Biochemical characterization and cytotoxic effect of the skin secretion from the red-spotted Argentina frog Argenteohyla siemersi (Anura: Hylidae)

Argenteohyla siemersi (red-spotted Argentina frog) is a casque-headed tree frog species belonging to the Hylidae family. This species has a complex combination of anti-predator defense mechanisms that include a highly lethal skin secretion. However, biochemical composition and biological effects of this secretion have not yet been studied. Methods: The A. siemersi skin secretion samples were analyzed by mass spectrometry and chromatographic analysis (MALDI-TOF/MS, RP-HPLC and GC-MS). Proteins were also studied by SDS-PAGE. Among the biological activities evaluated, several enzymatic activities (hemolytic, phospholipase A2, clotting, proteolytic and amidolytic) were assessed. Furthermore, the cytotoxic activity (cytolysis and fluorescence staining) was evaluated on myoblasts of the C2C12 cell line. Results: The MALDI-TOF/MS analysis identified polypeptides and proteins in the aqueous solution of A. siemersi skin secretion. SDS-PAGE revealed the presence of proteins with molecular masses from 15 to 55 kDa. Steroids, but no alkaloids or peptides (less than 5 KDa), were detected using mass spectrometry. Skin secretion revealed the presence of lipids in methanolic extract, as analyzed by CG-MS. This secretion showed hemolytic and phospholipase A2 activities, but was devoid of amidolytic, proteolytic or clotting activities. Moreover, dose-dependent cytotoxicity in cultured C2C12 myoblasts of the skin secretion was demonstrated. Morphological analysis, quantification of lactate dehydrogenase release and fluorescence staining indicated that the cell death triggered by this secretion involved necrosis. Conclusions: Results presented herein evidence the biochemical composition and biological effects of A. siemersi skin secretion and contribute to the knowledge on the defense mechanisms of casque-headed frogs.(AU)

Biochemical characterization and cytotoxic effect of the skin secretion from the red-spotted Argentina frog Argenteohyla siemersi (Anura: Hylidae)

Background:Argenteohyla siemersi (red-spotted Argentina frog) is a casque-headed tree frog species belonging to the Hylidae family. This species has a complex combination of anti-predator defense mechanisms that include a highly lethal skin secretion. However, biochemical composition and biological effects of this secretion have not yet been studied.Methods:The A. siemersi skin secretion samples were analyzed by mass spectrometry and chromatographic analysis (MALDI-TOF/MS, RP-HPLC and GC-MS). Proteins were also studied by SDS-PAGE. Among the biological activities evaluated, several enzymatic activities (hemolytic, phospholipase A2, clotting, proteolytic and amidolytic) were assessed. Furthermore, the cytotoxic activity (cytolysis and fluorescence staining) was evaluated on myoblasts of the C2C12 cell line.Results:The MALDI-TOF/MS analysis identified polypeptides and proteins in the aqueous solution of A. siemersi skin secretion. SDS-PAGE revealed the presence of proteins with molecular masses from 15 to 55 kDa. Steroids, but no alkaloids or peptides (less than 5 KDa), were detected using mass spectrometry. Skin secretion revealed the presence of lipids in methanolic extract, as analyzed by CG-MS. This secretion showed hemolytic and phospholipase A2 activities, but was devoid of amidolytic, proteolytic or clotting activities. Moreover, dose-dependent cytotoxicity in cultured C2C12 myoblasts of the skin secretion was demonstrated. Morphological analysis, quantification of lactate dehydrogenase release and fluorescence staining indicated that the cell death triggered by this secretion involved necrosis.Conclusions:Results presented herein evidence the biochemical composition and biological effects of A. siemersi skin secretion and contribute to the knowledge on the defense mechanisms of casque-headed frogs.(AU)

Effect of traffic noise on Scinax nasicus advertisement call (Amphibia, Anura) / Efecto del ruído del tráfico en la vocalización de machos de Scinax nasicus (Amphibia, Anura)

El aumento de los sonidos de origen antropogénico, como los ruidos del tráfico, contribuyen a la contaminación acústica, que produce un efecto nocivo en el canto de los vertebrados. Comparamos la vocalización de machos de Scinax nasicus (Cope, 1862) en ambientes naturales (como referencia o control, Sitio A) y sitios afectados por ruidos de tráfico (Sitio B). La estructura de la vocalización se registró y amplificó en sonogramas (software Raven Pro 1.5). Se midieron siete variables de su vocalización: duración (s), número de notas, número de pulsos por nota, frecuencia máxima, mínima y dominante (kHz) y amplitud (dB). Además, en cada sitio se midió el ruido de fondo (frecuencia fundamental, la F0 y amplitud, dB). La amplitud del ruido de fondo alcanzó valores más altos (68.02 dB) en el Sitio B, en el Sitio A fue menor (34.81 dB). Por lo tanto, el F0 en el Sitio A fue de 6.28 kHz y en el Sitio B fue de 4.15 kHz. Las vocalizaciones de esta rana en el ambiente con ruido de tráfico (Sitio B) se caracterizaron por menor duración (s) y número de pulsos por nota, mayor amplitud (dB) y frecuencias máximas y dominantes más altas (kHz), baja frecuencia mínima en comparación con el ambiente control (Sitio A). Nuestro estudio resaltó que los machos de S. nasicus cambian su estructura vocal en estanques de ruido de tráfico, principalmente por ajuste vocal de sus frecuencias y amplitud para contrarrestar el efecto de enmascaramiento del ruido. Finalmente, el monitoreo acústico de anuros en ambientes ruidosos debe considerar el solapamiento espacial, temporal y espectral entre ruido acústico específico y el comportamiento de la especie.(AU)

Increased anthropogenic-made sounds such as traffic noises contribute to acoustic pollution, which produces deleterious effect on song-vertebrates. We compared the advertisement call of Scinax nasicus (Cope, 1862) males in natural (as a reference or control, Site A) and Sites affected by traffic noises (Site B). Call structure was recorded and it was amplified in sonograms (software Raven Pro 1.5). Seven variables were measured on its advertisement call: duration (s), number of notes, number of pulses per note, maximum and minimum frequency (kHz), dominant frequency (kHz) and amplitude (dB). In addition, at each Site the background noise (the fundamental frequency, F0 and amplitude, dB) was measured. The amplitude of background noise reached higher values (68.02 dB) in Site B, while in Site A was lower (34.81 dB). Thus, the F0 in Site A was 6.28 kHz and in Site B it was 4.15 kHz. Frog call in noisy environment (Site B) were characterized by lesser duration (s) and number of pulses per note, higher maximum and dominant frequencies (kHz), lower minimum frequencies, and amplitude (dB) when compared with control environment (Site A). Our study highlights, that S. nasicus males shift their vocal structure in traffic noisy ponds, mainly by vocal adjust of their frequencies and amplitude to counteract masking effect. Finally, acoustic monitoring of anurans on noise environments should be considering the spatial, temporal and spectral overlap between noise and species-specific acoustic behaviour.(AU)

Effect of traffic noise on Scinax nasicus advertisement call (Amphibia, Anura) / Efecto del ruído del tráfico en la vocalización de machos de Scinax nasicus (Amphibia, Anura)

El aumento de los sonidos de origen antropogénico, como los ruidos del tráfico, contribuyen a la contaminación acústica, que produce un efecto nocivo en el canto de los vertebrados. Comparamos la vocalización de machos de Scinax nasicus (Cope, 1862) en ambientes naturales (como referencia o control, Sitio A) y sitios afectados por ruidos de tráfico (Sitio B). La estructura de la vocalización se registró y amplificó en sonogramas (software Raven Pro 1.5). Se midieron siete variables de su vocalización: duración (s), número de notas, número de pulsos por nota, frecuencia máxima, mínima y dominante (kHz) y amplitud (dB). Además, en cada sitio se midió el ruido de fondo (frecuencia fundamental, la F0 y amplitud, dB). La amplitud del ruido de fondo alcanzó valores más altos (68.02 dB) en el Sitio B, en el Sitio A fue menor (34.81 dB). Por lo tanto, el F0 en el Sitio A fue de 6.28 kHz y en el Sitio B fue de 4.15 kHz. Las vocalizaciones de esta rana en el ambiente con ruido de tráfico (Sitio B) se caracterizaron por menor duración (s) y número de pulsos por nota, mayor amplitud (dB) y frecuencias máximas y dominantes más altas (kHz), baja frecuencia mínima en comparación con el ambiente control (Sitio A). Nuestro estudio resaltó que los machos de S. nasicus cambian su estructura vocal en estanques de ruido de tráfico, principalmente por ajuste vocal de sus frecuencias y amplitud para contrarrestar el efecto de enmascaramiento del ruido. Finalmente, el monitoreo acústico de anuros en ambientes ruidosos debe considerar el solapamiento espacial, temporal y espectral entre ruido acústico específico y el comportamiento de la especie.

Increased anthropogenic-made sounds such as traffic noises contribute to acoustic pollution, which produces deleterious effect on song-vertebrates. We compared the advertisement call of Scinax nasicus (Cope, 1862) males in natural (as a reference or control, Site A) and Sites affected by traffic noises (Site B). Call structure was recorded and it was amplified in sonograms (software Raven Pro 1.5). Seven variables were measured on its advertisement call: duration (s), number of notes, number of pulses per note, maximum and minimum frequency (kHz), dominant frequency (kHz) and amplitude (dB). In addition, at each Site the background noise (the fundamental frequency, F0 and amplitude, dB) was measured. The amplitude of background noise reached higher values (68.02 dB) in Site B, while in Site A was lower (34.81 dB). Thus, the F0 in Site A was 6.28 kHz and in Site B it was 4.15 kHz. Frog call in noisy environment (Site B) were characterized by lesser duration (s) and number of pulses per note, higher maximum and dominant frequencies (kHz), lower minimum frequencies, and amplitude (dB) when compared with control environment (Site A). Our study highlights, that S. nasicus males shift their vocal structure in traffic noisy ponds, mainly by vocal adjust of their frequencies and amplitude to counteract masking effect. Finally, acoustic monitoring of anurans on noise environments should be considering the spatial, temporal and spectral overlap between noise and species-specific acoustic behaviour.

Effect of traffic noise on Scinax nasicus advertisement call (Amphibia, Anura)

RESUMEN El aumento de los sonidos de origen antropogénico, como los ruidos del tráfico, contribuyen a la contaminación acústica, que produce un efecto nocivo en el canto de los vertebrados. Comparamos la vocalización de machos de Scinax nasicus (Cope, 1862) en ambientes naturales (como referencia o control, Sitio A) y sitios afectados por ruidos de tráfico (Sitio B). La estructura de la vocalización se registró y amplificó en sonogramas (software Raven Pro 1.5). Se midieron siete variables de su vocalización: duración (s), número de notas, número de pulsos por nota, frecuencia máxima, mínima y dominante (kHz) y amplitud (dB). Además, en cada sitio se midió el ruido de fondo (frecuencia fundamental, la F0 y amplitud, dB). La amplitud del ruido de fondo alcanzó valores más altos (68.02 dB) en el Sitio B, en el Sitio A fue menor (34.81 dB). Por lo tanto, el F0 en el Sitio A fue de 6.28 kHz y en el Sitio B fue de 4.15 kHz. Las vocalizaciones de esta rana en el ambiente con ruido de tráfico (Sitio B) se caracterizaron por menor duración (s) y número de pulsos por nota, mayor amplitud (dB) y frecuencias máximas y dominantes más altas (kHz), baja frecuencia mínima en comparación con el ambiente control (Sitio A). Nuestro estudio resaltó que los machos de S. nasicus cambian su estructura vocal en estanques de ruido de tráfico, principalmente por ajuste vocal de sus frecuencias y amplitud para contrarrestar el efecto de enmascaramiento del ruido. Finalmente, el monitoreo acústico de anuros en ambientes ruidosos debe considerar el solapamiento espacial, temporal y espectral entre ruido acústico específico y el comportamiento de la especie.

ABSTRACT Increased anthropogenic-made sounds such as traffic noises contribute to acoustic pollution, which produces deleterious effect on song-vertebrates. We compared the advertisement call of Scinax nasicus (Cope, 1862) males in natural (as a reference or control, Site A) and Sites affected by traffic noises (Site B). Call structure was recorded and it was amplified in sonograms (software Raven Pro 1.5). Seven variables were measured on its advertisement call: duration (s), number of notes, number of pulses per note, maximum and minimum frequency (kHz), dominant frequency (kHz) and amplitude (dB). In addition, at each Site the background noise (the fundamental frequency, F0 and amplitude, dB) was measured. The amplitude of background noise reached higher values (68.02 dB) in Site B, while in Site A was lower (34.81 dB). Thus, the F0 in Site A was 6.28 kHz and in Site B it was 4.15 kHz. Frog call in noisy environment (Site B) were characterized by lesser duration (s) and number of pulses per note, higher maximum and dominant frequencies (kHz), lower minimum frequencies, and amplitude (dB) when compared with control environment (Site A). Our study highlights, that S. nasicus males shift their vocal structure in traffic noisy ponds, mainly by vocal adjust of their frequencies and amplitude to counteract masking effect. Finally, acoustic monitoring of anurans on noise environments should be considering the spatial, temporal and spectral overlap between noise and species-specific acoustic behaviour.

Acoustic niche partitioning in an anuran community from the municipality of Floriano, Piauí, Brazil / Partição de nicho acústico em uma comunidade de anuros do município de Floriano, Piauí, Brasil

Vocalizations are an important trait for the identification of cryptic and/or closely related amphibian species. Different vocalizations also contribute to partitioning of the acoustic space by sympatric species. This study aimed to describe the advertisement calls of anurans in a pond of the municipality of Floriano, State of Piauí, Brazil, and infer the acoustic niche partitioning of amphibians. Euclidean distance was used in a cluster analysis approach to infer the acoustic similarities among species. Thirteen species were analysed: Boana raniceps, Dendropsophus nanus, D. rubicundulus , D. minutus, Leptodactylus fuscus, L. troglodytes, L. vastus, Pithecopus nordestinus , Physalaemus cuvieri, P. nattereri, Pleurodema diplolister, Proceratophrys cristiceps and Scinax ruber. From these, six showed more than 90% of acoustic overlap: P. nattereri , P. cuvieri, L. fuscus and L. vastus (Leptodactylidae); and, D. nanus and D. rubicundulus (Hylidae). Despite the acoustic similarities among these six species, the acoustic interference was reduced due to the small number of sympatric species and to distinct features on carrier frequency such as dominant frequency and the degree of modulation in the frequency. Environmental factors limit the periods and sites of reproduction respectively, which may maintain the low anuran diversity and consequently reduce acoustic overlap.(AU)

A vocalização é um componente importante na identificação de espécies crípticas e/ou proximamente relacionadas de anfíbios anuros. Diferenças na bioacústica também contribuem para o particionamento do espaço acústico entre espécies simpátricas. Este estudo descreve o canto de anúncio de anuros em uma lagoa temporária do município de Floriano, Estado do Piauí, Brasil, além de buscar inferir o particionamento do nicho acústico entre essas espécies. Para tanto, foi utilizada a distância Euclidiana para compor uma análise de conglomerados e avaliar a similaridade/dissimilaridade da bioacústica da anurofauna. Treze espécies foram amostradas: Boana raniceps, Dendropsophus nanus, D. rubicundulus , D. minutus, Leptodactylus fuscus, L. troglodytes, L. vastus, Pithecopus nordestinus , Physalaemus cuvieri, P. nattereri, Pleurodema diplolister, Proceratophrys cristiceps e Scinax ruber. Destas, seis apresentaram mais de 90% de sobreposição acústica: P. nattereri, P. cuvieri, L. fuscus e L. vastus (Leptodactylidae); e, D. nanus e D. rubicundulus (Hylidae). Apesar da similaridade acústica entre essas seis espécies, a interferência é reduzida devido ao pequeno número de espécies simpátricas e certas características distintas na frequência do canto, tais como: frequência dominante e sua modulação. Fatores ambientais específicos do semiárido limitam os períodos e sítios reprodutivos, o que mantém baixa diversidade de espécies e consequentemente reduz a sobreposição no nicho acústico.(AU)

Acoustic niche partitioning in an anuran community from the municipality of Floriano, Piauí, Brazil

Abstract Vocalizations are an important trait for the identification of cryptic and/or closely related amphibian species. Different vocalizations also contribute to partitioning of the acoustic space by sympatric species. This study aimed to describe the advertisement calls of anurans in a pond of the municipality of Floriano, State of Piauí, Brazil, and infer the acoustic niche partitioning of amphibians. Euclidean distance was used in a cluster analysis approach to infer the acoustic similarities among species. Thirteen species were analysed: Boana raniceps, Dendropsophus nanus, D. rubicundulus , D. minutus, Leptodactylus fuscus, L. troglodytes, L. vastus, Pithecopus nordestinus , Physalaemus cuvieri, P. nattereri, Pleurodema diplolister, Proceratophrys cristiceps and Scinax ruber. From these, six showed more than 90% of acoustic overlap: P. nattereri , P. cuvieri, L. fuscus and L. vastus (Leptodactylidae); and, D. nanus and D. rubicundulus (Hylidae). Despite the acoustic similarities among these six species, the acoustic interference was reduced due to the small number of sympatric species and to distinct features on carrier frequency such as dominant frequency and the degree of modulation in the frequency. Environmental factors limit the periods and sites of reproduction respectively, which may maintain the low anuran diversity and consequently reduce acoustic overlap.

Resumo A vocalização é um componente importante na identificação de espécies crípticas e/ou proximamente relacionadas de anfíbios anuros. Diferenças na bioacústica também contribuem para o particionamento do espaço acústico entre espécies simpátricas. Este estudo descreve o canto de anúncio de anuros em uma lagoa temporária do município de Floriano, Estado do Piauí, Brasil, além de buscar inferir o particionamento do nicho acústico entre essas espécies. Para tanto, foi utilizada a distância Euclidiana para compor uma análise de conglomerados e avaliar a similaridade/dissimilaridade da bioacústica da anurofauna. Treze espécies foram amostradas: Boana raniceps, Dendropsophus nanus, D. rubicundulus , D. minutus, Leptodactylus fuscus, L. troglodytes, L. vastus, Pithecopus nordestinus , Physalaemus cuvieri, P. nattereri, Pleurodema diplolister, Proceratophrys cristiceps e Scinax ruber. Destas, seis apresentaram mais de 90% de sobreposição acústica: P. nattereri, P. cuvieri, L. fuscus e L. vastus (Leptodactylidae); e, D. nanus e D. rubicundulus (Hylidae). Apesar da similaridade acústica entre essas seis espécies, a interferência é reduzida devido ao pequeno número de espécies simpátricas e certas características distintas na frequência do canto, tais como: frequência dominante e sua modulação. Fatores ambientais específicos do semiárido limitam os períodos e sítios reprodutivos, o que mantém baixa diversidade de espécies e consequentemente reduz a sobreposição no nicho acústico.

Acoustic niche partitioning in an anuran community from the municipality of Floriano, Piauí, Brazil

Abstract Vocalizations are an important trait for the identification of cryptic and/or closely related amphibian species. Different vocalizations also contribute to partitioning of the acoustic space by sympatric species. This study aimed to describe the advertisement calls of anurans in a pond of the municipality of Floriano, State of Piauí, Brazil, and infer the acoustic niche partitioning of amphibians. Euclidean distance was used in a cluster analysis approach to infer the acoustic similarities among species. Thirteen species were analysed: Boana raniceps, Dendropsophus nanus, D. rubicundulus , D. minutus, Leptodactylus fuscus, L. troglodytes, L. vastus, Pithecopus nordestinus , Physalaemus cuvieri, P. nattereri, Pleurodema diplolister, Proceratophrys cristiceps and Scinax ruber. From these, six showed more than 90% of acoustic overlap: P. nattereri , P. cuvieri, L. fuscus and L. vastus (Leptodactylidae); and, D. nanus and D. rubicundulus (Hylidae). Despite the acoustic similarities among these six species, the acoustic interference was reduced due to the small number of sympatric species and to distinct features on carrier frequency such as dominant frequency and the degree of modulation in the frequency. Environmental factors limit the periods and sites of reproduction respectively, which may maintain the low anuran diversity and consequently reduce acoustic overlap.

Resumo A vocalização é um componente importante na identificação de espécies crípticas e/ou proximamente relacionadas de anfíbios anuros. Diferenças na bioacústica também contribuem para o particionamento do espaço acústico entre espécies simpátricas. Este estudo descreve o canto de anúncio de anuros em uma lagoa temporária do município de Floriano, Estado do Piauí, Brasil, além de buscar inferir o particionamento do nicho acústico entre essas espécies. Para tanto, foi utilizada a distância Euclidiana para compor uma análise de conglomerados e avaliar a similaridade/dissimilaridade da bioacústica da anurofauna. Treze espécies foram amostradas: Boana raniceps, Dendropsophus nanus, D. rubicundulus , D. minutus, Leptodactylus fuscus, L. troglodytes, L. vastus, Pithecopus nordestinus , Physalaemus cuvieri, P. nattereri, Pleurodema diplolister, Proceratophrys cristiceps e Scinax ruber. Destas, seis apresentaram mais de 90% de sobreposição acústica: P. nattereri, P. cuvieri, L. fuscus e L. vastus (Leptodactylidae); e, D. nanus e D. rubicundulus (Hylidae). Apesar da similaridade acústica entre essas seis espécies, a interferência é reduzida devido ao pequeno número de espécies simpátricas e certas características distintas na frequência do canto, tais como: frequência dominante e sua modulação. Fatores ambientais específicos do semiárido limitam os períodos e sítios reprodutivos, o que mantém baixa diversidade de espécies e consequentemente reduz a sobreposição no nicho acústico.

Quando e onde vocaliza Sphaenorhynchus surdus (Anura: Hylidae) no sul do Brasil? / When and where does Sphaenorhynchus surdus call in Southern Brazil?

Estudos sobre distribuição espacial e temporal de anfíbios têm se mostrado importantes para o entendimento das relações entre as espécies e o ambiente. Nesse sentido, constata-se que essas informações acerca de espécies do gênero Sphaenorhynchus Tschudi, 1838 no Rio Grande do Sul ainda não foram levantadas. Esta pesquisa, cujo objetivo principal foi a caracterização da distribuição espacial e temporal de Sphaenorhynchus surdus (Cochran, 1953) durante atividade de vocalização, bem como a análise dos principais fatores climáticos associados a essa atividade, foi conduzida em três corpos dágua com diferentes características da região dos Campos de Cima da Serra, nos municípios de Bom Jesus e Vacaria. As expedições a campo aconteceram mensalmente com a duração de dois dias e duas noites entre junho de 2006 e março de 2008. Os resultados mostraram que S. surdus apresenta temporada de vocalização concentrada nas estações mais quentes do ano, primavera e verão, interrompendo nos meses mais frios, durante outono e inverno. O pico da atividade de vocalização foi no ocaso e nas primeiras horas da noite, porém a espécie apresentou atividade de vocalização em todos os períodos amostrados do dia e da noite. Dentre as variáveis analisadas, a temperatura da água foi a variável climática com maior influência sobre a abundância de indivíduos em atividade de vocalização (r2= 0,43; F1,19 = 14,65, p= 0,01). Quanto aos sítios de vocalização, a lâmina dágua obteve a maior representatividade (42%) dentre os substratos, seguida pela vegetação arbustiva (25%) incluindo alturas superiores a dois metros, quando considerados todos os banhados.(AU)

Research regarding temporal and spatial distribution of amphibians has been very important to better understanding the relationship between species and their environment. In this context, no information is available for species of Sphaenorhynchus Tschudi, 1838 in Rio Grande do Sul. Thus, the main purpose of this research was to describe the temporal and spatial distribution of Sphaenorhynchus surdus (Cochran, 1953) during calling activity as well as the main climatic factors associated to this activity. This research was conducted in three ponds in the northeastern region of this State, specifically in the municipalities of Vacaria and Bom Jesus. Fieldwork was carried out monthly from June 2006 to March 2008 and each expedition lasted two days and two nights. The results show that S. surduspresents calling season concentrated in the warmer seasons, during spring and summer. The peak of calling males was observed during the sunset and the first hours of night; however, the calling activity was observed in all periods of day and night. Calling activity was primarily associated with water temperature (r2 = 0.43; F1.19 = 14.65, p = 0.01). Regarding the calling sites, water surface was the most representative substrate (42%), followed by shrubby vegetation (25%), including the ones above two meters, when all ponds were considered in the analysis.(AU)

Quando e onde vocaliza Sphaenorhynchus surdus (Anura: Hylidae) no sul do Brasil? / When and where does Sphaenorhynchus surdus call in Southern Brazil?

Estudos sobre distribuição espacial e temporal de anfíbios têm se mostrado importantes para o entendimento das relações entre as espécies e o ambiente. Nesse sentido, constata-se que essas informações acerca de espécies do gênero Sphaenorhynchus Tschudi, 1838 no Rio Grande do Sul ainda não foram levantadas. Esta pesquisa, cujo objetivo principal foi a caracterização da distribuição espacial e temporal de Sphaenorhynchus surdus (Cochran, 1953) durante atividade de vocalização, bem como a análise dos principais fatores climáticos associados a essa atividade, foi conduzida em três corpos d’água com diferentes características da região dos Campos de Cima da Serra, nos municípios de Bom Jesus e Vacaria. As expedições a campo aconteceram mensalmente com a duração de dois dias e duas noites entre junho de 2006 e março de 2008. Os resultados mostraram que S. surdus apresenta temporada de vocalização concentrada nas estações mais quentes do ano, primavera e verão, interrompendo nos meses mais frios, durante outono e inverno. O pico da atividade de vocalização foi no ocaso e nas primeiras horas da noite, porém a espécie apresentou atividade de vocalização em todos os períodos amostrados do dia e da noite. Dentre as variáveis analisadas, a temperatura da água foi a variável climática com maior influência sobre a abundância de indivíduos em atividade de vocalização (r2= 0,43; F1,19 = 14,65, p= 0,01). Quanto aos sítios de vocalização, a lâmina d’água obteve a maior representatividade (42%) dentre os substratos, seguida pela vegetação arbustiva (25%) incluindo alturas superiores a dois metros, quando considerados todos os banhados.

Research regarding temporal and spatial distribution of amphibians has been very important to better understanding the relationship between species and their environment. In this context, no information is available for species of Sphaenorhynchus Tschudi, 1838 in Rio Grande do Sul. Thus, the main purpose of this research was to describe the temporal and spatial distribution of Sphaenorhynchus surdus (Cochran, 1953) during calling activity as well as the main climatic factors associated to this activity. This research was conducted in three ponds in the northeastern region of this State, specifically in the municipalities of Vacaria and Bom Jesus. Fieldwork was carried out monthly from June 2006 to March 2008 and each expedition lasted two days and two nights. The results show that S. surduspresents calling season concentrated in the warmer seasons, during spring and summer. The peak of calling males was observed during the sunset and the first hours of night; however, the calling activity was observed in all periods of day and night. Calling activity was primarily associated with water temperature (r2 = 0.43; F1.19 = 14.65, p = 0.01). Regarding the calling sites, water surface was the most representative substrate (42%), followed by shrubby vegetation (25%), including the ones above two meters, when all ponds were considered in the analysis.

Quando e onde vocaliza Sphaenorhynchus surdus (Anura: Hylidae) no sul do Brasil?

ABSTRACT Research regarding temporal and spatial distribution of amphibians has been very important to better understanding the relationship between species and their environment. In this context, no information is available for species of Sphaenorhynchus Tschudi, 1838 in Rio Grande do Sul. Thus, the main purpose of this research was to describe the temporal and spatial distribution of Sphaenorhynchus surdus (Cochran, 1953) during calling activity as well as the main climatic factors associated to this activity. This research was conducted in three ponds in the northeastern region of this State, specifically in the municipalities of Vacaria and Bom Jesus. Fieldwork was carried out monthly from June 2006 to March 2008 and each expedition lasted two days and two nights. The results show that S. surdus presents calling season concentrated in the warmer seasons, during spring and summer. The peak of calling males was observed during the sunset and the first hours of night; however, the calling activity was observed in all periods of day and night. Calling activity was primarily associated with water temperature (r2 = 0.43; F1.19 = 14.65, p = 0.01). Regarding the calling sites, water surface was the most representative substrate (42%), followed by shrubby vegetation (25%), including the ones above two meters, when all ponds were considered in the analysis.

RESUMO Estudos sobre distribuição espacial e temporal de anfíbios têm se mostrado importantes para o entendimento das relações entre as espécies e o ambiente. Nesse sentido, constata-se que essas informações acerca de espécies do gênero Sphaenorhynchus Tschudi, 1838 no Rio Grande do Sul ainda não foram levantadas. Esta pesquisa, cujo objetivo principal foi a caracterização da distribuição espacial e temporal de Sphaenorhynchus surdus (Cochran, 1953) durante atividade de vocalização, bem como a análise dos principais fatores climáticos associados a essa atividade, foi conduzida em três corpos dágua com diferentes características da região dos Campos de Cima da Serra, nos municípios de Bom Jesus e Vacaria. As expedições a campo aconteceram mensalmente com a duração de dois dias e duas noites entre junho de 2006 e março de 2008. Os resultados mostraram que S. surdus apresenta temporada de vocalização concentrada nas estações mais quentes do ano, primavera e verão, interrompendo nos meses mais frios, durante outono e inverno. O pico da atividade de vocalização foi no ocaso e nas primeiras horas da noite, porém a espécie apresentou atividade de vocalização em todos os períodos amostrados do dia e da noite. Dentre as variáveis analisadas, a temperatura da água foi a variável climática com maior influência sobre a abundância de indivíduos em atividade de vocalização (r2= 0,43; F1,19 = 14,65, p= 0,01). Quanto aos sítios de vocalização, a lâmina dágua obteve a maior representatividade (42%) dentre os substratos, seguida pela vegetação arbustiva (25%) incluindo alturas superiores a dois metros, quando considerados todos os banhados.

Dero (Allodero) lutzi Michaelsen, 1926 (Oligochaeta: Naididae) associated with Scinax fuscovarius (Lutz, 1925) (Anura: Hylidae) from Semi-deciduous Atlantic Rain Forest, southern Brazil / Dero (Allodero) lutzi Michaelsen, 1926 (Oligochaeta: Naididae) associado com Scinax fuscovarius (Lutz, 1925) (Anura: Hylidae) na Floresta Estacional Semidecidual, Sul do Brasil

Amphibians are hosts for a wide variety of ecto- and endoparasites, such as protozoans and parasitic worms. Naididae is a family of Oligochaeta whose species live on a wide range of substrates, including mollusks, aquatic macrophytes, sponges, mosses, liverworts, and filamentous algae. However, some species are known as endoparasitic from vertebrates, such as Dero (Allodero) lutzi, which is parasitic of the urinary tracts of frogs, but also have a free-living stage. Specimens in the parasitic stage lack dorsal setae, branchial fossa, and gills. Here we report the occurrence of D. (A.) lutzi associated with anuran Scinax fuscovarius from Semi-deciduous Atlantic Rain Forest in southern Brazil. The study took place at the Caiuá Ecological Station, Diamante do Norte, Paraná, southern Brazil. Seven specimens of S. fuscovarius were examined for parasites but only one was infected. Parasites occurred in ureters and urinary bladder. Previous records of this D. (A.) lutzi include the Brazilian States of Santa Catarina, São Paulo, Rio de Janeiro, and Minas Gerais, as well as Cuba and North America. This is a new locality record for this species in Brazil. Reports of Dero (Allodero) lutzi are rare, due to difficulty of observation, and such events are restricted only the fortuitous cases. It is important to emphasize the necessity of future studies, which are fundamental to the understanding of biological and ecological aspects of this species.(AU)

Anfíbios são hospedeiros para uma grande variedade de ecto- e endoparasitos, tais como os protozoários e vermes parasitos. Naididae é uma família de Oligochaeta cujas espécies vivem em uma ampla variedade de substratos, incluindo moluscos, macrófitas aquáticas, esponjas, musgos, e algas hepáticas e filamentosas. No entanto, algumas espécies são conhecidas como endoparasitos de vertebrados, como Dero (Allodero) lutzi, o qual é um parasito do trato urinário de anfíbios, mas que também possui uma fase de vida livre. Espécimes no estágio parasitário não possuem cerdas dorsais, fossa branquial, e brânquias. Relatamos a ocorrência de D. (A.) lutzi associado ao anuro Scinax fuscovarius na Floresta Estacional Semidecidual no Sul do Brasil. O estudo foi realizado na Estação Ecológica do Caiuá, Diamante do Norte, Paraná, Sul do Brasil. Sete espécimes de S. fuscovarius foram examinados para parasitos, mas apenas um estava infectado. Os parasitos ocorreram nos ureteres e bexiga urinária. Registros anteriores de D. (A.) lutzi incluem os estados brasileiros de Santa Catarina, São Paulo, Rio de Janeiro e Minas Gerais, bem como Cuba e América do Norte. Este é o registro de uma nova localidade para esta espécie no Brasil. Registros de Dero (Allodero) lutzi são raros, devido à dificuldade de observação, e tais eventos são restritos apenas a casos fortuitos. É importante ressaltar a necessidade de futuros estudos, que são fundamentais para a compreensão de aspectos biológicos e ecológicos desta espécie.(AU)

Una especie nueva de rana arbórea del género Hyloscirtus (Amphibia: Anura: Hylidae) de la Cordillera del Cóndor

Ecuadorian frogs of genus Hyloscirtus comprises 16 described species, of which eleven belong to the H. larinopygion group. They are restricted to the flanks of the Andes, both east and west. An assessment of the herpetofauna in the southern part of Cordillera del Condor (montane forests on sandstone plateaus) province of Zamora Chinchipe, Ecuador, led to the discovery of a new species for the group, which we describe herein as Hyloscirtus condor sp. nov. We herein analyze the tadpoles and advertisement calls, as well as estimate the phylogenetic relationships of the new and related species, based on new sequences of mitochondrial genes 12S, tRNAVal y16S, until a total of 2508 bp. The results show that the group H. larinopygion comprises two clades: one occurring in the northern and central Andes, and the second in the south. The new species belongs to the southern clade, is sister to H. tapichalaca, and a seemingly undescribed species from Provincia Morona Santiago. The new species differs from all its congeners in color pattern, which consists of dark yellow dots on a tan background. It is the largest species of the H. larinopygion group and shares with H. tapichalaca the presence of a large prepollical curved spine and hypertrophied forearms. The new species inhabits a remote and well-preserved area of Cordillera del Condor. The discovery of new species and others at the site denotes the biological importance of this area and encourages the development of conservation plans.

Una especie nueva de rana arbórea del género Hyloscirtus (Amphibia: Anura: Hylidae) de la Cordillera del Cóndor

Ecuadorian frogs of genus Hyloscirtus comprises 16 described species, of which eleven belong to the H. larinopygion group. They are restricted to the flanks of the Andes, both east and west. An assessment of the herpetofauna in the southern part of Cordillera del Condor (montane forests on sandstone plateaus) province of Zamora Chinchipe, Ecuador, led to the discovery of a new species for the group, which we describe herein as Hyloscirtus condor sp. nov. We herein analyze the tadpoles and advertisement calls, as well as estimate the phylogenetic relationships of the new and related species, based on new sequences of mitochondrial genes 12S, tRNAVal y16S, until a total of 2508 bp. The results show that the group H. larinopygion comprises two clades: one occurring in the northern and central Andes, and the second in the south. The new species belongs to the southern clade, is sister to H. tapichalaca, and a seemingly undescribed species from Provincia Morona Santiago. The new species differs from all its congeners in color pattern, which consists of dark yellow dots on a tan background. It is the largest species of the H. larinopygion group and shares with H. tapichalaca the presence of a large prepollical curved spine and hypertrophied forearms. The new species inhabits a remote and well-preserved area of Cordillera del Condor. The discovery of new species and others at the site denotes the biological importance of this area and encourages the development of conservation plans.(AU)

Distribution, vocalization and taxonomic status of hypsiboas roraima and h. angelicus (Amphibia: Anura: Hylidae)

Redefinimos la distribución del hílido guayanés Hypsiboas roraima Duellman & Hoogmoed. Analizamos su canto y consideramos Hypsiboas angelicus Myers & Donnelly como un sinónimo menor de H. roraima.

The distribution of the poorly known hylid frog Hypsiboas roraima Duellman & Hoogmoed, on the Guiana Shield is redefined, including new records from Venezuela. The advertisement call of this species is analyzed and Hypsiboas angelicus Myers & Donnelly is associated as a junior synonym of H. roraima.

Distribution, vocalization and taxonomic status of hypsiboas roraima and h. angelicus (Amphibia: Anura: Hylidae)

Redefinimos la distribución del hílido guayanés Hypsiboas roraima Duellman & Hoogmoed. Analizamos su canto y consideramos Hypsiboas angelicus Myers & Donnelly como un sinónimo menor de H. roraima.

The distribution of the poorly known hylid frog Hypsiboas roraima Duellman & Hoogmoed, on the Guiana Shield is redefined, including new records from Venezuela. The advertisement call of this species is analyzed and Hypsiboas angelicus Myers & Donnelly is associated as a junior synonym of H. roraima.

Habitat use by a tree frog species of Scinax (Amphibia, Hylidae) at an urban forest fragment from south-eastern Brazil

We studied the pattern of habitat use by the tree frog Scinax aff. perereca. Fieldworks were performed from August 1996 to August 1997 at Parque das Mangabeiras, Belo Horizonte, State of Minas Gerais, southeastern Brazil. Calling males were observed in September, October and December 1996, February to April and June 1997. Females were found only in October 1996. Specimens were found perched on vegetation, on the ground or on stones near waterfall. At Parque das Mangabeiras, S. aff. perereca occupied nine types of substrata. The most frequently used substrata were shrubs, stones at the stream edges, and fallen trunks. The pattern of spatial occupation varied among months. Males were found calling in aggregations on the vegetation and spatial niche breadth was related to species abundance.

No presente estudo é tratado o uso do hábitat por Scinax aff. perereca, durante o período de agosto de 1996 a agosto de 1997 em uma área de mata urbana em Belo Horizonte, Minas Gerais, sudeste do Brasil. Machos em atividade de vocalização foram encontrados em setembro, outubro e dezembro de 1996 e de fevereiro a abril e junho de 1997. As fêmeas foram capturadas apenas em outubro de 1996. Os indivíduos foram encontrados em galhos da vegetação no solo ou em pedras próximas a quedas de água. Na área estudada, S. aff. perereca usa nove tipos de substratos, sendo os mais freqüentes a vegetação herbácea, pedras na margem do riacho e troncos caídos. O padrão de ocupação espacial variou ao longo dos meses. Os machos foram encontrados vocalizando em agregados e a largura de nicho espacial foi diretamente relacionada a abundância da espécie.

Habitat use by a tree frog species of Scinax (Amphibia, Hylidae) at an urban forest fragment from south-eastern Brazil

We studied the pattern of habitat use by the tree frog Scinax aff. perereca. Fieldworks were performed from August 1996 to August 1997 at Parque das Mangabeiras, Belo Horizonte, State of Minas Gerais, southeastern Brazil. Calling males were observed in September, October and December 1996, February to April and June 1997. Females were found only in October 1996. Specimens were found perched on vegetation, on the ground or on stones near waterfall. At Parque das Mangabeiras, S. aff. perereca occupied nine types of substrata. The most frequently used substrata were shrubs, stones at the stream edges, and fallen trunks. The pattern of spatial occupation varied among months. Males were found calling in aggregations on the vegetation and spatial niche breadth was related to species abundance.

No presente estudo é tratado o uso do hábitat por Scinax aff. perereca, durante o período de agosto de 1996 a agosto de 1997 em uma área de mata urbana em Belo Horizonte, Minas Gerais, sudeste do Brasil. Machos em atividade de vocalização foram encontrados em setembro, outubro e dezembro de 1996 e de fevereiro a abril e junho de 1997. As fêmeas foram capturadas apenas em outubro de 1996. Os indivíduos foram encontrados em galhos da vegetação no solo ou em pedras próximas a quedas de água. Na área estudada, S. aff. perereca usa nove tipos de substratos, sendo os mais freqüentes a vegetação herbácea, pedras na margem do riacho e troncos caídos. O padrão de ocupação espacial variou ao longo dos meses. Os machos foram encontrados vocalizando em agregados e a largura de nicho espacial foi diretamente relacionada a abundância da espécie.

Una nueva especie del grupo Hyloscirtus larinopygion (Amphibia: Anura: Hylidae) del suroccidente de Colombia

Se describe una nueva especie del grupo Hyloscirtus larinopygion del Nudo de los Pastos en el departamento de Nariño, Colombia. Hyloscirtus tigrinus sp. nov. puede ser distinguida fácilmente de sus especies similares por la presencia de un tubérculo calcar carnoso y prominente, además de su distintivo patrón de coloración. Se realizan algunos comentarios sobre la coloración de la garganta y coloración ventral en Hyloscirtus caucanus, H. larinopygion, H. lindae y H. tigrinus. La coloración de la garganta es altamente variable, por lo tanto no puede ser utilizada para diagnosticar a estas especies.

A new species of the Hyloscirtus larinopygion group from Nudo de los Pastos, Nariño department, Colombia is described. Hyloscirtus tigrinus sp. nov. can be distinguished easily from similar species by the presence of a fleshy and prominent calcar tubercle and by its distinctive color pattern. Some remarks on throat and ventral coloration in Hyloscirtus caucanus, H. larinopygion, H. lindae and H. tigrinus are presented. The throat coloration is highly variable and cannot be used to diagnose any of these species.

Una nueva especie del grupo Hyloscirtus larinopygion (Amphibia: Anura: Hylidae) del suroccidente de Colombia

Se describe una nueva especie del grupo Hyloscirtus larinopygion del Nudo de los Pastos en el departamento de Nariño, Colombia. Hyloscirtus tigrinus sp. nov. puede ser distinguida fácilmente de sus especies similares por la presencia de un tubérculo calcar carnoso y prominente, además de su distintivo patrón de coloración. Se realizan algunos comentarios sobre la coloración de la garganta y coloración ventral en Hyloscirtus caucanus, H. larinopygion, H. lindae y H. tigrinus. La coloración de la garganta es altamente variable, por lo tanto no puede ser utilizada para diagnosticar a estas especies.

A new species of the Hyloscirtus larinopygion group from Nudo de los Pastos, Nariño department, Colombia is described. Hyloscirtus tigrinus sp. nov. can be distinguished easily from similar species by the presence of a fleshy and prominent calcar tubercle and by its distinctive color pattern. Some remarks on throat and ventral coloration in Hyloscirtus caucanus, H. larinopygion, H. lindae and H. tigrinus are presented. The throat coloration is highly variable and cannot be used to diagnose any of these species.