Resumo
The maintenance of viable and stable Xanthomonascells is crucial for the xanthan reliable research and industrial production. The method, storage and recovery conditions should preserve bothviability and phenotypical and genotypical features. Here, the effectiveness classical methods on the long-term preservation of different Xanthomonas arboricola pathovar pruni strains was to determine.Strains were preserved by monthly sub-culturing in solid medium and lyophilization. After 12 years the viability of the strains, was assessed, as well as their productive capacity and the viscosity of the xanthan gum produced by these strains kept by lyophilization and sub-culturing. Among the lyophilized strains, only those stored at -18 °C were viable after 12 years. The productive capacity of the strains were poorly affected by lyophilization, the passage of the cultures into a solid nutrition medium being sufficient for them to return to their normal metabolism. The viscosity of the synthesized xanthan gum was method-dependent and higher for the lyophilized strains. The work and its findings arenew and original because a work on this topic has never been published before. The results obtained allow the breaking of paradigms regarding the preservation of Xanthomonas.(AU)
A manutenção de células de Xanthomonas viáveis e estáveis é crucial para se obter uma pesquisa confiável e para a produção de xantana industrial.O método, o armazenamento eascondições de recuperação devem preservar tanto a viabilidade quanto as características fenotípicas e genotípicas. O objetivo do estudo foi determinar a eficácia dos métodos clássicos na preservação a longo prazo de diferentes cepas de Xanthomonas arboricolapatovarpruni. As cepas foram preservadas por subcultivo mensal em meio sólido e liofilização. Após 12 anos,avaliou-se a viabilidade das linhagens, bem como a capacidade produtiva e a viscosidade da goma xantana produzida por essas linhagens mantidas por liofilização e subcultivo. Entre as cepas liofilizadas, somente foram viáveis, após 12 anos, as armazenadas a -18°C. A capacidade produtiva das cepas foi pouco afetada pela liofilização, sendo suficiente a passagem das culturas para um meio de cultivosólido para que elas voltassem ao seu metabolismo normal. A viscosidade da goma xantana sintetizada foi dependente do método e maior para as cepas liofilizadas. O estudo e suas descobertas sãonovos e originais porque um trabalho sobre este tópico nunca foi publicado antes. Os resultados obtidos permitem quebrar paradigmas quanto à preservação de Xanthomonas.(AU)
Assuntos
Xanthomonas/fisiologia , Xanthomonas/genética , Desenvolvimento Vegetal/genética , Viscosidade , LiofilizaçãoResumo
ABSTRACT: Platelet-rich plasma (PRP) has been considered a promising therapeutic alternative, since platelets are rich in growth factors that are used in the Regenerative Medicine field. However, fresh PRP cannot be stored for long periods. This study aimed to develop a protocol for obtaining lyophilized canine PRP capable of maintaining viability after its reconstitution. For that purpose, canine PRP extraction and lyophilization protocols were initially tested. Subsequently, assays were carried out to quantify the growth factors VEGF and TGF-, before and after the lyophilization process, gelation test and the three-dimensional gel structure analysis of the reconstituted lyophilized PRP by electron microscopy, as well as in vitro cell proliferation test in lyophilized PRP gel. Additionally, the immunogenicity test was performed, using allogeneic samples of lyophilized PRP. The results showed that the lyophilized PRP had adequate therapeutic concentrations of growth factors VEGF and TGF- (9.1pg/mL and 6161.6pg/mL, respectively). The reconstituted PRP gel after lyophilization showed an in vitro durability of 10 days. Its electron microscopy structure was similar to that of fresh PRP. In the cell proliferation test, an intense division process was verified in mesenchymal stem cells (MSCs) through the three-dimensional mesh structure of the lyophilized PRP gel. The immunogenicity test showed no evidence of an immune reaction. The findings were promising, suggesting the possibility of having a lyophilized canine PRP that can be marketed. New in vivo and in vitro studies must be carried out for therapeutic confirmation.
RESUMO: O plasma rico em plaquetas (PRP) é uma alternativa terapêutica promissora, pois as plaquetas são ricas em fatores de crescimento com ação na regeneração de tecidos. No entanto, o PRP fresco não pode ser armazenado por longos períodos. Esse trabalho teve como objetivo desenvolver um protocolo de obtenção de PRP liofilizado canino capaz de manter a viabilidade pós reconstituição. Portanto, foram testados diversos protocolos de extração e liofilização. Para validação do PRP canino liofilizado foi analisada a concentração dos fatores de crescimento VEGF e TGF- antes e após o processo de liofilização, a estrutura tridimensional do PRP liofilizado reconstituído em forma de gel por microscopia eletrônica e seu efeito in vitro na proliferação de células-tronco mesenquimais. Os resultados demonstraram que o PRP liofilizado apresentou concentrações terapêuticas adequadas dos fatores de crescimento VEGF e TGF- (9,1pg/ml e 6161,6pg/ml, respectivamente). O gel de PRP reconstituído após liofilização apresentou uma durabilidade in vitro de 10 dias, sua estrutura tridimensional mostrou-se semelhante ao PRP fresco e proporcionou intensa proliferação de células-tronco mesenquimais durante o cultivo. O teste de imunogenicidade não demonstrou evidências de reação imune. Os achados foram promissores, sugerindo a possibilidade de uso de PRP canino liofilizado para o mercado. Novos estudos in vivo e in vitro deverão ser conduzidos para comprovação terapêutica.
Resumo
Platelet-rich plasma (PRP) has been considered a promising therapeutic alternative, since platelets are rich in growth factors that are used in the Regenerative Medicine field. However, fresh PRP cannot be stored for long periods. This study aimed to develop a protocol for obtaining lyophilized canine PRP capable of maintaining viability after its reconstitution. For that purpose, canine PRP extraction and lyophilization protocols were initially tested. Subsequently, assays were carried out to quantify the growth factors VEGF and TGF-β, before and after the lyophilization process, gelation test and the three-dimensional gel structure analysis of the reconstituted lyophilized PRP by electron microscopy, as well as in vitro cell proliferation test in lyophilized PRP gel. Additionally, the immunogenicity test was performed, using allogeneic samples of lyophilized PRP. The results showed that the lyophilized PRP had adequate therapeutic concentrations of growth factors VEGF and TGF-β (9.1pg/mL and 6161.6pg/mL, respectively). The reconstituted PRP gel after lyophilization showed an in vitro durability of 10 days. Its electron microscopy structure was similar to that of fresh PRP. In the cell proliferation test, an intense division process was verified in mesenchymal stem cells (MSCs) through the three-dimensional mesh structure of the lyophilized PRP gel. The immunogenicity test showed no evidence of an immune reaction. The findings were promising, suggesting the possibility of having a lyophilized canine PRP that can be marketed. New in vivo and in vitro studies must be carried out for therapeutic confirmation.(AU)
O plasma rico em plaquetas (PRP) é uma alternativa terapêutica promissora, pois as plaquetas são ricas em fatores de crescimento com ação na regeneração de tecidos. No entanto, o PRP fresco não pode ser armazenado por longos períodos. Esse trabalho teve como objetivo desenvolver um protocolo de obtenção de PRP liofilizado canino capaz de manter a viabilidade pós reconstituição. Portanto, foram testados diversos protocolos de extração e liofilização. Para validação do PRP canino liofilizado foi analisada a concentração dos fatores de crescimento VEGF e TGF-β antes e após o processo de liofilização, a estrutura tridimensional do PRP liofilizado reconstituído em forma de gel por microscopia eletrônica e seu efeito in vitro na proliferação de células-tronco mesenquimais. Os resultados demonstraram que o PRP liofilizado apresentou concentrações terapêuticas adequadas dos fatores de crescimento VEGF e TGF- β (9,1pg/ml e 6161,6pg/ml, respectivamente). O gel de PRP reconstituído após liofilização apresentou uma durabilidade in vitro de 10 dias, sua estrutura tridimensional mostrou-se semelhante ao PRP fresco e proporcionou intensa proliferação de células-tronco mesenquimais durante o cultivo. O teste de imunogenicidade não demonstrou evidências de reação imune. Os achados foram promissores, sugerindo a possibilidade de uso de PRP canino liofilizado para o mercado. Novos estudos in vivo e in vitro deverão ser conduzidos para comprovação terapêutica.(AU)
Assuntos
Animais , Cães , Técnicas In Vitro , Plasma Rico em Plaquetas , Células-Tronco Mesenquimais , Liofilização , Terapêutica , CãesResumo
Platelet-rich plasma (PRP) has been considered a promising therapeutic alternative, since platelets are rich in growth factors that are used in the Regenerative Medicine field. However, fresh PRP cannot be stored for long periods. This study aimed to develop a protocol for obtaining lyophilized canine PRP capable of maintaining viability after its reconstitution. For that purpose, canine PRP extraction and lyophilization protocols were initially tested. Subsequently, assays were carried out to quantify the growth factors VEGF and TGF-β, before and after the lyophilization process, gelation test and the three-dimensional gel structure analysis of the reconstituted lyophilized PRP by electron microscopy, as well as in vitro cell proliferation test in lyophilized PRP gel. Additionally, the immunogenicity test was performed, using allogeneic samples of lyophilized PRP. The results showed that the lyophilized PRP had adequate therapeutic concentrations of growth factors VEGF and TGF-β (9.1pg/mL and 6161.6pg/mL, respectively). The reconstituted PRP gel after lyophilization showed an in vitro durability of 10 days. Its electron microscopy structure was similar to that of fresh PRP. In the cell proliferation test, an intense division process was verified in mesenchymal stem cells (MSCs) through the three-dimensional mesh structure of the lyophilized PRP gel. The immunogenicity test showed no evidence of an immune reaction. The findings were promising, suggesting the possibility of having a lyophilized canine PRP that can be marketed. New in vivo and in vitro studies must be carried out for therapeutic confirmation.(AU)
O plasma rico em plaquetas (PRP) é uma alternativa terapêutica promissora, pois as plaquetas são ricas em fatores de crescimento com ação na regeneração de tecidos. No entanto, o PRP fresco não pode ser armazenado por longos períodos. Esse trabalho teve como objetivo desenvolver um protocolo de obtenção de PRP liofilizado canino capaz de manter a viabilidade pós reconstituição. Portanto, foram testados diversos protocolos de extração e liofilização. Para validação do PRP canino liofilizado foi analisada a concentração dos fatores de crescimento VEGF e TGF-β antes e após o processo de liofilização, a estrutura tridimensional do PRP liofilizado reconstituído em forma de gel por microscopia eletrônica e seu efeito in vitro na proliferação de células-tronco mesenquimais. Os resultados demonstraram que o PRP liofilizado apresentou concentrações terapêuticas adequadas dos fatores de crescimento VEGF e TGF- β (9,1pg/ml e 6161,6pg/ml, respectivamente). O gel de PRP reconstituído após liofilização apresentou uma durabilidade in vitro de 10 dias, sua estrutura tridimensional mostrou-se semelhante ao PRP fresco e proporcionou intensa proliferação de células-tronco mesenquimais durante o cultivo. O teste de imunogenicidade não demonstrou evidências de reação imune. Os achados foram promissores, sugerindo a possibilidade de uso de PRP canino liofilizado para o mercado. Novos estudos in vivo e in vitro deverão ser conduzidos para comprovação terapêutica.(AU)
Assuntos
Animais , Cães , Técnicas In Vitro , Plasma Rico em Plaquetas , Células-Tronco Mesenquimais , Liofilização , Terapêutica , CãesResumo
A liofilização é considerada uma das técnicas mais seguras para obtenção de estabilidade de cepas de cultura. Para este processo, podem ser utilizados crioprotetores, que são substâncias que protegem as estruturas celulares durante o período de congelamento, descongelamento e desidratação. O objetivo do presente trabalho foi avaliar o desempenho da glicose, trealose e quitosana como crioprotetores para manutenção de cepas de Escherichia coli e Saccharomyces cerevisiae. Para tratamento estatístico, utilizou-se ANOVA e teste de Tukey com o software Bioestat, versão 5.3. Para Escherichia coli, a Trealose apresentou melhores resultados após a liofilização, porém nenhum dos tratamentos mostrou-se eficaz em prolongar a viabilidade até os 60 dias de armazenamento. Para Saccharomyces cerevisiae, todos os tratamentos apresentaram-se satisfatórios ao longo dos 60 dias avaliados.
Lyophilization is considered one of the safest techniques for acquiring stability of culture strains. For this process, cryoprotectants, which are substances that protect cell structures during the period of freezing, thawing and dehydration, may be used. The objective of the present work was to evaluate the performance of glucose, trehalose, and chitosan as cryoprotectants for Escherichia coli e Saccharomyces cerevisiae. For statistical treatment, ANOVA and Tukeys test were used with the software Bioestat, version 5.3. For Escherichia coli Trealose presented better performance after lyophilization, but none of the treatments proved to be effective in prolonging viability up to 60 days of storage. For Saccharomyces cerevisiae all treatments were satisfactory throughout the 60 days evaluated.
Assuntos
Escherichia coli , Glucose , Liofilização , Quitosana , Saccharomyces cerevisiae , Sobrevivência Celular , Trealose , CrioprotetoresResumo
A liofilização é considerada uma das técnicas mais seguras para obtenção de estabilidade de cepas de cultura. Para este processo, podem ser utilizados crioprotetores, que são substâncias que protegem as estruturas celulares durante o período de congelamento, descongelamento e desidratação. O objetivo do presente trabalho foi avaliar o desempenho da glicose, trealose e quitosana como crioprotetores para manutenção de cepas de Escherichia coli e Saccharomyces cerevisiae. Para tratamento estatístico, utilizou-se ANOVA e teste de Tukey com o software Bioestat, versão 5.3. Para Escherichia coli, a Trealose apresentou melhores resultados após a liofilização, porém nenhum dos tratamentos mostrou-se eficaz em prolongar a viabilidade até os 60 dias de armazenamento. Para Saccharomyces cerevisiae, todos os tratamentos apresentaram-se satisfatórios ao longo dos 60 dias avaliados.(AU)
Lyophilization is considered one of the safest techniques for acquiring stability of culture strains. For this process, cryoprotectants, which are substances that protect cell structures during the period of freezing, thawing and dehydration, may be used. The objective of the present work was to evaluate the performance of glucose, trehalose, and chitosan as cryoprotectants for Escherichia coli e Saccharomyces cerevisiae. For statistical treatment, ANOVA and Tukeys test were used with the software Bioestat, version 5.3. For Escherichia coli Trealose presented better performance after lyophilization, but none of the treatments proved to be effective in prolonging viability up to 60 days of storage. For Saccharomyces cerevisiae all treatments were satisfactory throughout the 60 days evaluated.(AU)
Assuntos
Escherichia coli , Saccharomyces cerevisiae , Liofilização , Glucose , Trealose , Quitosana , Sobrevivência Celular , CrioprotetoresResumo
The aim of this study was to assess the influence of heat treatment on physicochemical and rheological characteristics of natural yogurts, as well as the influence of lyophilization process on natural yogurts after reconstitution. In the first experiment, three yogurt treatments were processed, as follows: Treatment 1, yogurt produced with raw refrigerated milk; Treatment 2, yogurt produced with refrigerated pasteurized milk; and Treatment 3, yogurt produced with UHT (ultra-high temperature) milk, in addition to analyses of fat, protein, moisture, titratable acidity, and pH. The shelf life of yogurts at 1, 8, 15, 22, and 29 days of storage, as well as pH, acidity, syneresis, viscosity, viable lactic bacteria, and total coliforms were also assessed. In the second experiment, yogurts were submitted to lyophilization process, performed by scanning electron microscopy analysis and subsequently in those reconstituted, in addition to being assessed the physicochemical, rheological, and viable lactic bacteria characteristics. The results found in the first experiment showed that heat treatment was positive for viscosity, syneresis, and lactic bacteria, being viable until the 15th day of storage only for yogurts submitted to heat treatment. In the second experiment, lyophilization preserved the physicochemical characteristics of yogurts, but the number of initial lactic bacteria was different, also negatively affecting yogurt viscosity.
Objetivou-se avaliar a influência do tratamento térmico nas características físico-químicas e reológicas de iogurtes naturais e a influência do processo de liofilização em iogurtes naturais após sua reconstituição. No primeiro experimento, foram processados três tratamentos de iogurtes Tratamento 1 - iogurte produzido com leite cru refrigerado; Tratamento 2 - iogurte produzido com leite pasteurizado refrigerado; Tratamento 3 - iogurte produzido com leite UAT (Ultra Alta Temperatura) e feitas as análises de gordura, proteína, umidade, acidez titulável e pH. Avaliou-se também a vida de prateleira dos iogurtes nos tempos 1, 8, 15, 22 e 29 dias de armazenamento, tendo sido feitas as análises de pH, acidez, sinérese, viscosidade, bactérias lácticas viáveis e coliformes totais. No experimento II, os iogurtes foram submetidos ao processo de liofilização realizado analise de microscopia eletrônica de varredura e, em seguida reconstituídos, e avaliadas as características físico-químicas, reológicas e de bactérias lácticas viáveis. Os resultados encontrados no primeiro experimento evidenciaram que o tratamento térmico foi positivo para viscosidade, sinérese e também para as bactérias lácticas, que foram viáveis até o 15 dia de armazenamento apenas para os iogurtes submetidos ao tratamento térmico. No segundo experimento, constatou-se que a liofilização preservou as características físico-químicas dos iogurtes, os números de bactérias lácticas iniciais não foram mantidas, tendo também afetado negativamente a viscosidade dos iogurtes.
Assuntos
Iogurte , Tratamento Físico-Químico/análise , Tratamento Térmico/análise , Tratamento Térmico/efeitos adversosResumo
The aim of this study was to assess the influence of heat treatment on physicochemical and rheological characteristics of natural yogurts, as well as the influence of lyophilization process on natural yogurts after reconstitution. In the first experiment, three yogurt treatments were processed, as follows: Treatment 1, yogurt produced with raw refrigerated milk; Treatment 2, yogurt produced with refrigerated pasteurized milk; and Treatment 3, yogurt produced with UHT (ultra-high temperature) milk, in addition to analyses of fat, protein, moisture, titratable acidity, and pH. The shelf life of yogurts at 1, 8, 15, 22, and 29 days of storage, as well as pH, acidity, syneresis, viscosity, viable lactic bacteria, and total coliforms were also assessed. In the second experiment, yogurts were submitted to lyophilization process, performed by scanning electron microscopy analysis and subsequently in those reconstituted, in addition to being assessed the physicochemical, rheological, and viable lactic bacteria characteristics. The results found in the first experiment showed that heat treatment was positive for viscosity, syneresis, and lactic bacteria, being viable until the 15th day of storage only for yogurts submitted to heat treatment. In the second experiment, lyophilization preserved the physicochemical characteristics of yogurts, but the number of initial lactic bacteria was different, also negatively affecting yogurt viscosity.(AU)
Objetivou-se avaliar a influência do tratamento térmico nas características físico-químicas e reológicas de iogurtes naturais e a influência do processo de liofilização em iogurtes naturais após sua reconstituição. No primeiro experimento, foram processados três tratamentos de iogurtes Tratamento 1 - iogurte produzido com leite cru refrigerado; Tratamento 2 - iogurte produzido com leite pasteurizado refrigerado; Tratamento 3 - iogurte produzido com leite UAT (Ultra Alta Temperatura) e feitas as análises de gordura, proteína, umidade, acidez titulável e pH. Avaliou-se também a vida de prateleira dos iogurtes nos tempos 1, 8, 15, 22 e 29 dias de armazenamento, tendo sido feitas as análises de pH, acidez, sinérese, viscosidade, bactérias lácticas viáveis e coliformes totais. No experimento II, os iogurtes foram submetidos ao processo de liofilização realizado analise de microscopia eletrônica de varredura e, em seguida reconstituídos, e avaliadas as características físico-químicas, reológicas e de bactérias lácticas viáveis. Os resultados encontrados no primeiro experimento evidenciaram que o tratamento térmico foi positivo para viscosidade, sinérese e também para as bactérias lácticas, que foram viáveis até o 15 dia de armazenamento apenas para os iogurtes submetidos ao tratamento térmico. No segundo experimento, constatou-se que a liofilização preservou as características físico-químicas dos iogurtes, os números de bactérias lácticas iniciais não foram mantidas, tendo também afetado negativamente a viscosidade dos iogurtes.(AU)
Assuntos
Tratamento Térmico/efeitos adversos , Tratamento Térmico/análise , Tratamento Físico-Químico/análise , IogurteResumo
A albumina é a principal proteína do sangue, exercendo diversas funções no organismo tais como: pressão oncótica, equilíbrio ácido-básico, anticoagulante, entre outras funções. A hipoalbuminemia é comumente encontrada em pacientes críticos e associada a um mau prognóstico tanto na medicina quanto na veterinária, o que torna necessário o uso de uma solução de reposição de albumina. A produção de uma solução de albumina humana já é feita há mais de 50 anos a partir de técnicas de fracionamento do plasma. Na medicina veterinária, as técnicas de fracionamento não são realizadas de rotina e há poucos trabalhos com a utilização dessas técnicas no plasma canino. Apesar de já existir uma albumina canina liofilizada produzida nos EUA, ela não está disponível no Brasil devido aos altos custos de importação. Atualmente, não há trabalhos relacionados aos parâmetros críticos de qualidade da liofilização desta albumina, sendo que há uma demanda no mercado veterinário para seu uso clínico. Sendo assim, este trabalho objetivou o estudo do fracionamento do plasma canino para a purificação da albumina e do seu processo de liofilização. Para o fracionamento do plasma, foram avaliadas três técnicas diferentes utilizando três agentes precipitantes seguidos de cromatografia, com avaliação de rendimento e pureza. Para o estudo de liofilização, foram analisadas três soluções tampão diferentes com 9 formulações cada. O estudo de liofilização englobou a definição das temperaturas críticas de liofilização, e a avaliação pós-liofilização imediata. As três técnicas de fracionamento foram eficazes para a purificação da albumina canina, com a técnica utilizando PEG 6000 combinada com filtração tangencial obtendo o maior rendimento. Na liofilização, a formulação com 5% (p/v) de glicina em tampão com arginina 50 mM foi a que obteve as maiores temperaturas críticas. Outros trabalhos para o aperfeiçoamento na técnica de fracionamento do plasma e sobre a estabilidade a longo prazo da albumina liofilizada são necessários, porém este estudo é um primeiro passo para suprir uma demanda do mercado veterinário de uma albumina canina para uso clínico.
Albumin is the main protein of the blood, being responsible for oncotic pressure, acidbasic balance, anticoagulant function, among other functions. Hypoalbuminemia is commonly associated with critically ill patients leading to a poor outcome either in medicine and veterinary. Thus, a replacement solution is needed. Albumin solutions are already being made from human plasma using fractionation techniques for more than 50 years. In veterinary, plasma fractionation is not commonly used, having only a few studies assessing these techniques in canine plasma. Although in the USA, there is already freezedried canine albumin, which is not available in Brazil due to the excessive costs of import, there are no studies about the critical parameters for the freeze-drying process, thus there is a demand for canine albumin production for clinical use. Therefore, this study intended to assess the fractionation of canine plasma for albumin purification and its freeze-drying process. For the plasma fractionation, we used three different protocols, with three different precipitating agents followed by chromatography, with the evaluation of yield and purity. For the freeze-drying process, we evaluated three buffer solutions with 9 different formulations each. The freeze-drying critical temperatures were defined for each formulation and immediate post-lyophilization evaluation was performed. From the three fractionation techniques, PEG 6000 combined with tangential filtration had a better yield. For the freeze-drying process, arginine 50 mM buffer with 5% (w/v) glycine formulation presented higher critical temperatures. Further studies are necessary to improve the fractionation process for better yields and purity, and for long-term stability evaluation of the freeze-dried albumin. However, this study is a first approach to supply the demand for canine albumin for clinical use.
Resumo
O controle e manejo de doenças que acometem a piscicultura mundial, a exemplo das causadas por protozoários, parasitas, vermes, bactérias oportunistas e fungos, é um pré-requisito para a sustentabilidade desse setor produtivo e, um desafio constante, muito complexo e atualmente, limitado de produtos eficazes de tratamento. Além disso, alevinos e juvenis são ainda mais suscetíveis, de maneira geral, a surtos dessas doenças, por terem o sistema imunológico ainda em formação, de modo que, a sobrevivência desses animais depende de estratégias multidisciplinares de manejo adequado de sua saúde, nutrição, da qualidade da água e de medidas de biossegurança. Portanto, se faz necessária a ênfase em prevenção e não somente em tratamento. Por esses motivos, vacinas de DNA ganham atenção crescente, devido a superarem desvantagens de outros tratamentos preventivos, em geral de maneira mais eficiente. Elas funcionam expressando no hospedeiro, diferentes proteínas de patógenos, codificadas em vetores plasmideais. As vacinas comerciais licenciadas atualmente são relativamente caras, o que não gera estratégias amplas de vacinação. Foi avaliada a funcionalidade do plasmídeo vetorial pExu, transformado na linhagem Lactococcus lactis MG 1363, em peixes. Esta vacina gênica L. lactis MG1363 (pExu:mCherry) foi fornecida, por via oral, através de microencapsulamento ou liofilização, para a espécie Tilápia-do-Nilo (Oreochromis niloticus), de elevado interesse comercial. Para tanto, 108 juvenis machos de Tilápia-do-Nilo com peso de 250 ± 20 g foram utilizados. O equivalente a 1 dose (1x109 UFC) foi administrado por via oral [microencapsulado (administração direta) e liofilizado (incorporado à ração comercial)] aos animais e, a área que apresentava fluorescência, foi comparada, nas três secções intestinais (Anterior, Média e Posterior), nos períodos de 6, 18, 24, 48, 72, 96, 120, 144, e 168 horas após a administração. Ambos os métodos avaliados permitiram a expressão do gene repórter em todas as regiões de interesse. Houve, no entanto, diferença significativa (p < 0.001) na área de expressão média por seção intestinal, de modo que a seção Posterior apresentou menor expressão em relação às outras duas seções, tanto quando avaliado o microencapsulamento quanto a liofilização (redução de 40% e 87%, respectivamente). No entanto, a expressão da proteína mCherry se mostrou mais eficiente pelo método de liofilização que pelo microencapsulamento (p < 0.001), ao apresentar, aproximadamente, áreas de fluorescência 25 mil, 13 mil e 4 mil porcento maiores, nas seções Anterior, Média e Posterior, respectivamente. O método de microencapsulamento e liofilização apresentaram amplitude máxima da expressão no intervalo de 24 horas e 96 horas, respectivamente. Tais descobertas são importantes pois irão guiar pesquisas sobre novas estratégias com vacinas de DNA, em especial, as fornecidas oralmente.
The control and management of diseases that affect global pisciculture, such as those caused by protozoa, parasites, worms, opportunistic bacteria and fungi, is a prerequisite for the sustainability of this productive sector and a constant challenge, very complex and currently, limited of effective treatment products. In addition, fingerling and juvenile are even more susceptible, in general, to outbreaks of these diseases, as their immune systems are still in formation, so their survival relies on multidisciplinary strategies for the proper management of their health, nutrition, water quality and biosafety measures. Therefore, emphasis on prevention and not only just treatment is necessary. For these reasons, DNA vaccines are gaining increasing attention, due to overcoming disadvantages of other preventive treatments, generally more efficiently. They work by expressing different pathogen proteins in the host, encoded in plasmid vectors. Licensed commercial vaccines today are relatively expensive, which does not generate extensive vaccination strategies. It was evaluated the functionality of the plasmid pExu vector transformed in Lactococcus lactis MG 1363 strains, for fish. This genic L. lactis MG1363 (pExu:mCherry) vaccine was offered orally by either microencapsulation or lyophilization, for the Nile tilapia (Oreochromis niloticus), of elevated commercial interest. 108 Nile tilapia male juveniles, weighing 250 ± 20 g were utilized. 1 dose (equivalent of 1x109 CFU) were administrated orally [microencapsulated (direct administration) and lyophilized (incorporated into fish feed)] to the animals, and the area that presents fluorescence were compared in three intestinal sections (Anterior, Medium, Posterior) at 6, 18, 24, 48, 72, 96, 120, 144, e 168 hours after administration. Both methods allowed the expression of the reporter gene in all regions of interest. Statistical difference was observed (p < 0.001) in mean área of expression from different sections, so that the Posterior section presented inferior expression in relation to others, either by microencapsulation or lyophilization (40% and 87% reduction, respectively). mCherry protein expression was more efficient with lyophilization than microencapsulation (p < 0.001), by express, in average, fluorescence areas 25 thousand, 13 thousand and 4 thousand percent higher, on Anterior, Medium and Posterior sections, respectively. Microencapsulation and lyophilization presented maximum amplitude of expression in the 24 hours and 96 hours intervals, respectively. Such findings are important because they will guide research on new strategies with DNA vaccines, especially those given orally.
Resumo
A ureia é amplamente utilizada na dieta de ruminantes como fonte de nitrogênio não proteico (NNP) em substituição parcial ás fontes de proteína verdadeira, devido seu baixo custo por unidade de nutriente e alta capacidade de disponibilizar amônia como fonte de nitrogênio para produção de proteína microbiana. No entanto, há uma preocupação quanto a sua utilização em níveis elevados na dieta animal, devido o baixo aproveitamento do nitrogênio amoniacal, e principalmente pela possibilidade de intoxicação do rebanho. O presente estudo propôs-se a obter e caracterizar microesferas de cera de carnaúba contendo ureia. Os sistemas microencapsulados foram investigados quanto a rendimento e eficiência de microencapsulação, além de caracterizados por técnicas de Termogravimetria, Calorimetria exploratória diferencial, Espectroscospia na região do Infravermelho, Microscopia eletrônica de varredura, determinação de umidade e atividade de água,. As formulações (2:1) e (4:1) apresentaram altos índices de retenção de ureia, além de bons rendimentos, atestando a adequação da escolha da cera de carnaúba e também da técnica de liofilização para obter os sistemas microencapsulados. A cera de carnaúba proporcionou a inibição da higroscopicidade da ureia, prevenindo sua petrificação durante armazenamento e, portanto, facilitando sua homogeneização com os demais ingredientes da dieta. Desta forma, a partir das constatações feitas, a cera de carnaúba apresenta-se como um encapsulante promissor para obtenção de micropartículas contendo ureia para possível liberação lenta, em que, de acordo com o presente estudo, entre as duas formulações desenvolvidas, recomenda-se a UM2 (2:1), visto que apresentou melhor rendimento e é o sistema com maior conteúdo de ureia, proporcionando maior aporte de nitrogênio não proteico (NNP) de liberação lenta para o animal
Urea is widely used in the diet of ruminants as a source of non-protein nitrogen (NNP) in partial substitution to true protein sources, due to its low cost per unit of nutrient and high capacity to provide ammonia as a source of nitrogen for the production of microbial protein. However, there is a concern about its use at high levels to the animal diet, due to the low utilization of ammoniacal nitrogen, and mainly due to the possibility of intoxication of the herd. The present study aimed obtaining and characterizing urea-containing carnauba wax microspheres. The microencapsulated systems were investigated in terms of microencapsulation efficiency and yield, and also characterized by techniques of Thermogravimetry, Differential scanning calorimetry, Fourier transform infrared Spectroscopy, Scanning electron microscopy, moisture content, and water activity. The formulations presented high urea retention rates, as well as good yields, attesting the adequacy of carnauba wax and also the lyophilization technique to obtain the microencapsulated systems. Carnauba wax provided the inhibition of the hygroscopicity of urea, preventing its petrification during storage, facilitating its homogenization with other ingredients of the diet. Carnauba wax is a promising encapsulant for the production of urea microparticles for possible slow release, in which, according to the present study, between the two formulations developed, it is recommended the formulation UM2 (2:1), since it presented better yield and is the system with higher content of urea, providing a higher supply of slow release non-protein nitrogen (NNP) to the animal.
Resumo
Objetivou-se utilizar a cera de carnaúba para encapsular a ureia, a fim de elaborar um sistema de liberação lenta. Foram obtidos três sistemas microencapsulados pela técnica de Liofilização, com diferentes proporções entre encapsulante e núcleo (2:1, 3:1 e 4:1). Os produtos foram avaliados quanto ao processo de micoencapsulação através da análise de rendimento e eficiência, além de caracterizados por técnicas de Termogravimetria, Calorimetria exploratória diferencial, determinação de umidade e atividade de água, determinação de carga, Espectroscopia na região de infravermelho e Microscopia eletrônica de varredura. Avaliou-se também a cinética de degradação in situ, perfil de liberação de nitrogênio e mecanismo de liberação do núcleo em pequenos ruminantes. As formulações não diferiram muito entre si e todas apresentaram excelentes propriedades, incluindo a inibição da higroscopicidade da ureia, com destaque para a formulação 2:1, que exibiu os maiores valores de rendimento e maior eficiência de microencapsulação, enquanto a formulação 4:1 apresentou maior estabilidade térmica e menor teor de umidade. A obtenção de microesferas de ureia utilizando a cera de carnaúba demonstrou resultados exitosos para todos os sistemas microencapsulados desenvolvidos, evidenciando o potencial promissor de uso desta matéria-prima regional para tal finalidade. A cinética demonstrou que o aumento da proporção de cera reduziu não só a degradação, mas também o aproveitamento da ureia, como pode ser comprovado também no perfil de liberação, onde a UME2 apresentou uma liberação mais controlada que as demais UMEs estudadas. A cera de carnaúba propiciou uma maior biodisponibilidade da ureia, reduzindo o risco de intoxicação. Os principais mecanismos de liberação foram a difusão e a biodegradação, fato que impediu o aproveitamento completo do N, mas não diminuiu a taxa de liberação. O comportamento das granulometrias estudadas demonstrou que o aumento do tamanho da partícula tende a regular melhor a taxa de liberação do N, sendo mais eficaz que acrescentar cera ao sistema. Desta forma conclui-se que a cera de carnaúba é uma alternativa promissora para liberação gradual de ureia, sendo apontada a concentração 2:1 como a mais favorável.
The objective was to use the carnauba wax to encapsulate the urea in order to elaborate a slow release system. Three microencapsulated systems were obtained by the Lyophilization technique, with different ratios between encapsulant and core (1:2, 1:3 and 1:4). The products were evaluated for the mycoencapsulation process through the performance and efficiency analysis, besides characterized by techniques of Thermogravimetry, Exploratory differential calorimetry, Determination of moisture and water activity, determination of charge, Spectroscopy in the infrared region and Electron microscopy of scanning. In situ degradation kinetics, nitrogen release profile and nucleus release mechanism were evaluated in small ruminants. The formulations did not differ much from each other and all showed excellent properties, including inhibition of urea hygroscopicity, especially the formulation 1:2, which exhibited the highest yield values and highest microencapsulation efficiency, while the formulation 1:4 presented Higher thermal stability and lower moisture content. The production of urea microspheres using carnauba wax demonstrated successful results for all developed microencapsulated systems, evidencing the promising potential of using this regional raw material for this purpose. The kinetics showed that the increase of the wax content reduced not only degradation but also the use of urea, as can also be verified in the release profile, where UME2 showed a more controlled release than the other UMEs studied. Carnauba wax provided a higher bioavailability of urea, reducing the risk of intoxication. The main mechanisms of release were diffusion and biodegradation, a fact that prevented the complete use of N, but did not decrease the rate of release. The behavior of the granulometries studied showed that the increase of the particle size tends to regulate the rate of N release better, being more effective than adding wax to the system. Thus, it is concluded that carnauba wax is a promising alternative for the gradual release of urea, with the concentration 1:2 being the most favorable.
Resumo
Os compostos antioxidantes naturais têm sido cada vez mais investigados devido à necessidade das indústrias alimentícias suprirem as exigências dos consumidores em relação à saudabilidade dos produtos. A quercetina é um flavonoide cujos benefícios estão relacionados principalmente à sua ação antioxidante. Entretando, tal molécula apresenta, geralmente, baixa absorção no trato gastrointenstinal, o que pode ser um obstáculo para sua efetiva ação biológica. Por este motivo, uma alternativa para melhorar a sua bioacessibilidade é a encapsulação em sistemas coloidais baseados em matrizes lipídicas, como os lipossomas. Os lipossomas possuem a capacidade de incorporar tanto bioativos hidrofílicos quanto hidrofóbicos em sua estrutura, bem como proporcionar liberação controlada e aumentar a bioacessibilidade dos ingredientes encapsulados. No entanto, há necessidade do desenvolvimento de processos de produção de lipossomas em maior escala, e dentre os processos possíveis a serem empregados com este objetivo encontra-se o método de produção de injeção de etanol. O objetivo principal da presente Tese foi a microencapsulação de quercetina em lipossomas através do método de injeção de etanol. A dispersão de lipossomas encapsulando quercetina escolhida foi liofilizada, com a intenção de aumentar a estabilidade dos lipossomas e enriquecer o amido de milho. O enriquecimento do amido de milho foi realizado por aglomeração, especificamente pelo método de alto cisalhamento, sendo que o pó alimentício aglomerado resultante foi caracterizado fisicamente e teve suas propriedades físicas melhoradas. Foi possível realizar a aplicação do amido de milho enriquecido com quercetina no antepasto de berinjela, sendo que tal incorporação não alterou significativamente as características do produto. Além disso, o antepasto de berinjela foi processado a alta pressão hidrostática e teve sua estabilidade avaliada, sendo que a utilização do processamento não-térmico apresentou vantagens em relação ao método de processamento convencional.
The natural antioxidant compounds have been increasingly investigated due to the need of the food industry to provide healthier products. Quercetin is a flavonoid, whose benefits are linked mainly with its antioxidant activity. However, this bioactive generally has a low absorption rate in the gastrointestinal tract, which it can be an obstacle for its biological action effective. For this reason, an alternative to improve such bioavailability is to encapsulate quercetina in lipid-based matrices, e.g, liposomes. The liposomes have the capacity to encapsulate both hydrophilic and hydrophobic bioactive, as well as to control the release of the encapsulated bioactives, and enhance their bioavailability. However, there is a need to develop liposome production methods in larger scale, and one of the processes feasible to be scaled up is the ethanol injection method. One of the main objectives of this Thesis was to microencapsulate quercetin in liposomes by ethanol injection method. The dispersion of quercetin-loaded liposomes was lyophilized aiming to increase the stability of liposomes and enrich cornstarch. The enrichment of cornstarch was performed by agglomeration, specifically by high shear method, and the agglomerated food powders were characterized and their physical properties was improved. It was possible to incorporate the enriched cornstarch with quercetin in eggplant sauce, and such application did not change the product characteristics. Also, the eggplant sauce was processed by high hydrostatic pressure and had its stability evaluated, indicating the use of nonthermal technology showed advantages if compared to the conventional thermal processing.
Resumo
Several extraction methods of genomic DNA for identification and characterization of genetic diversity in different plant species are routinely applied during molecular analysis. However, the presence of undesirable compounds such as polyphenols and polysaccharides is one of the biggest problems faced during the isolation and purification of high quality DNA in plants. Therefore, achievement of fast and accurate methods for DNA extraction is crucial in order to produce pure samples. Leaves of strawberry genotypes (Fragaria ananassa) have high contents of polysaccharides and polyphenols which increase the sample viscosity and decrease the DNA quality, interfering with the PCR performance. Thereby, in this study we evaluated the quality and amount of genomic DNA extracted from young leaves of strawberry after tissue lyophilization and maceration in presence of polivinilpirrolidone (PVP). The CTAB method was used as reference procedure and it was modified to improve the DNA extraction. The modifications consisted of tissue lyophilization overnight until it was completely freeze-dried and addition of PVP during the tissue maceration in liquid nitrogen. The results showed the efficiency and reliability of the modified method compared to the unmodified method, indicating that combination of lyophilization and PVP improve the quality and amount of the DNA extracted from strawberry leaves.
Vários métodos de extração de DNA genômico para a identificação e caracterização da diversidade genética em diferentes espécies de plantas são rotineiramente aplicados durante a análise molecular. Entretanto, a presença de compostos indesejáveis, tais como polifenóis e polissacarídeos, é um dos maiores problemas que ocorrem durante o isolamento e purificação de DNA de alta qualidade em plantas. Dessa forma, o sucesso no desenvolvimento de métodos de extração de DNA rápidos e acurados é crucial para produzir amostras puras. Folhas de genótipos de morangueiro (Fragaria ananassa) têm elevado conteúdo de polissacarídeos e polifenóis que aumentam a viscosidade da amostra e reduzem a qualidade do DNA, interferindo no desempenho da PCR. Neste estudo, avaliamos a qualidade e a quantidade de DNA genômico extraído de folhas jovens de morangueiro após a liofilização do tecido e a maceração na presença de polivinilpirrolidona (PVP). O método CTAB foi utilizado como procedimento de referência e foi modificado para melhorar a extração do DNA. As modificações consistiram na liofilização do tecido a baixa temperatura até que ele tivesse sido desidratado completamente, associada à adição de PVP durante a maceração do tecido no nitrogênio líquido. Os resultados demonstraram a eficiência e a confiabilidade do método modificado comparado ao método não modificado, indicando que a combinação da liofilização com PVP melhora a qualidade e quantidade do DNA extraído de folhas de morangueiro.
Resumo
Several extraction methods of genomic DNA for identification and characterization of genetic diversity in different plant species are routinely applied during molecular analysis. However, the presence of undesirable compounds such as polyphenols and polysaccharides is one of the biggest problems faced during the isolation and purification of high quality DNA in plants. Therefore, achievement of fast and accurate methods for DNA extraction is crucial in order to produce pure samples. Leaves of strawberry genotypes (Fragaria ananassa) have high contents of polysaccharides and polyphenols which increase the sample viscosity and decrease the DNA quality, interfering with the PCR performance. Thereby, in this study we evaluated the quality and amount of genomic DNA extracted from young leaves of strawberry after tissue lyophilization and maceration in presence of polivinilpirrolidone (PVP). The CTAB method was used as reference procedure and it was modified to improve the DNA extraction. The modifications consisted of tissue lyophilization overnight until it was completely freeze-dried and addition of PVP during the tissue maceration in liquid nitrogen. The results showed the efficiency and reliability of the modified method compared to the unmodified method, indicating that combination of lyophilization and PVP improve the quality and amount of the DNA extracted from strawberry leaves.
Vários métodos de extração de DNA genômico para a identificação e caracterização da diversidade genética em diferentes espécies de plantas são rotineiramente aplicados durante a análise molecular. Entretanto, a presença de compostos indesejáveis, tais como polifenóis e polissacarídeos, é um dos maiores problemas que ocorrem durante o isolamento e purificação de DNA de alta qualidade em plantas. Dessa forma, o sucesso no desenvolvimento de métodos de extração de DNA rápidos e acurados é crucial para produzir amostras puras. Folhas de genótipos de morangueiro (Fragaria ananassa) têm elevado conteúdo de polissacarídeos e polifenóis que aumentam a viscosidade da amostra e reduzem a qualidade do DNA, interferindo no desempenho da PCR. Neste estudo, avaliamos a qualidade e a quantidade de DNA genômico extraído de folhas jovens de morangueiro após a liofilização do tecido e a maceração na presença de polivinilpirrolidona (PVP). O método CTAB foi utilizado como procedimento de referência e foi modificado para melhorar a extração do DNA. As modificações consistiram na liofilização do tecido a baixa temperatura até que ele tivesse sido desidratado completamente, associada à adição de PVP durante a maceração do tecido no nitrogênio líquido. Os resultados demonstraram a eficiência e a confiabilidade do método modificado comparado ao método não modificado, indicando que a combinação da liofilização com PVP melhora a qualidade e quantidade do DNA extraído de folhas de morangueiro.
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Os objetivos do trabalho foram caracterizar cinco estirpes não toxigênicas de Clostridium difficile (NTCD), avaliar a viabilidade temporal de esporos liofilizados e prevenir a infecção por C. difficile (ICD) em hamsters utilizando uma estirpe NTCD. Foram realizadas PCR e ELISA para confirmação do perfil toxigênico, testes de produção de esporos in vitro e avaliação do perfil de resistência a antimicrobianos. Uma estirpe foi selecionada e liofilizada em várias alíquotas, as quais foram mantidas a 4 e 20°C e submetidas a três métodos de contagem de esporos mensalmente. Um total de 107 esporos da estirpe NTCD foi administrada em hamsters previamente tratados com clindamicina. O desafio com 108 esporos de uma estirpe toxigênica de C. difficile ocorreu 12 e 48 horas após a administração da estirpe NTCD e os animais foram observados por 28 dias. As estirpes foram confirmadas como não toxigênicas, apresentaram resistência a clindamicina e lincomicina, além de genes de resistência a bacitracinas e tetraciclinas. A produção de esporos in vitro variou de 6,17 x 104 a 4,79 x 106 esporos/mL. As estirpes estocadas a 20°C mantiveram contagens ligeiramente mais elevadas ao longo do tempo, apresentando tempo de prateleira estimado de 23 meses. A estirpe NTCD foi capaz de prevenir ICD em todos os animais que a receberam, permanecendo no intestino até o último dia experimental.
The objectives of this study were to characterize five strains of non-toxigenic Clostridium difficile (NTCD), to assess the temporal viability of freeze-dried spores and prevent C. difficile infection (CDI) in hamsters using one NTCD strain. The tests performed were PCR and ELISA to confirm the toxigenic profile, in vitro spore production and evaluation of antimicrobial resistance profile. One strain was selected and lyophilized in several aliquots, which were kept at 4 and 20°C and subjected to three spore count methods monthly. A total of 107 spores of NTCD strain was administered to hamsters previously treated with clindamycin. The challenge with 108 spores from a toxigenic strain of C. difficile was performed 12 and 48 hours after administration of NTCD strain and the animals were observed for 28 days. Strains were confirmed as non-toxigenic, were resistant to clindamycin and lincomycin and presented resistance genes to bacitracins and tetracyclines. The production of spores in vitro ranged from 6.17 x 104 to 4.79 x 106 spore/ml. Strains stored at 20°C maintained slightly higher counts over time, with estimated shelf life of 23 months. NTCD strain was able to prevent ICD in all animals that received it and remaining in the intestine until the last experiment day.
Resumo
Objetivou-se com essa pesquisa avaliar a influência do tratamento térmico nas características físico-químicas e reológicas de iogurtes naturais e a influência do processo de liofilização em iogurtes naturais após sua reconstituição. No primeiro experimento, foram processados três tratamentos de iogurtes Tratamento 1 - iogurte produzido com leite cru refrigerado; Tratamento 2 - iogurte produzido com leite pasteurizado refrigerado; Tratamento 3 - iogurte produzido com leite UAT (Ultra Alta Temperatura) e feitas as análises de gordura, proteína, umidade, acidez titulável e pH. Avaliou-se também a vida de prateleira dos iogurtes nos tempos 1, 8, 15, 22 e 29 dias de armazenamento, tendo sido feitas as análises de pH, acidez, sinérese, viscosidade, bactérias lácticas viáveis e coliformes totais. No experimento II, os iogurtes foram submetidos ao processo de liofilização e, em seguida reconstituídos, e avaliadas as características físico-químicas, reológicas e de bactérias lácticas viáveis. Os resultados encontrados no primeiro experimento evidenciaram que o tratamento térmico foi positivo para viscosidade, sinérese e também para as bactérias lácticas, que foram viáveis até o 15° dia de armazenamento apenas para os iogurtes submetidos ao tratamento térmico. No segundo experimento, constatou-se que a liofilização preservou as características físico-químicas dos iogurtes, os números de bactérias lácticas iniciais não foram mantidas, tendo também afetado negativamente a viscosidade dos iogurtes.
This paper aimed to evaluate the influence of thermal treatment on physicochemical and rheological characteristics of natural yoghurt, and also to evaluate the infl uence of the lyophilization process on natural yoghurt after its reconstitution. In the first experiment, three treatments of yoghurt were processed: (a) Treatment 1 - yogurt made from refrigerated raw milk; (b) Treatment 2 - yoghurt made from pasteurized and refrigerated milk; (c) Treatment 3 - yoghurt produced with Ultra High Temperature (UHT) milk; for all treatments, the analyzes of fat, protein, moisture, acidity, and pH were made. The shelf life of yoghurt was also evaluated at the 1st, 8th, 15th, 22nd, and 29 th days of storage; analyzes of the pH, acidity, syneresis, viscosity, viable lactic acid bacteria, and total coliforms were made. In the second experiment, the yogurts were subjected to lyophilization process and then reconstituted and the physicochemical, rheological, and viable lactic acid bacteria characteristics were evaluated. Results of the first experiment showed that the thermal treatment was positive for viscosity, syneresis, and also to 20 lactic acid bacteria, which were viable until the 15thday of storage only for yoghurts subjected to this treatment. In the second experiment, it was found that lyophilization process preserved the physicochemical characteristics of yogurts, and that the numbers of initial lactic acid bacteria were not kept and has also negatively affected the viscosity of yogurt.
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The aim of this study was to assess the influence of heat treatment on physicochemical and rheological characteristics of natural yogurts, as well as the influence of lyophilization process on natural yogurts after reconstitution. In the first experiment, three yogurt treatments were processed, as follows: Treatment 1, yogurt produced with raw refrigerated milk; Treatment 2, yogurt produced with refrigerated pasteurized milk; and Treatment 3, yogurt produced with UHT (ultra-high temperature) milk, in addition to analyses of fat, protein, moisture, titratable acidity, and pH. The shelf life of yogurts at 1, 8, 15, 22, and 29 days of storage, as well as pH, acidity, syneresis, viscosity, viable lactic bacteria, and total coliforms were also assessed. In the second experiment, yogurts were submitted to lyophilization process, performed by scanning electron microscopy analysis and subsequently in those reconstituted, in addition to being assessed the physicochemical, rheological, and viable lactic bacteria characteristics. The results found in the first experiment showed that heat treatment was positive for viscosity, syneresis, and lactic bacteria, being viable until the 15th day of storage only for yogurts submitted to heat treatment. In the second experiment, lyophilization preserved the physicochemical characteristics of yogurts, but the number of initial lactic bacteria was di
Objetivou-se avaliar a influência do tratamento térmico nas características físico-químicas e reológicas de iogurtes naturais e a influência do processo de liofilização em iogurtes naturais após sua reconstituição. No primeiro experimento, foram processados três tratamentos de iogurtes Tratamento 1 - iogurte produzido com leite cru refrigerado; Tratamento 2 - iogurte produzido com leite pasteurizado refrigerado; Tratamento 3 - iogurte produzido com leite UAT (Ultra Alta Temperatura) e feitas as análises de gordura, proteína, umidade, acidez titulável e pH. Avaliou-se também a vida de prateleira dos iogurtes nos tempos 1, 8, 15, 22 e 29 dias de armazenamento, tendo sido feitas as análises de pH, acidez, sinérese, viscosidade, bactérias lácticas viáveis e coliformes totais. No experimento II, os iogurtes foram submetidos ao processo de liofilização realizado analise de microscopia eletrônica de varredura e, em seguida reconstituídos, e avaliadas as características físico-químicas, reológicas e de bactérias lácticas viáveis. Os resultados encontrados no primeiro experimento evidenciaram que o tratamento térmico foi positivo para viscosidade, sinérese e também para as bactérias lácticas, que foram viáveis até o 15 dia de armazenamento apenas para os iogurtes submetidos ao tratamento térmico. No segundo experimento, constatou-se que a liofilização preservou as características físic
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The aim of this study was to assess the influence of heat treatment on physicochemical and rheological characteristics of natural yogurts, as well as the influence of lyophilization process on natural yogurts after reconstitution. In the first experiment, three yogurt treatments were processed, as follows: Treatment 1, yogurt produced with raw refrigerated milk; Treatment 2, yogurt produced with refrigerated pasteurized milk; and Treatment 3, yogurt produced with UHT (ultra-high temperature) milk, in addition to analyses of fat, protein, moisture, titratable acidity, and pH. The shelf life of yogurts at 1, 8, 15, 22, and 29 days of storage, as well as pH, acidity, syneresis, viscosity, viable lactic bacteria, and total coliforms were also assessed. In the second experiment, yogurts were submitted to lyophilization process, performed by scanning electron microscopy analysis and subsequently in those reconstituted, in addition to being assessed the physicochemical, rheological, and viable lactic bacteria characteristics. The results found in the first experiment showed that heat treatment was positive for viscosity, syneresis, and lactic bacteria, being viable until the 15th day of storage only for yogurts submitted to heat treatment. In the second experiment, lyophilization preserved the physicochemical characteristics of yogurts, but the number of initial lactic bacteria was di
Objetivou-se avaliar a influência do tratamento térmico nas características físico-químicas e reológicas de iogurtes naturais e a influência do processo de liofilização em iogurtes naturais após sua reconstituição. No primeiro experimento, foram processados três tratamentos de iogurtes Tratamento 1 - iogurte produzido com leite cru refrigerado; Tratamento 2 - iogurte produzido com leite pasteurizado refrigerado; Tratamento 3 - iogurte produzido com leite UAT (Ultra Alta Temperatura) e feitas as análises de gordura, proteína, umidade, acidez titulável e pH. Avaliou-se também a vida de prateleira dos iogurtes nos tempos 1, 8, 15, 22 e 29 dias de armazenamento, tendo sido feitas as análises de pH, acidez, sinérese, viscosidade, bactérias lácticas viáveis e coliformes totais. No experimento II, os iogurtes foram submetidos ao processo de liofilização realizado analise de microscopia eletrônica de varredura e, em seguida reconstituídos, e avaliadas as características físico-químicas, reológicas e de bactérias lácticas viáveis. Os resultados encontrados no primeiro experimento evidenciaram que o tratamento térmico foi positivo para viscosidade, sinérese e também para as bactérias lácticas, que foram viáveis até o 15 dia de armazenamento apenas para os iogurtes submetidos ao tratamento térmico. No segundo experimento, constatou-se que a liofilização preservou as características físic