Resumo

The use of organophosphates has been recommended for fish, especially the trichlorfon to control parasites. Colossoma macropomum were exposed to trichlorfon during 96 hours and of total number of mucous cells decreased in the number of cells when compared to the control group. Glycoproteins acid, acid sulphated and neutral was identified in the gill epithelium. Neutra glycoprotein had a significant decrease between control and the sublethal concentration. Acid glycoprotein didn't have any significant difference between the groups exposed to the trichlorfon, compared to the control group. Sulfated acidic glycoprotein in the group exposed to the trichlorfon was noticed a reduction in number of mucosal cells acidic sulphated. The differences between density cell and production glycoprotein was a response of these cells after exposure to xenobiotic. The reduction of neutral, acid and sulphated acid glycoprotein in the MC of the gill epithelium Colossoma macropomum may affect gills epithelial surface protection by reducing the formation of an unstirred layer and enhance the ion loss.(AU)

A utilização de organofosforados tem sido recomendada em pisciculturas, principalmente o trichlorfon, para o controle de parasitoses. Colossoma macropomum foram expostos ao trichlorfon durante 96 horas, e o número total de células mucosas diminuiu no número de células quando comparado com o grupo controle. Glicoproteínas ácida, ácida sulfatada e neutra foram identificadas no epitélio branquial. Glicoproteína neutra teve uma diminuição significativa entre o controle e a concentração subletal. Glicoproteína ácida não apresentou diferença significativa entre os grupos expostos ao triclorfon, em comparação com o grupo controle. Glicoproteína ácida sulfatada no grupo exposto ao triclorfon teve uma redução no número de células da mucosa ácida sulfatada. As diferenças entre a densidade celular e a produção de glicoproteína foi uma resposta dessas células após exposição aos xenobióticos. A redução das glicoproteínas neutra, ácida e ácida sulfatada no epitélio branquial de Colossoma macropomum pode afetar a proteção da superfície, reduzindo a formação de uma camada de muco, e aumentar a perda de íons.(AU)

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Abstract Purpose: To investigate the correlation of inhaled nitric oxide (NO) on plasma levels of cardiac troponin I (cTnI) and von Willebrand factor (vWF), glycoprotein (GP) IIb/IIIa, granule membrane protein 140 (GMP-140) in rabbits with acute massive pulmonary embolism (PE). Methods: Thirty apanese white rabbits were divided into 3 groups, thrombus were injected in model group (n = 10), NO were inhalated for 24 h after massive PE in NO group (n = 10), saline were injected in control group (n = 10). The concentrations of vWF, GP IIb/IIIa, GMP-140 and cTnI were tested at 4, 8, 12, 16, 20, and 24 h, Correlation analyses were conducted between cTnI and vWF, GP IIb/IIIa, and GMP-140 by Pearson's correlation. Results: The concentration of cTnI and vWF, GP IIb/IIIa, and GMP-140 was increased in the model group, compared to control group. In the inhaled group, the concentrations of cTnI, vWF, GP IIb/IIIa, and GMP-140 were reduced compared to model group. There was a positive correlation between cTnI and vWF, GP IIb/IIIa, and GMP-140. Conclusion: Inhaled nitric oxide can lead to a decrease in levels of cardiac troponin I, von Willebrand factor, glycoprotein, and granule membrane protein 140, after an established myocardial damage, provoked by acute massive pulmonary embolism.

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A erliquiose é uma enfermidade presente em todos os estados brasileiros, frequentemente associada às alterações hematológicas em cães. O objetivo deste trabalho foi relatar a ocorrência da infecção natural por E. canis por meio da reação da polimerase em cadeia convencional (cPCR), avaliar a presença dos genes das glicoproteínas gp-36 e gp-19 e correlacionar a infecção com as alterações laboratoriais. No estudo, foram incluídos 206 cães em cães assintomáticos para hemoparasitose escolhidos por conveniência e aleatoriamente, atendidos no Hospital Veterinário da Universidade de Brasília, em Clínicas Veterinárias de Brasília e de abrigos localizados nas cidades do entorno do Distrito Federal. Como resultado, 14/206 (6,79%) cães foram positivos para E.canis por meio da cPCR. Essas amostras positivas para E. canis resultaram em 100% (14/14) e 28,6% (4/14) de positividade para os genes das glicoproteínas gp19 e gp36, respectivamente. As alterações hematológicas mais frequentes encontradas no grupo dos cães com a infecção foram trombocitopenia 57,2%(P= 0,002), anemia 35,7% (P 0,003) e leucopenia 14,3% (P= 0,03). As análises da bioquímica sérica não apresentaram diferença estatística entre os animais positivos e negativos para erliquiose e também não houve ocorrência das alterações dos perfis bioquímicos entre os infectados. Conclui-se que o Distrito Federal e entorno possuem baixa ocorrência do agente em cães assintomáticos para hemoparasitose, além disso, a identificação da E.canis envolvendo novos oligonucleotideos permite potencializar o conhecimento sobre a espécie na região e que as alterações laboratoriais sugestivas da infecção foram encontradas nos animais positivos mesmo na ausência de sinais clínicos comuns.

Ehrlichiosis is a disease present in all Brazilian states, often associated with hematological changes in dogs. The objective of this study was to report the occurrence of natural infection by E. canis by means of the conventional polymerase chain reaction (cPCR), to evaluate the presence of the genes of the gp-36 and gp-19 glycoproteins, and to correlate the infection with laboratory changes. In the study, 206 dogs were included in dogs asymptomatic for hemoparasitosis, chosen by convenience and randomly, treated at the Veterinary Hospital of the University of Brasília, at Veterinary Clinics of Brasília, and at shelters located in the cities surrounding the Federal District were included in the study. As a result, 14/206 (6.79%) dogs were positive for E. canis by cPCR. These positive samples for E. canis resulted in 100% (14/14) and 28.6% (4/14) positivity for the gp19 and gp36 glycoprotein genes, respectively. The most frequent hematological changes found in the group of dogs with the infection were thrombocytopenia 57.2% (P = 0.002), anemia 35.7% (P 0.003) and leukopenia 14.3% (P = 0.03). The analyzes of serum biochemistry showed no statistical difference between positive and negative animals for Ehrlichiosis and there was also no occurrence of changes in the biochemical profiles among those infected. It is concluded that the Federal District and its surroundings have a low occurrence of the agent in dogs asymptomatic for hemoparasitosis, in addition, the identification of E. canis involving new oligonucleotides allows to enhance knowledge about the species in the region and that the laboratory alterations suggestive of the infection were found in positive animals even in the absence of common clinical signs.

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ABSTRACT: Pregnancy diagnosis is an important tool for farm management. Ultrasonography is the main technique used for pregnancy diagnosis in ewes. As an alternative, radioimmunoassay (RIA) allows accurate and early detection of pregnancy-associated glycoproteins (PAGs) in sheep blood. However, radioactive-based techniques, as RIA, have been increasingly inadvisable due to environmental risk. Homology between ovine and bovine PAGs is high, and ELISA kits used for PAGs detection in cattle are safer than RIA. Thus, this study aimed to evaluate the feasibility of PAGs detection for pregnancy diagnosis in sheep serum samples using an ELISA kit produced for cattle. The sensitivity and specificity of the ELISA kit were 93.5% and 98.9%, respectively, whereas positive and negative predictive values were 99.0% and 93.1%, respectively, in comparison to ultrasonography diagnostic (control). PAGs reached consistently detectable concentrations in ovine serum around 33 days after mating. Accuracy of the ELISA test was 96.1% from 33 days of pregnancy until lambing. After parturition, PAGs were still detectable seven days post-lambing. However, from 21 days post-parturition, PAGs from the previous pregnancy were no longer detected in serum samples. In conclusion, the bovine ELISA kit can accurately detect pregnancy in sheep 33 days following mating, while PAGs levels from the previous gestation are no longer detected from 21 days post-partum. The evaluated ELISA test is a reliable tool for pregnancy diagnosis in sheep at random stages and as a complementary exam at early gestation.

RESUMO: O diagnóstico de gestação é uma ferramenta importante no manejo da propriedade. A ultrassonografia é a principal técnica utilizada no diagnóstico de prenhez em ovelhas. Como alternativa, o radiomunoensaio (RIA) permite acurácia e a detecção precoce de proteínas associadas à prenhez (PAGs) no sangue. No entanto, as técnicas radioativas, como o RIA, têm sido cada vez mais desaconselháveis, devido ao risco ambiental. A homologia entre PAGs de ovinos e bovinos é alta, e os kits de ELISA utilizados para a detecção de PAGs em bovinos são mais seguros do que RIA. Portanto, este estudo teve como objetivo avaliar a viabilidade de detecção de PAGs no soro ovino para diagnóstico de gestação em soro ovino, utilizando um kit de ELISA produzido para bovinos. A sensibilidade e a especificidade do kit de ELISA foram de 93,5% e 98,9%, respectivamente, enquanto que os valores preditivos positivo e negativo foram de 99,0% e 93,1%, respectivamente, em comparação com a ultrassonografia (utilizada como referência). As PAGs atingiram concentrações consistentemente detectáveis no soro ovino em torno de 33 dias após o acasalamento. A acurácia do teste de ELISA foi de 96,1% a partir de 33 dias de gestação até o parto. As PAGs ainda eram detectáveis sete dias pós-parto. No entanto, a partir de 21 dias após o parto, as PAGs da prenhez anterior já não eram detectadas no soro. Em conclusão, o kit de ELISA bovino pode detectar a prenhez com precisão em ovelhas a partir de 33 dias após o acasalamento, e os níveis de PAGs da gestação anterior não são detectados a partir de 21 dias pós-parto. O teste de ELISA avaliado é uma ferramenta confiável para o diagnóstico de gestação em ovelhas em estágios aleatórios e como exame complementar no início da gestação.

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Canid herpesvirus 1 (CHV-1) is a widespread pathogen of dogs and produces infertility, abortions and severe systemic disease in young puppies. Clinical data indicate the circulation of CHV-1 among Brazilian dogs yet definitive diagnosis has rarely been accomplished. This article describes the clinicopathological findings of four independent cases/outbreaks of neonatal disease by CHV-1 in Bulldog puppies followed by virus identification and genetic characterization. Three events occurred in a kennel holding dogs of different breeds at reproductive age (March 2013, October 2013 and April 2014). Puppies from three French or English Bulldog litters, aging 9 to 30 days were affected, presenting dyspnea, agonic breathing, pale mucous, abdominal pain and tension, evolving to death within about 24 hours. At necropsy, the puppies presented necrohemorrhagic hepatitis, multifocal and moderate necrohemorrhagic nephritis and fibrinonecrotic interstitial pneumonia. Virus isolation was positive in clinical specimens from one litter and CHV-1 DNA was detected by PCR in tissues from all four cases. Virus-neutralizing assays with samples of the affected kennel revealed 9/12 adult animals with high antibody titers to CHV-1. Nucleotide sequencing of glycoprotein B, C and D genes revealed 99-100% of identity among the viruses and with CHV-1 sequences available in GenBank. Phylogenetic analyses of gC sequences showed a segregation of the samples, even among three isolates from the same kennel. These findings support CHV-1 infection as the cause of disease and death in these dog litters, reinforcing the need for correct etiologic diagnosis, prevention and immunization against CHV-1 in dogs from Southern Brazil.

O herpesvírus canino (CHV-1) é um patógeno de cães que possui distribuição mundial e que causa infertilidade, abortos e doença sistêmica severa em filhotes de cães. Achados clínicos tem indicado a circulação do CHV-1 em cães no Brasil, embora o diagnóstico definitivo seja raramente determinado. Este artigo descreve os achados clinicopatológicos de quatro casos/surtos independentes de morte neonatal de filhotes de cães da raça Bulldog causados pelo CHV-1, a identificação e a caracterização genética do vírus. Três eventos ocorreram no mesmo canil que abriga animais de diferentes raças em idade reprodutiva (março de 2013, outubro de 2013 e abril de 2014). Filhotes de três ninhadas de Bulldog Francês e/ou Inglês, com idade de 9 a 30 dias, foram afetados e apresentaram dispneia, respiração agônica, mucosas pálidas, dor e tensão abdominal, que evoluíram para morte dos cães dentro de, aproximadamente, 24 horas. Na necropsia foram observados hepatite necro-hemorrágica, nefrite necro-hemorrágica multifocal e moderada e pneumonia intersticial fibrinonecrótica. O isolamento viral foi positivo em amostras clínicas de um filhote e DNA de CHV-1 foi detectado por PCR em tecidos de filhotes de todos os surtos. Teste de soroneutralização com amostras de soro de cães provenientes do canil afetado revelaram que nove de 12 animais adultos possuíam altos títulos de anticorpos para o CHV-1. Sequenciamento de nucleotídeos do gene das glicoproteínas B, C e D revelaram 99-100% de identidade entre as amostras e com as sequências de CHV-1 disponíveis no GenBank. A análise filogenética baseada na sequência do gene da glicoproteína C mostrou uma segregação das amostras, mesmo entre os três isolados de vírus provenientes do mesmo canil. Esses achados demonstram que o CHV-1 é a causa da doença e da morte dos filhotes, reforçando a necessidade do correto diagnóstico etiológico e a implementação de medidas de prevenção e imunização contra o CHV-1 em cães no sul do Brasil.

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West Nile virus (WNV) envelope glycoproteins preM/E were stably expressed in baby hamster kidney cells and tested as antigen in a fluorescent antibody assay for WNV antibodies. Sera from horses, mice and chicken immunized with an inactivated WNV vaccine and, less consistently, sera from horses acutely infected with WNV, reacted specifically with viral antigens present in preM/E-expressing cells.

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The aim of this work was the cloning of those transmembrane glycoproteins G and F from an isolate bovine respiratory syncytial viruses (BRSV) - a Brazilian isolate of BRSV, named BRSV-25-BR in previous studies, in a prokaryotic system to proceed the sequencing of larger genomic fragments. The nucleotide substitutions were confirmed and these clones may also be used in further studies regarding the biological effects of those proteins in vitro and in vivo.

O objetivo deste trabalho foi a clonagem das glicoproteínas transmembrana G e F de um isolado de vírus respiratório sincicial bovino (BRSV) - um isolado brasileiro denominado BRSV-25-BR- que já demonstrou possuir mutações em regiões altamente conservadas do gene da proteína G - em sistema procariótico, com o intuito de sequenciar fragmentos genômicos maiores. As substituições de nucleotídeos foram confirmadas e tais clones podem ser utilizados em futuros estudos sobre os efeitos biológicos destas proteínas tanto in vitro como in vivo.

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The mucous cells (MC) of traíra, Hoplias malabaricus, and jeju, Hoplerythrinus unitaeniatus, two ecologically distinct erythrinid species, were analyzed in fish exposed to deionized (DW) and high ion concentration (NaCl and Ca2+) water (HIW) during 15 days to evaluate the MC responses to ion challenge. MCs are localized in the leading and trailing edge and, interlamellar region of the gill filament epithelium but, in H. unitaeniatus, they are also found in the breathing or lamellar epithelium. MC density is lower in H. malabaricus, the exclusively water-breathing fish, than in H. unitaeniatus, a facultative air-breathing fish. The transference to DW or HIW did not change the MC density and surface area, excepting in H. malabaricus, in the first day of exposure to DW. A single MC containing three types of glycoproteins (neutral, acidic and sulphated) was identified in the gill epithelium of both, H. malabaricus and H. unitaeniatus. The amount (based on the intensity of histochemistry reaction) of these glycoproteins differed between the species and were altered after exposure to DW and HIW showing little adjustments in the amount of mucosubstances in the MC of H. malabaricus and reduction of acidic and sulphated glycoproteins in H. unitaeniatus. The decreasing of these glycoproteins in H. unitaeniatus reduced the mucus protection against desiccation of gill tissue when change the ion concentration in water.(AU)

As células mucosas (CM) em traíra, Hoplias malabaricus, e jeju, Hoplerythrinus unitaeniatus, dois eritrinídeos ecologicamente distintos, foram analisadas em espécimes expostos a água deionizada (DW) e água com alta concentração de íons (NaCl + Ca2+, HIW) durante 15 dias para avaliar as respostas das CMs. As CMs estão localizadas no lado aferente e eferente e região interlamelar no epitélio do filamento branquial, mas em H. unitaeniatus, CMs estão presentes no epitélio respiratório ou lamelar. A densidade de CMs é menor em H. malabaricus, espécie com respiração exclusivamente aquática, do que em H. unitaeniatus, espécie com respiração aérea facultativa. A transferência para AD e HIW não alterou a densidade de CMs e a sua superfície, exceto em H. malabaricus, no primeiro dia de exposição à AD. Um único tipo de CM contendo três tipos de glicoproteínas (neutra, ácida e ácida sulfatada) foi identificado no epitélio branquial de H. malabaricus e H. unitaeniatus. A quantidade das glicoproteínas (avaliada pela intensidade da reação histoquímica) diferiu nas duas espécies e foi alterada após a transferência para AD e HIW mostrando pequeno ajuste na quantidade de cada mucosubstância secretada pelas CMs em H. malabaricus e redução de glicoproteínas ácidas e sulfatadas em H. unitaeniatus. A diminuição dessas glicoproteínas em H. unitaeniatus reduz a proteção do muco sobre o tecido branquial quando é alterada a concentração de íons na da água.(AU)

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The fate of organochlorine 14C-dicofol in activated sludge process was investigated. Results showed that the major part of radioactivity remained adsorbed on biological sludge. Consequently, its final disposal deserves special attention. The small amounts of dicofol, biotransformed or not, which remained in the treated effluent could contaminate receiving bodies.

Glicoproteínas, glicoesfingolipídios e polissacarídios, expostos nas camadas mais externas da parede celular dos fungos, estão envolvidos em diferentes tipos de interações com o ambiente extracelular. Essas moléculas são componentes essenciais desses organismos, contribuindo para a estrutura, integridade, crescimento celular, diferenciação e sinalização. Alguns são compostos imunologicamente ativos com potencial para regular a patogênese e a resposta imune do hospedeiro, Algumas dessas estruturas podem ser especificamente reconhecidas por anticorpos presentes no soro de pacientes, sugerindo uma possível utilização como ferramenta no diagnóstico das infecções fúngicas.

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Histological structures of the digestive traits of Pimelodus maculatus La Cepède, 1803, in the Funil reservoir (22º30'- 22º35'S; 44º35'- 44º40'W) were described using haematoxilin-eosin (HE), trichome Gomori, periodic acid Schiff (PAS) and alcian blue (AB) pH 2.5 techniques. The main aim of this study was to detect the levels of glycoproteins (GPs) in the mucous tunic based in histochemical techniques and to characterize eventual alteration in the digestive tract of this species in a polluted system. Fifty-four adult individuals collected between April-2003 and July-2004 (TL=19-38 cm) were examined. The mucosa showed longitudinal folds in the buccopharyngeal cavity, with a stratified squamous epithelium. The oesophagus showed epithelium similar to buccopharyngeal cavity, with a predominance of mucous cells, which reacted strongly with the used methods. The stomach showed three regions: cardic, fundic and pyloric. The mucous tunic is continuously revested by a single cylindrical epithelium which showed positive reaction to AB and PAS only at the apical cells surface. The proper tunic has tubular glands that ramify gradatively, being a cellular type named oxyntopeptic, related to chloridric acid and pepsinogenic cells synthesis. The intestine showed vilosities, with the mucous tunic revested by a single cylindrical epithelium with striated planure and caliciform cells. The duodenum submucosa layer was located at the coledocum opening, as a single cylindrical epithelium lacking caliciforms cells, reacting positively with both PAS and AB. The eutrophic environment of Funil reservoir did not seem to influence morphologic patterns of the structures (oesophagus, stomach and intestine) and no modification was observed in the mucous cells activity.

As estruturas teciduais do trato gastrintestinal de Pimelodus maculatus La Cepède, 1803, do reservatório de Funil (22º30'-22º35'S; 44º35'- 44º40'W) foram descritas através das técnicas de hematoxilina-eosina (HE), tricômico Gomori, ácido Periódico de Schiff (PAS) e alcian blue (AB) pH 2,5. Objetivou-se a detecção de glicoproteínas (GPs) na mucosa através de uma análise histoquímica e caracterização de possíveis alterações ao longo do trato digestório destes peixes neste sistema de elevado grau de alteração. Cinqüenta e quatro indivíduos adultos, coletados entre abril de 2003 e julho de 2004 (CT=19-38 cm) foram utilizados. Na cavidade bucofaríngea, a mucosa apresenta-se com pregas longitudinais e o epitélio é do tipo estratificado pavimentoso. O esôfago apresenta o mesmo tipo de epitélio da cavidade bucofaríngea, destacando-se a predominância de células mucosas que tiveram forte reação aos métodos utilizados. O estômago foi diferenciado em região cárdica, fúndica e pilórica. A mucosa é continuamente revestida por um epitélio simples cilíndrico que apresentou reação positiva ao AB e PAS somente na superfície apical das células; a lâmina própria possui glândulas tubulares que se ramificam gradativamente e consistem de um tipo celular denominado oxinticopépticas, relacionadas com a síntese de ácido clorídrico e pepsinogênio. O intestino apresenta vilosidades revestidas por um epitélio simples cilíndrico com planura estriada e células caliciformes. Na camada submucosa do duodeno foi observada a abertura do colédoco, sendo o epitélio do tipo simples cilíndrico sem células caliciformes, positivo tanto ao PAS quanto ao AB. O ambiente eutrófico do reservatório de Funil não parece influenciar os padrões morfológicos das estruturas (esôfago, estômago e intestino) e não foram observadas modificações nas atividades das células mucosas.