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1.
Artigo em Português | VETINDEX | ID: biblio-1489646

Resumo

Este trabalho tem como objetivo implantar novas tecnologias na área de bioterismo, com a formação de um núcleo de desenvolvimento de Fertilização In Vitro (FIV) para criação de um banco de embriões de camundongos isogênicos, transgênicos ou "nocautes", estudando inicialmente a superovulação e viabilidade embrionária de diferentes linhagens de camundongos. As fêmeas com oito semanas foram estimuladas com os hormônios PMSG e HCG, em seguida, eutanasiadas para obtenção dos oócitos e os machos, das respectivas linhagens, foram também eutanasiados para obtenção dos espermatozóides. Após a fertilização in vitro, os embriões em duas células foram coletados e transferidos para fêmeas pseudográvidas. Os resultados da FIV mostraram que as linhagens 129sv ABR, CPA, C5BL/10 e ALOX apresentaram maior número de oócitos em relação às demais linhagens testadas: A/J, BALB/c IL-4, BALB/c SCID, C57BL/6 TLR2, CBA, C57BL/6 CD1, BALB/c CARECA, C57BL/6 IL-4 e C57BL/6 TLR4. Com relação ao - nº de oócitos/ nº de embriões em duas células - as linhagens A/J (42/30) e CBA (20/14), apesar de apresentarem um número de oócitos inferior quando comparamos com os animais da linhagem 129 (165/53), apresentaram um maior número de embriões em duas células. Com a linhagem C57BL/10.A, o número de oócitos (119) foi maior em comparação com a linhagem A/J e CBA, no entanto, o número de embriões em duas células obtidos pela linhagem C57BL/10.A (22) foi menor em comparação com os animais da linhagem A/J e CBA. A linhagem XPA, apresentou grande número de oócitos e também de embriões em duas células (116/76). A eficiência da FIV foi validada pelos primeiros nascimentos de embriões, obtidos com animais das linhagens C57BL/6 IL4, C57BL/6 TLR2 e da linhagem 129sv ABR. Em conjunto, os nossos resultados mostram que a resposta à superovulação é um fenômeno linhagem específico, além disso, dentro da particularidade de cada linhagem, os embriões que se diferenciaram em duas células são capazes de ser gerados em fêmeas receptoras e se desenvolveram até o nascimento. Com essa ferramenta, abrimos novas possibilidades de avanços tecnológicos na área de bioterismo. Certificado CEUA nº 098/11 HCFMUSP.


This study aimed to deploy new technologies in the Laboratory Animal Science, with the formation of a core development in vitro fertilization (IVF) to create an embryo bank of inbred mice, transgenic or “knockout”, initially studying the super ovulation and embryo viability of different strains of mice. Females 8 weeks, were stimulated with PMSG and HCG hormones then euthanized to obtain the oocytes and males, their lines were also euthanized to obtain sperm. After in vitro fertilization, the embryo into two cells were collected and transferred to pseudo-pregnant females. The IVF results showed that strains 129sv ABR, XPA, and C57BL/10.A ALOX had a higher number of oocytes compared with other tested strains: A/J, BALB/c IL-4, BALB/c SCID, C57BL/TLR2 6, CBA, C57BL/6 CD1, BALB/c BALD, C57BL/6 IL -4 and C57BL/6 TLR4. With respect to -n oocyte/embryo -n into two cells - the strains A/J (42/30) and CBA (20/14), although with a lower number of oocytes when compared with the strain 129 (165/53), showed a higher number of embryos in two cells. With the line C57BL/10.A, the number of oocytes (119) was higher in comparison with strain A/J and CBA, however, the number of two-cell embryos obtained by C57BL/10.A (22) was lower compared with animals from the strain A/J and CBA. The strain XPA, showed a large number of oocytes and embryos also two cells (116/76). The efficiency of IVF, has been validated by the first births of embryos obtained from animals of the strains C57BL/6 IL4, C57BL/6 and TLR2 strain 129sv ABR. Together, our results showed that the response to ovulation is a super strain-specific phenomenon, moreover, within the particularity of each strain, the embryos which differentiated into two cells are able to be generated in recipient females and develop to the birth. With this tool, we have opened new possibilities for technological advances in the Laboratory Animal Science. Certified CEUA Nº 098/11 HCFMUSP.


Assuntos
Animais , Camundongos/classificação , Fertilização in vitro , Superovulação/metabolismo , Embrião de Mamíferos/citologia
2.
R. Soc. bras. Ci. Anim. Lab. ; 1(1): 14-23, 2012.
Artigo em Português | VETINDEX | ID: vti-1878

Resumo

Este trabalho tem como objetivo implantar novas tecnologias na área de bioterismo, com a formação de um núcleo de desenvolvimento de Fertilização In Vitro (FIV) para criação de um banco de embriões de camundongos isogênicos, transgênicos ou "nocautes", estudando inicialmente a superovulação e viabilidade embrionária de diferentes linhagens de camundongos. As fêmeas com oito semanas foram estimuladas com os hormônios PMSG e HCG, em seguida, eutanasiadas para obtenção dos oócitos e os machos, das respectivas linhagens, foram também eutanasiados para obtenção dos espermatozóides. Após a fertilização in vitro, os embriões em duas células foram coletados e transferidos para fêmeas pseudográvidas. Os resultados da FIV mostraram que as linhagens 129sv ABR, CPA, C5BL/10 e ALOX apresentaram maior número de oócitos em relação às demais linhagens testadas: A/J, BALB/c IL-4, BALB/c SCID, C57BL/6 TLR2, CBA, C57BL/6 CD1, BALB/c CARECA, C57BL/6 IL-4 e C57BL/6 TLR4. Com relação ao - nº de oócitos/ nº de embriões em duas células - as linhagens A/J (42/30) e CBA (20/14), apesar de apresentarem um número de oócitos inferior quando comparamos com os animais da linhagem 129 (165/53), apresentaram um maior número de embriões em duas células. Com a linhagem C57BL/10.A, o número de oócitos (119) foi maior em comparação com a linhagem A/J e CBA, no entanto, o número de embriões em duas células obtidos pela linhagem C57BL/10.A (22) foi menor em comparação com os animais da linhagem A/J e CBA. A linhagem XPA, apresentou grande número de oócitos e também de embriões em duas células (116/76). A eficiência da FIV foi validada pelos primeiros nascimentos de embriões, obtidos com animais das linhagens C57BL/6 IL4, C57BL/6 TLR2 e da linhagem 129sv ABR. Em conjunto, os nossos resultados mostram que a resposta à superovulação é um fenômeno linhagem específico, além disso, dentro da particularidade de cada linhagem, os embriões que se diferenciaram em duas células são capazes de ser gerados em fêmeas receptoras e se desenvolveram até o nascimento. Com essa ferramenta, abrimos novas possibilidades de avanços tecnológicos na área de bioterismo. Certificado CEUA nº 098/11 HCFMUSP.(AU)


This study aimed to deploy new technologies in the Laboratory Animal Science, with the formation of a core development in vitro fertilization (IVF) to create an embryo bank of inbred mice, transgenic or “knockout”, initially studying the super ovulation and embryo viability of different strains of mice. Females 8 weeks, were stimulated with PMSG and HCG hormones then euthanized to obtain the oocytes and males, their lines were also euthanized to obtain sperm. After in vitro fertilization, the embryo into two cells were collected and transferred to pseudo-pregnant females. The IVF results showed that strains 129sv ABR, XPA, and C57BL/10.A ALOX had a higher number of oocytes compared with other tested strains: A/J, BALB/c IL-4, BALB/c SCID, C57BL/TLR2 6, CBA, C57BL/6 CD1, BALB/c BALD, C57BL/6 IL -4 and C57BL/6 TLR4. With respect to -n oocyte/embryo -n into two cells - the strains A/J (42/30) and CBA (20/14), although with a lower number of oocytes when compared with the strain 129 (165/53), showed a higher number of embryos in two cells. With the line C57BL/10.A, the number of oocytes (119) was higher in comparison with strain A/J and CBA, however, the number of two-cell embryos obtained by C57BL/10.A (22) was lower compared with animals from the strain A/J and CBA. The strain XPA, showed a large number of oocytes and embryos also two cells (116/76). The efficiency of IVF, has been validated by the first births of embryos obtained from animals of the strains C57BL/6 IL4, C57BL/6 and TLR2 strain 129sv ABR. Together, our results showed that the response to ovulation is a super strain-specific phenomenon, moreover, within the particularity of each strain, the embryos which differentiated into two cells are able to be generated in recipient females and develop to the birth. With this tool, we have opened new possibilities for technological advances in the Laboratory Animal Science. Certified CEUA Nº 098/11 HCFMUSP.(AU)


Assuntos
Animais , Fertilização in vitro , Camundongos/classificação , Superovulação/metabolismo , Embrião de Mamíferos/citologia
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