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1.
Pesqui. vet. bras ; 41: e06914, 2021. tab, graf
Artigo em Inglês | LILACS, VETINDEX | ID: biblio-1340359

Resumo

HoBi-like pestiviruses (HoBiPeV) constitute a novel group of bovine pestiviruses, genetically and antigenically related to bovine viral diarrhea virus 1 (BVDV-1) and BVDV-2. Recent data shows that HoBiPeV are endemic among Brazilian cattle, yet bovine reproductive/respiratory vaccines contain only BVDV-1 and BVDV-2 strains. The present study investigated the neutralizing antibody response against these pestiviruses induced by two commercial vaccines (VA = attenuated, VI = inactivated) and by three experimental, replicative, vaccine formulations (VAC1 = monovalent, BVDV-1; VAC2 = bivalent, BVDV-1 + BVDV-2; VAC3 = trivalent, BVDV-1 + BVDV-2 and HoBiPeV). Seronegative beef calves were immunized once (replicative vaccines) or twice (inactivated vaccine) and serum samples were tested by virus-neutralization (VN) 30 days after vaccination (dpv) (replicative vaccines) or 30 days after the second dose (VI). We considered a threshold VN titer of ≥60 indicative of protection against clinical disease. At 30 dpv, VA induced protective titers against BVDV-2 in 7/7 animals (GMT=289.8) and against BVDV-1 and HoBiPeV in 5/7 animals (GMTs=97.5 and 80, respectively). VI induced protective titers against BVDV-1 in 1/7 animal (GMT=16.4), 2/7 animals against BVDV-2 (GMT=53.8) and in none of the calves against HoBiPeV (GMT=12.2). When a pool of sera of each vaccine group was tested against individual Brazilian isolates, VA induced protective titers against 3/7 BVDV-1 isolates, to 9/10 (BVDV-2) and 1/8 (HoBiPeV); VI induced protective titers against 1/7 (BVDV-1), 1/10 (BVDV-2) and none (0/8) HoBiPeV isolates. The experimental vaccine VAC1 induced protective titers against BVDV-1 in 9/9 animals (GMT=320) but in no animal against BVDV-2 or HoBiPeV (GMT<10). VAC2 induced protective titers to BVDV-1 and BVDV-2 in 9/9 animals (GMTs=160 and 640, respectively), and against HoBiPeV in 7/9 animals (GMT=108.5). Finally, VAC3 induced protective titers in all animals against BVDV-1 (GMT=234.3), BVDV-2 (294.9) and HoBiPeV (201.1). Testing the pool of sera against pestivirus isolates, VAC1 induced titers ≥ 60 against 4/7 BVDV-1 but to none BVDV-2/HoBiPeV isolate; VAC2 induced protective titers against 4/7 BVDV-1; 10/10 BVDV-2 and 2/8 HoBiPeV; VAC3 induced protective titers against all BVDV-1, BVDV-2 and HoBiPeV isolates. These results indicate that vaccines composed by BVDV-1+BVDV-2, especially those containing inactivated virus, may not induce serological response against a variety of HoBiPeV isolates. Thus, the need of inclusion of HoBiPeV in vaccine formulations should be considered.(AU)


Os pestivírus HoBi-like (HoBiPeV) compõe um grupo novo de pestivírus de bovinos, genética e antigenicamente relacionados com os vírus da diarreia viral bovina 1 e 2 (BVDV-1, BVDV2). Dados recentes indicam que os HoBiPeV são endêmicos na população bovina do Brasil, mas as vacinas respiratórias e reprodutivas bovinas contêm apenas cepas de BVDV-1 e BVDV-2. O presente estudo investigou a atividade neutralizante contra estes pestivírus induzidas por duas vacinas comerciais (VA = atenuada, VI = inativada) e por três vacinas experimentais replicativas (VAC1 = monovalente, BVDV-1; VAC2 = bivalente, BVDV-1 + BVDV-2; VAC3 = trivalente, BVDV-1 + BVDV-2 e HoBiPeV). Bezerros soronegativos foram imunizados uma vez (vacinas replicativas) ou duas (vacina inativada) e amostras de soro foram testadas por vírus-neutralização (VN) 30 dias após a vacinação (dpv) (vacinas replicativas) ou 30 dias após a segunda dose (VI). Títulos neutralizantes ≥60 foram considerados indicativos de proteção contra doença clínica. Nesta data, a VA induziu títulos protetivos contra o BVDV-2 em 7/7 animais (GMT=289,8) e contra BVDV-1 e HoBiPeV em 5/7 animals (GMTs=97,5 e 80, respectivamente). VI induziu títulos protetores contra BVDV-1 em 1/7 animal (GMT=16,4), em 2/7 animais contra BVDV-2 (GMT=53,8) e em nenhum contra HoBiPeV (GMT=12,2). Quando um pool de soro de cada grupo vacinal foi testado frente a isolados Brasileiros, a VA induziu títulos protetores contra 3/7 isolados de BVDV-1, 9/10 (BVDV-2) e 1/8 (HoBiPeV); VI induziu títulos protetores em 1/7 contra BVDV-1, 1/10 (BVDV-2) e em nenhum (0/8) contra isolados de HoBiPeV. A VAC1 induziu títulos protetores contra BVDV-1 em 9/9 animais (GMT=320) mas em nenhum animal contra BVDV-2 ou HoBiPeV (GMT<10). VAC2 induziu títulos protetores contra BVDV-1e BVDV-2 em 9/9 animais (GMTs=160 e 640, respectivamente),e contra HoBiPeV em 7/9 animais (GMT=108,5). Finalmente, VAC3 induziu títulos protetores em todos os animais contra BVDV-1 (GMT=234,3), BVDV-2 (294,9) e HoBiPeV (201,1). No teste de pool de soro contra isolados de pestivírus, VAC1 induziu títulos ≥60 contra 4/7 BVDV-1 mas contra nenhum isolado de BVDV-2/HoBiPeV; VAC2 induziu títulos protetores contra 4/7 BVDV-1; 10/10 BVDV-2 e 2/8 HoBiPeV; VAC3 induziu títulos protetores contra todos BVDV-1, BVDV-2 e HoBiPeV. Esses resultados indicam que vacinas contendo apenas BVDV-1 BVDV-2, especialmente aquelas inativadas, podem não conferir resposta sorológica protetora contra vários isolados de HoBiPeV. Portanto, a necessidade de se incluir cepas de HoBiPeV nas vacinas deve ser considerada.(AU)


Assuntos
Animais , Bovinos , Bovinos/virologia , Vacinas Virais/administração & dosagem , Pestivirus/química , Variação Antigênica
2.
Pesqui. vet. bras ; 41: e06914, 2021. tab, graf
Artigo em Inglês | VETINDEX | ID: vti-764868

Resumo

HoBi-like pestiviruses (HoBiPeV) constitute a novel group of bovine pestiviruses, genetically and antigenically related to bovine viral diarrhea virus 1 (BVDV-1) and BVDV-2. Recent data shows that HoBiPeV are endemic among Brazilian cattle, yet bovine reproductive/respiratory vaccines contain only BVDV-1 and BVDV-2 strains. The present study investigated the neutralizing antibody response against these pestiviruses induced by two commercial vaccines (VA = attenuated, VI = inactivated) and by three experimental, replicative, vaccine formulations (VAC1 = monovalent, BVDV-1; VAC2 = bivalent, BVDV-1 + BVDV-2; VAC3 = trivalent, BVDV-1 + BVDV-2 and HoBiPeV). Seronegative beef calves were immunized once (replicative vaccines) or twice (inactivated vaccine) and serum samples were tested by virus-neutralization (VN) 30 days after vaccination (dpv) (replicative vaccines) or 30 days after the second dose (VI). We considered a threshold VN titer of ≥60 indicative of protection against clinical disease. At 30 dpv, VA induced protective titers against BVDV-2 in 7/7 animals (GMT=289.8) and against BVDV-1 and HoBiPeV in 5/7 animals (GMTs=97.5 and 80, respectively). VI induced protective titers against BVDV-1 in 1/7 animal (GMT=16.4), 2/7 animals against BVDV-2 (GMT=53.8) and in none of the calves against HoBiPeV (GMT=12.2). When a pool of sera of each vaccine group was tested against individual Brazilian isolates, VA induced protective titers against 3/7 BVDV-1 isolates, to 9/10 (BVDV-2) and 1/8 (HoBiPeV); VI induced protective titers against 1/7 (BVDV-1), 1/10 (BVDV-2) and none (0/8) HoBiPeV isolates. The experimental vaccine VAC1 induced protective titers against BVDV-1 in 9/9 animals (GMT=320) but in no animal against BVDV-2 or HoBiPeV (GMT<10). VAC2 induced protective titers to BVDV-1 and BVDV-2 in 9/9 animals (GMTs=160 and 640, respectively), and against HoBiPeV in 7/9 animals (GMT=108.5). Finally, VAC3 induced protective titers in all animals against BVDV-1 (GMT=234.3), BVDV-2 (294.9) and HoBiPeV (201.1). Testing the pool of sera against pestivirus isolates, VAC1 induced titers ≥ 60 against 4/7 BVDV-1 but to none BVDV-2/HoBiPeV isolate; VAC2 induced protective titers against 4/7 BVDV-1; 10/10 BVDV-2 and 2/8 HoBiPeV; VAC3 induced protective titers against all BVDV-1, BVDV-2 and HoBiPeV isolates. These results indicate that vaccines composed by BVDV-1+BVDV-2, especially those containing inactivated virus, may not induce serological response against a variety of HoBiPeV isolates. Thus, the need of inclusion of HoBiPeV in vaccine formulations should be considered.(AU)


Os pestivírus HoBi-like (HoBiPeV) compõe um grupo novo de pestivírus de bovinos, genética e antigenicamente relacionados com os vírus da diarreia viral bovina 1 e 2 (BVDV-1, BVDV2). Dados recentes indicam que os HoBiPeV são endêmicos na população bovina do Brasil, mas as vacinas respiratórias e reprodutivas bovinas contêm apenas cepas de BVDV-1 e BVDV-2. O presente estudo investigou a atividade neutralizante contra estes pestivírus induzidas por duas vacinas comerciais (VA = atenuada, VI = inativada) e por três vacinas experimentais replicativas (VAC1 = monovalente, BVDV-1; VAC2 = bivalente, BVDV-1 + BVDV-2; VAC3 = trivalente, BVDV-1 + BVDV-2 e HoBiPeV). Bezerros soronegativos foram imunizados uma vez (vacinas replicativas) ou duas (vacina inativada) e amostras de soro foram testadas por vírus-neutralização (VN) 30 dias após a vacinação (dpv) (vacinas replicativas) ou 30 dias após a segunda dose (VI). Títulos neutralizantes ≥60 foram considerados indicativos de proteção contra doença clínica. Nesta data, a VA induziu títulos protetivos contra o BVDV-2 em 7/7 animais (GMT=289,8) e contra BVDV-1 e HoBiPeV em 5/7 animals (GMTs=97,5 e 80, respectivamente). VI induziu títulos protetores contra BVDV-1 em 1/7 animal (GMT=16,4), em 2/7 animais contra BVDV-2 (GMT=53,8) e em nenhum contra HoBiPeV (GMT=12,2). Quando um pool de soro de cada grupo vacinal foi testado frente a isolados Brasileiros, a VA induziu títulos protetores contra 3/7 isolados de BVDV-1, 9/10 (BVDV-2) e 1/8 (HoBiPeV); VI induziu títulos protetores em 1/7 contra BVDV-1, 1/10 (BVDV-2) e em nenhum (0/8) contra isolados de HoBiPeV. A VAC1 induziu títulos protetores contra BVDV-1 em 9/9 animais (GMT=320) mas em nenhum animal contra BVDV-2 ou HoBiPeV (GMT<10). VAC2 induziu títulos protetores contra BVDV-1e BVDV-2 em 9/9 animais (GMTs=160 e 640, respectivamente),e contra HoBiPeV em 7/9 animais (GMT=108,5). Finalmente, VAC3 induziu títulos protetores em todos os animais contra BVDV-1 (GMT=234,3), BVDV-2 (294,9) e HoBiPeV (201,1). No teste de pool de soro contra isolados de pestivírus, VAC1 induziu títulos ≥60 contra 4/7 BVDV-1 mas contra nenhum isolado de BVDV-2/HoBiPeV; VAC2 induziu títulos protetores contra 4/7 BVDV-1; 10/10 BVDV-2 e 2/8 HoBiPeV; VAC3 induziu títulos protetores contra todos BVDV-1, BVDV-2 e HoBiPeV. Esses resultados indicam que vacinas contendo apenas BVDV-1 BVDV-2, especialmente aquelas inativadas, podem não conferir resposta sorológica protetora contra vários isolados de HoBiPeV. Portanto, a necessidade de se incluir cepas de HoBiPeV nas vacinas deve ser considerada.(AU)


Assuntos
Animais , Bovinos , Bovinos/virologia , Vacinas Virais/administração & dosagem , Pestivirus/química , Variação Antigênica
3.
Pesqui. vet. bras ; 40(5): 368-373, May 2020. tab, ilus
Artigo em Inglês | LILACS, VETINDEX | ID: biblio-1135632

Resumo

The identification of diversity of bovine pestiviruses circulating in the field is fundamental for continuous evaluation of diagnostic tests and vaccine composition. In this article we performed the genetic and antigenic characterization of twelve bovine pestiviruses isolated in the western region of Rio Grande do Sul, Brazil. The viruses were isolated from sera of bovine fetuses or from animals with clinical presentations suggestive of pestivirus infection. Genetic characterization by sequencing and phylogenetic analysis of the 5'UTR region of the viral genome allowed for the identification of bovine viral diarrhea virus (BVDV-1a, 4/12, 33.3%), BVDV-1b (6/12, 50%) and BVDV-2 (2/12, 16.7%). The reactivity of the isolates with a panel of monoclonal antibodies raised against envelope proteins (Erns, E1 and E2) demonstrated a high antigenic variability among isolates. Thus, the active circulation of bovine pestivirus infection, with high genetic and antigenic variability, in cattle on the western border of RS was confirmed, demonstrating the importance of continuous characterization of the pestiviruses circulating in the cattle herds to keep the diagnostic and control measures up to date.(AU)


A identificação da diversidade de pestivírus bovinos que circulam no campo é fundamental para a avaliação contínua dos testes de diagnóstico e composição de vacina. Neste artigo, realizamos a caracterização genética e antigênica de doze pestivírus bovinos isolados na região oeste do Rio Grande do Sul, Brasil. Os vírus foram isolados de soros de fetos bovinos ou de animais com apresentações clínicas sugestivas de infecção por pestivírus. A caracterização genética por sequenciamento e análise filogenética da região 5'UTR do genoma viral permitiu a identificação do vírus da diarréia viral bovina (BVDV-1a, 4/12, 33,3%), BVDV-1b (6/12, 50%) e BVDV-2 (2/12, 16,7%). A reatividade dos isolados com um painel de anticorpos monoclonais criados contra proteínas do envelope (Erns, E1 e E2) demonstrou uma alta variabilidade antigênica entre os isolados. Assim, confirmou-se a circulação ativa da infecção por pestivírus bovino, com alta variabilidade genética e antigênica, em bovinos na fronteira oeste do RS, demonstrando a importância da contínua caracterização dos pestivírus circulantes em bovinos para manter atualizadas as medidas de diagnóstico e controle.(AU)


Assuntos
Animais , Bovinos , Doenças dos Bovinos , Infecções por Pestivirus/epidemiologia , Vírus da Diarreia Viral Bovina Tipo 1/isolamento & purificação , Vírus da Diarreia Viral Bovina Tipo 1/genética , Vírus da Diarreia Viral Bovina Tipo 2/isolamento & purificação , Vírus da Diarreia Viral Bovina Tipo 2/genética , Feto , Anticorpos Monoclonais
4.
Pesqui. vet. bras ; 40(5): 368-373, mai. 2020. tab, ilus
Artigo em Inglês | VETINDEX | ID: vti-31971

Resumo

The identification of diversity of bovine pestiviruses circulating in the field is fundamental for continuous evaluation of diagnostic tests and vaccine composition. In this article we performed the genetic and antigenic characterization of twelve bovine pestiviruses isolated in the western region of Rio Grande do Sul, Brazil. The viruses were isolated from sera of bovine fetuses or from animals with clinical presentations suggestive of pestivirus infection. Genetic characterization by sequencing and phylogenetic analysis of the 5'UTR region of the viral genome allowed for the identification of bovine viral diarrhea virus (BVDV-1a, 4/12, 33.3%), BVDV-1b (6/12, 50%) and BVDV-2 (2/12, 16.7%). The reactivity of the isolates with a panel of monoclonal antibodies raised against envelope proteins (Erns, E1 and E2) demonstrated a high antigenic variability among isolates. Thus, the active circulation of bovine pestivirus infection, with high genetic and antigenic variability, in cattle on the western border of RS was confirmed, demonstrating the importance of continuous characterization of the pestiviruses circulating in the cattle herds to keep the diagnostic and control measures up to date.(AU)


A identificação da diversidade de pestivírus bovinos que circulam no campo é fundamental para a avaliação contínua dos testes de diagnóstico e composição de vacina. Neste artigo, realizamos a caracterização genética e antigênica de doze pestivírus bovinos isolados na região oeste do Rio Grande do Sul, Brasil. Os vírus foram isolados de soros de fetos bovinos ou de animais com apresentações clínicas sugestivas de infecção por pestivírus. A caracterização genética por sequenciamento e análise filogenética da região 5'UTR do genoma viral permitiu a identificação do vírus da diarréia viral bovina (BVDV-1a, 4/12, 33,3%), BVDV-1b (6/12, 50%) e BVDV-2 (2/12, 16,7%). A reatividade dos isolados com um painel de anticorpos monoclonais criados contra proteínas do envelope (Erns, E1 e E2) demonstrou uma alta variabilidade antigênica entre os isolados. Assim, confirmou-se a circulação ativa da infecção por pestivírus bovino, com alta variabilidade genética e antigênica, em bovinos na fronteira oeste do RS, demonstrando a importância da contínua caracterização dos pestivírus circulantes em bovinos para manter atualizadas as medidas de diagnóstico e controle.(AU)


Assuntos
Animais , Bovinos , Doenças dos Bovinos , Infecções por Pestivirus/epidemiologia , Vírus da Diarreia Viral Bovina Tipo 1/isolamento & purificação , Vírus da Diarreia Viral Bovina Tipo 1/genética , Vírus da Diarreia Viral Bovina Tipo 2/isolamento & purificação , Vírus da Diarreia Viral Bovina Tipo 2/genética , Feto , Anticorpos Monoclonais
5.
Pesqui. vet. bras ; 40(6): 479-483, June 2020. tab, ilus
Artigo em Inglês | LILACS, VETINDEX | ID: biblio-1135650

Resumo

Pestivirus infections are important in the livestock industries, with infection occurring in cattle, sheep and pigs. The Pestivirus genus of the family Flaviviridae, includes four recognized species: bovine viral diarrhea virus 1 (BVDV-1), bovine viral diarrhea virus 2 (BVDV-2), border disease virus (BDV), and classical swine fever virus (CSFV). All pestivirus species can infect pigs, therefore accurate and specific pestivirus detection and differentiation is of great importance to assure control measures in swine populations. The aim of the study was the molecular detection of different pestiviruses in domestic and feral pigs. A total of 527 samples (92 pigs and 435 wild boars) were tested for pestiviruses detection using molecular assays. Eleven positive samples (6 wild boars and 5 domestic pigs) were identified using panpestivirus primers targeting the 5'- UTR region of the pestivirus RNA genome. Further all the positive samples were sequentially tested for detection of CSFV, BVDV-1 and BVDV-2 using specific primers. All RNAs were identified as positives for BVDV-1 and no amplification signals were obtained from BVDV-2 and CSFV. The current detection of BVDV-1 in clinical swine specimens highlights the important risk factor of swine population as reservoir and consequently carrier for BVDV.(AU)


As infecções por pestivírus são importantes nas indústrias pecuárias, com infecções em bovinos, ovinos e suínos. O gênero Pestivirus da família Flaviviridae inclui quatro espécies reconhecidas: vírus da diarreia viral bovina 1 (BVDV-1), vírus da diarreia viral bovina 2 (BVDV-2), vírus da doença de fronteira (VDF) e vírus da peste suína clássica (VPSC). Todas as espécies de pestivírus podem infectar porcos, portanto a detecção e diferenciação precisas e específicas de pestivírus são de grande importância para garantir medidas de controle nas populações suínas. O objetivo do estudo foi a detecção molecular de diferentes pestivírus em suínos domésticos e javali. Um total de 527 amostras (92 porcos e 435 javalis) foram testados para detecção de pestivírus usando ensaios moleculares. Onze amostras positivas (6 javalis e 5 porcos domésticos) foram identificadas usando iniciadores de panpestivírus visando a região 5'-UTR do genoma do RNA do pestivírus. Além disso, todas as amostras positivas foram testadas sequencialmente para detecção de VPSC, BVDV-1 e BVDV-2 usando iniciadores específicos. Todos os RNAs foram identificados como positivos para BVDV-1 e nenhum sinal de amplificação foi obtido do BVDV-2 e CSFV. A detecção atual do BVDV-1 em amostras clínicas de suínos destaca o importante fator de risco da população suína como reservatório e consequentemente portador do BVDV.(AU)


Assuntos
Animais , Doenças dos Suínos , Infecções por Pestivirus/patologia , Infecções por Pestivirus/epidemiologia , Vírus da Doença da Fronteira/isolamento & purificação , Vírus da Diarreia Viral Bovina Tipo 1/isolamento & purificação , Vírus da Diarreia Viral Bovina Tipo 2/isolamento & purificação , Sus scrofa/virologia , Vírus da Febre Suína Clássica/isolamento & purificação , Romênia/epidemiologia , Reação em Cadeia da Polimerase , Infecções por Pestivirus/veterinária
6.
Pesqui. vet. bras ; 40(6): 479-483, jun. 2020. tab, ilus
Artigo em Inglês | VETINDEX | ID: vti-31967

Resumo

Pestivirus infections are important in the livestock industries, with infection occurring in cattle, sheep and pigs. The Pestivirus genus of the family Flaviviridae, includes four recognized species: bovine viral diarrhea virus 1 (BVDV-1), bovine viral diarrhea virus 2 (BVDV-2), border disease virus (BDV), and classical swine fever virus (CSFV). All pestivirus species can infect pigs, therefore accurate and specific pestivirus detection and differentiation is of great importance to assure control measures in swine populations. The aim of the study was the molecular detection of different pestiviruses in domestic and feral pigs. A total of 527 samples (92 pigs and 435 wild boars) were tested for pestiviruses detection using molecular assays. Eleven positive samples (6 wild boars and 5 domestic pigs) were identified using panpestivirus primers targeting the 5'- UTR region of the pestivirus RNA genome. Further all the positive samples were sequentially tested for detection of CSFV, BVDV-1 and BVDV-2 using specific primers. All RNAs were identified as positives for BVDV-1 and no amplification signals were obtained from BVDV-2 and CSFV. The current detection of BVDV-1 in clinical swine specimens highlights the important risk factor of swine population as reservoir and consequently carrier for BVDV.(AU)


As infecções por pestivírus são importantes nas indústrias pecuárias, com infecções em bovinos, ovinos e suínos. O gênero Pestivirus da família Flaviviridae inclui quatro espécies reconhecidas: vírus da diarreia viral bovina 1 (BVDV-1), vírus da diarreia viral bovina 2 (BVDV-2), vírus da doença de fronteira (VDF) e vírus da peste suína clássica (VPSC). Todas as espécies de pestivírus podem infectar porcos, portanto a detecção e diferenciação precisas e específicas de pestivírus são de grande importância para garantir medidas de controle nas populações suínas. O objetivo do estudo foi a detecção molecular de diferentes pestivírus em suínos domésticos e javali. Um total de 527 amostras (92 porcos e 435 javalis) foram testados para detecção de pestivírus usando ensaios moleculares. Onze amostras positivas (6 javalis e 5 porcos domésticos) foram identificadas usando iniciadores de panpestivírus visando a região 5'-UTR do genoma do RNA do pestivírus. Além disso, todas as amostras positivas foram testadas sequencialmente para detecção de VPSC, BVDV-1 e BVDV-2 usando iniciadores específicos. Todos os RNAs foram identificados como positivos para BVDV-1 e nenhum sinal de amplificação foi obtido do BVDV-2 e CSFV. A detecção atual do BVDV-1 em amostras clínicas de suínos destaca o importante fator de risco da população suína como reservatório e consequentemente portador do BVDV.(AU)


Assuntos
Animais , Doenças dos Suínos , Infecções por Pestivirus/patologia , Infecções por Pestivirus/epidemiologia , Vírus da Doença da Fronteira/isolamento & purificação , Vírus da Diarreia Viral Bovina Tipo 1/isolamento & purificação , Vírus da Diarreia Viral Bovina Tipo 2/isolamento & purificação , Sus scrofa/virologia , Vírus da Febre Suína Clássica/isolamento & purificação , Romênia/epidemiologia , Reação em Cadeia da Polimerase , Infecções por Pestivirus/veterinária
7.
Pesqui. vet. bras ; 38(3): 387-392, mar. 2018. tab, graf
Artigo em Inglês | VETINDEX | ID: vti-19653

Resumo

The present study performed a genetic identification of pestiviruses contaminating batches of fetal bovine serum (FBS) produced in Brazil from 2006 to 2014. Seventy-three FBS lots were screened by a RT-PCR targeting the 5'untranslated region (UTR) of the pestivirus genome. Thirty-nine lots (53.4%) were positive for pestivirus RNA and one contained infectious virus. Nucleotide sequencing and phylogenetic analysis of the 5'UTR revealed 34 lots (46.6%) containing RNA of bovine viral diarrhea virus type 1 (BVDV-1), being 23 BVDV-1a (5' UTR identity 90.8-98.7%), eight BVDV-1b (93.9-96.7%) and three BVDV-1d (96.2- 97.6%). Six lots (8.2%) contained BVDV-2 (90.3-100% UTR identity) being two BVDV-2a; three BVDV-2b and one undetermined. Four FBS batches (5.5%) were found contaminated with HoBi-like virus (98.3 to 100%). Five batches (6.8%) contained more than one pestivirus. The high frequency of contamination of FBS with pestivirus RNA reinforce the need for systematic and updated guidelines for monitoring this product to reduce the risk of contamination of biologicals and introduction of contaminating agents into free areas.(AU)


No presente estudo foi realizada a identificação genética de pestivírus contaminantes de lotes de soro fetal bovino (SFB) produzidos no Brasil de 2006 a 2014. Setenta e três lotes de SFB foram testados por RT-PCR para a região 5' não traduzida do genoma dos pestivírus. Trinta e nove lotes (53,4%) foram positivos para RNA de pestivírus e um continha vírus infeccioso. O sequenciamento de nucleotídeos e análise filogenética da região 5'UTR revelou que 34 lotes (46,6%) continham RNA do vírus da diarreia viral bovina tipo 1 (BVDV-1), sendo 23 BVDV-1a (identidade na 5' UTR de 90,8-98,7%), oito BVDV-1b (93,9 a 96,7%) e três BVDV-1d (96,2%-97,6%). Seis lotes (8,2%) continham BVDV-2 (90,3 a 100% de identidade), sendo dois BVDV-2a, três BVDV-2b e um de subgenótipo indeterminado. Quatro lotes de SFB (5,5%) estavam contaminados com o vírus HoBi-like (98,3 a 100%). Cinco lotes (6,8%) continham mais do que um pestivírus. A alta frequência de contaminação de SFB com RNA de pestivírus reforça a necessidade para diretrizes sistemáticas atualizadas para a monitoração deste produto com a finalidade de reduzir a contaminação de produtos biológicos e a introdução de agentes contaminantes em áreas livres.(AU)


Assuntos
Animais , Bovinos , Bovinos/virologia , Vírus da Diarreia Viral Bovina/classificação , Vírus da Diarreia Viral Bovina/genética
8.
Pesqui. vet. bras ; 38(10): 1896-1901, out. 2018. tab, ilus
Artigo em Inglês | VETINDEX | ID: vti-19606

Resumo

Swine can be infected by bovine viral diarrhea virus (BVDV). However, transmission routes among pigs are still unknown. The objective of the present study was to induce experimental infection of BVDV-1 in weaned piglets and to assess the potential transmission through pen back pond water, used to facilitate heat exchange of the pigs housed in barns. Two repetitions (BP1 and BP 2) were performed using 12 piglets proven to be free BVDV (n=6 per repetition) allocated into three groups: control, sentinels and infected with two piglets each. The piglets were placed in stainless steel isolators. The infected group received an inoculum containing BVDV-1, Singer strain. The piglets remained in the cabinets for 25 days, during which samples of nasal swab were collected daily and blood sampled weekly. At the end, the piglets were euthanized, necropsied and organ fragments were collected for histopathology, immunohistochemistry and RT-PCR. In the first experiment (BP1) the infected animals shed the virus between days 6 and 21 post-infection. Regarding the sentinel group, shedding occurred in only one piglet, on the 20th day after infection, and seroconversion was observed on the 25th day post-infection. In BP2, infected piglets I3 and I4 shed the virus on days 4 and 21 post-infection, respectively. Only one sentinel piglet (S3) she the virus on day 13 post-infection. Therefore, it was concluded that pigs can become infected with BVDV-1 and shed potentially infectious viral particles consequently, being able to transmit the virus to other pigs through back pond water.(AU)


Os suínos podem ser infectados pelo vírus da diarreia viral bovina (BVDV). No entanto, as vias de transmissão entre os suínos são ainda desconhecidas. O objetivo do presente estudo foi induzir a infecção experimental de BVDV-1 em leitões desmamados e avaliar a potencial transmissão pela lâmina d'água, que ajuda na troca de calor dos suínos alojados em baias. Duas repetições do experimento (BP1 e BP2) foram realizadas com 12 animais comprovadamente livres de BVDV (n=6 por repetição) alocados em três grupos: controle, sentinelas e infectados, com dois animais cada. Os animais foram mantidos em isoladores de aço inoxidável. O grupo infectado recebeu um inóculo contendo BVDV-1, estirpe Singer. Os animais permaneceram nos isoladores durante 25 dias e, durante esse período, amostras de suabe nasal foram coletadas diariamente e sangue coletado semanalmente. No final, os animais foram eutanasiados, necropsiados e fragmentos de órgãos foram coletados para histopatologia, imuno-histoquímica e RT-PCR. No primeiro experimento (BP1), os animais infectados excretaram partículas virais entre os dias 6 e 21 pós-infecção. Quanto ao grupo sentinela, a excreção ocorreu apenas em um animal, no 20º dia pós-infecção, e a soroconversão foi observada no 25º dia pós-infecção. Na BP2, os animais infectados I3 e I4 excretaram partículas virais nos dias 4 e 21 pós-infecção, respectivamente. Apenas um animal sentinela (S3) apresentou excreção no dia 13 pós-infecção. Concluiu-se que os suínos podem se infectar com BVDV-1 e excretar partículas virais potencialmente infecciosas, sendo capazes de transmitir o vírus a outros suínos através da lâmina d'água.(AU)


Assuntos
Animais , Doenças dos Suínos/transmissão , Doenças dos Suínos/virologia , Vírus da Diarreia Viral Bovina/patogenicidade , Sus scrofa/virologia , Indústria da Carne
9.
Pesqui. vet. bras ; 38(10): 1896-1901, out. 2018. tab, ilus
Artigo em Inglês | LILACS, VETINDEX | ID: biblio-976387

Resumo

Swine can be infected by bovine viral diarrhea virus (BVDV). However, transmission routes among pigs are still unknown. The objective of the present study was to induce experimental infection of BVDV-1 in weaned piglets and to assess the potential transmission through pen back pond water, used to facilitate heat exchange of the pigs housed in barns. Two repetitions (BP1 and BP 2) were performed using 12 piglets proven to be free BVDV (n=6 per repetition) allocated into three groups: control, sentinels and infected with two piglets each. The piglets were placed in stainless steel isolators. The infected group received an inoculum containing BVDV-1, Singer strain. The piglets remained in the cabinets for 25 days, during which samples of nasal swab were collected daily and blood sampled weekly. At the end, the piglets were euthanized, necropsied and organ fragments were collected for histopathology, immunohistochemistry and RT-PCR. In the first experiment (BP1) the infected animals shed the virus between days 6 and 21 post-infection. Regarding the sentinel group, shedding occurred in only one piglet, on the 20th day after infection, and seroconversion was observed on the 25th day post-infection. In BP2, infected piglets I3 and I4 shed the virus on days 4 and 21 post-infection, respectively. Only one sentinel piglet (S3) she the virus on day 13 post-infection. Therefore, it was concluded that pigs can become infected with BVDV-1 and shed potentially infectious viral particles consequently, being able to transmit the virus to other pigs through back pond water.(AU)


Os suínos podem ser infectados pelo vírus da diarreia viral bovina (BVDV). No entanto, as vias de transmissão entre os suínos são ainda desconhecidas. O objetivo do presente estudo foi induzir a infecção experimental de BVDV-1 em leitões desmamados e avaliar a potencial transmissão pela lâmina d'água, que ajuda na troca de calor dos suínos alojados em baias. Duas repetições do experimento (BP1 e BP2) foram realizadas com 12 animais comprovadamente livres de BVDV (n=6 por repetição) alocados em três grupos: controle, sentinelas e infectados, com dois animais cada. Os animais foram mantidos em isoladores de aço inoxidável. O grupo infectado recebeu um inóculo contendo BVDV-1, estirpe Singer. Os animais permaneceram nos isoladores durante 25 dias e, durante esse período, amostras de suabe nasal foram coletadas diariamente e sangue coletado semanalmente. No final, os animais foram eutanasiados, necropsiados e fragmentos de órgãos foram coletados para histopatologia, imuno-histoquímica e RT-PCR. No primeiro experimento (BP1), os animais infectados excretaram partículas virais entre os dias 6 e 21 pós-infecção. Quanto ao grupo sentinela, a excreção ocorreu apenas em um animal, no 20º dia pós-infecção, e a soroconversão foi observada no 25º dia pós-infecção. Na BP2, os animais infectados I3 e I4 excretaram partículas virais nos dias 4 e 21 pós-infecção, respectivamente. Apenas um animal sentinela (S3) apresentou excreção no dia 13 pós-infecção. Concluiu-se que os suínos podem se infectar com BVDV-1 e excretar partículas virais potencialmente infecciosas, sendo capazes de transmitir o vírus a outros suínos através da lâmina d'água.(AU)


Assuntos
Animais , Doenças dos Suínos/transmissão , Doenças dos Suínos/virologia , Vírus da Diarreia Viral Bovina/patogenicidade , Sus scrofa/virologia , Indústria da Carne
10.
Pesqui. vet. bras ; 38(3): 387-392, mar. 2018. tab, graf
Artigo em Inglês | LILACS, VETINDEX | ID: biblio-964231

Resumo

The present study performed a genetic identification of pestiviruses contaminating batches of fetal bovine serum (FBS) produced in Brazil from 2006 to 2014. Seventy-three FBS lots were screened by a RT-PCR targeting the 5'untranslated region (UTR) of the pestivirus genome. Thirty-nine lots (53.4%) were positive for pestivirus RNA and one contained infectious virus. Nucleotide sequencing and phylogenetic analysis of the 5'UTR revealed 34 lots (46.6%) containing RNA of bovine viral diarrhea virus type 1 (BVDV-1), being 23 BVDV-1a (5' UTR identity 90.8-98.7%), eight BVDV-1b (93.9-96.7%) and three BVDV-1d (96.2- 97.6%). Six lots (8.2%) contained BVDV-2 (90.3-100% UTR identity) being two BVDV-2a; three BVDV-2b and one undetermined. Four FBS batches (5.5%) were found contaminated with HoBi-like virus (98.3 to 100%). Five batches (6.8%) contained more than one pestivirus. The high frequency of contamination of FBS with pestivirus RNA reinforce the need for systematic and updated guidelines for monitoring this product to reduce the risk of contamination of biologicals and introduction of contaminating agents into free areas.(AU)


No presente estudo foi realizada a identificação genética de pestivírus contaminantes de lotes de soro fetal bovino (SFB) produzidos no Brasil de 2006 a 2014. Setenta e três lotes de SFB foram testados por RT-PCR para a região 5' não traduzida do genoma dos pestivírus. Trinta e nove lotes (53,4%) foram positivos para RNA de pestivírus e um continha vírus infeccioso. O sequenciamento de nucleotídeos e análise filogenética da região 5'UTR revelou que 34 lotes (46,6%) continham RNA do vírus da diarreia viral bovina tipo 1 (BVDV-1), sendo 23 BVDV-1a (identidade na 5' UTR de 90,8-98,7%), oito BVDV-1b (93,9 a 96,7%) e três BVDV-1d (96,2%-97,6%). Seis lotes (8,2%) continham BVDV-2 (90,3 a 100% de identidade), sendo dois BVDV-2a, três BVDV-2b e um de subgenótipo indeterminado. Quatro lotes de SFB (5,5%) estavam contaminados com o vírus HoBi-like (98,3 a 100%). Cinco lotes (6,8%) continham mais do que um pestivírus. A alta frequência de contaminação de SFB com RNA de pestivírus reforça a necessidade para diretrizes sistemáticas atualizadas para a monitoração deste produto com a finalidade de reduzir a contaminação de produtos biológicos e a introdução de agentes contaminantes em áreas livres.(AU)


Assuntos
Animais , Bovinos , Bovinos/virologia , Vírus da Diarreia Viral Bovina/classificação , Vírus da Diarreia Viral Bovina/genética
11.
Tese em Português | VETTESES | ID: vtt-221668

Resumo

Os pestivírus Hobi-like (HoBiPeV) constituem um novo grupo de pestivírus bovino, geneticamente e antigenicamente relacionados ao vírus da diarreia viral bovina 1 (BVDV-1) e BVDV-2. Dados recentes mostram que os HoBiPeV são endêmicos na população bovina brasileira, e as vacinas reprodutivas/respiratórias de bovinos contêm apenas cepas de BVDV-1 e BVDV-2. O presente estudo investigou a resposta de anticorpos neutralizantes contra estes pestivírus induzida por duas vacinas comerciais (VA vacina atenuada; VI vacina inativada) e por três vacinas experimentais replicativas (VAC1 monovalente, BVDV1-; VAC2 bivalente, BVDV-1+BVDV-2 e VAC3 trivalente, BVDV-1+BVDV-2+HoBiPeV). Bovinos de raças de corte, soronegativos, foram imunizados uma vez (vacinas replicativas) ou duas vezes (para VI) e amostras de soro foram testadas por vírus-neutralização (VN) 30 dias após a vacinação (dpv) (vacinas replicativas) ou 30 dias após a segunda dose (VI). Considerou-se o título 60 indicador de proteção à doença clínica. Aos 30 dpv, a VA induziu títulos protetores ao BVDV-2 em 7/7 animais (GMT=289,8), e ao BVDV-1 e HoBiPeV em 5/7 animais (GMTs=97,5 e 80 respectivamente). A VI induziu títulos neutralizantes protetores frente ao BVDV-1 em 1/7 animal (GM=16,4), a BVDV-2 em 2/7 animais (GMT=53,8) e a HoBiPeV em nenhum dos animais (GMT=12,2). Quando o pool de soro dos grupos vacinados foi testado frente a isolados de pestivírus, a VA induziu títulos protetores contra 3/7 BVDV-1, 9/10 (BVDV-2) e 1/8 (HoBiPeV); a VI induziu títulos protetores contra 1/7 (BVDV-1), 1/10 (BVDV-2) e nenhum (0/8) HoBiPeV. A vacina experimental VAC1 induziu título protetor ao BVDV-1 em 9/9 animais (GMT=320), e em nenhum animal frente a BVDV-2 e HoBiPeV (GMT<10). A VAC2 induziu títulos protetores a BVDV-1 e BVDV-2 em 9/9 animais (GMTs=160 e 640, respectivamente), e contra HoBiPeV em 7/9 animais (GMT=108,5). Por fim, a vacina trivalente (VAC3) induziu títulos protetores similares a BVDV-1 (GMT=234,3,) BVDV-2 (GMT=294,9) e HoBiPeV (GMT=201,1) na totalidade dos animais. Quando o pool de amostras das vacinas foi testado frente aos isolados, VAC1 induziu títulos protetores contra 4/7 isolados de BVDV-1 mas contra nenhum BVDV-2 ou HoBiPeV; VAC2 induziu títulos protetores frente à 4/7 BVDV-1; 10/10 BVDV-2 e 2/8 HoBiPeV. Já a VAC3 conferiu títulos protetores contra todos os isolados de BVDV-1, BVDV-2 e HoBiPeV testados. Estes resultados indicam que vacinas contendo apenas BVDV-1 e BVDV-2 especialmente aquelas com vírus inativado - podem não induzir resposta sorológica compatível com proteção frente à isolados de HoBiPeV. Dessa forma, a necessidade de incluir isolados de HoBiPeV em formulações vacinais no Brasil deve ser considerada.


oBi-like pestiviruses (HoBiPeV) constitute a novel group of bovine pestiviruses, genetically and antigenically related to bovine viral diarrhea virus 1 (BVDV-1) and BVDV-2. Recent data shows that HoBiPeV are endemic among Brazilian cattle, yet bovine reproductive/respiratory vaccines contain only BVDV-1 and BVDV-2 strains. The present study investigated the neutralizing antibody response against these pestiviruses induced by two commercial vaccines (VA attenuated; VI inactivated) and by three experimental, replicative, vaccine formulations (VAC1 monovalent, BVDV-1; VAC2 bivalent, BVDV-1 + BVDV-2 and VAC3 trivalent, BVDV-1 + BVDV-2 and HoBiPeV). Seronegative beef calves were immunized once (replicative vaccines) or twice (inactivated vaccine) and serum samples were tested by virus-neutralization (VN) 30 days after vaccination (dpv) (replicative vaccines) or 30 days after the second dose (VI). We considered a threshold VN titer of 60 indicative of protection against clinical disease. At 30 dpv, VA induced protective titers against BVDV-2 in 7/7 animals (GMT=289.8) and against BVDV-1 and HoBiPeV in 5/7 animals (GMTs=97.5 and 80, respectively). VI induced protective titers against BVDV-1 in 1/7 animal (GMT=16.4), 2/7 animals against BVDV-2 (GMT=53.8) and in none of the calves against HoBiPeV (GMT=12.2). When a pool of sera of each vaccine group was tested against individual Brazilian isolates, VA induced protective titers against 3/7 BVDV-1 isolates, to 9/10 (BVDV-2) and 1/8 (HoBiPeV); VI induced protective titers against 1/7 (BVDV-1), 1/10 (BVDV-2) and none (0/8) HoBiPeV isolates. The experimental vaccine VAC1 induced protective titers against BVDV-1 in 9/9 animals (GMT=320) but in no animal against BVDV-2 or HoBiPeV (GMT<10). VAC2 induced protective titers to BVDV-1 and BVDV-2 in 9/9 animals (GMTs = 160 and 640, respectively), and against HoBiPeV in 7/9 animals (GMT=108.5). Finally, VAC3 induced protective titers in all animals against BVDV-1 (GMT=234.3), BVDV-2 (294.9) and HoBiPeV (201.1). Testing the pool of sera against pestivirus isolates, VAC1 induced titers 60 against 4/7 BVDV-1 but to none BVDV-2/HoBiPeV isolate; VAC2 induced protective titers against 4/7 BVDV-1; 10/10 BVDV-2 and 2/8 HoBiPeV; VAC3 induced protective titers against all BVDV-1, BVDV-2 and HoBiPeV isolates. These results indicate that vaccines composed by BVDV-1+BVDV-2 especially those containing inactivated virus - may not induce serological response against a variety of HoBiPeV isolates. Thus, the need of inclusion of HoBiPeV in vaccine formulations should be considered.

12.
Pesqui. vet. bras ; 36(11): 1081-1086, Nov. 2016. ilus
Artigo em Português | LILACS, VETINDEX | ID: biblio-842016

Resumo

Objetivou-se descrever os aspectos clínicos e anatomopatológicos, e a identificação viral de um caso de infecção pelo vírus 'Hobi'-like (BVDV-3) em bovino do semiárido paraibano, Nordeste do Brasil. Um bovino, fêmea, três meses de idade, foi levado ao Hospital Veterinário da UFCG apresentando salivação, dificuldade de apreensão do teto, falta de apetite, fezes escuras e em pouca quantidade. Diante da piora do quadro clínico optou-se por sua eutanásia in extremis, seguida da realização da necropsia e coleta de material para histopatologia. Histologicamente, nas mucosas do trato digestivo, havia edema, degeneração balonosa, necrose e infiltrado inflamatório, que foi observado na face dorsal da língua e no seu epitélio mais profundo. A imunohistoquímica de amostras de extremidade de pavilhão auricular demonstrou marcação antigênica positiva e pela RT-PCR foi possível detectar RNA viral do BVDV no soro sanguíneo, cujo efeito citopático em células epiteliais de rim bovino da linhagem "Madin Darby bovine kidney" (MDBK) não foi observado. O sequenciamento do gene 5'NCR demonstrou que o vírus isolado estaria mais relacionado ao 'Hobi'-like (BVDV-3). Após a confirmação do diagnóstico foram coletadas amostras de soro dos 23 animais do rebanho para sorologia por ELISA indireto, sendo constatada 69,6% (16/23) de soropositividade. A identificação deste novo caso de infecção por 'Hobi'-like na Paraíba reafirma a necessidade de um monitoramento regular para BVDV na região para detecção precoce da infecção dos rebanhos e adoção de medidas eficazes de prevenção e controle.(AU)


The aim of this study was to describe the clinical and anatomopathological aspects, and the viral identification of a case of 'Hobi'-like (BVDV-3) vírus infection in cattle from the semiarid of Paraiba State, Northeastern Brazil. A female bovine, three months old, was sent to the UFCG's Veterinary Hospital presenting salivation, difficulty of ceiling seizure, lack of appetite, dark feces and in small amounts. Due to worsening of symptoms it was decided to in extremis euthanasia, followed by the necropsy and collection of material for histopathology. Histologically, in the mucous membranes of the digestive tract there were edema, ballooning degeneration, necrosis and inflammatory infiltrate, which was observed on the dorsal surface of the tongue and in its deepest epithelium. The immunohistochemical of skin biopsies of the extremity of the ear (ear notches) showed positive antigenic marking and by RT-PCR it was possible to detect viral RNA of BVDV in the serum, whose cytopathic effect in epithelial cells of bovine kidney lineage "Madin Darby bovine kidney" (MDBK)was not observed. The sequencing of the 5'NCR gene showed that the virus isolated was more related to 'Hobi'-like (BVDV-3). After confirming the diagnosis serum samples were collected from 23 animals for serology by indirect ELISA, and a seropositivity of 69.6% (16/23) was found. The identification of this new case of 'Hobi'-like infection in Paraiba reaffirms the need for regular BVDV monitoring in the region to early detection of infection in the herds and adoption of effective preventive and control measures.(AU)


Assuntos
Animais , Feminino , Bovinos , Doença das Mucosas por Vírus da Diarreia Viral Bovina/diagnóstico , Doença das Mucosas por Vírus da Diarreia Viral Bovina/patologia , Doença das Mucosas por Vírus da Diarreia Viral Bovina/virologia , Vírus da Diarreia Viral Bovina , Infecções por Pestivirus/veterinária , Doença das Mucosas por Vírus da Diarreia Viral Bovina/prevenção & controle , Ensaio de Imunoadsorção Enzimática/veterinária , Imuno-Histoquímica/veterinária , Pestivirus/patogenicidade , Reação em Cadeia da Polimerase em Tempo Real/veterinária
13.
Ci. Rural ; 46(11): 1986-1991, 2016.
Artigo em Inglês | VETINDEX | ID: vti-18053

Resumo

To study the pathogenicity of the Brazilian bovine viral diarrhea virus (BVDV) type 1a 241.10 isolate, four calves were intranasally inoculated with a viral suspension containing 107.2 TCID50 mL-¹. One calf was left uninoculated and kept in contact with the other calves to investigate viral transmissibility. After inoculation, the animals were monitored daily for clinical signs of infection. The presence of the virus in the blood and nasal secretions was confirmed by virus isolation in cell culture. White blood cells were quantified prior to and every 3 days after infection, and the presence of antibodies was checked every 7 days, starting at day 0 until day 42 post-inoculation (pi). After infection, nasal and ocular serous secretions were observed between days 1 and 5 pi, along with a mild cough from days 2 to 4 pi; however, no severe clinical signs were present. Body temperature was slightly elevated between days 4 and 6 pi. The control calf did not develop any of the signs observed in the infected animals. Cell culture-mediated virus isolation confirmed viremia between days 4 and 8 pi and the presence of the virus in the nasal secretions between days 1 and 10 pi. All infected animals showed a decrease in white blood cell count. Antibodies could be detected from day 14 pi, and these levels remained high until day 35 pi. The control calf had no viremia, viral presence in nasal secretions, or positive serology, indicating the absence of viral transmission. Thus, isolate BVDV 1a 241.10 has low pathogenicity and transmissibility but retains immunosuppressive capacity.(AU)


Com o objetivo de estudar a patogenicidade de uma amostra brasileira do BVDV-1a (241.10), quatro bovinos foram inoculados pela via intranasal com uma suspensão viral contendo 107,2 TCID50 mL-¹. Um bezerro foi mantido em contato com o grupo infectado para avaliar a transmissibilidade. Após a inoculação, os animais foram monitorados diariamente para observação dos sinais clínicos. A presença de vírus no sangue e na secreção nasal foi confirmada pelo isolamento viral em cultivo celular. A contagem total de leucócitos no sangue foi realizada com intervalos de três dias pré- e pós-infecção e a detecção de anticorpos a cada sete dias, iniciando-se no dia 0 até o dia 42 pós-inoculação (pi). Após a inoculação, não foram observados sinais clínicos evidentes, apenas secreção nasal e ocular serosa entre os dias 1 e 5 pi e tosse discreta entre os dias 2 e 4 pi. A temperatura corporal teve leve aumento entre os dias 4 e 6 pi. O animal controle não desenvolveu os sinais observados no grupo infectado. O isolamento viral indicou presença de viremia entre os dias 4 a 8 pi e excreção viral na secreção nasal entre os dias 1 e 10 pi. Os animais inoculados apresentaram redução na contagem total de leucócitos no sangue. A detecção de anticorpos iniciou-se no dia 14 pi e os níveis mantiveram-se elevados até o dia 35 pi. No animal controle, não foi observada viremia, presença de vírus na secreção nasal e sorologia positiva, demonstrando ausência da transmissão. Assim sendo, conclui-se que a amostra de BVDV 1a 241.10 possui baixa patogenicidade, mantém a capacidade imunossupressora e tem baixa transmissibilidade.(AU)


Assuntos
Animais , Bovinos , Vírus da Diarreia Viral Bovina/patogenicidade , Infecções por Pestivirus/patologia , Infecções por Pestivirus/diagnóstico , Infecções por Pestivirus/veterinária , Técnicas In Vitro/métodos
14.
Pesqui. vet. bras ; 36(11): 1081-1086, nov. 2016. ilus
Artigo em Português | VETINDEX | ID: vti-15355

Resumo

The aim of this study was to describe the clinical and anatomopathological aspects, and the viral identification of a case of Hobi-like (BVDV-3) vírus infection in cattle from the semiarid of Paraiba State, Northeastern Brazil. A female bovine, three months old, was sent to the UFCGs Veterinary Hospital presenting salivation, difficulty of ceiling seizure, lack of appetite, dark feces and in small amounts. Due to worsening of symptoms it was decided to in extremis euthanasia, followed by the necropsy and collection of material for histopathology. Histologically, in the mucous membranes of the digestive tract there were edema, ballooning degeneration, necrosis and inflammatory infiltrate, which was observed on the dorsal surface of the tongue and in its deepest epithelium. The immunohistochemical of skin biopsies of the extremity of the ear (ear notches) showed positive antigenic marking and by RT-PCR it was possible to detect viral RNA of BVDV in the serum, whose cytopathic effect in epithelial cells of bovine kidney lineage Madin Darby bovine kidney (MDBK)was not observed. The sequencing of the 5NCR gene showed that the virus isolated was more related to Hobi-like (BVDV-3). After confirming the diagnosis serum samples were collected from 23 animals for serology by indirect ELISA, and a seropositivity of 69.6% (16/23) was found. The identification of this new case of Hobi-like infection in Paraiba reaffirms the need for regular BVDV monitoring in the region to early detection of infection in the herds and adoption of effective preventive and control measures.(AU)


Objetivou-se descrever os aspectos clínicos e anatomopatológicos, e a identificação viral de um caso de infecção pelo vírus Hobi-like (BVDV-3) em bovino do semiárido paraibano, Nordeste do Brasil. Um bovino, fêmea, três meses de idade, foi levado ao Hospital Veterinário da UFCG apresentando salivação, dificuldade de apreensão do teto, falta de apetite, fezes escuras e em pouca quantidade. Diante da piora do quadro clínico optou-se por sua eutanásia in extremis, seguida da realização da necropsia e coleta de material para histopatologia. Histologicamente, nas mucosas do trato digestivo, havia edema, degeneração balonosa, necrose e infiltrado inflamatório, que foi observado na face dorsal da língua e no seu epitélio mais profundo. A imunohistoquímica de amostras de extremidade de pavilhão auricular demonstrou marcação antigênica positiva e pela RT-PCR foi possível detectar RNA viral do BVDV no soro sanguíneo, cujo efeito citopático em células epiteliais de rim bovino da linhagem Madin Darby bovine kidney (MDBK) não foi observado. O sequenciamento do gene 5NCR demonstrou que o vírus isolado estaria mais relacionado ao Hobi-like (BVDV-3). Após a confirmação do diagnóstico foram coletadas amostras de soro dos 23 animais do rebanho para sorologia por ELISA indireto, sendo constatada 69,6% (16/23) de soropositividade. A identificação deste novo caso de infecção por Hobi-like na Paraíba reafirma a necessidade de um monitoramento regular para BVDV na região para detecção precoce da infecção dos rebanhos e adoção de medidas eficazes de prevenção e controle.(AU)


Assuntos
Animais , Feminino , Bovinos , Vírus da Diarreia Viral Bovina , Doença das Mucosas por Vírus da Diarreia Viral Bovina/diagnóstico , Doença das Mucosas por Vírus da Diarreia Viral Bovina/patologia , Doença das Mucosas por Vírus da Diarreia Viral Bovina/virologia , Infecções por Pestivirus/veterinária , Pestivirus/patogenicidade , Reação em Cadeia da Polimerase em Tempo Real/veterinária , Imuno-Histoquímica/veterinária , Ensaio de Imunoadsorção Enzimática/veterinária , Doença das Mucosas por Vírus da Diarreia Viral Bovina/prevenção & controle
15.
Acta sci. vet. (Online) ; 44: 01-05, 2016. ilus
Artigo em Português | VETINDEX | ID: vti-722733

Resumo

Background: The farming of wild boars has growing due to the interest of the human consumption of this exotic meat. Such a development may pose an increased risk of disease transmission between boars and domestic animals. The wild boar population has increased in South America in the last years due the absence of predator causing economic losses due to direct damage to crops and risk of disease transmission. The genus Pestivirus within the family Flaviviridae are composed by four recognized species by the International Committee on the Taxonomy of Viruses (ICTV): classical swine fever virus (CSFV), border disease virus (BDV), bovine viral diarrhea virus type 1 (BVDV-1) and 2 (BVDV-2). Other putative species denoted as atypical pesitiviruses have been reported as HoBi-like virus, giraffe pestivirus, Bungowannah pestivirus, Pronghorn antelope virus, atypical porcine pestivirus (APPV), Norwegian rat pestivirus (NrPV) and Rhinolophus affinis bat pestivirus (RaPestV-1). CSFV is commonly detected in wild boars, but despite positive serology, bovine viral diarrhea virus (BVDV) was never detected in this animal species. Thereby, the present communication describes the first detection of BVDV in the lungs of captive boars using RT-PCR and DNA sequencing.Materials, Methods & Results: Forty lung samples from farmed wild boars were collected after slaughter in a commercial abattoir. [...](AU)


Assuntos
Animais , Infecções por Pestivirus/veterinária , Pestivirus/isolamento & purificação , Vírus da Diarreia Viral Bovina , Pulmão , Sus scrofa/microbiologia , Reação em Cadeia da Polimerase em Tempo Real/veterinária
16.
Acta sci. vet. (Online) ; 44: 01-05, 2016. graf
Artigo em Português | VETINDEX | ID: vti-722709

Resumo

Background: The farming of wild boars has growing due to the interest of the human consumption of this exotic meat. Such a development may pose an increased risk of disease transmission between boars and domestic animals. The wild boar population has increased in South America in the last years due the absence of predator causing economic losses due to direct damage to crops and risk of disease transmission. The genus Pestivirus within the family Flaviviridae are composed by four recognized species by the International Committee on the Taxonomy of Viruses (ICTV): classical swine fever virus (CSFV), border disease virus (BDV), bovine viral diarrhea virus type 1 (BVDV-1) and 2 (BVDV-2). Other putative species denoted as atypical pesitiviruses have been reported as ‘HoBi-like virus, giraffe pestivirus, Bungowannah pestivirus, Pronghorn antelope virus, atypical porcine pestivirus (APPV), Norwegian rat pestivirus (NrPV) and Rhinolophus affinis bat pestivirus (RaPestV-1). CSFV is commonly detected in wild boars, but despite positive serology, bovine viral diarrhea virus (BVDV) was never detected in this animal species. Thereby, the present communication describes the first detection of BVDV in the lungs of captive boars using RT-PCR and DNA sequencing.Materials, Methods & Results: Forty lung samples from farmed wild boars were collected after slaughter in a commercial abattoir. The organs were crushed separately, centrifuged, and the supernatant was stored for further analysis. The total RNA was isolated using a phenol-based protocol and RT-PCR protocol that amplified 118 bp of 5 untranslated region (5UTR) was carried out. One out 40 samples resulted positive. The positive sample had partial fragments of 5UTR and N terminal autoprotease (Npro) sequenced and analyzed. The strain LV Java/2012 presented 99% of identity in 5UTR and 98% in Npro region with a BVDV-2 previously reported in bovines in Southern Brazil.[...](AU)


Assuntos
Animais , Sus scrofa/virologia , Vírus da Diarreia Viral Bovina/isolamento & purificação , Infecções por Pestivirus/epidemiologia , Infecções por Pestivirus/veterinária
17.
Acta sci. vet. (Impr.) ; 44: 01-05, 2016. graf
Artigo em Português | VETINDEX | ID: biblio-1457440

Resumo

Background: The farming of wild boars has growing due to the interest of the human consumption of this exotic meat. Such a development may pose an increased risk of disease transmission between boars and domestic animals. The wild boar population has increased in South America in the last years due the absence of predator causing economic losses due to direct damage to crops and risk of disease transmission. The genus Pestivirus within the family Flaviviridae are composed by four recognized species by the International Committee on the Taxonomy of Viruses (ICTV): classical swine fever virus (CSFV), border disease virus (BDV), bovine viral diarrhea virus type 1 (BVDV-1) and 2 (BVDV-2). Other putative species denoted as atypical pesitiviruses have been reported as ‘HoBi’-like virus, giraffe pestivirus, Bungowannah pestivirus, Pronghorn antelope virus, atypical porcine pestivirus (APPV), Norwegian rat pestivirus (NrPV) and Rhinolophus affinis bat pestivirus (RaPestV-1). CSFV is commonly detected in wild boars, but despite positive serology, bovine viral diarrhea virus (BVDV) was never detected in this animal species. Thereby, the present communication describes the first detection of BVDV in the lungs of captive boars using RT-PCR and DNA sequencing.Materials, Methods & Results: Forty lung samples from farmed wild boars were collected after slaughter in a commercial abattoir. The organs were crushed separately, centrifuged, and the supernatant was stored for further analysis. The total RNA was isolated using a phenol-based protocol and RT-PCR protocol that amplified 118 bp of 5’ untranslated region (5’UTR) was carried out. One out 40 samples resulted positive. The positive sample had partial fragments of 5’UTR and N terminal autoprotease (Npro) sequenced and analyzed. The strain LV Java/2012 presented 99% of identity in 5’UTR and 98% in Npro region with a BVDV-2 previously reported in bovines in Southern Brazil.[...]


Assuntos
Animais , Infecções por Pestivirus/epidemiologia , Infecções por Pestivirus/veterinária , Sus scrofa/virologia , Vírus da Diarreia Viral Bovina/isolamento & purificação
18.
Braz. J. Microbiol. ; 47(4): 993-999, Out-Dez. 2016. tab, ilus, graf
Artigo em Inglês | VETINDEX | ID: vti-23302

Resumo

The open reading frame of a Brazilian bovine viral diarrhea virus (BVDV) strain, IBSP4ncp, was recombined with the untranslated regions of the reference NADL strain by homologous recombination in Saccharomyces cerevisiae, resulting in chimeric full-length cDNA clones of BVDV (chi-NADL/IBSP4ncp/2 and chi-NADL/IBSP4ncp/3). The recombinant clones were successfully recovered, resulting in viable viruses, having the kinetics of replication, focus size, and morphology similar to those of the parental virus, IBSP4ncp. In addition, the chimeric viruses remained stable for at least 10 passages in cell culture, maintaining their replication efficiency unaltered. Nucleotide sequencing revealed a few point mutations; nevertheless, the phenotype of the rescued viruses was nearly identical to that of the parental virus in all experiments. Thus, genetic stability of the chimeric clones and their phenotypic similarity to the parental virus confirm the ability of the yeast-based homologous recombination to maintain characteristics of the parental virus from which the recombinant viruses were derived. The data also support possible use of the yeast system for the manipulation of the BVDV genome.(AU)


Assuntos
Animais , Bovinos , Bovinos/genética , Bovinos/microbiologia , Leveduras/crescimento & desenvolvimento , Leveduras/genética , Infecções por Pestivirus/veterinária , Células Clonais/microbiologia
19.
Ci. Rural ; 46(9): 1607-1612, Sept. 2016. tab
Artigo em Inglês | VETINDEX | ID: vti-29720

Resumo

This study investigated the occurrence of antibodies for BVDV-1 in swine herds located in the region of Mossoró city of the state of Rio Grande do Norte, Brazil. A sample size of 412 animals was estimated assuming unknown prevalence (set at 50%). Virus neutralization assay was used to the detect the presence of antibodies for BVDV-1 and the results found were analysed using multivariable logistic regression model. The obtained prevalence was 4% at animal level and 45% at the animal and herd level. The titers were highly variable between animals and within farms. The multivariable logistic regression analysis showed an association between being housed outside and exposure to BVDV-1 (OR=0.24, 95% CI:0.06, 0.96, P=0.04). Highly correlated data and low prevalence of antibodies at the animal level resulted in insufficient power to detect significant differences with other selected risk factors. In conclusion, the prevalence is within the range reported for other countries.(AU)


Este estudo investigou a ocorrência de anticorpos contra o BVDV-1 em rebanhos suínos localizados na região da cidade de Mossoró do Estado do Rio Grande do Norte, Brasil. Um tamanho de amostra de 412 animais foi estimado assumindo uma prevalência desconhecida (fixada em 50%). O teste de virusneutralização foi utilizado para detectar a presença de anticorpos ao BVDV-1 e os resultados obtidos foram analisados usando o modelo de regressão logística multivariada. A prevalência obtida foi de 4% em nível animal e de 45% dos rebanhos. Os títulos foram muito variáveis entre os animais e dentro de fazendas. A análise de regressão logística multivariada apontou associação entre animais criados soltos e a exposição ao BVDV-1 (OR=0,24; 95% IC: 0,06; 0,96; P=0.04). A alta correlação entre os dados junto com a baixa prevalência de anticorpos a nível animal pode ter sido insuficiente para que as diferenças reais fossem detectadas. Em conclusão, a prevalência está dentro do intervalo referido em outros países.(AU)


Assuntos
Animais , Doenças dos Suínos , Vírus da Diarreia Viral Bovina Tipo 1/imunologia , Testes de Neutralização/veterinária
20.
Tese em Português | VETTESES | ID: vtt-219763

Resumo

O gênero Pestivirus, pertencente à família Flaviviridae, compreende vírus de genoma RNA classificados em 11 espécies e na sua grande maioria (10 espécies) estão associadas a infecções em animais ungulados. No Brasil, assim como em vários países, os pestivírus podem afetar a atividades pecuária e gerar prejuízos econômicos, como infecção por Pestivirus C (peste suína clássica) e K (pestivírus atípico porcino) em suínos e por Pestivirus A, B (vírus da diarreia viral bovina 1, 2) e H (pestivírus hobi-like) em bovinos. Com o objetivo de contribuir com mais informações acerca da epidemiologia e diversidade dos pestivírus no Brasil e da caracterização antigênica entre cepas de pestivírus de bovinos, o presente trabalho será apresentado sob a forma de 4 capítulos. O objetivo e resultados alcançados nos trabalhos foram, respectivamente: 1) a caracterização de pestivírus detectados em suínos de criação de fundo de quintal no Rio Grande do Sul, através de soroneutralização para detecção de anticorpos contra vírus da diarreia viral bovina (BVDV) 1 e 2, além de RT-PCR para detecção de pestivírus seguida de sequenciamento e análise filogenética. Como resultado, 28 (4,4%) das amostras foram positivas na sorologia e duas amostras foram positivas na RT-PCR e classificadas como BVDV-1d e BVDV-2a; 2) a primeira descrição de Pestivirus K no Brasil, através de análise de amostras de leitões nascidos com tremores congênitos em duas granjas do Sul do país por RT-PCR. Como resultado, foi obtida a primeira detecção deste vírus na América do Sul;.3) o uso da Análise de Componentes Principais (PCA) como ferramenta estatística para caracterização de cepas de BVDV-1 e 2 através de soroneutralização. Os resultados demonstraram que a PCA gerou gráficos de fácil visualização e interpretação de diferenças e semelhanças entre agrupamentos antigênicos e que não houve mesmo padrão de antigenicidade entre isolados pertencentes a um mesmo subgenótipo; e 4) a caracterização de pestivírus detectados em amostras de bovinos recebidas no Laboratório de Virologia Veterinária-UFRGS entre 2016-2018, bem como inferência temporal (através da ferramenta relógio molecular) dos subgenótipos de pestivírus de bovinos já escritos no Brasil. Como resultado, foram descritas amostras de subgenótipos BVDV-1a, 1b e 2b (mais prevalentes no país) e 1d e 1e (subgenótipos já descritos, porém menos frequentes), e análise temporal da filodinâmica destas cepas e outras representando os subgenótipos já descritos no país pode ser inferida e explicada pela história da pecuária bovina no país. Os resultados aqui apresentados somam novo conhecimento acerca dos pestivírus e podem no futuro contribuir para planos de controle e erradicação das doenças causadas por pestivírus no país.


The genus Pestivirus, belonging to the family Flaviviridae, comprises RNA genome viruses classified into 11 species, from which 10 species are associated with infection in ungulate animal hosts. In Brazil, as in several countries, pestiviruses can affect livestock and generate economic losses, such as Pestivirus C (classical swine fever virus) and K (atypical porcine pestivirus- APPV) swine infection and Pestivirus A, B (bovine viral diarrhea virus 1, 2- BVDV-1, 2) and H (HoBi-like virus) cattle infection. In order to contribute with data about pestiviruses in Brazil and antigenic characterization of bovine pestivirus strains, the present thesis will be presented in 4 chapters. The chapters present 1) the characterization of pestiviruses detected in backyard pigs in Rio Grande do Sul, 2) the first description of Pestivirus K in Brazil, 3) the use of Principal Component Analysis (PCA) as a statistical tool for antigenic characterization of strains of bovine pestiviruses and 4) the characterization of pestiviruses detected in bovine samples sent to the Veterinary Virology Laboratory-UFRGS between 2016-2018, as well as temporal inference (through the molecular clock tool) of subgenotypes detected in Brazil. In the first chapter, swine serum samples from backyard animals from Rio Grande do Sul state were tested through serum neutralization in order to detect antibodies against BVDV-1 and 2, as well as RT-PCR to detect pestivirus followed by sequencing and phylogenetic analysis. As a result, 28 (4.4%) of the samples were positive in serology and two samples were positive in RT-PCR and classified as BVDV-1d and BVDV-2a. In the second chapter, samples of piglets born with congenital tremors from two pig farms in South Brazil were analyzed using RT-PCR in an attempt to first detect the recently described Pestivirus K species in Brazilian swine herds. As a result, this was the first detection of APPV in South America. In the third chapter, PCA was applied to virus neutralization results in order to visualize antigenic relationships between vaccine strains and field isolates from several BVDV subgenotypes. As a result, PCA generated easy interpretation graphics for differences and similarities between antigenic clusters. The results also demonstrated that there are no grouping patterns between isolates belonging to the same subgenotype. In the fourth chapter, phylogeny of pestivirus samples received in the laboratory from 2016 to 2018 resulted in detection of BVDV-1a, 1b and 2b (most prevalent in the country) and 1d and 1e (less frequent) subgenotypes, and temporal analysis of subgenotypes in the country could be inferred. The results presented here contribute to pestiviruses knowledge and may in the future contribute to control and eradication of pestiviruses in the country.

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