Resistance of bovine gastrointestinal nematodes to four classes of anthelmintics in the semiarid region of Paraíba state, Brazil / Resistência de nematódeos gastrintestinais de bovinos à quatro classes de anti-helmínticos no semiárido do Estado da Paraíba, Brasil

The effectiveness of four anthelmintic classes on cattle gastrointestinal nematodes in the semi-arid region of Paraiba State, Brazil, was evaluated. Twenty farms were used, testing 40 animals in each one, totaling 800 animals. Cattle were divided into four groups composed with ten animals: I, treated with albendazole sulfoxide 15%; II, treated with ivermectin 1%; III, treated with closantel 25%; IV, treated with levamisole hydrochloride 7.5%. All treatments were administered subcutaneously. For the Fecal Egg Count Reduction Test (FECRT), individual fecal samples were collected on days 0 and 14, and sent for analysis of egg count per gram of feces (EPG) and larval cultures. It was observed that multiresistance was present in 95% (19/20) of the farms. Resistance to ivermectin and albendazole was observed in 95% (19/20), to closantel in 75% (15/20) and to levamisole in 20% (4/20). The most used management system was semi-intensive (75%; 15/20) and the ivermectin was the most reported drug for controlling helminths (65%; 13/20). Haemonchus spp. was the most prevalent helminth genus. It was concluded that the anthelmintic resistance of bovine gastrointestinal nematodes is high in the semi-arid of Paraíba State, Brazil, with multiresistance observed mainly to ivermectin, albendazole and closantel.(AU)

Avaliou-se a eficácia de quatro classes de anti-helmínticos sobre nematódeos gastrintestinais de bovinos na região semiárida da Paraíba, Brasil. Foram utilizadas 20 fazendas, sendo testados 40 animais em cada uma, totalizando 800 animais. Os bovinos foram distribuídos em quatro grupos compostos por dez animais: I, tratado com sulfóxido de albendazol 15%; II, tratado com ivermectina 1%; III, tratado com closantel 25%; IV, tratado com cloridrato de levamisole 7,5%. Para o Teste de Redução da Contagem de Ovos Fecais (TRCOF), amostras fecais individuais foram coletadas nos dias 0 e 14 e enviadas para análises de contagem de ovos por grama de fezes (OPG) e coproculturas. Observou-se que a multirressistência estava presente em 95% (19/20) das fazendas. Foi observada resistência à ivermectina e ao albendazol, em 95% das fazendas (19/20); ao closantel, em 75% (15/20) e, ao levamisole, em 20% (4/20). O sistema de manejo mais utilizado foi o semi-intensivo (75%; 15/20) e a ivermectina foi o fármaco mais relatado para controle de verminose (65%; 13/20). O gênero de helminto mais prevalente foi Haemonchus spp. (76,7%). Conclui-se que é alta a resistência anti-helmíntica por nematódeos gastrintestinais de bovinos no Semiárido da Paraíba, Brasil, com multirressistência observada principalmente à ivermectina, ao albendazol e ao closantel.(AU)

Resistance of bovine gastrointestinal nematodes to four classes of anthelmintics in the semiarid region of Paraíba state, Brazil / Resistência de nematódeos gastrintestinais de bovinos à quatro classes de anti-helmínticos no semiárido do Estado da Paraíba, Brasil

Abstract The effectiveness of four anthelmintic classes on cattle gastrointestinal nematodes in the semi-arid region of Paraiba State, Brazil, was evaluated. Twenty farms were used, testing 40 animals in each one, totaling 800 animals. Cattle were divided into four groups composed with ten animals: I, treated with albendazole sulfoxide 15%; II, treated with ivermectin 1%; III, treated with closantel 25%; IV, treated with levamisole hydrochloride 7.5%. All treatments were administered subcutaneously. For the Fecal Egg Count Reduction Test (FECRT), individual fecal samples were collected on days 0 and 14, and sent for analysis of egg count per gram of feces (EPG) and larval cultures. It was observed that multiresistance was present in 95% (19/20) of the farms. Resistance to ivermectin and albendazole was observed in 95% (19/20), to closantel in 75% (15/20) and to levamisole in 20% (4/20). The most used management system was semi-intensive (75%; 15/20) and the ivermectin was the most reported drug for controlling helminths (65%; 13/20). Haemonchus spp. was the most prevalent helminth genus. It was concluded that the anthelmintic resistance of bovine gastrointestinal nematodes is high in the semi-arid of Paraíba State, Brazil, with multiresistance observed mainly to ivermectin, albendazole and closantel.

Resumo Avaliou-se a eficácia de quatro classes de anti-helmínticos sobre nematódeos gastrintestinais de bovinos na região semiárida da Paraíba, Brasil. Foram utilizadas 20 fazendas, sendo testados 40 animais em cada uma, totalizando 800 animais. Os bovinos foram distribuídos em quatro grupos compostos por dez animais: I, tratado com sulfóxido de albendazol 15%; II, tratado com ivermectina 1%; III, tratado com closantel 25%; IV, tratado com cloridrato de levamisole 7,5%. Para o Teste de Redução da Contagem de Ovos Fecais (TRCOF), amostras fecais individuais foram coletadas nos dias 0 e 14 e enviadas para análises de contagem de ovos por grama de fezes (OPG) e coproculturas. Observou-se que a multirressistência estava presente em 95% (19/20) das fazendas. Foi observada resistência à ivermectina e ao albendazol, em 95% das fazendas (19/20); ao closantel, em 75% (15/20) e, ao levamisole, em 20% (4/20). O sistema de manejo mais utilizado foi o semi-intensivo (75%; 15/20) e a ivermectina foi o fármaco mais relatado para controle de verminose (65%; 13/20). O gênero de helminto mais prevalente foi Haemonchus spp. (76,7%). Conclui-se que é alta a resistência anti-helmíntica por nematódeos gastrintestinais de bovinos no Semiárido da Paraíba, Brasil, com multirressistência observada principalmente à ivermectina, ao albendazol e ao closantel.

Formação de biofilmes e resistência a antimicrobianos de isolados de Salmonella spp / Biofilm formation and antimicrobial resistance of Salmonella spp. isolates

O presente estudo avaliou a presença de Salmonella spp. em 89 amostras de produtos cárneos comercializados na região sul do Rio Grande do Sul e, a partir dos isolados obtidos, foi verificada a capacidade de resistência a agentes antimicrobianos e de formação de biofilme em superfícies de poliestireno. Foi constatada a presença de Salmonella spp. em 19,1% das amostras avaliadas e, dos isolados obtidos, 40% mostraram resistência a pelo menos um dos agentes antimicrobianos testados e 33,3% manifestaram-se multirresistentes. Apenas o antimicrobiano amicacina (30 µg) foi eficaz na inibição de todos os isolados testados. Nenhum isolado mostrou-se capaz de formar biofilmes em superfícies de poliestireno.

The objective of the study was to evaluate the presence of Salmonella spp. in 89 samples of meat products marketed in southern Rio Grande do Sul and from isolates obtained was verified the ability of resistance to antimicrobials and biofilm formation on polystyrene surfaces. The presence of Salmonella spp. was found in 19.1% of the samples. Of the isolates obtained, 40% showed resistance to at least one of the tested antimicrobials and 33.3% expressed multiresistant. Only the antimicrobial amikacin (30 µg) was effective in inhibiting all isolates tested. No isolate was able to form biofilms on polystyrene surfaces.

Formação de biofilmes e resistência a antimicrobianos de isolados de Salmonella spp. / Biofilm formation and antimicrobial resistance of Salmonella spp. isolates

O presente estudo avaliou a presença de Salmonella spp. em 89 amostras de produtos cárneos comercializados na região sul do Rio Grande do Sul e, a partir dos isolados obtidos, foi verificada a capacidade de resistência a agentes antimicrobianos e de formação de biofilme em superfícies de poliestireno. Foi constatada a presença de Salmonella spp. em 19,1% das amostras avaliadas e, dos isolados obtidos, 40% mostraram resistência a pelo menos um dos agentes antimicrobianos testados e 33,3% manifestaram-se multirresistentes. Apenas o antimicrobiano amicacina (30 µg) foi eficaz na inibição de todos os isolados testados. Nenhum isolado mostrou-se capaz de formar biofilmes em superfícies de poliestireno.(AU)

The objective of the study was to evaluate the presence of Salmonella spp. in 89 samples of meat products marketed in southern Rio Grande do Sul and from isolates obtained was verified the ability of resistance to antimicrobials and biofilm formation on polystyrene surfaces. The presence of Salmonella spp. was found in 19.1% of the samples. Of the isolates obtained, 40% showed resistance to at least one of the tested antimicrobials and 33.3% expressed multiresistant. Only the antimicrobial amikacin (30 µg) was effective in inhibiting all isolates tested. No isolate was able to form biofilms on polystyrene surfaces.(AU)

Occurrence and antimicrobial resistance of bacteria in retail market spices / Ocorrência e resistência antimicrobiana de bactérias em especiarias comercializadas no varejo

This study aimed to evaluate the microbiological quality and the transmission of multidrug-resistant bacteria in different spices sold in town fairs (local food markets) in the municipalities of Recôncavo Baiano. Samples of black pepper, oregano, and cinnamon were collected over a period of six months and investigated for coliforms at 45 °C, Staphylococcus spp., Staphylococcus aureus, Bacillus spp., Bacillus cereus, Escherichia coli and Salmonella spp. The contamination in the black pepper samples (log 4.66 CFU g-1) was higher (P>0.05), than those of cinnamon (log 2.55 CFU g-1) and oregano (log 2.49 CFU g-1), particularly for B. cereus. E. coli (89%) and Salmonella spp. (67%) were isolated only from black pepper. B. cereus and S. aureus showed greater resistance to β-lactams (penicillin, oxacillin, and cefepime), with approximately 40% of the strains with a multiple antimicrobial resistance (MAR) index of 0.33 (i.e., resistant to three antimicrobials). E. coli was more resistant to ampicillin and Salmonella spp. to nalidixic acid, ampicillin, and ceftriaxone. Salmonella spp. had a MAR index ranging from 0.16 to 0.91 (i.e, resistant to up to 11 antimicrobials), and E. coli to up to 0.58 (i.e., resistant to 7 antimicrobials). In conclusion, the spices sold in the town fairs of Recôncavo Baiano are of low microbiological quality, with the presence of pathogens, of which some display high resistance to antimicrobials that are commonly used for treating foodborne illnesses.(AU)

Este estudo teve como objetivo avaliar a qualidade microbiológica e a veiculação de bactérias multirresistentes em diferentes especiarias comercializadas em feiras livres nos municípios do Recôncavo Baiano. Foram analisadas amostras de pimenta-do-reino, orégano e canela durante seis meses e pesquisados coliformes a 45 °C, Staphylococcus spp., Staphylococcus aureus, Bacillus spp., Bacillus cereus, Escherichia coli e Salmonella spp. A contaminação nas amostras de pimenta-do-reino (log 4,66 UFC g-1) foi maior (P>0,05), quando comparado com as amostras de canela (log 2,55 UFC g-1) e orégano (log 2,49 UFC g-1), principalmente para B. cereus. E. coli (89%) e Salmonella spp. (67%) foram isoladas apenas na pimenta-do-reino. B. cereus e S. aureus apresentaram maior resistência aos β-lactâmicos (penicilina, oxacilina e cefepime), com cerca de 40% das cepas com índice MAR de 0,33 (resistência a 3 antimicrobianos). E. coli foi mais resistente a ampicilina e Salmonella spp. ao ácido nalidíxico, ampicilina e ceftriaxona. Salmonella spp. apresentou índice MAR variando de 0,16 a 0,91 (até 11 antimicrobianos), e E. coli até 0,58 (7 antimicrobianos). Com isso, as especiarias comercializadas nas feiras livres do Recôncavo Baiano apresentam baixa qualidade microbiológica, com presença de patógenos e elevada resistência a antimicrobianos comumente usados no tratamento de enfermidades transmitidas por alimentos.(AU)

Antimicrobial resistance evaluation of bacteria isolated from infections in small animals in the Umuarama region, Paraná / Avaliação da resistência antimicrobiana de bactérias isoladas de infecções em pequenos animais na região de Umuarama, Paraná

Bacterial resistance is shown to be an inevitable side effect due to the excessive use of antibiotics, becoming a significant concern worldwide. Knowledge of regional bacterial resistance profiles enables the development of site-specific infection control practices, making conscious and moderate use of commercially available antibiotics. The aim of this study was the retrospective evaluation of the antimicrobial resistance profile of bacteria isolated from companion animal infections in the region of Umuarama/PR, from 2013 to 2017. This research was performed by analyzing the database belonging to the "Laboratório de Microbiologia Animal" at the "Universidade Estadual de Maringá" (UEM). Staphylococcus spp. represented 45.53% of the bacteria isolated from clinical infections in small animals in the period and place evaluated, followed by enterobacteria (34.04%), non-fermenting Gram-negative bacilli (NFGNB, 11.06%) and Streptococcus/Enterococcus (9.36%). A high number of antimicrobial resistance to antibiotics used in veterinary medicine was found. The lowest resistances associated with the best impact factor values were found for aminoglycosides, especially amikacin, chloramphenicol, and fluoroquinolones (norfloxacin and ciprofloxacin). Intermediate results were found for sulbactam-associated ampicillin, ceftriaxone, amoxicillin-clavulanic acid, and enrofloxacin. According to the number of resistant antimicrobial drugs, 64.26% (151/235) of the isolates were classified as multidrug-resistant, being 15.32% extensively resistant. Considering the resistance to antimicrobial classes, 68.94% (162/235) of the isolates were classified as multiresistant, being 19.15% extensively resistant. No bacterial strains were characterized as pan-resistant, but ten bacteria were resistant to all classes tested, with isolated susceptibility to certain drugs. Through the evaluation of resistance profiles found in the period and place studied and relevant literature, it is clear that there is a growing increase in the number of multiresistant bacteria among domestic animals which characterizes a serious risk to public health. The therapeutic arsenal is becoming increasingly diminished, and there is more difficulty in empirical drug selection, making antimicrobial susceptibility testing essential for more specific selection in antimicrobial therapy. Educational measures on the conscious use of antibiotics, infection control, and prevention of local specific zoonoses need to be instituted for the knowledge of health professionals and general access of the population.(AU)

A resistência bacteriana, mostra-se como um efeito colateral inevitável pelo excessivo uso de antibióticos, tornando-se alvo de grande preocupação mundial. O conhecimento dos perfis de resistência bacteriana regionais possibilita o desenvolvimento de práticas de controle de infecções específicas para cada localidade, fazendo uso consciente e moderado dos antibióticos disponíveis no mercado. O objetivo deste estudo foi a avaliação retrospectiva do perfil de resistência antimicrobiana de bactérias isoladas de infecções de animais de companhia na região de Umuarama/PR, no período de 2013 a 2017. Esta pesquisa foi realizada por meio da análise do banco de dados pertencente ao Laboratório de Microbiologia Animal da Universidade Estadual de Maringá (UEM). Os Staphylococcus spp. representaram 45,53% das bactérias isoladas de infecções clínicas em pequenos animais no período e local avaliado, seguido por enterobactérias (34,04%), bacilos Gram-negativos não fermentados (BGNNF, 11,06%) e Streptococcus/Enterococcus (9,36%). Um número elevado de resistência antimicrobiana frente aos antibióticos utilizados na medicina veterinária foi encontrado. As menores resistências associadas aos melhores valores do fator de impacto foram encontrados para aminoglicosídeos, em especial amicacina, cloranfenicol, fluoroquinolonas (norfloxacina e ciprofloxacina). Já resultados intermediários foram encontrados para ampicilina associada a sulbactam, ceftriaxona, amoxacilina com ácido clavulônico e enrofloxacina. Conforme o número de drogas antimicrobianas resistentes, foram classificados como multirresistentes 64,26% (151/235) dos isolados, sendo 15.32% extensivamente resistentes. Já considerando a resistência a classes de antimicrobianos, 68,94% (162/235) dos isolados foram classificados como multirresistentes, sendo 19.15% extensivamente resistentes. Nenhum isolado bacteriano foi caracterizado como pan-resistente, porém 10 bactérias foram resistentes a todas as classes testadas, com susceptibilidade isolada a determinadas drogas. Por meio da avaliação dos perfis de resistência encontrados no período e local estudados e de literatura pertinente, percebe-se que há um aumento crescente no número de bactérias multirresistentes entre os animais domésticos o que caracteriza um grave risco à saúde pública. O arsenal terapêutico está se tornando cada vez mais diminuto e há mais dificuldade na seleção empírica de drogas, tornando essencial a realização de testes de susceptibilidade antimicrobiana para uma seleção mais específica na terapêutica antimicrobiana. Medidas educativas sobre o uso consciente dos antibióticos, controle de infecções e prevenção de zoonoses específicas para as localidades precisam ser instituídas para conhecimento dos profissionais do setor da saúde e acesso geral da população.(AU)

Antimicrobial resistance evaluation of bacteria isolated from infections in small animals in the Umuarama region, Paraná / Avaliação da resistência antimicrobiana de bactérias isoladas de infecções em pequenos animais na região de Umuarama, Paraná

Bacterial resistance is shown to be an inevitable side effect due to the excessive use of antibiotics, becoming a significant concern worldwide. Knowledge of regional bacterial resistance profiles enables the development of site-specific infection control practices, making conscious and moderate use of commercially available antibiotics. The aim of this study was the retrospective evaluation of the antimicrobial resistance profile of bacteria isolated from companion animal infections in the region of Umuarama/PR, from 2013 to 2017. This research was performed by analyzing the database belonging to the "Laboratório de Microbiologia Animal" at the "Universidade Estadual de Maringá" (UEM). Staphylococcus spp. represented 45.53% of the bacteria isolated from clinical infections in small animals in the period and place evaluated, followed by enterobacteria (34.04%), non-fermenting Gram-negative bacilli (NFGNB, 11.06%) and Streptococcus/Enterococcus (9.36%). A high number of antimicrobial resistance to antibiotics used in veterinary medicine was found. The lowest resistances associated with the best impact factor values were found for aminoglycosides, especially amikacin, chloramphenicol, and fluoroquinolones (norfloxacin and ciprofloxacin). Intermediate results were found for sulbactam-associated ampicillin, ceftriaxone, amoxicillin-clavulanic acid, and enrofloxacin. According to the number of resistant antimicrobial drugs, 64.26% (151/235) of the isolates were classified as multidrug-resistant, being 15.32% extensively resistant. Considering the resistance to antimicrobial classes, 68.94% (162/235) of the isolates were classified as multiresistant, being 19.15% extensively resistant. No bacterial strains were characterized as pan-resistant, but ten bacteria were resistant to all classes tested, with isolated susceptibility to certain drugs. Through the evaluation of resistance profiles found in the period and place studied and relevant literature, it is clear that there is a growing increase in the number of multiresistant bacteria among domestic animals which characterizes a serious risk to public health. The therapeutic arsenal is becoming increasingly diminished, and there is more difficulty in empirical drug selection, making antimicrobial susceptibility testing essential for more specific selection in antimicrobial therapy. Educational measures on the conscious use of antibiotics, infection control, and prevention of local specific zoonoses need to be instituted for the knowledge of health professionals and general access of the population.(AU)

A resistência bacteriana, mostra-se como um efeito colateral inevitável pelo excessivo uso de antibióticos, tornando-se alvo de grande preocupação mundial. O conhecimento dos perfis de resistência bacteriana regionais possibilita o desenvolvimento de práticas de controle de infecções específicas para cada localidade, fazendo uso consciente e moderado dos antibióticos disponíveis no mercado. O objetivo deste estudo foi a avaliação retrospectiva do perfil de resistência antimicrobiana de bactérias isoladas de infecções de animais de companhia na região de Umuarama/PR, no período de 2013 a 2017. Esta pesquisa foi realizada por meio da análise do banco de dados pertencente ao Laboratório de Microbiologia Animal da Universidade Estadual de Maringá (UEM). Os Staphylococcus spp. representaram 45,53% das bactérias isoladas de infecções clínicas em pequenos animais no período e local avaliado, seguido por enterobactérias (34,04%), bacilos Gram-negativos não fermentados (BGNNF, 11,06%) e Streptococcus/Enterococcus (9,36%). Um número elevado de resistência antimicrobiana frente aos antibióticos utilizados na medicina veterinária foi encontrado. As menores resistências associadas aos melhores valores do fator de impacto foram encontrados para aminoglicosídeos, em especial amicacina, cloranfenicol, fluoroquinolonas (norfloxacina e ciprofloxacina). Já resultados intermediários foram encontrados para ampicilina associada a sulbactam, ceftriaxona, amoxacilina com ácido clavulônico e enrofloxacina. Conforme o número de drogas antimicrobianas resistentes, foram classificados como multirresistentes 64,26% (151/235) dos isolados, sendo 15.32% extensivamente resistentes. Já considerando a resistência a classes de antimicrobianos, 68,94% (162/235) dos isolados foram classificados como multirresistentes, sendo 19.15% extensivamente resistentes. Nenhum isolado bacteriano foi caracterizado como pan-resistente, porém 10 bactérias foram resistentes a todas as classes testadas, com susceptibilidade isolada a determinadas drogas. Por meio da avaliação dos perfis de resistência encontrados no período e local estudados e de literatura pertinente, percebe-se que há um aumento crescente no número de bactérias multirresistentes entre os animais domésticos o que caracteriza um grave risco à saúde pública. O arsenal terapêutico está se tornando cada vez mais diminuto e há mais dificuldade na seleção empírica de drogas, tornando essencial a realização de testes de susceptibilidade antimicrobiana para uma seleção mais específica na terapêutica antimicrobiana. Medidas educativas sobre o uso consciente dos antibióticos, controle de infecções e prevenção de zoonoses específicas para as localidades precisam ser instituídas para conhecimento dos profissionais do setor da saúde e acesso geral da população.(AU)

Diversity and antimicrobial resistance of Salmonella isolated from swines feces and carcasses / Diversidade e resistência aos antimicrobianos de Salmonella isoladas de fezes e carcaças de suínos

The aim of this study was to determine the most frequent Salmonella serovars in swine feces in the farm, piggery’s waiting slaughterhouse and after in their carcasses during slaughter, as well as their antimicrobial resistance profiles. Eighty six strains of Salmonella spp. were used, they were previously isolated from three different lots in different collections. The identification of serovars was done by serotyping and the resistance to antimicrobial agents was determined by disc diffusion. A variety of serovars was observed, and the 86 strains were serologically identified as: 28 (32.55%) S. Typhimurium, 20 (23.26%) S. Agona, 17 (19.77%) S. Infantis, 6 (6.98%) S. Panama, and 15 (17.44%) S. Minnesota. The diversity of serovars indicated that different factors influence the infection of finishing pigs and the persistence of microorganisms in the carcass after slaughter of these animals. More than 50% of the isolates were resistant to nine of the 11 tested antibiotics. The drugs that microorganisms had the highest percentages of sensitivity were sulphazotrim and norfloxacin, 22.1% and 14%, respectively. S. Typhimurium serovar was the most isolated, including in the carcasses, and also showed the largest difference in antimicrobial resistance when compared to other serovars. The profile of multidrug resistance observed in this study highlights to the necessity of a judicious observation of antimicrobial resistance in zoonotic foodborne bacteria.

Objetivou-se determinar os sorovares de Salmonella mais freqüentes em fezes de suínos na granja de terminação, pocilga de espera do frigorífico e em suas carcaças durante o abate, assim como, seus perfis de resistência aos antimicrobianos. Utilizou-se 86 cepas de Salmonella spp previamente isoladas de três lotes diferentes em coletas distintas. A identificação dos sorovares foi realizada por meio de sorotipificação e a resistência aos antimicrobianos foi determinada pela técnica de difusão de discos. Foi observada uma multiplicidade de sorovares, sendo as 86 cepas identificadas sorologicamente como: 28 (32,55%) S. Typhimurium, 20 (23,26%), S. Agona, 17 (19,77%) S. Infantis, 6 (6,98%) S. Panama, e 15 (17,44%) S. Minnesota. A diversidade de sorovares indicou que diferentes fatores influenciam na infecção de suínos em terminação e na persistência do microrganismo na carcaça destes animais após o abate. Mais de 50% dos isolados apresentaram resistência a nove dos 11 antibióticos testados. As drogas as quais os microrganismos apresentaram os maiores percentuais de sensibilidade foram o sulfazotrim e a norfloxacina, 22,1% e 14%, respectivamente. S. Typhimurium foi o sorovar mais isolado, inclusive nas carcaças, e também o que demonstrou maior diferença quanto à resistência aos antimicrobianos, quando comparado aos outros sorovares. O perfil de multirresistência observado neste estudo alerta para a necessidade de vigilância e monitoramento sistemático da resistência aos antimicrobianos em bactérias zoonóticas transmitidas pelos alimentos.

Diversity and antimicrobial resistance of Salmonella isolated from swines feces and carcasses / Diversidade e resistência aos antimicrobianos de Salmonella isoladas de fezes e carcaças de suínos

The aim of this study was to determine the most frequent Salmonella serovars in swine feces in the farm, piggerys waiting slaughterhouse and after in their carcasses during slaughter, as well as their antimicrobial resistance profiles. Eighty six strains of Salmonella spp. were used, they were previously isolated from three different lots in different collections. The identification of serovars was done by serotyping and the resistance to antimicrobial agents was determined by disc diffusion. A variety of serovars was observed, and the 86 strains were serologically identified as: 28 (32.55%) S. Typhimurium, 20 (23.26%) S. Agona, 17 (19.77%) S. Infantis, 6 (6.98%) S. Panama, and 15 (17.44%) S. Minnesota. The diversity of serovars indicated that different factors influence the infection of finishing pigs and the persistence of microorganisms in the carcass after slaughter of these animals. More than 50% of the isolates were resistant to nine of the 11 tested antibiotics. The drugs that microorganisms had the highest percentages of sensitivity were sulphazotrim and norfloxacin, 22.1% and 14%, respectively. S. Typhimurium serovar was the most isolated, including in the carcasses, and also showed the largest difference in antimicrobial resistance when compared to other serovars. The profile of multidrug resistance observed in this study highlights to the necessity of a judicious observation of antimicrobial resistance in zoonotic foodborne bacteria.(AU)

Objetivou-se determinar os sorovares de Salmonella mais freqüentes em fezes de suínos na granja de terminação, pocilga de espera do frigorífico e em suas carcaças durante o abate, assim como, seus perfis de resistência aos antimicrobianos. Utilizou-se 86 cepas de Salmonella spp previamente isoladas de três lotes diferentes em coletas distintas. A identificação dos sorovares foi realizada por meio de sorotipificação e a resistência aos antimicrobianos foi determinada pela técnica de difusão de discos. Foi observada uma multiplicidade de sorovares, sendo as 86 cepas identificadas sorologicamente como: 28 (32,55%) S. Typhimurium, 20 (23,26%), S. Agona, 17 (19,77%) S. Infantis, 6 (6,98%) S. Panama, e 15 (17,44%) S. Minnesota. A diversidade de sorovares indicou que diferentes fatores influenciam na infecção de suínos em terminação e na persistência do microrganismo na carcaça destes animais após o abate. Mais de 50% dos isolados apresentaram resistência a nove dos 11 antibióticos testados. As drogas as quais os microrganismos apresentaram os maiores percentuais de sensibilidade foram o sulfazotrim e a norfloxacina, 22,1% e 14%, respectivamente. S. Typhimurium foi o sorovar mais isolado, inclusive nas carcaças, e também o que demonstrou maior diferença quanto à resistência aos antimicrobianos, quando comparado aos outros sorovares. O perfil de multirresistência observado neste estudo alerta para a necessidade de vigilância e monitoramento sistemático da resistência aos antimicrobianos em bactérias zoonóticas transmitidas pelos alimentos.(AU)

Antimicrobial resistance of Staphylococcus spp. in swine farming: a challenge for one health / Resistência antimicrobiana de Staphylococcus spp. na suinocultura: desafio para a saúde única

The inadequate and excessive use of antimicrobial agents in pig farming has contributed to the emergence and increase of resistance to antibiotics in both bacteria related to infectious processes in these animals as those that constitute their own microbiota. This conduct also causes the dissemination of these microorganisms throughout the pig production chain, causing damages to health of consumers of their meat and processed-meat products. The effect of excess use of these medicines can even reach and compromise other ecosystems. Methicillin-resistant Staphylococcus (MRS) stands out among bacterium species of interest to the public health. They emerged as important zoonotic pathogens, whose evolution generated different virulence and mechanisms of resistance to antimicrobial agents and has been associated to high use of these medicines in pig farming. The development of resistance to antibiotics in Staphylococcus spp., especially the expression of the gene mecA, and their interrelation with pig farming are aspects considered in this work. The emergence and global presence of MRS in pig farming denote the important epidemiological involvement of these animal species in the dissemination of these microorganisms, and the occurrence of infections in humans and animals in the whole world. This is a scenario that requires attention by public health agencies and should not be overlooked.

O uso inadequado e excessivo de agentes antimicrobianos na suinocultura tem contribuído para o surgimento e aumento da resistência a antibióticos, seja para as bactérias relacionadas aos processos infecciosos nesses animais, como para as que compõem a sua própria microbiota. Essa conduta também causa a disseminação desses microrganismos por toda a cadeia produtiva de suínos, causando danos à saúde dos consumidores de suas carnes e derivados. O efeito do uso excessivo desses medicamentos pode até atingir e comprometer outros ecossistemas. O Staphylococcus resistente à meticilina (MRS) se destaca entre as espécies de bactérias de interesse para a saúde pública. Surgiram como importantes patógenos zoonóticos, cuja evolução gerou diferentes virulências e mecanismos de resistência a agentes antimicrobianos e tem sido associada ao alto uso desses medicamentos na suinocultura. O desenvolvimento de resistência a antibióticos em Staphylococcus spp., principalmente a expressão do gene mecA, e sua inter-relação com a suinocultura são aspectos considerados neste trabalho. O surgimento e a presença global da MRS na suinocultura denotam o importante envolvimento epidemiológico dessa espécie animal na disseminação desses microrganismos e a ocorrência de infecções em humanos e animais em todo o mundo. Este é um cenário que requer atenção das agências de saúde pública e não deve ser esquecido.

Antimicrobial resistance of Staphylococcus spp. in swine farming: a challenge for one health / Resistência antimicrobiana de Staphylococcus spp. na suinocultura: desafio para a saúde única

The inadequate and excessive use of antimicrobial agents in pig farming has contributed to the emergence and increase of resistance to antibiotics in both bacteria related to infectious processes in these animals as those that constitute their own microbiota. This conduct also causes the dissemination of these microorganisms throughout the pig production chain, causing damages to health of consumers of their meat and processed-meat products. The effect of excess use of these medicines can even reach and compromise other ecosystems. Methicillin-resistant Staphylococcus (MRS) stands out among bacterium species of interest to the public health. They emerged as important zoonotic pathogens, whose evolution generated different virulence and mechanisms of resistance to antimicrobial agents and has been associated to high use of these medicines in pig farming. The development of resistance to antibiotics in Staphylococcus spp., especially the expression of the gene mecA, and their interrelation with pig farming are aspects considered in this work. The emergence and global presence of MRS in pig farming denote the important epidemiological involvement of these animal species in the dissemination of these microorganisms, and the occurrence of infections in humans and animals in the whole world. This is a scenario that requires attention by public health agencies and should not be overlooked.(AU)

O uso inadequado e excessivo de agentes antimicrobianos na suinocultura tem contribuído para o surgimento e aumento da resistência a antibióticos, seja para as bactérias relacionadas aos processos infecciosos nesses animais, como para as que compõem a sua própria microbiota. Essa conduta também causa a disseminação desses microrganismos por toda a cadeia produtiva de suínos, causando danos à saúde dos consumidores de suas carnes e derivados. O efeito do uso excessivo desses medicamentos pode até atingir e comprometer outros ecossistemas. O Staphylococcus resistente à meticilina (MRS) se destaca entre as espécies de bactérias de interesse para a saúde pública. Surgiram como importantes patógenos zoonóticos, cuja evolução gerou diferentes virulências e mecanismos de resistência a agentes antimicrobianos e tem sido associada ao alto uso desses medicamentos na suinocultura. O desenvolvimento de resistência a antibióticos em Staphylococcus spp., principalmente a expressão do gene mecA, e sua inter-relação com a suinocultura são aspectos considerados neste trabalho. O surgimento e a presença global da MRS na suinocultura denotam o importante envolvimento epidemiológico dessa espécie animal na disseminação desses microrganismos e a ocorrência de infecções em humanos e animais em todo o mundo. Este é um cenário que requer atenção das agências de saúde pública e não deve ser esquecido.(AU)

Perfil de resistência antimicrobiana de Klebsiella pneumoniae isoladas de animais domésticos e silvestres / Antimicrobial resistance profile of Klebsiella pneumoniae isolated from domestic and wild animals

Klebsiella pneumoniae é um patógeno oportunista, responsável por diversos tipos de infecções nosocomiais, e é considerado um microrganismo multirresistente. Dados na literatura que forneçam informações a respeito da resistência desse microrganismo a antimicrobianos em amostras de animais são escassos. Dessa forma, o objetivo deste trabalho foi avaliar o perfil e o seu aumento das resistências a antimicrobianos dentro da medicina veterinária. Um total de 67 isolados de K. pneumoniae, provenientes de diferentes sítios de isolamento de animais domésticos (39/67) e silvestres (28/67), foi confirmado por sequenciamento do gene 16S rRNA. O maior percentual de isolamento de K. pneumoniae foi de amostras de urina, com 16% (11/67), fezes, com 15% (10/67), e pulmão, com 13,5% (09/67). No perfil de resistência, foram testadas 11 categorias de antibióticos, sendo a maior taxa de resistência ao metronidazol 97% (65/67), à ampicilina 94% (63/67), à amoxicilina 93% (62/67), às sulfonamidas 93% (62/67), à colistina 93% (62/67) e à nitrofurantoína 88% (59/67). Aqueles que apresentaram menor taxa de resistência foram: meropenem 3% (2/67), imipenem 6% (4/67) e amicacina 16% (11/67). Todos os isolados foram considerados bactérias multirresistentes (MRD), com o índice de resistência múltipla aos antibióticos (IRMA) variando de 0,15 a 0,85 e com 60 tipos de padrões de resistência. O resultado deste estudo reforça que os animais são reservatórios de K. pneumoniae multirresistentes.(AU)

Klebsiella pneumoniae is an opportunistic pathogen responsible for several types of nosocomial infections and is considered a multiresistant microorganism. Data in the literature that provide information regarding the resistance of this microorganism to antimicrobials in animal samples are scarce. Thus, the objective of this work was to evaluate the profile and its increase of antimicrobial resistance within Veterinary Medicine. A total of 67 K. pneumoniae isolates from different domestic (39/67) and wild (28/67) isolation sites were confirmed by sequencing the 16S rRNA gene. The highest percentage of K. pneumoniae isolation was from urine samples with 16% (11/67), faeces 15% (10/67) and lung 13.5% (09/67). In the resistance profile, 11 categories of antibiotics were tested, with the highest resistance to metronidazole being 97% (65/67), ampicillin 94% (63/67), amoxicillin 93% (62/67), sulfonamides 93% (62 / 67), 93% colistin (62/67), and 88% nitrofurantoin (59/67). The ones with the lowest resistance were: meropenem 3% (2/67), imipenem 6% (4/67) and amikacin 16% (11/67). All isolates were considered multiresistant bacteria (MDR), with the Multiple Resistance to Antibiotics Index (IRMA) ranging from 0.15 to 0.85 and with 60 types of resistance patterns. The result of this study reinforces that the animals are reservoirs of multiresistant K. pneumoniae.(AU)

Perfil de resistência antimicrobiana de Klebsiella pneumoniae isoladas de animais domésticos e silvestres / Antimicrobial resistance profile of Klebsiella pneumoniae isolated from domestic and wild animals

Klebsiella pneumoniae é um patógeno oportunista, responsável por diversos tipos de infecções nosocomiais, e é considerado um microrganismo multirresistente. Dados na literatura que forneçam informações a respeito da resistência desse microrganismo a antimicrobianos em amostras de animais são escassos. Dessa forma, o objetivo deste trabalho foi avaliar o perfil e o seu aumento das resistências a antimicrobianos dentro da medicina veterinária. Um total de 67 isolados de K. pneumoniae, provenientes de diferentes sítios de isolamento de animais domésticos (39/67) e silvestres (28/67), foi confirmado por sequenciamento do gene 16S rRNA. O maior percentual de isolamento de K. pneumoniae foi de amostras de urina, com 16% (11/67), fezes, com 15% (10/67), e pulmão, com 13,5% (09/67). No perfil de resistência, foram testadas 11 categorias de antibióticos, sendo a maior taxa de resistência ao metronidazol 97% (65/67), à ampicilina 94% (63/67), à amoxicilina 93% (62/67), às sulfonamidas 93% (62/67), à colistina 93% (62/67) e à nitrofurantoína 88% (59/67). Aqueles que apresentaram menor taxa de resistência foram: meropenem 3% (2/67), imipenem 6% (4/67) e amicacina 16% (11/67). Todos os isolados foram considerados bactérias multirresistentes (MRD), com o índice de resistência múltipla aos antibióticos (IRMA) variando de 0,15 a 0,85 e com 60 tipos de padrões de resistência. O resultado deste estudo reforça que os animais são reservatórios de K. pneumoniae multirresistentes.(AU)

Klebsiella pneumoniae is an opportunistic pathogen responsible for several types of nosocomial infections and is considered a multiresistant microorganism. Data in the literature that provide information regarding the resistance of this microorganism to antimicrobials in animal samples are scarce. Thus, the objective of this work was to evaluate the profile and its increase of antimicrobial resistance within Veterinary Medicine. A total of 67 K. pneumoniae isolates from different domestic (39/67) and wild (28/67) isolation sites were confirmed by sequencing the 16S rRNA gene. The highest percentage of K. pneumoniae isolation was from urine samples with 16% (11/67), faeces 15% (10/67) and lung 13.5% (09/67). In the resistance profile, 11 categories of antibiotics were tested, with the highest resistance to metronidazole being 97% (65/67), ampicillin 94% (63/67), amoxicillin 93% (62/67), sulfonamides 93% (62 / 67), 93% colistin (62/67), and 88% nitrofurantoin (59/67). The ones with the lowest resistance were: meropenem 3% (2/67), imipenem 6% (4/67) and amikacin 16% (11/67). All isolates were considered multiresistant bacteria (MDR), with the Multiple Resistance to Antibiotics Index (IRMA) ranging from 0.15 to 0.85 and with 60 types of resistance patterns. The result of this study reinforces that the animals are reservoirs of multiresistant K. pneumoniae.(AU)

Phylogenetic analysis, biofilm production, and antimicrobial resistance profile of Escherichia coli isolated from slaughtered pigs / Análise filogenética, produção de biofilme e perfil de resistência antimicrobiana de Escherichia coli isoladas de suínos abatidos

Enteric diseases of bacterial origin are frequent in the pig industry, of particular notoriety are the colibacillosis that mainly affect piglets and cause great damage to the swine industry worldwide. The aim of the study was to analyze phylogenetics, to detect biofilm production, and to determine antimicrobial resistance profile in 126 strains of Escherichia coli isolated from swabs obtained from fragments of the small intestines of 235 healthy pigs killed in slaughterhouses in Pernambuco (Brazil) using polymerase chain reaction (PCR), adherence to microplates test and disc diffusion technique. Of the analyzed samples, 88.10% (111/126) were classified in phylogenetic group B1; 4.76% (6/126) in group D; 3.97% (5/126) in group B2 and, 3.17% (4/126) in group A. Antimicrobial resistance rates observed were: lincomycin 100% (126/126), erythromycin 100% (126/126), chlortetracycline 94.44% (119/126), cephalothin 51.59% (65/126), ampicillin 38.89% (49/126), sulfamethoxazole + trimethoprim 37.3% (47/126), ciprofloxacin 19.84% (25/126), norfloxacin 14.29% (18/126), gentamicin 8.73% (11/126) and, chloramphenicol 5.55% (7/126). Multiple antibiotic resistance (MAR) ranged from 0.2 to 0.9. Of the strains tested 46.03% (58/126) produced biofilm, and 99.21% (125/126) of the strains exhibited multi-resistance. Further studies are required to elucidate the importance of each phylogenetic group in pigs and to prevent the propagation of multi-resistant E. coli strains.(AU)

Doenças entéricas de origem bacteriana são frequentes na indústria de suínos, destacando-se a colibacilose, que afeta principalmente leitões e causa grandes danos à indústria suína em todo o mundo. Cento e vinte e seis cepas de Escherichia coli foram isoladas de swabs obtidos de fragmentos de intestino delgado de 235 suínos saudáveis abatidos em matadouros de Pernambuco (Brasil). O objetivo do presente estudo foi analisar filogeneticamente essas cepas, bem como detectar a produção de biofilme e determinar o perfil de resistência antimicrobiana delas, utilizando-se a reação em cadeia da polimerase (PCR), o teste de adesão em microplacas e a técnica de disco-difusão. 88,10% (111/126) das amostras foram classificadas no grupo filogenético B1; 4,76% (6/126) no grupo D; 3,97% (5/126) no grupo B2; e 3,17% (4/126) no grupo A. As taxas de resistência antimicrobiana observadas foram: lincomicina 100% (126/126), eritromicina 100% (126/126), clortetraciclina 94,44% (119/126), cefalotina 51,59% (65/126), ampicilina 38,89% (49/126), sulfametoxazol + trimetoprima 37,3% (47/126), ciprofloxacina 19,84% (25/126), norfloxacina 14,29% (18/126), gentamicina 8,73% (11/126) e cloranfenicol 5,55% (7/126). O índice de resistência múltipla (IRMA) variou de 0,2 a 0,9. Entre as amostras, 46,03% (58/126) produziram biofilme e 99,21% (125/126) foram multirresistentes. São necessários mais estudos para elucidar a importância de cada grupo filogenético em suínos e evitar a propagação de estirpes de E. coli multirresistentes.(AU)

Phylogenetic analysis, biofilm production, and antimicrobial resistance profile of Escherichia coli isolated from slaughtered pigs / Análise filogenética, produção de biofilme e perfil de resistência antimicrobiana de Escherichia coli isoladas de suínos abatidos

Enteric diseases of bacterial origin are frequent in the pig industry, of particular notoriety are the colibacillosis that mainly affect piglets and cause great damage to the swine industry worldwide. The aim of the study was to analyze phylogenetics, to detect biofilm production, and to determine antimicrobial resistance profile in 126 strains of Escherichia coli isolated from swabs obtained from fragments of the small intestines of 235 healthy pigs killed in slaughterhouses in Pernambuco (Brazil) using polymerase chain reaction (PCR), adherence to microplates test and disc diffusion technique. Of the analyzed samples, 88.10% (111/126) were classified in phylogenetic group B1; 4.76% (6/126) in group D; 3.97% (5/126) in group B2 and, 3.17% (4/126) in group A. Antimicrobial resistance rates observed were: lincomycin 100% (126/126), erythromycin 100% (126/126), chlortetracycline 94.44% (119/126), cephalothin 51.59% (65/126), ampicillin 38.89% (49/126), sulfamethoxazole + trimethoprim 37.3% (47/126), ciprofloxacin 19.84% (25/126), norfloxacin 14.29% (18/126), gentamicin 8.73% (11/126) and, chloramphenicol 5.55% (7/126). Multiple antibiotic resistance (MAR) ranged from 0.2 to 0.9. Of the strains tested 46.03% (58/126) produced biofilm, and 99.21% (125/126) of the strains exhibited multi-resistance. Further studies are required to elucidate the importance of each phylogenetic group in pigs and to prevent the propagation of multi-resistant E. coli strains.(AU)

Doenças entéricas de origem bacteriana são frequentes na indústria de suínos, destacando-se a colibacilose, que afeta principalmente leitões e causa grandes danos à indústria suína em todo o mundo. Cento e vinte e seis cepas de Escherichia coli foram isoladas de swabs obtidos de fragmentos de intestino delgado de 235 suínos saudáveis abatidos em matadouros de Pernambuco (Brasil). O objetivo do presente estudo foi analisar filogeneticamente essas cepas, bem como detectar a produção de biofilme e determinar o perfil de resistência antimicrobiana delas, utilizando-se a reação em cadeia da polimerase (PCR), o teste de adesão em microplacas e a técnica de disco-difusão. 88,10% (111/126) das amostras foram classificadas no grupo filogenético B1; 4,76% (6/126) no grupo D; 3,97% (5/126) no grupo B2; e 3,17% (4/126) no grupo A. As taxas de resistência antimicrobiana observadas foram: lincomicina 100% (126/126), eritromicina 100% (126/126), clortetraciclina 94,44% (119/126), cefalotina 51,59% (65/126), ampicilina 38,89% (49/126), sulfametoxazol + trimetoprima 37,3% (47/126), ciprofloxacina 19,84% (25/126), norfloxacina 14,29% (18/126), gentamicina 8,73% (11/126) e cloranfenicol 5,55% (7/126). O índice de resistência múltipla (IRMA) variou de 0,2 a 0,9. Entre as amostras, 46,03% (58/126) produziram biofilme e 99,21% (125/126) foram multirresistentes. São necessários mais estudos para elucidar a importância de cada grupo filogenético em suínos e evitar a propagação de estirpes de E. coli multirresistentes.(AU)

The presence of plasmids in Aeromonas hydrophila and its relationship with antimicrobial and heavy metal-resistance profiles

ABSTRACT: Aeromonas hydrophila is a common fish pathogen that causes extensive damage to aquaculture. To develop and implement a more adequate strategy to farm fish, it is crucial to understand the bacterial-resistance levels and their transference dynamics. The objective of this study was to analyze the resistance profile of isolated Aeromonas hydrophila to antimicrobial agents and heavy metals and draw a correlation of the observed profiles with the presence of plasmids. Resistance of the isolated bacteria to antimicrobial agents (oxacilin, gentamicin, tetracycline, and nalidixic acid) and heavy metals (cadmium, lead, copper, and manganese) was verified using the minimum bactericidal concentration (MBC) and minimum inhibitory concentration (MIC) standards. The Multiple Antibiotic Resistance Index (MAR Index) was calculated. Plasmids were extracted by using a common methodology described elsewhere. Mann-Whitney Test, implemented in the R environment, was used to determine the correlation between resistance and plasmids presence. A high resistance to almost all antimicrobial agents and heavy metals was observed, except to gentamicin and cadmium. The MAR index results showed resistance to all antimicrobial profiles. Of the isolated bacteria, 14 showed the presence of plasmids. However, no correlation was noted between the resistance profile and the plasmid presence for these isolates, indicating that the genes responsible for resistance to microbial agents and heavy metals are present in the cromossomic DNA, which in turn suggested the possibility of gene transfer between the isolated bacteria. The resistance to heavy metals can be linked to heavy utilization of fertilizers along the Sao Francisco River.

RESUMO: Bactérias da espécie Aeromonas hydrophila são patógenos que atacam peixes, causando grandes prejuízos à piscicultura. Entender os perfis de resistência dessa bactéria e a capacidade da mesma em transferir tal resistência é importante para implantação de um manejo adequado na produção de peixes. Os objetivos desse estudo foram analisar a resistência de isolados de Aeromonas hydrophila à antimicrobianos e metais pesados e, correlacionar os perfis encontrados com a presença de plasmídeos. A resistência dos isolados aos antimicrobianos (oxacilina, gentamicina, tetraciclina e ácido nalidíxico) e metais pesados (cádmio, chumbo, cobre e manganês) foi verificada pelas técnicas da Concentração Bactericida Mínima (CBM) e Concentração Inibitória Mínima (CIM). Foi calculado o Índice de Resistência Múltipla aos Antimicrobianos (IRMA). Os plasmídeos foram extraídos por metodologias descritas pela literatura. A relação entre a resistência aos antimicrobianos e metais pesados com a presença de plasmídeos foi determinada pelo teste de Mann-Whitney utilizando o ambiente R. Foi observada alta resistência aos antimicrobianos e metais pesados testados, com exceção à gentamicina e cádmio. No IRMA os isolados apresentaram resistência a todos os perfis de antimicrobianos possíveis. Quatorze isolados apresentaram plasmídeos, mas não foi encontrada relação dos perfis de resistência com a presença destes, o que indica que os genes de resistência a esses compostos estejam presentes no DNA cromossômico. Porém apontam a possibilidade de transferência dos genes de resistência entre os isolados. Estes resultados apontam alta resistência dos isolados e capacidade de transmissão dessa resistência a outras bactérias. A resistência aos metais pesados, pode estar ligada ao uso de fertilizantes nas plantações localizadas próximas as margens do Rio São Francisco.

The presence of plasmids in Aeromonas hydrophila and its relationship with antimicrobial and heavy metal-resistance profiles / Presença de plasmídeos em Aeromonas hydrophila e sua relação com perfis de resistência aos antimicrobianos e metais pesados

Aeromonas hydrophila is a common fish pathogen that causes extensive damage to aquaculture. To develop and implement a more adequate strategy to farm fish, it is crucial to understand the bacterial-resistance levels and their transference dynamics. The objective of this study was to analyze the resistance profile of isolated Aeromonas hydrophila to antimicrobial agents and heavy metals and draw a correlation of the observed profiles with the presence of plasmids. Resistance of the isolated bacteria to antimicrobial agents (oxacilin, gentamicin, tetracycline, and nalidixic acid) and heavy metals (cadmium, lead, copper, and manganese) was verified using the minimum bactericidal concentration (MBC) and minimum inhibitory concentration (MIC) standards. The Multiple Antibiotic Resistance Index (MAR Index) was calculated. Plasmids were extracted by using a common methodology described elsewhere. Mann-Whitney Test, implemented in the R environment, was used to determine the correlation between resistance and plasmids presence. A high resistance to almost all antimicrobial agents and heavy metals was observed, except to gentamicin and cadmium. The MAR index results showed resistance to all antimicrobial profiles. Of the isolated bacteria, 14 showed the presence of plasmids. However, no correlation was noted between the resistance profile and the plasmid presence for these isolates, indicating that the genes responsible for resistance to microbial agents and heavy metals are present in the cromossomic DNA, which in turn suggested the possibility of gene transfer between the isolated bacteria. The resistance to heavy metals can be linked to heavy utilization of fertilizers along the Sao Francisco River.(AU)

Bactérias da espécie Aeromonas hydrophila são patógenos que atacam peixes, causando grandes prejuízos à piscicultura. Entender os perfis de resistência dessa bactéria e a capacidade da mesma em transferir tal resistência é importante para implantação de um manejo adequado na produção de peixes. Os objetivos desse estudo foram analisar a resistência de isolados de Aeromonas hydrophila à antimicrobianos e metais pesados e, correlacionar os perfis encontrados com a presença de plasmídeos. A resistência dos isolados aos antimicrobianos (oxacilina, gentamicina, tetraciclina e ácido nalidíxico) e metais pesados (cádmio, chumbo, cobre e manganês) foi verificada pelas técnicas da Concentração Bactericida Mínima (CBM) e Concentração Inibitória Mínima (CIM). Foi calculado o Índice de Resistência Múltipla aos Antimicrobianos (IRMA). Os plasmídeos foram extraídos por metodologias descritas pela literatura. A relação entre a resistência aos antimicrobianos e metais pesados com a presença de plasmídeos foi determinada pelo teste de Mann-Whitney utilizando o ambiente R. Foi observada alta resistência aos antimicrobianos e metais pesados testados, com exceção à gentamicina e cádmio. No IRMA os isolados apresentaram resistência a todos os perfis de antimicrobianos possíveis. Quatorze isolados apresentaram plasmídeos, mas não foi encontrada relação dos perfis de resistência com a presença destes, o que indica que os genes de resistência a esses compostos estejam presentes no DNA cromossômico. Porém apontam a possibilidade de transferência dos genes de resistência entre os isolados. Estes resultados apontam alta resistência dos isolados e capacidade de transmissão dessa resistência a outras bactérias. A resistência aos metais pesados, pode estar ligada ao uso de fertilizantes nas plantações localizadas próximas as margens do Rio São Francisco.(AU)

COMPARAÇÃO TEMPORAL DO PERFIL DE RESISTÊNCIA IN VITRO AOS ANTIMICROBIANOS EM ISOLADOS DE Salmonella spp. DE CARNE DE FRANGO ENTRE 2004 2020

Salmonella spp. é um dos principais agentes causadores de doenças de origem alimentar no Brasil e no mundo e seu controle é um desafio para a saúde pública. Devido à alta capacidade de transmissão, a presença deste patógeno em animais criados para fins industriais causa grandes perdas econômicas, principalmente no comércio de carne de aves; além de ser prejudicial à saúde humana. Antimicrobianos são ferramentas amplamente utilizadas na tentativa de amenizar os riscos de aparecimento e disseminação de doenças no ambiente de produção, além de, na produção avícola, serem utilizados como promotores de crescimento. Entretanto, o uso prolongado e de maneira indiscriminada pode proporcionar o aparecimento de cepas bacterianas resistentes. Deste modo, o presente estudo teve como objetivo avaliar in vitro o perfil de resistência aos antimicrobianos em isolados de Salmonella spp. de carcaças e cortes de frango nos anos de 2004, 2005 e 2006 antigos (n= 63) e 2019 e 2020 atuais (n=24) pertencentes a bacterioteca do Serviço de Orientação à Alimentação Pública (SOAP UNESP, Botucatu - SP). Previamente ao estudo de perfil de resistência, os isolados foram submetidos à confirmação molecular por meio da PCR em tempo real para detecção do gene invA. Posteriormente, os isolados foram submetidos ao teste de perfil de susceptibilidade aos antimicrobianos pelo método de disco difusão. Dos 63 isolados antigos, nenhuma apresentou resistência aos antibióticos testados. Dos isolados novos, 22 (91,66 %) apresentaram resistência a ao menos um antimicrobiano testado e 18 destes foram considerados multidroga resistente. O perfil fenotípico de resistência mais prevalente foi ceftazidima-cefoxitina-ampicilina-tetracilina 72,72% (16/22), seguido por tetraciclina 18,18% (4/22), ceftazidima-cefoxitina-ampicilina 4,54% (1/22) e ceftazidima-cefoxitina-ampicilina-cloranfenicol-tetracilina 4,54% (1/22). Dos 18 isolados multidroga resistente, 83,33 % (15/18) foram positivas para ESBL. O dendrograma obtido da comparação do perfil de resistência de isolados antigos e novos, resultou em três grandes clusters, com destaque para o primeiro formado por isolados novos e multirresistentes com similaridade de 80 82%. A alta taxa de resistência em isolados novos demonstra que a resistência aos antimicrobianos é crescente com o passar dos anos, sendo assim, é necessário desenvolver ações para monitorar a resistência a antimicrobianos relacionados à carne de frango.

Salmonella spp. it is one at the main agent of foodborne diseases worldwide and its control is a challenge for public health. Due to the high transmission ability, the presence of this pathogen in animals bred for industrial purposes causes great economic losses, mainly in the poultry meat trade; in addition to being harmful to human health. Antimicrobials are tools widely used in an attempt to mitigate the risks of the appearance and spread of diseases in the production environment, in addition to, in poultry production, being used as growth promoters. However, prolonged and indiscriminate use can lead to the emergence of resistant bacterial strains. Thus, the aim of this study was to evaluate in vitro the profile of resistance to antimicrobials in isolates of Salmonella spp. of carcasses and cuts of chicken in the years of 2004, 2005 and 2006 old (n = 63) and 2019 and 2020 new (n = 24). Previously to the resistance profile study, the isolates were subjected to molecular confirmation by real-time PCR to detect the invA gene. Subsequently, the isolates were subjected to the susceptibility profile test to antimicrobials by the diffusion disk method. Of the 63 old isolates, none showed resistance to the tested antibiotics. Of the new strains, 22 (91,66 %) showed resistance to at least one tested antimicrobial and 18 of these were considered multidrug resistant. The most prevalent phenotypic resistance profile was ceftazidime-cefoxitin-ampicillin-tetracillin 72.72% (16/22), followed by tetracycline 18.18% (4/22), ceftazidime-cefoxitin-ampicillin 4.54% (1/22) and ceftazidime-cefoxitin-ampicillin-chloramphenicol-tetracillin 4.54 % (1/22). Of the 18 multidrug resistant isolates, 83.33% (15/18) were positive for ESBL. From the dendrogram obtained from the comparison of the resistance profile of old and new isolates, it resulted in three large clusters, with emphasis on the first formed by new and multiresistant isolates with similarity of 80 82%. The high rate of resistance in new isolates demonstrates that resistance to antimicrobials is increasing over the years, therefore, it is necessary to develop actions to monitor resistance to antimicrobials related to chicken meat.

RESISTÊNCIA ANTIMICROBIANA EM Enterobacterales ISOLADAS DE GALINHAS POEDEIRAS E CAIPIRAS EM CONDIÇÕES SEMIÁRIDAS BRASILEIRAS

A produção avícola de carne e ovos no Brasil está em crescimento e gera emprego e renda não somente aos grandes produtores como também às pequenas famílias rurais, que utilizam esses produtos para subsistência. Para manter a saúde desses animais e aumentar a produtividade, o uso de antimicrobianos de modo empírico e descontrolado se elevaram, e como consequência as bactérias se tornaram reservatórios de genes de resistência aos antimicrobianos, caracterizando um problema de Saúde Pública global. Dessa maneira, os objetivos deste trabalho foram isolar e identificar microrganismos provenientes da cloaca de galinhas poedeiras e caipiras do semiárido brasileiro, caracterizar o perfil de resistência e identificar genes de resistência antimicrobiana dos isolados. Foram colhidos 330 suabes cloacais de galinhas poedeiras e caipiras criadas em condições semiáridas brasileiras (165 suabes de galinhas poedeiras e 165 de galinhas caipiras), no período de setembro de 2019 a setembro de 2020. As amostras foram submetidas a cultivo bacteriano com posterior identificação bioquímica, e nos isolados foram verificados a suscetibilidade aos antimicrobianos, teste fenotípico para produção de ESBL e identificação de genes de resistência, blaCTX-M e blaCMY. Foram isoladas 152 Enterobacteriales de galinhas poedeiras e 198 de galinhas caipiras. Os microrganismos mais frequentemente isolados de galinhas poedeiras foram E. coli (73,7%), Klebsiella spp. (13,2%), Proteus mirabilis (5,3%) e Salmonella spp. (3,3%), e para galinhas caipiras E. coli (68,2%), Klebsiella spp. (12,6%),Edwardsiella spp. (10,1%) e Salmonella spp. (3,6%) foram os mais frequentes.As bactérias isoladas de galinhas poedeiras e caipiras apresentaram maiores susceptibilidade a tetraciclina, ampicilina, norfloxacina, amoxicilina+ácido clavulânico, ertapenem, imipenem e meropenem. Foram observados 69 (45,4%)isolados com multirresistência nas galinhas poedeiras e 36 (18%) de galinhas caipiras. Os genes detectados nas amostras de galinhas poedeiras foram CTXM em oito isolados com o grupo blaCTX-M1-like (quatro E. coli e quatro Klebsiella spp.), blaCTX-M2-like identificado em seis isolados (dois E. coli, três Klebsiella spp.e um Salmonella spp.), blaCTX-M8-like em sete isolados (seis E. coli e um Klebsiella spp.) e o gene CMY-2 em nove E. coli e duas Klebsiella spp. Para as galinhas caipiras foram observados gene blaCTX-M1-like, blaCTX-M2-like e blaCMY-2 em três E.coli. Conclui-se que a emergência e disseminação de bactérias produtoras de genes de resitência, em especial a produção de CTX-M e CMY em cloacas de galinhas poedeiras em comparação das galinhas caipiras, alerta para a possível difusão destes genes de resistência na interface humana, animal e nos ecossistemas estudados.

The poultry production of meat and eggs in Brazil is growing and generates employment and income not only for large producers but also for small rural families, who use these products for subsistence. To maintain the health of these animals and increase productivity, the use of antimicrobials in an empirical and uncontrolled way has increased, and as a consequence bacteria have become reservoirs of antimicrobial resistance genes, characterizing a global public health problem. Thus, the objectives of this study were to isolate and identify microorganisms from the cloaca of laying hens and free-range chickens in the Brazilian semiarid region, characterize the resistance profile and identify antimicrobial resistance genes of the isolates. A total of 330 cloacal swabs from laying hens and free-range chickens raised in Brazilian semiarid conditions (165 swabs from laying hens and 165 swabs from free-range chickens) were collected from September 2019 to September 2020. The samples were subjected to bacterial culture with subsequent biochemical identification, and in the isolates were checked for susceptibility to antimicrobials, phenotypic test for ESBL production and identification of resistance genes, , blaCTX-M and blaCMY. A total of 152 Enterobacteriales were isolated from laying hens and 198 from free-range hens. The microorganisms most frequently isolated from laying hens were E. coli (73.7%), Klebsiella spp. (13.2%), Proteus mirabilis (5.3%) and Salmonella spp.(3.3%), and E. coli (67.5%), Klebsiella spp. (12,5%), Edwardsiella spp. (10.0%)and Salmonella spp. (3.5%) were the most frequent for free-range chickens.Bacteria isolated from laying hens and free-range chickens showed higher susceptibility to tetracycline, ampicillin, norfloxacin, amoxicillin+clavulanic acid,ertapenem, imipenem and meropenem. Sixty-nine (45.4%) isolates with multidrug resistance were observed in laying hens and 36 (18%) from free-range chickens. The genes detected in the samples from laying hens were CTX-M in eight isolates with the blaCTX-M1-like group (four E. coli and four Klebsiella spp.),blaCTX-M2-like identified in six isolates (two E. coli, three Klebsiella spp. and one Salmonella spp.), blaCTX-M8-like in seven isolates (six E. coli and one Klebsiella spp.), and the CMY-2 gene in nine E. coli and two Klebsiella spp. For free-range chickens, blaCTX-M1-like, blaCTX-M2-like e blaCMY-2 genes were observed in three E.coli. We conclude that the emergence and dissemination of bacteria producing resistance genes, especially the production of CTX-M and CMY in laying hen cloacae compared to free-range hens, alerts to the possible diffusion of these resistance genes at the human-animal interface and in the ecosystems studied.

PERFIS MOLECULARES E DE RESISTÊNCIA ANTIMICROBIANA DE ISOLADOS DE Salmonella enterica subsp. enterica sorovar Minnesota PROVENIENTES DE GRANJAS DE FRANGOS DE CORTE E DE HUMANOS DE DIFERENTES ESTADOS BRASILEIROS

A criação de frangos de corte vem se expandindo ao longo de muitas décadas, sendo uma atividade de grande relevância para a economia brasileira. Salmonella Minnesota (SM) tem sido apontada como um dos sorovares emergentes na cadeia produtiva de frangos de corte no Brasil, reforçando a necessidade de mais estudos de sua biologia e evolução, tendo em vista sua participação em eventos sanitários e da evolução de resistência aos antimicrobianos. No presente estudo foram analisados os perfis genéticos por meio da técnica de gel de eletroforese em campo pulsado (PFGE) em 13 isolados de SM provenientes cadeia produtiva de frangos de corte coletados nos estados de Minas Gerais, São Paulo e Espírito Santo, bem como em cinco recuperados de casos de infecção alimentar em humanos nos estados de Minas Gerais, Santa Catarina e Rio Grande do Sul. Outros 25 isolados de SM de origem avícola foram avaliados quanto à susceptibilidade a antimicrobianos pelo método de Kirby-Bauer. A análise de PFGE das 18 estirpes de SM originou um dendrograma que permitiu agrupar isolados em quatro clusters com 83-90% de similaridade. Dentre os quais, o cluster A agrupou a maioria dos isolados (13), incluindo duas amostras de origem humana que apresentaram 90% de similaridade com uma amostra isolada de frango, ambas coletadas em Minas Gerais. As estirpes de SM apresentaram resistência à tetraciclina (88%), cefoxitina (88%), ceftazidima (56%), ácido nalidíxico (28%), ciprofloxacina (16%) e estreptomicina (8%). Isso traz preocupações, uma vez que cefalosporinas de 3ª geração e fluoroquinolonas são drogas de escolhas para tratamento de infecções em humanos. Não foi observada resistência à gentamicina, cloranfenicol, meropenem, nitrofurantoína e sulfametoxazol-trimetoprim. Entretanto, 28% das amostras avaliadas apresentaram perfis de multirresistência, todas pertencentes ao Estado de Minas Gerais. Os resultados encontrados ressaltam a importância de mais estudos envolvendo SM, uma vez que esse sorovar, que atualmente circula na cadeia produtiva de frango de corte do Brasil, pode provocar infecção alimentar em humanos. Destaca-se ainda que os perfis de multirresistência antimicrobiana encontrados nos isolados analisados reforçam ainda mais a preocupação e os riscos que SM oferece para a saúde pública

The broiler industry has been expanding over several decades in Brazil, being a highly important economic activity in the country. Salmonella Minnesota (SM) has been identified as one of the emerging serovars in the broiler production chain in Brazil, reinforcing the need of further studies of its biology and evolution, in view of its participation in animal infections, including human, and the evolution of resistance to antimicrobials. In the present study, genetic profiles were analyzed using the pulsed field gel electrophoresis (PFGE) technique in 13 isolates obtained from the broiler industry collected in the states of Minas Gerais, São Paulo and Espírito Santo, as well as five recovered from cases of food borne infection in humans in the states of Minas Gerais, Santa Catarina and Rio Grande do Sul. Additionally, 25 isolates of SM from poultry origin were evaluated for susceptibility to antimicrobials by the Kirby-Bauer method. The PFGE analysis of 18 strains of SM generated a dendrogram that grouped the isolates with 83-90% similarity into four main clusters. Among them, cluster A grouped the majority of isolates (13), including two isolated of human origin that showed 90% similarity with a broiler isolate, both collected in Minas Gerais. Strains of SM showed resistance to tetracycline (88%), cefoxitin (88%), ceftazidime (56%), nalidixic acid (28%), ciprofloxacin (16%) and streptomycin (8%). This raises concerns, since 3rd generation cephalosporins and fluoroquinolones are drugs of choice for treating infections in humans. No resistance to gentamicin, chloramphenicol, meropenem, nitrofurantoin and sulfamethoxazole-trimethoprim was found. Moreover, 28% of the evaluated isolates presented multi-resistance profile, all belonging to the State of Minas Gerais. The results highlight the importance of further studies involving MS, since this serovar, which is currently spreading in the Brazilian broiler industry, could potentially provoke food borne infection in humans. It is also noteworthy that the multi-resistance antimicrobial profiles found reinforce the concern and risks that SM offers to public health.