Resumo
Serine protease inhibitors (serpins), a superfamily of protease inhibitors, are known to be involved in several physiological processes, such as development, metamorphosis, and innate immunity. In our study, a full-length serpin cDNA, designated Haserpin1, was isolated from the cotton bollworm Helicoverpa armigera. The cDNA sequence of Haserpin1 is 1176 nt long, with an open reading frame encoding 391 amino acids; there is one exon and no intron. The predicted molecular weight of Haserpin1 is 43.53 kDa, with an isoelectric point of 4.98. InterProScan was employed for Haserpin1 functional characterization, which revealed that Haserpin1 contains highly conserved signature motifs, including a reactive center loop (RCL) with a hinge region (E341N350), the serpin signature, (F367F375) and a predicted P1P1 cleavage site (L357S358), which are useful for identifying serpins. Transcripts of Haserpin1 were constitutively expressed in the fat body, suggesting that it is the major site for serpin synthesis. During the developmental stages, a fluctuation in the expression level of Haserpin1 was observed, with low expression detected at the 5th-instar larval stage. In contrast, relatively high expression was detected at the prepupal stage, suggesting that Haserpin1 might play a critical role at the H. armigera wandering stage. Although the detailed function of this serpin (Haserpin1) needs to be elucidated, our study provides a perspective for the functional investigation of serine protease inhibitor genes.(AU)
Sabe-se que os inibidores de serina protease (serpinas), uma superfamília de inibidores de protease, estão envolvidos em vários processos fisiológicos, como desenvolvimento, metamorfose e imunidade inata. Neste estudo, um cDNA de serpina de comprimento total, denominado Haserpin1, foi isolado da lagarta Helicoverpa armigera na cultura de algodão. A sequência de ADNc de Haserpin1 tem 1.176 nt de comprimento, com uma grelha de leitura aberta que codifica 391 aminoácidos; existe um éxon, mas nenhum íntron. O peso molecular previsto de Haserpin1 é de 43,53 kDa, com um ponto isoelétrico de 4,98. O InterProScan foi empregado para a caracterização funcional do Haserpin1, que revelou que o Haserpin1 contém motivos de assinatura altamente conservados, incluindo um loop central reativo (RCL) com uma região de dobradiça (E341-N350), a assinatura da serpina (F367-F375) e um local de clivagem previsto de P1-P1' (L357-S358), que são úteis para identificar serpinas. As transcrições de Haserpin1 foram expressas constitutivamente no corpo gordo, sugerindo que é o principal local para a síntese de serpinas. Durante os estágios de desenvolvimento, observou-se uma flutuação no nível de expressão de Haserpin1, com baixa expressão detectada no estágio larval do 5º ínstar. Por outro lado, detectou-se uma expressão relativamente alta no estágio pré-pupal, sugerindo que o Haserpin1 pode desempenhar um papel crítico no estágio errante de H. armigera. Embora a função detalhada dessa serpina (Haserpin1) precise ser elucidada, este estudo fornece uma perspectiva para a investigação funcional dos genes inibidores da serina protease.(AU)
Assuntos
Gossypium/parasitologia , Pragas da Agricultura , Lepidópteros , Inibidores de Serina ProteinaseResumo
Abstract Serine protease inhibitors (serpins), a superfamily of protease inhibitors, are known to be involved in several physiological processes, such as development, metamorphosis, and innate immunity. In our study, a full-length serpin cDNA, designated Haserpin1, was isolated from the cotton bollworm Helicoverpa armigera. The cDNA sequence of Haserpin1 is 1176 nt long, with an open reading frame encoding 391 amino acids; there is one exon and no intron. The predicted molecular weight of Haserpin1 is 43.53 kDa, with an isoelectric point of 4.98. InterProScan was employed for Haserpin1 functional characterization, which revealed that Haserpin1 contains highly conserved signature motifs, including a reactive center loop (RCL) with a hinge region (E341N350), the serpin signature, (F367F375) and a predicted P1P1 cleavage site (L357S358), which are useful for identifying serpins. Transcripts of Haserpin1 were constitutively expressed in the fat body, suggesting that it is the major site for serpin synthesis. During the developmental stages, a fluctuation in the expression level of Haserpin1 was observed, with low expression detected at the 5th-instar larval stage. In contrast, relatively high expression was detected at the prepupal stage, suggesting that Haserpin1 might play a critical role at the H. armigera wandering stage. Although the detailed function of this serpin (Haserpin1) needs to be elucidated, our study provides a perspective for the functional investigation of serine protease inhibitor genes.
Resumo Sabe-se que os inibidores de serina protease (serpinas), uma superfamília de inibidores de protease, estão envolvidos em vários processos fisiológicos, como desenvolvimento, metamorfose e imunidade inata. Neste estudo, um cDNA de serpina de comprimento total, denominado Haserpin1, foi isolado da lagarta Helicoverpa armigera na cultura de algodão. A sequência de ADNc de Haserpin1 tem 1.176 nt de comprimento, com uma grelha de leitura aberta que codifica 391 aminoácidos; existe um éxon, mas nenhum íntron. O peso molecular previsto de Haserpin1 é de 43,53 kDa, com um ponto isoelétrico de 4,98. O InterProScan foi empregado para a caracterização funcional do Haserpin1, que revelou que o Haserpin1 contém motivos de assinatura altamente conservados, incluindo um loop central reativo (RCL) com uma região de dobradiça (E341-N350), a assinatura da serpina (F367-F375) e um local de clivagem previsto de P1-P1' (L357-S358), que são úteis para identificar serpinas. As transcrições de Haserpin1 foram expressas constitutivamente no corpo gordo, sugerindo que é o principal local para a síntese de serpinas. Durante os estágios de desenvolvimento, observou-se uma flutuação no nível de expressão de Haserpin1, com baixa expressão detectada no estágio larval do 5º ínstar. Por outro lado, detectou-se uma expressão relativamente alta no estágio pré-pupal, sugerindo que o Haserpin1 pode desempenhar um papel crítico no estágio errante de H. armigera. Embora a função detalhada dessa serpina (Haserpin1) precise ser elucidada, este estudo fornece uma perspectiva para a investigação funcional dos genes inibidores da serina protease.
Resumo
Nutritional and physiological interactions depend on the evolutionary history of the host-parasitoid interaction considering that the hosts regulation by the parasitoid is species-specific. Cotesia flavipes Cameron was introduced in Brazil in the 70s to be used in the control of Diatraea sugarcane borer complex; however, Diatraea flavipennella Box is restricted to Brazil. Thus, this study investigated the possible nutritional changes in the hemolymph and fat body, and cytochemistry of D. flavipennella hemocytes parasitized by Cotesia flavipes. The levels of nutrients were quantified using colorimetric tests in the hemolymph and fat body. Levels of acidic polysaccharides, mucin, and lipids were investigated only in hemocytes using cytochemical techniques. In addition, histological sections of parasitized and non-parasitized caterpillars were prepared to observe volume changes and the presence of glycogen in the fat body. The results showed a reduction in protein and lipid concentration in the hemolymph of parasitized caterpillars. The parasitism reduced the levels of total carbohydrate, glycogen, and protein in the fat body and almost completely consumed the perivisceral fat body. It changed the cytochemistry of hemocytes and reduced acidic glycans in prohemocytes and oenocytoids, mucin in plasmatocytes and granulocytes, and lipids in adipohemocytes, granulocytes, and...(AU)
A interação nutricional e fisiológica depende da história evolutiva da interação entre hospedeiro e parasitoide, sendo a regulação do hospedeiro pelo parasitoide espécie-específica. Cotesia flavipes Cameron foi introduzida no Brasil na década de 70 para o controle do complexo de brocas Diatraea, contudo Diatraea flavipennella Box é restrita ao Brasil. Assim, este estudo investigou as possíveis alterações nutricionais da hemolinfa e do corpo gorduroso, e citoquímica dos hemócitos de D. flavipennella parasitada por C. flavipes. Os níveis de nutrientes foram quantificados por meio de testes colorimétricos da hemolinfa e corpo gorduroso. Já os níveis de glicanos ácidos, mucina e lipídeo foram investigados, somente nos hemócitos, utilizando técnicas citoquímicas. Adicionalmente, cortes histológicos da lagarta parasitada e não parasitada foram preparados para observar alterações no volume e na presença de glicogênio no corpo gorduroso. Os resultados mostraram uma redução na concentração de proteína e lipídeos na hemolinfa de lagartas parasitadas. O parasitismo reduziu os níveis de carboidratos totais, glicogênio e proteína no corpo gorduroso e consumiu quase todo o corpo gorduroso perivisceral. Parasitismo alterou a citoquímica dos hemócitos, reduzindo glicanos ácidos em prohemócitos e oenocitóides, mucina em plasmatócitos e granulócitos, e lipídeos em adipohemócitos, granulócitos e...(AU)
Assuntos
Himenópteros , Hemolinfa , Corpo Adiposo , Histocitoquímica , Hemócitos , LepidópterosResumo
Abstract Serine protease inhibitors (serpins), a superfamily of protease inhibitors, are known to be involved in several physiological processes, such as development, metamorphosis, and innate immunity. In our study, a full-length serpin cDNA, designated Haserpin1, was isolated from the cotton bollworm Helicoverpa armigera. The cDNA sequence of Haserpin1 is 1176 nt long, with an open reading frame encoding 391 amino acids; there is one exon and no intron. The predicted molecular weight of Haserpin1 is 43.53 kDa, with an isoelectric point of 4.98. InterProScan was employed for Haserpin1 functional characterization, which revealed that Haserpin1 contains highly conserved signature motifs, including a reactive center loop (RCL) with a hinge region (E341N350), the serpin signature, (F367F375) and a predicted P1P1 cleavage site (L357S358), which are useful for identifying serpins. Transcripts of Haserpin1 were constitutively expressed in the fat body, suggesting that it is the major site for serpin synthesis. During the developmental stages, a fluctuation in the expression level of Haserpin1 was observed, with low expression detected at the 5th-instar larval stage. In contrast, relatively high expression was detected at the prepupal stage, suggesting that Haserpin1 might play a critical role at the H. armigera wandering stage. Although the detailed function of this serpin (Haserpin1) needs to be elucidated, our study provides a perspective for the functional investigation of serine protease inhibitor genes.
Resumo Sabe-se que os inibidores de serina protease (serpinas), uma superfamília de inibidores de protease, estão envolvidos em vários processos fisiológicos, como desenvolvimento, metamorfose e imunidade inata. Neste estudo, um cDNA de serpina de comprimento total, denominado Haserpin1, foi isolado da lagarta Helicoverpa armigera na cultura de algodão. A sequência de ADNc de Haserpin1 tem 1.176 nt de comprimento, com uma grelha de leitura aberta que codifica 391 aminoácidos; existe um éxon, mas nenhum íntron. O peso molecular previsto de Haserpin1 é de 43,53 kDa, com um ponto isoelétrico de 4,98. O InterProScan foi empregado para a caracterização funcional do Haserpin1, que revelou que o Haserpin1 contém motivos de assinatura altamente conservados, incluindo um loop central reativo (RCL) com uma região de dobradiça (E341-N350), a assinatura da serpina (F367-F375) e um local de clivagem previsto de P1-P1' (L357-S358), que são úteis para identificar serpinas. As transcrições de Haserpin1 foram expressas constitutivamente no corpo gordo, sugerindo que é o principal local para a síntese de serpinas. Durante os estágios de desenvolvimento, observou-se uma flutuação no nível de expressão de Haserpin1, com baixa expressão detectada no estágio larval do 5º ínstar. Por outro lado, detectou-se uma expressão relativamente alta no estágio pré-pupal, sugerindo que o Haserpin1 pode desempenhar um papel crítico no estágio errante de H. armigera. Embora a função detalhada dessa serpina (Haserpin1) precise ser elucidada, este estudo fornece uma perspectiva para a investigação funcional dos genes inibidores da serina protease.
Resumo
The distribution and morphology of fat body of Brazilian diplopod Rhinocricus padbergi Verhoeff, 1938 are analyzed by scanning electron microscopy and histology. A terminology is proposed for description of the diplopods fat body.
Resumo
The distribution and morphology of fat body of Brazilian diplopod Rhinocricus padbergi Verhoeff, 1938 are analyzed by scanning electron microscopy and histology. A terminology is proposed for description of the diplopods fat body.
Resumo
Workers of Melipona quadrifasciata anthidioides (Lepeletier, 1836) develop their ovaries and lay eggs, therefore the production of vitellogenin is expected. In electrophoretic profiles only fat body extracts from nurse workers and ovary extracts from newly-emerged workers show protein with molecular mass similar to vitellogenin. However, an increase in the protein content was detected in forager fat body. This increase was attributed to storage of vitellogenin or other proteins in the previous phase and not discharged into the hemolymph or to an effect of the increased titre of juvenile hormone in this phase of worker life over the fat body functioning.
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Workers of Melipona quadrifasciata anthidioides (Lepeletier, 1836) develop their ovaries and lay eggs, therefore the production of vitellogenin is expected. In electrophoretic profiles only fat body extracts from nurse workers and ovary extracts from newly-emerged workers show protein with molecular mass similar to vitellogenin. However, an increase in the protein content was detected in forager fat body. This increase was attributed to storage of vitellogenin or other proteins in the previous phase and not discharged into the hemolymph or to an effect of the increased titre of juvenile hormone in this phase of worker life over the fat body functioning.
Resumo
Workers of Melipona quadrifasciata anthidioides (Lepeletier, 1836) develop their ovaries and lay eggs, therefore the production of vitellogenin is expected. In electrophoretic profiles only fat body extracts from nurse workers and ovary extracts from newly-emerged workers show protein with molecular mass similar to vitellogenin. However, an increase in the protein content was detected in forager fat body. This increase was attributed to storage of vitellogenin or other proteins in the previous phase and not discharged into the hemolymph or to an effect of the increased titre of juvenile hormone in this phase of worker life over the fat body functioning.
Resumo
The fat body cells of Pachycondyla (=Neoponera) villosa are disposed in a single layer between the cuticle and the digestive tract, forming a group of cells enclosed by a thin membrane. Histological studies have revealed three different cellular types: trophocyte (more abundant), urate, (located among the trophocytes), and oenocyte (the scarcest), usually observed laying near the cuticle. Histochemically, the trophocytes showed a positive reaction for basic proteins in the nucleus and cytoplasm, as well as a strong positive reaction in the cytoplasmic granules. The test for carbohydrates showed a strong positive reaction throughout the cytoplasm, while the test for lipids was positive for the cytoplasmic vesicles. The urate cells showed a positive reaction for basic proteins in the nucleus and in the areas of the cytoplasm surrounding the vesicles. These cells did not react to the PAS test or to Sudan Black B. The oenocytes showed a weak positive reaction to PAS and a strong positive reaction to Sudan Black B and Mercuric-bromophenol Blue.
As células do corpo gorduroso de Pachycondyla (=Neoponera) villosa distribuem-se como uma única camada entre a cutícula e o trato digestivo, formando um conjunto de células agrupadas e recobertas por uma fina membrana. Não foram identificados tipos celulares distintos por meio da ultramorfologia, porém a histologia revelou três tipos celulares distintos: os trofócitos, mais abundantes, as células de urato, distribuídas por entre os trofócitos, e os enócitos, menos abundantes que os demais. Os enócitos são comumente observados próximos da cutícula. Histoquimicamente, os trofócitos apresentaram reação positiva para proteínas básicas no núcleo e no citoplasma e reação fortemente positiva nos grânulos citoplasmáticos. O teste para carboidratos foi fortemente positivo em todo o citoplasma, enquanto para os lipídeos observou-se reação positiva nas vesículas citoplasmáticas. Em relação às células de urato, estas apresentaram reação positiva para proteínas básicas no núcleo e citoplasma, por entre as vesículas. Essas células não apresentaram reação para o teste de PAS e Sudan Black B. Quanto aos enócitos, estes apresentaram citoplasma fracamente positivo ao PAS e fortemente positivo ao Sudan Black B e para o azul de bromofenol.
Resumo
The fat body cells of Pachycondyla (=Neoponera) villosa are disposed in a single layer between the cuticle and the digestive tract, forming a group of cells enclosed by a thin membrane. Histological studies have revealed three different cellular types: trophocyte (more abundant), urate, (located among the trophocytes), and oenocyte (the scarcest), usually observed laying near the cuticle. Histochemically, the trophocytes showed a positive reaction for basic proteins in the nucleus and cytoplasm, as well as a strong positive reaction in the cytoplasmic granules. The test for carbohydrates showed a strong positive reaction throughout the cytoplasm, while the test for lipids was positive for the cytoplasmic vesicles. The urate cells showed a positive reaction for basic proteins in the nucleus and in the areas of the cytoplasm surrounding the vesicles. These cells did not react to the PAS test or to Sudan Black B. The oenocytes showed a weak positive reaction to PAS and a strong positive reaction to Sudan Black B and Mercuric-bromophenol Blue.
As células do corpo gorduroso de Pachycondyla (=Neoponera) villosa distribuem-se como uma única camada entre a cutícula e o trato digestivo, formando um conjunto de células agrupadas e recobertas por uma fina membrana. Não foram identificados tipos celulares distintos por meio da ultramorfologia, porém a histologia revelou três tipos celulares distintos: os trofócitos, mais abundantes, as células de urato, distribuídas por entre os trofócitos, e os enócitos, menos abundantes que os demais. Os enócitos são comumente observados próximos da cutícula. Histoquimicamente, os trofócitos apresentaram reação positiva para proteínas básicas no núcleo e no citoplasma e reação fortemente positiva nos grânulos citoplasmáticos. O teste para carboidratos foi fortemente positivo em todo o citoplasma, enquanto para os lipídeos observou-se reação positiva nas vesículas citoplasmáticas. Em relação às células de urato, estas apresentaram reação positiva para proteínas básicas no núcleo e citoplasma, por entre as vesículas. Essas células não apresentaram reação para o teste de PAS e Sudan Black B. Quanto aos enócitos, estes apresentaram citoplasma fracamente positivo ao PAS e fortemente positivo ao Sudan Black B e para o azul de bromofenol.
Resumo
Nutritional and physiological interactions depend on the evolutionary history of the host-parasitoid interaction considering that the hosts regulation by the parasitoid is species-specific. Cotesia flavipes Cameron was introduced in Brazil in the 70s to be used in the control of Diatraea sugarcane borer complex; however, Diatraea flavipennella Box is restricted to Brazil. Thus, this study investigated the possible nutritional changes in the hemolymph and fat body, and cytochemistry of D. flavipennella hemocytes parasitized by Cotesia flavipes. The levels of nutrients were quantified using colorimetric tests in the hemolymph and fat body. Levels of acidic polysaccharides, mucin, and lipids were investigated only in hemocytes using cytochemical techniques. In addition, histological sections of parasitized and non-parasitized caterpillars were prepared to observe volume changes and the presence of glycogen in the fat body. The results showed a reduction in protein and lipid concentration in the hemolymph of parasitized caterpillars. The parasitism reduced the levels of total carbohydrate, glycogen, and protein in the fat body and almost completely consumed the perivisceral fat body. It changed the cytochemistry of hemocytes and reduced acidic glycans in prohemocytes and oenocytoids, mucin in plasmatocytes and granulocytes, and lipids in adipohemocytes, granulocytes, and...
A interação nutricional e fisiológica depende da história evolutiva da interação entre hospedeiro e parasitoide, sendo a regulação do hospedeiro pelo parasitoide espécie-específica. Cotesia flavipes Cameron foi introduzida no Brasil na década de 70 para o controle do complexo de brocas Diatraea, contudo Diatraea flavipennella Box é restrita ao Brasil. Assim, este estudo investigou as possíveis alterações nutricionais da hemolinfa e do corpo gorduroso, e citoquímica dos hemócitos de D. flavipennella parasitada por C. flavipes. Os níveis de nutrientes foram quantificados por meio de testes colorimétricos da hemolinfa e corpo gorduroso. Já os níveis de glicanos ácidos, mucina e lipídeo foram investigados, somente nos hemócitos, utilizando técnicas citoquímicas. Adicionalmente, cortes histológicos da lagarta parasitada e não parasitada foram preparados para observar alterações no volume e na presença de glicogênio no corpo gorduroso. Os resultados mostraram uma redução na concentração de proteína e lipídeos na hemolinfa de lagartas parasitadas. O parasitismo reduziu os níveis de carboidratos totais, glicogênio e proteína no corpo gorduroso e consumiu quase todo o corpo gorduroso perivisceral. Parasitismo alterou a citoquímica dos hemócitos, reduzindo glicanos ácidos em prohemócitos e oenocitóides, mucina em plasmatócitos e granulócitos, e lipídeos em adipohemócitos, granulócitos e...