Determinación de la concentración de Mycobacterium por espectrofotometría / Determination of Mycobacterium fortuitum concentration by spectrophotometry / Determinação da concentração de Mycobacterium fortuitum através da espectrofotometria

Mycobacterium fortuitum es agente causante de enfermidad oportunista en humanos y animales. Es un agente biológico modelo para estudios experimentales que sustituy Mycobacterium bovis, que es más patógeno. Este estudio presenta una metodología alternativa para el recuento de unidades formadoras de colonias por mililitro de inóculo para determinar la concentración de Mycobacterium fortuitum usando espectrofotometría. Catorce muestras se utilizaron Mycobacterium fortuitum, cultivadas en Lowesntein-Jensen, ocho de ellos de siete días de cultivo, y la otra entre 8 y 14 días en la cultura. Todas las muestras se colocaron en placas y se incubaron a 37o.C durante 7 días en un invernadero. De cada muestra se hicieron lecturas las variables de absorbancia (Abs) y transmitancia (T%) en un espectrofotómetro, a una longitud de onda de 560 nm y 600 nm. La comparación de los valores de UFC, ABS y T% por análisis de regresión lineal simple, el estadístico SAS versión 8.2 del software, hubo una fuerte evidencia estadística de que el aumento del valor de transmitancia se asocia con la disminución en el valor de UFC chapado, siguiendo el modelo matemático: LOG10 (UFC) = 21,012 - 0,1936 * transmitancia, con p = 0,0025 y una repetibilidad de más de 80%.(AU)

Mycobacterium fortuitum is an opportunistic agent which causes disease in human and animals. It is also a biological model for experimental studies instead of using Mycobacterium bovis, which is more pathogenic. This work presents an alternative methodology using spectrophotometry to count colony forming units (CFU) per milliliter of inoculum, in order to determinate Mycobacterium fortuitum concentration. Fourteen Mycobacterium fortuitum samples were cultivated in Lowenstein-Jensen culture media, considering that eight of them were seven days old cultures and the others were between eight and 14 days old. All samples were seeded and incubated at 37o.C for 7 days in an incubator. For each sample, the variables absorbance (Abs) and transmitance (T%) were read with an spectrophotometer and wave length of 560nm and 600nm. When the values of CFU, Abs and T% were compared through simple linear regression analysis and using the statistic software SAS Version 8.2., it was observed strong statistical evidence that the increase of transmitance value is associated to the decrease of CFU plate values, according to the mathematic model: LOG10 (CFU) = 21.012 - 0.1936*Transmitance, and p value = 0.0025 and a repeatability over 80%.(AU)

O Mycobacterium fortuitum é um agente oportunista causador de doença em humanos e animais. Além disso, é um modelo biológico para estudos experimentais em substituição ao Mycobacterium bovis, que é mais patogênico. Este estudo apresenta metodologia alternativa à contagem de unidades formadoras de colônia por mililitro de inóculo, para determinar a concentração do Mycobacterium fortuitum utilizando espectrofotometria. Utilizaram-se 14 amostras de Mycobacterium fortuitum, cultivadas em meio Lowesntein-Jensen, sendo oito delas com sete dias de cultivo e as demais entre oito e 14 dias de cultivo. Todas as amostras foram semeadas e incubadas a 37o.C por 7 dias em estufa. Fizeram-se, de cada amostra, leituras das variáveis absorbância (Abs) e transmitância (T%) em espectrofotômetro, nos comprimentos de onda de 560nm e 600nm. Comparando-se os valores obtidos de UFC, Abs e T% por meio da análise de regressão linear simples, pelo programa estatístico SAS versão 8.2, observou-se forte evidência estatística que o aumento do valor da transmitância está associado com o decréscimo do valor de UFC em placas, seguindo o modelo matemático: LOG10 (UFC) = 21.012 - 0.1936*Transmitância, com valor de p = 0,0025 e uma repetibilidade de mais de 80%.(AU)

Determinación de la concentración de Mycobacterium por espectrofotometría / Determination of Mycobacterium fortuitum concentration by spectrophotometry / Determinação da concentração de Mycobacterium fortuitum através da espectrofotometria

Mycobacterium fortuitum es agente causante de enfermidad oportunista en humanos y animales. Es un agente biológico modelo para estudios experimentales que sustituy Mycobacterium bovis, que es más patógeno. Este estudio presenta una metodología alternativa para el recuento de unidades formadoras de colonias por mililitro de inóculo para determinar la concentración de Mycobacterium fortuitum usando espectrofotometría. Catorce muestras se utilizaron Mycobacterium fortuitum, cultivadas en Lowesntein-Jensen, ocho de ellos de siete días de cultivo, y la otra entre 8 y 14 días en la cultura. Todas las muestras se colocaron en placas y se incubaron a 37o.C durante 7 días en un invernadero. De cada muestra se hicieron lecturas las variables de absorbancia (Abs) y transmitancia (T%) en un espectrofotómetro, a una longitud de onda de 560 nm y 600 nm. La comparación de los valores de UFC, ABS y T% por análisis de regresión lineal simple, el estadístico SAS versión 8.2 del software, hubo una fuerte evidencia estadística de que el aumento del valor de transmitancia se asocia con la disminución en el valor de UFC chapado, siguiendo el modelo matemático: LOG10 (UFC) = 21,012 - 0,1936 * transmitancia, con p = 0,0025 y una repetibilidad de más de 80%.

Mycobacterium fortuitum is an opportunistic agent which causes disease in human and animals. It is also a biological model for experimental studies instead of using Mycobacterium bovis, which is more pathogenic. This work presents an alternative methodology using spectrophotometry to count colony forming units (CFU) per milliliter of inoculum, in order to determinate Mycobacterium fortuitum concentration. Fourteen Mycobacterium fortuitum samples were cultivated in Lowenstein-Jensen culture media, considering that eight of them were seven days old cultures and the others were between eight and 14 days old. All samples were seeded and incubated at 37o.C for 7 days in an incubator. For each sample, the variables absorbance (Abs) and transmitance (T%) were read with an spectrophotometer and wave length of 560nm and 600nm. When the values of CFU, Abs and T% were compared through simple linear regression analysis and using the statistic software SAS Version 8.2., it was observed strong statistical evidence that the increase of transmitance value is associated to the decrease of CFU plate values, according to the mathematic model: LOG10 (CFU) = 21.012 - 0.1936*Transmitance, and p value = 0.0025 and a repeatability over 80%.

O Mycobacterium fortuitum é um agente oportunista causador de doença em humanos e animais. Além disso, é um modelo biológico para estudos experimentais em substituição ao Mycobacterium bovis, que é mais patogênico. Este estudo apresenta metodologia alternativa à contagem de unidades formadoras de colônia por mililitro de inóculo, para determinar a concentração do Mycobacterium fortuitum utilizando espectrofotometria. Utilizaram-se 14 amostras de Mycobacterium fortuitum, cultivadas em meio Lowesntein-Jensen, sendo oito delas com sete dias de cultivo e as demais entre oito e 14 dias de cultivo. Todas as amostras foram semeadas e incubadas a 37o.C por 7 dias em estufa. Fizeram-se, de cada amostra, leituras das variáveis absorbância (Abs) e transmitância (T%) em espectrofotômetro, nos comprimentos de onda de 560nm e 600nm. Comparando-se os valores obtidos de UFC, Abs e T% por meio da análise de regressão linear simples, pelo programa estatístico SAS versão 8.2, observou-se forte evidência estatística que o aumento do valor da transmitância está associado com o decréscimo do valor de UFC em placas, seguindo o modelo matemático: LOG10 (UFC) = 21.012 - 0.1936*Transmitância, com valor de p = 0,0025 e uma repetibilidade de mais de 80%.

Fotoinativação de patógenos no leite experimentalmente contaminado

A produção de leite e de seus derivados lácteos geram grande impacto no setor agroindustrial. Classificado como um dos alimentos mais completos, o leite é rico em nutrientes essenciais ao crescimento e à manutenção de uma vida saudável. Em contrapartida, os constituintes do leite propiciam excelente meio de cultura para o desenvolvimento de microrganismos, desde o momento da ordenha até a chegada ao consumidor final. Neste contexto, estudos acerca de novas alternativas que auxiliem no controle da qualidade do leite são essenciais. A fotoinativação com luz azul tem surgido como uma alternativa antimicrobiana em potencial na indústria alimentícia, pois exerce atividade antimicrobiana intrínseca, sem o envolvimento de substâncias fotossensibilizadoras exógenas. O objetivo deste estudo foi determinar a efetividade da fotoinativação por luz azul (LED azul, = 410 ± 15 nm, 100 mW) sobre Staphylococcus aureus, Escherichia coli, Listeria monocytogenes e Mycobacterium fortuitum suspensos em leite integral UHT e solução PBS. Os resultados demonstraram a fotinativação de todas as cepas empregadas no estudo pela luz azul, em tempos distintos, independentemente do meio utilizado, isto é, M. fortuitum, S. aureus, E. coli e L. monocytogenes apresentaram cinética de fotoinativação diferentes entre si, quando suspensos no leite ou no PBS (p<0,0001). O fator de resistência R foi menor que 1 (R < 1) em meio leite, sendo 0,82, 0,78, 0,88 e 0,81 para S.aureus, E. coli, L. monocytogenes e M. fortuitum, nesta ordem, apresentando-se, portanto, mais sensíveis à luz azul nos tempos iniciais e ocorrendo fotoinativação em maior proporção neste período. Quando suspensos em PBS, à semelhança do meio leite, L. monocytogenes e E. coli, apresentaram valor de R < 1 (0,87 e 0,81, respectivamente), ao passo que S. aureus e M. fortuitum apresentaram R > 1, isto é, 1,06 e 1,46, respectivamente, demonstrando maior resistência à fotoinativação nos períodos iniciais e tornando-se mais sensíveis conforme o tempo de irradiação progredia. Concluiu-se que a luz azul foi capaz de fotoinativar, in vitro, cepas de S. aureus, E. coli, L. monocytogenes e M.fortuitum, suspensas em PBS e em leite integral UHT. A fotoinativação com luz azul apresenta caráter inovador, sendo uma alternativa potencialmente promissora no controle da contaminação por microrganismos na indústria láctea.

The production of milk and its dairy products have great impact on the agro-industrial sector. Considered as one of the most complete foods, milk is full of essential nutrients required for growth and maintenance of a healthy life. On the other hand, the composition of milk makes it an excellent growth medium for many microorganisms, from the moment of milking to its arrival to the final consumer. In this context, studies toward the search for new alternatives are essential for milk quality improvement. The photoinactivation by blue light has emerged as an alternative antimicrobial approach in the food industry due to its intrinsic antimicrobial properties without the involvement of exogenous photosensitizers. The aim of this study was to assess the effectiveness of blue light photoinactivation (blue LED, = 410 ± 15 nm, 100 mW) on Staphylococcus aureus, Escherichia coli, Listeria monocytogenes and Mycobacterium fortuitum strains suspended in UHT whole milk and PBS medium. All used strains was sucesssfully photoinactivated by the blue light, at different moments, regardless of the medium used, i.e., M. fortuitum, S. aureus, E. coli and L. monocytogenes presented different photoinactivation kinetics when suspended in the UHT whole milk or PBS (p < 0.0001). The resistance R factor was less than 1 (R < 1) in milk medium, with 0.82, 0.78, 0.88 and 0.81 for S. aureus, E. coli, L. monocytogenes and M. fortuitum, respectively, meaning that the strains were most sensitive to blue light in the initial times, when the photoinactivation was higher. When suspended in PBS, as occurred in the the milk medium, L. monocytogenes and E. coli presented R < 1 (0.87 and 0.81, respectively), whereas S. aureus and M. fortuitum demonstrated R > 1, i.e., 1.06 and 1.46, respectively, indicating higher photoinactivation resistance in the initial stages and higher sensibility as the irradiation time progressed. We concluded that blue light promoted in vitro photoinactivation of the strains of S. aureus, E. coli, L. monocytogenes and M.fortuitum, suspended in PBS and UHT whole milk. The photoinactivation by blue light presents an innovative approach and a promising and exciting alternative for microbial contamination control in dairy industry

Micobacteriose cutânea atípica felina autóctone no município do Rio de Janeiro-Brasil / Autochthonous Case of Feline Atypical Cutaneous Mycobacteriosis in the Municipality of Rio de Janeiro-Brazil

Background: Cutaneous mycobacterioses show a worldwide distribution and manifest as three forms: atypical mycobacteriosis, feline leprosy and cutaneous tuberculosis. Atypical cutaneous mycobacteriosis in cats is a rare disease commonly caused by fast-growing mycobacteria belonging group IV of the Runyon classification. This report describes for the first time an autochthonous case of atypical cutaneous mycobacteriosis in a cat from the municipality of Rio de Janeiro. Case: A castrated female mongrel cat presented multiple ulcerated, exudative and alopecic lesions in different regions of the body. After sedation of the animal with 1% acepromazine hydrochloride (0.1 mg/kg) and 10% ketamine hydrochloride (10 mg/kg), clinical examination was performed and an exudate was collected from the ulcerated skin lesion for cytopathological analysis and mycological culture. The slide containing the lesion impression was stained by a rapid panoptic method. For fungal culture, material was collected with a sterile swab, seeded onto Sabouraud dextrose agar containing chloramphenicol and mycobiotic agar, and incubated at 25ºC. After antisepsis and asepsis, local anesthesia was performed with 2% lidocaine hydrochloride without vasoconstrictor and a 4 mm punch biopsy was collected from the lesion, fixed in 10% buffered formalin and sent for histopathological analysis. No fungal structures were detected by cytopathological or mycological analysis. Histopathological examination revealed ulcerated skin and the presence of a marked and diffuse pyogranulomatous infiltrate in the superficial and deep dermis, which also involving the subcutaneous tissue and underlying muscle tissue. Grocott’s or PAS staining did not identify fungal structures. The Wade method was positive for acid-fast bacteria suggestive of Mycobacterium. Analysis of the hematological and biochemical profiles revealed no noteworthy alterations.(...)

Micobacteriose cutânea atípica felina autóctone no município do Rio de Janeiro-Brasil / Autochthonous Case of Feline Atypical Cutaneous Mycobacteriosis in the Municipality of Rio de Janeiro-Brazil

Background: Cutaneous mycobacterioses show a worldwide distribution and manifest as three forms: atypical mycobacteriosis, feline leprosy and cutaneous tuberculosis. Atypical cutaneous mycobacteriosis in cats is a rare disease commonly caused by fast-growing mycobacteria belonging group IV of the Runyon classification. This report describes for the first time an autochthonous case of atypical cutaneous mycobacteriosis in a cat from the municipality of Rio de Janeiro. Case: A castrated female mongrel cat presented multiple ulcerated, exudative and alopecic lesions in different regions of the body. After sedation of the animal with 1% acepromazine hydrochloride (0.1 mg/kg) and 10% ketamine hydrochloride (10 mg/kg), clinical examination was performed and an exudate was collected from the ulcerated skin lesion for cytopathological analysis and mycological culture. The slide containing the lesion impression was stained by a rapid panoptic method. For fungal culture, material was collected with a sterile swab, seeded onto Sabouraud dextrose agar containing chloramphenicol and mycobiotic agar, and incubated at 25ºC. After antisepsis and asepsis, local anesthesia was performed with 2% lidocaine hydrochloride without vasoconstrictor and a 4 mm punch biopsy was collected from the lesion, fixed in 10% buffered formalin and sent for histopathological analysis. No fungal structures were detected by cytopathological or mycological analysis. Histopathological examination revealed ulcerated skin and the presence of a marked and diffuse pyogranulomatous infiltrate in the superficial and deep dermis, which also involving the subcutaneous tissue and underlying muscle tissue. Grocotts or PAS staining did not identify fungal structures. The Wade method was positive for acid-fast bacteria suggestive of Mycobacterium. Analysis of the hematological and biochemical profiles revealed no noteworthy alterations.(...)(AU)

Avaliação da fervura na inativação de patógenos em leite integral de vaca, cabra e búfala experimentalmente contaminados / Milk boiling evaluation on inactivating pathogens in cow, goat and buffalo whole milk experimentally contaminated

A fervura do leite foi avaliada quanto à inativação de Staphylococcus aureus (ATCC 25923), Salmonella Typhimurium (ATCC 14028) e Mycobacterium fortuitum (NCTC 8573) inoculados em leite integral de vaca, cabra e búfala. As amostras de leite, previamente tratadas, foram contaminadas com os patógenos. Três repetições foram realizadas com cada tipo de leite. As amostras foram analisadas antes e depois da fervura e também após 24h sob refrigeração. As amostras foram diluídas em série e a metodologia oficial foi usada para quantificar Staphylococcus aureus, e adaptada para se obter o NMP de Salmonella. O número de UFC de Mycobacterium foi obtido em meio Löwenstein-Jensen, incubados a 37°C/5 dias. Antes da fervura, as amostras tinham entre 6,8 e 8,0 log UFC ou NMP/mL, de cada agente. Após a fervura, Staphylococcus foi recuperado em uma das 3 amostras de leite de vaca (1x10 UFC/mL), e Salmonella em todas as três amostras de leite de búfala (0,3 NMP/mL cada). Mycobacterium não foi detectado em nenhuma das analises realizadas após a fervura. As amostras fervidas e refrigeradas mostraram ausência de crescimento de todos os agentes. Nas condições estudadas, os resultados comprovam a efetividade da fervura do leite em reduzir o risco microbiológico a níveis mínimos.

The inactivation of Staphylococcus aureus (ATCC 25923), Salmonella Typhimurium (ATCC 14028) and Mycobacterium fortuitum (NCTC 8573) inoculated in cow, goat and buffalo whole milk submitted to the boiling was evaluated. Milk samples, previously treated, were contaminated with the pathogens and boiled. Tree replicates were performed with each kind of milk. Samples were analyzed immediately before and after the boiling, and also after 24h under refrigeration. Samples were serial diluted and official method was used to quantify Staphylococcus aureus, and it was adapted to get the MPN of Salmonella. The number of CFU of Mycobacterium was obtained on Löwenstein-Jensen medium, incubated to 37°C/5 days. Before boiling the milk samples had from 6.8 to 8.0 log CFU or MPN/mL, of each agent. After boiling, Staphylococcus was recovery in one of three cow milk samples (1x10 CFU/mL), and Salmonella in all three buffalo milk samples (0.3 MPN/mL each). Mycobacterium was not detected in any of analysis made after the boiling. Boiled and refrigerated samples showed no growth in all of them. Under the studied conditions, the results prove the effectiveness of domestic boiling to reduce biological risk to minimum levels.

Dermatite micobacteriana atípica em gato: relato de caso / Atypical mycobacterial dermatitis in cat: a case report

Relata-se, pela primeira vez no Brasil, um caso de dermatite decorrente de infecção por micobactéria atípica do complexo Mycobacterium fortuitum-peregrinum, em espécie felina, sem raça definida, fêmea, com cinco anos de idade. Há oito meses, evoluía com lesões maculares equimóticas, nodulares, erosadas, ulceradas, acompanhadas de fístulas exsudativas, com intenso prurido e algia. Evidenciou-se a presença de micobactéria do complexo Mycobacterium fortuitum-peregrinum (grupo IV de Runyon ) identificada após evidenciação histopatológica, cultivo bacteriano e por testes bioquímicos. Após dois meses de terapia sistêmica com enrofloxacina (5mg/kg/Bid/VO) e tópica (triclosan e rifamicina) houve involução das lesões, com efeitos colaterais discretos.(AU)

A case of dermatitis caused by atypical mycobateria of Mycobacterium fortuitum peregrinum complex was observed for the first time in Brazil. A five-year-old female mixed breed cat had a dermatitis process which had started eight months before. Lesions were characterized by macules, nodules, erosions, ulcers and exsudative fistulas, with intensive pruritus and pain. It had failed to respond to clinical treatment and surgical excision. The diagnosis was based on history, physical and dermatologic examination and complementary tests (cytologic, bacterioscopic, bacterial culture, histopathological, hemathological, ultrasonographic, radiographic and electrocardiographic). The presence of mycobacteria of Mycobacterium fortuitum-peregrinum complex (group IV of Runyon) was observed and identified after histopathological evidence, bacterial culture and biochemical tests. After two months of systemic therapy with enrofloxacin (5mg/kg, orally/twice a day) and topic treatment with triclosan and rifamicin, rapid improvement of the clinical appearance of the lesions were observed with low incidence of side-effects.(AU)

Micobacteriose cutânea atípica felina autóctone no município do Rio de Janeiro-Brasil

Background:  :  : Cutaneous mycobacterioses show a worldwide distribution and manifest as three forms: atypical mycobacteriosis, feline leprosy and cutaneous tuberculosis. Atypical cutaneous mycobacteriosis in cats is a rare disease commonly caused by fast-growing mycobacteria belonging group IV of the Runyon classification. This report describes for the first time an autochthonous case of atypical cutaneous mycobacteriosis in a cat from the municipality of Rio de Janeiro. Case: A castrated female mongrel cat presented multiple ulcerated, exudative and alopecic lesions in different regions of the body. After sedation of the animal with 1% acepromazine hydrochloride (0.1 mg/kg) and 10% ketamine hydrochloride (10 mg/kg), clinical examination was performed and an exudate was collected from the ulcerated skin lesion for cytopathological analysis and mycological culture. The slide containing the lesion impression was stained by a rapid panoptic method. For fungal culture, material was collected with a sterile swab, seeded onto Sabouraud dextrose agar containing chloramphenicol and mycobiotic agar, and incubated at 25ºC. After antisepsis and asepsis, local anesthesia was performed with 2% lidocaine hydrochloride without vasoconstrictor and a 4 mm punch biopsy was collected from the lesion, fixed in 10% buffered formalin and sent for histopathological analysis. No fungal structures we

Micobacteriose cutânea atípica felina autóctone no município do Rio de Janeiro-Brasil

Background:  :  : Cutaneous mycobacterioses show a worldwide distribution and manifest as three forms: atypical mycobacteriosis, feline leprosy and cutaneous tuberculosis. Atypical cutaneous mycobacteriosis in cats is a rare disease commonly caused by fast-growing mycobacteria belonging group IV of the Runyon classification. This report describes for the first time an autochthonous case of atypical cutaneous mycobacteriosis in a cat from the municipality of Rio de Janeiro. Case: A castrated female mongrel cat presented multiple ulcerated, exudative and alopecic lesions in different regions of the body. After sedation of the animal with 1% acepromazine hydrochloride (0.1 mg/kg) and 10% ketamine hydrochloride (10 mg/kg), clinical examination was performed and an exudate was collected from the ulcerated skin lesion for cytopathological analysis and mycological culture. The slide containing the lesion impression was stained by a rapid panoptic method. For fungal culture, material was collected with a sterile swab, seeded onto Sabouraud dextrose agar containing chloramphenicol and mycobiotic agar, and incubated at 25ºC. After antisepsis and asepsis, local anesthesia was performed with 2% lidocaine hydrochloride without vasoconstrictor and a 4 mm punch biopsy was collected from the lesion, fixed in 10% buffered formalin and sent for histopathological analysis. No fungal structures we

Influence of the organic matter on the mycobactericidal activity of five chemical disinfectants used for livestock / Influência da matéria orgânica na atividade micobactericida de cinco desinfetantes de uso pecuário

The influence of the organic matter on the mycobactericidal activity of five proprietary disinfectant of veterinary use was evaluated using a 0.0005% (moist weight) suspension of Mycobacterium fortuitum; the organic matter was represented either by bovine faeces or serun. The five disinfectant products tested uere: "A" - sodiun hypochloride; "B" - amixture of phenols and cresylic acid; "C" - a mixture of aldehydes; "D" - iodophor; "E" - phenolyc compounds. The contact period of each disinfectant with the suspension of M. fortuimm in the presence of the organic matter was 60 minutes at temperature between 4 to 8 ºC. The disinfectant action was interrupted after the established time using nutrient broth containing 5% sterilized rabbit serun added with 0.05% Tween 80 for the disinfectants "C", "D" and "E"; disinfectant "B" was neutralized with nutrient broth enriched with rabbit serun added with 3.0% Tween 80; disinfectant "A" was treated by 5% sodium thiosulphate added with 0.05% Tween 80. The isolation of the viable microorganisms was carried out by culturing in the Lowenstein-Jensen medium and counting the Colonies Forming Unit (CFU). Disinfectants "A", "B" and "C" were found to be highly effective even in the presence of the serun or faeces; the percentage of the CFU reduction was above 55.0% when compared to controls. Disinfectant "D" was found to have a varied behavior with

Tendo em vista que a maioria dos desinfetantes químicos tem a sua atuação antimicrobiana prejudicada pela presença de matéria orgânica, o objetivo do presente trabalho foi o de investigar, comparativamente, a influência da presença de fezes ou de soro de bovinos sobre a atividade micobactericida de desinfetantes químicos de uso pecuário. Foram ensaiados cinco desinfetantes: A - hipoclorito de sódio; B - combinação de fenóis e cresóis; C - combinação de aldeídos e amorno quaternário; D - iodóforo; E - composto fenólico. A suspensão microbiana foi representada por uma cultura de Mycobactenum fortuitum na concentração de 0,0005% (peso úmido). 0 período de atuação dos desinfetantes foi de 60 minutos, à temperatura de 4 a 8 C. A interrupção da ação dos desinfetantes foi estabelecida pelo emprego de inativantes. A recuperação dos microrganismos remanescentes foi obtida por cultivo em meio de Lowenstein-Jensen, com quantificação do número de unidades formadoras de colônias (U.F.C.). Os produtos "A", B" e "C" revelaram possuir atividade micobactericida em presença de matéria orgânica, com percentuais de redução do número de U.F.C. em relação aos controles, superiores a 55,0%. O produto "D" apresentou variabilidade de comportamento frente ao sistema de ensaio adotado. 0 produto "E" mostrou-se destituído de poder micobactericida. A despeito de apresentar percentuais de redução de U.F.C

Estudo comparativo entre a eficiência da filagem da Mozzarella e da pasteurização lenta do leite na inativação do Mycobacterium fortuitum e da Listeria monocytogenes experimentalmente inoculados no leite de búfala / Comparative study between the efficiency of the Mozzarella stretching and the holder pasteurization of milk in the inhibition of the Mycobacterium fortuitum and the Listeria monocytogenes experimentally inoculated into buffalo milk

Leite integral de búfala foi experimentalmente contaminado com Mycobacterium fortuitum e Listeria monocytogenes. Foi feita a análise quantitativa dos agentes imediatamente antes e depois de dois tratamentos térmicos: pasteurização (do leite) e filagem (da Mozzarella). Na análise da Listeria, foi empregada metodologia adaptada para a obtenção do NMP, usando os meios UVM, Fraser e Palcam como pré-enriquecimento, enriquecimento seletivo e isolamento, respectivamente. O Mycobacterium foi semeado em placas com meio Löwenstein-Jensen modificado. Os resultados mostraram que a pasteurização do leite reduziu em média 6,0 log NMP/mL de Listeria sp e 4,0 log UFC/mL de Mycobacterium sp. A filagem da coalhada reduziu em média 8,37 log NMP/g de Listeria sp e 6,3 log UFC/g de Mycobacterium sp. Concluiu-se que a filagem da Mozzarella foi mais eficiente que a pasteurização do leite na redução do inóculo de Listeria monocytogenes e Mycobacterium fortuitum em cerca de 2 logaritmos de cada agente

Whole buffalo milk was experimentally contaminated with Mycobacterium fortuitum and Listeria monocytogenes. The quantitative analysis of the agents was made immediately before and after two thermal treatments: pasteurization (of milk) and stretching (of Mozzarella). In the analysis of the Listeria, methodology adapted for the attainment of the MPN was used, employing UVM, Fraser and Palcam as not selective enrichment, selective enrichment and isolation, respectively. The Mycobacterium was plated onto modified Löwenstein-Jensen. The results had shown that the pasteurization of milk reduced 6,0 log MPN/mL Listeria sp on average, and 4,0 log CFU/mL de Mycobacterium sp. The stretching of the curd reduced 8,37 log MPN/g de Listeria sp on average, and 6,3 log CFU/g de Mycobacterium sp. It has been concluded that the stretching of Mozzarella was more efficient than the pasteurization of milk in the reduction of Listeria monocytogenes inoculum and Mycobacterium fortuitum in about 2 logarithms of each agent

Efeito da gordura do leite de vaca sobre o valor D65ºC do Mycobacterium fortuitum (NCTN 8573) / Effect of fat ratio of whole and skim cow milk on thermal resistance of Mycobacterium fortuitum (NCTC 8573)

O presente trabalho objetivou avaliar o efeito da gordura do leite bovino na resistência térmica do Mycobacterium fortuitum. Amostras de leite bovino integral e desnatado foram contaminadas com inóculo padronizado de M. fortuitum, atingindo a concentração de aproximadamente 107 UFC/mL de leite, e submetidas à pasteurização lenta (65ºC/30mim.). Foi realizada a contagem do agente nos tempos 0, 5, 10, 15, 20, 25 e 30 minutos de pasteurização (em meio Lowenstein-Jensen, incubação a 37ºC/5 dias), e os resultados, em logarítmo, foram plotados em diagrama de dispersão com posterior regressão linear para construção da curva de sobreviventes (ou curva de morte térmica). Foram obtidas 3 curvas para o leite integral e 3 para o leite desnatado, porém, para o cálculo do valor D65ºC, utilizou-se a melhor reta obtida para cada tipo de leite. Encontraram-se valores D65ºC do Mycobacterium fortuitum iguais a 18,02 minutos para o leite integral e 7,82 minutos para o desnatado; a gordura do leite influenciou no padrão da curva de morte térmica e teve efeito protetor sobre o M. fortuitum. Conclui-se que a pasteurização lenta é capaz de reduzir 3,85 log de M. fortuitum em leite desnatado e 1,67 log em leite integral, resultando em diferentes níveis de segurança ao consumidor

This study aimed to evaluate the effect of cow milk fat on the thermal resistance of Mycobacterium fortuitum. Samples of whole and skim cow milk were contaminated with a standardized inoculum of M. fortuitum, until 107 cfu/mL, and heated at 65ºC/30 minutes (Holder Pasteurization). It was repeated tree times, with milk (whole and skim) from the same animal. Survivors were enumerated by plate count method, after heating for 0, 5, 10, 15, 20, 25 and 30 minutes (in Lowenstein-Jensen medium, incubation at 37ºC/5 days) and the logarithmic results were plotted on dispersion diagram with posterior linear regression for the construction of the survivors? curve (or thermal death curve). Those data resulted on 3 curves for the whole milk and 3 for the skim milk, although, for the D65ºC value calculation, it was selected the best-fit line for each kind of milk. The D65ºC value for Mycobacterium fortuitum achieved was 18,02 minutes for the whole milk and 7,82 minutes for the skim milk; the milk fat influenced the pattern of thermal death curve and had a protective effect on the M. fortuitum. It was inferred that the holder pasteurization (65ºC/30 min) is capable to reduce 3,85 log of the M. fortuitum at skim milk and 1,67 log at whole milk, resulting in different security levels for the customers

Efeito da gordura do leite de cabra sobre o valor D65oC do Mycobacterium fortuitum (NCTN 8573) / Effect of fat goat milk on value D65oC of Mycobacterium fortuitum (NCTN 8573)

O presente trabalho objetivou avaliar o efeito da gordura do leite caprino na resistência térmica do Mycobacterium fortuitum. A realização desta pesquisa é motivada pelos seguintes fatos: 1. a pasteurização lenta é amplamente utilizada para o beneficiamento do leite caprino destinado ao consumo e industrialização; 2. o binômio tempo x temperatura foi estabelecido com base na resistência térmica do Mycobacterium ssp; 3. o valor D expressa o tempo que se leva, a uma dada temperatura, para se reduzir um ciclo logarítmico de um microrganismo; 4. a gordura exerce efeito protetor sobre os microrganismos; 5. M. fortuitum é a espécie recomendada para testes iniciais, por ser menos patogênica e de crescimento rápido. Foram realizados dois experimentos (um com leite integral e outro com leite desnatado, com três repetições cada), utilizando-se amostras de cabras sadias. As amostras foram contaminadas com inóculo previamente padronizado e distribuídas em oito tubos com tampa, que foram submetidos a tratamento térmico em banho-maria à 65oC. Realizou-se a contagem das UFC/mL do leite contaminado antes do tratamento térmico (controle da contaminação) e dos tubos retirados nos tempos 0, 5, 10, 15, 20, 25 e 30 minutos. Realizou-se a diluição seriada até 10-7, com posterior semeadura em duplicata em placas de petri com meio Lowenstein-Jensen, incubadas por cinco dias à oC. Os resultados, em logarítmo, foram plotados em diagrama de dispersão, com posterior regressão linear para construção da curva de sobreviventes (ou curva de morte térmica), o valor D65oC foi calculado a partir da equação da reta obtida em cada repetição, e também a melhor curva obtida a partir das três repetições. Através dos resultados obtidos no presente trabalho obteve-se o valor D65oC do Mycobacterium fortuitum em leite caprino integral de 10,2 minutos e 8,61 minutos para o leite desnatado. Isso mostra que, na condição estudada a pasteurização lenta é capaz de reduzir 3,48 log de M. fortuitum em leite desnatado, e apenas 2,94 log em leite integral e, portanto, resultará em diferentes níveis de segurança ao consumidor. A variação nos valores D65oC observadas neste trabalho sugerem que a gordura não é a única responsável por essa diferença, pois houve variação entre as repetições realizadas no mesmo substrato. A variação entre os resultados em leite integral pode ser atribuída, pelo menos em parte, à composição da gordura que têm influência na resistência térmica dos microrganismos. A gordura do leite interfere negativamente na eficiência da pasteurização lenta sobre destruição de M. fortuitum. A importância dessa informação para a saúde pública é dependente, em primeiro lugar, da comprovação de que esse fenômeno é comum às espécies patogênicas de micobactérias, e determinar sua intensidade. A gordura não interfere no padrão de morte térmica no leite de cabra

This work describes the results obtained to evaluate the effect of fat goat milk on thermal resistance of Mycobacterium fortuitum. This research is motivated for the following motives: 1. The holder pasteurization is extensive method using for the processing goat milk destined for consumption and industrialization; 2. The couple time x temperature was established for the thermal resistance of Mycobacterium ssp; 3. The value D express the necessary time, in a given temperature, to reduce a logarithmic cycle of microorganism; 4. The fat causes a protecting effect on the microorganisms; 5. Mycobacterium fortuitum is the specie recommended for beginnings tests, because it is less pathogenic and have fast growth. Two experiments were done (one using raw goat milk and another using skim goat milk, with three repetition each). The samples were contaminated with previous standard inoculum and distributed in eight tubes, that had been submitted a thermal treatment in water-bath in 65°C. The cfu/mL were counted in the contamined milk before the thermal treatment (contamination control) and the tubes pulled off in the times: 0, 5, 10, 15, 20, 25 e 30 minutes. Following was realized a series diluted until 10-7, with later spreaded in duplicate petri plates with medium Lowestein Jensen, incubated for five days in 37°C. The results obtained were represented in a logarithmic graph of dispersion diagram, with posterior linear regression for the construction survivor?s curve (or death thermal curve), the value D65oC was calculated from the equation of the straight line obtained in each repetition, and the best straight line obtained from the three repetitions too. Through the results obtained in the present work get a value D65oC of Mycobacterium fortuitum in raw goat milk the 10,2 minutes, and 8,61 minutes for skim goat milk, this mean that in these study conditions, the holder pasteurization is able to reduce 3,48 log of Mycobacterium fortuitum in skim milk and only 2,94 log in raw milk, and thus results in different security levels for the consumers. The variation observed in the values D65oC obtained in this work suggest that the fat doesn?t a unique responsible for this difference, because have a variation among the repetitions done in the same substrate. The variation between the results in raw milk can be attribute, in part, for the composition of fat that have a influence on the thermal resistance in the microorganisms. The fat milk interferes negatively in the holder pasteurization effective about the Mycobacterium fortuitum destruction. The importance on this information for the public health is dependent, in first moment, the proved that this phenomenon is common for the micobacteria pathogenic species, and determined its intensity. The fat doesn't interfere in the standard thermal death in the goat milk