Sandflies in an endemic area for Visceral Leishmaniasis in Northeastern Brazil / Flebotomíneos em uma área endêmica para Leishmaniose Visceral no Nordeste do Brasil

Phlebotomines of the genus Lutzomyia are important vector for species of Leishmania, the etiological agent of leishmaniasis. The aim of this study was to assess the diversity of sandflies in an endemic area for Visceral Leishmaniasis (VL). Sampling was performed in four localities on the coast of the municipality of Goiana, state of Pernambuco, Northeastern Brazil. Specimens were collected monthly on three consecutive nights, from November 2017 to October 2018. CDC light traps were installed at a height of 1.5 m above the ground, in two ecotypes (i.e. tree and animal facility), both in peridomestic areas. A total of 5,205 sandflies were collected, among which the species Lutzomyia longipalpis (99.85%; 5,197/5,205) was the most common, followed by Lutzomyia evandroi (0.13%; 07/5,205) and Lutzomyia whitmani (0.02%; 01/5,205). Specimens of L. longipalpis were collected throughout the study period and most of them were found near to the animal facilities. The findings from this research indicate that vectors for Leishmania infantum are present in the study area throughout the year, along with occurrences of vectors relating to Cutaneous Leishmaniasis (CL). Preventive vector control measures need to be implemented in Goiana to reduce the risk of infection for the human and animal populations.(AU)

Flebotomíneos do gênero Lutzomyia são importantes vetores de espécies de Leishmania, agente etiológico das leishmanioses. O objetivo deste estudo foi avaliar a diversidade de flebotomíneos em área endêmica para Leishmaniose Visceral (LV). As coletas foram realizadas em quatro localidades do litoral do município de Goiana, Pernambuco, Nordeste do Brasil. Os espécimes foram coletados mensalmente em três noites consecutivas de novembro de 2017 a outubro de 2018. Foram instaladas armadilhas luminosas modelo CDC a uma altura de 1,5 m acima do solo em dois ecótopos (ex. árvore e instalações de animais), ambos em áreas peridomiciliares. Um total de 5.205 flebotomíneos foi coletado, sendo Lutzomyia longipalpis (99,85%; 5.197/5.205) a mais comum, seguida por Lutzomyia evandroi (0,13%; 07/5.205) e Lutzomyia whitmani (0,02%; 01/5.205). L. longipalpis foi coletada durante todo o período do estudo. A maioria dos espécimes foi detectada perto das instalações dos animais. Os achados deste estudo indicam a presença de vetores de Leishmania infantum na área avaliada ao longo do ano, bem como a ocorrência de vetores relacionados à Leishmaniose Cutânea (LC). Medidas preventivas de controle vetorial devem ser implementadas em Goiana para reduzir o risco de infecção à população humana e animal.(AU)

Reflexões sobre cenários, vigilância epidemiológica e controle da transmissão de leishmaniose visceral no estado de São Paulo / Analysis of epidemiological scenarios and the relationship with surveillance and control of visceral leishmaniasis transmission in the state of São Paulo

Diferenças regionais nos padrões de transmissão da leishmaniose visceral tem se constituído ao longo do tempo em diferentes cenários para enfrentamento da doença no estado de São Paulo. Entre 1999 a 2016, Lutzomyia longipalpis foi detectado em 95,8% (137/143) dos municípios com transmissão humana, canina ou ambas. Todavia, a ocorrência de casos humanos em município do litoral e aumento de casos caninos na região metropolitana de São Paulo sem detecção do vetor, sugere novos desafios à vigilância e ao controle da doença. No oeste do estado, prevalece à forma clássica de transmissão com 19,70% (13/66) dos municípios prioritários, acumulando 63,8% (245/384) dos casos no triênio 2015-2016-2017. Esse padrão epidemiológico é compatível com a regra empírica 80/20. Alguns destes municípios houve remissão da transmissão, porem com posterior aumento no decorrer dos anos. Desse modo conclui-se que a vigilância e o controle da leishmaniose visceral terá como desafio a busca por novas ferramentas para o enfrentamento da transmissão nos diversos cenários e para o efetivo controle da doença.

Regional characteristics influence the patterns of transmission of visceral leishmaniasis revealing over time different scenarios for the control of the disease in the state of São Paulo. Between 1999 and 2016, Lutzomyia longipalpis was detected in 95.8% (137/143) of the municipalities with human, canine or both transmissions. However, the occurrence of human cases in a new municipality and an increase in canine cases in the metropolitan region of São Paulo without detection of the vector suggest new challenges to surveillance and control of the disease. In the western part of the state, the classic form of transmission prevails with 19.70% (13/66) of the priority municipalities, accumulating 63.8% (245/384) of cases in the triennium 2015-2016-2017. This epidemiological pattern is compatible with the 80/20 empirical rule. Some of these municipalities had remission of the transmission with a subsequent increase in the number of cases over the years. Thus, it is concluded that the surveillance and control system of visceral leishmaniasis should seek new tools for coping with transmission in the various scenarios and for effective control of the disease.

Addressing the recent dispersion of urban visceral leishmaniasis in the border of Argentina, Brazil, Paraguay + Uruguay + Bolivia – Project IDRC / Abordando a recente dispersão da leishmaniose visceral urbana nas fronteiras da Argentina, Brasil e Paraguai + Uruguai + Bolívia - Projeto IDRC

The territory located in the border of Argentina, Brazil and Paraguay is endemic for tegumentary leishmaniasis (TL). However, Lutzomyia longipalpis first report in the area was in 2010-Argentina, in 2012-Brazil, and no records in the Paraguayan border despite of reports of human visceral leishmaniasis (VL) cases. Therefore, we developed a research from 2014 to 2017 to study VL in the three-country border at locality level; Uruguay-2015, and Bolivia-2016 joined latter due to the alerts of VL in the Argentinean borders. The space-time distributions of vectors, infected dogs and environmental variables were recorded and associated at three progressive scales, while anthropological surveys were performed. Three scenarios were characterized based on canine VL prevalence, vector presence-abundance and the spatial distribution consistency between them: settled VL, incipient VL, and steady TL with imported canine VL. The vector abundance was clustered in ‘hot spots’ persistent in time that could act as ‘source populations’. The clustering distribution was associated with environmental variables at the different scales studied. Therefore, the vector distribution (proxy of human-dog exposure) could be modeled in recent southern scenarios to focus the surveillance and interventions on predicted ‘hot spots’, in order to increase the effectiveness and efficiency of program activities.

O território localizado na fronteira da Argentina, Brasil e Paraguai é endêmico para leishmaniose tegumentar (LT). Entretanto, o primeiro relato de Lutzomyia longipalpis na área foi em 2010-Argentina, em 2012-Brasil, sem registros na fronteira em Paraguai apesar dos casos de leishmaniose visceral humana (LV). Portanto, desenvolvemos uma pesquisa de 2014 a 2017 para estudar a LV na tríplice fronteira em nível de localidades; Uruguai-2015 e Bolívia-2016 aderiram mais tarde devido aos alertas de LV nas fronteiras argentinas. As distribuições espaço-temporais de vetores, cães infectados e as variáveis ambientais foram registradas e associadas em três escalas progressivas, enquanto se realizou o inquérito antropológico. Três cenários foram caracterizados com base na prevalência de LV canina, na abundância-presença de vetores, e a coerência da distribuição espacial entre eles: LV instalada, LV incipiente e LT estável com LV canina importada. A abundância de vetores foi agrupada em “pontos quentes” persistentes no tempo que poderiam atuar como “populações fonte”. A distribuição de agrupamento foi associada a variáveis ambientais nas diferentes escalas. Portanto, a distribuição vetorial (proxy da exposição humana a cães) poderia ser modelada em cenários recentes do sul para focar a vigilância e as intervenções nos “pontos quentes” previstos, a fim de aumentar a eficácia e a eficiência das atividades do programa.

Vetor ou vetores? Capacidade vetorial e estratégias de controle / Vector or vectors? Vectorial capacity and control strategies

Variáveis relacionadas a fatores epidemiológicos, ao ambiente, ao agente etiológico, ao vetor e aos reservatórios parecem atuar na determinação dos diferentes cenários de transmissão da leishmaniose visceral no Brasil. No estado de São Paulo a leishmaniose visceral (LV) não apresenta um padrão epidemiológico homogêneo por todas suas regiões, parecendo refletir uma multitude de cenários propícios para a ocorrência da transmissão dentro do território Paulista. Lutzomyia longipalpis é composta por um complexo de espécies das quais duas são encontradas no Estado de São Paulo e parecem possuir diferença na capacidade vetorial. É provável que essa diferença seja o fator determinante na caracterização dos diferentes padrões epidemiológicos observados nas diferentes regiões do Estado. No presente estudo, procuramos determinar a distribuição temporal e geográfica das espécies do complexo Lu. longipalpis, dos casos caninos e dos casos humanos de LV como elementos chave para ajudar na caracterização de alguns cenários de transmissão da doença e apontar áreas de maior risco para a aquisição da doença. Por outro lado, a recente e inesperada ocorrência de transmissão da LV em localidades sem a presença da Lu. longipalpis, caracteriza mais um novo cenário, onde a transmissão da Leishmania infantum ao homem se mostrou possível, configurando um novo desafio para as autoridades da saúde pública.

Variables related to epidemiological factors, etiologic agent, environment, vector and reservoirs seem to act in determining the different scenarios of transmission of visceral leishmaniasis (VL) in Brazil. In the state of São Paulo, VL does not present a homogeneous epidemiological pattern across all its regions, seeming to reflect a multitude of scenarios conducive to the occurrence of transmission within Paulista territory. Lutzomyia longipalpis is composed of a complex of species of which two are found in the state of São Paulo and appear to have a difference in vector capacity. It is likely that this difference is the determining factor in the characterization of the different epidemiological patterns observed in the different regions of the State. In the present study, we sought to determine the temporal and geographic distribution of Lu. longipalpis species, canine cases and human cases of VL as key elements to help characterize some scenarios of transmission of the disease and to indicate areas of greater risk for disease acquisition. The recent and unexpected occurrence of VL transmission in localities without the presence of Lu. longipalpis characterizes another new scenario, where other species of san flies can transmit Leishmania infantum to man and configuring a new challenge for public health authorities.

Canine visceral leishmaniasis in Londrina, Paraná - investigation and case report / Leishmaniose visceral canina em Londrina, Paraná - investigação e relato de caso

Dogs are considered the main reservoirs of visceral leishmaniasis for humans, which also present a chronic and severe clinical picture when affected. The objective of the present report was to describe a canine visceral leishmaniasis case diagnosed in Londrina, an indene city, and its investigation. A street animal with extensive dermatological lesions, onychogryphosis, mild anemia and leukopenia was attended at a veterinary hospital in Londrina, where positivity was reported for Leishmania spp. in serological tests. Cytology was positive in bone marrow, PCR and parasite culture were positive in skin, spleen, liver, lymph node and bone marrow, and DNA sequencing confirmed the species of the parasite as L. (L.) infantum. The official diagnosis was made by the Central Laboratory of Paranل (LACEN), and through an official report, an investigation of the case was started for the confirmation of autochthony. An active search for the vector and other canine cases in the neighborhood was carried out along with a search for information on the origin of the animal in question. However, the species, Lutzomyia longipalpis, new canine cases, or origin of the sick animal were not identified. Although, the present case cannot be confirmed as autochthonous, we suggest that it is necessary to disseminate the present report to serve as a warning to veterinarians and other public health professionals in the northern region of Paranل to be attentive to suspicious cases and to not fail to investigate these cases to the end.(AU)

Os cمes sمo considerados os principais reservatَrios da leishmaniose visceral para os humanos e também apresentam quadro clيnico crônico e grave quando acometidos. O objetivo do presente relato foi descrever um caso de leishmaniose visceral canina diagnosticado em Londrina, um cidade indene, e sua investigaçمo. Um animal de rua com extensas lesُes dermatolَgicas, onicogrifose, anemia leve e leucopenia foi atendida em um hospital veterinلrio em Londrina, onde a positividade foi relatada para Leishmania spp. em testes sorolَgicos. A citologia foi positiva na medula َssea, a PCR e a cultura parasitلria foram positivas na pele, baço, fيgado, linfonodo e medula َssea. Com o sequenciamento de DNA confirmamos as espécies do parasita como L. (L.) infantum. O diagnَstico oficial foi feito pelo Laboratَrio Central do Paranل (LACEN) e, através de um relatَrio oficial, iniciou-se a investigaçمo do caso para a verificaçمo de autoctonia. Foi realizada uma busca ativa do vetor e outros casos caninos suspeitos no bairro, bem como a procura de informaçُes sobre a origem do animal doente. No entanto, a espécie Lutzomyia longipalpis nمo foi identificada, nem novos casos caninos foram identificados ou mesmo a origem do animal doente esclarecida. Embora o presente caso nمo possa ser confirmado como autَctone, sugerimos que seja necessلrio divulgar o presente relato para servir de aviso aos veterinلrios e outros profissionais de saْde pْblica na regiمo norte do Paranل para estarem atentos a casos suspeitos e nمo deixar de investigar esses casos até o fim.(AU)

Vetor ou vetores? Capacidade vetorial e estratégias de controle / Vector or vectors? Vectorial capacity and control strategies

Variáveis relacionadas a fatores epidemiológicos, ao ambiente, ao agente etiológico, ao vetor e aos reservatórios parecem atuar na determinação dos diferentes cenários de transmissão da leishmaniose visceral no Brasil. No estado de São Paulo a leishmaniose visceral (LV) não apresenta um padrão epidemiológico homogêneo por todas suas regiões, parecendo refletir uma multitude de cenários propícios para a ocorrência da transmissão dentro do território Paulista. Lutzomyia longipalpis é composta por um complexo de espécies das quais duas são encontradas no Estado de São Paulo e parecem possuir diferença na capacidade vetorial. É provável que essa diferença seja o fator determinante na caracterização dos diferentes padrões epidemiológicos observados nas diferentes regiões do Estado. No presente estudo, procuramos determinar a distribuição temporal e geográfica das espécies do complexo Lu. longipalpis, dos casos caninos e dos casos humanos de LV como elementos chave para ajudar na caracterização de alguns cenários de transmissão da doença e apontar áreas de maior risco para a aquisição da doença. Por outro lado, a recente e inesperada ocorrência de transmissão da LV em localidades sem a presença da Lu. longipalpis, caracteriza mais um novo cenário, onde a transmissão da Leishmania infantum ao homem se mostrou possível, configurando um novo desafio para as autoridades da saúde pública.(AU)

Variables related to epidemiological factors, etiologic agent, environment, vector and reservoirs seem to act in determining the different scenarios of transmission of visceral leishmaniasis (VL) in Brazil. In the state of São Paulo, VL does not present a homogeneous epidemiological pattern across all its regions, seeming to reflect a multitude of scenarios conducive to the occurrence of transmission within Paulista territory. Lutzomyia longipalpis is composed of a complex of species of which two are found in the state of São Paulo and appear to have a difference in vector capacity. It is likely that this difference is the determining factor in the characterization of the different epidemiological patterns observed in the different regions of the State. In the present study, we sought to determine the temporal and geographic distribution of Lu. longipalpis species, canine cases and human cases of VL as key elements to help characterize some scenarios of transmission of the disease and to indicate areas of greater risk for disease acquisition. The recent and unexpected occurrence of VL transmission in localities without the presence of Lu. longipalpis characterizes another new scenario, where other species of san flies can transmit Leishmania infantum to man and configuring a new challenge for public health authorities.(AU)

Addressing the recent dispersion of urban visceral leishmaniasis in the border of Argentina, Brazil, Paraguay + Uruguay + Bolivia Project IDRC / Abordando a recente dispersão da leishmaniose visceral urbana nas fronteiras da Argentina, Brasil e Paraguai + Uruguai + Bolívia - Projeto IDRC

The territory located in the border of Argentina, Brazil and Paraguay is endemic for tegumentary leishmaniasis (TL). However, Lutzomyia longipalpis first report in the area was in 2010-Argentina, in 2012-Brazil, and no records in the Paraguayan border despite of reports of human visceral leishmaniasis (VL) cases. Therefore, we developed a research from 2014 to 2017 to study VL in the three-country border at locality level; Uruguay-2015, and Bolivia-2016 joined latter due to the alerts of VL in the Argentinean borders. The space-time distributions of vectors, infected dogs and environmental variables were recorded and associated at three progressive scales, while anthropological surveys were performed. Three scenarios were characterized based on canine VL prevalence, vector presence-abundance and the spatial distribution consistency between them: settled VL, incipient VL, and steady TL with imported canine VL. The vector abundance was clustered in ‘hot spots persistent in time that could act as ‘source populations. The clustering distribution was associated with environmental variables at the different scales studied. Therefore, the vector distribution (proxy of human-dog exposure) could be modeled in recent southern scenarios to focus the surveillance and interventions on predicted ‘hot spots, in order to increase the effectiveness and efficiency of program activities.(AU)

O território localizado na fronteira da Argentina, Brasil e Paraguai é endêmico para leishmaniose tegumentar (LT). Entretanto, o primeiro relato de Lutzomyia longipalpis na área foi em 2010-Argentina, em 2012-Brasil, sem registros na fronteira em Paraguai apesar dos casos de leishmaniose visceral humana (LV). Portanto, desenvolvemos uma pesquisa de 2014 a 2017 para estudar a LV na tríplice fronteira em nível de localidades; Uruguai-2015 e Bolívia-2016 aderiram mais tarde devido aos alertas de LV nas fronteiras argentinas. As distribuições espaço-temporais de vetores, cães infectados e as variáveis ambientais foram registradas e associadas em três escalas progressivas, enquanto se realizou o inquérito antropológico. Três cenários foram caracterizados com base na prevalência de LV canina, na abundância-presença de vetores, e a coerência da distribuição espacial entre eles: LV instalada, LV incipiente e LT estável com LV canina importada. A abundância de vetores foi agrupada em “pontos quentes” persistentes no tempo que poderiam atuar como “populações fonte”. A distribuição de agrupamento foi associada a variáveis ambientais nas diferentes escalas. Portanto, a distribuição vetorial (proxy da exposição humana a cães) poderia ser modelada em cenários recentes do sul para focar a vigilância e as intervenções nos “pontos quentes” previstos, a fim de aumentar a eficácia e a eficiência das atividades do programa.(AU)

Reflexões sobre cenários, vigilância epidemiológica e controle da transmissão de leishmaniose visceral no estado de São Paulo / Analysis of epidemiological scenarios and the relationship with surveillance and control of visceral leishmaniasis transmission in the state of São Paulo

Diferenças regionais nos padrões de transmissão da leishmaniose visceral tem se constituído ao longo do tempo em diferentes cenários para enfrentamento da doença no estado de São Paulo. Entre 1999 a 2016, Lutzomyia longipalpis foi detectado em 95,8% (137/143) dos municípios com transmissão humana, canina ou ambas. Todavia, a ocorrência de casos humanos em município do litoral e aumento de casos caninos na região metropolitana de São Paulo sem detecção do vetor, sugere novos desafios à vigilância e ao controle da doença. No oeste do estado, prevalece à forma clássica de transmissão com 19,70% (13/66) dos municípios prioritários, acumulando 63,8% (245/384) dos casos no triênio 2015-2016-2017. Esse padrão epidemiológico é compatível com a regra empírica 80/20. Alguns destes municípios houve remissão da transmissão, porem com posterior aumento no decorrer dos anos. Desse modo conclui-se que a vigilância e o controle da leishmaniose visceral terá como desafio a busca por novas ferramentas para o enfrentamento da transmissão nos diversos cenários e para o efetivo controle da doença.(AU)

Regional characteristics influence the patterns of transmission of visceral leishmaniasis revealing over time different scenarios for the control of the disease in the state of São Paulo. Between 1999 and 2016, Lutzomyia longipalpis was detected in 95.8% (137/143) of the municipalities with human, canine or both transmissions. However, the occurrence of human cases in a new municipality and an increase in canine cases in the metropolitan region of São Paulo without detection of the vector suggest new challenges to surveillance and control of the disease. In the western part of the state, the classic form of transmission prevails with 19.70% (13/66) of the priority municipalities, accumulating 63.8% (245/384) of cases in the triennium 2015-2016-2017. This epidemiological pattern is compatible with the 80/20 empirical rule. Some of these municipalities had remission of the transmission with a subsequent increase in the number of cases over the years. Thus, it is concluded that the surveillance and control system of visceral leishmaniasis should seek new tools for coping with transmission in the various scenarios and for effective control of the disease.(AU)

Studies on the phlebotomine sandflies fauna (Diptera: Psychodidae: Phlebotominae) and on the natural infection by Leishmania infantum in municipalities of northwest region of the State of São Paulo / Estudos da fauna flebotomínica (Diptera: Psychodidae: Phlebotominae) e infecção natural por Leishmania infantum em municípios da região noroeste do estado de São Paulo, Brasil

The geographical expansion and the increase of visceral leishmaniasis cases in northwest region of the São Paulo state aroused the interest of conducting a study to identify the phlebotomine sandflies fauna, and to evaluate the rate of natural infection by Leishmania infantum in Fernandópolis, Santa Fé do Sul and Votuporanga. Entomological surveys were conducted using the CDC miniature light traps, installed in different types of peridomestic ecotopes, during the period from August 2013 to November 2014. The L. infantum DNA detection in phlebotomine sandflies was performed by means of conventional Polymerase Chain Reaction (PCR). Five hundred seven phlebotomine sandflies specimens were collected, being 116 females (22.9 %) and 391 males (77.1 %), which were represented by seven species, prevailing Lutzomyia longipalpis, with 461 specimens (90.9 %). Molecular analysis revealed DNA of L. infantum in one specimen of L. longipalpis from Fernandópolis. These findings confirm the occurrence of this species in all of the surveyed municipalities. And the existence of at least one specimen, naturally infected in Fernandópolis, highlights the need for performing the further control measures directed to the vectors in this municipality, for restraining their spread and to prevent the occurrence of human cases of visceral leishmaniasis.(AU)

A expansão geográfica e o crescente aumento dos casos de leishmaniose visceral na região noroeste do estado de São Paulo despertaram o interesse em desenvolver estudo para identificar a fauna flebotomínica e avaliar sua infecção natural por Leishmania infantum nos municípios de Fernandópolis, Santa Fé do Sul e Votuporanga. Foram realizados inquéritos entomológicos com a utilização de armadilhas luminosas do tipo CDC, instaladas em diferentes ecótopos peridomiciliares, durante o período de agosto de 2013 a novembro de 2014. A detecção de DNA de L. infantum em flebotomíneos foi realizada por meio da Reação em Cadeia da Polimerase (PCR). Foram coletados 507 flebotomíneos, sendo 116 fêmeas (22,9 %) e 391 machos (77,1 %), representados por sete espécies, com predomínio de Lutzomyia longipalpis, com 461 exemplares (90,9 %). As análises moleculares revelaram DNA de L. infantum em um exemplar de L. longipalpis capturado em Fernandópolis. Estes resultados confirmam a presença desta espécie nos municípios pesquisados. E o encontro de pelo menos um exemplar, naturalmente infectado, em Fernandópolis evidencia a necessidade de realizar ações de controle direcionadas aos vetores neste município, com o intuito de conter sua dispersão e prevenir a ocorrência de casos humanos de leishmaniose visceral.(AU)

Avaliação da infectividade parasitária a Lutzomyia longipalpis por xenodiagnóstico em cães tratados para leishmaniose visceral naturalmente adquirida / Evaluation of parasite infectivity for Lutzomyia longipalpis by xenodiagnosis in dogs treated for natural visceral leishmaniasis

O efeito de um protocolo quimioterápico multidrogas contra a leishmaniose visceral (LV) canina, sobre a capacidade de transmissão de Leishmania infantum ao vetor, foi analisado por meio de xenodiagnóstico. Trinta e cinco cães naturalmente infectados foram avaliados antes e durante o tratamento com a combinação de metronidazol, cetoconazol e alopurinol a cada três meses por até um ano. Em cada avaliação, os cães foram individualmente submetidos ao xenodiagnóstico e quantificação da carga parasitária por PCR quantitativa. O tratamento foi eficaz em bloquear a transmissibilidade parasitária do cão para o flebotomíneo (p= 0,011) nos cães avaliados. Houve significante correlação entre recuperação clínica e infectividade: cães com melhora clínica mais evidente apresentaram menores chances de transferir L. infantum ao Lutzomyia longipalpis via xenodiagnóstico (r=0,528, p= 0,002). Esses resultados demonstram que o tratamento canino com o protocolo proposto pode representar uma alternativa ao sacrifício de cães no Brasil como medida de controle da doença, uma vez que as drogas utilizadas não são aplicadas ao tratamento da LV humana em áreas endêmicas.(AU)

The outcome of a multidrug chemotherapeutic protocol against canine visceral leishmaniasis (VL) has been evaluated for its effect on dogs' capacity of transferring Leishmania infantum to sand flies by xenodiagnosis. Thirty-five naturally infected dogs were examined before and during treatment with a combination of metronidazole, ketoconazole, and allopurinol, at every three months up to one year. For each evaluation, treated dogs were individually submitted to xenodiagnosis and quantitative PCR to quantify parasite load in sand flies. The treatment was effective in blocking parasite transmission from host to sand flies (p=0.011) in the assessed dogs. There was a significant correlation between clinical improvement and sand fly infectivity: dogs that achieved better clinical conditions showed a lower chance of L. infantum transference to vector by xenodiagnosis (r=0.528, p=0.002). These results demonstrate that the treatment of dogs with the proposed protocol may represent an alternative to dog culling in Brazil for disease control, since these drugs are not used for treating human VL in endemic areas.(AU)

Avaliação da infectividade parasitária a Lutzomyia longipalpis por xenodiagnóstico em cães tratados para leishmaniose visceral naturalmente adquirida / Evaluation of parasite infectivity for Lutzomyia longipalpis by xenodiagnosis in dogs treated for natural visceral leishmaniasis

O efeito de um protocolo quimioterápico multidrogas contra a leishmaniose visceral (LV) canina, sobre a capacidade de transmissão de Leishmania infantum ao vetor, foi analisado por meio de xenodiagnóstico. Trinta e cinco cães naturalmente infectados foram avaliados antes e durante o tratamento com a combinação de metronidazol, cetoconazol e alopurinol a cada três meses por até um ano. Em cada avaliação, os cães foram individualmente submetidos ao xenodiagnóstico e quantificação da carga parasitária por PCR quantitativa. O tratamento foi eficaz em bloquear a transmissibilidade parasitária do cão para o flebotomíneo (p= 0,011) nos cães avaliados. Houve significante correlação entre recuperação clínica e infectividade: cães com melhora clínica mais evidente apresentaram menores chances de transferir L. infantum ao Lutzomyia longipalpis via xenodiagnóstico (r=0,528, p= 0,002). Esses resultados demonstram que o tratamento canino com o protocolo proposto pode representar uma alternativa ao sacrifício de cães no Brasil como medida de controle da doença, uma vez que as drogas utilizadas não são aplicadas ao tratamento da LV humana em áreas endêmicas.(AU)

The outcome of a multidrug chemotherapeutic protocol against canine visceral leishmaniasis (VL) has been evaluated for its effect on dogs' capacity of transferring Leishmania infantum to sand flies by xenodiagnosis. Thirty-five naturally infected dogs were examined before and during treatment with a combination of metronidazole, ketoconazole, and allopurinol, at every three months up to one year. For each evaluation, treated dogs were individually submitted to xenodiagnosis and quantitative PCR to quantify parasite load in sand flies. The treatment was effective in blocking parasite transmission from host to sand flies (p=0.011) in the assessed dogs. There was a significant correlation between clinical improvement and sand fly infectivity: dogs that achieved better clinical conditions showed a lower chance of L. infantum transference to vector by xenodiagnosis (r=0.528, p=0.002). These results demonstrate that the treatment of dogs with the proposed protocol may represent an alternative to dog culling in Brazil for disease control, since these drugs are not used for treating human VL in endemic areas.(AU)

Avaliação da infectividade parasitária a Lutzomyia longipalpis por xenodiagnóstico em cães tratados para leishmaniose visceral naturalmente adquirida

ABSTRACT: The outcome of a multidrug chemotherapeutic protocol against canine visceral leishmaniasis (VL) has been evaluated for its effect on dogs capacity of transferring Leishmania infantum to sand flies by xenodiagnosis. Thirty-five naturally infected dogs were examined before and during treatment with a combination of metronidazole, ketoconazole, and allopurinol, at every three months up to one year. For each evaluation, treated dogs were individually submitted to xenodiagnosis and quantitative PCR to quantify parasite load in sand flies. The treatment was effective in blocking parasite transmission from host to sand flies (p=0.011) in the assessed dogs. There was a significant correlation between clinical improvement and sand fly infectivity: dogs that achieved better clinical conditions showed a lower chance of L. infantum transference to vector by xenodiagnosis (r=0.528, p=0.002). These results demonstrate that the treatment of dogs with the proposed protocol may represent an alternative to dog culling in Brazil for disease control, since these drugs are not used for treating human VL in endemic areas.

RESUMO: O efeito de um protocolo quimioterápico multidrogas contra a leishmaniose visceral (LV) canina, sobre a capacidade de transmissão de Leishmania infantum ao vetor, foi analisado por meio de xenodiagnóstico. Trinta e cinco cães naturalmente infectados foram avaliados antes e durante o tratamento com a combinação de metronidazol, cetoconazol e alopurinol a cada três meses por até um ano. Em cada avaliação, os cães foram individualmente submetidos ao xenodiagnóstico e quantificação da carga parasitária por PCR quantitativa. O tratamento foi eficaz em bloquear a transmissibilidade parasitária do cão para o flebotomíneo (p= 0,011) nos cães avaliados. Houve significante correlação entre recuperação clínica e infectividade: cães com melhora clínica mais evidente apresentaram menores chances de transferir L. infantum ao Lutzomyia longipalpis via xenodiagnóstico (r=0,528, p= 0,002). Esses resultados demonstram que o tratamento canino com o protocolo proposto pode representar uma alternativa ao sacrifício de cães no Brasil como medida de controle da doença, uma vez que as drogas utilizadas não são aplicadas ao tratamento da LV humana em áreas endêmicas.

XENODIAGNÓSTICO EM GATOS DOMÉSTICOS (Felis catus) NATURALMENTE INFECTADOS POR Leishmania infantum

O papel dos gatos na transmissão de leishmaniose visceral tem ganhado espaço desde a primeira evidência da transmissibilidade de Leishmania infantum para flebotomíneos através de xenodiagnóstico. Com o objetivo de ampliar os estudos sobre o papel destes animais no ciclo de transmissão da LV em áreas urbanas, quatro gatos naturalmente infectados por L. infantum, diagnosticados através de RIFI, ELISA e PCR com sequenciamento 100% compatível com L. infantum, foram avaliados quanto à presença de sinais clínicos e alterações hematológicas e submetidos a xenodiagnóstico. Dos quatro animais positivos, todos apresentavam sinais clínicos compatíveis com a doença e alterações hematológicas, três apresentaram parasitológico positivo, com a presença de amastigotas em medula óssea e/ou linfonodo. Um total de 203 flebotomíneos foram expostos para alimentação nos 4 gatos, resultando em 100% das fêmeas ingurgitadas. Ensaios parasitológico e molecular foram realizados para avaliar a presença de L. infantum no intestino dos flebotomíneos. Dez fêmeas de Lu. longipalpis (4,9%) foram positivas no ensaio parasitológico de um dos gatos. Alimentadas nesse mesmo gato, 13 (6,4%) fêmeas foram positivas pela PCR tendo o kDNA de Leishmania spp. como alvo (7 das positivas no parasitológico e outras 6 que eram negativas) e 1 (0,5%) fêmea alimentada em outro gato também foi positiva por essa PCR. Ainda com relação ao primeiro gato, as 16 fêmeas positivas no parasitológico e/ou no kDNA foram testadas no ITS1, resultando também em positividade em todas elas (7,9%), com sequenciamento 100% idêntico a L. infantum. Sendo assim, somando todos os testes de todos os gatos, 17 (8,4%) fêmeas de 2 (50%) gatos foram positivas para L. infantum, o que evidencia que gatos naturalmente infectados são competentes em transmitir L. infantum ao vetor, evidenciando a capacidade de gatos infectados e com sinais clínicos transmitirem L. infantum aos vetores.

Cats have been gained importance since the first evidence of transmissibility of Leishmania infantum to phlebotomine by xenodiagnosis. To expand studies regarding the hole of cats on Visceral Leishmaniasis transmission cycle in urban areas, four naturally infected cats by L. infantum diagnosed by IFAT, ELISA and PCR assays with sequencing matching 100% with L. infantum were evaluated according presence of clinical signs and haematological changes and subjected to xenodiagnostic. All four positive animals presented clinical sings compatible with the disease and/or haematological changes, three presented positivity at parasitological assays, showing presence of amastigotes in bone marrow and/or lymph node. A total of 203 phlebotomine were exposed to feed on the four cats, which resulted at 100% of females engorged. Parasitological and molecular assays were realized to evaluate the presence of L. infantum on phlebotomines gut. Ten (4.9%) Lu. longipalpis females fed in one (25%) cat were positive by parasitological analyses. Fed on the same cat, 13 (6,4%) female were positive at Leishmanias kDNA PCR (7 also positive at parasitological test) and 1 (0,5%) were positive at the same test from another cat. Moreover, 16 (7,9%) positive at parasitological and/or kDNA PCR were also positive at ITS1 gene PCR and sequencing matched 100% with L. infantum. Therefore, considering all tests from all cats, 17 (8,4%) females fed on two (50%) cats were positive for L. infantum, evidencing the capacity from infected cats with clinical signs to transmit L. infantum to vectors.

Natural infection of phlebotomines (Diptera: Psychodidae) by Leishmania (Leishmania) amazonensis in an area of ecotourism in Central-Western Brazil

Background Bonito municipality, known as an area of ecoturism, in Mato Grosso do Sul state, Brazil, is also a focus of visceral and cutaneous leishmaniases, with cases registered in both human and canine populations. This study sought to investigate natural infection by flagellate forms of Leishmania in phlebotomines of the urban area of Bonito.Findings Sand flies were collected fortnightly from October 2005 to July 2006 with modified automatic light traps installed in peridomiciles and animal shelters in the center and on the outskirts of the city. The females were dissected and their guts observed under an optical microscope. A total of 1977 specimens were captured, Lutzomyia longipalpis (88.4 %) and Bichromomyia flaviscutelata (3.0 %) being the most frequent species. Bi. flaviscutellata was found infected by flagellates that were identified as Leishmania (Leishmania) amazonensis by indirect immunofluorescence reaction, employing monoclonal antibodies and the biotin-avidin system. This is the first report of natural infection by L. amazonensis in Bi. flaviscutellata in a Brazilian urban area.Conclusions As Bi. flaviscutellata is only slightly attracted by humans, the transmission of L. amazonensis in the study area may have a zoonotic character; however, the sympatric occurrence of this parasite andLu. longipalpis should be taken into consideration by the local health authorities since this sand fly has already been found with L. amazonensis DNA in a focus of canine visceral leishmaniasis in Bonito municipality.(AU)

Natural infection of phlebotomines (Diptera: Psychodidae) by Leishmania (Leishmania) amazonensis in an area of ecotourism in Central-Western Brazil

Background Bonito municipality, known as an area of ecoturism, in Mato Grosso do Sul state, Brazil, is also a focus of visceral and cutaneous leishmaniases, with cases registered in both human and canine populations. This study sought to investigate natural infection by flagellate forms of Leishmania in phlebotomines of the urban area of Bonito.Findings Sand flies were collected fortnightly from October 2005 to July 2006 with modified automatic light traps installed in peridomiciles and animal shelters in the center and on the outskirts of the city. The females were dissected and their guts observed under an optical microscope. A total of 1977 specimens were captured, Lutzomyia longipalpis (88.4 %) and Bichromomyia flaviscutelata (3.0 %) being the most frequent species. Bi. flaviscutellata was found infected by flagellates that were identified as Leishmania (Leishmania) amazonensis by indirect immunofluorescence reaction, employing monoclonal antibodies and the biotin-avidin system. This is the first report of natural infection by L. amazonensis in Bi. flaviscutellata in a Brazilian urban area.Conclusions As Bi. flaviscutellata is only slightly attracted by humans, the transmission of L. amazonensis in the study area may have a zoonotic character; however, the sympatric occurrence of this parasite andLu. longipalpis should be taken into consideration by the local health authorities since this sand fly has already been found with L. amazonensis DNA in a focus of canine visceral leishmaniasis in Bonito municipality.

Occurrence of Lutzomyia longipalpis (Phlebotominae) and canine visceral leishmaniasis in a rural area of Ilha Solteira, SP, Brazil / Ocorrência de Lutzomyia longipalpis (Phlebotominae) e leishmaniose visceral canina em uma área rural de Ilha Solteira, SP, Brasil

This study aimed to investigate the occurrence of Lutzomyia longipalpis and also the canine visceral leishmaniasis (CVL) in a rural area of Ilha Solteira, state of São Paulo. Blood samples were collected from 32 dogs from different rural properties (small farms) and were analyzed by ELISA and the indirect immunofluorescence antibody test (IFAT) in order to diagnose CVL. From these serological tests, 31.25% of the dogs were positive for CVL and these were distributed in 66.7% (8/12) of the rural properties, which were positive for L. longipalpis. CDC (Center for Disease Control and Prevention) light traps were installed in 12 properties (one per property) and insects were caught on three consecutive days per month for one year. L. longipalpis was present on 100% of the rural properties visited, at least once during the twelve-month interval, totaling 64 males and 25 females. The insects were more numerous after the peak of the rain, but the association between prevalence of peridomestic vectors and the climatic data (precipitation, relative air humidity and temperature) and the occurrences of CVL among dogs on each rural property were not statistical significant (p <0.05). However, the occurrence of CVL cases in dogs and the presence of L. longipalpis indicate that more attention is necessairy for the control of this disease in the rural area studied.

O objetivo desse trabalho foi o estudo da prevalência de Lutzomyia longipalpis e da leishmaniose visceral canina (LVC) em uma área rural do município de Ilha Solteira do estado de São Paulo. Amostras de sangue foram coletadas de 32 cães provenientes de pequenas propriedades rurais e analisadas por meio dos métodos sorológicos ELISA (imunoensaio enzimático indireto) e RIFI (reação de imunofluorescência indireta) para o diagnóstico da LVC. Pelos exames sorológicos, dos 32 cães avaliados, 31,25% foram diagnosticados positivos para LVC, os quais estavam diostribuídos em 66,67% (8/12) das propriedades positivas para Lutzomyia longipalpis. Armadilhas luminosas do tipo CDC (Center for Disease Control and Prevention) foram instaladas em 12 propriedades, sendo uma por propriedade, e as coletas dos insetos foram realizadas três dias consecutivos a cada mês, durante um ano. O inseto L. longipalpis foi encontrado em 100% das propriedades visitadas, pelo menos uma vez no ano, totalizando 65 machos e 25 fêmeas. A maior quantidade de insetos foi observada principalmente após a ocorrência dos maiores picos de precipitação pluvial, mas a associação entre a prevalência dos vetores peridomiciliares e os dados climáticos (precipitação, umidade relativa do ar e temperatura) assim como a ocorrência da CVL em cães em cada propriedade não foi estatisticamente significante (p<0.05). No entanto, alerta-se que pela presença dos casos de LVC nos cães amostrados e também de L. longipalpis, maior atenção deve ser dada durante as investigações epidemiológicas para o controle dessa doença nessa área rural estudada.

Ecology of Lutzomyia longipalpis and Lutzomyia migonei in an endemic area for visceral leishmaniasis / Ecologia de Lutzomyia longipalpis e Lutzomyia migonei em uma área endêmica para Leishmaniose Visceral

The main vector for visceral leishmaniasis (VL) in Brazil is Lutzomyia longipalpis. However, the absence of L. longipalpis in a region of autochthonous VL demonstrates the participation of other species in the transmission of the parasite. Studies conducted in La Banda, Argentina, and São Vicente Férrer, Pernambuco State, Brazil, have correlated the absence of L. longipalpis and the presence of L. migonei with autochthonous cases of VL. In São Vicente Férrer, Pernambuco, there was evidence for the natural infection of L. migonei with Leishmania infantum chagasi. Thus, the objective of this work was to assess the ecology of the sand flies L. longipalpis and L. migonei in Fortaleza, an endemic area for VL. Insect capture was conducted at 22 sampling points distributed across four regions of Fortaleza. In total, 32,403 sand flies were captured; of these, 18,166 (56%) were identified as L. longipalpis and 14,237 (44%) as L. migonei. There were significant density differences found between the vectors at each sampling site (indoors and outdoors) (p <0.0001). These findings confirm that L. migonei and L. longipalpis are distributed throughout Fortaleza, where they have adapted to an indoor environment, and suggest that L. migonei may share the role as a vector with L. longipalpis in the transmission of VL in Fortaleza.

O principal vetor de leishmaniose visceral (LV) no Brasil é Lutzomyia longipalpis. Entretanto, a ausência de L. longipalpis em área com casos autóctones de LV demonstra a existência de outras espécies na transmissão dessa doença. Estudo realizado na cidade de La Banda, Argentina, e São Vicente Férrer, Brasil, correlacionou a ausência de L. longipalpis e a presença de Lutzomyia migonei com casos autóctones de LV. Em São Vicente Férrer, foi comprovada a infecção natural de L. migonei por Leishmania infantum chagasi. Dessa forma, o objetivo deste trabalho foi avaliar a ecologia dos flebotomíneos L. longipalpis e L. migonei no município de Fortaleza, área endêmica para LV. A captura de flebotomíneos foi realizada em 22 pontos de coleta distribuídos nas quatro regiões do município de Fortaleza. No total, foram capturados 32.403 flebotomíneos. Destes, 18.166 (56%) eram da espécie L. longipalpis e 14.237 (44%) eram L. migonei. Houve diferença significativa de densidade entre os vetores em cada local de captura (intra e peri) (p<0,0001). Esses achados confirmam que, na cidade de Fortaleza, L. migonei e L. longipalpis estão bem distribuídos, bem como adaptados ao ambiente intradomiciliar e que L. migonei, possivelmente, compartilhe com L. longipalpis o papel de vetor da LV em Fortaleza.

Serological survey of cases of canine visceral leishmaniasis and evaluation of phlebotomine fauna on Marambaia Island, municipality of Mangaratiba, Rio de Janeiro state, Brazil / Levantamento sorológico de casos de leishmaniose visceral canina eavaliação da fauna de flebotomíneos na Ilha da Marambaia,município de Mangaratiba, estado do Rio de Janeiro, Brasil

The state of Rio de Janeiro is epidemiologically classified as a region of low incidence for American visceral leishmaniasis (AVL); however, endemic areas have expanded dramatically in recent years. In 2009 and 2010, autochthonous cases of AVL were reported in the municipality of Maricá and in the neighborhood of Laranjeiras in the city of Rio de Janeiro, respectively. In 2006, samples isolated in infected animals in the coastal area of the municipality of Mangaratiba were characterized as L. (L.) chagasi. In 2002, on Marambaia Island, located in Mangaratiba, only cases of American cutaneous leishmaniasis (ACL) were recorded. This study aimed to reassess the prevalence of CVL and identify the phlebotomine fauna on Marambaia Island, Mangaratiba, in 2012. To this end, a canine serological survey was carried out using IFA, ELISA and DPP techniques. In addition, phlebotomi were captured with the help of light traps, HP type.  The census totaled 116 dogs, and 17 animals tested positive with prevalence of 14.6%.  From April to November 2012, 2,524 sandfly specimens of nine different species were captured. We observed the maintenance of CVL prevalence in the region, as well as the presence of the Lutzomyia longipalpis vector.(AU)

O estado do Rio de Janeiro é classificado epidemiologicamente como uma região de baixa incidência de leishmaniose visceralamericana (LVA), no entanto, áreas endêmicas têm se expandido drasticamente nos últimos anos. Em 2009 e 2010, foram notificadoscasos autóctones de LVA no município de Maricá e no bairro de Laranjeiras, na cidade de Rio de Janeiro, respectivamente. Em2006, em amostras de animais infectados no litoral do município de Mangaratiba foram isoladas e caracterizadas L. (L.) chagasi.Em 2002, na Ilha da Marambaia, localizada em Mangaratiba, foram registrados apenas os casos de leishmaniose tegumentaramericana (LTA). Este estudo teve como objetivo avaliar a prevalência da LVC e identificar a fauna de flebotomíneos na Ilha daMarambaia, Mangaratiba, em 2012. Para este fim, um inquérito sorológico canino foi realizado utilizando as técnicas IFA, ELISAe DPP. Além disso, foram capturados flebótomos com a ajuda de armadilhas luminosas, tipo HP. O censo totalizou 116 cães e 17animais foram positivos com a prevalência de 14,6%. Entre abril e novembro de 2012, foram capturados, nove espécies diferentesflebotomíneos, um total de 2.524 espécimes. Observou-se a manutenção da LVC prevalência na região, bem como a presençado vetor Lutzomyia longipalpis.(AU)

Epidemiological survey of Lutzomyia longipalpis infected by Leishmania infantum in an endemic area of Brazil / Levantamento epidemiológico de Lutzomyia longipalpis infectada por Leishmania infantum em área endêmica do Brasil

The objective of this study was to perform an epidemiological survey to determine the areas at risk of visceral leishmaniasis through the detection and quantification of natural infection by Leishmania infantum in Lutzomyia longipalpis. The sandflies were captured between February 2009 and January 2010, at 21 sites in four regions of the Fortaleza municipality. Samples were screened for the presence of Leishmania DNA by Real Time PCR (qPCR), amplification of kDNA minicircle sequence. Out of the 123 pools of analyzed sandflies, 45 were positive for L.infantum, and the minimum infection rate was 3.7%. In the north, south, east and west regions, the pool screen assay predicted sand-fly infection prevalence of 3.4%, 4.7%, 4.9% and 8.4%, respectively. The parasite load ranged from 2.45 ± 0.96 to 2,820,246 ± 106,072. No statistical differences were found with respect to the frequency of sand-fly infection between the regions (P=0.3014), seasons (P = 0.3906) or trap locations (P = 0.8486). Statistical differences were found with respect to the frequency of sand-fly infection between the two seasons only in the west region (P=0.0152). The qPCR was able to detect and quantify L. infantum in L. longipalpis, therefore succeeding in identifying the areas of greatest risk of VL transmission.

O objetivo foi realizar um estudo epidemiológico para determinar as áreas de risco de transmissão de leishmaniose visceral pela detecção e quantificação de infecções naturais por Leishmania infantum em Lutzomyia longipalpis. As coletas foram realizadas entre fevereiro de 2009 e janeiro de 2010 em 21 locais, distribuídos em quatro regiões do município de Fortaleza. As amostras foram testadas quanto à presença de DNA de Leishmania por PCR em tempo real (qPCR). Dos 123 pools de flebotomíneos investigados, 45 foram positivos para L. infantum, e a taxa de infecção mínima foi de 3,7%. Nas regiões Norte, Sul, Leste e Oeste, a prevalência de flebotomíneos infectados foi de 3,4%, 4,7%, 4,9% e 8,4%, respectivamente. A carga de parasitas nos pools variou de 2,45 ± 0,96 a 2.820.246 ± 106.072. Não foram observadas diferenças significativas na frequência de flebotomíneos infectados entre as regiões (P = 0,3014), estação do ano (P = 0,3906) ou localização da armadilha (P = 0,8486). Foram observadas diferenças significativas na frequência de flebotomíneos somente na região oeste durante a estação chuvosa (P = 0,0152). A qPCR foi capaz de detectar e quantificar L. infantum em L. longipalpis, identificando as áreas de maior risco de transmissão de leishmaniose visceral.

EQUINOS COMO HOSPEDEIROS DE LEISHMANIA SPP. E ESTUDO DA FAUNA DE FLEBOTOMÍNEOS NOS MUNICÍPIOS DE ANDRADINA E ILHA SOLTEIRA, ESTADO DE SÃO PAULO

Objetivou-se a detecção de DNA e anticorpos anti-Leishmania spp. em equinos e levantamento da fauna de flebotomíneos nos municípios de Andradina e Ilha Solteira, São Paulo. Para isso, 235 equinos provenientes de Andradina, Araçatuba, Bauru e Ilha Solteira passaram por exames clínicos e laboratoriais. Os flebotomíneos foram coletados de janeiro de 2017 a dezembro de 2018, por meio de armadilha do tipo CDC (Center for Disease Control and Prevention) onde 6 armadilhas foram instaladas em Andradina e 6 em Ilha Solteira.As coletas foram realizadas mensalmente durante três dias consecutivos. Nos equinos, pelo ensaio imunoenzimático (ELISA) foi constatada soropositividade de 60,6% (137/226) e pela técnica da Reação de Imunofluorescência Indireta (RIFI), soropositividade de 89,4% (202/226). Pela PCR convencional (cPCR) utilizando o primer 13A/13B avaliando amostras do sangue (cPCR-SG), constatou-se 3,4% (8/235) de positivos, já na avaliação do suabe conjuntival (cPCR-SC), 2,5% (6/235) foram positivos Não foram encontrados animais positivos avaliados pelo cPCR utilizando o primer LIT5R/L5-8S (ITS-1). Na correlação de animais positivos com os achados hematológicos e bioquímicos, houve correlação no aumento da concentração plasmática de globulinas e diminuição de albuminas no grupo de animais positivos. Já na correlação entre a soropositividade dos cavalos e contato com cães com leishmaniose visceral e soropositividade compresença de lesão dermatológica não encontramos correlação. Em relação aos flebotomíneos, a densidade total foi de 64 machos e 50 fêmeas capturados em Ilha Solteira e 32 machos e 16 fêmeas em Andradina. Quando realizada a caracterização da espécie, em Andradina foram identificadas 6 espécies distintas de flebotomíneos e Ilha Solteira 11 espécies, dentre todas se destacando a maior densidade de Lu. (Lu) longipalpis, 43,75% e 28,10% em ambos os municípios respectivamente. Os resultados da presente pesquisa alertam para a presença de equinos infectados em áreas endêmicas, bem como da presença ativa de vetores incriminados na transmissão das leishmanioses nos locais estudados.

The aim of this study was to detect DNA and anti-Leishmania sp. in equines and a fauna survey of sand flies in the municipalities of Andradina and Ilha Solteira, state of São Paulo. For this, 235 horses from Andradina, Araçatuba, Bauru and Ilha Solteira underwent clinical and laboratory tests,. Sandflies were collected from January 2017 to December 2018 by means of a CDC (Center for Disease Control and Prevention) trap, where 6 traps were installed in Andradina and 6 in Ilha Solteira.Collections were performed monthly for three consecutive days. By ELISA, a seropositivity of 60.6% (137/226) was detected and by Indirect Immunofluorescence Reaction (IFAT), 89.4% (202/226). By conventional PCR (cPCR) using primers 13A / 13B ,3.4% (8/235) blood samples were positives (cPCR-SG), and (6/235) were positives in conjunctival swab (cPCR-SC). No positive animals were found by cPCR using primers LIT5R / L5-8S (ITS-1). Regarding the comparison of hematological and biochemical findings between positive and negatives animals, there was correlation in the increase of plasma globulin concentration and decrease of albumins in the group of positive animals. The correlation between horses seropositivity and contact with dogs with visceral leishmaniasis and seropositivity with presence of dermatological lesions, no correlation was found. Regarding to sand flies, the total density was 64 males and 50 females caught in Ilha Solteira and 32 males and 16 females in Andradina. When characterization of the species was carried out, six species of sandflies were identified in Andradina and Ilha Solteira 11 species, among them the highest density of Lutzomyia (Lutzomyia) longipalpis, 43.75% and 28.10% in both municipalities, respectively. The results of the present study point out the presence of infected horses in endemic areas as well as an active presence of vectors incriminated in the transmission of leishmaniases in the studied areas.