Leishmania infantum in the reproductive organs of dogs / Leishmania infantum em órgãos reprodutivos de cães

Leishmania infantum causes canine leishmaniasis. Using parasitological and molecular analyses, we identified L. infantum in the reproductive organs of male and female dogs. Using histochemistry, immunohistochemistry, and PCR, we examined tissue samples from the reproductive organs of 8 male dogs and 16 female dogs diagnosed with leishmaniasis. Despite the absence of macroscopic or microscopic lesions in these organs, we observed L. infantum amastigotes in tissue samples from the testis and the uterus. PCR and sequencing of these tissues revealed sequences that matched 100% with L. infantum DNA available at GenBank. The presence of L. infantum amastigotes and DNA in testicular and uterine tissue samples suggested that these organs can harbor the parasite without associated macroscopic or microscopic lesions, and this can be especially important in the vertical and venereal transmission of leishmaniasis in dogs.

Leishmania infantum é agente etiológico da leishmaniose canina. Por meio de análises parasitológicas e moleculares, a presença do parasita foi investigada em órgãos reprodutivos de cães machos e fêmeas. Amostras de tecidos dos órgãos reprodutivos de 8 cães machos e 16 fêmeas diagnosticados com leishmaniose foram avaliadas por histoquímica, imunohistoquímica e PCR. Apesar de não terem sido observadas lesões macroscópicas ou microscópicas nos órgãos reprodutivos desses cães, formas amastigotas de L. infantum foram observadas em amostras teciduais do testículo e útero. A PCR e o sequenciamento do DNA extraído desses tecidos revelaram sequências 100% idênticas a L. infantum depositadas no GenBank. Nossos resultados sugerem que os testículos e o útero podem abrigar o parasita, sem associação com lesões macroscópicas ou microscópicas, o que pode ter uma grande importância na transmissão venérea e vertical da leishmaniose entre cães.

Leishmania infantum in the reproductive organs of dogs / Leishmania infantum em órgãos reprodutivos de cães

ABSTRACT: Leishmania infantum causes canine leishmaniasis. Using parasitological and molecular analyses, we identified L. infantum in the reproductive organs of male and female dogs. Using histochemistry, immunohistochemistry, and PCR, we examined tissue samples from the reproductive organs of 8 male dogs and 16 female dogs diagnosed with leishmaniasis. Despite the absence of macroscopic or microscopic lesions in these organs, we observed L. infantum amastigotes in tissue samples from the testis and the uterus. PCR and sequencing of these tissues revealed sequences that matched 100% with L. infantum DNA available at GenBank. The presence of L. infantum amastigotes and DNA in testicular and uterine tissue samples suggested that these organs can harbor the parasite without associated macroscopic or microscopic lesions, and this can be especially important in the vertical and venereal transmission of leishmaniasis in dogs.

RESUMO: Leishmania infantum é agente etiológico da leishmaniose canina. Por meio de análises parasitológicas e moleculares, a presença do parasita foi investigada em órgãos reprodutivos de cães machos e fêmeas. Amostras de tecidos dos órgãos reprodutivos de 8 cães machos e 16 fêmeas diagnosticados com leishmaniose foram avaliadas por histoquímica, imunohistoquímica e PCR. Apesar de não terem sido observadas lesões macroscópicas ou microscópicas nos órgãos reprodutivos desses cães, formas amastigotas de L. infantum foram observadas em amostras teciduais do testículo e útero. A PCR e o sequenciamento do DNA extraído desses tecidos revelaram sequências 100% idênticas a L. infantum depositadas no GenBank. Nossos resultados sugerem que os testículos e o útero podem abrigar o parasita, sem associação com lesões macroscópicas ou microscópicas, o que pode ter uma grande importância na transmissão venérea e vertical da leishmaniose entre cães.

Leishmania infantum in the reproductive organs of dogs / Leishmania infantum em órgãos reprodutivos de cães

Leishmania infantum causes canine leishmaniasis. Using parasitological and molecular analyses, we identified L. infantum in the reproductive organs of male and female dogs. Using histochemistry, immunohistochemistry, and PCR, we examined tissue samples from the reproductive organs of 8 male dogs and 16 female dogs diagnosed with leishmaniasis. Despite the absence of macroscopic or microscopic lesions in these organs, we observed L. infantum amastigotes in tissue samples from the testis and the uterus. PCR and sequencing of these tissues revealed sequences that matched 100% with L. infantum DNA available at GenBank. The presence of L. infantum amastigotes and DNA in testicular and uterine tissue samples suggested that these organs can harbor the parasite without associated macroscopic or microscopic lesions, and this can be especially important in the vertical and venereal transmission of leishmaniasis in dogs.(AU)

Leishmania infantum é agente etiológico da leishmaniose canina. Por meio de análises parasitológicas e moleculares, a presença do parasita foi investigada em órgãos reprodutivos de cães machos e fêmeas. Amostras de tecidos dos órgãos reprodutivos de 8 cães machos e 16 fêmeas diagnosticados com leishmaniose foram avaliadas por histoquímica, imunohistoquímica e PCR. Apesar de não terem sido observadas lesões macroscópicas ou microscópicas nos órgãos reprodutivos desses cães, formas amastigotas de L. infantum foram observadas em amostras teciduais do testículo e útero. A PCR e o sequenciamento do DNA extraído desses tecidos revelaram sequências 100% idênticas a L. infantum depositadas no GenBank. Nossos resultados sugerem que os testículos e o útero podem abrigar o parasita, sem associação com lesões macroscópicas ou microscópicas, o que pode ter uma grande importância na transmissão venérea e vertical da leishmaniose entre cães.(AU)

Caracterização histoquímica no diagnóstico da babesiose bovina por Babesia bovis / Histochemical characterization in the diagnosis of bovine babesiosis by Babesia bovis

A babesiose é uma doença hemolítica transmitida por carrapatos e causada por protozoários intraeritrocitários do gênero Babesia. Esta é uma doença de incidência elevada na Região Sul do Brasil e responsável por perdas econômicas consideráveis. O diagnóstico clínico-patológico pode ser feito através da demonstração do parasito pelo exame de esfregaços sanguíneos ou de tecidos frescos. Entretanto, com frequência, somente órgãos fixados em formol são remetidos para laboratórios de patologia, o que impossibilita a realização do esfregaço. O principal objetivo deste estudo foi encontrar técnicas histoquímicas alternativas e capazes de aprimorar a evidenciação de Babesia bovis intraeritrocitária em tecidos fixados em formol. Para este estudo, foram analisadas retrospectivamente amostras de tecidos de 50 casos de necropsias de bovinos, as quais haviam sido fixadas em formol e processadas rotineiramente para histopatologia. Os casos foram divididos em um grupo controle, constituído por 12 casos de babesiose cerebral com substância cinzenta encefálica róseo-cereja característica (grupo A), e 38 casos sugestivos de tristeza parasitária bovina (grupo B), conforme os protocolos de necropsias. Foram testadas as técnicas histoquímicas de Azul Alciano, Azul de Metileno, Azul de Toluidina, Giemsa, Gram (método de McCallum-Goodpasture), Grocott, Ácido Periódico de Schiff e Ziehl-Neelsen. Dentre estas, observou-se que as técnicas de Azul de Metileno e Azul de Toluidina permitiram observar características morfológicas e tintoriais de maneira mais nítida, auxiliando na identificação de B. bovis. Adicionalmente, foram estabelecidos vários parâmetros clínico-epidemiológicos e anatomopatológicos da babesiose por B. bovis.(AU)

Babesiosis is a hemolytic tick-borne disease caused by intraerythrocytic protozoal parasites of the genus Babesia. This is a disease of high incidence in the southern Brazil and responsible for considerable economic losses. Clinical-pathological diagnosis can be made by demonstrating the parasite by examining blood smears or fresh tissues. However, frequently, only formalin-fixed organs are sent to pathology laboratories, which makes it impossible to perform the smears. The main objective of this study was to find alternative histochemical techniques capable to improve the identification of intraerythrocytic Babesia bovis in histological sections. For this study, tissue samples from 50 bovine necropsy cases were retrospectively analyzed, which had been fixed in formalin and routinely processed for histopathology. The cases were divided into a control group, consisting of 12 cases of cerebral babesiosis with characteristic pink-cherry gray matter (group A), and 38 cases suggestive of cattle tick fever (group B), according to necropsy protocols. Histochemical techniques of Alcian Blue, Methylene Blue, Toluidine Blue, Giemsa, Gram (McCallum-Goodpasture method), Grocott, Periodic Acid of Schiff and Ziehl-Neelsen were tested. Among these, it was observed that the techniques of Methylene Blue and Toluidine Blue allowed to observe morphological and dye characteristics in a clearer way, aiding in the identification of B. bovis. In addition, several clinical-epidemiological and anatomopathological parameters of babesiosis caused by B. bovis were established.(AU)

Caracterização histoquímica no diagnóstico da babesiose bovina por Babesia bovis / Histochemical characterization in the diagnosis of bovine babesiosis by Babesia bovis

A babesiose é uma doença hemolítica transmitida por carrapatos e causada por protozoários intraeritrocitários do gênero Babesia. Esta é uma doença de incidência elevada na Região Sul do Brasil e responsável por perdas econômicas consideráveis. O diagnóstico clínico-patológico pode ser feito através da demonstração do parasito pelo exame de esfregaços sanguíneos ou de tecidos frescos. Entretanto, com frequência, somente órgãos fixados em formol são remetidos para laboratórios de patologia, o que impossibilita a realização do esfregaço. O principal objetivo deste estudo foi encontrar técnicas histoquímicas alternativas e capazes de aprimorar a evidenciação de Babesia bovis intraeritrocitária em tecidos fixados em formol. Para este estudo, foram analisadas retrospectivamente amostras de tecidos de 50 casos de necropsias de bovinos, as quais haviam sido fixadas em formol e processadas rotineiramente para histopatologia. Os casos foram divididos em um grupo controle, constituído por 12 casos de babesiose cerebral com substância cinzenta encefálica róseo-cereja característica (grupo A), e 38 casos sugestivos de tristeza parasitária bovina (grupo B), conforme os protocolos de necropsias. Foram testadas as técnicas histoquímicas de Azul Alciano, Azul de Metileno, Azul de Toluidina, Giemsa, Gram (método de McCallum-Goodpasture), Grocott, Ácido Periódico de Schiff e Ziehl-Neelsen. Dentre estas, observou-se que as técnicas de Azul de Metileno e Azul de Toluidina permitiram observar características morfológicas e tintoriais de maneira mais nítida, auxiliando na identificação de B. bovis. Adicionalmente, foram estabelecidos vários parâmetros clínico-epidemiológicos e anatomopatológicos da babesiose por B. bovis.(AU)

Babesiosis is a hemolytic tick-borne disease caused by intraerythrocytic protozoal parasites of the genus Babesia. This is a disease of high incidence in the southern Brazil and responsible for considerable economic losses. Clinical-pathological diagnosis can be made by demonstrating the parasite by examining blood smears or fresh tissues. However, frequently, only formalin-fixed organs are sent to pathology laboratories, which makes it impossible to perform the smears. The main objective of this study was to find alternative histochemical techniques capable to improve the identification of intraerythrocytic Babesia bovis in histological sections. For this study, tissue samples from 50 bovine necropsy cases were retrospectively analyzed, which had been fixed in formalin and routinely processed for histopathology. The cases were divided into a control group, consisting of 12 cases of cerebral babesiosis with characteristic pink-cherry gray matter (group A), and 38 cases suggestive of cattle tick fever (group B), according to necropsy protocols. Histochemical techniques of Alcian Blue, Methylene Blue, Toluidine Blue, Giemsa, Gram (McCallum-Goodpasture method), Grocott, Periodic Acid of Schiff and Ziehl-Neelsen were tested. Among these, it was observed that the techniques of Methylene Blue and Toluidine Blue allowed to observe morphological and dye characteristics in a clearer way, aiding in the identification of B. bovis. In addition, several clinical-epidemiological and anatomopathological parameters of babesiosis caused by B. bovis were established.(AU)

Caracterização histoquímica no diagnóstico da babesiose bovina por Babesia bovis

ABSTRACT: Babesiosis is a hemolytic tick-borne disease caused by intraerythrocytic protozoal parasites of the genus Babesia. This is a disease of high incidence in the southern Brazil and responsible for considerable economic losses. Clinical-pathological diagnosis can be made by demonstrating the parasite by examining blood smears or fresh tissues. However, frequently, only formalin-fixed organs are sent to pathology laboratories, which makes it impossible to perform the smears. The main objective of this study was to find alternative histochemical techniques capable to improve the identification of intraerythrocytic Babesia bovis in histological sections. For this study, tissue samples from 50 bovine necropsy cases were retrospectively analyzed, which had been fixed in formalin and routinely processed for histopathology. The cases were divided into a control group, consisting of 12 cases of cerebral babesiosis with characteristic pink-cherry gray matter (group A), and 38 cases suggestive of cattle tick fever (group B), according to necropsy protocols. Histochemical techniques of Alcian Blue, Methylene Blue, Toluidine Blue, Giemsa, Gram (McCallum-Goodpasture method), Grocott, Periodic Acid of Schiff and Ziehl-Neelsen were tested. Among these, it was observed that the techniques of Methylene Blue and Toluidine Blue allowed to observe morphological and dye characteristics in a clearer way, aiding in the identification of B. bovis. In addition, several clinical-epidemiological and anatomopathological parameters of babesiosis caused by B. bovis were established.

RESUMO: A babesiose é uma doença hemolítica transmitida por carrapatos e causada por protozoários intraeritrocitários do gênero Babesia. Esta é uma doença de incidência elevada na Região Sul do Brasil e responsável por perdas econômicas consideráveis. O diagnóstico clínico-patológico pode ser feito através da demonstração do parasito pelo exame de esfregaços sanguíneos ou de tecidos frescos. Entretanto, com frequência, somente órgãos fixados em formol são remetidos para laboratórios de patologia, o que impossibilita a realização do esfregaço. O principal objetivo deste estudo foi encontrar técnicas histoquímicas alternativas e capazes de aprimorar a evidenciação de Babesia bovis intraeritrocitária em tecidos fixados em formol. Para este estudo, foram analisadas retrospectivamente amostras de tecidos de 50 casos de necropsias de bovinos, as quais haviam sido fixadas em formol e processadas rotineiramente para histopatologia. Os casos foram divididos em um grupo controle, constituído por 12 casos de babesiose cerebral com substância cinzenta encefálica róseo-cereja característica (grupo A), e 38 casos sugestivos de tristeza parasitária bovina (grupo B), conforme os protocolos de necropsias. Foram testadas as técnicas histoquímicas de Azul Alciano, Azul de Metileno, Azul de Toluidina, Giemsa, Gram (método de McCallum-Goodpasture), Grocott, Ácido Periódico de Schiff e Ziehl-Neelsen. Dentre estas, observou-se que as técnicas de Azul de Metileno e Azul de Toluidina permitiram observar características morfológicas e tintoriais de maneira mais nítida, auxiliando na identificação de B. bovis. Adicionalmente, foram estabelecidos vários parâmetros clínico-epidemiológicos e anatomopatológicos da babesiose por B. bovis.

CARACTERIZAÇÃO HISTOPATOLÓGICA DA MATRIZ EXTRACELULAR DO SISTEMA NERVOSO CENTRAL DE CÃES COM CINOMOSE CANINA

A cinomose canina é uma enfermidade cosmopolita e endêmica no Brasil, muitas vezes letal, e que pode provocar leucoencefalite desmeilinizante, lesão semelhante à que ocorre na esclerose múltipla humana. Apesar de sua importância, a patogenia da desmielinização não está completamente elucidada e o microambiente encefálico, incluindo a matriz extracelular, é um importante fator adjuvante nessa lesão já descritos na esclerose múltipla, porém ainda não comprovado na cinomose canina. Portanto o objetivo neste trabalho é caracterizar a matriz extracelular do sistema nervoso central de cães com cinomose canina, a partir de técnicas de histoquímica. Foram coletados fragmentos de córtex e cerebelo de 14 cães naturalmente infectados com cinomose canina encaminhados para necropsia no Laboratório de Patologia Animal do Hospital Veterinário da Universidade Federal de Uberlândia. Os fragmentos foram processados rotineiramente e submetidos a coloração histoquímica com Hematoxilina e Eosina (H.E.), Tricrômico de Masson (TM), Periódico Ácido-Schiff (PAS) e Reticulina. As lâminas foram escaneadas pelo aparelho Aperio Scanscope AT- Leica e lidas a partir do software ImageScope. Além disso as imagens foram transferidas para o software ImageJ e então as marcações das colorações foram quantificadas em lesões de desmielinização, necrose e áreas não lesionadas. Notou-se que a desmielinização foi a lesão mais frequente no H.E., e também foi a mais identificada na coloração de PAS. Os fragmentos corados com TM evidenciaram marcação azulada em vasos e meninge, em intensidades diferentes, o que indica uma mudança na composição da parede vascular que apresenta uma maior deposição de fibras colágenas nesse local. Além disso, na coloração de reticulina observou-se mudança uma maior desorganização da parede vascular, principalmente nas áreas de necrose. Nessas mesmas áreas notou-se pigmentação rosada no interior de macrófagos corados com PAS, indicando uma participação dessas células na estruturação da matriz extracelular do SNC de cães com cinomose canina. Nossa pesquisa evidenciou uma participação da matriz extracelular na patogenia da cinomose canina utilizando colorações histoquímicas facilmente encontradas na rotina de laboratório histopatológico. Mais estudos são necessários para um melhor detalhamento da participação dessas moléculas na patogenia dessa doença viral.

Canine distemper is a cosmopolitan disease, usually lethal, endemic in Brazil, and it can cause demyelinating leucoencephalitis, similar to human multiple sclerosis. Demyelination is not completely understood, even though it is important, and the encephalic microenvironment, including the extracellular matrix, is an important key factor in this lesion previously described in multiple sclerosis but not proved in canine distemper. Thereby, the aim of this work is to characterize the extracellular matrix using histochemical techniques in the encephalon of dogs naturally infected by canine distemper. Samples of cortex and cerebellum of 14 naturally infected dogs with canine distemper were collected after being sent for necropsy in the Animal Pathology Laboratory of the Veterinary Hospital of Uberlândia Federal University. The samples were processed as routine and submitted to histochemical stain with Hematoxylin and Eosin (H.E), Masson Trichrome (MT), Periodic Acid-Schiff (PAS) and Reticulin. The slides were scanned by Aperio Scanscope AT Leica and were read through ImageScope software. In addition, the images were transferred to ImageJ and the stain was quantified in areas of demyelination, necrosis, and non-lesion. Demyelination was the most frequent lesion in H.E. and it was also more noted in PAS. The TM samples showed blue stain around vessels and meninge, which indicates a change in the vascular wall composition showing more collagen deposition in this area. Reticulin stain pointed a disorganization in the vascular wall, more visible at necrotic areas. Still in that lesioned area, PAS stained pink inside macrophages, pointing that these cells were involved in the structure of the extracellular matrix in the encephalon. This study proved an involvement of the extracellular matrix in the pathogeny of canine distemper by the usage of histochemical stains easily found in histopathology laboratories. More researches should be done to better detail the involvement of these molecules in the course of this viral disease.

Leaf anatomy of Cordiera sessilis (Vell. ) Kuntze (Rubiaceae) / Anatomia foliar de Cordiera sessilis (Vell.) Kuntze (Rubiaceae)

A study on the leaf anatomy of Cordiera sessilis (Rubiaceae), a native medicinal shrub from Brazilian Cerrado was carried out to identify features that may be useful in species recognition. Leaves were collected, fixed and processed by usual techniques, and studied by light and electron microscopy. Quantitative analyzes of stomata and trichomes were performed. In addition to the typical anatomical characteristics of Rubiaceae leaves, two types of vascular patterns were identified in the petiole: in distal part, the vascular system is arranged cylindrically surrounded by sclerenchyma sheath and in proximal part the vascular system is arranged in U-shape coupled to sclerified cells. The micromorphological organization of leaf surface, epicuticular wax types, the petiole pattern and histochemical characteristics as the presence of druses, crystal sand and alkaloids and absence of raphides in the mesophyll, midrib and petiole are considerate representative characteristics of C. sessilis and may be useful in the species recognition.(AU)

A study on the leaf anatomy of Cordiera sessilis (Rubiaceae), a native medicinal shrub from Brazilian Cerrado was carried out to identify features that may be useful in species recognition. Leaves were collected, fixed and processed by usual techniques, and studied by light and electron microscopy. Quantitative analyzes of stomata and trichomes were performed. In addition to the typical anatomical characteristics of Rubiaceae leaves, two types of vascular patterns were identified in the petiole: in distal part, the vascular system is arranged cylindrically surrounded by sclerenchyma sheath and in proximal part the vascular system is arranged in U-shape coupled to sclerified cells. The micromorphological organization of leaf surface, epicuticular wax types, the petiole pattern and histochemical characteristics as the presence of druses, crystal sand and alkaloids and absence of raphides in the mesophyll, midrib and petiole are considerate representative characteristics of C. sessilis and may be useful in the species recognition.(AU)

Oral fibrosarcoma in jararaca (Bothrops pubescens): anatomopathological and immunohistochemical aspects / Fibrossarcoma oral em jararaca (Bothrops pubescens): aspectos anatomopatológicos e imuno-histoquímicos

A 4-year-old female captive-bred snake of the genus Bothrops showed swelling on the left side of the oral cavity, suggesting the development of neoplasia. The mass was removed surgically and sent for pathological examination. Two months later a new increase in volume in the same site was observed, suggesting recurrence. The lesion was completely removed and sent for pathological analysis. Histologically, the two-samples consisted of a mass with highly-cell density composed of spindle-shaped anaplastic cells arranged in interwoven bundles, distributed throughout the tissue extension and, occasionally, polygonal cells arranged in irregular fascicles. The Masson trichrome staining showed modest amount of collagen supporting the neoplastic cells. PAS-positive content was not observed in the cytoplasm of neoplastic cells. Histological and histochemical findings indicated that it was a spindle cell neoplasm, but the classification was not possible. Immunohistochemistry was requested and performed using the streptavidin-biotin-peroxidase method. The markers used were anti-vimentin, anti-PCNA, anti-EMA, anti-melan A and anti-melanosome, anti-desmin, anti-actin, anti-CD68 and anti- S100protein. The neoplastic cells were immunoreactive for vimentin and PCNA and negative for the other antibodies. The morphology characterization, histochemical and immunohistochemical analysis of neoplastic cells allowed the definitive diagnosis of oral fibrosarcoma.(AU)

Uma serpente de cativeiro, fêmea, quatro anos de idade, do gênero Bothrops apresentou aumento de volume no lado esquerdo da cavidade oral, sugerindo tratar-se de neoplasma. A massa foi removida cirurgicamente e enviada para exame anatomopatológico. Dois meses depois foi observado novo aumento de volume no mesmo local, sugerindo recidiva. A lesão foi removida por completo e também enviada para análise. Histologicamente, as duas amostras consistiam de massa altamente celular, composta por células anaplásicas fusiformes organizadas em feixes entrelaçados e distribuídos por toda extensão tecidual e, ocasionalmente, células poligonais arranjadas em fascículos irregulares. A coloração de tricrômico de Masson apresentou quantidade modesta de colágeno sustentando as células neoplásicas. Não foi observado conteúdo PAS-positivo no citoplasma das células neoplásicas. Os achados histológicos e histoquímicos indicavam tratar-se de neoplasma de células fusiformes, porém não era possível sua classificação. A imuno-histoquímica foi requisitada e realizada pelo método streptavidina-biotina-peroxidase, utilizando os anticorpos anti-vimentina, anti-PCNA, Anti-EMA, anti-melan A, anti-HMB45, anti-desmina, anti-actina, anti-CD68 e anti-proteína S-100. As células neoplásicas foram imunorreativas para vimentina e PCNA e, negativas para os demais anticorpos. A caracterização morfológica, histoquímica e imuno-histoquímica das células neoplásicas permitiu o diagnóstico definitivo de fibrossarcoma oral.(AU)

Histoquímica e morfometria da placenta de ratas tratadas com dexametasona / Placental morphometry and histochemistry in rats treated with dexamethasone in early pregnancy

A dexametasona, um glicocorticóide sintético, tem a capacidade de atravessar a placenta aumentando o nível de circulação de corticosteróides da mãe para o feto durante a prenhez. Quando administrada nas fases finais da prenhez pode produzir efeitos indesejáveis na formação da placenta e em vários órgãos da prole. Assim, o presente estudo objetivou investigar o efeito da administração da dexametasona (0,8mg/dia/animal) nos cinco primeiros dias da prenhez, sobre o desenvolvimento placentário de ratas. Utilizou-se 30 ratas albinas, divididas em dois grupos: Grupo I -ratas prenhes sem aplicação de dexametasona, sacrificadas ao 7º e 14º dia; Grupo II -ratas submetidas à aplicação de dexametasona nos cinco primeiros dias de prenhez, sacrificadas ao 7º e 14º dia. Os resultados mostraram que a dexametasona não afetou o número e a histologia dos sítios de implantação, porém, promoveu alteração no disco placentário ocasionando hipertrofia na camada de células trofoblásticas gigantes. Não foram evidenciadas alterações no teor de colágeno, porém houve interferência no metabolismo do glicogênio no espongiotrofoblasto trofospongio. Na morfometria de linhas houve diferença entre os grupos na região de labirinto e células trofoblásticas gigantes, porém a morfometria de pontos só ratificou as alterações percebidas na região do labirinto.(AU)

The dexamethasone, a synthetic glucocorticoid, has the ability to cross the placenta by increasing the level of movement of corticosteroids from mother to fetus during pregnancy. When administered in the late stages of pregnancy can produce effects undesirable on placental formation. The present study aimed to investigate the effect of administration of dexamethasone (0.8mg/day/animal) in the first five days of pregnancy, on placental development in rats. We used 30 albino rats, divided into two groups: Group I -pregnant rats without the application of dexamethasone, sacrificed to the 7th and 14th day. Group II -rats subjected to the application of dexamethasone in the first five days of pregnancy, sacrificed to the 7th and 14th day. The results showed that dexamethasone did not affect the number and histology of the implantation sites, but promoted changes in the disk placental causing hypertrophy in trophoblastic giant cell layer. No changes were found in the content of collagen, but there was interference with the metabolism of glycogen in spongiotrophoblast. The morphometry of lines showed, a difference between groups in the region of labyrinth and trophoblast giant cell. However, in morphometry of points there was a difference between groups in the region of labyrinth.(AU)

Intoxicação crônica por cobre em ovinos: conduta para o diagnóstico conclusivo / Chronic copper toxicities in sheep: conduct for diagnostic confirmation

Descreveram-se os sinais clínicos e achados anatomopatológicos da intoxicação crônica por cobre em um ovino da raça Texxel e definiu-se a conduta diagnóstica correta para confirmação da enfermidade. Um ovino foi encaminhado ao setor de patologia com histórico de apatia, hemoglobinúria e morte em dois a três dias. No exame necroscópico, observaram-se icterícia e edema subcutâneo, fígado aumentado de volume e amarelado e rins escuros. No exame histológico, observaram-se necrose zonal aleatória e acentuada no fígado, necrose epitelial tubular, gotas hialinas e cilindros marrom-alaranjados em túbulos coletores dos rins. O histórico alimentar, a sensibilidade de espécie/raça, o quadro clínico, as alterações macroscópicas e microscópicas sugeriram o quadro de intoxicação crônica por cobre. A confirmação diagnóstica somente foi possível após a marcação de pigmentos de cobre pela técnica histoquímica de Ulzmann e pela quantificação de cobre em matéria seca de fígado e rins, cujos valores foram mais altos que o normal.(AU)

The present work describes the clinical signs and anatomopathological findings of chronic copper toxicities in a Texxel breed sheep and defines the optimal diagnostic procedure for confirmation of the disorder. A sheep was sent to pathology analysis service with a history of apathy, hemoglobinuria and death within two to three days. Necropsy showed jaundice and subcutaneous edema, enlarged yellow liver and dark kidneys. The histologic examination showed random zonal necrosis, marked necrosis in the liver and tubular epithelial and orange-brown spotted hyaline cylinders in the collecting tubules of the kidneys. The dietary history, sensitivity of species/breed, clinical, macroscopic and microscopic alterations suggested the framework of chronic copper poisoning. Diagnostic confirmation was only possible after staining copper pigments trough the Ulzmann technique and quantification of copper in the dry liver and kidney, which were higher than normal levels.(AU)

CARACTERIZAÇÃO HISTOQUÍMICA NO DIAGNÓSTICO DA BABESIOSE BOVINA POR Babesia bovis.

A babesiose é uma doença hemolítica transmitida por carrapatos e causada por protozoários intraeritrocitários do gênero Babesia. Esta é uma doença de incidência elevada na Região Sul do Brasil e responsável por perdas econômicas consideráveis. O diagnóstico clínico-patológico pode ser feito através da demonstração do parasita pelo exame de esfregaços sanguíneos ou de tecidos frescos. Entretanto, com frequência, somente órgãos fixados em formol são remetidos para laboratórios de patologia, o que impossibilita a realização do esfregaço. O principal objetivo deste estudo foi encontrar técnicas histoquímicas alternativas e capazes de aprimorar a evidenciação de B. bovis intraeritrocitária. Para este estudo, foram analisadas, retrospectivamente, amostras de tecidos de 50 casos de necropsias de bovinos, as quais haviam sido fixadas em formol e processadas rotineiramente para histopatologia. Os casos foram divididos em um grupo controle, constituído por 12 casos de babesiose cerebral com substância cinzenta encefálica róseo-cereja característica (grupo A), e 38 casos sugestivos de tristeza parasitária bovina (grupo B), conforme os protocolos de necropsias. Foram testadas as técnicas histoquímicas de Azul Alciano, Azul de Metileno, Azul de Toluidina, Giemsa, Gram (método de McCallum-Goodpasture), Grocott, Ácido Periódico de Schiff e Ziehl-Neelsen. Dentre estas, observou-se que as técnicas de Azul de Metileno e Azul de Toluidina permitiram observar características morfológicas e tintoriais de maneira mais nítida, auxiliando na identificação de B. bovis. Adicionalmente, foram estabelecidos vários parâmetros clínico-epidemiológicos e anatomopatológicos da babesiose por B. bovis.

Babesiosis is a hemolytic tick-borne disease caused by intraerythrocytic protozoal parasites of the genus Babesia. This is a disease of high incidence in the South region of Brazil and responsible for considerable economic losses. Clinical-pathological diagnosis can be made by demonstrating the parasite by examining blood smears or fresh tissues. However, frequently, only formalin-fixed organs are sent to pathology laboratories, which makes it impossible to perform the smears. The main objective of this study was to find alternative histochemical techniques capable to improve the identification of intraerythrocytic B. bovis in histological sections. For this study, tissue samples from 50 bovine necropsy cases were retrospectively analyzed, which had been fixed in formalin and routinely processed for histopathology. The cases were divided into a control group, consisting of 12 cases of cerebral babesiosis with characteristic pink-cherry gray matter (group A), and 38 cases suggestive of cattle tick fever (group B), according to necropsy protocols. Histochemical techniques of Alcian Blue, Methylene Blue, Toluidine Blue, Giemsa, Gram (McCallum-Goodpasture method), Grocott, Periodic Acid of Schiff and Ziehl-Neelsen were tested. Among these, it was observed that the techniques of Methylene Blue and Toluidine Blue allowed to observe morphological and dye characteristics in a clearer way, aiding in the identification of B. bovis. In addition, several clinical-epidemiological and anatomopathological parameters of babesiosis caused by B. bovis were established.

Cephalic salivary glands of two species of advanced eusocial bees (Hymenoptera: Apidae): morphology and secretion

Some adult eusocial bees have a pair of cephalic salivary glands (CSG) in addition to the thoracic labial or salivary gland pairs. This paper deals with variations in morphological features and secretion production of the CSG of females and males of Apis mellifera Linnaeus, 1758 and Scaptotrigona postica Latreille, 1807. The following life stages were studied: newly emerged, nurse, and forager workers; newly emerged and egg-laying queens; and newly emerged and sexually mature males. The histological results showed that the CSG differs between the two species in the following features: while alveoli and duct cells are cuboidal in workers and queens of A. mellifera, they change from cuboidal to flat in S. postica as the workers age. The glands of newly emerged males and females of A. mellifera are similar. However, as males become sexually mature, glands degenerate and practically disappear. The secretion from the glands of females of both species is oleaginous and gradually accumulates in the lumen of the alveoli in the beginning of the adult phase. Consequently, forager workers and egg-laying queens exhibit more turgid alveoli than younger individuals. Sudan black and Nile's blue staining indicated that the CSG secretion consists of neutral lipids. The possible role of gland secretion is discussed taking in account tasks performed by the individuals in the particular phases studied.

Cephalic salivary glands of two species of advanced eusocial bees (Hymenoptera: Apidae): morphology and secretion

Some adult eusocial bees have a pair of cephalic salivary glands (CSG) in addition to the thoracic labial or salivary gland pairs. This paper deals with variations in morphological features and secretion production of the CSG of females and males of Apis mellifera Linnaeus, 1758 and Scaptotrigona postica Latreille, 1807. The following life stages were studied: newly emerged, nurse, and forager workers; newly emerged and egg-laying queens; and newly emerged and sexually mature males. The histological results showed that the CSG differs between the two species in the following features: while alveoli and duct cells are cuboidal in workers and queens of A. mellifera, they change from cuboidal to flat in S. postica as the workers age. The glands of newly emerged males and females of A. mellifera are similar. However, as males become sexually mature, glands degenerate and practically disappear. The secretion from the glands of females of both species is oleaginous and gradually accumulates in the lumen of the alveoli in the beginning of the adult phase. Consequently, forager workers and egg-laying queens exhibit more turgid alveoli than younger individuals. Sudan black and Nile's blue staining indicated that the CSG secretion consists of neutral lipids. The possible role of gland secretion is discussed taking in account tasks performed by the individuals in the particular phases studied.

Cephalic salivary glands of two species of advanced eusocial bees (Hymenoptera: Apidae): morphology and secretion

Some adult eusocial bees have a pair of cephalic salivary glands (CSG) in addition to the thoracic labial or salivary gland pairs. This paper deals with variations in morphological features and secretion production of the CSG of females and males of Apis mellifera Linnaeus, 1758 and Scaptotrigona postica Latreille, 1807. The following life stages were studied: newly emerged, nurse, and forager workers; newly emerged and egg-laying queens; and newly emerged and sexually mature males. The histological results showed that the CSG differs between the two species in the following features: while alveoli and duct cells are cuboidal in workers and queens of A. mellifera, they change from cuboidal to flat in S. postica as the workers age. The glands of newly emerged males and females of A. mellifera are similar. However, as males become sexually mature, glands degenerate and practically disappear. The secretion from the glands of females of both species is oleaginous and gradually accumulates in the lumen of the alveoli in the beginning of the adult phase. Consequently, forager workers and egg-laying queens exhibit more turgid alveoli than younger individuals. Sudan black and Nile's blue staining indicated that the CSG secretion consists of neutral lipids. The possible role of gland secretion is discussed taking in account tasks performed by the individuals in the particular phases studied.

Diagnóstico histoquímico e imunoistoquímico da enteropatia proliferativa (Lawsonia intracellularis) em suínos / Detection of swine proliferative enteropathy (Lawsonia intracellularis) in slaughtered pigs by histochemical and immunohistochemical techniques

Estudou-se a eficácia do diagnóstico macroscópico de lesões da enteropatia proliferativa suína (EPS) usando-se fragmentos de íleo de 663 suínos, coletados em abatedouros localizados em três municípios do Rio Grande do Sul. As amostras foram processadas por métodos histológicos rotineiros e coradas por uma técnica desenvolvida pela combinação das colorações Warthin-Starry, alcian blue e hematoxilina-eosina para detecção simultânea de Lawsonia intracellularis e lesões associadas com EPS. Lâminas suspeitas de EPS foram submetidas à técnica de imunoistoquímica, utilizando anticorpo policlonal anti-Lawsonia intracellularis na diluição de 1:15.000 pelo método avidina-biotina. A coloração combinada detectou 11 casos positivos, e a imunoistoquímica, nove casos adicionais. Entre as 643 amostras consideradas negativas, 12 apresentaram desaparecimento de células caliciformes e proliferação adenomatosa características de EPS, mas ausência de bactérias intracelulares. A eficiência do exame macroscópico para diagnóstico de EPS foi medida pela associação entre os resultados das avaliações macroscópicas e histológicas realizadas em 219 amostras. Embora 51 delas tenham sido consideradas macroscopicamente positivas, apenas quatro foram confirmadas pela presença de bactérias intracelulares associadas com lesões características de EPS. Não se observou associação entre as alterações macroscópicas e histológicas de EPS.(AU)

Fragments of terminal ileum were collected from 663 pigs at slaughter from three municipalities of the Rio Grande do Sul state, southern Brazil, to study the efficacy of the macroscopic diagnosis of porcine proliferative enteropathy (PPE). All samples were processed by standard histological methods and stained with a technique that combined Warthin-Starry, alcian blue and hematoxylin-eosin. Sections were simultaneously evaluated for the detection of Lawsonia intracellularis and lesions associated with PPE. Sections in which the occurrence of PPE was suspected were stained by the avidin-biotin immunoperoxidase technique using a polyclonal antiserum to Lawsonia intracellularis, at the dilution of 1:15,000. The histochemical method detected 11 positive sections and immunohistochemical staining detected additional nine positive cases. Twelve out of 643 negative samples had reduced number of goblet cells and adenomatous proliferation without any detectable bacteria. The efficiency of gross evaluation for detecting PPE was measured through the comparison between the results from gross and histological evaluations performed on samples from 219 animals. Although 51 of these samples were considered positive by gross evaluations, only four of them were confirmed as positive by detection of intracellular bacteria associated with characteristic lesions of PPE. The association between gross and histological changes often reported in PPE was not observed in this study.(AU)

Histochemical comparative study of primary and metastatic tumors in nude rats xenotransplanted with KB cells / Estudo histoquímico comparativo da matriz extracelular dc tumores primários e metastáticos em ratos nude xenotransplantados com células KB

A comparative study of metastic and primitive tumors extra-celular matrix in nude rats, xenotransplanted with KB cells, using histochemical methods, was carried out. In both primitive and metastatic tumors it was possible to observe a qualitative and a quantitative variation of matricial components; coexistence of different kinds of fibers; small representation of elastic fibers; presence of acid and sulfated glycosaminoglycans and neutral polysacharyds, and also absence of basal membrane. It is suggested a small interaction between collagenic components and proteoglycan of primary tumors and the proteoglycan, whereas in métastasés this interaction is increased.

Estudou-se comparativamente, através de métodos histoquímicos, a expressão dos componentes da matriz extracelular de tumores primitivos e metastáticos em ratos nude, xenotransplantados com células KB. Em ambas as neoplasias observou-se uma variabilidade tanto qualitativa como quantitativa dos componentes matriciais, coexistência de diferentes tipos de fibras, pouca representatividade de fibras elásticas de glicosaminoglicanas ácidas e sulfatadas e de polissacarídeos neutros, além da ausência de membrana basal.

Histochemical comparative study of primary and metastatic tumors in nude rats xenotransplanted with KB cells / Estudo histoquímico comparativo da matriz extracelular dc tumores primários e metastáticos em ratos nude xenotransplantados com células KB

A comparative study of metastic and primitive tumors extra-celular matrix in nude rats, xenotransplanted with KB cells, using histochemical methods, was carried out. In both primitive and metastatic tumors it was possible to observe a qualitative and a quantitative variation of matricial components; coexistence of different kinds of fibers; small representation of elastic fibers; presence of acid and sulfated glycosaminoglycans and neutral polysacharyds, and also absence of basal membrane. It is suggested a small interaction between collagenic components and proteoglycan of primary tumors and the proteoglycan, whereas in métastasés this interaction is increased.

Estudou-se comparativamente, através de métodos histoquímicos, a expressão dos componentes da matriz extracelular de tumores primitivos e metastáticos em ratos nude, xenotransplantados com células KB. Em ambas as neoplasias observou-se uma variabilidade tanto qualitativa como quantitativa dos componentes matriciais, coexistência de diferentes tipos de fibras, pouca representatividade de fibras elásticas de glicosaminoglicanas ácidas e sulfatadas e de polissacarídeos neutros, além da ausência de membrana basal.