Clinical and pathological aspects of an outbreak of Streptococcus suis serotype 9 infection in pigs / Aspectos clínicos e patológicos de um surto de infecção por Streptococcus suis sorotipo 9 em suínos

Streptococcus suis is a Gram-positive pathogen that inhabits the upper respiratory tract and can cause severe systemic inflammatory disease in pigs, mainly during the nursery phase. Streptococcus suis is a reemergent pathogen, and outbreaks of its inducing disease represent significant economic losses for the pig industry worldwide. In this study, we described the clinical, pathological, and molecular aspects of an outbreak of S. suis infection with atypically high mortality. The outbreak occurred in nursery farms integrated into a cooperative in the state of Paraná, Brazil. Of the 30 nurseries, 10 were severely affected by the pathogen and had high economic losses. Clinical signs usually started approximately 10 days after weaning and were mainly characterized by acute nervous and locomotor disorders. The mortality of the affected batches usually ranged between 8% and 10%, but in some cases, it reached 18%. Nine piglets were submitted to post mortem examination. Macroscopically, the synovial joints were enlarged and contained fibrinous exudates. In the central nervous system, there was hyperemia of the leptomeningeal vessels associated with deposition of fibrin and purulent exudate in the leptomeninges. In three piglets, there was thickening of the choroid plexus associated with dilation of the lateral ventricles. Microscopic lesions were characterized mainly by fibrinosuppurative inflammation, which involved the synovial membranes, leptomeninges of the brain, and spinal cord. Furthermore, it also affects the choroid plexus, ependyma, nerve roots, and central canal of the spinal cord. S. suis was isolated from the cerebrospinal fluid, meningeal swabs, and/or synovial fluid of 8/9 piglets, and typified as serotype 9 by multiplex PCR.

Streptococcus suis é um patógeno Gram positivo que habita o trato respiratório superior e pode causar doença inflamatória sistêmica grave em suínos, principalmente durante a fase de creche. Streptococcus suis é um patógeno reemergente e surtos representam perdas econômicas significativas a suinocultura mundial. Neste estudo descrevemos os aspectos clínicos, patológicos e moleculares de um surto de infecção por S. suis com mortalidade atipicamente alta. O surto ocorreu em creches integradas a uma cooperativa do estado do Paraná, Brasil. Das 30 creches, 10 foram severamente afetadas pelo patógeno e apresentavam elevadas perdas econômicas. Os sinais clínicos iniciavam em torno de 10 dias após o desmame e eram caracterizados principalmente por sinais clínicos nervosos e locomotores agudos. A mortalidade dos lotes afetados variava entre 8% e 10%, mas em alguns casos ultrapassava 18%. Nove leitões foram submetidos ao exame post mortem. Macroscopicamente, as articulações sinoviais estavam aumentadas e continham exsudato fibrinoso. No sistema nervoso central havia hiperemia dos vasos leptomeníngeos associada a deposição de fibrina e exsudato purulento nas leptomeninges. Em três leitões havia espessamento do plexo coroide associado a dilatação dos ventrículos laterais. As lesões microscópicas eram caracterizadas principalmente por inflamação fibrinossupurativa que envolvia as membranas sinoviais, as leptomeninges do cérebro e medula espinhal. Além disso, também afetava o plexo coroide, epêndima, raízes nervosas e canal central da medula espinhal. S. suis foi isolado do líquido cefalorraquidiano, suabe de meninge e/ou líquido sinovial de 8/9 leitões e tipificado como sorotipo 9 por PCR multiplex.

Suppurative meningoencephalitis secondary to a Trueperella pyogenes-induced mandibular abscess in a free-ranging gray brocket deer (Mazama gouazoubira)

Trueperella pyogenes é um patógeno oportunista, afetando mais comumente ruminantes e porcos. Uma fêmea de veado-mato-cinzento ( Mazama gouazoubira ) teve um abscesso no músculo masseter associado a uma osteólise e osteomielite na mandíbula direita adjacente, com um trato fistuloso até a órbita e através do forame óptico no crânio, causando uma supuração meningite. Histologicamente, o abscesso foi caracterizado por um infiltrado inflamatório neutrofílico e histiocítico com uma miríade de bactérias Gram-positivas em forma de bastonete e uma leptomeningite supurativa e histiocítica focalmente extensa das porções ventrais do cérebro. A cultura microbiológica aeróbia, MALDI-ToF e PCR identificaram T. pyogenes.

Suppurative meningoencephalitis secondary to a Trueperella pyogenes-induced mandibular abscess in a free-ranging gray brocket deer (Mazama gouazoubira)

Trueperella pyogenes é um patógeno oportunista, afetando mais comumente ruminantes e porcos. Uma fêmea de veado-mato-cinzento ( Mazama gouazoubira ) teve um abscesso no músculo masseter associado a uma osteólise e osteomielite na mandíbula direita adjacente, com um trato fistuloso até a órbita e através do forame óptico no crânio, causando uma supuração meningite. Histologicamente, o abscesso foi caracterizado por um infiltrado inflamatório neutrofílico e histiocítico com uma miríade de bactérias Gram-positivas em forma de bastonete e uma leptomeningite supurativa e histiocítica focalmente extensa das porções ventrais do cérebro. A cultura microbiológica aeróbia, MALDI-ToF e PCR identificaram T. pyogenes.(AU)

Diseases of the central nervous system in swine in Southern Brazil / Doenças do sistema nervoso central de suínos no Sul do Brasil

Brazil is the fourth largest exporter of pork worldwide, with its production concentrated in the Southern region of the country. To reduce the economic impacts and increase herd health, an efficient diagnosis of diseases is necessary. The frequency, seasonal, and annual distribution of diseases that affecting the swine nervous system in Southern Brazil were determined through a retrospective study conducted from 2008 to 2018. A total of 231 pigs were evaluated, and distributed in the following phases: suckling piglets, nursery, growing, finishing, and adults. Piglets in the nursery phase were the most affected with 58.01%. Infectious diseases accounted for 87.01% (201/231) of lesions in the nervous system. Bacterial meningitis was observed in 58.87% of cases, presenting an endemic distribution, and a propensity to occur in the months of autumn/winter. The highest number of cases of porcine circovirus-2 were observed in 2008 and 2009, with a subsequent decline. Porcine circovirus, salt poisoning, and brain abscesses exhibited no association between the seasonal occurrence and annual distribution. Salt poisoning was observed more frequently in the last years of this study. Both, non-suppurative encephalomyelitis and selenium toxicosis exhibited an association between their occurrence and seasonal distribution in, the months of winter, and summer, respectively.(AU)

Brasil é o quarto maior exportador de carne suína do mundo, com sua produção concentrada na região Sul do país. Para reduzir os impactos econômicos e aumentar a saúde do rebanho, é necessário o diagnóstico eficiente das doenças. A frequência, distribuição sazonal e anual das doenças que afetam o sistema nervoso de suínos no Sul do Brasil foram determinadas através de um estudo retrospectivo no período de 2008 a 2018. Foram avaliados 231 suínos, distribuídos nas seguintes fases: maternidade, creche, crescimento, terminação e adultos. Leitões da fase de creche foram os mais afetados com 58,01%. As doenças de origem infecciosa foram responsáveis por 87,01% (201/231) das causas de lesões no sistema nervoso. Meningite bacteriana foi observada em 58,87% dos casos, apresentando distribuição endêmica, e uma tendência a ocorrer nos meses de outono/inverno. O maior número de casos de circovírus suíno foram observados em 2008 e 2009, com declínio posterior. Circovírus suíno, intoxicação por sal e os abscessos encefálicos não apresentaram associação entre a ocorrência sazonal e distribuição anual. A intoxicação por sal foi observada com maior frequência nos últimos anos deste estudo. A encefalomielite não supurativa e a intoxicação por selênio exibiram associação entre a sua ocorrência e distribuição sazonal, nos meses de inverno e verão, respectivamente.(AU)

Diseases of the central nervous system in swine in Southern Brazil / Doenças do sistema nervoso central de suínos no Sul do Brasil

Brazil is the fourth largest exporter of pork worldwide, with its production concentrated in the Southern region of the country. To reduce the economic impacts and increase herd health, an efficient diagnosis of diseases is necessary. The frequency, seasonal, and annual distribution of diseases that affecting the swine nervous system in Southern Brazil were determined through a retrospective study conducted from 2008 to 2018. A total of 231 pigs were evaluated, and distributed in the following phases: suckling piglets, nursery, growing, finishing, and adults. Piglets in the nursery phase were the most affected with 58.01%. Infectious diseases accounted for 87.01% (201/231) of lesions in the nervous system. Bacterial meningitis was observed in 58.87% of cases, presenting an endemic distribution, and a propensity to occur in the months of autumn/winter. The highest number of cases of porcine circovirus-2 were observed in 2008 and 2009, with a subsequent decline. Porcine circovirus, salt poisoning, and brain abscesses exhibited no association between the seasonal occurrence and annual distribution. Salt poisoning was observed more frequently in the last years of this study. Both, non-suppurative encephalomyelitis and selenium toxicosis exhibited an association between their occurrence and seasonal distribution in, the months of winter, and summer, respectively.(AU)

Brasil é o quarto maior exportador de carne suína do mundo, com sua produção concentrada na região Sul do país. Para reduzir os impactos econômicos e aumentar a saúde do rebanho, é necessário o diagnóstico eficiente das doenças. A frequência, distribuição sazonal e anual das doenças que afetam o sistema nervoso de suínos no Sul do Brasil foram determinadas através de um estudo retrospectivo no período de 2008 a 2018. Foram avaliados 231 suínos, distribuídos nas seguintes fases: maternidade, creche, crescimento, terminação e adultos. Leitões da fase de creche foram os mais afetados com 58,01%. As doenças de origem infecciosa foram responsáveis por 87,01% (201/231) das causas de lesões no sistema nervoso. Meningite bacteriana foi observada em 58,87% dos casos, apresentando distribuição endêmica, e uma tendência a ocorrer nos meses de outono/inverno. O maior número de casos de circovírus suíno foram observados em 2008 e 2009, com declínio posterior. Circovírus suíno, intoxicação por sal e os abscessos encefálicos não apresentaram associação entre a ocorrência sazonal e distribuição anual. A intoxicação por sal foi observada com maior frequência nos últimos anos deste estudo. A encefalomielite não supurativa e a intoxicação por selênio exibiram associação entre a sua ocorrência e distribuição sazonal, nos meses de inverno e verão, respectivamente.(AU)

Babesiose encefálica em cães: aspectos clínicos, epidemiológicos e patológicos / Encephalic babesiosis in dogs: clinical, epidemiological and pathological aspects

Background: Babesiosis is a hemolytic disease caused by protozoa of the genus Babesia spp. responsible for causinganemia, fever and splenomegaly in several animal species. The cerebral involvement of babesiosis in dogs manifests itselfin a hyperacute manner with neurological disorders such as motor incoordination, nystagmus, anisocoria and convulsions.In Brazil there still are no studies which describe the pathological aspects of cerebral babesiosis in dogs together withinformation relating to its clinical aspects and epidemiology. Therefore, this work had as an objective to describe sevencases of canine cerebral babesiosis, emphasizing its epidemiological, clinical and pathological aspects.Materials, Methods & Results: All the records of the necropsies performed in dogs at Animal Pathology Laboratory (LPA/HV) of the Federal University of Campina Grande (UFCG), Patos Campus, Paraíba, Northeast of Brazil were identified. In Theperiod from January 2003 to December 2017. Later, were selected all the cases of cerebral babesiosis. Were included in thestudy the cases in which was possible to detect structures that were morphologically compatible with Babesia spp. trophozoites,intra-erythrocyte in vessels, associated to the presence of lesions in the CNS. For the microscopical description all the histological slides of the cases were revised, in addition to new slides were made with the fragments stored in parafin blocks or withthe material fixed in a 10% formalin solution. The clinical course of the animals studied was hyperacute. In 4 cases, there wassudden death within 24 h, from the appearance of the first symptoms and case 7 presented an evolution of approximately 12 h.The main clinical symptoms described were vocalization, anorexia/hyporexia, jaundice and decubitus. Additionally, the mostconsistente macroscopical findings observed...

Babesiose encefálica em cães: aspectos clínicos, epidemiológicos e patológicos / Encephalic babesiosis in dogs: clinical, epidemiological and pathological aspects

Background: Babesiosis is a hemolytic disease caused by protozoa of the genus Babesia spp. responsible for causinganemia, fever and splenomegaly in several animal species. The cerebral involvement of babesiosis in dogs manifests itselfin a hyperacute manner with neurological disorders such as motor incoordination, nystagmus, anisocoria and convulsions.In Brazil there still are no studies which describe the pathological aspects of cerebral babesiosis in dogs together withinformation relating to its clinical aspects and epidemiology. Therefore, this work had as an objective to describe sevencases of canine cerebral babesiosis, emphasizing its epidemiological, clinical and pathological aspects.Materials, Methods & Results: All the records of the necropsies performed in dogs at Animal Pathology Laboratory (LPA/HV) of the Federal University of Campina Grande (UFCG), Patos Campus, Paraíba, Northeast of Brazil were identified. In Theperiod from January 2003 to December 2017. Later, were selected all the cases of cerebral babesiosis. Were included in thestudy the cases in which was possible to detect structures that were morphologically compatible with Babesia spp. trophozoites,intra-erythrocyte in vessels, associated to the presence of lesions in the CNS. For the microscopical description all the histological slides of the cases were revised, in addition to new slides were made with the fragments stored in parafin blocks or withthe material fixed in a 10% formalin solution. The clinical course of the animals studied was hyperacute. In 4 cases, there wassudden death within 24 h, from the appearance of the first symptoms and case 7 presented an evolution of approximately 12 h.The main clinical symptoms described were vocalization, anorexia/hyporexia, jaundice and decubitus. Additionally, the mostconsistente macroscopical findings observed...(AU)

Glässer's disease in swine from Northeastern Brazil / Doença de Glässer em suínos no Nordeste do Brasil

Glässer's disease is an important infectious disorder of swine caused by Haemophilus parasuis. Although well recognized in most regions of Brazil, outbreaks of Glässer's disease have not been described in Northeastern region. For this reason, three municipalities of the Pernambuco State were visited in order to identify histories of high mortality in growing and finishing pigs. The main clinical signs consisted of dry cough, apathy, fever, anorexia, paresis, muscle tremors, motor incoordination, seizures leading to high mortality rates. Nine pigs were necropsied, and fragments of the nervous system, organs of the abdominal and thoracic cavities were collected for histological analysis. In addition, lung and brain fragments were used for DNA extraction and molecular testing by real-time Polymerase Chain Reaction (PCR). Grossly, the main lesions consisted of petechial hemorrhages or ecchymosis on the skin of the face, abdomen, forelimbs, and hind limbs. The main severe lesions consisted of hydropericardium, hemopericardium, fibrinous pericarditis and pleuropneumonia. Microscopically, pericarditis, epicarditis and subepicardial myocarditis, followed by a moderate to severe multifocal pleuropneumonia, fibrinosuppurative and necrotizing were the most frequent lesions observed. Real-time PCR amplified H. parasuis infB gene in all samples analyzed, confirming the presence of this etiologic agent.(AU)

A doença de Glässer é uma importante enfermidade infecciosa de suínos causada pela bactéria Haemophilus parasuis. Embora bem reconhecida na maioria das regiões do Brasil, surtos de doença de Glässer não têm sido descritos na região Nordeste. Por este motivo, três regiões do Estado de Pernambuco foram visitadas com o objetivo de se identificar históricos de alta mortalidade em leitões e suínos em fase de terminação. Nove suínos foram necropsiados e fragmentos do sistema nervoso, órgãos das cavidades abdominal e torácica foram coletados para análise histopatológica. Além disso, fragmentos de pulmão e cérebro foram utilizados para extração de DNA e realização de teste molecular por meio da Reação em Cadeia da Polimerase (PCR) em tempo real. Os principais sinais clínicos consistiram em tosse seca, apatia, febre, anorexia, paresia, tremores musculares, incoordenação motora e convulsões levando a altas taxas de mortalidade. As lesões macroscópicas mais severas consistiam em petéquias e equimoses na pele da face, abdome, membros anteriores e posteriores, além de hidropericárdio, hemopericárdio, pericardite fibrinosa e pleuropneumonia. Microscopicamente, pericardite, epicardite e miocardite subepicárdica, seguidas de pleuropneumonia multifocal moderada a grave, fibrino-supurativa e necrosante foram as lesões mais frequentes observadas. A PCR em tempo real amplificou o gene infB de H. parasuis em todas as amostras analisadas, confirmando a presença deste agente etiológico.(AU)

Glässer's disease in swine from Northeastern Brazil / Doença de Glässer em suínos no Nordeste do Brasil

Glässer's disease is an important infectious disorder of swine caused by Haemophilus parasuis. Although well recognized in most regions of Brazil, outbreaks of Glässer's disease have not been described in Northeastern region. For this reason, three municipalities of the Pernambuco State were visited in order to identify histories of high mortality in growing and finishing pigs. The main clinical signs consisted of dry cough, apathy, fever, anorexia, paresis, muscle tremors, motor incoordination, seizures leading to high mortality rates. Nine pigs were necropsied, and fragments of the nervous system, organs of the abdominal and thoracic cavities were collected for histological analysis. In addition, lung and brain fragments were used for DNA extraction and molecular testing by real-time Polymerase Chain Reaction (PCR). Grossly, the main lesions consisted of petechial hemorrhages or ecchymosis on the skin of the face, abdomen, forelimbs, and hind limbs. The main severe lesions consisted of hydropericardium, hemopericardium, fibrinous pericarditis and pleuropneumonia. Microscopically, pericarditis, epicarditis and subepicardial myocarditis, followed by a moderate to severe multifocal pleuropneumonia, fibrinosuppurative and necrotizing were the most frequent lesions observed. Real-time PCR amplified H. parasuis infB gene in all samples analyzed, confirming the presence of this etiologic agent.(AU)

A doença de Glässer é uma importante enfermidade infecciosa de suínos causada pela bactéria Haemophilus parasuis. Embora bem reconhecida na maioria das regiões do Brasil, surtos de doença de Glässer não têm sido descritos na região Nordeste. Por este motivo, três regiões do Estado de Pernambuco foram visitadas com o objetivo de se identificar históricos de alta mortalidade em leitões e suínos em fase de terminação. Nove suínos foram necropsiados e fragmentos do sistema nervoso, órgãos das cavidades abdominal e torácica foram coletados para análise histopatológica. Além disso, fragmentos de pulmão e cérebro foram utilizados para extração de DNA e realização de teste molecular por meio da Reação em Cadeia da Polimerase (PCR) em tempo real. Os principais sinais clínicos consistiram em tosse seca, apatia, febre, anorexia, paresia, tremores musculares, incoordenação motora e convulsões levando a altas taxas de mortalidade. As lesões macroscópicas mais severas consistiam em petéquias e equimoses na pele da face, abdome, membros anteriores e posteriores, além de hidropericárdio, hemopericárdio, pericardite fibrinosa e pleuropneumonia. Microscopicamente, pericardite, epicardite e miocardite subepicárdica, seguidas de pleuropneumonia multifocal moderada a grave, fibrino-supurativa e necrosante foram as lesões mais frequentes observadas. A PCR em tempo real amplificou o gene infB de H. parasuis em todas as amostras analisadas, confirmando a presença deste agente etiológico.(AU)

Avaliação do desempenho da PCR em tempo real para o diagnóstico de meningite por Enterovirus / Evaluation of a real-time PCR assay performance for the diagnosis of enteroviral meningitis

O gênero Enterovirus (EV) é o agente etiológico mais frequente e responsável pela ocorrência de meningite viral no mundo. O objetivo deste trabalho foi de avaliar resultados da implantação do ensaio de PCR em tempo real (RT-qPCR) para a detecção de EV. Foram selecionadas 616 amostras de líquido cefalorraquidiano (LCR) de pacientes com meningite, recebidas para realizar diagnóstico laboratorial no período de 1998-2013. Os RNAs foram extraídos diretamente do LCR pelo método QIAamp®, e o ensaio TaqMan® foi aplicado. A avaliação foi feita comparando-se resultados de RT-qPCR com os obtidos pelo método de isolamento em cultura de células. Das 616 amostras analisadas, 94 (15,2 %) foram positivas para EV no ensaio de RT-qPCR; e na cultura celular EV foi isolado de 58 (9,4 %) amostras. Valores de sensibilidade, especificidade, valor preditivo positivo e valor preditivo negativo foram de 89,70 %, 92,40 %, 55,30 % e 98,90 %, respectivamente. O RT-qPCR foi ligeiramente superior à cultura viral para a detecção de EV no LCR. O RT-qPCR TaqMan® é um ensaio rápido e sensível, facilmente exeqüível e com potencial para melhorar o diagnóstico da meningite viral na rotina do laboratório de saúde pública no Estado de São Paulo.

Enterovirus (EV) genus is the most frequent etiological agent causing viral meningitis worldwide. This study aimed at evaluating the performance of real-time reverse transcription-PCR (RT-qPCR) assay for detecting EV. A total of 616 cerebrospinal fluid (CSF) samples from patients with meningitis were selected, among those received at EV diagnosis laboratory from 1998 to 2013. RNAs were directly extracted from CSF by using QIAamp® Viral RNA Mini Kit, and TaqMan® RT-qPCR assay was applied. Evaluation was made by comparing the RT-qPCR results with those found in the cell culture for viral isolation method. Of 616 analyzed samples, 94 (15.20%) were positive for EV RNA on the RT-qPCR assay; and in the cell culture EV was isolated from 58 (9.40 %) samples. The assay showed sensitivity, specificity, positive predictive value and negative predictive value of 89.70 %, 92.40 %, 55.30 % and 98.90 %, respectively. In the present study, the RT-qPCR assay was slightly superior when compared to the viral culture technique for detecting EV from CSF samples. The TaqMan® RT-qPCR assay shows to be a fast and sensitive assay, easy to perform, and it shows a potential to improve the viral meningitis diagnosis in the public health laboratory in São Paulo State.

Avaliação do desempenho da PCR em tempo real para o diagnóstico de meningite por Enterovirus / Evaluation of a real-time PCR assay performance for the diagnosis of enteroviral meningitis

O gênero Enterovirus (EV) é o agente etiológico mais frequente e responsável pela ocorrência de meningite viral no mundo. O objetivo deste trabalho foi de avaliar resultados da implantação do ensaio de PCR em tempo real (RT-qPCR) para a detecção de EV. Foram selecionadas 616 amostras de líquido cefalorraquidiano (LCR) de pacientes com meningite, recebidas para realizar diagnóstico laboratorial no período de 1998-2013. Os RNAs foram extraídos diretamente do LCR pelo método QIAamp®, e o ensaio TaqMan® foi aplicado. A avaliação foi feita comparando-se resultados de RT-qPCR com os obtidos pelo método de isolamento em cultura de células. Das 616 amostras analisadas, 94 (15,2 %) foram positivas para EV no ensaio de RT-qPCR; e na cultura celular EV foi isolado de 58 (9,4 %) amostras. Valores de sensibilidade, especificidade, valor preditivo positivo e valor preditivo negativo foram de 89,70 %, 92,40 %, 55,30 % e 98,90 %, respectivamente. O RT-qPCR foi ligeiramente superior à cultura viral para a detecção de EV no LCR. O RT-qPCR TaqMan® é um ensaio rápido e sensível, facilmente exeqüível e com potencial para melhorar o diagnóstico da meningite viral na rotina do laboratório de saúde pública no Estado de São Paulo.(AU)

Enterovirus (EV) genus is the most frequent etiological agent causing viral meningitis worldwide. This study aimed at evaluating the performance of real-time reverse transcription-PCR (RT-qPCR) assay for detecting EV. A total of 616 cerebrospinal fluid (CSF) samples from patients with meningitis were selected, among those received at EV diagnosis laboratory from 1998 to 2013. RNAs were directly extracted from CSF by using QIAamp® Viral RNA Mini Kit, and TaqMan® RT-qPCR assay was applied. Evaluation was made by comparing the RT-qPCR results with those found in the cell culture for viral isolation method. Of 616 analyzed samples, 94 (15.20%) were positive for EV RNA on the RT-qPCR assay; and in the cell culture EV was isolated from 58 (9.40 %) samples. The assay showed sensitivity, specificity, positive predictive value and negative predictive value of 89.70 %, 92.40 %, 55.30 % and 98.90 %, respectively. In the present study, the RT-qPCR assay was slightly superior when compared to the viral culture technique for detecting EV from CSF samples. The TaqMan® RT-qPCR assay shows to be a fast and sensitive assay, easy to perform, and it shows a potential to improve the viral meningitis diagnosis in the public health laboratory in São Paulo State.(AU)

Malformações do sistema nervoso central de caprinos e ovinos e eimeriose cerebral e sistêmica em caprinos

Descrevem-se nesta tese três artigos científicos que abordam doenças do sistema nervoso central em caprinos e ovinos no Nordeste do Brasil. O primeiro capítulo reúne e descreve os casos de malformações do SNC em caprinos e ovinos durante o período de 2000 a 2019 de diagnóstico no Laboratório de Patologia Animal da Universidade Federal de Campina Grande. Durante o período de estudo foram recebidas 1012 caprinos e 834 ovinos para necropsia. Das quais, oito foram diagnosticados como malformações do SNC, três casos de lisencefalia com hipoplasia cerebela em caprinos, dois casos de anencefalia em caprinos, um caso de acefalia em ovino, um caso de microcefalia em ovino e um caso de diplomielia com diastematemilia em caprino. Para a maioria dos animais, a doença teve um curso clínico agudo e muito letal. O segundo capítulo descreve dois casos de lisencefalia-paquigiria e hipoplasia cerebelar em caprinos de um mesmo rebanho, filhos do mesmo reprodutor e matrizes diferentes. Os animais eram jovens e foram alimentado de forma artificial. No exame físico apresentava incoordenação e incapacidade de ficar em pé, decúbito esternal permanente, ataxia, ausência do reflexo de ameaça, tremores de intenção e nistagmo. Com evolução dos sinais clínicos os animais vieram óbito e foram necropsiados. Na necropsia, o cérebro de ambos os animais não apresentava giros nem sulcos e o cerebelo estava reduzido de tamanho. Histologicamente, em todo o córtex cerebral, a substância cinzenta estava mais espessa e a substância branca mais fina que o normal. Os neurônios estavam distribuídos de forma aleatória na substância cinzenta. No cerebelo, as camadas estavam desorganizadas, com localização heterotópica das células. Todas as lesões eram comum aos dois casos, variando apenas na intensidade. O terceiro capitulo descrever dois casos de eimeriose sistêmica em caprinos, um deles com envolvimento cerebral. Os dois caprinos eram fêmeas, com um mês de idade da raça Saanen. Os animais apresentavam quadros de diarreia evoluindo para sinais neurológicos. No exame físico de um dos animais observou-se letargia, relutância ao movimento, bruxismo, ataxia, andar em círculo, diminuição da acuidade visual, anorexia, distensão abdominal e dificuldades respiratórias. O exame parasitológico evidenciou acentuados oocistos de emeiridios. Com a evolução clinica o animal veio a óbito e foi necropsiado. Macroscopicamente as lesões eram restritas ao intestino delgado, que apresentava bastante muco e nódulos esbranquiçados multifocais e levemente elevados na mucosa. Microscopicamente observou-se leptomeningite mononuclear associada a oocistos de Eimeria intralesionais, enterite crônica acentuada e presença de acentuadas estruturas oocisticas na lamina própria, parênquima hepático e septos alveolares. As doenças do SNC são raras e esporádicas no entanto, médicos veterinários e produtores rurais devem conhecer as características clinicopatológicas dessas doença para melhor definir os controles e profilaxias.

This thesis describes three scientific articles that address central nervous system diseases in goats and sheep in Northeastern Brazil. The first chapter brings together and describes the cases of CNS malformations in goats and sheep during the period 2000 to 2019 of diagnosis at Laboratorio de Patologia Animal da Universidade Federal de Campina Grande. During the study period, 1012 goats and 834 sheep were received for necropsy, of which, eight were diagnosed as CNS malformations, three cases of lissencephaly with cerebellar hypoplasia in goats, two cases of anencephaly in goats, one case of acephaly in sheep, one case of microcephaly in sheep and one case of diplomyelia with diastematemyly in goats . For most animals, the disease had an acute and very lethal clinical course. The second chapter describes two cases of lissencephaly-pachygyria and cerebellar hypoplasia in goats from the same herd, offspring of the same sire and different breeders. The animals were young and fed from a bottle. On physical examination, they presented incoordination and inability to stand, permanent sternal decubitus, ataxia, absence of threat reflex, intention tremors and nystagmus. With evolution of clinical signs, the animals died and were necropsied. At necropsy, the brain of both animals did not show gyrus or sulci and the cerebellum was reduced in size. Histologically, throughout the cerebral cortex, the gray matter was thicker and the white matter thinner than normal. Neurons were randomly distributed in the gray matter. In the cerebellum, the layers were disorganized, with heterotopic location of the cells. All injuries were common to both cases, varying only in intensity. The third chapter describes two cases of systemic eimeriosis in goats, one of them with cerebral involvement. The two goats were female, one month old of the Saanen breed. The animals had diarrhea progressing to neurological signs. On physical examination of one of the animals, lethargy, reluctance to movement, bruxism, ataxia, walking in a circle, decreased visual acuity, anorexia, abdominal distension and respiratory difficulties were observed. The parasitological examination showed marked emeirid oocysts. With the clinical evolution, the animal died and was necropsied. Macroscopically, the lesions were restricted to the small intestine, which had a lot of mucus and whitish multifocal nodules and slightly elevated in the mucosa. Microscopically, mononuclear leptomeningitis associated with intralesional Eimeria oocysts, severe chronic enteritis and the presence of marked oocystic structures in the lamina propria, liver parenchyma and alveolar septa were observed. CNS diseases are rare and sporadic, however, veterinarians and rural producers must know the clinicopathological characteristics of these diseases to better define controls and prophylaxis.

DOENÇAS DO SISTEMA NERVOSO CENTRAL DE SUÍNOS

Doenças do sistema nervoso são frequentemente observadas na clínica de suínos e podem ser de origem infecciosa, não infecciosa ou multifatorial. As doenças infecciosas são a principal causa de morte em suínos e envolvem bactérias como Escherichia coli, Streptococcus suis (S. suis), Glaesserella (Haemophilus) parasuis e Salmonella choleraesuis. S. suis é um agente zoonótico, responsável por inflamação das meninges, válvulas cardíacas, pulmões e articulações de suínos e humanos. Nas lesões de suínos, o sorotipo 2 é o mais frequentemente isolado. Agentes virais como circovírus suíno apresentam elevado impacto na suinocultura e ocorre de forma endêmica nos rebanhos brasileiros. Foram realizados três estudos. No primeiro foi determinada, através de um estudo retrospectivo, a frequência, distribuição sazonal e anual das doenças que acometem o sistema nervoso central (SNC) de suínos no Sul do Brasil. Foram analisados 231 casos de suínos com lesão microscópica no SNC, distribuídos nas fases de maternidade, creche, crescimento, terminação e adultos. As doenças de origem infecciosa foram responsáveis por 87,01% das lesões no sistema nervoso de suínos. Leitões na fase de creche foram a categoria mais afetada (58,01%). A meningite bacteriana teve o maior número de observações no estudo, com tendência de ocorrência nos meses de outono/inverno e com caráter endêmico. Não foi observada associação sazonal ao número de diagnósticos nos casos de circovírus suíno, intoxicação por sal e abscessos encefálicos. Os casos de encefalomielite não supurativa e intoxicação por selênio tiveram maior número de observações no inverno e verão, respectivamente. No segundo estudo foram investigados agentes virais envolvidos em um surto de doença neurológica, na qual observou-se incoordenação motora, paresia e paralisia dos membros pélvicos. Nesse surto, ocorrido em uma granja no Sul do Brasil, 10 leitões com idade de 40 a 65 dias, foram submetidos ao exame post mortem. As lesões macroscópicas eram restritas a medula espinhal e caracterizadas por aumento de volume de raízes nervosas e gânglios, principalmente em região cervical e sacral. Microscopicamente as lesões eram caracterizadas por encefalomielite e ganglioneurite não supurativas. Amostras refrigeradas de SNC, líquido cefalorraquidiano e fezes foram analisadas molecularmente. A reação de polimerase em cadeia (PCR) de 10 amostras de SNC foram positivas para Teschovirus A, oito foram positivas para Sapelovirus A e sete para Enterovirus G. Mammastrovirus foi identificado em pool de fezes de leitões sadios. O terceiro manuscrito teve como objetivo descrever os aspectos clínicos, patológicos e moleculares de um surto de infecção por S. suis com elevada mortalidade. Os sinais clínicos iniciavam em torno de 10 dias pós-desmame e eram caracterizados por apatia, aumento de volume articular e relutância ao movimento. Em 24 horas, os sinais clínicos evoluíam para decúbito lateral, opistótono, nistagmo e movimentos de pedalagem. Macroscopicamente observava-se hiperemia dos vasos da leptomeninge e deposição de fibrina sobre a leptomeninge. Havia ainda espessamento de plexo coroide associado a dilatação de ventrículos laterais. Microscopicamente foi observada inflamação fibrinossupurativa em leptomeninges do cérebro e medula espinhal. Esse mesmo infiltrado era observado no plexo coroide, epêndima, raízes nervosas e no canal central da medula espinhal. A PCR identificou S. suis sorotipo 9 neste surto.

Nervous system diseases are frequently seen in the swine clinic and can be of infectious, non-infectious or multifactorial origin. Infectious diseases are the leading cause of death in pigs and involve bacteria such as Escherichia coli, Streptococcus suis (S. suis), Glaesserella (Haemophilus) parasuis and Salmonella choleraesuis. S. suis is a zoonotic agent, responsible for inflammation of the meninges, heart valves, lungs and joints of pigs and humans. In pig lesions, serotype 2 is the most frequently isolated. Viral agents such as porcine circovirus have a high impact on pig production and occur endemically in Brazilian herds. Three studies were carried out. In the first, it was determined, through a retrospective study, the frequency, seasonal and annual distribution of diseases that affect the central nervous system (CNS) of swine in southern Brazil. Two hundred thirty-one cases of pigs with lesions in the CNS were analyzed, distributed in the phases of suckling piglets, nursery, growing, finishing, and adults Infectious diseases were responsible for 87.01% of swine nervous system lesions. Piglets in the nursery phase were the most affected category (58.01%). Bacterial meningitis had the highest number of observations in the study, with a tendency to occur in the autumn/winter months and endemic character. There was no seasonal association with the number of diagnoses in cases of porcine circovirus, salt poisoning and brain abscesses. The cases of non-suppurative encephalomyelitis and selenium intoxication had the highest number of observations in winter and summer, respectively. In the second study, viral agents involved in an outbreak of neurological disease were investigated, which motor incoordination, paresis and paralysis of the posterior limbs were observed. In this outbreak, which occurred on a farm in southern Brazil, 10 piglets aged 40 to 65 days were submitted to post-mortem examination. Macroscopic lesions were restricted to the spinal cord and characterized by an increase in the volume of nerve roots and ganglia, mainly in the cervical and sacral regions. Microscopically, the lesions were characterized by encephalomyelitis and non-suppurative ganglioneuritis. Refrigerated samples of CNS, cerebrospinal fluid and feces were analyzed molecularly. The plymerase chain reaction (PCR) of 10 CNS samples were positive for Teschovirus A, eight were positive for Sapelovirus A and seven for Enterovirus G. Mammastrovirus was identified in a fecal pool of healthy piglets. The third manuscript aimed to describe the clinical, pathological and molecular aspects of an outbreak of S. suis infection with high mortality. The clinical signs started about 10 days after weaning and was characterized by acute nervous and locomotor disorders. Macroscopically, there was an increase in joint volume, hyperemia of the vessels of the leptomeninges and deposition of fibrin. There was also choroidal plexus thickening associated with dilation of lateral ventricles. Microscopically, fibrinosuppurative inflammation was observed in leptomeninges of brain and spinal cord. This same infiltrate was observed in choroid plexus, ependyma, nerve roots and in central canal of the spinal cord. PCR identified S. suis serotype 9 in this outbreak.

Infecções piogênicas do sistema nervoso central de ruminantes

A sanidade dos rebanhos bovinos, caprinos e ovinos depende do conhecimento acerca das doenças que acometem essas espécies. Dentro desse grupo, destacam-se as doenças piogênicas do sistema nervoso central (4,09%) diagnosticadas no sertão da paraíba. Esta Dissertação, foi elaborada em dois capítulos, composta por dois artigos originais. O primeiro será submetido à Pesquisa Veterinária Brasileira e relata 23 casos de infecções por Listeria sp. de 2003 a 2019, 11 em ovinos, 10 em caprinos e 2 em bovinos, descrevendo seus aspectos epidemiológicos, clínicos e patológicos. A doença ocorreu principalmente em animais sem raça definida com idades variando de 3 a 96 meses. As alterações clínicas incluíam sinais neurológicos que evoluíram para morte de forma aguda. Macroscopicamente, haviam lesões em 11 animais (6 ovinos e 5 caprinos) que consistiam em ulcerações na cavidade oral, aumento de volume unilateral do tronco encefálico, herniação do verme cerebelar, áreas amareladas circulares em medula cervical, bulbo e óbex. Histologicamente, as lesões caracterizavam-se por meningoencefalite microabscedativa variando de discreta a acentuada em bulbo, mesencéfalo e medula cervical. O diagnóstico de listeriose foi realizado através dos achados patológicos associadas aos dados epidemiológicos e sinais clínicos. O segundo artigo, será submetido à revista Small Ruminant Research, descreve um surto de meninigite por Escherichia coli em trinta e nove ovinos da raça Dorper, entre 25 e 30 dias de vida, de ambos os sexos. As manifestações clínicas eram inicialmente digestivas e posteriormente, neurológicas, com evolução clínica de até quatro dias até à morte. Na necropsia, observou-se líquido cefalorraquidiano turvo, exsudato purulento na superfície das leptomeninges e ingurgitamento dos vasos sanguíneos. Microscopicamente, as lesões consistiam em meningite fibrinossupurativa difusa acentuada com área de hemorragia em encéfalo, medula espinhal e base de nervos espinhais. Na cultura microbiológica, cresceram bastonetes Gram negativos com fenotipagem compatível com E. coli. O diagnóstico de meningite por E. coli foi estabelecido com base nos achados epidemiológicos, clínicos, anatomopatológicos e microbiológicos. Com a realização desses trabalhos foi possível constatar que as doenças piogênicas do sistema nervoso central de ruminantes podem ocorrer esporadicamente ou em forma de surtos diagnosticados na rotina do Laboratório de Patologia Animal do Hospital Veterinário Universitário Prof. Dr. Ivon Macêdo Tabosa da UFCG. Essas enfermidades constituem importantes causas de morte em ruminantes pela alta letalidade.

The health of cattle, goats and sheep depends on knowledge about the diseases that affect these species. Within this group, pyogenic diseases of the central nervous system (4.09%) diagnosed in the hinterland of Paraiba stand out. This Dissertation was developed in two chapters, composed of two original articles. The first will be submitted to the Brazilian Veterinary Research and reports 23 cases of infections by Listeria sp. from 2003 to 2019, 11 in sheep, 10 in goats and 2 in cattle, describing their epidemiological, clinical and pathological aspects. The disease occurred mainly in mixed breed animals with ages varying from 3 to 96 months. Clinical changes included neurological signs that evolved to death acutely. Macroscopically, there were lesions in 11 animals (6 sheep and 5 goats) that consisted of ulcerations in the oral cavity, unilateral enlargement of the brain stem, herniation of the cerebellar worm, yellowish circular areas in the cervical cord, bulb and obex. Histologically, the lesions were characterized by microabscessive meningoencephalitis ranging from mild to accentuated in bulb, midbrain and cervical spinal cord. The diagnosis of listeriosis was made through pathological findings associated with epidemiological data and clinical signs. The second article, to be submitted to the Small Ruminant Research magazine, describes an outbreak of Escherichia coli meninigitis in thirty-nine Dorper sheep, between 25 and 30 days old, of both sexes. The clinical manifestations were initially digestive and later, neurological, with clinical evolution of up to four days until death. At necropsy, cloudy cerebrospinal fluid, purulent exudate on the surface of leptomeninges and engorgement of blood vessels were observed. Microscopically, the lesions consisted of marked diffuse fibrin-suppurative meningitis with an area of hemorrhage in the brain, spinal cord and base of spinal nerves. In the microbiological culture, Gram negative rods were grown with phenotyping compatible with E. coli. The diagnosis of E. coli meningitis was established based on epidemiological, clinical, anatomopathological and microbiological findings. With the accomplishment of these works it was possible to verify that the pyogenic diseases of the central nervous system of ruminants can occur sporadically or in the form of outbreaks diagnosed in the routine of the Animal Pathology Laboratory of Hospital Veterinário Universitário Prof. Dr. Ivon Macêdo Tabosa from UFCG. These diseases are important causes of death in ruminants due to their high lethality.

Suppurative intracranial processes in 15 domestic ruminants / Processos supurativos intracranianos em 15 ruminantes domésticos

In addition to listeriosis which is relatively common in ruminants, there are three other uncommon suppurative intracranial processes (SIP) identifiable in adult ungulates as brain abscess, basilar empyema and suppurative meningitis. The present paper reports the epidemiological, clinical, laboratorial, pathological and microbiological findings of 15 domestic ruminants with SIP. A total of 15 animals were selected (eight sheep, four cattle and three goats); with the definitive diagnoses of basilar empyema (n=3), brain abscess (n=1), listeriosis (n=5) and suppurative meningitis (n=6). Hematology revealed leukocytosis with inversion of the lymphocyte/ neutrophil ratio in 4 cases. In the majority of animals, cerebrospinal fluid (CSF) presented light yellow coloration and cloudy aspect due to neutrophilic pleocytosis (15 - 997 leukocytes/µL). Microbiological culture of CSF or central nervous system (CNS) fragments resulted on isolation of Trueperella (Arcanobacterium) pyogenes,Listeria monocytogenes,Escherichia coli and Stenotrophomonas sp. In a goat with thalamic abscess, microbiological assay was not performed, but Gram positive bacilli type bacteria were observed in histology. The diagnosis of these outbreaks was based on the association of epidemiological, clinical, pathological and bacteriological findings; reiterating that the infectious component remains an important cause of CNS disease in domestic ruminants and also shows the need for dissemination of information about the most effective preventive measures for the ranchers.(AU)

Além da listeriose, que é relativamente comum em ruminantes, existem outros três processos supurativos intracranianos (PSI) identificáveis em ungulados adultos, que não são comuns, como: abscesso cerebral, empiema basilar e meningite supurativa. O presente trabalho tem como objetivo relatar os achados epidemiológicos, clínicos, laboratoriais, patológicos e microbiológicos de 15 ruminantes domésticos com PSI. O total de 15 animais foi selecionado (oito ovinos, quatro bovinos e três caprinos), com o diagnóstico definitivo de empiema basilar (n=3), abscesso cerebral (n=1), listeriose (n=5) e meningite supurativa (n=6). A hematologia revelou leucocitose com inversão da relação linfócito/ neutrófilo em quatro animais. Na maioria dos animais, a análise do líquido cefalorraquidiano (LCR) revelou coloração amarelado clara e aspecto turvo devido à pleocitose neutrofílica (15 - 997 leucócitos/µL). A cultura microbiológica de LCR ou de fragmentos do sistema nervoso central (SNC), permitiu o isolamento de Trueperella (Arcanobacterium) pyogenes,Listeria monocytogenes,Escherichia coli e Stenotrophomonas sp. No caprino com abscesso de tálamo, a cultura microbiológica não foi realizada, mas bactérias Gram positivas tipo bacilos foram observadas na histologia. O diagnóstico desses surtos foi baseado na associação dos achados epidemiológicos, clínicos, patológicos e bacteriológicos; reiterando que o componente infeccioso continua sendo uma causa importante de doença do SNC em ruminantes domésticos e também mostra a necessidade de disseminação da informação sobre as medidas preventivas mais eficazes para os criadores.(AU)

Expressão de microRNAs no hipocampo de ratos submetidos a meningite pneumocócica e tratados com vitamina B12

A meningite se caracteriza pela inflamação da aracnóide, pia-máter e líquor; causando danos às estruturas corticais e subcorticais. As meningites bacterianas estão intimamente relacionadas ao nível de desenvolvimento socioeconômico do país e são consideradas endêmicas no Brasil. Apesar dos esforços para o desenvolvimento de medicamentos e vacinas, a doença ainda possui altos índices de morbidade. Ela ocorre quando bactérias atravessam barreiras de proteção do corpo e alcançam o sistema nervoso central, desencadeando uma resposta imunológica. Sabe-se que durante o curso da doença os níveis de homocisteína do líquor aumentam, promovendo desmielinização e danos neuronais, e que a vitamina B12 é um tratamento utilizado para diminuir danos. Os microRNAs (miRNAs) são instrumentos de resposta fisiológica, tendo sua expressão modificada em diferentes tecidos, em decorrência de diferentes estímulos fisiológicos e patológicos. Estão associados ao controle da expressão de diferentes mediadores inflamatórios e sua ausência é capaz de causar danos severos a resposta imune. Considerando a importância dos miRNAs para regulação de processos imunes o presente estudo visou elucidar os padrões de expressão dos miRNAs durante o processo inflamatório da meningite pneumocócica (MP), bem como observar esses padrões em resposta ao tratamento adjuvante da doença com vitamina B12. Observamos um total de 37 miRNAs diferencialmente expressos, a infecção regulou positivamente 22 deles, e outros 7 negativamente, o tratamento adjuvante com vitamina B12 em animais nãoinfectados aumentou a expressão de 2, e diminuiu a expressão de 1 miRNA; o tratamento adjuvante com vitamina B12 em animais infectados amentou a expressão de 2 e diminui a de 6 miRNAs. Vias de sinalização, intimamente relacionadas à meningite pneumocócica foram encontradas reguladas, tanto pela MP, quanto pelo tratamento adjuvante com vitamina B12 em animais infectados. O uso da vitamina B12 não regulou nenhuma via em animais não infectados. Pode-se concluir que o presente estudo corrobora com achados recorrentes durante as meningites bacterianas, e serviu de início para a investigação dos efeitos da terapia adjuvante com vitamina B12 durante a MP, entretanto são necessários estudos futuros sobre os miRNAs regulados durante o tratamento adjuvante e seus alvos experimentais.

Meningitis is characterized by an arachnoid, pia mater and cerebrospinal fluid inflammation; causing damage to the cortical and subcortical structures. Bacterial meningitis is closely related to the level of socioeconomic development of country and is considered endemic in Brazil. Despite efforts to develop drugs and vaccines, the disease still has high rates of morbidity and mortality. Occurring when bacteria cross body protection barriers and reach the central nervous system, triggering immune response. It is known that during disease course the the levels of homocysteine increase in cerebrospinal fluid, leading to demyelination and neuronal damage, and that vitamin B12 is a treatment used to reduce those damages. MicroRNAs (miRNAs) are instruments of physiological response, having their expression modified in different tissues, due to different physiological and pathological stimuli. They are associated with expression control of different inflammatory mediators and their absence is capable of causing severe damage to the immune response. Considering the importance of miRNAs in regulation of immune processes, the present study aimed to elucidate miRNA expression patterns during the inflammatory process resulting from pneumococcal meningitis (PM), and to observe these patterns in response to adjuvant treatment of vitamin B12 in infected rats. We observed a total of 37 differentially expressed miRNAs; the infection positively regulated 22 and negatively regulated 7 of them, while the adjuvant treatment with vitamin B12 in non-infected animals increased the expression of 2, and decreased the expression of 1 miRNA; the adjuvant treatment with vitamin B12 in infected animals upregulated 2 and downregulated 6 miRNAs. Signaling pathways, closely related to PM, were found to be regulated by both, PM and adjuvant treatment with vitamin B12 in infected animals. The adjuvant therapy with vitamin B12 did not regulate any pathways in non-infected rats. We can concluded that, the present study corroborates with recurrent findings during bacterial meningitis course, and served as a start for the investigation of vitamin B12 adjuvant therapy effects during PM. However, future studies about the adjuvant treatment regulated miRNAs, and their experimental targets are needed.

Meningoencefalite supurativa bacteriana multifocal em um equino: relato de caso / Suppurative bacterial multifocal meningoencephalitis in a horse: case report / Meningoencefalitis supurativa bacteriana multifocal en un equino: reporte de un caso

O presente trabalho tem como objetivo descrever um caso clínico de Meningoencefalite Supurativa Bacteriana multifocal em um equino que apresentava relutância em andar, pouco reflexo ocular do lado esquerdo e incoordenação motora, com diminuição proprioceptiva e paresia. O diagnóstico inicial dado pelo médico veterinário responsável foi de mieloencefalopatia protozoária equina (MEP), o qual foi descartado pelo exame histopatológico. Este animal foi tratado conforme indicação da literatura, com leve melhora e posterior óbito.

The objective of this study was to describe a clinical case of suppurative bacterial multifocal meningoencephalitis in an equine that was reluctant to walk, had little ocular reflex on the left side and motor incoordination, with proprioceptive decrease and paresis. The initial diagnosis given by the veterinarian responsible was equine protozoal myeloencephalopathy (EPM), which was discarded by histopathological examination. This animal was treated as indicated in the literature, in which slight improvement and subsequent death.

El presente trabajo tiene como objetivo describir un caso clínico de meningoencefalitis bacteriana multifocal en un equino que presentó reticencia a caminar, poco reflejo ocular en el lado izquierdo e incoordinación motora, con disminución de la propioceptivo Y loharía. La diagnosis inicial dada por el médico veterinario responsable era Mieloencefalopatia protozoo equino (MEP), que fue desechado por el examen histopatológico. Este animal fue tratado como una indicación de la literatura, con la mejora suave y la muerte subsecuente.

Meningoencefalite supurativa bacteriana multifocal em um equino: relato de caso / Suppurative bacterial multifocal meningoencephalitis in a horse: case report / Meningoencefalitis supurativa bacteriana multifocal en un equino: reporte de un caso

O presente trabalho tem como objetivo descrever um caso clínico de Meningoencefalite Supurativa Bacteriana multifocal em um equino que apresentava relutância em andar, pouco reflexo ocular do lado esquerdo e incoordenação motora, com diminuição proprioceptiva e paresia. O diagnóstico inicial dado pelo médico veterinário responsável foi de mieloencefalopatia protozoária equina (MEP), o qual foi descartado pelo exame histopatológico. Este animal foi tratado conforme indicação da literatura, com leve melhora e posterior óbito.(AU)

The objective of this study was to describe a clinical case of suppurative bacterial multifocal meningoencephalitis in an equine that was reluctant to walk, had little ocular reflex on the left side and motor incoordination, with proprioceptive decrease and paresis. The initial diagnosis given by the veterinarian responsible was equine protozoal myeloencephalopathy (EPM), which was discarded by histopathological examination. This animal was treated as indicated in the literature, in which slight improvement and subsequent death.(AU)

El presente trabajo tiene como objetivo describir un caso clínico de meningoencefalitis bacteriana multifocal en un equino que presentó reticencia a caminar, poco reflejo ocular en el lado izquierdo e incoordinación motora, con disminución de la propioceptivo Y loharía. La diagnosis inicial dada por el médico veterinario responsable era Mieloencefalopatia protozoo equino (MEP), que fue desechado por el examen histopatológico. Este animal fue tratado como una indicación de la literatura, con la mejora suave y la muerte subsecuente.(AU)

FREQUÊNCIA, ASPECTOS PARASITOLÓGICOS E MORFOLÓGICOS DA INFECÇÃO POR Angiostrongylus cantonensis (Chen, 1935) (NEMATODA, ANGIOSTRONGYLIDAE) EM ROEDORES SINANTRÓPICOS NO ESTADO DE PERNAMBUCO

Angiostrongylus cantonensis é um nematódeo de caráter zoonótico que tem roedores e moluscos terrestres como principais hospedeiros. Diversas espécies de mamíferos e aves são susceptíveis à infecção acidental, sendo a infecção por A. cantonensis a principal causa de meningite eosinofílica em humanos. A introdução e rápida disseminação de moluscos da espécie Achatina fulica tem elevado o risco da transmissão de A. cantonensis, pois o molusco é o seu principal hospedeiro intermediário inclusive no Brasil, onde há diversas áreas vulneráveis à introdução do parasito e são escassos os dados sobre sua epidemiologia. Em Pernambuco não há dados sobre a presença de roedores naturalmente infectados. O objetivo deste trabalho foi avaliar a frequência, distribuição, alterações estruturais, morfológicas, parasitológicas, ultraestruturais e a realização da caracterização molecular de A. cantonensis em roedores naturalmente infectados nas diferentes mesorregiões estado de Pernambuco. Para realização do estudo, foram capturados 94 roedores das espécies Rattus norvegicus (ratazana) e R. rattus (rato-preto), provenientes de 13 municípios distribuídos em quatro mesorregiões do estado de Pernambuco, com e sem registro de casos humanos de Meningite Eosinofílica. Foi procedida a captura, eutanásia, necropsia e análise dos órgãos torácicos dos roedores e coleta de helmintos encontrados no bloco cardiopulmonar, utilizando microscopia de luz e eletrônica, além de realização de Reação em Cadeia da Polimerase (PCR). Foi realizada a análise macroscópica e histopatológica de lesões pulmonares, posteriormente realizada a avaliação morfológica dos parasitos encontrados nas artérias pulmonares do roedor, para identificação dos parasitos; foi realizada a avaliação do exsudato pulmonar quanto à presença de ovos e larvas L1; para o diagnóstico molecular, foi utilizada a técnica de PCR; com auxílio da microscopia eletrônica de transmissão, foi procedida a avaliação ultraestrutural dos enterócitos do tubo digestivo de A. cantonensis. Foi observada a frequência de 29,78% dos roedores infectados, pertencentes à espécie R. norvegicus. No estudo histológico dos pulmões foi observada pneumonite subaguda a crônica, além de fibrose pulmonar e presença de ovos e larvas do parasito no tecido pulmonar. A PCR revelou fragmentos de 1134 pb compatíveis com o gênero Angiostrongylus e a microscopia eletrônica de transmissão revelou ultraestruturas dos enterócitos e do epitélio intestinal do parasito. Este é o primeiro relato de infecção natural de R. norvegicus por A. cantonensis em áreas urbanas, indicando o risco de infecção para a população humana nas áreas do estado de Pernambuco, nordeste do Brasil onde foi detectada a presença do parasito.

Angiostrongylus cantonensis is a zoonotic nematode that has terrestrial rodents and mollusks as the main hosts. Several species of mammals and birds are susceptible to accidental infection, and A. cantonensis infection is the main cause of eosinophilic meningitis in humans. The introduction and rapid dissemination of mollusks of the Achatina fulica species has increased the risk of transmission of A. cantonensis, since the mollusk is its main intermediate host, even in Brazil, where several areas are vulnerable to the introduction of the parasite and data on epidemiology. In Pernambuco there is no data on the presence of naturally infected rodents. The objective of this work was to evaluate the frequency, distribution, structural, morphological, parasitological, ultrastructural and molecular characterization of A. cantonensis in naturally infected rodents in the different mesoregions of the state of Pernambuco. For the study, 94 rodents of the Rattus norvegicus (norway rat) and R. rattus (black rat) species were collected from 13 municipalities distributed in four mesoregions of the State of Pernambuco, with and without human cases of Eosinophilic Meningitis. Euthanasia, necropsy and analysis of the thoracic organs of the rodents and collection of helminths found in the cardiopulmonary block, using light and electronic microscopy, and Polymerase Chain Reaction (PCR) were performed. A macroscopic and histopathological analysis of lung lesions was carried out, after which a morphological evaluation of the parasites found in the pulmonary arteries of the rodent was performed to identify the parasites. The evaluation of the pulmonary exudate was performed on the presence of eggs and L1 larvae; for the molecular diagnosis, the PCR technique was used and with the aid of transmission electron microscopy, the ultrastructural evaluation of the enterocytes of the digestive tract of A. cantonensis was carried out. The frequency of 29.78% of norway rats infected by A. cantonensis was observed. In the histological study of the lungs it was observed subacute to chronic pneumonitis, besides pulmonary fibrosis and presence of eggs and larvae of the parasite in the lung tissue. PCR revealed 1134 bp fragments compatible with the genus Angiostrongylus and transmission electron microscopy revealed ultrastructures of the enterocytes and intestinal epithelium of the parasite. This is the first report of natural infection of R. norvegicus by A. cantonensis in urban areas, indicating the risk of infection to the human population in the areas of the state of Pernambuco, northeastern Brazil, where the presence of the parasite was detected.

Avaliação de resultados discrepantes obtidos na execução de PCR em tempo real em amostras de pacientes com suspeita clínica de meningite bacteriana / Inconsistent results in real-time PCR in analyzing samples from patients with suspected bacterial meningitis

O princípio básico para obter resultado confiável é a compatibilidade entre as réplicas e sua reprodutibilidade. Na rotina diagnóstica por PCR em tempo real (PCR-TR), em que centenas de amostras são processadas, a obtenção de resultados com Cts tardios ou réplicas que diferem entre si por mais de três unidades, são inevitáveis. Das 3.000 amostras processadas em 2010, em duplicata, na rotina diagnóstica das meningites bacterianas por PCR-TR na pesquisa de N. meningitidis, S. pneumoniae e H. influenzae,157 (5,2 %), apresentaram inconsistência entre as réplicas (diferença entre Cts maior do que 3) e/ou altos valores de Cts; e os ensaios foram retestados. O presente trabalho investigou estes resultados obtidos, os benefícios destas repetições e as possíveis razões da ocorrência dos resultados discrepantes. Verificou-se que, apenas 18 (11 %) das amostras submetidas à repetição, apresentaram resultados positivos. Erros humanos inerentes à pipetagem, como o uso de pipetas não calibradas, a baixa concentração de DNA alvo nas amostras, a degradação da sonda ou mesmo a possível contaminação aleatória são fatores que contribuem para induzir resultados discrepantes. A realização do ensaio de PCR-TR com amostras em duplicata e a repetição de ensaios com resultados discordantes é um artifício eficiente para avaliar e definir estes resultados.(AU)

The basic principle for obtaining a reliable result is the consistency found among the replicas and its reproducibility. In a diagnostic routine by using real-time PCR (RT-PCR), when hundreds samples are processed, and results with late Cts or replicas that differ by more than three units are inevitable. Of 3,000 samples processed in 2010, in duplicate, in the diagnostic routine of bacterial meningitis by RT-PCR for detecting N. meningitidis, S. pneumoniae and H. influenzae, 157 (5.2 %) samples showed inconsistencyamong replicas (difference between Cts higher than three units) and/or high Cts values; and the samples were retested. This study assessed these results, the benefits of its repetitions and probable reasons for the occurrence of these discrepant results. Among the retested samples, 18 (11 %) only showed positive results. Human errors inherent to pipetting, use of non-calibrated pipettes, low concentration of target DNA in the analyzed samples, probe degradation or even random contamination are factors which contribute to induce the discrepant results. Performing RT-PCR assay with samples in duplicate and retesting thesamples showing discordant results constitute a device for efficiently evaluating and defining these results.(AU)