Effects of breed, age and gender on equine platelet rich plasma and correlation of platelet count with its physical aspect / [Efeitos de raça, idade e gênero sobre o plasma rico em plaquetas em equinos e correlação da contagem plaquetária com seu aspecto físico]

Platelet rich plasma samples from 50 healthy horses of five different breeds (Thoroughbreds - TB, Brazilian Criollo Horses - BCH, Brazilian Sport Horses - BSH, Miniature Horses - MH and Crossbred Horses - CB), were investigated as to breed, age, and gender effect for platelet concentration. Moreover, a score for physical analysis was established to correlate PRP physical aspect with platelet count. Platelet count was performed by an automatic hematology analyzer and by manual count. PRP physical analysis was based on color, aspect, and capacity to separate blood components. MH showed significant higher platelet concentration than BSH (p<0.05), while the other breed comparisons showed no significant difference. There was no significant difference for gender but there was a weak correlation of age with PRP platelet concentrations (rs = -0.24). Most of the PRP presented yellow color, the separation of blood components showed no correlation, but the aspect showed a moderate correlation (rs = 0.30) with platelet count. Results suggest that PRP platelet concentration can be influenced by intrinsic factors such as breed. Additionally, the analysis of PRP aspect can help to evaluate the quality of the product when there is no access to platelet counts.

Amostras de plasma rico em plaquetas de 50 cavalos saudáveis, de cinco raças diferentes (Puro Sangue de Corrida, Crioula, Brasileiro de Hipismo, Pônei Brasileiro e sem raça definida), foram investigadas quanto à concentração plaquetária em relação à raça, à idade e ao sexo. Além disso, um escore foi estabelecido para correlacionar o aspecto físico do PRP com a contagem plaquetária. A contagem celular foi realizada por um analisador hematológico automático e pelo método manual. A análise física baseou-se na cor, no aspecto e na capacidade de separar hemocomponentes. Pôneis tiveram concentração plaquetária significativamente maior que os Brasileiros de Hipismo (P<0,05), mas as demais comparações entre raças não apresentaram diferença quanto à contagem plaquetária. Não houve diferença para o gênero, mas a idade demonstrou correlação fraca com as concentrações plaquetárias do PRP (rs = -0,24). A maioria dos PRPs apresentaram coloração amarela, e a separação dos hemocomponentes não mostrou correlação com a contagem plaquetária, mas o aspecto apresentou uma correlação moderada (rs = 0,30). Os resultados deste estudo sugerem que a concentração plaquetária do PRP pode ser influenciada por fatores intrínsecos, como a raça. Além disso, a análise do aspecto do PRP pode ajudar na avaliação da qualidade do produto quando não há acesso à contagem plaquetária.

Cellular components and TGF-beta1 content of a closed Tube system for Platelet Rich Plasma acquisition in horse] / [Componentes celulares e TGF-beta1 do plasma rico em plaquetas obtido por sistema fechado em equinos]

Platelet-rich plasma (PRP) has been proposed as an agent to accelerate the healing process and stimulate the regenerative capacity of tissues due to its abundance of growth factors. A large variety of kits and protocols are available to obtain PRP by different cell-separation systems. However, the lack of standardization may lead to inconsistent results. The aim of this study was to characterize cellular composition, platelet parameters using the ADVIA 120 flow cytometer, and TGF-ß1 concentration from the PRP product obtained through a closed system, using simple centrifugation. Six clinically healthy horses were used in this study. The protocol in the closed system resulted in approximately 1.6-fold higher platelet and approximately 2.0-fold lower white blood cell concentrations in comparison with whole blood values. The evaluated system was efficient in concentrating platelets and in retrieving a small number of leukocytes, using a protocol of single centrifugation at low speed.

O plasma rico em plaquetas (PRP) tem sido proposto como um agente para acelerar o processo de cicatrização e estimular a capacidade regenerativa dos tecidos, devido à sua abundância de fatores de crescimento. Uma grande variedade de kits e de protocolos está disponível para obtenção de PRP, utilizando-se diferentes sistemas de separação de células. No entanto, a falta de padronização pode levar a resultados inconsistentes. O objetivo deste estudo foi caracterizar a composição celular, os parâmetros plaquetários pelo citômetro de fluxo ADVIA 120 e a concentração de TGF-ß1 do PRP obtido em sistema fechado, por centrifugação simples. Seis cavalos clinicamente saudáveis ​​foram usados ​​neste estudo. O protocolo no sistema fechado resultou em concentrações de plaquetas aproximadamente 1,6 vez maior e concentrações de leucócitos aproximadamente 2,0 vezes menores em comparação com os valores do sangue total. O sistema avaliado foi eficiente na concentração de plaquetas e na recuperação de um pequeno número de leucócitos, utilizando um protocolo de centrifugação única em baixa velocidade.

Plasma rico em plaquetas e células tronco no tratamento de desmopatia dos ligamentos colaterais distais em equino / Platelet-rich plasma and stem cells in the treatment of desmopathy of the distal collateral ligaments in equine

Os equinos são animais muito utilizados em eventos esportivos, sendo, desta forma, propensos a sofrer acidentes que podem levar a lesões articulares e ósseas. Na rotina clínica, artifícios como o uso de raio X e ultrassonografia são de grande importância para que o correto diagnóstico seja feito e a conduta clínica possa ser melhor planejada. Além disso, alguns biomateriais, como o plasma rico em plaquetas (PRP) e células-tronco mesenquimais (CTMs), têm se inserido nos protocolos terapêuticos, demonstrando grande efetividade no tratamento desse tipo de lesão, devido à grande quantidade de fatores de crescimento presentes em ambos os biomateriais. O PRP é um derivado sanguíneo, caracterizado pela alta concentração plaquetária. Foi produzido a partir de duas centrifugações, a primeira para separar o plasma das hemácias e a segunda para concentrar as plaquetas. As CTMs foram isoladas de tecido adiposo, cultivadas, transportadas e aplicadas de forma autóloga, assim como o PRP. No presente relato, um equino, fêmea, Brasileiro de Hipismo com 8 anos, foi diagnosticado com desmopatia nos ligamentos colaterais da articulação interfalângica distal e foi tratado com PRP e CTMs, de forma associada e sequencial. Foi encontrada uma melhora do quadro clínico, significativa, em comparação aos dados encontrados na literatura, demonstrando grande potencialidade do uso associado de PRP e CTMs no tratamento de lesões ligamentares.

Horses are animals widely used in sporting events and are therefore prone to accidents that can lead to joint and bone injuries. In the clinical routine, devices such as the use of X-ray and ultrasound are of great importance for the correct diagnosis to be made and the clinical conduct can be better planned. In addition, some biomaterials such as platelet-rich plasma (PRP) and mesenchymal stem cells (MSCs) have been included in the therapeutic protocols, demonstrating great effectiveness in the treatment of this type of injury due to the large amount of growth factors present in both biomaterials. PRP is a blood derivative, characterized by high platelet concentration. It is produced from two centrifugations, the first to separate plasma from red blood cells and the second to concentrate platelets. MSCs were isolated from adipose tissue, cultured, transported and applied autologously, as well as PRP. In the present report, an 8-year-old female Brazilian equestrian horse was diagnosed with desmopathy in the collateral ligaments of the distal interphalangeal joint and was treated with PRP and MSCs in an associated and sequential manner. A significant improvement in the clinical picture was found in comparison to the data found in the literature, demonstrating great potential of the associated use of PRP and MSCs in the treatment of ligament injuries.

Retorno de cavalos da raça Puro-Sangue Inglês às corridas após tratamento de fraturas slab do osso terceiro carpiano com PRP e células-tronco / Return of Thoroughbred racing horses to the races after treating slab fractures of the third carpal bone with PRP and stem cells

Background: Despite the fact that slab fracture of the third carpal bone is an event of great worldwide relevance in racehorses, the third carpal fracture doesn’t have data on treatments and return to racing in Brazil. The search for efficient treatments and which provide recovery providing horses return to racing is an objective of sports equine medicine. Regenerative therapies like Platelet Rich Plasma (PRP) and Stem Cells (MSc) have demonstrated a great potential in the treatment of several injuries. For the treatment of three Thoroughbred racing horses at Brazilian Jockey Club, with sagittal plane slab fractures of the third carpal bone, we used the association of PRP and Stem Cells for reduction of the rest and good return to conditions athletics of these horses. Cases: Three Thoroughbred racing horses, males, 4 and 5 years old, showed slab fracture third carpal bone in different moments of their activity at Brazilian Jockey Club. Usually, the treatment for this type of fracture is the arthroscopic repair and the conservative management. We performed after initial radiographic evaluation dorsoproximal-dorsodistal oblique (DPr-DDiO) “skyline”, intra-articular applications of PRP and MSCs. The treatments were performed according to the radiographic follow-up of the lesion evolution. No other treatment was performed concomitantly with cell therapy in the 3 treated patients. Three treatments were performed in the first patient and 2 in the second and third patients. Before each treatment for all patients, we performed radiography dorsoproximal-dorsodistal oblique (DPr-DDiO) ‘skyline’ of the carpus. After this step, the animal was sedated with 10% xylazine hydrochloride at a dose of 0.5 mg/kg intravenously. Antisepsis of the carpus was performed and applied with radiographic monitoring of the needle positioning, first the PRP in the volume of 2 mL and in sequence, 20 million cells MSCs suspended in autologous...

Occurrence of Salmonella sp. in poultry carcasses evaluated from the retail trade between 2007 and 2013 in Paraná state, Brazil / Ocorrência de Salmonella sp. em carcaças de frango avaliadas a partir do comércio varejista entre 2007 e 2013 no estado do Paraná, Brasil

Poultry meat is often involved as a vehicle for microorganisms that cause food-borne diseases. Salmonella sp. is a major pathogen involved in outbreaks around the world. Based on its importance, the objective of this study was to determine the occurrence of Salmonella sp. in frozen and chilled poultry carcasses slaughtered and marketed in the western region of Paraná state, Brazil. A total of 340 samples were collected between January 2007 and April 2013, with 66 (19.41%) carcasses positive for Salmonella sp. It can be concluded from the results obtained that the occurrence of Salmonella sp. in poultry carcasses remains high, even though it is a product marketed refrigerated or frozen, methods considered appropriate for food preservation. A lower occurrence result was expected due to the 14-year implementation of the national pathogen reduction program established by the Ministry of Agriculture, Livestock and Supply aimed at a gradual reduction in the occurrence of Salmonella sp. in these products through constant monitoring of carcasses immediately after slaughter.(AU)

A carne de aves é um alimento que frequentemente encontra-se envolvido como veículo de micro-organismos causadores de enfermidades, sendo Salmonella sp. um desses agentes comumente envolvidos nessas enfermidades em todo o mundo. Com isso, o objetivo deste estudo foi determinar a ocorrência de Salmonella sp. em carcaças de frango congeladas e refrigeradas, abatidas e comercializadas na região oeste do estado do Paraná. Um total de 340 amostras foram coletadas entre janeiro de 2007 e abril de 2013. Das amostras analisadas, 66 (19,41%) das carcaças foram positivas para Salmonella sp. De acordo com os resultados obtidos pode-se concluir que a ocorrência de Salmonella sp. em carcaças de frangos permanece alta, mesmo sendo produtos comercializados refrigerados ou congelados, métodos considerados adequados para conservação de alimentos. Um resultado de menor ocorrência era esperado devido à implementação de 14 anos do Programa Nacional de Redução de Patógenos estabelecido pelo Ministério da Agricultura, Pecuária e Abastecimento visando uma redução gradual na ocorrência de Salmonella sp. nestes produtos através de monitoramento constante de carcaças imediatamente após o abate.(AU)

Occurrence of Salmonella sp. in poultry carcasses evaluated from the retail trade between 2007 and 2013 in Paraná state, Brazil / Ocorrência de Salmonella sp. em carcaças de frango avaliadas a partir do comércio varejista entre 2007 e 2013 no estado do Paraná, Brasil

Poultry meat is often involved as a vehicle for microorganisms that cause food-borne diseases. Salmonella sp. is a major pathogen involved in outbreaks around the world. Based on its importance, the objective of this study was to determine the occurrence of Salmonella sp. in frozen and chilled poultry carcasses slaughtered and marketed in the western region of Paraná state, Brazil. A total of 340 samples were collected between January 2007 and April 2013, with 66 (19.41%) carcasses positive for Salmonella sp. It can be concluded from the results obtained that the occurrence of Salmonella sp. in poultry carcasses remains high, even though it is a product marketed refrigerated or frozen, methods considered appropriate for food preservation. A lower occurrence result was expected due to the 14-year implementation of the national pathogen reduction program established by the Ministry of Agriculture, Livestock and Supply aimed at a gradual reduction in the occurrence of Salmonella sp. in these products through constant monitoring of carcasses immediately after slaughter.

A carne de aves é um alimento que frequentemente encontra-se envolvido como veículo de micro-organismos causadores de enfermidades, sendo Salmonella sp. um desses agentes comumente envolvidos nessas enfermidades em todo o mundo. Com isso, o objetivo deste estudo foi determinar a ocorrência de Salmonella sp. em carcaças de frango congeladas e refrigeradas, abatidas e comercializadas na região oeste do estado do Paraná. Um total de 340 amostras foram coletadas entre janeiro de 2007 e abril de 2013. Das amostras analisadas, 66 (19,41%) das carcaças foram positivas para Salmonella sp. De acordo com os resultados obtidos pode-se concluir que a ocorrência de Salmonella sp. em carcaças de frangos permanece alta, mesmo sendo produtos comercializados refrigerados ou congelados, métodos consideradosadequados para conservação de alimentos. Um resultado de menor ocorrência era esperado devido à implementação de 14 anos do Programa Nacional de Redução de Patógenos estabelecido pelo Ministério da Agricultura, Pecuária e Abastecimento visando uma redução gradual na ocorrência de Salmonella sp. nestes produtos através de monitoramento constante de carcaças imediatamente após o abate.

Protocols for preparation of platelet rich plasma (PRP) in Quarter Horses / Protocolos para o preparo de plasma rico em plaquetas (PRP) em cavalos Quarto de Milha

This study compared two protocols for preparation of platelet rich plasma (PRP) and evaluated the association between manual and automated methods for platelet count using a prospective study design. Eight clinically healthy Quarter Horses had venous blood samples collected at rest. After collection, blood samples were centrifuged twice, using two different protocols including a period of sample resting, either at the start or at the end of the protocol. Platelet counting at the start of the protocol, during, and after obtaining PRP was conducted manually or with an automated counter, followed by comparison of the two methods. In order to investigate platelet degranulation during the protocol, vascular endothelial growth factor (VEGF) was measured at each preparation stage. The protocol with sample resting before centrifugation yielded a more concentrated PRP, and the study verified that both manual and automated methods are comparable and can be used interchangeably for platelet counting. VEGF concentration did not differ significantly between protocols, or among protocol stages. The results indicate that choice of protocol for PRP preparation will affect the quantity of platelets in the final product, although platelet degranulation was not observed as evidenced by the stable VEGF concentrations measured. A larger yield of non-degranulated platelets in PRP is desirable since more α-granules will be present, therefore Protocol II is recommended. Both manual and automated counts reliably allow clinicians to obtain platelet counts and the choice of utilizing a manual or automated method is unlikely to interfere with evaluation of the final PRP product.(AU)

Este estudo comparou dois protocolos de preparo de plasma rico em plaquetas (PRP) e avaliou a associação entre dois métodos de contagem plaquetária - um manual e o outro automático através de um estudo prospectivo. Sangue venoso de oito equinos da raça Quarto de Milha foi coletado e em seguida foi centrifugado duas vezes utilizando-se dois protocolos distintos: um com descanso antes da primeira centrifugação e outro após a segunda centrifugação. A contagem plaquetária ao início, no meio e ao final dos protocolos foi realizada manualmente e pelo método automatizado, seguida de comparação entre os dois métodos. Para investigar a degranulação plaquetária ocorrida durante o preparo do PRP, o fator de crescimento vascular endotelial (VEGF) foi mensurado em cada estágio dos protocolos. O método utilizando o descanso da amostra antes da primeira centrifugação proporcionou a obtenção de um PRP mais concentrado, além de o estudo verificar que ambos os métodos de contagem plaquetária (manual e automatizado) são comparáveis e podem ser usados indiferentemente. A concentração de VEGF não foi significativamente diferente entre os estágios de preparo do PRP. Os resultados indicam que o método de preparo afeta a quantidade de plaquetas obtidas no PRP, apesar da degranulação plaquetária não ter sido observada, como evidenciado pela concentração estável de VEGF. Uma maior concentração de plaquetas no PRP é desejável, pois indica que um maior número de α-grânulos estará presente na amostra, portanto, conclui-se que o Protocolo II é mais recomendável. Tanto o método manual, quanto o automatizado, pode ser usado de maneira confiável para a contagem plaquetária, não interferindo com a avaliação do produto final (PRP).(AU)

Protocols for preparation of platelet rich plasma (PRP) in Quarter Horses / Protocolos para o preparo de plasma rico em plaquetas (PRP) em cavalos Quarto de Milha

This study compared two protocols for preparation of platelet rich plasma (PRP) and evaluated the association between manual and automated methods for platelet count using a prospective study design. Eight clinically healthy Quarter Horses had venous blood samples collected at rest. After collection, blood samples were centrifuged twice, using two different protocols including a period of sample resting, either at the start or at the end of the protocol. Platelet counting at the start of the protocol, during, and after obtaining PRP was conducted manually or with an automated counter, followed by comparison of the two methods. In order to investigate platelet degranulation during the protocol, vascular endothelial growth factor (VEGF) was measured at each preparation stage. The protocol with sample resting before centrifugation yielded a more concentrated PRP, and the study verified that both manual and automated methods are comparable and can be used interchangeably for platelet counting. VEGF concentration did not differ significantly between protocols, or among protocol stages. The results indicate that choice of protocol for PRP preparation will affect the quantity of platelets in the final product, although platelet degranulation was not observed as evidenced by the stable VEGF concentrations measured. A larger yield of non-degranulated platelets in PRP is desirable since more α-granules will be present, therefore Protocol II is recommended. Both manual and automated counts reliably allow clinicians to obtain platelet counts and the choice of utilizing a manual or automated method is unlikely to interfere with evaluation of the final PRP product.(AU)

Este estudo comparou dois protocolos de preparo de plasma rico em plaquetas (PRP) e avaliou a associação entre dois métodos de contagem plaquetária - um manual e o outro automático através de um estudo prospectivo. Sangue venoso de oito equinos da raça Quarto de Milha foi coletado e em seguida foi centrifugado duas vezes utilizando-se dois protocolos distintos: um com descanso antes da primeira centrifugação e outro após a segunda centrifugação. A contagem plaquetária ao início, no meio e ao final dos protocolos foi realizada manualmente e pelo método automatizado, seguida de comparação entre os dois métodos. Para investigar a degranulação plaquetária ocorrida durante o preparo do PRP, o fator de crescimento vascular endotelial (VEGF) foi mensurado em cada estágio dos protocolos. O método utilizando o descanso da amostra antes da primeira centrifugação proporcionou a obtenção de um PRP mais concentrado, além de o estudo verificar que ambos os métodos de contagem plaquetária (manual e automatizado) são comparáveis e podem ser usados indiferentemente. A concentração de VEGF não foi significativamente diferente entre os estágios de preparo do PRP. Os resultados indicam que o método de preparo afeta a quantidade de plaquetas obtidas no PRP, apesar da degranulação plaquetária não ter sido observada, como evidenciado pela concentração estável de VEGF. Uma maior concentração de plaquetas no PRP é desejável, pois indica que um maior número de α-grânulos estará presente na amostra, portanto, conclui-se que o Protocolo II é mais recomendável. Tanto o método manual, quanto o automatizado, pode ser usado de maneira confiável para a contagem plaquetária, não interferindo com a avaliação do produto final (PRP).(AU)

Protocols for preparation of platelet rich plasma (PRP) in Quarter Horses

ABSTRACT: This study compared two protocols for preparation of platelet rich plasma (PRP) and evaluated the association between manual and automated methods for platelet count using a prospective study design. Eight clinically healthy Quarter Horses had venous blood samples collected at rest. After collection, blood samples were centrifuged twice, using two different protocols including a period of sample resting, either at the start or at the end of the protocol. Platelet counting at the start of the protocol, during, and after obtaining PRP was conducted manually or with an automated counter, followed by comparison of the two methods. In order to investigate platelet degranulation during the protocol, vascular endothelial growth factor (VEGF) was measured at each preparation stage. The protocol with sample resting before centrifugation yielded a more concentrated PRP, and the study verified that both manual and automated methods are comparable and can be used interchangeably for platelet counting. VEGF concentration did not differ significantly between protocols, or among protocol stages. The results indicate that choice of protocol for PRP preparation will affect the quantity of platelets in the final product, although platelet degranulation was not observed as evidenced by the stable VEGF concentrations measured. A larger yield of non-degranulated platelets in PRP is desirable since more -granules will be present, therefore Protocol II is recommended. Both manual and automated counts reliably allow clinicians to obtain platelet counts and the choice of utilizing a manual or automated method is unlikely to interfere with evaluation of the final PRP product.

RESUMO: Este estudo comparou dois protocolos de preparo de plasma rico em plaquetas (PRP) e avaliou a associação entre dois métodos de contagem plaquetária - um manual e o outro automático através de um estudo prospectivo. Sangue venoso de oito equinos da raça Quarto de Milha foi coletado e em seguida foi centrifugado duas vezes utilizando-se dois protocolos distintos: um com descanso antes da primeira centrifugação e outro após a segunda centrifugação. A contagem plaquetária ao início, no meio e ao final dos protocolos foi realizada manualmente e pelo método automatizado, seguida de comparação entre os dois métodos. Para investigar a degranulação plaquetária ocorrida durante o preparo do PRP, o fator de crescimento vascular endotelial (VEGF) foi mensurado em cada estágio dos protocolos. O método utilizando o descanso da amostra antes da primeira centrifugação proporcionou a obtenção de um PRP mais concentrado, além de o estudo verificar que ambos os métodos de contagem plaquetária (manual e automatizado) são comparáveis e podem ser usados indiferentemente. A concentração de VEGF não foi significativamente diferente entre os estágios de preparo do PRP. Os resultados indicam que o método de preparo afeta a quantidade de plaquetas obtidas no PRP, apesar da degranulação plaquetária não ter sido observada, como evidenciado pela concentração estável de VEGF. Uma maior concentração de plaquetas no PRP é desejável, pois indica que um maior número de -grânulos estará presente na amostra, portanto, conclui-se que o Protocolo II é mais recomendável. Tanto o método manual, quanto o automatizado, pode ser usado de maneira confiável para a contagem plaquetária, não interferindo com a avaliação do produto final (PRP).

Surgical sponge associated with platelets rich plasma in skin mesh grafts and layer in rabbits (Oryctolagus cuniculus) / Esponja cirúrgica associada com plasma rico em plaquetas em enxertos cutâneos em malha e camada em coelhos (Oryctolagus cuniculus)

The aim of this study was to evaluate of the efficacy of PRP employment associated with surgical sponges to improve the integration of the graft in the recipient bed. It was held at the Veterinary Hospital UNESP, Campus of Jaboticabal - SP, a study of 64 rabbits, divided into eight groups with eight animals. The groups were divided in control with saline solution 0,9%, control with PRP both without the sponge, surgical sponge with PRP, surgical sponge without PRP, and were used mesh and layer grafts in the respective groups. The data were submitted to statistical analysis (paired t-test, Kruskal-Wallis test, with subsequent use of the multiple comparison tests of Dunn, analysis of variance (F) test, Tukey test, P< 0.05). Edema and exudate with 3 and 3 and 7 days (P= 0,03 e P= 0,0049); coloring on the 14th day (P= 0,0001); cosmetic appearance on the 7th and 14th day (P= 0,0026 and P= 0,0001); mononuclear cells (P= 0,01) and polymorphonuclear (P= 0,01); fibroblast proliferation (P= 0,01); collagenous (P= 0,05); hemorrhage (P-007); necrosis and re-epithelialization (P= 0,2928 and P= 0,1). We concluded that the use of Platelet Rich Plasma Gel on skin grafts associated with a sponge as a compressive dressing promote the skin graft survival without a previous granulation tissue.(AU)

O objetivo deste estudo foi avaliar a eficácia do PRP associado com esponjas cirúrgicas na integração do enxerto ao leito receptor. Realizou-se, no Hospital Veterinário da Unesp, Jaboticabal, SP, um estudo com 64 coelhos, separados em oito grupos, com oito animais. Os grupos foram: Gprpc (PRP, sem esponja cirúrgica, enxerto camada), Gprpce (PRP, esponja cirúrgica, enxerto camada), Gcc (solução fisiológica 0,9%, sem esponja cirúrgica, enxerto camada), Gcce (solução fisiológica 0,9%, esponjas cirúrgicas, enxerto camada), Gprpm (PRP, sem esponja cirúrgica, enxerto malha), Gprpme (PRP, esponja cirúrgica, enxerto malha), Gcm (solução fisiológica 0,9%, sem esponja cirúrgica, enxerto malha) e Gcce (solução fisiológica 0,9%, esponjas cirúrgicas, malha). Os dados foram analisados pelo teste t emparelhado, Kruskal-Wallis, análise de variância, e teste de Tukey (P<0,05). Edema e exsudato presente com três e sete dias (P=0,03 e P=0,0049); coloração cianótica no 14º dia (P=0,0001); aspecto cosmético bom no sétimo e no 14º dia (P=0,00026 e P=0,0001); presença de células mononucleares (P=0,01) e polimorfonucleares (P=0,01); proliferação de fibroblastos discreta (P=0,01); colagenização intensa (P=0,05); hemorragia discreta (P=0,007); ausência de diferença significativa em necrose e reepitelização (P=0,2928 e P=0,1). Conclui-se que o emprego do PRP gel em enxertos cutâneos associando esponjas cirúrgicas como curativo compressivo favorece sua integração ao leito receptor sem a presença prévia de tecido de granulação.(AU)

Surgical sponge associated with platelets rich plasma in skin mesh grafts and layer in rabbits (Oryctolagus cuniculus) / Esponja cirúrgica associada com plasma rico em plaquetas em enxertos cutâneos em malha e camada em coelhos (Oryctolagus cuniculus)

The aim of this study was to evaluate of the efficacy of PRP employment associated with surgical sponges to improve the integration of the graft in the recipient bed. It was held at the Veterinary Hospital UNESP, Campus of Jaboticabal - SP, a study of 64 rabbits, divided into eight groups with eight animals. The groups were divided in control with saline solution 0,9%, control with PRP both without the sponge, surgical sponge with PRP, surgical sponge without PRP, and were used mesh and layer grafts in the respective groups. The data were submitted to statistical analysis (paired t-test, Kruskal-Wallis test, with subsequent use of the multiple comparison tests of Dunn, analysis of variance (F) test, Tukey test, P< 0.05). Edema and exudate with 3 and 3 and 7 days (P= 0,03 e P= 0,0049); coloring on the 14th day (P= 0,0001); cosmetic appearance on the 7th and 14th day (P= 0,0026 and P= 0,0001); mononuclear cells (P= 0,01) and polymorphonuclear (P= 0,01); fibroblast proliferation (P= 0,01); collagenous (P= 0,05); hemorrhage (P-007); necrosis and re-epithelialization (P= 0,2928 and P= 0,1). We concluded that the use of Platelet Rich Plasma Gel on skin grafts associated with a sponge as a compressive dressing promote the skin graft survival without a previous granulation tissue.(AU)

O objetivo deste estudo foi avaliar a eficácia do PRP associado com esponjas cirúrgicas na integração do enxerto ao leito receptor. Realizou-se, no Hospital Veterinário da Unesp, Jaboticabal, SP, um estudo com 64 coelhos, separados em oito grupos, com oito animais. Os grupos foram: Gprpc (PRP, sem esponja cirúrgica, enxerto camada), Gprpce (PRP, esponja cirúrgica, enxerto camada), Gcc (solução fisiológica 0,9%, sem esponja cirúrgica, enxerto camada), Gcce (solução fisiológica 0,9%, esponjas cirúrgicas, enxerto camada), Gprpm (PRP, sem esponja cirúrgica, enxerto malha), Gprpme (PRP, esponja cirúrgica, enxerto malha), Gcm (solução fisiológica 0,9%, sem esponja cirúrgica, enxerto malha) e Gcce (solução fisiológica 0,9%, esponjas cirúrgicas, malha). Os dados foram analisados pelo teste t emparelhado, Kruskal-Wallis, análise de variância, e teste de Tukey (P<0,05). Edema e exsudato presente com três e sete dias (P=0,03 e P=0,0049); coloração cianótica no 14º dia (P=0,0001); aspecto cosmético bom no sétimo e no 14º dia (P=0,00026 e P=0,0001); presença de células mononucleares (P=0,01) e polimorfonucleares (P=0,01); proliferação de fibroblastos discreta (P=0,01); colagenização intensa (P=0,05); hemorragia discreta (P=0,007); ausência de diferença significativa em necrose e reepitelização (P=0,2928 e P=0,1). Conclui-se que o emprego do PRP gel em enxertos cutâneos associando esponjas cirúrgicas como curativo compressivo favorece sua integração ao leito receptor sem a presença prévia de tecido de granulação.(AU)

Encefalopatia espongiforme bovina atípica: uma revisão / Atypical bovine spongiform encephalopathy: a review

Bovine spongiform encephalopathy (BSE), caused by an infectious prion, emerged in the 1980s in Europe as a new disease in cattle and, since then, several actions are being taken for its prevention and control. Restricting the feeding of ruminants with animal by-products and the removal and destruction of specific risk materials (SRM) for the condition of carcasses in slaughterhouses have been proven effective to control the disease, in addition to the reduction of human exposure to the agent, as this is an important zoonosis. However, in 2004 the first atypical cases of BSE were diagnosed, in which the causative agents showed different molecular weights in Western blot (WB), compared to the classical form of the agent. In addition to the molecular differences, clinical presentations proved to be differentiated in atypical forms, affecting mainly cattle older than eight years. Because it is a new form of the disease, many studies are being conducted to elucidate the pathogenesis, epidemiology and zoonotic potential of atypical BSE. The aim of this study was to review the main aspects of atypical BSE emphasizing its etiology, epidemiology, clinical signs, diagnosis and control and prevention measures.

A encefalopatia espongiforme bovina (EEB), causada por um príon infectante, surgiu na década de 1980 na Europa como uma nova doença nos rebanhos bovinos e, desde então, estão sendo tomadas várias ações para sua prevenção e controle. A restrição da alimentação de ruminantes com subprodutos de origem animal e a remoção e destruição dos materiais de risco específico para a doença das carcaças em frigoríficos se mostraram efetivas medidas para o controle da doença, além de reduzirem a exposição humana ao agente, pois se trata de uma importante zoonose. No entanto, em 2004 os primeiros casos atípicos de EEB foram diagnosticados, nos quais os agentes causais apresentavam alterações de peso molecular na prova de Western blot, em relação ao agente da forma clássica. Além das diferenças moleculares dos agentes, as apresentações clínicas mostraram-se diferenciadas nas formas atípicas, acometendo principalmente bovinos com idade superior a oito anos. Por se tratar de uma nova forma da doença, muitos estudos estão sendo conduzidos buscando elucidar a patogenia, epidemiologia e seu potencial zoonótico. Objetivou-se neste estudo revisar os principais aspectos relacionados às EEB atípicas enfatizando sua etiologia, epidemiologia, sinais clínicos, diagnóstico e medidas de controle.

Encefalopatia espongiforme bovina atípica: uma revisão / Atypical bovine spongiform encephalopathy: a review

A encefalopatia espongiforme bovina (EEB), causada por um príon infectante, surgiu na década de 1980 na Europa como uma nova doença nos rebanhos bovinos e, desde então, estão sendo tomadas várias ações para sua prevenção e controle. A restrição da alimentação de ruminantes com subprodutos de origem animal e a remoção e destruição dos materiais de risco específico para a doença das carcaças em frigoríficos se mostraram efetivas medidas para o controle da doença, além de reduzirem a exposição humana ao agente, pois se trata de uma importante zoonose. No entanto, em 2004 os primeiros casos atípicos de EEB foram diagnosticados, nos quais os agentes causais apresentavam alterações de peso molecular na prova de Western blot, em relação ao agente da forma clássica. Além das diferenças moleculares dos agentes, as apresentações clínicas mostraram-se diferenciadas nas formas atípicas, acometendo principalmente bovinos com idade superior a oito anos. Por se tratar de uma nova forma da doença, muitos estudos estão sendo conduzidos buscando elucidar a patogenia, epidemiologia e seu potencial zoonótico. Objetivou-se neste estudo revisar os principais aspectos relacionados às EEB atípicas enfatizando sua etiologia, epidemiologia, sinais clínicos, diagnóstico e medidas de controle.(AU)

Bovine spongiform encephalopathy (BSE), caused by an infectious prion, emerged in the 1980s in Europe as a new disease in cattle and, since then, several actions are being taken for its prevention and control. Restricting the feeding of ruminants with animal by-products and the removal and destruction of specific risk materials (SRM) for the condition of carcasses in slaughterhouses have been proven effective to control the disease, in addition to the reduction of human exposure to the agent, as this is an important zoonosis. However, in 2004 the first atypical cases of BSE were diagnosed, in which the causative agents showed different molecular weights in Western blot (WB), compared to the classical form of the agent. In addition to the molecular differences, clinical presentations proved to be differentiated in atypical forms, affecting mainly cattle older than eight years. Because it is a new form of the disease, many studies are being conducted to elucidate the pathogenesis, epidemiology and zoonotic potential of atypical BSE. The aim of this study was to review the main aspects of atypical BSE emphasizing its etiology, epidemiology, clinical signs, diagnosis and control and prevention measures.(AU)

Encefalopatia espongiforme bovina atípica: uma revisão / Atypical bovine spongiform encephalopathy: a review

Bovine spongiform encephalopathy (BSE), caused by an infectious prion, emerged in the 1980s in Europe as a new disease in cattle and, since then, several actions are being taken for its prevention and control. Restricting the feeding of ruminants with animal by-products and the removal and destruction of specific risk materials (SRM) for the condition of carcasses in slaughterhouses have been proven effective to control the disease, in addition to the reduction of human exposure to the agent, as this is an important zoonosis. However, in 2004 the first atypical cases of BSE were diagnosed, in which the causative agents showed different molecular weights in Western blot (WB), compared to the classical form of the agent. In addition to the molecular differences, clinical presentations proved to be differentiated in atypical forms, affecting mainly cattle older than eight years. Because it is a new form of the disease, many studies are being conducted to elucidate the pathogenesis, epidemiology and zoonotic potential of atypical BSE. The aim of this study was to review the main aspects of atypical BSE emphasizing its etiology, epidemiology, clinical signs, diagnosis and control and prevention measures.(AU)

A encefalopatia espongiforme bovina (EEB), causada por um príon infectante, surgiu na década de 1980 na Europa como uma nova doença nos rebanhos bovinos e, desde então, estão sendo tomadas várias ações para sua prevenção e controle. A restrição da alimentação de ruminantes com subprodutos de origem animal e a remoção e destruição dos materiais de risco específico para a doença das carcaças em frigoríficos se mostraram efetivas medidas para o controle da doença, além de reduzirem a exposição humana ao agente, pois se trata de uma importante zoonose. No entanto, em 2004 os primeiros casos atípicos de EEB foram diagnosticados, nos quais os agentes causais apresentavam alterações de peso molecular na prova de Western blot, em relação ao agente da forma clássica. Além das diferenças moleculares dos agentes, as apresentações clínicas mostraram-se diferenciadas nas formas atípicas, acometendo principalmente bovinos com idade superior a oito anos. Por se tratar de uma nova forma da doença, muitos estudos estão sendo conduzidos buscando elucidar a patogenia, epidemiologia e seu potencial zoonótico. Objetivou-se neste estudo revisar os principais aspectos relacionados às EEB atípicas enfatizando sua etiologia, epidemiologia, sinais clínicos, diagnóstico e medidas de controle.(AU)

Plasma rico em plaquetas: estudo comparativo entre a dupla centrifugação e o filtro E-PET (Equine Platelet Enhancement Therapy) / Comparative study of double spin and use of E-PET filter (Equine Platelet Enhancement Therapy) to obtain platelet rich plasma in horses

O plasma rico em plaquetas (PRP) consiste em uma alta concentração de plaquetas em um pequeno volume de plasma, sendo, em média, quatro vezes maior que a concentração sérica. O uso de PRP é justificado pela alta concentração de fatores de crescimento presentes em grânulos no interior das plaquetas, que possuem diversas funções como proliferação celular, quimiotaxia, angiogênese e diferenciação celular, que ampliam o poder de reparação tecidual. Há diversos protocolos para obtenção do PRP em equinos descritos na literatura, dentre os quais destacam-se os de dupla centrifugação, os automatizados e os filtros. Há diferenças substanciais no conteúdo do PRP dependendo do seu método de obtenção, principalmente no que se diz respeito à quantidade de leucócitos, plaquetas e concentração de fatores de crescimento. Sendo assim, o objetivo deste estudo foi comparar a utilização do concentrado de plaquetas obtido por protocolo de dupla centrifugação e o obtido pelo filtro E-PET (Equine Platelet Enhancement Therapy), levando-se em consideração a concentração plaquetária e leucocitária final, a quantificação de fatores de crescimento (TGFß e PDGF-BB) e a facilidade de realização entre tais métodos. Utilizou-se nove animais para a obtenção de PRP por dupla centrifugação e através do filtro E-PET, não havendo diferença estatística (p>0,05) entre os métodos de obtenção em relação à concentração plaquetária e leucocitária, entretanto, houve diferença estatística (p=0,002; p=0,004, respectivamente) em relação a concentração de TGFß e PDGF-BB. Dessa forma, concluiu-se que o filtro E-PET mostrou-se um método mais efetivo, sendo possível sua utilização à campo, além de proporcionar uma maior concentração de fatores de crescimento TGFß e PDGF-BB.(AU)

The platelet-rich plasma (PRP) consists of a high concentration of platelets in a small volume of plasma, four times greater (average) than the serum concentration. The use of PRP is justified by the high concentration of growth factors present in granules in the platelets, which have several functions such as cell proliferation, chemotaxis, angiogenesis and differenciation, which extend the power of tissue repair. There are several protocols to obtain PRP in horses described in the literature, among which are highlighted the double centrifugation, automated and filters. There are substantial differences in the PRP content depending on its method of production, especially when it concerns the amount of leukocytes, platelets and concentration of growth factors. Thus, the aim of this study was to compare the use of platelet concentrates obtained by double centrifugation protocol and obtained by the filter E-PET (Equine Platelet Enhancement Therapy) taking into account the platelet and leukocyte final concentration, the quantification of growth factors (TGFß and PDGF-BB) and the facility to do those methods. Nine horses were used to obtain PRP by double centrifugation and through the E-PET filter, with no statistical difference (p>0.05) between the methods relative to the platelet and leukocyte concentration; however, there was statistical difference (p=0.002 and p=0.004 respectively) compared with the concentration of TGFß and PDGF-BB. It was concluded that the E-PET filter proved to be a more effective method possible to use in the field and to provide a higher concentration of growth factors (TGFß and PDGF-BB).(AU)

Plasma rico em plaquetas: estudo comparativo entre a dupla centrifugação e o filtro E-PET (Equine Platelet Enhancement Therapy) / Comparative study of double spin and use of E-PET filter (Equine Platelet Enhancement Therapy) to obtain platelet rich plasma in horses

O plasma rico em plaquetas (PRP) consiste em uma alta concentração de plaquetas em um pequeno volume de plasma, sendo, em média, quatro vezes maior que a concentração sérica. O uso de PRP é justificado pela alta concentração de fatores de crescimento presentes em grânulos no interior das plaquetas, que possuem diversas funções como proliferação celular, quimiotaxia, angiogênese e diferenciação celular, que ampliam o poder de reparação tecidual. Há diversos protocolos para obtenção do PRP em equinos descritos na literatura, dentre os quais destacam-se os de dupla centrifugação, os automatizados e os filtros. Há diferenças substanciais no conteúdo do PRP dependendo do seu método de obtenção, principalmente no que se diz respeito à quantidade de leucócitos, plaquetas e concentração de fatores de crescimento. Sendo assim, o objetivo deste estudo foi comparar a utilização do concentrado de plaquetas obtido por protocolo de dupla centrifugação e o obtido pelo filtro E-PET (Equine Platelet Enhancement Therapy), levando-se em consideração a concentração plaquetária e leucocitária final, a quantificação de fatores de crescimento (TGFß e PDGF-BB) e a facilidade de realização entre tais métodos. Utilizou-se nove animais para a obtenção de PRP por dupla centrifugação e através do filtro E-PET, não havendo diferença estatística (p>0,05) entre os métodos de obtenção em relação à concentração plaquetária e leucocitária, entretanto, houve diferença estatística (p=0,002; p=0,004, respectivamente) em relação a concentração de TGFß e PDGF-BB. Dessa forma, concluiu-se que o filtro E-PET mostrou-se um método mais efetivo, sendo possível sua utilização à campo, além de proporcionar uma maior concentração de fatores de crescimento TGFß e PDGF-BB.(AU)

The platelet-rich plasma (PRP) consists of a high concentration of platelets in a small volume of plasma, four times greater (average) than the serum concentration. The use of PRP is justified by the high concentration of growth factors present in granules in the platelets, which have several functions such as cell proliferation, chemotaxis, angiogenesis and differenciation, which extend the power of tissue repair. There are several protocols to obtain PRP in horses described in the literature, among which are highlighted the double centrifugation, automated and filters. There are substantial differences in the PRP content depending on its method of production, especially when it concerns the amount of leukocytes, platelets and concentration of growth factors. Thus, the aim of this study was to compare the use of platelet concentrates obtained by double centrifugation protocol and obtained by the filter E-PET (Equine Platelet Enhancement Therapy) taking into account the platelet and leukocyte final concentration, the quantification of growth factors (TGFß and PDGF-BB) and the facility to do those methods. Nine horses were used to obtain PRP by double centrifugation and through the E-PET filter, with no statistical difference (p>0.05) between the methods relative to the platelet and leukocyte concentration; however, there was statistical difference (p=0.002 and p=0.004 respectively) compared with the concentration of TGFß and PDGF-BB. It was concluded that the E-PET filter proved to be a more effective method possible to use in the field and to provide a higher concentration of growth factors (TGFß and PDGF-BB).(AU)

Efeitos de raça, idade e gênero sobre o Plasma Rico em Plaquetas em equinos e correlação da contagem plaquetária com o aspecto físico

O plasma rico em plaquetas (PRP) é uma fonte de diversos fatores de crescimento e outras moléculas que participam na modulação da resposta inflamatória e na reparação tecidual. Na medicina equina o PRP tem se destacado por sua ação benéfica no tratamento de feridas, além do seu uso em diversas afecções nas quais necessita-se redução de inflamação e reparo tecidual. Entretanto, ainda existem fatores intrínsecos que diferem entre os protocolos estabelecidos e podem influenciar na qualidade do produto final. Este estudo teve como objetivo avaliar os efeitos de raça, idade e gênero no PRP equino e correlacionar seu aspecto físico com a contagem plaquetária. Foram coletadas 50 amostras de sangue de animais de cinco raças diferentes (Puro Sangue de Corrida - PSC, Brasileiro de Hipismo - BH, Crioulo - C, Pônei Brasileiro - PB e Sem Raça Definida - SRD) para confecção de PRP e os mesmos foram investigados quanto à concentração plaquetária em relação à raça, idade e gênero. Além disso, um escore de análise física do PRP foi estabelecido para correlacioná-lo com a contagem plaquetária. A contagem celular foi realizada pelo método automático e manual, já a análise física do PRP baseou-se na cor, aspecto visual e capacidade de separar hemocomponentes. PB tiveram concentração plaquetária significativamente maior que dos BH (p < 0.05), mas as demais comparações entre raças não apresentaram diferença quanto à contagem plaquetária. Não houve diferença estatística para gênero, mas a idade apresentou correlação fraca com as concentrações plaquetárias do PRP (rs = -0.24). A maioria dos PRPs apresentaram coloração amarela, a separação dos hemocomponentes não apresentou correlação com a contagem plaquetária, mas o aspecto visual apresentou uma correlação moderada (rs = 0,30). Nossos resultados sugerem que a concentração plaquetária do PRP pode ser influenciada por fatores intrínsecos, como a raça. Além disso, a análise do aspecto visual do PRP pode ajudar na avaliação da qualidade do produto, quando não há acesso à contagem plaquetária

Platelet-rich plasma (PRP) is a source of several growth factors and other molecules that participate in modulating the inflammatory response and tissue repair. In equine medicine, PRP has stood out for its beneficial action in the treatment of wounds, in addition to its use in several conditions in which inflammation reduction and tissue repair are needed. However, there are still intrinsic factors that differ between established protocols and can influence the quality of the final product. This study aimed to evaluate the effects of race, age and gender on equine PRP and to correlate its physical appearance with platelet count. Fifty blood samples were collected from animals of five different breeds (Thoroughbred - TB, Brazilian Sport Horses - BSH, Brazilian Criollo Horses - BCH, Miniature Horses - MH and Cross Breed horses - CB) for the preparation of PRP and they were investigated as to platelet concentration in relation to race, age and gender. In addition, a PRP physical analysis score was established to correlate its appearance with the platelet count. Cell count was performed by automatic and manual methods, while the physical analysis of the PRP was based on color, appearance and ability to separate blood components. MH had significantly higher platelet concentration than BSH (p < 0.05), but the other comparisons between breeds showed no difference in platelet count. There was no significant difference for gender but there was a weak correlation of age with PRP platelet concentrations (rs = -0.24). Most of the PRP presented yellow colour, the separation of blood components showed no correlation but the aspect showed a moderate correlation (rs = 0.30) with platelet count. Results suggest that PRP platelet concentration can be influenced by intrinsic factors such as breed. Additionally, the analysis of PRP aspect can help to evaluate the quality of the product, when there is no access to platelet counts.

Criopreservação do plasma rico em plaquetas de equinos / Equine platelet-rich plasma cryopreservation

Avaliou-se o congelamento do plasma rico em plaquetas (PRP) de equinos, a -196ºC em nitrogênio líquido, utilizando-se como crioprotetor o DMSO em duas concentrações (3% e 6%), e, como ponto final, a avaliação da morfologia e da agregometria plaquetária. Foram utilizadas 12 amostras de PRP em duas repetições. Previamente ao congelamento, as amostras foram submetidas a um resfriamento lento (-0,07ºC/minuto) até a temperatura final de 4-5ºC. A criopreservação do PRP equino, incluindo um resfriamento lento a 4-5ºC, previamente ao congelamento a -197ºC em nitrogênio líquido, foi similar para as concentrações do crioprotetor DMSO a 3% ou 6%, quando avaliado o percentual de ativação e de agregação plaquetária.(AU)

Equine platelet-rich plasma (PRP) frozen at -196°C in liquid nitrogen using DMSO as a cryoprotectant in two different concentrations (3% and 6%) was evaluated, using platelet morphology and aggregometry as the final parameters. Twelve PRP samples were used in two repetitions. The samples were submitted to slow cooling prior to frozen (-0.07°C/minute) until they reached the temperature of 4-5°C. Platelet cryopreserved in 3% or 6% DMSO, presented similar efficacy when the percentage of activation and platelet aggregation was evaluated.(AU)

Modulação da resposta inflamatória no útero de éguas tratadas com plasma rico em plaquetas

A endometrite é a causa mais comum de subfertilidade em éguas. Todas as éguas apresentam uma inflamação endometrial fisiológica pós-cobertura; entretanto, 15-20% das éguas têm endometrite persistente pós-cobertura (EPPC). Recentemente, o plasma rico em plaquetas (PRP) vêm se tornando popular no manejo reprodutivo de éguas susceptíveis a EPPC. Atualmente, não existe uma padronização dos métodos de preparação do PRP para uso intrauterino em éguas. Desta forma, este estudo teve como objetivo comparar três métodos de preparação de PRP para infusão intrauterina em éguas e avaliar a resposta inflamatória pós-cobertura, cultura endometrial e recuperação embrionária em éguas suscetíveis a EPPC tratadas com PRP. No primeiro estudo, o PRP foi produzido por três métodos. Método 1, o sangue foi coletado em bolsa de transfusão, transferido para tubos Falcon e duplamente centrifugadas; Método 2, sangue foi coletado em tubos vacutainer e centrifugado uma única vez; Método 3 sangue foi coletado em uma seringa de 60 mL contendo anticoagulante, a qual foi mantida em posição vertical para sedimentar por 4h. Após o processamento, a contagem de células e a viabilidade plaquetária foram avaliadas. Em um subgrupo de éguas (n = 6), o PRP foi avaliado 6 e 24h pós-refrigeração a 5 °C. No estudo 2, éguas (n = 12) suscetíveis a EPPC tiveram três ciclos atribuídos aleatoriamente para receber infusões intrauterinas de LRS (controle), ou PRP autólogo ou plasma pobre em plaquetas (PPP) antes (48 e 24h) e após a inseminação artificial (IA) (6 e 24h). Tanto o PRP quanto o PPP foram obtidos pelo Método 1 no experimento 2. As éguas foram inseminadas com sêmen fresco de um garanhão com fertilidade conhecida. O acúmulo de líquido intrauterino (IUF) e as células polimorfonucleares endometriais (PMNs) foram avaliados a cada 24h até 96h pós-inseminação. Citocinas uterinas (Il, IL6, CXCL8 e IL10) foram avaliadas antes (0h), 6 e 24h após IA, e cultura endometrial três e nove dias após IA. A lavagem do embrião foi realizada 8 dias após a ovulação. Os dados foram analisados com modelo misto, teste post-hoc de Tukeys e regressão multivariada. No estudo 1, o Método 1 resultou no maior e o método 3 nas menores concentrações de plaquetas, e o último teve maior concentração de leucócitos que os outros (P<0,05). A viabilidade das plaquetas foi semelhante entre os tratamentos. O resfriamento por 24h não afetou a contagem de plaquetas. No entanto, a viabilidade plaquetária foi reduzida após o resfriamento do PRP produzido pelo método 3. Estudo 2, o tratamento com PRP reduziu os PMNs endometriais, IUF pós-reprodução e citocinas pró-inflamatórias quando comparados aos ciclos atribuídos pelo controle, mas não significativamente diferente do PPP. Os controles tiveram uma porcentagem significativamente maior de culturas bacterianas positivas (33%) em comparação com os ciclos atribuídos a PRP (0%), enquanto os ciclos tratados com PPP não foram significativamente diferentes dos outros grupos (25%). Os ciclos atribuídos ao PRP tiveram taxas de recuperação embrionária significativamente maiores (83%) do que o controle (33%), embora não significativamente diferente do PPP (60%). Em conclusão, o Método 1 resultou nas maiores concentrações de plaquetas, enquanto o método 3 resultou em maiores contagens de leucócitos. O resfriamento afetou a viabilidade das plaquetas no PRP obtido com o método 3. Resta determinar se os diferentes métodos e o resfriamento afetariam a eficácia clínica do PRP. A infusão de plasma reduziu a duração e intensidade da resposta inflamatória pós-IA e melhorou a recuperação embrionária em éguas suscetíveis a EPPC. As plaquetas parecem ter uma propriedade antimicrobiana e anti-inflamatória dependente da dose

Endometritis is the most common cause of subfertility in mares. All mares display a physiological post-breeding endometrial inflammation; however, 15-20% of mares have persistent breeding-induced endometritis (PBIE). Recently, platelet-rich plasma (PRP) is becoming popular in mare practice to mitigate post-breeding induced endometritis and improve fertility. Currently, there is no standardization of methods to prepare PRP for intrauterine use in mares. This study aimed to compare three methods to prepare PRP for intrauterine infusion in mares and to assess the post-breeding inflammatory response, endometrial culture and embryo recovery in mares susceptible to PBIE treated with PRP. In the first study, PRP was produce by three methods. Method 1, blood was collected in blood transfusion bag, transferred to Falcon tubes and double centrifuged; Method 2, blood was collected in vacutainer tubes and centrifuged once; Method 3, blood was collected in a syringe containing anticoagulant, which was kept in an upright-position to sediment for 4h. After processing, cell counts and platelet viability were assessed. In a subset of mares (n=6), PRP was evaluated at 6 and 24h post-cooling at 5°C. In study 2, mares (n=12) susceptible to PBIE had three cycles randomly assigned in a crossover design to receive intrauterine infusions of LRS (control), or autologous PRP or platelet-poor plasma (PPP) pre- (48 and 24h) and post-breeding (6 and 24h). Both PRP and PPP were obtained by Method 1. Mares were bred with fresh semen from one stallion. Intrauterine fluid accumulation (IUF) and endometrial polymorphonuclear cells (PMNs) were assessed every 24h up to 96h post-breeding. Uterine cytokines (Il, IL6, CXCL8 and IL10) were evaluated before (0h), 6 and 24h post-breeding, and endometrial culture three and nine-days after breed. Embryo flushing was performed 8d post-ovulation. Data were analyzed with mixed model, Tukeys post-hoc test, and multivariate regression. In study 1, Method 1 resulted in the greatest and method 3 in the fewest platelet concentrations, and the latter had greater WBC than the others (P<0.05). Platelet viability was similar across treatments. Cooling for 24h did not affect platelet counts. However, platelet viability was reduced after cooling PRP produced by method 3. Study 2, PRP treatment reduced endometrial PMNs, post-breeding IUF and pro-inflammatory cytokines when compared to control-assigned cycles, but not significantly different than PPP. Controls had a significantly higher percentage of positive bacterial cultures (33%) in comparison to PRP-assigned cycles (0%), whereas cycles treated with PPP were not significantly different from the other groups (25%). The PRP-assigned cycles had significantly higher embryo recovery rates (83%) than the control (33%), though not significantly different than PPP (60%). In conclusion, Method 1 resulted in the greatest platelet concentrations, while method 3 resulted had greater WBC counts. Cooling affected platelet viability in PRP obtained with method 3. It remains to be determined whether the different methods and cooling would affect PRP's clinical efficacy. Plasma infusion reduced the duration and intensity of the post-breeding inflammatory response and improved embryo recovery in mares susceptible to PBIE. Platelets incrementally downregulate PBIE and appear to have a dose-dependent antimicrobial property.

Utilização de plasma rico em plaquetas para estimulação da angiogênese em flape de padrão axial toracodorsal em coelhos (Oryctolagus cuniculus) / Use of platelet rich plasma to stimulate angiogenesis in the thoracodorsal axial pattern flap in rabbits (Oryctolagus cuniculus)

Feridas de grandes extensões, com perda da viabilidade tecidual e retardo na cicatrização por segunda intenção são casos que se faz necessário o emprego de técnicas cirúrgicas reconstrutivas. O plasma rico em plaquetas (PRP) é um produto com maior concentração plaquetária, adjuvante no processo cicatricial de cirurgias reconstrutivas, auxiliando nos processos de hemostasia e estimulação da angiogênese. Dessa forma, delineou-se um estudo a fim de avaliar a eficácia do uso do gel produzido a partir do plasma rico em plaquetas (PRP) em flapes de avanço de padrão axial toracodorsal em coelhos, para avaliar a possibilidade de favorecer a integração do retalho no leito receptor. Utilizaram-se 30 coelhos da raça Nova Zelândia branco, separados em dois grupos de 15 animais, compreendendo os grupos plasma rico em plaquetas (GPRP), na qual empregou-se o gel antes da síntese da ferida cirúrgica, e controle (GC), na qual utilizou-se apenas solução fisiológica. Para obtenção do PRP, coletou-se sangue dos animais, e determinou-se a contagem plaquetária antes da preparação do gel. No início e término do experimento os animais foram pesados para posterior análise de ganho peso médio. Após o procedimento cirúrgico iniciou-se as avaliações macroscópicas no 3º, 7º e 14º dia, e avaliou-se presença ou ausência de exsudato, integridade da pele, edema, rubor e necrose. Após esta etapa, coletou-se o material da ferida cirúrgica para confecção das lâminas histológicas e posterior avaliação microscópica. Avaliou-se a proliferação vascular, presença de células mononucleares e polimorfonucleares, proliferação fibroblástica, colagenização, reepitelização e hemorragia. Os dados obtidos foram submetidos à análise estatística (Teste t Student, t emparalhado, e Kruskall Walis, sendo p<0,05)[...](AU)

Wounds of large tracts with loss of tissue viability and delayed healing by secondary intention are cases where it is necessary the use of reconstructive surgical techniques. The platelet rich plasma (PRP) is a product with a higher platelet concentration, adjuvant in the healing process of reconstructive surgeries, assisting in the processes of hemostasis and stimulation of angiogenesis. Thus, a study was devised to assess the efficacy of the gel produced from the platelet rich plasma (PRP) in the forward axial flaps thoracodorsal pattern in rabbits to evaluate the ability to promote the integration of the flap the recipient bed. We used 30 white rabbits New Zealand, separated into two groups of 15 animals, comprising the platelet rich plasma groups (GPRP), in which we used the gel before the synthesis of the surgical wound , and control (CG), in which only saline was used. To obtain the PRP, the blood was collected from the animals, was determined and the platelet count before preparation of the gel. At the beginning and end of the experiment the animals were weighed for analysis of average weight gain. After surgery began macroscopic in the 3rd, 7th and 14th day reviews, and we assessed the presence or absence of exudate, skin integrity, edema, redness and necrosis. After this step, yielded the material for the manufacture of surgical wound, followed by microscopic histological slides. We evaluated vascular proliferation, presence of polymorphonuclear and mononuclear cells, fibroblast proliferation, collagen deposition, reepithelialization and hemorrhage. The data were subjected to statistical analysis (Student t test, t paired, and Kruskal Wallis test, and p<0.05)[...](AU)