Resumo

Cattle are considered intermediate hosts of Sarcocystis, which can cause clinical signs and lower performance in the acute phase of infection. Sarcocystis spp. are usually not visible to the naked eye during the post mortem inspection. Moreover, fresh microscopic examination and transmission electron microscopy techniques are difficult to apply to large samples. Therefore, extensive studies on Sarcocystis infection in cattle using molecular and serological methods are required. Here, we investigated Sarcocystis spp. infection in cattle using fresh microscopic examination and polymerase chain reaction of myocardium samples and compared the results with the presence of antibodies against Sarcocystis spp. in corresponding serum samples detected using indirect fluorescent antibody test. Microscopic Sarcocystis were observed in 100% of the myocardial samples, and Sarcocystis DNA was present in 86% (43/50) of these samples. Antibodies against Sarcocystis spp. were detected in 96% (48/50) and 80% (40/50) of the serum samples at 1:25 and 1:200 dilutions, respectively. The three associated methods (fresh microscopic examination, PCR and serology) showed good sensitivity and detection for Sarcocystis spp. compared with fresh microscopic examination (only), and they may facilitate diagnosis in live animals on a large scale as well as monitoring of the herd status.

Os bovinos são considerados hospedeiros intermediários de Sarcocystis, podendo causar sinais clínicos e menor desempenho na fase aguda da infecção. Sarcocystis spp. geralmente não são visíveis a olho nu durante a inspeção post mortem. Além disso, o exame microscópico a fresco e as técnicas de microscopia eletrônica de transmissão são difíceis de aplicar a uma amostras de grande tamanho. Portanto, são necessários extensos estudos sobre a infecção por Sarcocystis em bovinos usando métodos moleculares e sorológicos. Aqui, investigamos a infecção de Sarcocystis spp. em bovinos por meio de exame microscópico a fresco e reação em cadeia da polimerase de amostras de miocárdio e comparado os resultados com a presença de anticorpos contra Sarcocystis spp. em amostras de soro correspondentes detectadas usando o teste de anticorpos fluorescentes indiretos. Sarcocistos microscópicos foram observados em 100% das amostras de miocárdio, e o DNA de Sarcocystis estava presente em 86% (43/50) dessas amostras. Anticorpos contra Sarcocystis spp. foram detectados em 96% (48/50) e 80% (40/50) das amostras de soro nas diluições 1:25 e 1:200, respectivamente. Os três métodos associados (exame microscópico a fresco, PCR e sorologia) mostraram boa sensibilidade e detecção para Sarcocystis spp. em comparação com o exame microscópico fresco (apenas) e podem facilitar o diagnóstico em animais vivos em larga escala, bem como o monitoramento do status do rebanho.

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Abstract Neospora caninum is an obligate intracellular parasite that can infect many domestic and wild animals, including birds. These animals are important sources for monitoring of environmental contamination, as they could become infected through sporulated oocysts; however, the real role of birds in the biological cycle of N. caninum remains uncertain. This study aimed to determine the prevalence of anti-N. caninum antibodies, evaluate associated factors, detect the parasite by molecular testing of free-range chickens from Brazil, and evaluate different techniques for its serological diagnosis. Blood samples of 366 chickens from 25 farms were collected for serological assays. The indirect fluorescent antibody test (IFAT) and the indirect enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) were used to detect anti-N. caninum antibodies. Chickens that tested seropositive by IFAT had their brain tissues and a pool of organs (heart, lung, and liver) submitted to PCR for molecular detection of the parasite. Out of 366 chickens, 65 (17.8%) and 163 (44.6%) were seropositive by IFAT and ELISA, respectively. Brain tissues (n=60) and the pools of organs (n=65) were negative in the PCR. Our results showed a high prevalence of antibodies in free-range chickens and that IFAT is the more sensitive technique for the detection of anti-N. caninum antibodies.

Resumo Neospora caninum é um parasita intracelular obrigatório que pode infectar vários animais domésticos e silvestres, incluindo as aves. Esses animais são importantes fontes para o monitoramento da contaminação ambiental, uma vez que eles podem se infectar por meio da ingestão de oocistos. Porém, o real papel das aves no ciclo biológico do N. caninum ainda é incerto. Este estudo teve como objetivos determinar a prevalência de anticorpos anti-N. caninum, avaliar fatores associados, detectar o parasita por meio de teste molecular em galinhas de vida livre do Brasil e avaliar diferentes técnicas para o diagnóstico sorológico. Amostras de sangue de 366 galinhas de 25 fazendas foram coletadas para testes sorológicos. A reação de imunofluorescência indireta (RIFI) e o ensaio de imunoabsorção enzimática (ELISA) foram utilizados para detectar anticorpos anti-N. caninum. As amostras de tecidos (cérebro, coração, pulmão e fígado) de galinhas soropositivas na RIFI foram coletadas e submetidas à PCR para detecção molecular do parasita. Das 366 galinhas, 65 (17,8%) e 163 (44,6%) foram soropositivas pela RIFI e ELISA, respectivamente. Nenhuma amostra foi positiva na PCR. Esses resultados demonstram uma elevada prevalência de anticorpos em galinhas de vida livre e que a RIFI é uma técnica mais sensível para a detecção de anticorpos anti-N. caninum.

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O objetivo desse trabalho foi determinar a ocorrência de anticorpos IgG para Neospora caninum bem como avaliar os fatores de risco associados à infecção em rebanhos ovinos do estado de Sergipe, Brasil. Foram coletadas, nos anos de 2011 e 2012, 1200 amostras de sangue de ovinos oriundos de sessenta propriedades distribuídas em três mesorregiões do estado para pesquisa de anticorpos para N. caninum pela Reação de Imunofluorescência Indireta (RIFI) utilizando-se como ponto de corte de 50 e as amostras diluídas na base 2. Os dados de 34 variáveis estudadas foram obtidos a partir de questionários aplicados aos proprietários e analisados para se determinar a frequências absolutas e relativas e análise dos fatores de risco pelo teste Qui-quadrado de Pearson (p≤0,05). A ocorrência de ovinos soropositivos para N. caninum foi de 39,83% (478/1200). Em relação às mesorregiões a ocorrência de animais e propriedades positivas foi de, respectivamente, 55,88% (380/680) e 88,24% (30/34) na Leste; 21,42% (60/280) e 42,85% (6/14) no Agreste e 15,83% (38/240) e 41,67% (5/12) no Sertão. Os títulos de anticorpos variaram de 50, representando 96,02% (459/478) das amostras soropositivas, a 6400 (1/478). Dentre as variáveis significantes, na analise multivariada, que foram consideradas com fatores de risco para a infecção pelo N. caninum estavam propriedades localizadas na mesorregião Leste (p=0,000, OR=4,64, IC95%=3,36-6,41), presença de fonte de água parada e corrente (p=0,000 OR=2,03, IC95%=1,41-2,92), ausência de quarentena (p=0,000 OR=2,71, IC95%=2,08-3,53), não utilização de esterqueiras (p=0,000 OR=3,14, IC95%=2,45-4,02), criações com finalidade de subsistência (p=0,000 OR=4,99, IC95%=3,15-7,92), de reprodução (p=0,002, OR=1,74, IC95%=1,22-2,49), presença de cães (p=0,000 OR=2,74, IC95%=1,73-433) e circulação de animais silvestres nos rebanhos (p=0,000 OR=3,45, IC95%=2,44-4,87). Os resultados evidenciam a ocorrência de N. caninum em rebanhos ovinos sergipanos, demonstrando o manejo e a localização dos rebanhos no estado como importantes fatores de risco.(AU)

The aim of this study was to determine the occurrence of antibodies IgG against Neospora caninumand evaluate the risk factors associated with the infection in ovine herds, State of Sergipe, Brazil. Blood samples (n=1200) were collected from sheep raised in 60 sheep run located in the three mesoregions of the State of Sergipe, between 2011 e 2012. Antibodies were investigated by Indirect Immunofluorescence Antibody Test of which cutoff point was 50 and positive samples were diluted in base 2 until the last positive titer. Data from 15 variables was obtained from questionnaires given to farmers. Absolute and relative frequencies were determined and the risk factors were analyzed by Pearson's Qui-Square test (p≤0,05). The occurrences of serum reactive sheep were 39.83% (478/1200). The occurrences of positive sheep and sheep run were 55.88% (380/680) and 88.24% (30/34) in the Eastern region; 21.42% (60/280) e 42.85% (6/14) in dry region and 15.83% (38/240) e 41.67% (5/12) in the backwoods respectively. Antibody titers ranged from 50 (n=459), represented 96.02% (459/478) of seropositive samples to 6400 (1/478). Among the significant variables in the multivariate analysis were considered risk factors for infection with N. caninum were, sheep run located in Eastern region (p=0.000, OR=4.64, CI95%=3.36-6.41); standing and running water sources (p=0.000 OR=2.03, CI95%=1.41-2.92), absence of quarantine (p=0.000, OR=2.71, CI95%=2.08-3.53), absence of dunghill (p=0.000, OR=3.14, CI95%=2.45-4.02), presence of dogs (p=0.000, OR=2.74, CI95%=1.73-433), presence of wild animals (p=0.000, OR=3.45, CI95%=2.44-4.87) and subsistence (p=0.000, OR=4.99, CI95%=3.15-7.92) or reproduction (p=0.002, OR=1.74, CI95%=1.22-2.49) livestock were important risk factors. Our results highlight the occurrence ofN. caninumin the ovine herds from State of Sergipe. Management and location of sheep runs were important risk factors associated to the infection.(AU)

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The aim of this study was to examine the intra-uterine exposure to Sarcocystis spp. antigens, determining the number of foals with detectable concentrations of antibodies against these agents in the serum, before colostrum ingestion and collect data about exposure of horses to the parasite. Serum samples were collected from 195 thoroughbred mares and their newborns in two farms from southern Brazil. Parasite specific antibody responses to Sarcocystis antigens were detected using the indirect immunofluorescent antibody test (IFAT) and immunoblot analysis. In 84.1% (159/189) of the pregnant mares and in 7.4% (14/189) of foals we detected antibodies anti-Sarcocystis spp. by IFAT. All samples seropositive from foals were also positive in their respective mares. Serum samples of seropositive foals by IFAT, showed no reactivity on the immunoblot, having as antigens S. neurona merozoites. In conclusion, the intra-uterine exposure to Sarcocystis spp. antigens in horses was demonstrated, with occurrence not only in mares, but also in their foals, before colostrum ingestion these occurrences were reduced.

O objetivo deste estudo foi avaliar a exposição intrauterina ao Sarcocystis spp., para determinar o número de potros que possuem concentrações detectáveis de anticorpos contra esses agentes no soro, antes da ingestão do colostro, por meio da coleta de dados sobre a exposição a esses protozoários nos equinos. Amostras de soro foram coletadas de 195 éguas puro-sangue e seus respectivos potros recém-nascidos, em duas fazendas localizadas na região Sul do Brasil. Os testes utilizados na detecção de anticorpos específicos para o Sarcocystis foram a reação de imunofluorescência indireta (RIFI) e análise por meio de immunoblot. Pela RIFI, em 84,1% (159/189) das éguas e em 7,4% (14/189) dos potros foram detectados anticorpos anti-Sarcocystis spp. Todas as amostras soropositivas dos potros também foram positivas para suas respectivas mães. As amostras de soro dos potros soropositivos na RIFI, não apresentaram reatividade no immunoblot, tendo como antígenos merozoítos de S. neurona. Em conclusão, foi demonstrada a exposição intrauterina de Sarcocystis spp. em equinos, com ocorrência em éguas, porém, em seus respectivos potros, antes da ingestão de colostro a ocorrência foi reduzida.

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Background: Toxoplasmosis is a zoonosis caused by an obligate intracellular parasite, Toxoplasma gondii, which affects warm-blooded animals including humans. Its prevalence rates usually vary in different regions of the planet. Methods: In this study, an analysis of the seroprevalence of toxoplasmosis among Brazilian students was proposed by means of IgG specific antibodies detection. The presence of anti-Toxoplasma gondiiantibodies by indirect fluorescent antibody test (IFAT) was also evaluated in order to compare it with enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) and to assess the use of 2,2′-azinobis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid) and o-phenylenediamine dihydrochloride chromogens. Results: The IFAT method showed a seroprevalence of 22.3%. These results were similar to those obtained by ELISA (24.1%). The seroprevalence was directly estimated from the IgG avidity, which showed that in a sample of 112 students, three of them had acute infection, an incidence of 1.6% in the studied population. Conclusion: In this study, the use of different chromogenic substrates in immunoenzymatic ELISA assays did not display different sensitivity in the detection of T. gondii-reagent serum. The extrapolation of results to this population must be carefully considered, since the investigation was conducted on a reduced sample. However, it allows us to emphasize the importance of careful and well prepared studies to identify risk factors for toxoplasmosis, to adopt preventive measures and to offer guidance to at-risk populations about the disease.

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Toxoplasmosis and neosporosis have been recognized as economically important diseases with considerable impact on the livestock industry. Little is known concerning the occurrence of Toxoplasma gondii and Neospora caninum in sheep from Tocantins state, Brazil. Here, we investigated antibodies against these parasites and associated factors in 182 sheep from Araguaína, Santa Terezinha do Tocantins, Arguianópolis and Palmeiras do Tocantins districts, Tocantins. Sheep sera were assayed for T. gondii and N. caninum IgG antibodies by indirect fluorescence antibody test (IFAT), using cut-off point at a dilution of 1:40 and 1:25 respectively. The prevalence of seropositive animal for T. gondii was 13.74% and 13.74% for N. caninum. None of the characteristics studied including reproductive problems, presence of cats, presence of dogs and veterinary care (p>0.05) was associated with occurrence of T. gondii or N. caninum infection. Only breed was identified as associated factor for the occurrence of toxoplasmosis in sheep (p<0.05). The present study is the first report on serum occurrence of T. gondii and N. caninum in sheep from the state of Tocantins, Brazil.

Toxoplasmose e Neosporose são reconhecidas por doenças economicamente importantes com impacto considerável na indústria pecuária. Pouco se sabe sobre a ocorrência de Toxoplasma gondii e Neospora caninum em ovelhas do estado do Tocantins, Brasil. Foram investigados a ocorrência de anticorpos contra estes parasitos e fatores associados em 182 ovelhas das cidades de Araguaína, Santa Terezinha do Tocantins, Arguianópolis e Palmeiras do Tocantins, Tocantins. Os soro das ovelhas foram testados para anticorpos IgG anti-T. gondii e anti-N. caninum pela Reação de Imunofluorescência Indireta (RIFI), usando os pontos de corte na diluição de 1:40 e 1:25, respectivamente. A prevalência de animais soropositivos para T. gondii foi de 13.74% e para N. caninum, 13.74%. Nenhuma das características estudadas incluindo problemas reprodutivos, presença de gatos, presença de cães e cuidados veterinários (p>0.05) foram associadas com a ocorrência infecção por T. gondii ou N. caninum. Somente raça foi identificada como fator associado à ocorrência de toxoplasmose em ovelhas (p<0.05). O presente trabalho é o primeiro relato da ocorrência sérica de T. gondii e N. caninum em ovelhas do estado do Tocantins, Brasil.

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Os javalis (Sus scrofa) são mamíferos considerados uma espécie exótica invasora, uma vez que podem causar prejuízos à produção agropecuária e problemas à saúde pública. Embora possam ser potenciais reservatórios de diversos micro-organismos, os dados sobre a soroprevalência das enfermidades zoonóticas ainda são escassos no Brasil. Por essa razão, o presente trabalho objetivou estudar a ocorrência de anticorpos contra Brucella spp., Leptospira spp., Toxoplasma gondii, Leishmania infantum e Trypanosoma cruzi em javalis de vida livre no Estado de São Paulo. Para tanto, 92 amostras de soro sanguíneo foram coletadas de javalis das regiões Norte, Nordeste e Centro-oeste do Estado de São Paulo e foram submetidas aos testes do antígeno acidificado tamponado para Brucella spp., da soroaglutinação microscópica para Leptospira spp. e da reação de imunofluorescência indireta para pesquisa de anticorpos contra T. gondii, L. infantum e T. cruzi. Foram realizados a taxa de soroprevalência, os fatores de risco associados à ocorrência de anticorpos contra os agentes estudados (por meio da análise univariada, com o cálculo da razão de prevalência e seu respectivo intervalo de confiança de 95 % e teste de ² ou exato de Fisher. Além do geoprocessamento do local que o animal foi abatido. Os resultados evidenciaram que 54,3 % (50/92) eram fêmeas e 50 % (46/92) dos javalis apresentavam idade jovem. As soroprevalências e os títulos de anticorpos encontrados foram 0 % para Brucella spp.; 10,87 % (10/92) para T. gondii, com títulos entre 40 e 640; 1,08 % (1/92) para Leptospira spp., reagindo apenas ao sorogrupo Sejroe e ao sorovar Unesp03, com titulação de 100; 63,04 % (58/92) para L. infantum, com titulação de 40 a 640, e 60,86 % (56/92) para T. cruzi, com titulação de 40 a 160. Na região do presente estudo, a frequência de anticorpos contra T. gondii e Leptospira spp. mostrou-se baixa. Não houve animais reagentes aos anticorpos contra Brucella spp. Para L. infantum e T. cruzi, houve alta e semelhante ocorrência de anticorpos, sugerindo ser uma reação cruzada entre ambos, havendo necessidade de diagnóstico comprobatório. Apenas a ocorrência de anticorpos contra L. infantum foi associada ao município. As variáveis gênero, idade e município foram igualmente associadas à ocorrência de anticorpos contra os demais agentes estudados.

Wild boars (Sus scrofa) are mammals considered an invasive alien species, since they can cause damage to agricultural production and problems to public health. Although they may be potential reservoirs for several microorganisms, data on the seroprevalence of zoonotic diseases are still scarce in Brazil. For this reason, the present study aimed to study the occurrence of antibodies against Brucella spp., Leptospira spp., Toxoplasma gondii, Leishmania infantum and Trypanosoma cruzi in wild boars in the State of São Paulo. For this purpose, 92 blood serum samples were collected from wild boar in the North, Northeast and Midwest regions of the State of São Paulo and were subjected to tests of the acidified buffered antigen for Brucella spp. Of microscopic serum agglutination for Leptospira spp. and the indirect fluorescent antibody test for antibodies against T. gondii, L. infantum and T. cruzi. The seroprevalence rate, the risk factors associated with the occurrence of antibodies against the agents studied were performed (through univariate analysis, with the calculation of the prevalence ratio and its respective 95 % confidence interval and ² or exact test Fisher. In addition to the geoprocessing of the place where the animal was slaughtered. The results showed that 54.3 % (50/92) were female and 50 % (46/92) of the wild boar were young. The seroprevalence and antibody titers found were 0 % for Brucella spp.; 10.87 % (10/92) for T. gondii, with titles between 40 and 640; 1.08 % (1/92) for Leptospira spp., reacting only to serogroup Sejroe and serovar Unesp03, with a titration of 100; 63.04 % (58/92) for L. infantum, with titration from 40 to 640, and 60.86 % (56/92) for T. cruzi, with titration from 40 to 160. In the region of the present study, the frequency of antibodies against T. gondii and Leptospira spp. proved to be low. There were no animals reactive to antibodies against Brucella spp. For L. infantum and T. cruzi, there was a high and similar occurrence of antibodies, suggesting that it is a cross reaction between both, requiring a supporting diagnosis. Only the occurrence of antibodies against L. infantum was associated with the municipality. The variables gender, age and municipality were also associated with the occurrence of antibodies against the other agents studied.

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This study aimed to investigate anti-Toxoplasma gondii antibodies and to isolate the parasite from the brains of horses processed at slaughterhouses in Brazil. We collected brain and blood samples from 398 horses of various ages, from six Brazilian states. Serum samples were evaluated by indirect fluorescent antibody test (IFAT cut-off titre 1:64), and brains were submitted to mouse bioassay. Among the 398 horses, positivity for T. gondii was identified in 46 (11.6%) by IFAT and in 14 (3.5%) by mouse bioassay. In 12 of those 14 bioassays, mice were positive only by IFAT (cut-off titre 1:16), T. gondii being isolated in the remaining two. Using polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism (PCR-RFLP) analysis of 18S rDNA to differentiate among T. gondii, Neospora caninum, and Sarcocystis neurona, we found that two of the 14 brains were positive for T. gondii only. For genotyping of the two isolates and the PCR-positive brain, we performed PCR-RFLP based on 13 markers, and SAG2 all samples were Toxoplasma gondii type I. Collectively, IFAT of horse sera and mouse bioassay identified positivity in 60 (15%) of the samples. Our results show that some horses sent to slaughter in Brazil have been exposed toT. gondii.

O objetivo do estudo foi investigar anticorpos anti-Toxoplasma gondii e isolar o parasita do cérebro de equídeos abatidos em matadouros-frigoríficos no Brasil. Colheram-se amostras de 398 cérebros e sangue de equídeos machos e fêmeas de idades variadas, provenientes de seis estados brasileiros. As amostras de soro foram avaliadas pelo teste de imunofluorescência indireta (IFI) para T. gondii (ponto de corte 64), e os fragmentos de cérebros foram submetidos ao bioensaio em camundongos. Por meio da IFI, 46 (11,6%) equídeos foram soropositivos. Pelo bioensaio em camundongos, 14 (3,5%) cérebros de equídeos testados foram positivos. Em doze dos bioensaios, os camundongos foram positivos somente pela IFI (ponto de corte 16) e T. gondii foi isolado nos outros dois bioensaios. A PCR-RFLP com base em 18S rDNA para diferenciar entre T. gondii, Neospora caninum, e Sarcocystis neurona foram feitas em todos os 14 cérebros e dois foram positivos apenas para T. gondii. De dois isolados positivos para T. gondii e do cérebro positivo à PCR em que realizou-se a PCR-RFLP, com base em 13 marcadores e SAG2, a genotipagem mostrou ser o T. gondii tipo I para todas as amostras. A IFI de soros de equídeos e do bioensaio em camundongos identificaram positividade em 60 (15%) amostras testadas. Os resultados mostram que alguns cavalos enviados para abate foram expostos ao T. gondii.

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This study aimed to investigate anti-Toxoplasma gondii antibodies and to isolate the parasite from the brains of horses processed at slaughterhouses in Brazil. We collected brain and blood samples from 398 horses of various ages, from six Brazilian states. Serum samples were evaluated by indirect fluorescent antibody test (IFAT cut-off titre ≥ 1:64), and brains were submitted to mouse bioassay. Among the 398 horses, positivity for T. gondii was identified in 46 (11.6%) by IFAT and in 14 (3.5%) by mouse bioassay. In 12 of those 14 bioassays, mice were positive only by IFAT (cut-off titre ≥ 1:16), T. gondii being isolated in the remaining two. Using polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism (PCR-RFLP) analysis of 18S rDNA to differentiate among T. gondii, Neospora caninum, and Sarcocystis neurona, we found that two of the 14 brains were positive for T. gondii only. For genotyping of the two isolates and the PCR-positive brain, we performed PCR-RFLP based on 13 markers, and SAG2 all samples were Toxoplasma gondii type I. Collectively, IFAT of horse sera and mouse bioassay identified positivity in 60 (15%) of the samples. Our results show that some horses sent to slaughter in Brazil have been exposed toT. gondii.

O objetivo do estudo foi investigar anticorpos anti-Toxoplasma gondii e isolar o parasita do cérebro de equídeos abatidos em matadouros-frigoríficos no Brasil. Colheram-se amostras de 398 cérebros e sangue de equídeos machos e fêmeas de idades variadas, provenientes de seis estados brasileiros. As amostras de soro foram avaliadas pelo teste de imunofluorescência indireta (IFI) para T. gondii (ponto de corte ≥ 64), e os fragmentos de cérebros foram submetidos ao bioensaio em camundongos. Por meio da IFI, 46 (11,6%) equídeos foram soropositivos. Pelo bioensaio em camundongos, 14 (3,5%) cérebros de equídeos testados foram positivos. Em doze dos bioensaios, os camundongos foram positivos somente pela IFI (ponto de corte ≥ 16) e T. gondii foi isolado nos outros dois bioensaios. A PCR-RFLP com base em 18S rDNA para diferenciar entre T. gondii, Neospora caninum, e Sarcocystis neurona foram feitas em todos os 14 cérebros e dois foram positivos apenas para T. gondii. De dois isolados positivos para T. gondii e do cérebro positivo à PCR em que realizou-se a PCR-RFLP, com base em 13 marcadores e SAG2, a genotipagem mostrou ser o T. gondii tipo I para todas as amostras. A IFI de soros de equídeos e do bioensaio em camundongos identificaram positividade em 60 (15%) amostras testadas. Os resultados mostram que alguns cavalos enviados para abate foram expostos ao T. gondii.

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This study evaluated factors associated with the frequency ofLeishmania spp. antibodies in dogs residing in the Itaguai micro-region, State of Rio de Janeiro, Brazil. Blood samples were collected from 524 dogs. The serum samples were submitted to indirect fluorescent antibody test (IFAT) and enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) forLeishmania spp. The frequency of seropositive dogs was 28.24% (n = 148) in the micro-region, and among the three municipalities within that region, the highest frequency (p < 0.05) was observed in Seropedica (59.46%), followed by Itaguai (29.05%) and Mangaratiba (11.49%). Regarding factors associated with the host, mongrel dogs and those over the age of two presented higher frequency of antibodies to Leishmaniaspp. (p < 0.05). Concerning factors related to the environment and habits of the animal, dogs residing in rural areas (FR = 1.67, p = 0.0002), living outside the residence (FR = 1.42, p = 0.0197), with access to forest, streams and pastures (FR = 2.81, p = 0.0007), remaining loose (FR = 1.66, p = 0.0073), and those that had no shelter (FR = 2.16, p < 0.0001) were more likely to be seropositive. Canine leishmaniasis is a disease with high occurrence in the Itaguai micro-region, and aspects such as the definition of breed, age, habits and care by owners showed significant association in this micro-region.

Este estudo avaliou os fatores associados à frequência de anticorpos específicos para Leishmania spp. em cães domiciliados na microrregião de Itaguaí, Rio de Janeiro. Foram colhidas amostras de sangue de 524 cães. As amostras de soro foram submetidas a reação de imunofluorescência indireta (RIFI) e ensaio imunoenzimático indireto (ELISA-teste) para Leishmania spp. A frequência de cães soropositivos foi de 28,24% (n = 148) na microrregião e, entre os três municípios avaliados, a maior frequência (p < 0,05) foi observada em Seropédica (59,46%), seguida de Itaguaí (29,05%) e Mangaratiba (11,49%). Em relação aos fatores associados ao hospedeiro, observou-se que cães sem raça definida e aqueles com idade acima de dois anos apresentaram maior frequência de anticorpos para Leishmania spp. (p < 0,05). Em relação aos fatores relacionados ao ambiente e ao hábito do animal, os cães residentes em áreas rurais (RF = 1,67, p = 0,0002), animais que vivem fora da residência (RF = 1,42, p = 0,0197), com acesso à mata, córregos e pastagens (FR = 2,81, p = 0,0007), que permanecem soltos (RF = 1,66, p = 0,0073), e aqueles que não possuem abrigo (RF = 2,16, p < 0,0001) apresentaram maior chance de serem soropositivos. A leishmaniose canina é uma enfermidade com elevada ocorrência na microrregião de Itaguai, e aspectos como definição racial, idade, hábitos e cuidados estabelecidos pelo proprietário mostraram associação significativa nessa microrregião.

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The prevalence of T. gondii infection was investigated in free-range chickens for human consumption in the county of Rio Bonito, Rio de Janeiro, Brazil. Thus, a search for antibodies to T. gondii by indirect fluorescent antibody test was done in the serum of 220 chickens from twenty two farms. Titres equal or greater than 16 were considered positive. The prevalence of toxoplasmic infection found in chickens was 27.6% (61/220). There were positive cases in eighteen (77.2%) farms. The more frequent titre was 16 (12.5%) and the highest was 4096 (0.4%). The high prevalence of T. gondii in chickens and the high percentage of farms with positive cases indicate environmental contamination in the studied area showing the possibility of human and animal infection.

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The objective of this study was to detect the frequency of antibodies against Neospora spp. in samples of presuckle foal, as weel as determine the best dilution of serum to be used in indirect fluorescent antibody test. We analyzed serum samples from 203 presuckle foals, by indirect fluorescent antibody test in different titrations. The titrations of 16 and 50 showed 25.1% and 9.9% of presuckle foals positive, respectively. Thus, in serum samples from presuckle foals the titration 16 can be considered more appropriate to detect the occurrence of infection by the protozoan and therefore the transplacental transmission of Neospora spp. in horses.

Buscou-se detectar a frequência de anticorpos anti-Neospora spp. em amostras de potros pré-colostrais, bem como estabelecer a melhor diluição do soro sanguíneo para ser utilizado na imunofluorescência indireta. Foram analisadas 203 amostras sorológicas de potros pré-colostrais, pela reação de imunofluorescência indireta em diferentes titulações. As titulações 16 e 50 apresentaram 25,1% e 9,9% de potros pré-colostrais positivos, respectivamente. Dessa forma, em amostras de soro de animais desprovidos de colostro, pode-se considerar a titulação 16 mais apropriada para detectar a ocorrência de infecção pelo protozoário e assim da transmissão transplacentária pelo Neospora spp. em equinos.

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Objetivou-se avaliar a frequência da infecção por Toxoplasma gondii em suínos abatidos para o consumo humano em dois matadouros na Região Metropolitana do Recife, Pernambuco com inspeção Sanitária Estadual. A pesquisa de anticorpos foi realizada por meio da reação de Imunofluorescência indireta, adotando-se o ponto de corte 1:64. Foram analisados 327 animais provenientes de seis cidades, Abreu e Lima, Igarassu e Paulista, Carpina, Paudalho e Tracunhaém. Observou-se frequência de 9,78% de soros positivos, com diluições iguais ou superiores a 1: 64. Os resultados obtidos alertam sobre os riscos de infecção por T. gondii pela ingestão da carne suína crua ou mal cozida, pois é provável que os suínos soropositivos abriguem cistos teciduais, ressaltando a importância de um manejo de criação adequado, visando a diminuição do risco de infecção nesta espécie.

The objective of the present study was to evaluate the incidence of Toxoplasma gondii infection in pigs slaughtered for human consumption in two slaughterhouses with sanitary inspection in the Recife metropolitan area, Pernambuco State, Brazil. Antibody testing was performed by the indirect fluorescent antibody test, adopting the cut-off 1:64. A total of 327 animals were analyzed from six cities: Abreu e Lima, Paulista, Igarassu, Carpina, Paudalho and Tracunhaém. A frequency of 9.78% positive sera was observed for dilutions equal to or greater than 1:64. These data suggest risks of infection with Toxoplasma gondii by ingestion of raw or undercooked pork, since it is likely that seropositive pigs could contain tissue cysts, emphasizing the importance of creating a suitable management, aimed at reducing the risk of infection in this species.

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O objetivo deste estudo foi determinar a ocorrência de anticorpos anti-Neospora caninum em 260 amostras de soro coletadas de fetos bovinos de julho de 2007 a março de 2008, em abatedouro do município de Santa Maria, Rio Grande do Sul, Brasil. Para detecção de anticorpos anti-N. caninum, a técnica de imunofluorescência indireta foi utilizada tanto para a detecção de imunoglobulinas G e M. Amostras com títulos e" 25 foram consideradas positivas. Das 260 amostras testadas, 15 por cento (39/260) foram positivas para anticorpos anti-N. caninum. Destas, em 38 (97,4 por cento) foi detectada a presença de IgG anti-N. caninum e em seis (15,4 por cento) de IgM. Em cinco amostras (12,8 por cento) detectaram-se ambos, IgG e IgM. Os resultados reafirmam a habilidade do N. caninum em determinar infecção fetal. A pesquisa de IgM foi de limitada importância na detecção da infecção via transplacentária em soro fetal bovino.

The aim of this study was to determine the occurrence of anti-Neospora caninum antibodies in serum samples collected from 260 bovine fetuses, between July 2007 and March 2008, in an abattoir in the municipality of Santa Maria, Rio Grande do Sul, Brazil. An indirect fluorescent antibody test was used to detect anti-N. caninum immunoglobulins G (IgG) and M (IgM), using a cut-off of 1:25. Considering IgG or IgM detection, 15 percent (39/260) of the samples tested were found positive. Among the positive samples, 38 (97.4 percent) were positive for IgG and 6 (15.4 percent) for IgM. However 5 (12.8 percent) of it were positive for both IgG and IgM. These results are in agreement with the proven ability of N. caninum to fetal infection. IgM testing was few relevant to detect N. caninum transplacental infection through fetal bovine serum analisys.

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305 dairy calves sera samples at different ages for a serological survey in order to determine antibodies serum prevalence against Babesisa bovis and Babesia bigemina in zebu cattle as well as the crossbreds in Campos dos Goytacazes, RJ, Brazil were collected. By Indirect Fluorescent Antibody Test (IFAT) and Indirect Enzyme-Linked Immunoadsorbent Assay (ELISA) data were analyzed. Positive serum dairy cattle average percentages indicated 90.20 and 90.50% for B. bovis and 88.20 and 78.70% for B. bigemina by IFAT and ELISA, respectively. Both B. bovis and B. bigemina tests agreement ratio were 98.00 and 61.00%. Serum prevalence showed that the region is enzootically considered stable for bovine babesiosis infection with high disease prevalence. In Campos dos Goytacazes region whose livestock activity has been noted as a second income supporting, the present study may be regarding as unpublished, at all.

Com o objetivo de realizar um levantamento soroepidemiológico para B. bovis e B. bigemina em bezerros de raças zebuínas e seus cruzamentos no município de Campos dos Goytacazes, RJ, foram coletadas 305 amostras de soros de bezerros de diferentes faixas etárias de propriedades dedicadas à produção leiteira. Os dados foram analisados pelas técnicas de imunofluorescência indireta (IFI) e prova de imunoadsorção enzimática (ELISA). As médias dos percentuais obtidos de bovinos com sorologia positiva para B. bovis e B. bigemina foram de 90,20 e 90,50% e de 88,20 e 78,70% para IFI e ELISA, respectivamente. O grau de concordância dos testes para B. bovis foi de 98,00% e o de B. bigemina, de 61,00%. A soroprevalência encontrada caracteriza esta região como uma área de estabilidade enzoótica para B. bovis, com índice elevado na prevalência de portadores de Babesia sp. O presente trabalho é inédito na região de Campos dos Goytacazes, que tem a pecuária como segunda fonte de renda.

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Antibodies to Neospora caninum were analyzed by an indirect fluorescent antibody test (IFAT), in stray and domiciled dogs from urban, periurban and rural areas from Curitiba, Paraná State, Brazil. Of the total of 556 dogs, 18.17% (101) were positive for N. caninum (titer 50). Frequency of antibody was 12.71 in urban, 15.73 in periurban, and 25.38% in rural dogs. Rural dogs had a significantly higher frequency of antibodies than urban dogs (P 0.05). There were no significant differences between the frequencies of antibodies in urban and periurban dogs (P>0.05), and between dogs from periurban and rural areas (P>0.05). Antibodies to N. caninum were detected in 34 of 233 domiciled dogs (14.59%) and in 17 of 126 stray dogs (13.49%). No statistical differences were observed considering life-style and geographic location of origin (P>0.05). Neospora caninum is widespread among dogs from urban, periurban and rural areas of the municipal district of Curitiba, Paraná, Brazil.

Anticorpos anti-Neospora caninum foram detectados pela reação de imunofluorescência indireta (RIFI), em cães errantes e domiciliados das áreas urbana, periurbana e rurais de Curitiba, estado do Paraná, Brasil. Do total de 556 cães, 18,17% (101) foram soropositivos para N. caninum (título de 1:50). A frequência de anticorpos foi de 12,71% nos cães urbanos, de 15,73% nos periurbanos e de 25,38% nos cães rurais. Nos cães rurais a frequência de anticorpos foi maior do que nos cães urbanos (P 0.05). Não houve diferença significativa entre as frequências de anticorpos dos cães urbanos e periurbanos (P>0,05), e dos periurbanos e rurais (P>0,05). Os anticorpos anti N. caninum foram detectados em 34 de 233 cães domiciliados (14,59%) e em 17 de 126 cães errantes (13,49%). Não houve diferença estatística significativa entre o tipo de criação e a origem (P>0,05). Neospora caninum está presente nos cães urbanos e periurbanos de Curitiba e nas áreas rurais do Estado do Paraná.

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A toxoplasmose é uma zoonose de ampla distribuição geográfica, causada pelo Toxoplasma gondii, um protozoário intracelular obrigatório. A maior parte dessas infecções em humanos é assintomática, porém podem causar consequências graves ou até fatais em pacientes com doenças imunossupressoras, receptores de órgãos e nos fetos. A transmissão pode ocorrer pela ingestão de carne crua ou mal passada, leite cru caprino, vegetais e frutas contaminadas, transfusão de sangue, transplante de órgãos ou por via transplacentária. Um dos métodos diagnósticos mais utilizados é a Reação de Imunofluorescência Indireta (RIFI) em que são identificados anticorpos IgM e IgG para Toxoplasma gondii. A soroprevalência humana no Brasil é variável, mas está entre 50 a 80%. Outras informações que contribuem para o diagnóstico da toxoplasmose são os dados epidemiológicos que podem ser obtidos por meio de questionários respondidos pelos pacientes. O objetivo desse estudo foi determinar a soroprevalência da toxoplasmose em doadores de sangue do Hemocentro do Hospital das Clínicas da Faculdade de Medicina de Botucatu. Em 450 amostras de soro os valores obtidos de anticorpos IgM anti-Toxoplasma, pela RIFI, foi de 48,0% e IgG, 35,1%. Conclui-se que a soroprevalência da toxoplasmose nesse grupo de doadores de sangue é alta, porém, corrobora com os encontrados no Brasil. Para prevenir a possível transmissão da infecção por meio de transfusões de sangue e hemoderivados é necessário a obtenção de dados epidemiológicos e análises sorológicas para triagem dos doadores.

Toxoplasmosis is a worldwide geographic zoonosis, caused by an obligate intracellular parasite, Toxoplasma gondii. Most of these infections in human being are asymptomatic, but may cause severe or fatal consequences in patients with immunosuppressive diseases, organ, blood, or hemoderived recipients and in the fetus. Transmission may occur by eating uncooked meat or goat milk, contaminated vegetables or fruits, blood transfusion, organ transplantation or by transplacental route. Indirect fluorescent antibody (IFA) test is the most used diagnostic technique by the research from anti-Toxoplasma gondii IgG and IgM antibodies. In Brazil, the seroprevalence is variable, but this is about 50% to 80%. Other information that contribute for the toxoplasmosis diagnosis are epidemiological data obtained from questionnaires replied for patients. The aim of the present study was verify the seroprevalence for toxoplasmosis in blood donors from Hemocentro, Hospital das Clínicas da Faculdade de Medicina de Botucatu. In 450 serum samples the values obtained of anti-Toxoplasma IgM antibodies, by IFA, was 48.0% and IgG, 35.1%. In conclusion, the infection occurrence in blood donors is high, however, agree with the values found in Brazil. The acquirement of epidemiological data and serological analysis in predonation are necessary for the infection transmission prevention through blood and hemoderived transfusion.

La toxoplasmosis es una zoonosis de amplia distribución geográfica, causada por Toxoplasma gondii, un protozoario estrictamente intracelular. La mayor parte de esas infecciones en humanos es clínicamente inaparente, todavía puede ocasionar consecuencias serias o mismo fatales en pacientes con enfermedades inmunosupresoras, en individuos receptores de órganos, de sangre o de hemoderivados, y también en los fetos. La transmisión puede ocurrir por la ingestión de carne y leche de cabra crudos, de verduras y frutas contaminadas, así como por transplante de órganos o por la vía transplacentaria. Uno de los métodos diagnósticos mas utilizados es la técnica de Reacción de Inmunofluorescencia Indirecta (RIFI), en que son identificados anticuerpos IgM y IgG anti-Toxoplasma gondii. La seroprevalencia en Brasil es variable (entre 50 a 80%). Otras informaciones que contribuyen para el diagnóstico de la toxoplasmosis son los datos epidemiológicos que pueden ser obtenidos por medio de cuestionarios respondidos por los pacientes. El objetivo de ese estudio fue determinar la ocurrencia de la infeccion en donadores de sangre del Hemocentro del Hospital de Clínicas de la Facultad de Medicina de Botucatu, São Paulo, Brasil. Utilizando la RIFI a partir de 450 muestras de sueros, se detectaran 48,0% de anticuerpos IgM anti-Toxoplasma, y 35,1% de IgG. Se concluye que la ocurrencia de toxoplasmosis en donadores de sangre es elevada, corroborando con los resultados encontrados en Brasil. Para prevenir la transmisión de la infección por medio de transfusión de sangre y hemoderivados es necesaria la obtención de los datos epidemiológicos así como la realización de análisis serologicas en el momento de predonación.

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We conducted a cross-sectional observational study, in order to determine the frequency of anti-A. marginale and anti-B. bovis antibodies in calves from four to 12 months of age from ten farms that producing B type milk and an equal number that produce raw milk refrigerated, located in the Campo das Vertentes region of Minas Gerais state, in the period September 2008 to August 2009. Blood smears were performed, serologic testing by indirect immunofluorescence technique (IFAT), given the packed cell volume, rickettsemia, and the clinical scores of animals infected by A. marginale. In the farms that produce B type milk, the overall average frequency of seropositive calves was 94.47% (166/176) and 89.20% (157/176) for A. marginale and B. bovis, respectively. Already on the farms that produce raw milk refrigerated, the overall average frequency of A. marginale was 92.59% (149/161) and for B. bovis from 86.30% (139/161), and there was no significant difference (p > 0.05) in the frequency of calves infected for both hemoparasitic between the two systems of milk production. Statistically significant (p 0.05) levels of rickettsemia among calves from farms with different types of milk production, where calves from properties that produce B type milk had a higher percentage of erythrocytes infected with A. marginale. In this study there was a predominance of calves with clinical

Foi realizado um estudo observacional do tipo transversal, com o objetivo de determinar a frequência de anticorpos anti-A. marginale e B. bovis em 337 bezerras com idade entre quatro a 12 meses, oriundas de dez propriedades produtoras de leite B e igual número de fazendas de leite cru refrigerado (leite C), na região do Campo das Vertentes de Minas Gerais, no período de setembro de 2008 a agosto de 2009. Foram realizados esfregaços sanguíneos, sorologia por meio da reação de imunofluorescência indireta (RIFI), determinado o volume globular e riquetsemia, e os escores clínicos das bezerras infectadas por A. marginale. Nas propriedades de leite B (LB), a frequência média global de bezerras soropositivas para A. marginale e B. bovis foi de 94,47% (166/176) e 89,20% (157/176), respectivamente. Nas fazendas de leite cru refrigerado (LCR), a frequência média global de bezerras soropositivas para A. marginale foi de 92,59% (149/161) e para B. bovis de 86,30% (139/161), não havendo diferença (p > 0,05) na frequência de animais infectados para ambos hemoparasitos entre os dois sistemas de produção de leite. Entretanto, houve diferença (p 0,05) nos níveis de riquetsemia entre as bezerras provenientes de propriedades com diferentes tipos de produção leiteira, onde os animais de fazendas de LB tiveram uma maior porcentagem de hemácias infectadas por A. marginale. Neste estudo, houv

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The results of the HA test were compared qualitatively and quantitatively with SF and IFI tests. Eighty canine serum samples were tested by the three techniques. There was an agreement of over 86% in SF-HA and 92% in IFI-HA tests. At a difference of one dilution (four-fold) there was 94% agreement in antibody titers between the SF-HA tests and 97% agreement in antibody titers between the IFI-HA tests.

As avaliações qualitativas e quantitativas da prova de HA foram realizadas comparativamente às de SF e IFI. Foram examinados 80 soros de cães pelas 3 técnicas tendo sido detectados 86% de concordância entre SF-HA e 92% de concordância entre IFI-HA. Os títulos de anticorpos apresentaram resultados concordantes ou afastados no máximo a uma diluição em 94% quando relacionado SF-HA e 97% quando da IFI-HA. A prova de HA dada a facilidade de execução e fácil padronização do antígeno, torna-a recomendável para a rotina juntamente com a prova de IFI.

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The objective of the present study was to correlate ophthalmic and haematological findings, compared with the serological data obtained by indirect fluorescent antibody test (IFATT) and by dot-blot linked immunoassay (DBELIA) in 51 dogs with uveitis due to possible ehrlichiosis infection. Thirty-four positive IFAT and forty-four positive DBELIA results were obtained in serum samples.The high correlation between uveitis and a positive serology for Ehrlichia canis was established. The DBELIA test was moresensitive for the diagnosis of ehrlichiosis than IFAT.

O objetivo do presente trabalho foi correlacionar os achados oftálmicos e hematológicos, comparados aos dados sorológicos obtidos por meio da reação de imunofluorescência indireta (RIFI) e dot-blot ELISA (DBELIA) de 51 cães com uveíte, possivelmente devido a erliquiose. Trinta e quatro soros sangüíneos foram positivos pela RIFAT e quarenta e quatro pelo DBELIA. Foi estabelecida uma alta correlação entre uveíte e sorologia positiva para a Ehrlichia canis. O DBELIA foi mais sensível para o diagnóstico da erliquiose comparativamente a RIFI.