Resumo
Oeceoclades maculata is a terrestrial orchid species that has potential for commercial purposes. Taking that into consideration, the present investigation aimed at studying its germination and initial development in vitro as well as its acclimatization. The influence of Murashige and Skoog (MS), Knudson C (KC), and Vacin and Went (VW) media in the presence and absence of 0.3% activated charcoal on in vitro germination and protocorm development were investigated. The effects of different concentrations of BA in combination with 0.5 mg L-1 NAA on seedling multiplication and growth were evaluated. The possibility of using dark-grown stem segments for micropropagation and acclimatization under laboratory and field conditions was also assessed. The results indicated that the most adequate media for germination were full-strength MS enriched with activated charcoal or KC supplemented with 1.5 mg L-1 BA in combination with 0.5 mg L-1 NAA. In terms of protocorm development, KC supplemented with 1.5 mg L-1 BA alone or in combination with 0.5 mg L-1 NAA provided the best results. The addition of 1.5 mg L-1 BA in combination with 0.5 mg L-1 NAA to KC medium favored the best results for seedling multiplication and development. The use of dark-grown stem segments is a viable alternative for the micropropagation of O. maculata. Regarding acclimatization, 100% survival of plants was observed during the initial phases and under field conditions average survival was 53.33%.(AU)
Assuntos
Técnicas In Vitro , Germinação , Orchidaceae , AclimataçãoResumo
In this study, through a rapid assessment, we evaluated differences in richness, abundance, species composition and beta diversity of Euglossini bees in preserved areas and areas altered by riverine human populations in the Caxiuanã National Forest (northern Amazon). Our hypotheses were: i) the species richness, diversity, abundance and composition of Euglossini bees differ between the preserved and altered areas because many species are intolerant to small anthropic disturbances; and ii) areas altered by riverine populations have higher values ââof beta diversity (species dissimilarity between sites) than preserved areas, due to local changes in habitat and increased heterogeneity between sites. We sampled two areas (preserved and altered) and, in each area, four transects were sampled with odorous baits. We used a Student's t test to evaluate differences in richness, abundance, and Shannon-Wiener diversity index. We also evaluated differences in composition and differences in beta diversity between areas. We collected 102 specimens, identified in 18 species and three genera, 63 individuals (61.8% of the total) in preserved areas and 39 individuals (38.2%) in altered areas. Euglossa liopoda (Dressler, 1982) was the most abundant in altered areas and Euglossa imperialis (Cockerell, 1922) the most abundant in preserved areas. Species richness was 2.5 times greater in the transects of preserved areas, and species composition also differed between the sampled areas. In contrast, species abundance did not differ between transects of both areas. Despite our small sample size, this study demonstrated that the richness, composition and beta diversity of Euglossini bees can be potentially affected by local changes in habitat caused by small-scale activities provided by traditional Amazonian groups. Our results indicate the urgency for more comprehensive studies aimed to investigate these relationships.
Neste estudo, por meio de uma avaliação rápida, investigamos diferenças na riqueza, abundância, composição de espécies e diversidade beta de abelhas Euglossini em áreas preservadas e áreas alteradas por populações ribeirinhas na Floresta Nacional de Caxiuanã (norte da Amazônia). Nossas hipóteses foram: i) a riqueza de espécies, diversidade, abundância e composição das abelhas Euglossini diferem entre as áreas preservadas e alteradas, uma vez que muitas espécies são intolerantes a pequenos distúrbios antrópicos; e ii) áreas alteradas por populações ribeirinhas apresentam maiores valores de diversidade beta (dissimilaridade de espécies entre locais) do que áreas preservadas, devido às mudanças locais no habitat e aumento da heterogeneidade entre locais. Amostramos duas áreas (preservadas e alteradas) e, em cada área, foram amostrados quatro transectos com iscas odoríferas. Nós utilizamos testes t de Student, para avaliar diferenças de riqueza, abundância e índice de diversidade de Shannon-Wiener. Também avaliamos as diferenças na composição e as diferenças na diversidade beta entre as áreas. Foram coletados 102 espécimes, em 18 espécies e três gêneros, 63 deles (61,8%) em áreas preservadas e 39 (38,2%) em áreas alteradas. Euglossa liopoda (Dressler, 1982) foi a mais abundante nas áreas alteradas e Euglossa imperialis (Cockerell, 1922) nas áreas preservadas. A riqueza foi 2,5 vezes maior nos transectos de áreas preservadas, e a composição de espécies também diferiu entre as áreas amostradas. Em contraste, a abundância de espécies não foi diferente entre os transectos das duas áreas. Apesar de nosso esforço amostral reduzido, nossos resultados demonstram que a riqueza, composição e diversidade beta das abelhas Euglossini podem potencialmente ser afetadas por mudanças locais no habitat causadas por atividades de pequena escala fornecidas por grupos tradicionais da Amazônia. Esses resultados indicam a urgência por estudos mais extensos no sentido de investigar as relações aqui estudadas.
Assuntos
Animais , Abelhas/classificação , Alteração Ambiental , Meio AmbienteResumo
Potted flower production is an important floricultural activity. However, there have been few studies on the fertilization management of orchids. Fertigation with urea and potassium chloride is feasible, but little information is available regarding the interaction of these fertilizers with other sources of nutrients. Thus, the present study evaluated the effects of application of bokashi and a simple superphosphate and their interactions with fertigation on the growth and nutrition of hybrid Cattleya. Seedlings of Laeliocattleya Drumbeat × Laeliocattleya Gold Digger hybrid were submitted to two ferti-irrigation levels (absent and present) using urea and potassium chloride as nitrogen and potassium sources, respectively. As complementary fertilization, bokashi and superphosphate were applied singly and in combination. A commercial fertilizer (Peters®) was used as an additional control. Fertigation increased plant height; leaf area; number, length, and diameter of pseudobulbs; dry mass of leaves, pseudobulbs, and roots; and content of chlorophyll, carotenoid, and nitrogen. The application of bokashi resulted in dry mass gain in all plant organs. The combination of fertigation and bokashi was superior to the commercial fertilizer in terms of increased leaf area, chlorophyll A content, carotenoid content, and dry mass.
A produção de flores em vaso é uma importante atividade da floricultura. Todavia, são escassos os estudos sobre o manejo da fertilização em orquídeas. A fertirrigação com ureia e cloreto de potássio é uma prática comum; porém, pouco se sabe sobre suas interações com outras fontes de nutrientes. Nesse sentido, o objetivo do presente estudo foi avaliar o efeito do bokashi e do superfosfato simples e suas interações com a fertirrigação no crescimento e nutrição de um híbrido de Cattleya. Mudas do híbrido entre Laeliocattleya Drumbeat × Laeliocattleya Gold Digger foram submetidas à dois regimes de fertirrigação (ausência e presente) utilizando ureia e cloreto de potássio como fonte de nitrogênio (N) e potássio (K), respectivamente. Além disso, como fertilização complementar foi utilizado o bokashie superfosfato, aplicados isolados e em combinação. O fertilizante comercial Peters® foi utilizado como testemunha adicional. A fertirrigação propiciou incrementos na altura, área foliar, número, comprimento e diâmetro dos pseudobulbos, bem como na massa seca de folhas, pseudobulbos e raízes, além de aumento nos teores de clorofila, carotenoides e teor de N. O uso do bokashi resultou em ganhos na massa seca em todos os órgãos da planta. A utilização combinada entre a fertirrigação e bokashi foi superior ao fertilizante comercial para as características área foliar, teor de clorofila A, carotenoides, além das características de massa seca.
Assuntos
Fertilizantes/efeitos adversos , Flores/crescimento & desenvolvimento , Flores/metabolismoResumo
Potted flower production is an important floricultural activity. However, there have been few studies on the fertilization management of orchids. Fertigation with urea and potassium chloride is feasible, but little information is available regarding the interaction of these fertilizers with other sources of nutrients. Thus, the present study evaluated the effects of application of bokashi and a simple superphosphate and their interactions with fertigation on the growth and nutrition of hybrid Cattleya. Seedlings of Laeliocattleya Drumbeat × Laeliocattleya Gold Digger hybrid were submitted to two ferti-irrigation levels (absent and present) using urea and potassium chloride as nitrogen and potassium sources, respectively. As complementary fertilization, bokashi and superphosphate were applied singly and in combination. A commercial fertilizer (Peters®) was used as an additional control. Fertigation increased plant height; leaf area; number, length, and diameter of pseudobulbs; dry mass of leaves, pseudobulbs, and roots; and content of chlorophyll, carotenoid, and nitrogen. The application of bokashi resulted in dry mass gain in all plant organs. The combination of fertigation and bokashi was superior to the commercial fertilizer in terms of increased leaf area, chlorophyll A content, carotenoid content, and dry mass.(AU)
A produção de flores em vaso é uma importante atividade da floricultura. Todavia, são escassos os estudos sobre o manejo da fertilização em orquídeas. A fertirrigação com ureia e cloreto de potássio é uma prática comum; porém, pouco se sabe sobre suas interações com outras fontes de nutrientes. Nesse sentido, o objetivo do presente estudo foi avaliar o efeito do bokashi e do superfosfato simples e suas interações com a fertirrigação no crescimento e nutrição de um híbrido de Cattleya. Mudas do híbrido entre Laeliocattleya Drumbeat × Laeliocattleya Gold Digger foram submetidas à dois regimes de fertirrigação (ausência e presente) utilizando ureia e cloreto de potássio como fonte de nitrogênio (N) e potássio (K), respectivamente. Além disso, como fertilização complementar foi utilizado o bokashie superfosfato, aplicados isolados e em combinação. O fertilizante comercial Peters® foi utilizado como testemunha adicional. A fertirrigação propiciou incrementos na altura, área foliar, número, comprimento e diâmetro dos pseudobulbos, bem como na massa seca de folhas, pseudobulbos e raízes, além de aumento nos teores de clorofila, carotenoides e teor de N. O uso do bokashi resultou em ganhos na massa seca em todos os órgãos da planta. A utilização combinada entre a fertirrigação e bokashi foi superior ao fertilizante comercial para as características área foliar, teor de clorofila A, carotenoides, além das características de massa seca.(AU)
Assuntos
Flores/crescimento & desenvolvimento , Flores/metabolismo , Fertilizantes/efeitos adversosResumo
O presente trabalho teve como objetivo avaliar diferentes substratos no cultivo da espécie Cyrtopodium cardiochilum (Orchidaceae). As plantas foram cultivadas em vasos de polietileno, em casa de vegetação com tela de sombreamento de polipropileno de 60% de retenção de luminosidade. Os tratamentos constituíram-se de brita de gnaisse (granulometria variando de 8-15 mm), argila expandida (15-22 mm de diâmetro), seixo rolado (8-15 mm), casca de coco em cubos (coxim) e vermiculita. Foram analisadas também as combinações de brita e argila expandida, brita e seixo, argila expandida e seixo, na proporção 1:1 (v/v); brita, argila expandida e seixo na proporção 1:1:1 (v/v/v); e brita, argila expandida, seixo e vermiculita na proporção 1:1:1:1 (v/v/v/v). Após seis meses de instalação do experimento foram avaliadas as seguintes variáveis: altura das plantas, diâmetro dos pseudobulbos, número de folhas, produção de massa de matéria seca total (MST), da parte aérea (MSPA) e do sistema radicular (MSR). Utilizou-se o delineamento experimental em blocos casualizados, composto por nove tratamentos e oito repetições. Não houve diferença entre os tratamentos para: altura de planta, número de folhas, diâmetro dos pseudobulbos e MSR. Para a MSPA e MST observou-se diferença entre os substratos, com destaque para o tratamento argila expandida + brita de gnaisse. Conclui-se que todos os substratos utilizados podem ser utilizados no cultivo de C. cardiochilum, destacando-se o substrato argila expandida + brita de gnaisse na proporção de 1:1 (v/v).
This study aimed to evaluate the effect of different substrates in the cultivation of the species Cyrtopodium cardiochilum (Orchidaceae). Plants were grown in plastic pots in a greenhouse with 60% shading, obtained through a polypropylene mesh black type "shading". The treatments consisted of gneiss gravel (grain size ranging from 8-15 mm), expanded clay (15-22 mm diameter), pebbles (8-15 mm), coconut cubes (cushion) and vermiculite. The combinations of gravel and expanded clay, gravel and pebble, expanded clay and pebble, in a 1:1 (v/v); gravel, expanded clay and pebble in the proportion 1:1:1 (v/ v/v); and gravel, expanded clay, vermiculite and pebble in the proportion 1:1:1:1 (v/v/v/v) were also tested. After six months of trial installation the variables were evaluated: plant height, diameter of the pseudobulbs, number of leaves, mass production of total dry matter (TDM) and shoot (DMS) and root system (DMRS) dry matter. It was used the experimental randomized block design, consisting of nine treatments and eight repetitions. There was no difference between treatments for: plant height, leaf number, diameter of the pseudobulbs and DMRS. For the DMS and TDM was observed difference between the substrates, especially for the treatment expanded clay + gravel gneiss. It concluded that all tested substrates may be used in cultivation of C. cardiochilum, high lighting the substrate expanded clay + gneiss gravel in the ratio 1:1 (v/v).
Assuntos
Flores/crescimento & desenvolvimento , Flores/fisiologia , Orchidaceae/crescimento & desenvolvimento , Orchidaceae/fisiologia , Substratos para Tratamento Biológico/métodosResumo
O presente trabalho teve como objetivo avaliar diferentes substratos no cultivo da espécie Cyrtopodium cardiochilum (Orchidaceae). As plantas foram cultivadas em vasos de polietileno, em casa de vegetação com tela de sombreamento de polipropileno de 60% de retenção de luminosidade. Os tratamentos constituíram-se de brita de gnaisse (granulometria variando de 8-15 mm), argila expandida (15-22 mm de diâmetro), seixo rolado (8-15 mm), casca de coco em cubos (coxim) e vermiculita. Foram analisadas também as combinações de brita e argila expandida, brita e seixo, argila expandida e seixo, na proporção 1:1 (v/v); brita, argila expandida e seixo na proporção 1:1:1 (v/v/v); e brita, argila expandida, seixo e vermiculita na proporção 1:1:1:1 (v/v/v/v). Após seis meses de instalação do experimento foram avaliadas as seguintes variáveis: altura das plantas, diâmetro dos pseudobulbos, número de folhas, produção de massa de matéria seca total (MST), da parte aérea (MSPA) e do sistema radicular (MSR). Utilizou-se o delineamento experimental em blocos casualizados, composto por nove tratamentos e oito repetições. Não houve diferença entre os tratamentos para: altura de planta, número de folhas, diâmetro dos pseudobulbos e MSR. Para a MSPA e MST observou-se diferença entre os substratos, com destaque para o tratamento argila expandida + brita de gnaisse. Conclui-se que todos os substratos utilizados podem ser utilizados no cultivo de C. cardiochilum, destacando-se o substrato argila expandida + brita de gnaisse na proporção de 1:1 (v/v).(AU)
This study aimed to evaluate the effect of different substrates in the cultivation of the species Cyrtopodium cardiochilum (Orchidaceae). Plants were grown in plastic pots in a greenhouse with 60% shading, obtained through a polypropylene mesh black type "shading". The treatments consisted of gneiss gravel (grain size ranging from 8-15 mm), expanded clay (15-22 mm diameter), pebbles (8-15 mm), coconut cubes (cushion) and vermiculite. The combinations of gravel and expanded clay, gravel and pebble, expanded clay and pebble, in a 1:1 (v/v); gravel, expanded clay and pebble in the proportion 1:1:1 (v/ v/v); and gravel, expanded clay, vermiculite and pebble in the proportion 1:1:1:1 (v/v/v/v) were also tested. After six months of trial installation the variables were evaluated: plant height, diameter of the pseudobulbs, number of leaves, mass production of total dry matter (TDM) and shoot (DMS) and root system (DMRS) dry matter. It was used the experimental randomized block design, consisting of nine treatments and eight repetitions. There was no difference between treatments for: plant height, leaf number, diameter of the pseudobulbs and DMRS. For the DMS and TDM was observed difference between the substrates, especially for the treatment expanded clay + gravel gneiss. It concluded that all tested substrates may be used in cultivation of C. cardiochilum, high lighting the substrate expanded clay + gneiss gravel in the ratio 1:1 (v/v).(AU)
Assuntos
Orchidaceae/crescimento & desenvolvimento , Orchidaceae/fisiologia , Substratos para Tratamento Biológico/métodos , Flores/crescimento & desenvolvimento , Flores/fisiologiaResumo
The aim of the present study was to induce the formation of somatic embryos in protocorms from Phalaenopsis Classic Spotted Pink hybrids at two physiological maturation stages, namely: 80 and 120 days after seed inoculation (DASI). Protocorms were inoculated in ½ MS medium supplemented with 0.1 mg L-¹ ANA and 3 mg L-¹ TDZ. Protocorms were inoculated 120 days after sowing were more developed at the 15th cultivation day due to the formation of pro-embryogenic structures. It was possible seeing the formation of globular- and torpedo-stage somatic embryos at the 30th day of cultivation in somatic embryogenesis (SE) induction medium. The protocorms inoculated at the 80th DASI did not formed somatic embryos; they oxidized 20 days after cultivation in SE-induction medium. The formation of somatic embryos happened directly on the explant, thus characterizing a direct somatic embryogenesis. The embryos converted into plants when the somatic embryos were transferred to the nutrient medium containing no growth regulator. Therefore, it was concluded that the somatic embryos induction from protocorms 120 days after sowing was positive, since the embryos were able to become plants and presented vegetative organs with morphological traits similar to those of the matrix plant.(AU)
O presente estudo buscou induzir a formação de embriões somáticos em protocormos do híbrido Phalaenopsis Classic Spotted Pink em dois estádios de maturação fisiológica aos 80 e 120 dias após a inoculação das sementes (DAIS). Os protocormos foram inoculados em meio ½ MS suplementado com 0,1 mg L-¹ de ANA e 3 mg L-¹ de TDZ. Aos 15 dias de cultivo os protocormos, inoculados aos 120 dias após a semeadura, apresentavam estádio mais desenvolvido, apresentando formação de estruturas pró-embriogênicas. Aos 30 dias de cultivo em meio de indução de ES observou-se a formação de embriões somáticos na fase globular e torpedo. Os protocormos inoculados com 80 DAIS não evoluíram para a formação de embriões somáticos, ocorrendo a oxidação destes aos 20 dias após o cultivo em meio de indução de ES. A formação dos embriões somáticos ocorreu diretamente no explante, caracterizando uma embriogênese somática direta. Quando os embriões somáticos foram transferidos para o meio nutritivo sem regulador de crescimento, houve a conversão em plantas. Diante disso, conclui-se que a indução de embriões somáticos a partir de protocormos com 120 dias após a semeadura, foi positiva, em que os embriões obtidos apresentaram competência em converter-se em plantas, apresentando os órgãos vegetativos com características morfológicas satisfatórias.(AU)
Assuntos
Orchidaceae/crescimento & desenvolvimento , Desenvolvimento EmbrionárioResumo
Euglossa Latreille, 1802 do not live in large colonies, and these are usually maintained or "reactivated" by new females, subordinate to their mother, which construct and provision brood cells. This study aimed to obtain information about the natural history of Euglossa cordata (Linnaeus, 1758) specially focusing on nest behavior. Our specific objective was to answer the following question: do E. cordata females reside in a single nest? We construct 14 artificial nesting boxes and made them available for E. cordata bees in natural environment for seven months. During this time, we use a re-marking method to identify bee fidelity to a single nest box. More specifically, we record bee permanence in the nests, the time bees take to provision brood to new cells and the time taken to offspring emergence. A total of 12 boxes were colonized by E. cordata and 23 cells were built in an average of 9.78 ± 11 days per cell. Eleven females emerged from the cells in 48.6 ± 11 days. Although adult females moved between nests and sometimes used multiple nests at the same time, E. cordata showed a relatively high fidelity to a single nest (81.1% of the female bees stayed in a single nest more than 50% of time).
Abelhas Euglossa Latreille, 1802 não vivem em grandes colônias, e estas geralmente são mantidas ou "reativadas" por novas fêmeas, subordinadas à mãe, que constroem e fornecem células de cria. Este estudo teve como objetivo obter informações sobre o tempo que as abelhas levam para prover novas células, sobre a emergência e permanência das abelhas nos ninhos, bem como o número de ninhos construídos por cada uma. Durante sete meses observamos fêmeas em 14 caixas vazias de madeira (5,7 x 5,7 x 7,0 cm), disponibilizadas para nidificação das abelhas. O método de remarcação foi utilizado quando uma abelha foi encontrada pela primeira vez nas caixas ou para cada nova abelha filha após a sua emergência. Um total de 12 caixas foi colonizada por Euglossa cordata (Linnaeus, 1758) e 23 células foram construídas em 9,78 ± 11 dias por célula. Onze fêmeas emergiram das células em 48,6 ± 11 dias. Dois imaturos morreram e dois foram parasitados por Bombyliidae. Apesar de que as fêmeas adultas de E. cordata moveram-se entre ninhos e às vezes usaram vários ninhos de uma só vez, elas demonstraram uma fidelidade relativamente alta a um único ninho (81.1% dessas fêmeas permaneceram mais de 50% do tempo em um único ninho).
Assuntos
Feminino , Animais , Abelhas/crescimento & desenvolvimento , Comportamento de NidaçãoResumo
ABSTRACT Euglossa Latreille, 1802 do not live in large colonies, and these are usually maintained or reactivated by new females, subordinate to their mother, which construct and provision brood cells. This study aimed to obtain information about the natural history of Euglossa cordata (Linnaeus, 1758) specially focusing on nest behavior. Our specific objective was to answer the following question: do E. cordata females reside in a single nest? We construct 14 artificial nesting boxes and made them available for E. cordata bees in natural environment for seven months. During this time, we use a re-marking method to identify bee fidelity to a single nest box. More specifically, we record bee permanence in the nests, the time bees take to provision brood to new cells and the time taken to offspring emergence. A total of 12 boxes were colonized by E. cordata and 23 cells were built in an average of 9.78 ± 11 days per cell. Eleven females emerged from the cells in 48.6 ± 11 days. Although adult females moved between nests and sometimes used multiple nests at the same time, E. cordata showed a relatively high fidelity to a single nest (81.1% of the female bees stayed in a single nest more than 50% of time).
RESUMO Abelhas Euglossa Latreille, 1802 não vivem em grandes colônias, e estas geralmente são mantidas ou reativadas por novas fêmeas, subordinadas à mãe, que constroem e fornecem células de cria. Este estudo teve como objetivo obter informações sobre o tempo que as abelhas levam para prover novas células, sobre a emergência e permanência das abelhas nos ninhos, bem como o número de ninhos construídos por cada uma. Durante sete meses observamos fêmeas em 14 caixas vazias de madeira (5,7 x 5,7 x 7,0 cm), disponibilizadas para nidificação das abelhas. O método de remarcação foi utilizado quando uma abelha foi encontrada pela primeira vez nas caixas ou para cada nova abelha filha após a sua emergência. Um total de 12 caixas foi colonizada por Euglossa cordata (Linnaeus, 1758) e 23 células foram construídas em 9,78 ± 11 dias por célula. Onze fêmeas emergiram das células em 48,6 ± 11 dias. Dois imaturos morreram e dois foram parasitados por Bombyliidae. Apesar de que as fêmeas adultas de E. cordata moveram-se entre ninhos e às vezes usaram vários ninhos de uma só vez, elas demonstraram uma fidelidade relativamente alta a um único ninho (81.1% dessas fêmeas permaneceram mais de 50% do tempo em um único ninho).
Resumo
Tissue culture techniques have been employed for orchid mass propagation by means of themorphogenetic route of protocorm like-bodies (PLBs). This study aimed to analyze and compare Indoleaceticacid (IAA) and sugar endogenous levels in protocorm-like bodies (PLBs) induction and developmentin Cattleya tigrina, in order to better understand this process and to optimize micropropagation procedureprotocols. Leaves grown on MS (Murashige and Skoog) culture medium, suplemented with 9 μM TDZfor PLBs induction and development were collected after 0, 2, 7, 14, 30, 60 and 100 days of cultivation, forfurther analysis. Increase of IAA and reduction of sugar levels are strongly related to morphogeneticresponse, that is, PLBs formation over the preexisting ones and leaf primordia formation. Sucrose, fructoseand glucose presence in this study is related to cell signaling. Thus, hormonal signals and carbohydratesalter metabolism, triggering PLBs initiation and development in C. tigrina.(AU)
Técnicas de cultura de tecidos têm sido empregadas para a propagação em massa de orquídeaspor meio da via morfogenética de estruturas semelhantes a protocormos (ESPs). O estudo teve comoobjetivo analisar e comparar os níveis endógenos de ácido indol-3-acético (AIA) e de açúcares na indução eno desenvolvimento de estruturas semelhantes a protocormos (ESPs) em Cattleya tigrina, visando à melhorcompreensão deste processo e à otimização de protocolos de micropropagação. Folhas cultivadas em meiode cultura MS (Murashige & Skoog), suplementadas com 9 μM de TDZ para indução e desenvolvimentode ESPs foram coletadas após 0, 2, 7, 14, 30, 60 e 100 dias de cultivo, para posterior análise. O aumento dosníveis de AIA e a redução dos níveis de açúcar estão fortemente relacionados à resposta morfogenética, ouseja, à formação de ESPs sobre os pré-existentes e à formação de primórdios foliares. A presença desacarose, frutose e glicose neste estudo está relacionada à sinalização celular. Assim, sinais hormonais ecarboidratos alteram o metabolismo, desencadeando a iniciação e o desenvolvimento de ESPs em C. tigrina.(AU)
Assuntos
Orchidaceae/enzimologia , Orchidaceae/metabolismo , Ácidos Indolacéticos/classificaçãoResumo
Tissue culture techniques have been employed for orchid mass propagation by means of themorphogenetic route of protocorm like-bodies (PLBs). This study aimed to analyze and compare Indoleaceticacid (IAA) and sugar endogenous levels in protocorm-like bodies (PLBs) induction and developmentin Cattleya tigrina, in order to better understand this process and to optimize micropropagation procedureprotocols. Leaves grown on MS (Murashige and Skoog) culture medium, suplemented with 9 μM TDZfor PLBs induction and development were collected after 0, 2, 7, 14, 30, 60 and 100 days of cultivation, forfurther analysis. Increase of IAA and reduction of sugar levels are strongly related to morphogeneticresponse, that is, PLBs formation over the preexisting ones and leaf primordia formation. Sucrose, fructoseand glucose presence in this study is related to cell signaling. Thus, hormonal signals and carbohydratesalter metabolism, triggering PLBs initiation and development in C. tigrina.
Técnicas de cultura de tecidos têm sido empregadas para a propagação em massa de orquídeaspor meio da via morfogenética de estruturas semelhantes a protocormos (ESPs). O estudo teve comoobjetivo analisar e comparar os níveis endógenos de ácido indol-3-acético (AIA) e de açúcares na indução eno desenvolvimento de estruturas semelhantes a protocormos (ESPs) em Cattleya tigrina, visando à melhorcompreensão deste processo e à otimização de protocolos de micropropagação. Folhas cultivadas em meiode cultura MS (Murashige & Skoog), suplementadas com 9 μM de TDZ para indução e desenvolvimentode ESPs foram coletadas após 0, 2, 7, 14, 30, 60 e 100 dias de cultivo, para posterior análise. O aumento dosníveis de AIA e a redução dos níveis de açúcar estão fortemente relacionados à resposta morfogenética, ouseja, à formação de ESPs sobre os pré-existentes e à formação de primórdios foliares. A presença desacarose, frutose e glicose neste estudo está relacionada à sinalização celular. Assim, sinais hormonais ecarboidratos alteram o metabolismo, desencadeando a iniciação e o desenvolvimento de ESPs em C. tigrina.
Assuntos
Orchidaceae/enzimologia , Orchidaceae/metabolismo , Ácidos Indolacéticos/classificaçãoResumo
The aim of the present study was to evaluate the effects of carbohydrate supplementation on the propagation of the orchid Cattleya schilleriana. The 120-d-old seedlings were subcultured in fructose-, glucose-, or sucrose-supplemented (0, 15, 30, and 45g L-1) ½ MS culture medium (half-strength macronutrient concentrations), using a completely random design with four repetitions per treatment. After 120d of treatment, root number and length, leaf number and length, and fresh weight were evaluated, and seedling survival was evaluated after 75d of acclimatization in a greenhouse. The in vitro growth data were submitted to regression analysis, whereas the percentage survival data were analyzed using ANOVA and Tukeys test. Both in vitro growth and ex vitro survival were lowest when the plantlets were grown in the absence of a carbohydrate source and highest (>90% survival) when supplemented with glucose. According to our findings, the addition of either glucose (30g L-1) or sucrose (30g L-1) is recommended for mass propagation of C. schilleriana.(AU)
O objetivo deste estudo foi avaliar a adição de doses de carboidratos em meio de cultura ½ MS para a propagação da orquídea Cattleya schilleriana. Plântulas com 120 dias após semeadura foram recultivadas em 12 tratamentos, onde foram investigadas a adição de diferentes doses de frutose, glicose e sacarose (0, 15, 30 e 45g L-1). O delineamento utilizado foi inteiramente casualizado com quatro repetições por tratamento. Após 120 dias nos tratamentos, foram mensurados o número de raízes, comprimento da maior raiz, número de folhas, comprimento da maior folha e massa fresca total. Depois as plântulas foram aclimatizadas em casa de vegetação e avaliada a taxa de sobrevivência após 75 dias. Os dados obtidos foram submetidos ao teste de Tukey a 5% de probabilidade e ajustadas curvas de regressão. A ausência de carboidrato reduziu o crescimento das plântulas entre todas as características avaliadas in vitro e ex vitro. As doses de glicose promoveram maior eficiência para o crescimento in vitro e sobrevivência acima de 90% após a aclimatização. Assim, a adição de glicose (30g L-1) ou sacarose (30g L-1) são recomendadas para a propagação massal de C. schilleriana.(AU)
Assuntos
Orchidaceae/crescimento & desenvolvimento , Glucose/administração & dosagem , Sacarose/administração & dosagem , Plântula/crescimento & desenvolvimento , Carboidratos/administração & dosagem , Técnicas In VitroResumo
In Brazil, orchid cultivation has been increasing steadily over the last few years and contributing significantly to the economy. It has been reported that several vegetable crops and ornamentals have been successfully grown by soilless cultivation. The orchid Oncidium baueri Lindl. is grown on pot substrates. Nevertheless, hydroponics is an excellent alternative, especially for the production of cut flowers and bare root plants. The objective of this study was to evaluate the development of Oncidium baueri on two soilless systems: (a) pots containing Amafibra® coconut fiber, carbonized rice husk, and pine bark (1:1:1) irrigated with nutrient solution every 15 d; and (b) a nutrient film technique (NFT) hydroponic system irrigated with nutrient solution daily. Shoot height, pseudobulb diameter, and number of sprouts were evaluated monthly. The number of flowering plants, number of flowers, dry mass of shoots, and dry mass of roots were evaluated 11 months after onset of experiment. The pot cultivation system yielded more flowers and higher values for all vegetative parameters than the NFT hydroponic system.
No Brasil, o cultivo de orquídeas vem crescendo continuamente ao longo dos últimos anos, contribuindo de forma significativa na economia do país. O cultivo sem solo tem sido relatado com sucesso para diversas espécies hortícolas. Para a orquídea Oncidium baueri Lindl., além do uso de substratos em vaso, a hidroponia pode representar uma alternativa interessante. Assim, o objetivo deste trabalho foi avaliar o desenvolvimento de Oncidium baueri em dois sistemas de cultivo sem solo: em vasos contendo fibra de coco Amafibra®+casca de arroz carbonizada+casca de pinus (1:1:1) e irrigadas com solução nutritiva a cada quinze dias e irrigadas diariamente com solução nutritiva em sistema hidropônico do tipo NFT. O delineamento experimental foi em blocos completos casualizados, com seis repetições, sendo cada parcela composta por seis plantas. Foram avaliados mensalmente a altura de parte aérea, o diâmetro do pseudobulbo, o número de brotações e, após 11 meses, o número de plantas florescidas e de flores emitidas por planta, a massa seca da parte aérea e das raízes. O sistema de cultivo em vaso contendo substrato propiciou o florescimento das plantas ao final do experimento e os melhores resultados para todas as variáveis vegetativas avaliadas, propiciando maior crescimento e desenvolvimento de Oncidium baueri do que o cultivo hidropônico do tipo NFT.
Assuntos
Hidroponia/economia , Orchidaceae/crescimento & desenvolvimento , Substratos para Tratamento Biológico/análiseResumo
In Brazil, orchid cultivation has been increasing steadily over the last few years and contributing significantly to the economy. It has been reported that several vegetable crops and ornamentals have been successfully grown by soilless cultivation. The orchid Oncidium baueri Lindl. is grown on pot substrates. Nevertheless, hydroponics is an excellent alternative, especially for the production of cut flowers and bare root plants. The objective of this study was to evaluate the development of Oncidium baueri on two soilless systems: (a) pots containing Amafibra® coconut fiber, carbonized rice husk, and pine bark (1:1:1) irrigated with nutrient solution every 15 d; and (b) a nutrient film technique (NFT) hydroponic system irrigated with nutrient solution daily. Shoot height, pseudobulb diameter, and number of sprouts were evaluated monthly. The number of flowering plants, number of flowers, dry mass of shoots, and dry mass of roots were evaluated 11 months after onset of experiment. The pot cultivation system yielded more flowers and higher values for all vegetative parameters than the NFT hydroponic system.(AU)
No Brasil, o cultivo de orquídeas vem crescendo continuamente ao longo dos últimos anos, contribuindo de forma significativa na economia do país. O cultivo sem solo tem sido relatado com sucesso para diversas espécies hortícolas. Para a orquídea Oncidium baueri Lindl., além do uso de substratos em vaso, a hidroponia pode representar uma alternativa interessante. Assim, o objetivo deste trabalho foi avaliar o desenvolvimento de Oncidium baueri em dois sistemas de cultivo sem solo: em vasos contendo fibra de coco Amafibra®+casca de arroz carbonizada+casca de pinus (1:1:1) e irrigadas com solução nutritiva a cada quinze dias e irrigadas diariamente com solução nutritiva em sistema hidropônico do tipo NFT. O delineamento experimental foi em blocos completos casualizados, com seis repetições, sendo cada parcela composta por seis plantas. Foram avaliados mensalmente a altura de parte aérea, o diâmetro do pseudobulbo, o número de brotações e, após 11 meses, o número de plantas florescidas e de flores emitidas por planta, a massa seca da parte aérea e das raízes. O sistema de cultivo em vaso contendo substrato propiciou o florescimento das plantas ao final do experimento e os melhores resultados para todas as variáveis vegetativas avaliadas, propiciando maior crescimento e desenvolvimento de Oncidium baueri do que o cultivo hidropônico do tipo NFT.(AU)
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Orchidaceae/crescimento & desenvolvimento , Hidroponia/economia , Substratos para Tratamento Biológico/análiseResumo
Growers appreciate Cattleya walkeriana and C. loddigesii due to striking shape and rarity. Thus, this study aimed to evaluate the feasibility of DNA barcode regions, namely ITS1, ITS2 and rpoC1, to discriminate between C. walkeriana and C. loddigesii species. DNA barcode regions were successfully amplified using primers designed to amplify plants. We also included sequences from public databases in order to test if these regions were able to discriminate C. walkeriana and C. loddigesii from other Cattleya species. These regions, and their combinations, demonstrated that the ITS1+ITS2 had the highest average interspecific distance (11.1%), followed by rpoC1 (1.06%). For species discrimination, ITS1+ITS2 provided the best results. The combined data set of ITS1+ITS2+rpoC1 also discriminated both species, but did not result in higher rates of discrimination. These results indicate that ITS region is the best option for molecular identification of these two species and from some other species of this genus.(AU)
As espécies Cattleya walkeriana e C. loddigesii são apreciadas pelos colecionadores devido às suas impressionantes forma e raridade. Este estudo teve como objetivo avaliar a viabilidade das regiões DNA barcode, ou seja, ITS1, ITS2 e rpoC1, para discriminar as espécies C. walkeriana e C. loddigesii. Regiões DNA barcode foram amplificadas com êxito utilizando os iniciadores desenhados para plantas. Nós também incluímos sequências de bases públicas de dados, a fim de testar se estas regiões foram capazes de discriminar C. walkeriana e C. loddigesii de outras espécies de Cattleya. Estas regiões e suas combinações demonstraram que o ITS1 + ITS2 teve a maior distância média interespecífica (11,1%), seguido por rpoC1 (1,06%). Para a discriminação das espécies, ITS1 + ITS2 proporcionaram os melhores resultados. Os dados combinados dos ITS1 + ITS2 + rpoC1 também discriminaram ambas as espécies, mas não resultaram em maiores taxas de discriminação. Estes resultados indicam que a região ITS é a melhor opção para a identificação molecular destas duas espécies e a partir de algumas outras espécies deste gênero.(AU)
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Orchidaceae/crescimento & desenvolvimento , Orchidaceae/genética , Código de Barras de DNA Taxonômico/métodos , Código de Barras de DNA Taxonômico , Variação GenéticaResumo
An adequate concentration of growth regulators as well as the replacement of agar by an alternative medium may be promising from practical and financial points of view to produce orchid plants by micropropagation. The objective of this work was to evaluate different concentrations of growth regulator and alternative substrates for agar replacement in culture medium for in vitro multiplication and rooting of Oncidium baueri. In the explant multiplication phase, two experimental factors were evaluated- various concentrations of 6-benzylaminopurine (BAP) (0.0, 1.0, 2.0, and 3.0 mg L-1) and substrates (agar, vermiculite, and coconut fiber) added to MS medium. In the rooting phase, different concentrations of indole butyric acid (IBA) (0.0, 0.5, 1.0, and 1.5 mg L-1) were added to culture medium containing the same substrate. Six months after the experiments were initiated, the survival percentage, number of leaves, shoots, and roots and length of the aerial part and the major root were evaluated. The results suggested that addition of 1.0 mg L-1 BAP is necessary for the O. baueri in vitro multiplication phase, but IBA is not necessary in the rooting phase. For the substrate, vermiculite is not indicated as an agar replacement. In contrast, coconut fiber can be used in both multiplication and rooting phases of Oncidium baueri in vitro culture.
Na micropropagação de orquídeas, a concentração adequada de reguladores de crescimento, bem como a substituição do ágar por substratos alternativos no meio de cultura podem ser promissoras do ponto de vista da praticidade e da economia financeira para a obtenção de mudas. Assim, o objetivo do trabalho foi avaliar diferentes concentrações de reguladores de crescimento e substratos alternativos em substituição ao ágar no meio de cultura para a multiplicação e o enraizamento in vitro de Oncidium baueri. Na fase de multiplicação dos explantes, foram avaliados dois fatores: concentração de benzilaminopurina (BAP) (0,0; 1,0; 2,0 e 3,0 mg L-1) e substrato (ágar, vermiculita e fibra de coco) no meio de cultura MS e, no período de enraizamento, foram testadas concentrações de ácido indolbutírico (AIB) (0,0; 0,5; 1,0 e 1,5 mg L-1) nos mesmos substratos e meio de cultura. Após seis meses da instalação dos experimentos, foram avaliadas as variáveis: porcentagem de sobrevivência; número médio de folhas, brotações e raízes; comprimento da parte aérea e da maior raiz. Para a fase de multiplicação in vitro é necessário a utilização de BAP na concentração de 1,0 mg L-1; porém, para a fase de enraizamento a utilização do regulador de crescimento AIB é dispensável. Quanto aos substratos, a vermiculita não é indicada para substituir o ágar; entretanto, a fibra de coco pode ser usada, tanto na fase de multiplicação, quanto no enraizamento in vitro de Oncidium baueri.
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Orchidaceae/citologia , Orchidaceae/crescimento & desenvolvimento , Técnicas de CulturaResumo
An adequate concentration of growth regulators as well as the replacement of agar by an alternative medium may be promising from practical and financial points of view to produce orchid plants by micropropagation. The objective of this work was to evaluate different concentrations of growth regulator and alternative substrates for agar replacement in culture medium for in vitro multiplication and rooting of Oncidium baueri. In the explant multiplication phase, two experimental factors were evaluated- various concentrations of 6-benzylaminopurine (BAP) (0.0, 1.0, 2.0, and 3.0 mg L-1) and substrates (agar, vermiculite, and coconut fiber) added to MS medium. In the rooting phase, different concentrations of indole butyric acid (IBA) (0.0, 0.5, 1.0, and 1.5 mg L-1) were added to culture medium containing the same substrate. Six months after the experiments were initiated, the survival percentage, number of leaves, shoots, and roots and length of the aerial part and the major root were evaluated. The results suggested that addition of 1.0 mg L-1 BAP is necessary for the O. baueri in vitro multiplication phase, but IBA is not necessary in the rooting phase. For the substrate, vermiculite is not indicated as an agar replacement. In contrast, coconut fiber can be used in both multiplication and rooting phases of Oncidium baueri in vitro culture.(AU)
Na micropropagação de orquídeas, a concentração adequada de reguladores de crescimento, bem como a substituição do ágar por substratos alternativos no meio de cultura podem ser promissoras do ponto de vista da praticidade e da economia financeira para a obtenção de mudas. Assim, o objetivo do trabalho foi avaliar diferentes concentrações de reguladores de crescimento e substratos alternativos em substituição ao ágar no meio de cultura para a multiplicação e o enraizamento in vitro de Oncidium baueri. Na fase de multiplicação dos explantes, foram avaliados dois fatores: concentração de benzilaminopurina (BAP) (0,0; 1,0; 2,0 e 3,0 mg L-1) e substrato (ágar, vermiculita e fibra de coco) no meio de cultura MS e, no período de enraizamento, foram testadas concentrações de ácido indolbutírico (AIB) (0,0; 0,5; 1,0 e 1,5 mg L-1) nos mesmos substratos e meio de cultura. Após seis meses da instalação dos experimentos, foram avaliadas as variáveis: porcentagem de sobrevivência; número médio de folhas, brotações e raízes; comprimento da parte aérea e da maior raiz. Para a fase de multiplicação in vitro é necessário a utilização de BAP na concentração de 1,0 mg L-1; porém, para a fase de enraizamento a utilização do regulador de crescimento AIB é dispensável. Quanto aos substratos, a vermiculita não é indicada para substituir o ágar; entretanto, a fibra de coco pode ser usada, tanto na fase de multiplicação, quanto no enraizamento in vitro de Oncidium baueri.(AU)
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Orchidaceae/citologia , Orchidaceae/crescimento & desenvolvimento , Técnicas de CulturaResumo
The objective of this paper was to evaluate the effects of different honey concentrations in culture media, in comparison to sucrose medium, for the in vitro development of the epiphytic Encyclea cordigera orchid, in order to improve the process of propagation of the species. The in vitro germination was prepared on a reduced Murashige & Skoog (MS) medium. After 90 days, the seedlings were divided into different treatments, where they remained for another 90 days. Six treatments were set up (30g L-1 of sucrose; 15, 30, 45, and 60g L-1 of honey; and absence of any carbohydrates) in a completely randomized design. Plants were removed from the vials 270 days after the start of the experiment, and the number of roots, length of the largest leaf, length of the longest root, number of leaves, and fresh and dry masses were evaluated. Data concerning the number of leaves and roots were (x+1)1/2 transformed and subjected to an analysis of variance (ANOVA); the means were compared by a Tukey's test set at 5% probability. Medium containing 60g L-1 of honey proved to be superior to the sucrose medium traditionally used, favoring the in vitro growth and development of Encyclea cordigera. This medium can therefore be recommended for the propagation of this species, which is usually cultivated as an ornamental plant.(AU)
Este trabalho foi realizado com objetivo de avaliar a influência da concentração de mel no meio de cultura, comparando-o com a sacarose, para o desenvolvimento in vitro da orquídea epífita Encyclea cordigera, a fim de aperfeiçoar o processo de propagação dessa espécie. A semeadura in vitro procedeu-se em meio de cultura Murashige & Skoog (MS) reduzido e, após 90 dias, as plântulas foram distribuídas entre os tratamentos, em que permaneceram por mais 90 dias. Seis tratamentos (30g L-1 de sacarose, 15, 30, 45 e 60g L-1 de mel e ausência de carboidrato) foram utilizados, em delineamento inteiramente casualizado. Após 270 dias do início do experimento, as plantas foram retiradas dos frascos, sendo avaliado o número de raízes, comprimento da maior folha, comprimento da maior raiz, número de folhas, massa fresca e massa seca. Os dados de número de folhas e de raízes foram transformados (x+1)1/2 e submetidos à análise de variância (ANAVA); as médias foram comparadas pelo teste de Tukey a 5% de probabilidade. O meio de cultura suplementado com 60g L-1 de mel favoreceu o crescimento e desenvolvimento in vitro de Encyclea cordigera, sendo superior ao uso de sacarose, que é tradicionalmente usado, podendo ser recomendado para propagação dessa orquídea, que apresenta potencial ornamental.(AU)
Assuntos
Mel , Técnicas In Vitro , Orchidaceae/crescimento & desenvolvimentoResumo
For orchid cultivation in containers is essential to select the right substrate, since this will influence the quality of the final product, it serve as a support for the root system of the plants. This study aimed to evaluate different agricultural residues and expanded clay in Oncidium baueri Lindl. orchid cultivation. The plants were subjected to treatments: pinus husk + carbonized rice husk, pinus husk + coffee husk, pinus husk + fibered coconut, pecan nut husk, expanded clay, fibered coconut, coffee husk, carbonized rice husk, pinus husk. After eleven months of the experiment, the following variables were evaluated: plant height; largest pseudo-bulb diameter; number of buds; shoot fresh dry matter; the longest root length; number of roots; root fresh matter; root dry matter; and electric conductivity; pH and water retention capacity of the substrates. Except the expanded clay, the other substrates showed satisfactory results in one or more traits. Standing out among these substrates pinus husk + coffee husk and pine bark + fibered coconut, which favored the most vegetative and root characteristic of the orchid. The mixture of pinus husk + coffee husk and pinus husk + fibered coconut, provided the best results in vegetative and root growth of the orchid Oncidium baueri and the expanded clay did not show favorable results in the cultivation of this species.(AU)
Para o cultivo de orquídeas em recipientes é fundamental a seleção do substrato correto, visto que este influenciará a qualidade do produto final, servindo como suporte ao sistema radicular das plantas. O presente trabalho teve como objetivo avaliar diferentes resíduos agrícolas e argila expandida no cultivo da orquídea Oncidium baueri Lindl. As plantas foram submetidas aos tratamentos: casca de pinus + casca de arroz carbonizada; casca de pinus + casca de café; casca de pinus + fibra de coco; casca de noz pecã; argila expandida; fibra de coco; casca de café; casca de arroz carbonizada; e casca de pinus. Após 11 meses da instalação do experimento foram avaliadas as variáveis: altura da parte aérea; diâmetro do maior pseudobulbo; número de brotos; massa fresca da parte aérea; comprimento da maior raiz; número de raízes; massa fresca das raízes; massa seca das raízes; condutividade elétrica; pH e capacidade de retenção de água dos substratos. Exceto a argila expandida, os demais substratos apresentaram resultados satisfatórios em uma ou mais características avaliadas. Destacando-se entre estes os substratos casca de pinus + casca de café e casca de pinus + fibra de coco, que favoreceram a maioria das características vegetativa e radicular da orquídea. As misturas de casca de pinus + casca de café e casca de pinus + fibra de coco propiciaram os melhores resultados no desenvolvimento vegetativo e radicular da orquídea Oncidium baueri e a argila expandida não apresentou resultados favoráveis no cultivo dessa espécie.(AU)
Assuntos
Orchidaceae/crescimento & desenvolvimento , Argila , Casca de Planta , Solos ArgilososResumo
An efficient in vitro propagation method was established for Brasilidium forbesii (Hook.) Campacci using transverse and longitudinal thin cell layer (tTCL and lTCL, respectively) culture systems. Six-month-old protocorms from in vitro germinated seeds were used for this study. TCLs (1.0-mm thick) from protocorms were grown on Woody Plant Medium (WPM) supplemented with benzyladenine (BA) (0.54.0 µM).The lTCL technique was more efficient for inducing protocorm-like bodies (PLBs) and regenerating shoots than the tTCL technique. The frequency of PLB formation was influenced by BA concentration, and the lTCL explant grown on a medium containing 2.0 µM BA produced the highest percentage of new protocorms (77%) with a total of 22.7 PLBs per explant, after the first subculture on the same medium. Plantlet development was optimal on WPM medium containing 3.0 g L-1 activated charcoal, and indole-3-butyric acid was not necessary for rooting. Regenerated plants were successfully acclimatized in a greenhouse after 16 weeks using vermiculite as the substrate (100% survival).(AU)
Foi estabelecido um método eficiente de propagação in vitro para Brasilidium forbesii (Hook.) Campacci utilizando a técnica thin cell layer transversal (TCLt) e longitudinal (TCLl). Foram utilizados protocormos de seis meses obtidos da germinação in vitro. TCLs (1,0 mm de espessura) dos protocormos foram cultivados no meio "Woody Plant Medium" (WPM), acrescido com benziladenina (BA) (0,5 a 4,0 M). A técnica TCLl foi mais eficiente para indução de estruturas semelhantes a protocormos (ESPs) e regeneração de brotações do que a técnica TCLt. A frequência de formação de ESP foi influenciada pela concentração de BA e o explante TCLl, cultivado em um meio contendo 2,0 M BA, produziu a mais alta percentagem de novos protocormos (77%), com um total de 22,7 PLBs por explante, após o primeiro subcultivo para o mesmo meio. O desenvolvimento das plântulas foi eficiente no meio WPM contendo 3,0 g L-1 de carvão ativado e o ácido indol-3-butírico (AIB) não foi necessário para o enraizamento. Plantas regeneradas foram estabelecidas com sucesso em casa de vegetação, utilizando vermiculita como substrato (100% de sobrevivência), após 16 semanas.(AU)