis is important for treatment and epidemiological purposes. The E. canis TRP36 (Tandem Repeat Protein) protein elicits the earliest acute-phase antibody response observed during the course of the disease. This study aimed to generate the recombinant TRP36 protein from E. canis São Paulo strain and to evaluate its potential as a tool for the serologic diagnosis of CME. The E. canis São Paulo isolate was cultivated in DH82 lineage cells, and its genomic DNA was obtained. The bacterial DNA fragment encoding the entire ORF of TRP36 was cloned into the pBAD/Thio-TOPO vector and transformed into Escherichia coli DH10B competent cells with the trp36-bearing plasmid for protein expression. To evaluate the protein antigenicity, 16 canine serum samples were previously tested (by PCR and the commercial SNAP®4Dx® serological test). The results were in accordance with the SNAP®4Dx® test. Experiments using this recombinant protein as an antigen, targeting the development of a serologic test based on ELISA methodology, are the next step to produce a reliable, affordable and useful diagnostic tool for CME in Brazil.(AU)

Ehrlichia canis é o principal agente etiológico da erliquiose monocítica canina (EMC), uma doença infecciosa canina globalmente dispersa. No Brasil, a EMC é considerada endêmica, e a infecção pode atingir 65% em cães em alguns estados. O diagnóstico de erliquiose é importante para fins de tratamento e epidemiológicos. A proteína TRP36 de E. canis leva a uma resposta humoral com produção de anticorpos em fase aguda, encontrada durante o curso da doença. O objetivo deste estudo foi obter a proteína TRP36 recombinante da amostra São Paulo de E. canis e avaliar seu potencial como ferramenta para o diagnóstico sorológico da CME. O isolado de E. canis São Paulo foi cultivado em células da linhagem DH82 e o DNA genômico foi obtido. O fragmento de DNA bacteriano que codifica toda a ORF de TRP36 foi clonado no vetor pBAD / Thio-TOPO e transformado em células competentes Escherichia coli DH10B, com o plasmídeo portador de trp36 para expressão de proteínas. Para avaliar a antigenicidade da proteína, 16 amostras de soro canino foram previamente analisadas (por PCR e teste sorológico comercial SNAP®4Dx®). Os resultados estavam de acordo com o teste SNAP®4Dx®. Os experimentos que utilizam essa proteína recombinante como antígeno, visando ao desenvolvimento de um teste sorológico baseado no ELISA, são o próximo passo para produzir um teste de diagnóstico confiável, acessível e útil para o diagnóstico da EMC no Brasil.(AU)