Outbreak of abomasal bloat in goat kids due to Clostridium ventriculi and Clostridium perfringens type A

We described an outbreak of abomasal bloat in goat kids. Increased mortality with a history of abdominal bloating, dullness, and death was reported. Postmortem exanimation revealed dehydration, pale mucosa, ascites, abomasal tympanism and intestinal meteorism and congestion, and emphysematous abomasitis. Cytological evaluation from abomasum revealed gram-positive bacteria with a cuboid shape suggestive of Clostridium ventriculi, gram-positive bacilli suggestive of Clostridium perfringens, and ovoid basophilic yeasts. C. ventriculi and C. perfringens type A were confirmed by anaerobic culture and molecular tests. Histopathological findings revealed emphysematous abomasitis, necrosis of the gastric and intestinal walls, gastroenteritis, and intestinal thromboembolism. The possible associated factor was erroneous use of the milk replacer associated with inadequate kid management. Finally, the prophylactic measures suggested such as hygiene care, proper use of milk replacer, clostridial vaccination plan, and a good colostrum management were able to control the outbreak.(AU)

Mapping of the continuous epitopes displayed on the Clostridium perfringens type D epsilon-toxin

The epsilon toxin, produced by Clostridium perfringens, is responsible for enterotoxemia in ruminants and is a potential bioterrorism agent. In the present study, 15 regions of the toxin were recognized by antibodies present in the serum, with different immunodominance scales, and may be antigen determinants that can be used to formulate subunit vaccines.(AU)

Clostridial diseases diagnosed in herbivores in Southern Brazil

Background: The genus Clostridium includes a group of Gram-positive, anaerobic bacteria which producing endosporesand produce toxins when encounter conditions favorable to their development. These toxins can be produced and absorbedin the intestinal lumen, as occurs in cases of enterotoxemia (Clostridium perfringens), or are produced in areas of tissuenecrosis after bacterial infections, as seen in tetanus (C. tetani), blackleg (C. chauvoei) and bacillary hemoglobinuria(C. haemolyticum), or in infections by C. chauvoei, C. novyi and C. septicum frequently associated with cases of malignant edema. The aim of this research was relates the epidemiological and clinicopathological aspects of the clostridiosisobserved in the region of infl uence of the Setor de Patologia Veterinária of Universidade Federal do Rio Grande do Sul.Materials, Methods & Results: The necropsy records were reviewed from January 1996 to December 2011 to identifythe cases of clostridiosis that were diagnosed. In the period, 4.689 necropsies were performed by the (SPV-UFRGS). Atotal of 135 cases (2.88%) were associated with clostridiosis. The most prevalent clostridiosis included tetanus (48.15%)in horses, cattle, sheep and goats; botulism (17.04%) in cattle and enterotoxemia (22.96%) in goats. Additional diseaseswere blackleg (5.93%) in cattle, necrotic myositis/malignant edema in horses and sheep and bacillary hemoglobinuria incattle, both with 4 cases each (2.96%).Discussion: Tetanus, enterotoxemia, and botulism were the most prevalent clostrodiosis diagnosed at SPV-UFRGS andtogether accounted for approximately 90% of cases in the period 1996-2011. As for blackleg, bacillary hemoglobinuria,and necrotic myositis/malignant edema, together they represented slightly less than 10% of the clostridioses in the period.The most signifi cant clostridiosis in the period studied was tetanus, affecting cattle, sheep, and horses. There was a largenumber...(AU)

Clostridial diseases diagnosed in herbivores in Southern Brazil

Background: The genus Clostridium includes a group of Gram-positive, anaerobic bacteria which producing endosporesand produce toxins when encounter conditions favorable to their development. These toxins can be produced and absorbedin the intestinal lumen, as occurs in cases of enterotoxemia (Clostridium perfringens), or are produced in areas of tissuenecrosis after bacterial infections, as seen in tetanus (C. tetani), blackleg (C. chauvoei) and bacillary hemoglobinuria(C. haemolyticum), or in infections by C. chauvoei, C. novyi and C. septicum frequently associated with cases of malignant edema. The aim of this research was relates the epidemiological and clinicopathological aspects of the clostridiosisobserved in the region of infl uence of the Setor de Patologia Veterinária of Universidade Federal do Rio Grande do Sul.Materials, Methods & Results: The necropsy records were reviewed from January 1996 to December 2011 to identifythe cases of clostridiosis that were diagnosed. In the period, 4.689 necropsies were performed by the (SPV-UFRGS). Atotal of 135 cases (2.88%) were associated with clostridiosis. The most prevalent clostridiosis included tetanus (48.15%)in horses, cattle, sheep and goats; botulism (17.04%) in cattle and enterotoxemia (22.96%) in goats. Additional diseaseswere blackleg (5.93%) in cattle, necrotic myositis/malignant edema in horses and sheep and bacillary hemoglobinuria incattle, both with 4 cases each (2.96%).Discussion: Tetanus, enterotoxemia, and botulism were the most prevalent clostrodiosis diagnosed at SPV-UFRGS andtogether accounted for approximately 90% of cases in the period 1996-2011. As for blackleg, bacillary hemoglobinuria,and necrotic myositis/malignant edema, together they represented slightly less than 10% of the clostridioses in the period.The most signifi cant clostridiosis in the period studied was tetanus, affecting cattle, sheep, and horses. There was a largenumber...

Clostridioses dos animais de produção

As bactérias do gênero Clostridium são bastonetes, gram-positivos e anaeróbios. Devido à alta capacidade de esporulação da maioria das bactérias patogênicas desse grupo, as infecções e intoxicações por bactérias do gênero Clostridium, conhecidas por clostridioses, são de erradicação impossível e estão entre as principais enfermidades dos animais domésticos em todo mundo, principalmente de ruminantes. Esta revisão tem como objetivo abordar as principais clostridioses que acometem os animais domésticos no Brasil, abordando os principais aspectos e ocorrência do botulismo, tétano, mionecroses (gangrena gasosa e carbúnculo sintomático), doenças causadas por C. perfringens e diarreias e colites causadas por C. difficile.

Clostridioses dos animais de produção

As bactérias do gênero Clostridium são bastonetes, gram-positivos e anaeróbios. Devido à alta capacidade de esporulação da maioria das bactérias patogênicas desse grupo, as infecções e intoxicações por bactérias do gênero Clostridium, conhecidas por clostridioses, são de erradicação impossível e estão entre as principais enfermidades dos animais domésticos em todo mundo, principalmente de ruminantes. Esta revisão tem como objetivo abordar as principais clostridioses que acometem os animais domésticos no Brasil, abordando os principais aspectos e ocorrência do botulismo, tétano, mionecroses (gangrena gasosa e carbúnculo sintomático), doenças causadas por C. perfringens e diarreias e colites causadas por C. difficile.

Produção de toxoíde Epsilon e avaliação de formulações vacinais em bovinos e caprinos.

As doenças causadas pelas bactérias pertencentes ao gênero Clostridium estão entre as mais importantes enfermidades que causam efeitos deletérios e prejuízos aos produtores de rebanho de ovinos, caprinos e bovinos. Entre estas se destaca a enterotoxemia, causada pela toxina épsilon de Clostridium perfringens tipo D. Devido ao rápido curso dessa doença é preconizado a vacinação com a toxina épsilon inativada como o método mais indicado para a sua prevenção. Entretanto é reconhecida a baixa capacidade de manutenção dos anticorpos neutralizantes persistentes a partir das vacinas comerciais para a espécie caprina e pouca evidência do comportamento da duração da imunidade em bovinos. Com isso, o presente trabalho objetivou: (a) produzir, concentrar e purificar a toxina épsilon (ETX) de C. perfringens tipo D para a produção do seu respectivo toxoide na forma ultrafiltrada (EToX-U) e ultrafiltrada, dialisada e purificada em cromatografia de troca iônica (EToX-UC); (b) produzir vacinas utilizando os referidos toxoides em formulações do tipo microemulsão (ME), adsorvidos em micropartícula de quitosana (MQ), em nanopartículas de sílica mesosporosa (NSM), em nanopartículas de hidroxiapatita (HANP) e em hidróxido de alumínio (HA); (c)triagem das melhores formulações em imunizações de coelhos observando-se o título de anticorpos neutralizantes obtido pós vacinação segundo diretrizes da normativa oficial do MAPA com leitura da soroneutralização in vitro realizada em monocamada de células Madin Darby Canine Cells (MDCK); (d) avaliar as opções vacinais selecionadas em coelhos nas espécies alvos caprinos e bovinos por meio do acompanhamento da cinética da resposta humoral antitoxina épsilon nestas espécies pelo período de um ano. Além disso, avaliar o comportamento da curva de anticorpos em caprinos após a aplicação de uma terceira dose vacinal na semana 52 pós primovacinação. A produção da toxina épsilon de C. perfringens tipo D permitiu obter antígeno ETX-U e ETX-UC em qualidade e quantidade suficiente para as formulações pretendidas, bem como seus respectivos toxoides oriundos da inativação pelo formaldeído (EToX-U e EToX-UC). As vacinas formuladas à base de HA, MQ, NSM e HANP administradas em duas doses (t=0 e 21 dias) obtiveram títulos sorológicos médios superiores ou igual ao índice mínimo de aprovação de 2UI/mL na triagem inicial em coelhos, tornando-se opções viáveis de proteção imunológica frente à enterotoxemia causada pela toxina épsilon de C. perfringens tipo D. Por outro lado as vacinas à base de MQ, NSM e HANP administradas em dose única (t=0) não obtiveram títulos médios iguais ou acima do índice de aprovação, sugerindo que nas condições formuladas tais vacinas não seriam recomendados em esquema vacinal single shot. De forma similar, as vacinas em ME formuladas neste trabalho não lograram êxito na geração de título detectável nos coelhos, administrando-se tanto duas doses quanto dose única. Frente aos resultados obtidos em coelhos, as vacinas selecionadas para teste em espécie alvo foram: EToX-UC e EToX-U adsorvidos em hidróxido de alumínio e EToX-U adsorvido em micropartícula de quitosana cujos títulos médios de antitoxina épsilon em coelhos foram 10,24 UI/mL, 7,45 UI/mL e 6,03 UI/mL respectivamente. Quando avaliados nas espécies alvo, observou-se que os mais elevados títulos tanto no grupo de caprinos quanto bovinos foram aos 60 dias pós primovacinação, correspondendo a 10,5 UI/mL, 11,5 UI/mL e 6,9 UI/mL para as vacinas EToX-U HA, EToX-UC HA e EToX-UC MQ respectivamente em bovinos e 1,1 UI/mL, 3,9 UI/mL e 2,1 UI/mL para as vacinas EToX-U HA, EToX-UC HA e EToX-UC MQ respectivamente em caprinos. O estudo da concordância entre os títulos obtidos nos grupos animais neste experimento corrobora fortemente o fato do coelho representar um excelente modelo animal para a resposta em bovinos nas formulações à base de hidróxido de alumínio, 22 corroborando a indicação deste nos testes oficiais, porém com fraca concordância com caprinos para formulações com épsilon não purificado. O estudo de duração de imunidade com as formulações avaliadas em caprinos corroborou a necessidade de revacinação de três a quatro meses referendada por outros autores. Em relação aos bovinos, apesar de não existirem trabalhos na literatura que estabeleçam a duração de imunidade para a espécie, o resultado do título de antitoxina épsilon, apesar de limítrofe, conferiu proteção pelo período de um ano em acordo com as recomendações das vacinas comerciais de revacinação anual.

The diseases caused by bacterial belonging to the genus Clostridium are among the most important diseases that cause deleterious and loss effects to sheep, goat and cattle herds producers. Among these stand out the enterotoxemias, caused by Clostridium perfringens type D toxin. Because rapid course of this disease it is recommended vaccination with inactivated epsilon toxin as the most appropriate method for its prevention. However, the low maintenance capacity of persistent neutralizing antibodies from commercial vaccines in goat and the little evidence of the duration of immunity in cattle is recognized. The aim of the present work was to: (a) produce, concentrate and purify epsilon toxin (ETX) of C. perfringens type D for the production of its toxoid in the ultrafiltered form (EToX-U) and ultrafiltered, dialyzed and purified in chromatography (EToX-UC); (b) produce vaccines using toxoids in microemulsion (ME) -type formulations, adsorbed on microparticles of chitosan (MQ), mesosporous silica nanoparticles (NSM), hydroxyapatite nanoparticles (HANP) and aluminum hydroxide ); (c) screening the best formulations in rabbits by observing the titre of neutralizing antibodies obtained after vaccination according to guidelines of the official MAPA standard with in vitro seroneutralization readings performed on a monolayer of Madin Darby Canine Cells (MDCK) cells; (d) evaluate the selected vaccine options in rabbits in the caprine and bovine target species by monitoring the kinetics of the humoral epsilon antitoxin response in these species for a period of one year. In addition, to evaluate the antibody of profile curve in goats after the inoculation of a third vaccine dose at week 52 post-vaccination. The C. perfringens type D epsilon toxin production allowed to obtain ETX-U and ETX-UC antigen in sufficient quality and quantity for the desired formulations and their respective toxoids from inactivation by formalin (EToX-U and EToX-UC). The HA, MQ, NSM and HANP formulated vaccines administered at two doses (t = 0 and 21 days) produced high titers over 2UI/mL at initial screening in rabbits, making them viable options for immunological protection against enterotoxemia caused by the epsilon toxin of C. perfringens type D. On the other hand, MQ, NSM and HANP vaccines administered in a single dose (t = 0) did not obtain high titres suggesting that under formulated conditions such vaccines would not be recommended in a single shot vaccine scheme. Similarly, the ME vaccines formulated in this work did not succeed in generating detectable titer of antibodies in rabbits both when given two doses and a single dose. Based on the results obtained in rabbits, the best vaccines were: EToX-UC and EToX-U adsorbed on aluminum hydroxide and EToX-U adsorbed on microparticles of chitosan whose mean efficacy of epsilon antitoxin in rabbits was 10.24 IU / mL, 7.45 IU / mL and 6.03 IU / mL respectively. When evaluated in the livestock animals it was observed that the highest titers in both the goat and bovine groups were 60 days post-vaccination corresponding to 10.5 IU / mL, 11.5 IU / mL and 6.9 IU / mL for the the EToX-U HA, EToX-UC HA and EToX-UC MQ vaccines respectively in cattle and, 1.1 IU / mL, 3.9 IU / mL and 2.1 IU / mL for the EToX-U HA, EToX-UC HA and EToX-UC MQ respectively in goats. The study of the concordance between the titers obtained in the animal groups in this experiment corroborates strongly with the fact that rabbits represents an excellent animal model for the response bovines immune response in the formulations based on aluminum hydroxide corroborating with the indication of this one in the official tests, but with weak agreement with goats for formulations with unpurified epsilon. The study of duration of immunity with the formulations evaluated in goats showed the need of revaccination of three to four months as recommended by other authors. Regarding cattle, although there are no studies in the 24 literature that establish the duration of immunity for the species, the result of the epsilon antitoxin titer, although borderline, conferred protection for a period of one year

Kinetics of epsilon antitoxin antibodies in different strategies for active immunization of lambs against enterotoxaemia / Cinética dos anticorpos antitoxina epsilon em diferentes estratégias de imunização ativa em cordeiros contra a enterotoxemia

Enterotoxaemia, a common disease that affects domestic small ruminants, is mainly caused by the epsilon toxin of Clostridium perfringens type D. The present study tested four distinct immunization protocols to evaluate humoral response in lambs, a progeny of non-vaccinated sheep during gestation. Twenty-four lambs were randomly allocated into four groups according to age (7, 15, 30 and 45 days), receiving the first dose of epsilon toxoid commercial vaccine against clostridiosis with booster after 30 days post vaccination. Indirect ELISA was performed after the first vaccine dose and booster to evaluate the immune response of the lambs. Results showed that for the four protocols tested all lambs presented serum title considered protective (≥0.2UI/ml epsilon antitoxin antibodies) and also showed that the anticipation of primovaccination of lambs against enterotoxaemia conferred serum title considered protective allowing the optimization of mass vaccination of lambs.(AU)

Enterotoxemia, uma das mais comuns enfermidades que acomete os pequenos ruminantes domésticos, é causada principalmente pela toxina épsilon de Clostridium perfringens tipo D. O presente estudo avaliou a resposta humoral conferida por quatro protocolos distintos de primovacinação na progênie de ovelhas não vacinadas durante a gestação. Vinte e quatro cordeiros foram aleatoriamente divididos em quatro grupos de acordo com a idade (dias) que receberam a primeira dose da vacina comercial contra clostridiose contendo toxóide epsilon na sua formulação. Todos os cordeiros foram vacinados aos 7, 15, 30 ou 45 dias de idade e receberam um reforço da dose 30 dias após a vacinação. A avaliação sorológica dos cordeiros pelo teste de ELISA indireto foi realizada por ocasião da administração da primeira dose da vacina. Os resultados elucidaram não haver comprometimento da resposta imune de cordeiros vacinados tanto aos 7, 15, 30 ou 45 dias de idade associada ao reforço da dose 30 dias após, demonstrando assim que a antecipação da primeira vacinação conferiu proteção aos cordeiros contra a enterotoxemia, permitindo otimizar o planejamento da vacinação em massa dos cordeiros.(AU)

Cinética dos anticorpos de origem colostral contra a toxina épsilon de Clostridium perfringens tipo D em cordeiros / Kinetics of colostral antibodies against epsilon toxin produced by Clostridium perfringens type D in lambs

Enterotoxemia, uma das mais importantes enfermidades que acomete os pequenos ruminantes domésticos, é causada principalmente pela toxina épsilon de Clostridium perfringens tipo D. O presente estudo avaliou a cinética de anticorpos colostrais antitoxina épsilon em cordeiros nascidos de ovelhas submetidas a dois diferentes tipos de manejo sanitário. Um grupo de ovelhas prenhes (n=6) foi vacinado com uma dose única de vacina comercial polivalente contra clostridioses contendo toxóide épsilon na sua formulação cerca de 30 dias antes da data prevista para a parição. Outro grupo de ovelhas (n=6) de mesma idade gestacional não foi vacinado. Imediatamente após o parto, antes da ingestão do colostro, foram colhidas amostras sanguíneas dos respectivos cordeiros, bem como aos 30 e 60 dias de idade e submetidas à avaliação sorológica pelo teste de ELISA indireto. Os resultados encontrados permitem concluir que a vacinação de ovelhas prenhes 30 dias antes do parto contra a enterotoxemia causada pela toxina épsilon, com dose única de produto comercial, induz imunidade passiva em níveis considerados protetores (>0,5UI/ml) aos cordeiros por, no mínimo, 60 dias de idade.(AU)

Enterotoxemia, a disease that affect small ruminants, is caused mainly by the epsilon toxin from Clostridium perfringens type D. This study evaluated the kinetics of epsilon antitoxin colostral antibodies in lambs born to ewes submitted to two different types of health management. A group of pregnant ewes (n=6) was vaccinated with a single dose of commercial vaccine against polyvalent clostridial toxoid containing epsilon in its formulation some 30 days before the expected date of birth. Another group of ewes (n=6) of the same gestational age were not vaccinated. Immediately after birth, before intake of colostrum, blood samples were collected from their lambs as well as 30 and 60 days of age for serum evaluation by ELISA. The results allow to conclude that vaccination of pregnant ewes 30 days before parturition allowed the transfer of colostral antibodies specific enough to guarantee the immunity considered protective (0,5UI/ml) of the newborn lamb against enterotoxemia until its entry into the feedlot, with 60 days of age.(AU)

Necrotizing enteritis associated with Clostridium perfringensType B in chinchillas (Chinchilla lanigera) / Enterite necrosante associado a infecção por Clostridium perfringenstipo B em chinchilas (Chinchilla lanigera)

Four 3-4 month-old chinchillas (Chinchilla lanigera) from a commercial flock of 395 chinchillas, were found dead with evidence of previous diarrhea and prolapsed rectum. A fifth 8 month-old chinchilla died 8 hours after being found recumbent, apathetic, diarrheic and with a prolapsed rectum. Two chinchillas were necropsied and observed gross lesions consisted of extensive hemorrhagic enteritis, mild pulmonary edema and enlarged and yellow liver; this latter finding was particularly prominent in the chinchilla presenting longer clinical course. Histologically there was necrotizing enteritis associated with abundant bacterial rods aggregates in the intestinal surface epithelium and within the lamina propria. In the lungs there were small amounts of pink proteinaceous material (edema) in the interstitium and marked vacuolar hepatocellullar degeneration (lipidosis) in the liver. Anaerobic cultures from the intestinal contents of one of the affected chinchillas yielded Clostridium perfringens. Genotyping of this C. perfringens isolate was achieved by multiplex polymerase chain reaction (mPCR) as C. perfringenstype B due to detection of alpha, beta and epsilon-toxin genes. These findings suggest C. perfringens type B as an important cause of sudden or acute death in chinchillas.(AU)

Quatro chinchilas (Chinchilla lanigera) com 3-4 meses de idade, pertencentes a um criadouro comercial com 395 chinchilas, foram encontradas mortas com evidências de diarreia prévia e prolapso de reto. Uma quinta chinchila, de oito meses de idade, foi encontrada em decúbito, apática, com diarreia e prolopaso de reto, e morreu após oito horas. Duas chinchilas foram submetidas à necropsia. As lesões macroscópicas consistiam de extensa enterite hemorrágica, moderado edema pulmonar e fígado pálido e aumentado de volume; este achado foi particularmente proeminente na chinchila que apresentou curso clínico mais longo. Histologicamente foi observado enterite necrosante associada a numerosos agregados bacterianos na superfície epitelial com invasão da lâmina própria. Nos pulmões foi observada pequena quantidade de material proteináceo róseo amorfo (edema) no interstício e marcada degeneração hepatocelular vacuolar (lipidose). Cultura anaeróbica do conteúdo intestinal de uma chinchila afetada revelou crescimento de Clostridium perfringens. A genotipificação de C. perfringensisolado, realizada por reação em cadeia de polymerase multiplex(mPCR), revelou C. perfringenstipo B pela detecção das tóxinas alfa, beta e épisilon. Estes achados sugerem que infecção por C. perfringenstipo B é uma importante causa de morte súbita ou aguda em chinchilas.(AU)

Focal symmetrical encephalomalacia in sheep / Encefalomalacia focal simétrica em ovino

Focal symmetrical encephalomalacia (FSE) is the most prominent lesion seen in the chronic form of enterotoxemia by Clostridium perfringens type D. This paper reports FSE in sheep in Brazil. Six deaths occurred within a seven days period in a flock of 70, four to 30-month-old Santa Inês sheep in the state of Paraíba in the Brazilian semiarid. The flock was grazing a paddock of irrigated sprouting Cynodon dactylon (Tifton grass), and supplemented, ad libitum, with a concentrate of soybean, corn and wheat. Nervous signs included blindness and recumbence. A 19 month-old sheep was examined clinically and necropsied after a clinical course of three days. Gross lesions were herniation of the cerebellar vermis and multifocal, bilateral, symmetric brownish areas in the internal capsule, thalamus and cerebellar peduncles. Histologic lesions were multifocal, bilateral malacia with some neutrophils, swelling of blood vessels endothelium, perivascular edema, and hemorrhages. The flock was vaccinated, before the outbreak, with only one dose of Clostridium perfringens type D vaccine. Two factors are suggested to be important for the occurrence of the disease: insufficient immunity due to the incorrect vaccination; and high nutritional levels by the supplementation with highly fermentable carbohydrates.(AU)

Encefalomalacia focal simétrica (EFS) é a lesão mais proeminente vista nas formas subaguda ou crônica da enterotoxemia por Clostridium perfringens tipo D. Este trabalho relata EFS em ovinos no semiárido do estado da Paraíba. Seis ovinos morreram, em um período de sete dias, dentro de um rebanho de 70 animais, da raça Santa Inês, entre 4-30 meses de idade, que pastavam em piquete de Cynodon dactylon (capim Tifton), que estava rebrotando. Os ovinos eram suplementados com um concentrado de soja, trigo e milho. Os sinais nervosos incluíam cegueira e decúbito lateral. Um ovino de 19 meses de idade foi examinado clinicamente e necropsiado, depois de um curso clínico de 3 dias. Macroscopicamente foram observadas herniação do cerebelo e áreas acastanhadas, multifocais, simétricas e bilaterais na cápsula interna, tálamo e pedúnculo cerebelar. Histologicamente observou-se malacia, bilateral e simétrica, com alguns neutrófilos, tumefação das células endoteliais dos vasos sanguíneos, edema perivascular e hemorragia. O rebanho foi vacinado, antes do surto, com umaúnica dose de vacina para Clostridium perfringens tipo D. Dois fatores são sugestivos quanto a importância da ocorrência da enfermidade: imunidade insuficiente devida à vacinação incorreta; e altos níveis nutricionais da suplementação com carboidratos altamente fermentáveis.(AU)

Padronização da titulação da toxina épsilon de Clostridium perfringens tipo D em linhagem contínua de células como alternativa ao bioensaio animal

Enterotoxemia (also called pulpy kidney disease) is an enteric disease, that affect ruminants, produced by epsilon toxin from Clostridium perfringens type D, an anaerobic commonly isolated from soil and feces of healthy animals. The diagnostic is based on detection of this exotoxin in the intestinal content by soroneutralization in mice. Therefore, this study aimed to standardize a test for detection and titration of the toxin in vitro, and compare it with the phenomenon in vivo. A volume of epsilon toxin was titrated in mice and in some cell lines. After concluding the most sensitive cell line, were held in vitro titrations of dilutions from a toxin wich one had in vivo titer known. The results were grouped and a mathematical equation was developed. MDCK cell line showed that the phenomenon observed in vitro can be expressed by a mathematical equation wich shows a correlation of 98.33% with a minimum lethal dose determined in vivo. Therefore, the soroneutralization using MDCK allows a specific, sensitive, practical, fast, and doesn't requere use of animal titration of epsilon toxin.

Enterotoxemia, também chamada de doença do rim pulposo, doença que acomete os ruminantes domésticos, é causada pela ação da toxina épsilon produzida pelo Clostridium perfringens tipo D, um anaeróbio comumente isolado do solo e das fezes de animais sadios. O método tradicional de diagnóstico baseia-se na detecção e classificação dessa exotoxina no conteúdo intestinal por meio da soroneutralização em camundongos. Com isso, o objetivo deste estudo foi padronizar um teste para detecção e titulação dessa toxina in vitro e compará-lo ao fenômeno in vivo. Para isso, uma partida de toxina épsilon de Clostridium perfringens tipo D foi titulada em camundongos e em várias linhagens contínuas de células. Após a determinação da linhagem celular mais sensível, realizaram-se ensaios de titulação in vitro de diluições de uma partida de toxina, comparando-os com os títulos in vivo conhecidos. Os resultados foram agrupados, e foi desenvolvida a equação matemática que melhor adaptou-se aos intervalos trabalhados. A linhagem MDCK, além de mais sensível, demonstrou que o fenômeno observado in vitro pode ser expresso por meio da equação matemática que apresenta uma correlação de 98,33%, com a dose mínima mortal determinada in vivo. Portanto, a linhagem MDCK permite titular a toxina épsilon de C. perfringens tipo D de forma específica e sensível, além de ser uma técnica prática, rápida e que dispensa o uso de animais.

Padronização da titulação da toxina épsilon de Clostridium perfringens tipo D em linhagem contínua de células como alternativa ao bioensaio animal

Enterotoxemia (also called pulpy kidney disease) is an enteric disease, that affect ruminants, produced by epsilon toxin from Clostridium perfringens type D, an anaerobic commonly isolated from soil and feces of healthy animals. The diagnostic is based on detection of this exotoxin in the intestinal content by soroneutralization in mice. Therefore, this study aimed to standardize a test for detection and titration of the toxin in vitro, and compare it with the phenomenon in vivo. A volume of epsilon toxin was titrated in mice and in some cell lines. After concluding the most sensitive cell line, were held in vitro titrations of dilutions from a toxin wich one had in vivo titer known. The results were grouped and a mathematical equation was developed. MDCK cell line showed that the phenomenon observed in vitro can be expressed by a mathematical equation wich shows a correlation of 98.33% with a minimum lethal dose determined in vivo. Therefore, the soroneutralization using MDCK allows a specific, sensitive, practical, fast, and doesn't requere use of animal titration of epsilon toxin.

Enterotoxemia, também chamada de doença do rim pulposo, doença que acomete os ruminantes domésticos, é causada pela ação da toxina épsilon produzida pelo Clostridium perfringens tipo D, um anaeróbio comumente isolado do solo e das fezes de animais sadios. O método tradicional de diagnóstico baseia-se na detecção e classificação dessa exotoxina no conteúdo intestinal por meio da soroneutralização em camundongos. Com isso, o objetivo deste estudo foi padronizar um teste para detecção e titulação dessa toxina in vitro e compará-lo ao fenômeno in vivo. Para isso, uma partida de toxina épsilon de Clostridium perfringens tipo D foi titulada em camundongos e em várias linhagens contínuas de células. Após a determinação da linhagem celular mais sensível, realizaram-se ensaios de titulação in vitro de diluições de uma partida de toxina, comparando-os com os títulos in vivo conhecidos. Os resultados foram agrupados, e foi desenvolvida a equação matemática que melhor adaptou-se aos intervalos trabalhados. A linhagem MDCK, além de mais sensível, demonstrou que o fenômeno observado in vitro pode ser expresso por meio da equação matemática que apresenta uma correlação de 98,33%, com a dose mínima mortal determinada in vivo. Portanto, a linhagem MDCK permite titular a toxina épsilon de C. perfringens tipo D de forma específica e sensível, além de ser uma técnica prática, rápida e que dispensa o uso de animais.

Padronização da titulação da toxina épsilon de Clostridium perfringens tipo D em linhagem contínua de células como alternativa ao bioensaio animal

Enterotoxemia (also called pulpy kidney disease) is an enteric disease, that affect ruminants, produced by epsilon toxin from Clostridium perfringens type D, an anaerobic commonly isolated from soil and feces of healthy animals. The diagnostic is based on detection of this exotoxin in the intestinal content by soroneutralization in mice. Therefore, this study aimed to standardize a test for detection and titration of the toxin in vitro, and compare it with the phenomenon in vivo. A volume of epsilon toxin was titrated in mice and in some cell lines. After concluding the most sensitive cell line, were held in vitro titrations of dilutions from a toxin wich one had in vivo titer known. The results were grouped and a mathematical equation was developed. MDCK cell line showed that the phenomenon observed in vitro can be expressed by a mathematical equation wich shows a correlation of 98.33% with a minimum lethal dose determined in vivo. Therefore, the soroneutralization using MDCK allows a specific, sensitive, practical, fast, and doesn't requere use of animal titration of epsilon toxin.

Enterotoxemia, também chamada de doença do rim pulposo, doença que acomete os ruminantes domésticos, é causada pela ação da toxina épsilon produzida pelo Clostridium perfringens tipo D, um anaeróbio comumente isolado do solo e das fezes de animais sadios. O método tradicional de diagnóstico baseia-se na detecção e classificação dessa exotoxina no conteúdo intestinal por meio da soroneutralização em camundongos. Com isso, o objetivo deste estudo foi padronizar um teste para detecção e titulação dessa toxina in vitro e compará-lo ao fenômeno in vivo. Para isso, uma partida de toxina épsilon de Clostridium perfringens tipo D foi titulada em camundongos e em várias linhagens contínuas de células. Após a determinação da linhagem celular mais sensível, realizaram-se ensaios de titulação in vitro de diluições de uma partida de toxina, comparando-os com os títulos in vivo conhecidos. Os resultados foram agrupados, e foi desenvolvida a equação matemática que melhor adaptou-se aos intervalos trabalhados. A linhagem MDCK, além de mais sensível, demonstrou que o fenômeno observado in vitro pode ser expresso por meio da equação matemática que apresenta uma correlação de 98,33%, com a dose mínima mortal determinada in vivo. Portanto, a linhagem MDCK permite titular a toxina épsilon de C. perfringens tipo D de forma específica e sensível, além de ser uma técnica prática, rápida e que dispensa o uso de animais.

Clostridium perfringens types A and D associated with enterotoxemia in an 18-month-old goat

Postmortem examination of a Boer buck that died peracutely revealed bowel and liver diffusely congested and edematous. Kidney was apparently edematous. Clostridium perfringens type A was isolated from bowel and type D from kidney. Microscopic examination revealed large areas of necrosis in the renal cortex and medulla (pulpy kidney disease), hyperemia and centrilobular necrosis of the liver, necrosis of the small-intestine wall, pulmonary edema and congestion, intense hyperemia of the cerebellum, hyperemia and edema of the brain.

Enterotoxemia em bovino / Bovine enterotoxaemia

This report describes a case of bovine enterotoxaemia in Morro da Garça, Minas Gerais, Brazil. Clostridium perfringens type D was isolated in pure culture and was characterized by biochemical reactions and PCR. By the mouse neutralization test, the presence of epsilon toxin from intestinal content was detected.(AU)

Diarréia em leitões lactentes por Clostridium perfringens tipo A em granjas tecnificadas nos estados de Minas Gerais e São Paulo / Clostridium perfringens type A diarrhea in suckling piglets in industrial swine farms in the states of Minas Gerais and São Paulo

Diarrhea in suckling piglets caused by Clostridium perfringens type A was diagnosed in industrial (technified) swine farms of the states of Minas Gerais and São Paulo (Brazil), based on isolation and identification of bacterium by biochemical tests, detection of alpha toxin in animal bioassays, and PCR. This seems to be the first report of clostridial enterotoxaemia in piglets by C. perfringens type A in Brazil and allowed specific procedures to control the disease.(AU)

CLOSTRIDIOSES DOS ANIMAIS DE PRODUÇÃO

As bactérias do gênero Clostridium são bastonetes, gram-positivos e anaeróbios. Devido à alta capacidade de esporulação da maioria das bactérias patogênicas desse grupo, as infecções e intoxicações por bactérias do gênero Clostridium, conhecidas por clostridioses, são de erradicação impossível e estão entre as principais enfermidades dos animais domésticos em todo mundo, principalmente de ruminantes. Esta revisão tem como objetivo abordar as principais clostridioses que acometem os animais domésticos no Brasil, abordando os principais aspectos e ocorrência do botulismo, tétano, mionecroses (gangrena gasosa e carbúnculo sintomático), doenças causadas por C. perfringens e diarreias e colites causadas por C. difficile.

CLOSTRIDIOSES DOS ANIMAIS DE PRODUÇÃO

As bactérias do gênero Clostridium são bastonetes, gram-positivos e anaeróbios. Devido à alta capacidade de esporulação da maioria das bactérias patogênicas desse grupo, as infecções e intoxicações por bactérias do gênero Clostridium, conhecidas por clostridioses, são de erradicação impossível e estão entre as principais enfermidades dos animais domésticos em todo mundo, principalmente de ruminantes. Esta revisão tem como objetivo abordar as principais clostridioses que acometem os animais domésticos no Brasil, abordando os principais aspectos e ocorrência do botulismo, tétano, mionecroses (gangrena gasosa e carbúnculo sintomático), doenças causadas por C. perfringens e diarreias e colites causadas por C. difficile.

Sudden death of goats due to enterotoxaemia / Morte súbita de caprinos por enterotoxemia

An occurrence of sudden death in goats is presented. Most of the death were without symptons but some animals exhibited diarrhoea, incoordination of movements and, before their death, spelted strong cries. The isolation of anaerobic Gram-positive rod, biochemically identified as Clostridium perfringens was possible in intestines, reticulum and food samples. Filtrates of these organs revelated a termolabile and high lethal toxin when inoculated into mice. Macroscopically it was seen hemorrhages in the intestines mucosa and stomachs filled up with food. Those aspects associated to the laboratory findings led to the diagnostic of enterotoxaemia.

Descreve-se a ocorrência de morte súbita observada em uma criação de caprinos. A maioria das mortes ocorreu sem qualquer manifestação sintomática prévia; entretanto, em alguns casos observou-se incoordenação motora, eliminação de cíbalas envoltas em fragmentos de mucosa intestinal e diarréia. Nos momentos que antecediam à morte, alguns animais emitiam fortes berros. O isolamento de um bacilo anaeróbio, Gram-positivo e bioquimicamente identificado como Clostridium perfríngens, foi possível a partir de amostras de materiais coletadas em diferentes porções dos intestinos, retículo e também da ração. Nos filtrados obtidos dos conteúdos dos órgãos citados, evidenciou-se a presença, em alta dosagem, de uma toxina termolábil e letal para camundongos. À necrópsia, observaram-se compartimentos gástricos plenos de alimento e hemorragias na mucosa intestinal. Estas constatações, associadas aos resultados laboratoriais, possibilitaram concluir tratar-se de um quadro de enterotoxemia.