Southern Brazilian geographic distribution of Migonemyia migonei (Diptera: Psychodidae), a putative vector of Leishmania infantum (Kinetoplastida: Trypanosomatidae): a systematic review / Distribuição geográfica sul brasileira de Migonemyia migonei (Diptera: Psychodidae), um vetor putativo de Leishmania infantum (Kinetoplastida: Trypanosomatidae): uma revisão sistemática

This systematic review gathered information on the spatial distribution in southern Brazil of the sandfly Migonemyia migonei, a possible vector of Leishmania species that cause visceral leishmaniasis (VL). Articles were searched from the PubMed, Scielo, Web of Science, and Scopus databases using the keywords: "Migonemyia migonei AND Paraná", "Migonemyia migonei AND Santa Catarina", "Migonemyia migonei AND Rio Grande do Sul", "phlebotomine AND Parana", " flebotomíneo AND Paraná" and "sandfly AND Paraná", "phlebotomine AND Santa Catarina;", " flebotomíneo AND Santa Catarina" and "sandfly AND Santa Catarina", "phlebotomine AND Rio Grande do Sul;", " flebotomíneo AND Rio Grande do Sul", and "sandfly AND Rio Grande do Sul". The initial search identified 322 articles that met the selection criteria. Empty files or duplicated were then excluded. The titles were screened, and the full texts were obtained. This review included 36 articles, covering 72 of the 399 (18.04%) municipalities in Paraná state, one of the 295 (0.33%) in Santa Catarina, and two of the 497 (0.40%) in Rio Grande do Sul. Mg. migonei was found in 54 municipalities of Paraná state, in one municipality of Santa Catarina, and in one of Rio Grande do Sul. Based on the wide distribution of Mg. migonei in the municipalities of Paraná, greater monitoring is required regarding cases of VL in humans and animals in this region, in addition to epidemiological investigations of these cases of suspected autochthony, as well as increased prevention and control efforts. More studies on VL are required in Santa Catarina and Rio Grande do Sul.

Esta revisão sistemática reuniu informações sobre a distribuição espacial no sul do Brasil do flebotomíneo Migonemyia migonei, um possível vetor de espécies de Leishmania causadoras da leishmaniose visceral (LV). Os artigos foram pesquisados nas bases de dados PubMed, Scielo, Web of Science e Scopus usando as palavras-chave: "Migonemyia migonei AND Paraná", "Migonemyia migonei AND Santa Catarina", "Migonemyia migonei AND Rio Grande do Sul", "phlebotomine AND Parana" , "flebotomíneo AND Paraná" e "flebotomíneo AND Paraná", "flebotomíneo AND Santa Catarina;", "flebotomíneo AND Santa Catarina" e "flebotomíneo AND Santa Catarina", "flebotomíneo AND Rio Grande do Sul;", "flebotomíneo AND Rio Grande do Sul" e "sandfly AND Rio Grande do Sul". A busca inicial identificou 322 artigos que atenderam aos critérios de seleção. Em seguida, arquivos vazios ou duplicados foram excluídos. Os títulos foram triados e os textos completos foram obtidos. Esta revisão incluiu 36 artigos, abrangendo 72 dos 399 (18,04%) municípios do Paraná, um dos 295 (0,33%) de Santa Catarina, dois dos 497 (0,40%) do Rio Grande do Sul. Mg. migonei foi encontrado em 54 municípios do Paraná estado, em um município de Santa Catarina e em um do Rio Gr ande do Sul. Com base na ampla distribuição de Mg. migonei nos municípios paranaenses, é necessária maior atenção quanto aos casos de LV em humanos e animais, além de investigações epidemiológicas desses casos de suspeita de autoctonia, bem como maiores esforços de prevenção e controle. Mais estudos são necessários em Santa Catarina e Rio Grande do Sul.

Cytological and molecular detection of Leishmania spp. in different biological tissues of dogs in areas endemic for visceral leishmaniasis / Detecção citológica e molecular de Leishmania spp. em diferentes amostras biológicas de cães em áreas endêmicas para leishmaniose visceral

Devido à ampla distribuição da leishmaniose visceral (LV) no Brasil e à importância dos cães no ciclo de transmissão dessa zoonose, o presente estudo teve como objetivo avaliar a ocorrência de Leishmania spp. e caracterizar a espécie circulante em diferentes tecidos biológicos de cães da Baixada Cuiabana, Mato Grosso, Brasil. Amostras de sangue, linfonodo e medula óssea foram coletadas de 205 cães para realização de análise parasitológica por citologia e análise molecular por meio da nested PCR (nPCR) e do sequenciamento . Dos 205 cães estudados, 34 (16,58%) animais foram positivos pela nPCR, dos quais 12 possuíam formas amastigotas de Leishmania spp. na citologia. Amostras positivas na nPCR foram sequenciadas e caracterizadas como Leishmania (Leishmania) infantum. A sensibilidade da nPCR nas amostras de medula óssea, linfonodo e sangue foi de 94,87%, 91,8% e 98%, respectivamente, enquanto a especificidade foi de 100% para todas as amostras. O presente estudo relata a ocorrência de LV canina em 16,58% dos cães analisados, caracterizando a L. infantum como agente causador. Entre as amostras avaliadas, a medula óssea foi a única a apresentar concordância substancial entre as técnicas de nPCR e citologia (k = 0,643), sendo considerada a amostra mais adequada para o diagnóstico da doença. Os resultados ampliam o conhecimento de espécies de Leishmania infectando cães no Brasil, destacando a importância da identificação etiológica em áreas com escassos dados moleculares.(AU)

Cytological and molecular detection of Leishmania spp. in different biological tissues of dogs in areas endemic for visceral leishmaniasis / Detecção citológica e molecular de Leishmania spp. em diferentes amostras biológicas de cães em áreas endêmicas para leishmaniose visceral

Devido à ampla distribuição da leishmaniose visceral (LV) no Brasil e à importância dos cães no ciclo de transmissão dessa zoonose, o presente estudo teve como objetivo avaliar a ocorrência de Leishmania spp. e caracterizar a espécie circulante em diferentes tecidos biológicos de cães da Baixada Cuiabana, Mato Grosso, Brasil. Amostras de sangue, linfonodo e medula óssea foram coletadas de 205 cães para realização de análise parasitológica por citologia e análise molecular por meio da nested PCR (nPCR) e do sequenciamento . Dos 205 cães estudados, 34 (16,58%) animais foram positivos pela nPCR, dos quais 12 possuíam formas amastigotas de Leishmania spp. na citologia. Amostras positivas na nPCR foram sequenciadas e caracterizadas como Leishmania (Leishmania) infantum. A sensibilidade da nPCR nas amostras de medula óssea, linfonodo e sangue foi de 94,87%, 91,8% e 98%, respectivamente, enquanto a especificidade foi de 100% para todas as amostras. O presente estudo relata a ocorrência de LV canina em 16,58% dos cães analisados, caracterizando a L. infantum como agente causador. Entre as amostras avaliadas, a medula óssea foi a única a apresentar concordância substancial entre as técnicas de nPCR e citologia (k = 0,643), sendo considerada a amostra mais adequada para o diagnóstico da doença. Os resultados ampliam o conhecimento de espécies de Leishmania infectando cães no Brasil, destacando a importância da identificação etiológica em áreas com escassos dados moleculares.(AU)

Canine visceral leishmaniasis in the Northeast Region of Brazil

Background Visceral leishmaniasis (VL) is a zoonosis that affects dogs and other mammals, including humans. Contact with dogs is a major risk factor for humans. This disease is endemic in several regions of Brazil. The aim of this study was to determine the prevalence of Leishmania spp. infection in dogs and to correlate it with possible risk factors. Methods Blood samples were collected from 391 dogs of different ages, breeds, and both genders, coming from Campina Grande, Paraíba state, Brazil. An epidemiological questionnaire was employed in order to identify risk factors associated with the disease. Serological tests were performed using indirect immunofluorescence, enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA S7®) and polymerase chain reaction. Results Leishmania spp. antibodies were detected in 33 (8.4 %) and 17 (4.3 %) dogs according to the indirect immunofluorescence test (IFAT) and enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA S7®), respectively. PCR results indicated the presence of L. chagasi DNA in only eight (2 %) blood samples. There was a significant association between reactive animals and contact with animals from different houses (OR = 4.1; p= 0.02). Conclusions It is suggested that CVL may occur in urban areas. Moreover, it is demonstrated that the association among different diagnostic tests may lead to a more accurate identification of positive animals, which might help to improve the disease control and prevent euthanasia in false-positive results.(AU)

Canine visceral leishmaniasis in the Northeast Region of Brazil

Visceral leishmaniasis (VL) is a zoonosis that affects dogs and other mammals, including humans. Contact with dogs is a major risk factor for humans. This disease is endemic in several regions of Brazil. The aim of this study was to determine the prevalence of Leishmania spp. infection in dogs and to correlate it with possible risk factors. Methods Blood samples were collected from 391 dogs of different ages, breeds, and both genders, coming from Campina Grande, Paraíba state, Brazil. An epidemiological questionnaire was employed in order to identify risk factors associated with the disease. Serological tests were performed using indirect immunofluorescence, enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA S7®) and polymerase chain reaction. Results Leishmania spp. antibodies were detected in 33 (8.4 %) and 17 (4.3 %) dogs according to the indirect immunofluorescence test (IFAT) and enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA S7®), respectively. PCR results indicated the presence of L. chagasi DNA in only eight (2 %) blood samples. There was a significant association between reactive animals and contact with animals from different houses (OR = 4.1; p= 0.02). Conclusions It is suggested that CVL may occur in urban areas. Moreover, it is demonstrated that the association among different diagnostic tests may lead to a more accurate identification of positive animals, which might help to improve the disease control and prevent euthanasia in false-positive results.(AU)

Canine visceral leishmaniasis in the Northeast Region of Brazil

Visceral leishmaniasis (VL) is a zoonosis that affects dogs and other mammals, including humans. Contact with dogs is a major risk factor for humans. This disease is endemic in several regions of Brazil. The aim of this study was to determine the prevalence of Leishmania spp. infection in dogs and to correlate it with possible risk factors. Methods Blood samples were collected from 391 dogs of different ages, breeds, and both genders, coming from Campina Grande, Paraíba state, Brazil. An epidemiological questionnaire was employed in order to identify risk factors associated with the disease. Serological tests were performed using indirect immunofluorescence, enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA S7®) and polymerase chain reaction. Results Leishmania spp. antibodies were detected in 33 (8.4 %) and 17 (4.3 %) dogs according to the indirect immunofluorescence test (IFAT) and enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA S7®), respectively. PCR results indicated the presence of L. chagasi DNA in only eight (2 %) blood samples. There was a significant association between reactive animals and contact with animals from different houses (OR = 4.1; p= 0.02). Conclusions It is suggested that CVL may occur in urban areas. Moreover, it is demonstrated that the association among different diagnostic tests may lead to a more accurate identification of positive animals, which might help to improve the disease control and prevent euthanasia in false-positive results.

DETECÇÃO DE ANTICORPOS ANTI-Leishmania infantum EM CÃES PROCEDENTES DE DIFERENTES MESORREGIÕES DO ESTADO DE PERNAMBUCO

leishmaniose visceral (LV) é uma zoonose com ampla distribuição geográfica apresentando 95% concentrados em Bangladesh, Brasil, China, Etiópia, Índia, Quênia, Nepal, Somália, Sudão do Sul e Sudão. O Brasil enfrenta o processo de expansão e urbanização da LV, com 43% da população exposta ao risco de desenvolver a doença, com casos de LV registrados em todas as regiões brasileiras, notadamente a região Nordeste do país. Este estudo teve como objetivo determinar a prevalência da leishmaniose visceral canina em diferentes mesorregiões do estado de Pernambuco. Foram testados com o teste de ELISA indireto (SNAP Leishmania® Idexx), 500 soros caninos provenientes do banco de soro do laboratório de Doenças Parasitárias dos Animais Domésticos/UFRPE. Os dados obtidos foram confrontados com o levantamento de casos de LV em humanos e com o levantamento da literatura referente a fauna flebotomínica nas regiões estudadas. Dos 500 soros testados 49,4% (247/500) foram reagentes ao teste. A frequência de resultados positivo ao teste para leishmaniose visceral canina (LVC) entre as diferentes mesorregiões variou de 28 a 73%, com maior prevalência na Região Metropolitana do Recife (69,63%), seguida do Sertão (38,24%) e Agreste (37,84%). Lutzomyia longipalpis tem sido identificado em todas as mesorregiões, porém, não tem sido localizado em alguns municípios que apresentam casos da doença, o que pode levar a suspeita de outros vetores estarem envolvidos ou levar em consideração outras vias de transmissão. Os dados de animais sororreagentes apresentados são compatíveis com os achados da doença humana no Estado, havendo correlação positiva e significativa entre os dados de LV e LVC. Conclui-se que a Leishmaniose Visceral canina vem avançando no estado de Pernambuco. Os dados revelaram elevada prevalência da doença nas diferentes mesorregiões do Estado, sugerindo a necessidade de medidas de controle mais eficazes.

Visceral leishmaniasis (VL) is a zoonosis with wide geographic distribution, with 95% concentrated in Bangladesh, Brazil, China, Ethiopia, India, Kenya, Nepal, Somalia, South Sudan and Sudan. Brazil is facing the process of expansion and urbanization of VL, with 43% of the population exposed to the risk of developing the disease, with cases of VL registered in all Brazilian regions, notably the Northeast region of the country. This study aimed to determine the prevalence of canine visceral leishmaniasis in different mesoregions of the Pernambuco state. A total of 500 canine sera from the laboratory of Parasitic Diseases of Domestic Animals/UFRPE were tested with the indirect ELISA test (SNAP Leishmania® Idexx). Data were compared with a survey of VL cases in humans and with a survey of the literature on sandfly fauna in the regions studied. Of the 500 sera tested, 49.4% (247/500) were reactive to the test. The frequency of positive test results for canine visceral leishmaniasis (CVL) among the different mesoregions ranged from 28 to 73%, with the highest prevalence in the Metropolitan Region of Recife (69.63%), followed by Sertão (38.24%) and Agreste (37.84%). Lutzomyia longipalpis has been identified in all mesoregions, however, it has not been located in some municipalities that present cases of the disease, which may lead to suspicion of other vectors being involved or taking into account other transmission routes. The data from seroreactive animals presented are compatible with the findings of human disease in the state, with a positive and significant correlation between the VL and CVL data. It is concluded that canine Visceral Leishmaniasis has been advancing in the state of Pernambuco. The data revealed a high prevalence of the disease in the different mesoregions of the State, suggesting the need for more effective control measures.

Design of primer pairs for species-specific diagnosis of Leishmania (Leishmania) infantum chagasi using PCR / Construção de pares de primers para a detecção espécie-específica de Leishmania (Leishmania) infantum chagasi por PCR

The objective of this study was to design and evaluate new primers for species-specific detection of L. infantum chagasi using PCR. Two combinations of primer pairs were established with the aim of obtaining specific amplification products from the L. infantum chagasi 18S rRNA gene. The combinations of the primer pairs and the respective sizes of the PCR products, based on the U422465 GenBank reference sequence of L. infantum chagasi, were: LCS1/LCS3 (259 bp) and LCS2/LCS3 (820 bp). It was concluded that the new PCR assays optimized using the primer pairs LCS1/LCS3 and LCS2/LCS3 were effective for specific detection of L. infantum chagasi, with analytical sensitivity to detect 1 pg/µL of DNA.

Objetivou-se com este trabalho construir e avaliar novos primers para a detecção espécie-específicos de L. infantum chagasi por PCR. Foram estabelecidas duas combinações de pares de primers com a finalidade de obter produtos de amplificação específicos para o gene 18S rRNA de L. infantum chagasi. As combinações dos pares de primers e os respectivos tamanhos dos produtos de PCR, previstos conforme a sequência de referência utilizada (GenBank U422465) foram: LCS1/LCS3 (259 pb); LCS2/LCS3 (820 pb). Pôde-se concluir que os novos ensaios de PCR otimizados neste estudo, empregando os pares de primers LCS1/LCS3 e LCS2/LCS3, foram efetivos para a detecção específica de L. infantum chagasi, com sensibilidade analítica para detectar 1 pg/µL de DNA.

Design of primer pairs for species-specific diagnosis of Leishmania (Leishmania) infantum chagasi using PCR / Construção de pares de primers para a detecção espécie-específica de Leishmania (Leishmania) infantum chagasi por PCR

The objective of this study was to design and evaluate new primers for species-specific detection of L. infantum chagasi using PCR. Two combinations of primer pairs were established with the aim of obtaining specific amplification products from the L. infantum chagasi 18S rRNA gene. The combinations of the primer pairs and the respective sizes of the PCR products, based on the U422465 GenBank reference sequence of L. infantum chagasi, were: LCS1/LCS3 (259 bp) and LCS2/LCS3 (820 bp). It was concluded that the new PCR assays optimized using the primer pairs LCS1/LCS3 and LCS2/LCS3 were effective for specific detection of L. infantum chagasi, with analytical sensitivity to detect 1 pg/µL of DNA.

Objetivou-se com este trabalho construir e avaliar novos primers para a detecção espécie-específicos de L. infantum chagasi por PCR. Foram estabelecidas duas combinações de pares de primers com a finalidade de obter produtos de amplificação específicos para o gene 18S rRNA de L. infantum chagasi. As combinações dos pares de primers e os respectivos tamanhos dos produtos de PCR, previstos conforme a sequência de referência utilizada (GenBank U422465) foram: LCS1/LCS3 (259 pb); LCS2/LCS3 (820 pb). Pôde-se concluir que os novos ensaios de PCR otimizados neste estudo, empregando os pares de primers LCS1/LCS3 e LCS2/LCS3, foram efetivos para a detecção específica de L. infantum chagasi, com sensibilidade analítica para detectar 1 pg/µL de DNA.

Avaliação da biópsia de medula óssea esternal e ilíaca no diagnóstico da leishmaniose visceral canina / Evaluation of sternal and iliac crist bone marrow biopsy in diagnosis of canine Visceral Leishmaniosis

No Brasil, o diagnóstico da Leishmaniose Visceral Canina (LVC) tem sido realizado por meio de métodos parasitológicos, sorológicos e moleculares. Apesar de o diagnóstico parasitológico ser um método de confirmação, a realização da biópsia de medula óssea em cães, comumente tem sido realizada na crista ilíaca. O objetivo deste trabalho foi avaliar a biópsia de medula óssea esternal (BME) e ilíaca (BMI) no diagnóstico da LVC. Foram utilizados vinte e oito animais com infecção natural por Leishmania infantum com e sem sinais clínicos de LVC e sorologicamente positivos. Os resultados mostraram não haver diferença significativa (P > 0,05) entre o local da biópsia quanto à detecção do parasito, no entanto recomenda-se a biópsia esternal pela sua simplicidade e praticidade no diagnóstico da LVC.

In Brazil, Canine Visceral Leishmaniasis (CVL) diagnosis has been made by parasitological, serological, and molecular methods. Although the parasitological diagnosis is the confirmatory method, the bone marrow biopsy has been carried out the biopsy of the iliac crist. The goal of this research was to evaluate the sternal (SMB) and iliac (IMB) bone marrow biopsy to diagnosis of CVL. A total of twenty eight animals naturally infected with Leishmania infantum (symptomatic and asymptomatic) and serologically positive were utilized. The results showed no statistical difference (P > 0.05) between the local of biopsy. The findings support the sternal biopsies use because is a simple and pratical method to CVL diagnosis.

Avaliação da biópsia de medula óssea esternal e ilíaca no diagnóstico da leishmaniose visceral canina / Evaluation of sternal and iliac crist bone marrow biopsy in diagnosis of canine Visceral Leishmaniosis

No Brasil, o diagnóstico da Leishmaniose Visceral Canina (LVC) tem sido realizado por meio de métodos parasitológicos, sorológicos e moleculares. Apesar de o diagnóstico parasitológico ser um método de confirmação, a realização da biópsia de medula óssea em cães, comumente tem sido realizada na crista ilíaca. O objetivo deste trabalho foi avaliar a biópsia de medula óssea esternal (BME) e ilíaca (BMI) no diagnóstico da LVC. Foram utilizados vinte e oito animais com infecção natural por Leishmania infantum com e sem sinais clínicos de LVC e sorologicamente positivos. Os resultados mostraram não haver diferença significativa (P > 0,05) entre o local da biópsia quanto à detecção do parasito, no entanto recomenda-se a biópsia esternal pela sua simplicidade e praticidade no diagnóstico da LVC. (AU)

In Brazil, Canine Visceral Leishmaniasis (CVL) diagnosis has been made by parasitological, serological, and molecular methods. Although the parasitological diagnosis is the confirmatory method, the bone marrow biopsy has been carried out the biopsy of the iliac crist. The goal of this research was to evaluate the sternal (SMB) and iliac (IMB) bone marrow biopsy to diagnosis of CVL. A total of twenty eight animals naturally infected with Leishmania infantum (symptomatic and asymptomatic) and serologically positive were utilized. The results showed no statistical difference (P > 0.05) between the local of biopsy. The findings support the sternal biopsies use because is a simple and pratical method to CVL diagnosis.(AU)

DISTRIBUIÇÃO ESPACIAL DA LEISHMANIOSE VISCERAL NO ESTADO DE SÃO PAULO, BRASIL, NO PERÍODO DE 1970 A 2014

Atualmente, no Brasil, a leishmaniose visceral (LV) é classificada como uma enfermidade reemergente, em processo de transição epidemiológica, juntamente com um aumento da incidência nas áreas endêmicas e presente em quatro das cinco regiões do território nacional. Assim, este trabalho objetiva analisar a evolução e a distribuição espacial da LV no Estado de São Paulo, desde o seu primeiro registro até o ano 2014, com vistas a fornecer subsídios para as autoridades de saúde pública para melhoria do programa de controle. Por meio de um estudo descritivo, dados secundários obtidos junto ao Centro de Vigilância Epidemiológica (CVE) e à Superintendência de Controle de Endemias (SUCEN) do Estado de São Paulo foram analisados e tratados em um sistema de informações geográficas (ArcGis 10.1), com confecção de mapas de distribuição. Observou-se que existem dois padrões distintos da distribuição da LV no estado: o da região oeste, definido pela ocorrência de casos humanos, alta prevalência de casos caninos e um maior número de municípios onde L. longipalpis está presente; e o da região leste, caracterizada pela ausência de notificação de casos humanos, até mesmo onde o flebotomíneo e casos caninos são presentes. Deduz-se que a expansão ocidental dos casos caninos e humanos seguindo a mesma rota de expansão do vetor não é coincidência, isso porque os registros do flebotomíneo precedem as notificações da doença no cão e, subsequentemente, no ser humano. A pesquisa serve de base para estudos futuros e fornece subsídios para ações do Programa Estadual de Controle. Sugere-se que haja um contínuo levantamento da presença do vetor e vigilância sorológica dos cães, bem como educação da população para que esteja receptiva à eutanásia dos cães em casos positivos, uma vez que em relação ao ciclo do vetor, nada pode ser feito.

Nowadays, in Brazil, visceral leishmaniasis (VL) is classified as a re-emerging disease, in a clear process of epidemiological transition, along with an increased incidence in endemic areas, and present in four of the five regions of the country. Therefore, this essay aims to analyze the evolution and spatial distribution of VL in São Paulo, since its first record until the year 2014, in order to provide information for public health authorities to improve the control program. By means of an ecological and descriptive study, secondary data obtained from the Centro de Vigilância Epidemológica (CVE) and the Superintendência de Controle de Endemias (SUCEN) of São Paulo were analyzed and treated in a geographic information system (ArcGIS 10.1), with confection distribution maps. It was observed that there are two distinct patterns of distribution of LV in São Paulo: one in the western region, defined by the occurrence of human cases, high prevalence of canine cases and a greater number of municipalities where sand fly is present; the other, represented by the eastern region, characterized by the absence of reporting human cases, even where the sand flies and canine cases are present. It follows that western expansion of canine and human cases following the same expansion route as the vector is not a coincidence, since the phlebotomine sandflies records precede the notifications of the disease in dogs and subsequently in humans. The research is the basis for future studies and provides subsidies for actions of the State Control Program. It is suggested that there is a continuous survey of the presence vector and serological monitoring of dogs as well as education of the population so that it is receptive to euthanasia dogs in the positive cases, since in relation to the vector cycle, nothing can be done

ESTUDO SOROLÓGICO DA INFECÇÃO POR Leishmania sp. E Leptospira spp. EM CÃES DE ASSENTAMENTOS RURAIS NO ESTADO DA PARAÍBA, BRASIL

Os assentamentos rurais são definidos como espaços agrários de organização familiar, cuja finalidade é o fortalecimento da agricultura familiar a partir de políticas públicas. São ambientes peculiares que podem representar risco de doenças, especialmente de caráter zoonótico, considerando naturalmente o convívio próximo com os animais, que de certo modo, podem atuar como fontes de infecção. O capítulo I do presente trabalho objetivou determinar a soropositividade para Leishmania sp. em cães de assentamentos do Estado da Paraíba, Nordeste do Brasil, bem como identificar os fatores de risco. Foram utilizados 306 cães e o diagnóstico sorológico da leishmaniose visceral canina (LVC) foi realizado através do ELISA S7. Dos 306 cães investigados, 118 apresentaram anticorpos anti-Leishmania sp., resultando em frequência de 38,6%. Idade de 12 24 meses (OR = 2,97), idade de 24 48 meses (OR = 4,83), idade de 4 6 anos (OR = 4,40), idade > 6 anos (OR = 3,62), contato com aves (OR = 1,67) e sexo (fêmea) (OR = 1,97) foram apontados como fatores de risco. A frequência da LVC em cães de assentamentos rurais do semiárido paraibano foi considerada alta, o que torna a população desses locais susceptível à infecção. Isso aponta para uma necessidade de alerta aos órgãos de vigilância epidemiológica para estabelecer medidas de prevenção e controle dessa zoonose. Recomenda-se a construção dos aviários afastados das residências, pulverização com inseticidas nas habitações humanas e instalações dos animais, bem como melhorias nas práticas sanitárias, objetivando reduzir o acúmulo de matéria orgânica e consequentemente diminuir a população de flebótomo e o contato deste com os seres humanos. O objetivo do capítulo II foi determinar a frequência de anticorpos anti-Leptospira spp. em cães de assentamentos rurais do Estado da Paraíba, Nordeste do Brasil, bem como identificar os fatores de risco. Foram utilizados 306 cães e o diagnóstico de Leptospira spp. realizado pela técnica de Soroaglutinação Microscópica (SAM). Foram identificados 27/306 (8,82%; IC 95% = 6,13 - 12,5%) cães soropositivos para Leptospira spp. O sorotipo mais frequente foi o Pomona. A criação do tipo solto (OR = 3,53) foi apontada como fator de risco para a doença. Os resultados do presente estudo indicam a presença de anticorpos anti-leptospira spp. em cães de áreas de assentamentos rurais do Estado da Paraíba, Nordeste do Brasil. Isso reforça a necessidade de limitar o contato de cães com reservatórios silvestres e implantação de melhorias nas condições higiênico-sanitário nos assentamentos, destacando-se a construção de pocilgas afastadas das residências com o intuito de reduzir a ocorrência dessa infecção e, consequentemente, diminuir a transmissão da doença aos seres humanos e animais.

Rural settlements are designed areas for landless workers, which purpose is to strengthen family agriculture through public policies. They are peculiar environments that may represent a risk of diseases, especially zoonotic types, naturally considering living close to animals, which in a certain way, may act as sources of infection. Chapter I of this study aimed to determine the seropositivity and risk factors for Leishmania sp. in dogs from rural settlements in the State of Paraíba, Northeastern of Brazil. A total of 306 dogs were tested, and the serological diagnosis of canine visceral leishmaniasis (CVL) was performed by ELISA S7. Of the 306 dogs, 118 (38,6%) showed anti-Leishmania sp. antibodies. The risk factors identified for CVL seropositivity were: age between 12-24 months (OR = 2.97), age between 24 48 months (OR = 4.83), age between 4-6 years (OR = 4.40), age > 6 years (OR = 3.62), contact with birds (OR = 1.675) and gender (female) (OR = 1.97). The high frequency of LVC in dogs from rural settlements in the semi-arid region of Paraíba makes the population of these locations susceptible to infection. This factor points to a need to alert the epidemiological surveillance agencies to establish measures to prevent and control this zoonosis. It is recommended the construction of poultry houses apart from residences, spraying with insecticides in human habitations and animal facilities, as well as, improvements in sanitary practices, aiming to reduce the accumulation of organic matter and therefore decrease the population of phlebotomy and its contact with human beings. The purpose of chapter II was to determine the frequency of anti-Leptospira spp. antibodies in dogs from the rural settlements of the state of Paraíba, northeastern of Brazil, as well as identify risk factors. A total of 306 dogs were tested, and the diagnosis of Leptospira spp. was performed by the Microscopic Agglutination Test (MAT). There were 27/306 (8,82%; IC 95% = 6,13 - 12,5%) dogs identified as being seropositive for Leptospira spp. the Pomona was the most frequent serotype. The creation of loose type (OR = 3.53) was identified as a risk factor for the disease. The results of this study indicate the presence of antibodies anti-leptospira spp in dogs from rural settlements areas of the state of Paraiba, northeastern of Brazil. This fact reinforces the need to limit the contact of dogs with wild reservoirs and implementation of improvements in sanitary conditions in the settlements, highlighting the construction of pigsties apart from homes in order to reduce the occurrence of the infections and therefore reduce the transmission of the disease to humans and animals.

Leishmaniose visceral canina na zona rural do município de Patos-PB: aspectos epidemiológicos e padronização de um ensaio sorológico

No Brasil, a leishmaniose visceral é causada pelo protozoário Leishmania (Leishmania) infantum chagasi. É uma zoonose crônica, considerada um grave problema de saúde pública no mundo. O Capítulo I do presente trabalho objetivou estimar a soroprevalência e os fatores de risco da leishmaniose visceral canina (LVC) na zona rural do município de Patos, Paraíba, além de avaliar a eficiência dos testes sorológicos: ELISA, RIFI e Teste Imunocromatográfico Dual Path Plataform (DPP). Considerou-se o ELISA como padrão ouro, já que é o teste confirmatório pelo Ministério da Saúde para a LVC. Foram coletadas 362 amostras de sangue e a prevalência sorológica foi determinada a partir das amostras que foram positivas em, pelo menos, dois testes sorológicos. Aplicou-se um questionário epidemiológico aos proprietários para identificação dos fatores de risco. A soroprevalência encontrada foi de 11,33% (41/362). O DPP apresentou sensibilidade de 58,33% e especificidade de 95,54%. A RIFI apresentou sensibilidade de 83,33% e especificidade de 99,36%. Os resultados da comparação dos ensaios sorológicos demonstram que o DPP não é a melhor técnica para triagem dos animais positivos em função da baixa sensibilidade do método. O fator de risco identificado na análise multivariada foi o sexo, em que os cães machos apresentaram duas vezes mais chances de desenvolver a doença, o que pode ser justificado por serem mais utilizados para a caça e como cão de guarda, o que favorece a exposição do animal aos flebótomos. A soroprevalência da leishmaniose visceral canina aumentou consideravelmente no município de Patos, o que indica a necessidade de aplicação de medidas de controle. O objetivo do Capítulo II foi desenvolver e padronizar um teste de Soroaglutinação em Látex (SAL) utilizando a proteína recombinante HSP70 de Leishmania (L.) infantum chagasi para o diagnóstico da leishmaniose visceral canina. Quarenta amostras de soro, 20 positivas e 20 negativas, foram testadas em três diluições diferentes. Os melhores resultados foram na diluição 1:4, com sensibilidade de 75% e especificidade de 90%. O teste de Soroaglutinação em Látex é um bom método de diagnóstico de triagem por ser um teste rápido e de fácil manipulação; a utilização do antígeno purificado poderá aumentar a sensibilidade do ensaio.

In Brazil, visceral leishmaniasis is caused by Leishmania (Leishmania) infantum chagasi. It is a chronic zoonosis and considered a worldwide public health problem. Chapter I describes the prevalence and risk factors of canine visceral leishmaniasis (CVL) in Patos, Paraíba, and evaluate the performance of serological tests commonly used in CVL (ELISA, IFA and Test DPP immunoassay). 362 blood samples were collected and serologic prevalence was determined from samples that were positive in at least two serological tests. The owners answered an epidemiological questionnaire to identify potential risk factors. Estimated seroprevalence was 11.33% (41/362). ELISA was taken as the gold standard because it is established as the confirmatory test to CVL by the Ministry of Health. Dual Path Platform (DPP) had a sensitivity of 58.33% and specificity of 95.54%. IFA had a sensitivity of 83.33% and specificity of 99.36%. The comparison of serological tests showed that DPP is not the best technique to screen for positive animals due to its low sensitivity. By multivariate analysis, animal gender was identified as risk factor and male dogs were two times more likely to develop the disease, what can be justified because of their use in hunting and as guard dogs, increasing the contact with other animals and with phlebotomine sand flies. The prevalence of canine visceral leishmaniasis has increased considerably in the county of Patos, Paraíba, which indicates the urgent need to take control measures. Chapter II describes the development and standardization of a latex agglutination test based on a recombinant protein (HSP70) of Leishmania (L.) infantum chagasi for the diagnosis of canine visceral leishmaniasis. Forty serum samples, 20 from positives and 20 from negative animals, were tested at three different dilutions. The best result was on 1:4, with a sensitivity of 75% and specificity of 90%. The Rapid Latex Agglutination Test is a good screening method, being fast and of easy handling; the use of purified antigen may enhance the assay sensitivity.

Níveis séricos da gama-glutamiltransferase em cães com e sem infecção natural por Leishmania (Leishmania) chagasi / Serum levels of gamma-glutamyl transferase in dogs naturally infected or not by Leishmania (Leishmania) Chagasi

The serum levels of Gamma-GT in dogs naturally infected by Leishmania (Leishmania) chagasi were evaluated. Two groups of animals were used: the first with 41 naturally infect dogs and the second with 14 uninfect animals. The results showed 17.1% (7/41) dogs presented high levels of gamma-GT, but no difference between groups was observed. So, the serum level of gamma-GT is not a tool for diagnosis of visceral leishmaniasis in dogs.(AU)

Renal involvement in visceral leishmaniasis dogs

Visceral leishmaniasis (VL) is a zoonosis that affects both animals and man. Dogs are the etiological agents main reservoir. The aim of this study was to evaluate the clinical laboratory aspects and renal histopathology of VL dogs. Thirty-four symptomatic (case) and 17 asymptomatic (control) VL seropositive dogs of different breeds, sexes, and ages from Teresina, Piauí State, Brazil, were used. Diagnosis was confirmed by enzyme-linked immunosorbent assay and indirect immunofluorescence test. Clinical and laboratory tests included blood cell count and renal function analysis (urea and creatinine). Animals were subjected to euthanasia and necropsy. Renal fragments were prepared by the usual histological techniques and stained with hematoxylin-eosin and periodic acid-Schiff. Physical examination showed that lymph node hypertrophy (85.29%) and skin lesions (35.29%) were frequent in the case group. Anemia was found in 55.88% of the case and in 11.76% of the control group. There was a significant difference between groups by Fishers exact test. Two case-group dogs showed azotemia. Renal histopathological evaluation showed that 61.76% case and 17.65% control-group dogs had membranoproliferative glomerulonephritis. Mesangial proliferative glomerulonephritis was seen in 32.35% case and 64.70% control-group animals. There was a significant difference for both types of glomerulonephritis between groups. Amastigote forms of Leishmania were found in the renal parenchyma, in the inflammatory infiltrate of one case-group dog. We concluded that, in canine VL, regardless of the clinical signs at physical examination, the kidneys are frequently compromised.

Leishmaniose visceral (Calazar): cinco casos em cães de Santa Maria, Rio Grande do Sul, Brasil

Five canine cases of visceral leishmaniasis were diagnosed. All five dogs presented with icterus, intermitent fever, vomition, anorexia and emaciation. The most prominent gross lesions were hemorrhagic gastroenteritis, interstitial pneumonia and splenomegaly. In tissue sections, free and intracellular forms of Leishmania spp were depicted in macrophages and endothelial cells of all organs scanned. Epidemiological survey to detect either the agent or the sandfly was negative.

Leishmaniose visceral foi diagnosticada no exame pós-morte de cinco cães da região de Santa Maria, RS. Todos os animais mostraram sinais de doença crônica com icterícia, anorexia, vômito, febre intermitente e emaciaçâo. Os achados macroscópicos à necropsia foram de gastrenterite hemorrágica, pneumonia intersticial e esplenomegalia. Histologicamente foram detectadas formas livres e intracelulares de Leishmania spp em macrófagos e células endoteliais em todos os tecidos investigados. Estudos epidemiológicos, realizados na região onde a maioria dos casos ocorreu, foram negativos para a detecção do agente e do vetor biológico.

Leishmaniose visceral (Calazar): cinco casos em cães de Santa Maria, Rio Grande do Sul, Brasil

Five canine cases of visceral leishmaniasis were diagnosed. All five dogs presented with icterus, intermitent fever, vomition, anorexia and emaciation. The most prominent gross lesions were hemorrhagic gastroenteritis, interstitial pneumonia and splenomegaly. In tissue sections, free and intracellular forms of Leishmania spp were depicted in macrophages and endothelial cells of all organs scanned. Epidemiological survey to detect either the agent or the sandfly was negative.

Leishmaniose visceral foi diagnosticada no exame pós-morte de cinco cães da região de Santa Maria, RS. Todos os animais mostraram sinais de doença crônica com icterícia, anorexia, vômito, febre intermitente e emaciaçâo. Os achados macroscópicos à necropsia foram de gastrenterite hemorrágica, pneumonia intersticial e esplenomegalia. Histologicamente foram detectadas formas livres e intracelulares de Leishmania spp em macrófagos e células endoteliais em todos os tecidos investigados. Estudos epidemiológicos, realizados na região onde a maioria dos casos ocorreu, foram negativos para a detecção do agente e do vetor biológico.