Resumo
The objective of this study was to determine the ability of prostaglandin E2 (PGE2) to induce ovulation and expression of PGE2 receptor (EP2 and EP4) and COX genes (COX-1 and COX-2) in the ovary and pituitary of prepubertal mice. The positive control consisted of the application of 5 µg of gonadotropin-releasing hormone (GnRH, n = 29); the negative control applied 0.5 mL of phosphate buffered saline (PBS, n=31); the treatment tested the application of 250 µg of PGE2 (n = 29), making a total of 89 prepubertal mice (BALB/c). Mice were euthanized 14 to 15 h after treatments to detect ovulation and tissue collection. A Chi-square test was used to compare the proportion of animals ovulating. Gene expressions and number of ovulation were analyzed by one-way ANOVA and Tukey's test was used to compare means among groups. A greater proportion of mice (P < 0.001) ovulated after receiving GnRH (89.7%, 26/29) compared to PGE2 group (58.6%, 17/29). However, the proportion was higher compared to those treated with PBS (0%, 0/31). Ep2gene expression in the pituitary was > two-fold higher (P < 0.05) in the PGE2 group compared to the PBS and GnRH groups. Further, PGE2 stimulated Cox1 (2.7 fold, P < 0.05) while GnRH stimulated Cox2 expression (6.5 fold, P < 0.05) in the pituitary when compared to the PBS group. In conclusion, our results support the hypothesis that PGE2 can induce ovulation in prepubertal mice with a concomitant increase in Ep2 and Cox1 gene expression in the pituitary gland.(AU)
O objetivo deste estudo foi determinar a capacidade da prostaglandina E2 (PGE2) em induzir a ovulação e expressão do receptor PGE2 (EP2 e EP4) e genes COX (COX-1 e COX-2) no ovário e na hipófise de camundongos pré-púberes. O controle positivo consistiu na aplicação de 5 µg de hormônio liberador de gonadotrofina (GnRH, n = 29); o controle negativo aplicação 0,5 mL de tampão fosfato-salino (PBS, n=31); o tratamento testado aplicação de 250 µg de PGE2 (n = 29), perfazendo um total de 89 camundongos (BALB/c) pré-púberes. Os camundongos foram sacrificados 14 a 15 h após os tratamentos para detectar ovulações e coleta de tecido. O teste do qui-quadrado foi usado para comparar a proporção de animais ovulando. As expressões gênicas e o número de ovulação foram analisados por ANOVA e o teste de tukey foi usado para comparar as médias entre os grupos. Uma maior proporção de camundongos (P <0,001) ovulou após receber GnRH (89,7%, 26/29) em comparação com o grupo PGE2 (58,6%, 17/29). No entanto, a proporção foi maior em comparação com aqueles tratados com PBS (0%, 0/31). A expressão do gene Ep2 na hipófise foi duas vezes maior (P <0,05) no grupo PGE2 em comparação com os grupos PBS e GnRH. Além disso, a PGE2 estimulou a Cox1(2,7 vezes, P <0,05) enquanto o GnRH estimulou a expressão de Cox2 (6,5 vezes, P <0,05) na pituitária em comparação com o grupo PBS. Em conclusão, nossos resultados suportam a hipótese de que PGE2 é capaz de induzir ovulação em camundongos pré-púberes com aumento concomitante na expressão dos genes Ep2 e Cox1 na glândula pituitária.(AU)
Assuntos
Animais , Camundongos , Ovulação , Dinoprostona/análise , Expressão Gênica , Camundongos/genética , HipófiseResumo
The objective of this study was to determine the ability of prostaglandin E2 (PGE2) to induce ovulation and expression of PGE2 receptor (EP2 and EP4) and COX genes (COX-1 and COX-2) in the ovary and pituitary of prepubertal mice. The positive control consisted of the application of 5 µg of gonadotropin-releasing hormone (GnRH, n = 29); the negative control applied 0.5 mL of phosphate buffered saline (PBS, n=31); the treatment tested the application of 250 µg of PGE2 (n = 29), making a total of 89 prepubertal mice (BALB/c). Mice were euthanized 14 to 15 h after treatments to detect ovulation and tissue collection. A Chi-square test was used to compare the proportion of animals ovulating. Gene expressions and number of ovulation were analyzed by one-way ANOVA and Tukey's test was used to compare means among groups. A greater proportion of mice (P < 0.001) ovulated after receiving GnRH (89.7%, 26/29) compared to PGE2 group (58.6%, 17/29). However, the proportion was higher compared to those treated with PBS (0%, 0/31). Ep2gene expression in the pituitary was > two-fold higher (P < 0.05) in the PGE2 group compared to the PBS and GnRH groups. Further, PGE2 stimulated Cox1 (2.7 fold, P < 0.05) while GnRH stimulated Cox2 expression (6.5 fold, P < 0.05) in the pituitary when compared to the PBS group. In conclusion, our results support the hypothesis that PGE2 can induce ovulation in prepubertal mice with a concomitant increase in Ep2 and Cox1 gene expression in the pituitary gland.(AU)
O objetivo deste estudo foi determinar a capacidade da prostaglandina E2 (PGE2) em induzir a ovulação e expressão do receptor PGE2 (EP2 e EP4) e genes COX (COX-1 e COX-2) no ovário e na hipófise de camundongos pré-púberes. O controle positivo consistiu na aplicação de 5 µg de hormônio liberador de gonadotrofina (GnRH, n = 29); o controle negativo aplicação 0,5 mL de tampão fosfato-salino (PBS, n=31); o tratamento testado aplicação de 250 µg de PGE2 (n = 29), perfazendo um total de 89 camundongos (BALB/c) pré-púberes. Os camundongos foram sacrificados 14 a 15 h após os tratamentos para detectar ovulações e coleta de tecido. O teste do qui-quadrado foi usado para comparar a proporção de animais ovulando. As expressões gênicas e o número de ovulação foram analisados por ANOVA e o teste de tukey foi usado para comparar as médias entre os grupos. Uma maior proporção de camundongos (P <0,001) ovulou após receber GnRH (89,7%, 26/29) em comparação com o grupo PGE2 (58,6%, 17/29). No entanto, a proporção foi maior em comparação com aqueles tratados com PBS (0%, 0/31). A expressão do gene Ep2 na hipófise foi duas vezes maior (P <0,05) no grupo PGE2 em comparação com os grupos PBS e GnRH. Além disso, a PGE2 estimulou a Cox1(2,7 vezes, P <0,05) enquanto o GnRH estimulou a expressão de Cox2 (6,5 vezes, P <0,05) na pituitária em comparação com o grupo PBS. Em conclusão, nossos resultados suportam a hipótese de que PGE2 é capaz de induzir ovulação em camundongos pré-púberes com aumento concomitante na expressão dos genes Ep2 e Cox1 na glândula pituitária.(AU)
Assuntos
Animais , Camundongos , Ovulação , Dinoprostona/análise , Expressão Gênica , Camundongos/genética , HipófiseResumo
This study aimed to evaluate the role of prostaglandin F2α (PGF) on ovulation. In Experiment 1, cows were randomly allocated to two treatments to receive 150 µg of d-Cloprostenol (PGF Group, n = 12) or 2 mL of NaCl 0.9% (Control Group, n = 11) and CIDRsï, were removed 4 days later. No cow ovulated in Control and PGF groups. In Experiment 2, cows were randomly separated into two experimental groups to receive 4 injections of 150 µg of d-Cloprostenol (n = 9) or 2 mL of NaCL 0.9% (n = 9). In this experiment, ovulation was not observed in any cows. In Experiment 3, ovariectomized cows receive three injections of 300µg of PGF analog (PGF Group, n = 5), 100µg of Lecirelin (GnRH Group, n = 5) or 2 mL of PBS (Control Group, n = 4). The LH concentration was higher (P <0.0001) in cows from the GnRH group than in the PGF and Control groups. In experiment 4, cows with preovulatory follicles (>11.5 mm) were treated with Saline (Control Group, n = 6); Lecirelin (GnRH Group, n = 7) or Cloprostenol Sodium (PGF Group, n = 6). There was a significant increase in the vascular area of follicles from 0 to 24 h in GnRH and PGF treatments. In conclusion, PGF was not able to induce ovulation in cows with high or low plasma progesterone concentration. Additionally, PGF alone was not able to induce LH release and follicle luteinization, but increased follicular vascularization.(AU)
O objetivo deste estudo foi avaliar o papel da prostaglandina F2α (PGF) na ovulação. No Experimento 1, as vacas foram alocadas aleatoriamente em dois tratamentos para receber 150 µg de d-Cloprostenol (Grupo PGF, n = 12) ou 2 mL de NaCl 0,9% (Grupo Controle, n = 11) e os CIDRï, foram removidos 4 dias depois. Nenhuma vaca ovulou nos grupos Controle e PGF. No Experimento 2, as vacas foram separadas aleatoriamente em dois grupos experimentais para receber 4 injeções de 150 µg de d-Cloprostenol (n = 9) ou 2 mL de NaCL 0,9% (n = 9). Não foi observada ovulação em nenhum dos animais deste experimento. No Experimento 3, vacas ovariectomizadas receberam três injeções de 300µg de análogo de PGF (Grupo PGF, n = 5), 100µg de Lecirelina (Grupo GnRH, n = 5) ou 2 mL de PBS (Grupo Controle, n = 4). A concentração de LH foi maior (P <0,0001) nas vacas do grupo GnRH do que nos grupos PGF e Controle. No Experimento 4, vacas com folículos pré-ovulatórios (> 11,5 mm) foram tratadas com solução salina (Grupo Controle, n = 6), Lecirelina (Grupo GnRH, n = 7) ou Cloprostenol Sódico (Grupo PGF, n = 6). Houve um aumento significativo na área vascular dos folículos de 0 a 24h nos tratamentos com GnRH e PGF. Em conclusão, a PGF não foi capaz de induzir ovulação em vacas com alta ou baixa concentração plasmática de progesterona. Além disso, a PGF sozinha não foi capaz de induzir a liberação de LH e a luteinização do folículo, mas aumentou a vascularização folicular.(AU)
Assuntos
Animais , Feminino , Bovinos , Prostaglandinas Sintéticas , Bovinos/embriologia , Bovinos/fisiologia , Hormônio Luteinizante , Dinoprosta/análise , Ovulação , HipófiseResumo
This study aimed to evaluate the role of prostaglandin F2α (PGF) on ovulation. In Experiment 1, cows were randomly allocated to two treatments to receive 150 µg of d-Cloprostenol (PGF Group, n = 12) or 2 mL of NaCl 0.9% (Control Group, n = 11) and CIDRsï, were removed 4 days later. No cow ovulated in Control and PGF groups. In Experiment 2, cows were randomly separated into two experimental groups to receive 4 injections of 150 µg of d-Cloprostenol (n = 9) or 2 mL of NaCL 0.9% (n = 9). In this experiment, ovulation was not observed in any cows. In Experiment 3, ovariectomized cows receive three injections of 300µg of PGF analog (PGF Group, n = 5), 100µg of Lecirelin (GnRH Group, n = 5) or 2 mL of PBS (Control Group, n = 4). The LH concentration was higher (P <0.0001) in cows from the GnRH group than in the PGF and Control groups. In experiment 4, cows with preovulatory follicles (>11.5 mm) were treated with Saline (Control Group, n = 6); Lecirelin (GnRH Group, n = 7) or Cloprostenol Sodium (PGF Group, n = 6). There was a significant increase in the vascular area of follicles from 0 to 24 h in GnRH and PGF treatments. In conclusion, PGF was not able to induce ovulation in cows with high or low plasma progesterone concentration. Additionally, PGF alone was not able to induce LH release and follicle luteinization, but increased follicular vascularization.(AU)
O objetivo deste estudo foi avaliar o papel da prostaglandina F2α (PGF) na ovulação. No Experimento 1, as vacas foram alocadas aleatoriamente em dois tratamentos para receber 150 µg de d-Cloprostenol (Grupo PGF, n = 12) ou 2 mL de NaCl 0,9% (Grupo Controle, n = 11) e os CIDRï, foram removidos 4 dias depois. Nenhuma vaca ovulou nos grupos Controle e PGF. No Experimento 2, as vacas foram separadas aleatoriamente em dois grupos experimentais para receber 4 injeções de 150 µg de d-Cloprostenol (n = 9) ou 2 mL de NaCL 0,9% (n = 9). Não foi observada ovulação em nenhum dos animais deste experimento. No Experimento 3, vacas ovariectomizadas receberam três injeções de 300µg de análogo de PGF (Grupo PGF, n = 5), 100µg de Lecirelina (Grupo GnRH, n = 5) ou 2 mL de PBS (Grupo Controle, n = 4). A concentração de LH foi maior (P <0,0001) nas vacas do grupo GnRH do que nos grupos PGF e Controle. No Experimento 4, vacas com folículos pré-ovulatórios (> 11,5 mm) foram tratadas com solução salina (Grupo Controle, n = 6), Lecirelina (Grupo GnRH, n = 7) ou Cloprostenol Sódico (Grupo PGF, n = 6). Houve um aumento significativo na área vascular dos folículos de 0 a 24h nos tratamentos com GnRH e PGF. Em conclusão, a PGF não foi capaz de induzir ovulação em vacas com alta ou baixa concentração plasmática de progesterona. Além disso, a PGF sozinha não foi capaz de induzir a liberação de LH e a luteinização do folículo, mas aumentou a vascularização folicular.(AU)
Assuntos
Animais , Feminino , Bovinos , Prostaglandinas Sintéticas , Bovinos/embriologia , Bovinos/fisiologia , Hormônio Luteinizante , Dinoprosta/análise , Ovulação , HipófiseResumo
Here, the efficiency of applying subdoses of equine chorionic gonadotropin (eCG) and prostaglandin F2α (PGF2α) at the Bai Hui (BH) acupoint for estrus synchronization in sheep was evaluated. Thirty Santa Inês ewes received intravaginal sponges containing 60 mg medroxyprogesterone acetate for 7 days. The animals were divided into five treatments (T) (n=6): T1 (control), 132.5 µg PGF2α (100% of dose) and 300 IU eCG (100% of dose), both intramuscularly (IM); T2, 39.75 µg PGF2α (30% of dose) at the BH acupoint and 300 IU eCG (100% of dose) IM; T3, 132.5 µg PGF2α (100% of dose) IM and 90 IU eCG (30% of dose) at the BH acupoint; T4, 39.75 µg PGF2α (30% of dose) and 90 IU eCG (30% of dose), both at the BH acupoint; and T5, 39.75 µg PGF2α (30% of dose) and 90 IU eCG (30% of dose) both at a false acupoint (IM, at the same location as in T1). After 12 h of sponge removal and hormone application, the ewes were subjected to monitoring for estrus and mating and ultrasound assessments of follicular growth and ovulation time every 12 h. The data were evaluated for normality and subjected to analysis of variance, considering a 5% probability. There were no differences in the percentage of animals in estrus (93.3±9.1%), interval from sponge removal to estrus onset (48.1±6.0 h), interval from sponge removal to estrus end (69.6±5.4 h), duration of estrus (24.0±4.7 h), interval from sponge removal to ovulation (73.7±5.9 h), interval from estrus onset to ovulation (26.5±2.3 h), size of the largest follicle (6.7±0.4 mm), follicular growth rate (0.8±0.1 mmâ¢day-1), number of ovulations (1.3±0.1), and plasma progesterone levels 7 days after ovulation (9.6±2.0 ngâ¢mL-1). The cost of the synchronization protocol per animal was US$ 4.37, 4.12, 2.96, 2.71, and 2.71 for T1, T2, T3, T4, and T5, respectively, with 37.99% cost reduction using PGF2α and eCG at 30% of the conventional doses. Therefore, the application of reduced PGF2α (39.75 µg) and eCG (90 IU) doses at the BH or false acupoint effectively synchronized estrus and reduced protocol cost in sheep, indicating that the conventional doses are overestimated.(AU)
Aqui, foi avaliada a eficiência da aplicação de subdoses de gonadotrofina coriônica equina (eCG) e prostaglandina F2α (PGF2α) no ponto de acupuntura Bai Hui (BH) para sincronização de estro em ovelhas. Trinta ovelhas Santa Inês receberam esponjas intravaginais contendo 60 mg de acetato de medroxiprogesterona por 7 dias. Os animais foram divididos em cinco tratamentos (T) (n=6): T1 (controle), 132,5 µg PGF2α (100% da dose) e 300 UI de eCG (100% da dose), ambos por via intramuscular (IM); T2, 39,75 µg de PGF2α (30% da dose) no ponto de acupuntura BH e 300 UI eCG (100% da dose) IM; T3, 132,5 µg PGF2α (100% da dose) IM e 90 UI eCG (30% da dose) no ponto de acupuntura BH; T4, 39,75 µg PGF2α (30% da dose) e 90 UI eCG (30% da dose), ambos no ponto de acupuntura BH; e T5, 39,75 µg PGF2α (30% da dose) e 90 UI eCG (30% da dose) ambos em um falso acuponto (IM, no mesmo local que em T1). Após 12 horas da retirada da esponja e aplicação do hormônio, as ovelhas foram submetidas ao monitoramento do estro e acasalamento, e avaliação ultrassonográfica do crescimento folicular e tempo de ovulação a cada 12 horas. Os dados foram avaliados quanto à normalidade e submetidos à análise de variância, considerando 5% de probabilidade. Não houve diferenças na porcentagem de animais em estro (93,3 ± 9,1%), intervalo da remoção da esponja ao início do estro (48,1 ± 6,0 h), intervalo da remoção da esponja ao final do estro (69,6 ± 5,4 h), duração do estro (24,0 ± 4,7 h), intervalo da remoção da esponja à ovulação (73,7 ± 5,9 h), intervalo do início do estro à ovulação (26,5 ± 2,3 h), tamanho do maior folículo (6,7 ± 0,4 mm), taxa de crescimento folicular (0,8 ± 0,1 mmâ¢dia-1), número de ovulações (1,3 ± 0,1) e níveis de progesterona plasmática 7 dias após a ovulação (9,6 ± 2,0 ngâ¢mL-1). O custo do protocolo de sincronização por animal foi de US $ 4,37, 4,12, 2,96, 2,71 e 2,71 para T1, T2, T3, T4 e T5, respectivamente, com redução de custo de 37,99% usando PGF2α e eCG a 30% das doses convencionais. Portanto, a aplicação de PGF2α (39,75 µg) e doses reduzidas de eCG (90 UI) no BH ou falso acuponto sincronizaram efetivamente o estro e reduziram o custo do protocolo em ovelhas, indicando que as doses convencionais estão superestimadas.(AU)
Assuntos
Animais , Feminino , Ovinos , Acetato de Medroxiprogesterona , Acupuntura , Sincronização do Estro , Gonadotropina Coriônica , Custos e Análise de CustoResumo
Comparou-se a eficiência de protocolos para indução de estro em cutias. Em cinco fêmeas, foram administradas duas doses de cloprostenol (5µg) com intervalo de nove dias, via intraperitoneal; em outras cinco, administraram-se 30µg de análogo do hormônio liberador de gonadotrofinas (GnRH), via intravulvar, seguidos de 5µg de cloprostenol, via intraperitoneal, após sete dias e, após mais dois dias, nova dose do análogo de GnRH. A cada três dias, a ciclicidade reprodutiva dos animais foi monitorada, por meio de coleta de sangue, para dosagem hormonal, ultrassonografia ovariana e citologia vaginal. Duas das fêmeas que receberam apenas prostaglandina, as quais estavam em fase luteal no início do tratamento, manifestaram o estro aos três e seis dias após a segunda administração da droga. Já nas fêmeas que receberam a prostaglandina associada ao análogo do GnRH, duas que originalmente estavam em fase luteal apresentaram estro aos quatro dias após o tratamento, e uma outra apenas após 10 dias. Não foram evidenciadas diferenças estatísticas quanto à eficiência dos tratamentos (P>0,05). Conclui-se que, de acordo com os protocolos utilizados, o uso da prostaglandina isolada ou em associação com análogo do GnRH para a indução do estro em cutias D. leporina apresenta eficiência limitada às fêmeas que estejam em fase luteal por ocasião do início do tratamento.(AU)
We compared the efficiency of protocols for estrus induction in agoutis. Five females received double intraperitoneal administration of cloprostenol (5µg) on a 2-days interval; other five females were treated with intravulvar administration of 30µg gonadotrophin release hormone analogue (GnRH associated to intraperitoneal administration of 5µg cloprostenol after seven days and a new administration of GnRH analogue after two days. Every 3 days, the agoutis' reproductive cycle was monitored by blood collection for hormonal analysis, ovarian ultrasound and vaginal cytology. Two females, originally in luteal phase, that received isolated prostaglandin presented estrous signs at 3 and 6 days after the second drug administration. From the females that received the association, two that were originally in luteal phase presented estrus at 4 days after treatment, and one other presented estrus only after 10 days. There was no significant statistical difference regarding the efficiency of treatments for estrus induction (P>0.05). We conclude that, according to the protocols tested in the study, the use of isolated prostaglandin or its association to GnRH analogue for estrus induction in D. leporine shows an efficiency limited to the females that were in luteal phase in the beginning of the treatment.(AU)
Assuntos
Dasyproctidae/embriologia , Estro/fisiologia , Prostaglandinas/administração & dosagem , Prostaglandinas/isolamento & purificação , Hormônio Liberador de Gonadotropina/análogos & derivadosResumo
Comparou-se a eficiência de protocolos para indução de estro em cutias. Em cinco fêmeas, foram administradas duas doses de cloprostenol (5µg) com intervalo de nove dias, via intraperitoneal; em outras cinco, administraram-se 30µg de análogo do hormônio liberador de gonadotrofinas (GnRH), via intravulvar, seguidos de 5µg de cloprostenol, via intraperitoneal, após sete dias e, após mais dois dias, nova dose do análogo de GnRH. A cada três dias, a ciclicidade reprodutiva dos animais foi monitorada, por meio de coleta de sangue, para dosagem hormonal, ultrassonografia ovariana e citologia vaginal. Duas das fêmeas que receberam apenas prostaglandina, as quais estavam em fase luteal no início do tratamento, manifestaram o estro aos três e seis dias após a segunda administração da droga. Já nas fêmeas que receberam a prostaglandina associada ao análogo do GnRH, duas que originalmente estavam em fase luteal apresentaram estro aos quatro dias após o tratamento, e uma outra apenas após 10 dias. Não foram evidenciadas diferenças estatísticas quanto à eficiência dos tratamentos (P>0,05). Conclui-se que, de acordo com os protocolos utilizados, o uso da prostaglandina isolada ou em associação com análogo do GnRH para a indução do estro em cutias D. leporina apresenta eficiência limitada às fêmeas que estejam em fase luteal por ocasião do início do tratamento.(AU)
We compared the efficiency of protocols for estrus induction in agoutis. Five females received double intraperitoneal administration of cloprostenol (5µg) on a 2-days interval; other five females were treated with intravulvar administration of 30µg gonadotrophin release hormone analogue (GnRH associated to intraperitoneal administration of 5µg cloprostenol after seven days and a new administration of GnRH analogue after two days. Every 3 days, the agoutis' reproductive cycle was monitored by blood collection for hormonal analysis, ovarian ultrasound and vaginal cytology. Two females, originally in luteal phase, that received isolated prostaglandin presented estrous signs at 3 and 6 days after the second drug administration. From the females that received the association, two that were originally in luteal phase presented estrus at 4 days after treatment, and one other presented estrus only after 10 days. There was no significant statistical difference regarding the efficiency of treatments for estrus induction (P>0.05). We conclude that, according to the protocols tested in the study, the use of isolated prostaglandin or its association to GnRH analogue for estrus induction in D. leporine shows an efficiency limited to the females that were in luteal phase in the beginning of the treatment.(AU)
Assuntos
Dasyproctidae/embriologia , Estro/fisiologia , Prostaglandinas/administração & dosagem , Prostaglandinas/isolamento & purificação , Hormônio Liberador de Gonadotropina/análogos & derivadosResumo
This study aimed to evaluate and compare the effects of the fixed combination of dorzolamide/timolol with those of tafluprost on intraocular pressure (IOP) and pupil diameter (PD) in healthy dogs (n=10). Two experiments were conducted with an interval of 30 days. In both, IOP and PD were assessed at 8, 11, 14, 17, and 20h. Parameters were evaluated during baseline, treatment period of four days, and one day of post-treatment. During treatment phase, IOP decreased by 0.74 (P 0.05), 1.88 (P 0.01), 2.94 (P 0.001), and 3.10mmHg (P 0.01), in dorzolamide/timolol-treated eyes; and by 1.50, 2.18, 2.14, and 2.18mmHg (P 0.001), in tafluprost-treated eyes. PD decreased by 0.24 (P 0.01), 0.32 (P 0.01), 0.49 (P 0.001), and 0.40mm (P 0.001), in dorzolamide/timolol treated eyes; and by 2.31, 2.55, 2.43, and 2.70mm (P 0.001), in tafluprost-treated eyes. Dorzolamide/timolol and tafluprost were able to decrease IOP and PD in healthy dogs. However, a cumulative effect of the fixed combination of dorzolamide/timolol was more effective in reducing IOP, than tafluprost. Comparisons between treatments showed that tafluprost was more effective in reducing PD throughout the treatment phase.
O estudo objetivou avaliar e comparar os efeitos da combinação fixa da dorzolamida/timolol com os da tafluprosta sobre a pressão intraocular (PIO) e o diâmetro pupilar (DP) em cães saudáveis (n=10). Dois experimentos com intervalo de 30 dias foram conduzidos. Em ambos, a PIO e o DP foram avaliados às 8, 11, 14, 17 e às 20h. Os parâmetros foram avaliados durante a fases basal, um período de tratamento de quatro dias, e um dia de pós-tratamento. Durante a fase de tratamento, a PIO dos olhos tratados com dorzolamida/timolol reduziram em 0.74 (P 0.05), 1.88 (P 0.01), 2.94 (P 0.001), e 3.10mmHg (P 0.01); e dos olhos tratados com tafluprosta em 1.50, 2.18, 2.14 e 2.18mmHg (P 0.001). O DP dos olhos tratados com dorzolamida/timolol reduziram em 0.24 (P 0.01), 0.32 (P 0.01), 0.49 (P 0.001) e 0.40mm (P 0.001); e dos olhos tratados com tafluprosta em 2.31, 2.55, 2.43 e 2.70mm (P 0.001). A dorzolamida/timol e a tafluprosta foram capazes de reduzir a PIO e o DP em cães saudáveis. Porém, efeito cumulativo do tratamento com dorzolamida/timolol foi observado, decorridos três dias de tratamento. Por essa razão, a dorzolamida/timolol foi mais efetiva que a tafluprosta na redução da PIO. Comparações entre os tratamentos demonstraram que a tafluprosta foi mais efetiva em reduzir o DP, durante toda a fase de tratamento.
Assuntos
Animais , Cães , Inibidores da Anidrase Carbônica , Pressão Intraocular , Prostaglandinas Sintéticas , Pupila , Timolol , Glaucoma/veterináriaResumo
This study aimed to evaluate and compare the effects of the fixed combination of dorzolamide/timolol with those of tafluprost on intraocular pressure (IOP) and pupil diameter (PD) in healthy dogs (n=10). Two experiments were conducted with an interval of 30 days. In both, IOP and PD were assessed at 8, 11, 14, 17, and 20h. Parameters were evaluated during baseline, treatment period of four days, and one day of post-treatment. During treatment phase, IOP decreased by 0.74 (P 0.05), 1.88 (P 0.01), 2.94 (P 0.001), and 3.10mmHg (P 0.01), in dorzolamide/timolol-treated eyes; and by 1.50, 2.18, 2.14, and 2.18mmHg (P 0.001), in tafluprost-treated eyes. PD decreased by 0.24 (P 0.01), 0.32 (P 0.01), 0.49 (P 0.001), and 0.40mm (P 0.001), in dorzolamide/timolol treated eyes; and by 2.31, 2.55, 2.43, and 2.70mm (P 0.001), in tafluprost-treated eyes. Dorzolamide/timolol and tafluprost were able to decrease IOP and PD in healthy dogs. However, a cumulative effect of the fixed combination of dorzolamide/timolol was more effective in reducing IOP, than tafluprost. Comparisons between treatments showed that tafluprost was more effective in reducing PD throughout the treatment phase.(AU)
O estudo objetivou avaliar e comparar os efeitos da combinação fixa da dorzolamida/timolol com os da tafluprosta sobre a pressão intraocular (PIO) e o diâmetro pupilar (DP) em cães saudáveis (n=10). Dois experimentos com intervalo de 30 dias foram conduzidos. Em ambos, a PIO e o DP foram avaliados às 8, 11, 14, 17 e às 20h. Os parâmetros foram avaliados durante a fases basal, um período de tratamento de quatro dias, e um dia de pós-tratamento. Durante a fase de tratamento, a PIO dos olhos tratados com dorzolamida/timolol reduziram em 0.74 (P 0.05), 1.88 (P 0.01), 2.94 (P 0.001), e 3.10mmHg (P 0.01); e dos olhos tratados com tafluprosta em 1.50, 2.18, 2.14 e 2.18mmHg (P 0.001). O DP dos olhos tratados com dorzolamida/timolol reduziram em 0.24 (P 0.01), 0.32 (P 0.01), 0.49 (P 0.001) e 0.40mm (P 0.001); e dos olhos tratados com tafluprosta em 2.31, 2.55, 2.43 e 2.70mm (P 0.001). A dorzolamida/timol e a tafluprosta foram capazes de reduzir a PIO e o DP em cães saudáveis. Porém, efeito cumulativo do tratamento com dorzolamida/timolol foi observado, decorridos três dias de tratamento. Por essa razão, a dorzolamida/timolol foi mais efetiva que a tafluprosta na redução da PIO. Comparações entre os tratamentos demonstraram que a tafluprosta foi mais efetiva em reduzir o DP, durante toda a fase de tratamento.(AU)
Assuntos
Animais , Cães , Timolol , Pressão Intraocular , Pupila , Inibidores da Anidrase Carbônica , Prostaglandinas Sintéticas , Glaucoma/veterináriaResumo
Na literatura, ainda é inexistente se os protocolos de sincronização de estro e da ovulação a base de acetato de medroxiprogesterona (MPA) por 14 dias, associado à gonadotrofina coriônica equina (eCG) afetam o ambiente uterino de ovelhas da raça Santa Inês durante o período de reconhecimento materno da gestação. Portanto, objetivou-se avaliar os efeitos de diferentes protocolos hormonais sobre a taxa de sincronização do estro, níveis séricos de progesterona e expressão de IFNAR1 durante o período de reconhecimento materno da gestação em ovelhas Santa Inês. As ovelhas foram sincronizadas com acetato de medroxiprogesterona (MPA) mais gonadotrofina coriônica equina (eCG) (grupo MPA + eCG, n = 7) ou com prostaglandina F2 (grupo PGF2, n = 7). O protocolo de sincronização do grupo MPA + eCG consistiu na utilização de esponjas intravaginais impregnadas com MAP por 14 dias e aplicação de prostaglandina (PGF2) no dia 07. No dia 14, foi retirada a esponja intravaginal e realizada a aplicação de eCG. O grupo PGF2 consitiu de duas aplicações de PGF2 nos dias 0 e 12 do protocolo. Após 24 horas do final do protocolo, os animais receberam monta natural. No 15º dia após o acasalamento, todos os animais foram submetidos à coleta de sangue para dosagem de progesterona e coleta de biópsia uterina para imunolocalização do IFNAR1. Houve diferença significativa nos efeitos dos tratamentos hormonais sobre a taxa de sincronização do estro (P<0,05). O grupo MPA+eCG apresentou 100% de taxa de sicronização de estro, enquanto o grupo PGF2 apresentou 57,17%. Além disso, os níveis séricos de progesterona foram significativamente superiores em ovelhas sincronizadas com MPA + eCG quando comparadas com ovelhas sincronizadas com PGF2 (p <0,05). Porém, a intensidade da imunomarcação para IFNAR1 no endométrio uterino de ovelhas não diferiu entre os tratamentos hormonais testados (p> 0,05). Nas condições do presente estudo, o tratamento hormonal com MPA + eCG promoveu maior taxa de sincronização do estro e estimulou a síntese de progesterona ovariana durante o período de reconhecimento materno da gestação em ovelhas. No entanto, não houve efeito dos tratamentos hormonais testados sobre o padrão de expressão de IFNAR1 no endométrio de ovelhas Santa Inês durante este período.
Na literatura, ainda é inexistente se os protocolos de sincronização de estro e da ovulação a base de acetato de medroxiprogesterona (MPA) por 14 dias, associado à gonadotrofina coriônica equina (eCG) afetam o ambiente uterino de ovelhas da raça Santa Inês durante o período de reconhecimento materno da gestação. Portanto, objetivou-se avaliar os efeitos de diferentes protocolos hormonais sobre a taxa de sincronização do estro, níveis séricos de progesterona e expressão de IFNAR1 durante o período de reconhecimento materno da gestação em ovelhas Santa Inês. As ovelhas foram sincronizadas com acetato de medroxiprogesterona (MPA) mais gonadotrofina coriônica equina (eCG) (grupo MPA + eCG, n = 7) ou com prostaglandina F2 (grupo PGF2, n = 7). O protocolo de sincronização do grupo MPA + eCG consistiu na utilização de esponjas intravaginais impregnadas com MAP por 14 dias e aplicação de prostaglandina (PGF2) no dia 07. No dia 14, foi retirada a esponja intravaginal e realizada a aplicação de eCG. O grupo PGF2 consitiu de duas aplicações de PGF2 nos dias 0 e 12 do protocolo. Após 24 horas do final do protocolo, os animais receberam monta natural. No 15º dia após o acasalamento, todos os animais foram submetidos à coleta de sangue para dosagem de progesterona e coleta de biópsia uterina para imunolocalização do IFNAR1. Houve diferença significativa nos efeitos dos tratamentos hormonais sobre a taxa de sincronização do estro (P<0,05). O grupo MPA+eCG apresentou 100% de taxa de sicronização de estro, enquanto o grupo PGF2 apresentou 57,17%. Além disso, os níveis séricos de progesterona foram significativamente superiores em ovelhas sincronizadas com MPA + eCG quando comparadas com ovelhas sincronizadas com PGF2 (p <0,05). Porém, a intensidade da imunomarcação para IFNAR1 no endométrio uterino de ovelhas não diferiu entre os tratamentos hormonais testados (p> 0,05). Nas condições do presente estudo, o tratamento hormonal com MPA + eCG promoveu maior taxa de sincronização do estro e estimulou a síntese de progesterona ovariana durante o período de reconhecimento materno da gestação em ovelhas. No entanto, não houve efeito dos tratamentos hormonais testados sobre o padrão de expressão de IFNAR1 no endométrio de ovelhas Santa Inês durante este período.
Resumo
The study aimed to verify the synchronization of mares genetic grouping Baixadeiro using PGF2α. Weused 8 mares being established two synchronization protocols - Protocol I: IM PGF2α dose; Protocol II: twodoses (PGF2α, IM) with 10-day interval. After 72 hours were monitored daily by means of ultrasound to monitorfollicle development. The evaluated mares showed interval between treatment and ovulation 11,16 ± 1,46 daysfor T1 and 5,2 ± 0,9 days for T2, with statistically significant difference (P < 0,05). As the diameter of the preovulatoryfollicle was found average of 38,08 ± 0,97 at T1 and 37,31 ± 3,45 in T2, with no significant differencebetween them (P > 0,05). Thus, treatment with two doses of PGF2α promotes return to ciclicity and is effective insynchronizing Baixadeiro mares which had follicular development patterns within the expected range for thespecies.(AU)
Assuntos
Animais , Feminino , Cavalos/embriologia , Sincronização do Estro , Ovulação , Dinoprosta/administração & dosagem , Dinoprosta/análiseResumo
The study aimed to verify the synchronization of mares genetic grouping Baixadeiro using PGF2α. Weused 8 mares being established two synchronization protocols - Protocol I: IM PGF2α dose; Protocol II: twodoses (PGF2α, IM) with 10-day interval. After 72 hours were monitored daily by means of ultrasound to monitorfollicle development. The evaluated mares showed interval between treatment and ovulation 11,16 ± 1,46 daysfor T1 and 5,2 ± 0,9 days for T2, with statistically significant difference (P 0,05). Thus, treatment with two doses of PGF2α promotes return to ciclicity and is effective insynchronizing Baixadeiro mares which had follicular development patterns within the expected range for thespecies.
Assuntos
Feminino , Animais , Cavalos/embriologia , Dinoprosta/administração & dosagem , Dinoprosta/análise , Ovulação , Sincronização do EstroResumo
O presente estudo teve por objetivo avaliar a fertilidade do sêmen convencional e sexado utilizado em vacas Nelore multíparas que receberam tratamento com PGF2 no momento da inseminação artificial (IA) e expressaram diferentes intensidades de comportamento de estro (com ou sem expressão de estro) em um protocolo de IATF. Adicionalmente o estudo avaliou laboratorialmente as amostras de sêmen sexado e convencional a fim de comparar as características seminais in vitro com os resultados de fertilidade obtidos a campo. No experimento a campo, foram avaliadas as taxas de concepção (TC) de vacas multíparas lactantes da raça Nelore locadas em duas fazendas comerciais de gado de corte (fazenda 1: n=348 e fazenda 2: n=355). Em ambas as fazendas, as vacas foram submetidas ao mesmo protocolo de IATF. Quarenta e oito hs após a remoção do dispositivo de Progesterona (dia 11; D11), a IA foi realizada com sêmen convencional ou sexado de dois touros diferentes, de forma aleatória. Adicionalmente, no momento da IA, as vacas receberam, aleatoriamente, 12,5 mg im de dinoprost trometamina (Dinoprost; Lutalyse®; tratamento PGF) ou 2,5 mL im de soro fisiológico estéril (Controle). O comportamento estral foi aferido no D11 (momento da IATF) pela ativação do dispositivo estrotect®. Os dados foram analisados por regressão logística a um grau de significância de 5%. No experimento laboratorial, foram avaliadas amostras de sêmen sexado e convencional dos dois touros (touros 1 e 2), utilizados na fazenda 1 deste estudo. Foram analisados parâmetros convencionais de qualidade espermática, avaliação da integridade de membrana plasmática (pelo teste hiposmótico), análise computadorizada do sêmen (CASA) e avaliação de morfometria e parâmetros da cromatina espermática pelo Azul de Toluidina. Os dados laboratoriais foram analisados por ANOVA considerando 5% de significância. De acordo com os resultados do estudo a campo, a TC geral foi de 32,8% na Fazenda 1 e 42,3% na Fazenda 2 (P = 0,01). Escore de condição corporal (P = 0,02), comportamento estral (P=0,01) e tipo de sêmen (P <0,001) foram fatores que afetaram a TC. Vacas inseminadas com sêmen convencional tiveram 2,73 vezes mais probabilidade de tornar-se gestantes do que vacas inseminadas com sêmen sexado e vacas exibindo estro tiveram 2,5 vezes mais chance de gestação do que vacas que não exibiram estro. Nenhum efeito do tratamento com PGF2 (P=0,67) foi detectado em vacas que receberam sêmen convencional ou sexado. Ainda assim, foi detectada tendência estatística de interação (P=0,08) entre o tratamento (PGF ou controle) e o comportamento estral (estro ou não). O tratamento com PGF2 no momento da IA aumentou em 70% a TC das vacas que não expressaram estro. Nas análises laboratoriais, o sêmen convencional de ambos os touros apresentou maior (P<0,05) motilidade visual, concentração espermática, espermatozoides móveis na palheta e integridade de membrana plasmática em relação ao sêmen sexado. Nas avaliações pelo sistema CASA, motilidade total (MT) e progressiva (MP) foram significativamente menores nas amostras de sêmen sexado em relação ao convencional no touro 1 (P<0.05). A amplitude de deslocamento lateral de cabeça (ALH) foi maior (P<0.05) no sêmen sexado comparado ao sêmen convencional nos dois animais avaliados. Os resultados de análise morfométrica demonstraram que o touro 2 apresentou menor elipsidade nos espermatozoides sexados em relação ao sêmen convencional (P<0,05), enquanto no touro 1 foi observado menor Fourier1 no sêmen sexado em relação ao convencional. Não foram observadas diferenças na descompactação e heterogeneidade do DNA, quando comparados sêmen convencional e sexado em ambos os touros. Concluiu-se que a fertilidade do sêmen sexado foi menor do que o sêmen convencional, independente do tratamento com PGF2. Porém, vacas que não apresentaram estro e receberam o tratamento com PGF2 no momento da IA demonstraram TC semelhante às vacas em estro, independentemente do tipo de sêmen. Além disso, o processo de sexagem prejudicou diversas características de viabilidade espermática, bem como parâmetros cinéticos e morfométricos dos espermatozoides que estão relacionados com menor capacidade de fertilização deste tipo de sêmen.
The present study aimed to evaluate the fertility of conventional and sexed semen used in multiparous Nelore cows that received PGF2 treatment at the moment of AI and expressed different intensities of estrus behavior (estrus or no estrus expression) in timed-AI protocol. Additionally, laboratory assessment of sexed and conventional semen was performed in order to compare in vitro sperm characteristics with field fertility results. In the field experiment, conception rates (CR) of lactating multiparous Nelore cows from two commercial beef farms (farm 1: n=348 and farm 2: n=355) were evaluated. The animals were submitted to the same timed-AI protocol and 48 hs after the progesterone device removal (day 11; D11), AI was randomly performed with conventional or sexed semen from two different bulls. Additionally, at the time of AI, cows randomly received 12.5 mg im of dinoprost tromethamine (Dinoprost; Lutalyse®; PGF treatment) or 2.5 mL im of sterile saline (Control). Estrus behavior was measured at D11 (moment of timed-AI) by estrotect® device. The data were analyzed by logistic regression at 5% of significance level. In the laboratory experiment, sexed and conventional semen samples from the bulls (bulls 1 and 2) used in farm 1 were evaluated. Conventional sperm quality parameters, plasma membrane integrity (hyposmotic test), computerized semen analysis (CASA) and sperm morphometry and chromatin (Toluidine Blue) assessment were analyzed. The laboratory data were analyzed by ANOVA at 5% of significance. The overall CR was 32.8% in Farm 1 and 42.3% in Farm 2 (P = 0.01). Body condition score (P = 0.02), estrous behavior (P = 0.01) and semen type (P <0.001) were factors affecting CR. Cows inseminated with conventional semen were 2.73 times more likely to become pregnant than cows inseminated with sexed semen and cows exhibiting estrus were 2.5 times more likely to become pregnant than cows not exhibiting estrus. No effect of PGF2 treatment (P=0.67) was detected in cows that received conventional or sexed semen. Still, a statistical tendency of interaction (P=0.08) was detected between treatment (PGF or control) and estrous behavior (estrus or no estrus). Treatment with PGF2 at the time of AI increased by 82% the CR of cows with no estrus behavior. In laboratory analyses, conventional semen from both bulls demonstrated higher (P<0.05) visual motility, sperm concentration, number of motile sperm in the straw and plasma membrane integrity compared to sexed semen. In the CASA assessment, total
Resumo
A eficiência da associação da indução do estro pelo programa de luz seguida da administração de cloprostenol e efeito macho foi estudada em cabras Saanen acíclicas submetidas ao programa de luz (16 h de luz e 8 h de escuridão) por 60 dias (D0-D60). Cabras multíparas e nulíparas foram alocadas em baias com (T1, n = 67 multíparas; T3, n = 41 nulíparas) ou sem (T2, n = 61 multíparas; T4, n = 34 nulíparas) bode vasectomizado (D120-D135 para multíparas e D120-171 para nulíparas). T1, T2 e T4 receberam duas doses de 120 µg de cloprostenol no D135 (manhã) e no D142 (tarde). A dinâmica folicular ovariana foi acompanhada de D0 a D176 em intervalos diferentes. A inseminação artificial foi realizada 10 a 24 h após o início do estro em T1 e T2, enquanto T3 foram cobertas por monta natural controlada. T1 (85,2%) e T3 (91,7%) apresentaram maior frequência (P<0,05) de corpos lúteos (CL) do que T2 (48,8%) e T4 (23,8%) na primeira dose de cloprostenol/efeito macho, mas não ocorreu no momento da 2ª dose de cloprostenol (P>0,05). A taxa de gestação ajustada em 30d diferiram (P<0,05) entre T1 vs. T2 (21,7 e 42,0%) e T3 vs. T4 (98,0 e 63,7%). T1 apresentou maior frequência de CL funcional quando comparado a T2 e T4 (96,9 vs. 66,7%) em D176. Em conclusão, a associação do programa de luz com o efeito macho mostrou-se uma alternativa viável para indução de estro sincronizado em cabras Saanen e a presença de machos foi capaz de eliminar o efeito da ordem de parto em cabritas nulíparas na contra-estação reprodutiva.
The efficiency of combining estrus induction by light program followed by cloprostenol administration and male effect was tested in acyclic Saanen goats were submitted to light program (16 h of light and 8 h of darkness) for 60 days (D0-D60). Multiparous and nulliparous goats were allocated in pains with (T1, n = 67 multiparous; T3, n = 41 nulliparous) or without (T2, n = 61 multiparous; T4, n = 34 nulliparous) vasectomized buck (D120-D135 to multiparous and D120-171 to nulliparous). T1, T2 and T4 received two doses of 120 µg of cloprostenol on D135 (morning) and D142 (afternoon). Ovarian follicular dynamics were recorded from D0 to D176 at different intervals. Artificial insemination was performed 10 to 24 h after estrous onset in T1 and T2 while T3 were hand-mated. T1 (85.2%) and T3 (91.7%) present more (P < 0.05) corpora lutea (CL) than T2 (48.8%) and T4 (23.8%) at the first cloprostenol dose/male effect but not at the time of the 2nd cloprostenol dose (P>0.05). The 30d adjusted gestation rates differed (P<0.05) between T1 vs. T2 (21.7 and 42.0%) and T3 vs. T4 (98.0 and 63.7%). T1 showed a higher frequency of functional CL when compared to T2 and T4 (96.9 vs. 66.7%) at D176. In conclusion, the association of light treatment with male effect proved to be a viable alternative for induction of synchronized estrus on Saanen goats and the male presence was able to eliminate the effect of parity on nulliparous goats at non-breeding season.
Resumo
O sistema reprodutor da ovelha possui particularidades anatômicas que tornam difícil o acesso ao útero pela via transcervical. Assim, atualmente, procedimentos de coleta e transferência de embriões vêm sendo realizados de forma cirúrgica. Isso gera um alto custo em equipamentos e insumos, além de demandar conhecimento técnico específico, limitando o uso de tais técnicas. Com base no exposto, é proposto avaliar um conjunto de drogas que permita o acesso ao útero de ovelhas da raça Santa Inês através da via transcervical visando a transferência de embriões proporcionando relaxamento e analgesia adequados. Foi realizado um ensaio com delineamento crossover. Foram avaliados dois protocolos de dilatação cervical visando a transferência de embriões, sendo testado um Grupo estradiol+ocitocina e Grupo apenas com ocitocina, além de um grupo controle. Além disso neste ensaio avaliamos o uso do teste de vela de Hegar como ferramenta de seleção de animais para a realização da transferência não cirúrgica e acompanhamos a viabilidade do corpo lúteo durante a fase luteal. As receptoras do grupo controle apresentaram taxa de transposição mais baixa (64%), enquanto o grupo estradiol+ocitocina apresentou taxa de transposição de 88%, seguido do grupo ocitocina com 84%. O teste de vela de Hegar mostrou uma alta sensibilidade (85,7 a 93,3%) na identificação e triagem de ovelhas que podem ser submetidas a transferência não cirúrgica de embriões.
The reproductive system of the ewes has anatomical features that make access to the uterus by transcervical route extremely difficult, making the procedure of embryos transfer currently performed surgically. This generates a high cost in equipment, besides demanding very specific technical knowledge, thus limiting the use of such techniques. The purpose of this study is to evaluate a set of drugs that allow access to the uterus of Santa Ines sheep through the transfer of embryos, promoting adequate relaxation and analgesia. A test was carried out with a crossover design. We had two cervical dilation protocols tested (oestradiol + oxytocin group and a group with oxytocin only) plus a control group. In addition, we evaluated the use of the Hegar dilator test, as a tool for selecting animals to perform non-surgical tranfer and monitor the viability of the corpus luteum during the luteal phase. The recipients of the control group had a lower transposition rate (64%), while the oestradiol+oxytocin group had a rate of 88%, followed by the oxytocin group with 84%. The Hegar dilator test showed a high sensitivity (85,7 to 93,3%) in the identification and screening of sheep that can be subjected to non surgical embyo transfer.
Resumo
In this study, endometrial samples were collected in 14 Nelore cows on days zero (ovulation), five, nine, thirteen and nineteen of the estrous cycle (biopsy group), and in 15 females these collections weren't performed (control group). Biopsies were done on the uterine horn endometrium contralateral to the ovary with corpus luteum. Blood samples were taken at -24, -16, -8, 0 +8, +16 and +24 hours in relation to progesterone drop (<1ng/mL, zero moment) and evaluated for 13, 14-dihydro-15-keto prostaglandin F2-alpha (PGFM) by radioimmunoassay (RIA). Plasma progesterone concentration was determined by RIA every 24 hours. Data were analyzed by ANOVA using the PROC GLM and MIXED of the SAS. The mean value for PGFM during the entire period evaluated was greater in the biopsy group. The mean concentration of PGFM at moment zero was not different between the groups; the mean concentration of PGFM was higher in the biopsy group before and after the drop in progesterone level. The maximum mean concentration observed was not different between the groups; however, the mean minimum concentration was different with high values in the biopsy group. Although the PGFM concentrations were higher in the biopsy group, the biopsy and control groups had similar length of estrous cycle showing that repeated endometrial biopsy on the side contralateral to the ovary with corpus luteum does not affect luteolysis and the length of the estrous cycle.(AU)
No presente estudo, foram coletadas amostras endometriais de 14 vacas Nelore nos dias zero (dia da ovulação), cinco, nove, 13 e 19 do ciclo estral (grupo controle), e em 15 fêmeas essas coletas não foram realizadas (grupo controle). As biópsias foram realizadas no corno uterino contralateral ao ovário contendo o corpo lúteo. Amostras plasmáticas foram coletadas nos momentos -24, -16, -8, 0 +8, +16 e +24 horas em relação à queda de progesterona (<1ng/mL, momento zero) e avaliadas quanto à concentração de 13, 14-di-hidro-15-ceto prostaglandina F2-alpha (PGFM) por radioimunoensaio (RIA). As concentrações plasmáticas de progesterona foram avaliadas a cada 24 horas também por RIA. Os dados foram analisados por ANOVA empregando-se PROC GLM e MIXED do SAS. O valor médio de PGFM durante todo o período avaliado foi maior no grupo biópsia. A concentração média de PGFM no momento zero não diferiu entre os grupos, e foi maior no grupo biópsia antes e após a queda de progesterona. A concentração máxima observada não foi diferente entre os grupos, porém a concentração mínima diferiu com maiores valores observados no grupo biópsia. Embora as concentrações de PGFM fossem maior no grupo biópsia, ambos os grupos apresentaram o mesmo comprimento do ciclo estral, demonstrando que a coleta repetitiva de biópsias endometriais no corno uterino contraletral ao ovário contendo o corpo lúteo não afeta a luteólise e o comprimento do ciclo estral.(AU)
Assuntos
Animais , Bovinos , Membrana Celular , Endométrio , Progesterona , Corpo Lúteo , Dinoprosta , Colo do Útero , Biópsia/veterinária , Ciclo EstralResumo
A presente tese foi dividida em três capítulos, no primeiro é apresentada uma revisão bibliográfica dos temas relacionados à tese, os outros dois capítulos são manuscritos gerados a partir dos experimentos realizados durante o doutorado. No manuscrito I (capítulo II) avaliamos o desempenho reprodutivo de fêmeas de lambari (Astyanax altiparanae) usando diferentes protocolos de reprodução em cativeiro, como a administração de análogo do hormônio liberador de gonadotrofina de salmão (sGnRHa) e extrato de pituitária de carpa (CPE), bem como sem o uso de terapia hormonal. Foram realizados dois experimentos consecutivos com machos e fêmeas maduros de lambari (seis meses de idade) usando dose única (Exp. 1) ou fracionada (10% + 90% - intervalo de 12h) (Exp. 2). No Exp. 1, seis doses de sGnRHa (variando de 1 a 160 g kg -1 ) foram aplicadas em três repetições (cinco fêmeas e 10 machos cada); no Exp. 2, três doses de sGnRHa (10, 100 e 1000 g kg -1 ) foram aplicadas em quatro repetições (cinco fêmeas e 10 machos cada). Em ambos os experimentos, 6 mg de CPE kg -1 e solução salina foram usados como controles positivo e negativo, respectivamente. A quantificação de 17-20-dihidroxi-4- pregnen-3-ona (17,20-P) e níveis plasmáticos de prostaglandina F2 e avaliações histológicas ovarianas foram introduzidas no Exp. 2 separando fêmeas desovadas e não desovadas. Usando uma única dose, a taxa de desova foi baixa e semelhante entre todos os grupos (de 0 a 20%). Usando doses fracionadas, a taxa de desova de CPE (60%) foi maior do que todos os outros grupos (de 10 a 25%), com exceção da dose mais alta de sGnRHa (40%). A desova e elevação dos níveis de 17,20-P ocorreram em algumas fêmeas do controle negativo (Exp. 2). Portanto, a terapia com doses fracionadas de CPE melhorou a ovulação de lambari, mas não foi condicional para a obtenção da ovulação. Apenas as fêmeas não desovadas induzidas com doses fracionadas de CPE, mas não com sGnRHa e nem no controle negativo, atingiram a maturação final. Além disso, a desova nos grupos com sGnRHa ocorreu em uma extensão semelhante à do controle negativo e os grupos tratados com sGnRHa não mostraram qualquer resposta dose-dependente considerando todas variáveis avaliadas. Portanto, é possível que a desova nos grupos sGnRHa se deva apenas ao agrupamento de peixes, semelhante ao controle negativo. Em conclusão, a dose fracionada de CPE foi o único tratamento que provocou maturação final em todas as fêmeas tratadas e um aumento significativo no desempenho reprodutivo em comparação com todos os outros tratamentos. No manuscrito II (capítulo III) avaliamos o efeito do análogo do hormônio liberador do hormônio luteinizante (LHRHa) com e sem domperidona no desempenho reprodutivo de lambari e na liberação de 17,20-P e PGF 2 , bem como avaliação histológica das estruturas ovarianas em dois experimentos independentes e consecutivos. No primeiro experimento cinco doses de LHRHa (20, 60, 180, 540 e 1620 g kg -1 ) foram testadas com três repetições cada, enquanto no segundo experimento a dose de 180 g kg -1 foi testada em combinação com 20 mg kg -1 de domperidona (D) com quatro repetições. Em ambos os experimentos utilizamos solução salina 0,9% como controle negativo e 6 mg de CPE kg -1 como controle positivo e as fêmeas de todos os grupos receberam duas injeções (10% + 90% - intervalo de 12h). As doses testadas de LHRHa não apresentram resultados superiores aos do controle negativo. Associando o LHRHa com D não foram obtidos resultados superiores ao LHRHa sem associação, sugerindo que a dopamina parece não apresentar um papel no controle neuroendócrino da reprodução dessa espécie ou que este antidopaminérgico não é o mais indicado para o lambari. O grupo tratado com CPE foi o único com melhor desempenho que o controle negativo, indicando que o CPE foi a melhor terapia hormonal para induzir a desova em lambari (entre os testados por nós). Houve uma diminuição nas taxas de fertilização e eclosão que coincidiram com as duas doses mais altas de LHRH (540 e 1620 g kg -1 ), sugerindo que essas doses podem ter causado uma superestimulação da hipófise na produção de LH, a qual pode ter afetado a qualidade dos ovos.
The present thesis was divided into three chapters, in the first one a review of the themes related to the thesis is presented, the other two chapters are manuscripts prepared from the experiments carried out during the doctorate. In the manuscript I (chapter II) we evaluated lambari (Astyanax altiparanae) reproductive performance using different protocols of reproduction in captivity, such as the administration of analogue of salmon gonadotropin- releasing hormone (sGnRHa) and carp pituitary extract (CPE) as well as without the use of hormonal therapy. We performed two consecutive experiments with mature lambari males and females (six months old) using single (Exp. 1) or fractioned doses (10% + 90% - 12h interval) (Exp. 2). In Exp. 1, six sGnRHa doses (ranging from 1 to 160 g kg -1 ) were applied in three replicates (five females and 10 males each); in Exp. 2, three sGnRHa doses (10, 100 and 1000 g kg -1 ) were applied in four replicates (five females and 10 males each). In both experiments 6 mg of CPE kg -1 and saline solution were used as positive and negative controls, respectively. Quantification of 17-20-dihydroxy-4-pregnen-3-one (17,20-P) and prostaglandin F 2 plasma levels and ovarian histological evaluations were introduced in Exp. 2 via the separation of spawned and unspawned females. Using a single dose, the spawning rate was low and similar between all groups (from 0 to 20%). Using fractioned doses, the spawning rate of CPE (60%) was higher than all other groups (from 10 to 25%), with the exception of the highest sGnRHa dose (40%). Spawning and elevation of 17,20-P levels occurred in some females of the negative control (Exp. 2). Therefore, only CPE fractioned doses therapy improved lambari ovulation but were not conditional for obtaining ovulation. Only unspawned females treated with fractioned CPE doses, but neither sGnRHa nor negative control, attained final oocyte maturation.In addition, spawning in sGnRHa groups occurred in a similar extent as in negative control and sGnRHa-treated groups did not show any dose dependent response considering all variables measured. Therefore, it was possible that spawning in sGnRHa groups were just due to grouping of fish, similar to negative control. In conclusion, the fractioned dose of CPE was the only treatment that provoked final oocyte maturation in all treated females and a significant enhance in reproductive performance comparing to all other treatments. In the manuscript II (chapter III) we evaluated the effect of luteinizing hormone-releasing hormone ethylamide analogue (LHRHa) with and without domperidone on reproductive performance of lambari and the quantification of plasma levels of 17,20-P and PGF 2 , as well as histological evaluation of ovarian structures in two independent and consecutive experiments. In the first, five doses of LHRHa (20, 60, 180, 540 and 1620 g kg -1 ) were tested with three replicates each, while in the second the dose of 180 g kg -1 was tested in combination with 20 mg kg -1 domperidone (D) with four replicates. In both experiments, we used 0.9% saline as a negative control and 6 mg CPE kg -1 as a positive control and the females of all groups received two injections (10%; and 90% after 12 h). The doses we tested of LHRHa did not show results superior to those of the negative control. When associating LHRHa with D, we did not obtain results superior to LHRHa without association, suggesting that dopamine does not seem to play a role in the neuroendocrine control of the reproduction of this species or that this antidopaminergic is not the most suitable for lambari. The group treated with CPE was the only one with better performance than the negative control, indicating that CPE was the best hormonal therapy to induce spawning in lambari (among those tested by us). There was a decrease in fertilization and hatching rates that coincided with the two highest doses of LHRH (540 and 1620 g kg -1 ), suggesting that these doses may have caused an overstimulation of the pituitary in the production of LH, which may have affected egg quality.
Resumo
A leishmaniose canina (CanL) é causada pelo parasito intracelular Leishmania infantum. Devido ao alto parasitismo na pele o cão é considerado o principal reservatório urbano da L. Infantum. A prostaglandina-E2 (PGE2) possui propriedades reguladoras potentes do sistema imunológico e pode se ligar aos receptores EP1, EP2 e EP4 que geram ativação celular ou EP3 que gera inibição de resposta celular. Na CanL o papel regulador da PGE2 ainda não foi estudado, por isso, os parâmetros foram avaliados em cultura de leucócitos esplênicos de cães com CanL. Avaliando o nível de PGE2, seus receptores, e seu efeito modulador sobre a PGE2 na atividade da arginase, NO2, citocinas IL-10, IL-17 e TNF- e carga. Para isso utilizamos seus agonistas, antagonista e inibidor. Nossos resultados mostraram que a expressão do receptor EP2 diminuiu nos leucócitos esplênicos dos cães com CanL quando comparado aos cães saudáveis. Observamos que o NO2 diminuiu quando tratados com os agonistas dos receptores de PGE2 (EP1/EP2/EP3), antagonista dos receptores de PGE2 (AH-6809) e inibidor de COX-2 (NS-398). A concentração das citocinas TNF- e a IL-17 diminuíram quando tratadas com agonista do receptor de PGE2 (EP2), e quando estimuladas com a PGE2. A carga parasitária diminuiu na cultura de leucócitos esplênicos de cães com CanL estimulados com PGE2. Concluímos que a infecção por Leishmania modula os receptores de PGE2 em cães, e que a ligação da PGE2 aos receptores pode ativar a capacidade microbicida das células.
Canine leishmaniasis (CanL) is caused by the intracellular parasite Leishmania infantum. Prostaglandin E2 (PGE2) exerts potent regulatory effects on the immune system in Leishmania infection, but in CanL has not yet been studied. In this study, PGE2 and PGE2 receptor levels and the regulatory effect of PGE2 on arginase activity; NO2; the IL-10, IL-17 and TNF- and parasite load in the presence of agonists, antagonists and inhibitors were evaluated in cultures of splenic leukocytes obtained from dogs with CanL. Our results showed that splenic leukocytes from dogs with CanL had lower EP2 receptor levels than splenic leukocytes from healthy animals. We observed that NO2 levels decreased when the cells were treated with PGE2 receptor agonist (EP1/EP2/EP3), a PGE2 receptor antagonist (AH-6809) or a COX-2 inhibitor (NS-398) and that TNF- and IL-17 cytokine levels decreased when the cells were treated with a PGE2 receptor agonist (EP2) or stimulated with PGE2. The parasite load in splenic leukocyte cell cultures from dogs with CanL decreased after stimulation of the cells with PGE2. We conclude that the infection of dogs by Leishmania modulates PGE2 receptors and speculate that the binding of PGE2 to its receptors may activate the microbicidal capacity of cells.
Resumo
Os antiinamatórios não esteroidais são rotineiramente utilizados na clínica de equinos atletas para o tratamento de afecções do aparelho locomotor estando seus efeitos colaterais sobre o trato gastrointestinal associados a redução dos mecanismos de defesa gástricos principalmente pela inibição da produção de prostaglandina a qual reduz a quantidade de secreção de muco e bicarbonato. O ácido acetilsalicílico é um antiinamatório não esteroidal cujo efeito colateral no estômago é devido à inibição inespecíca da enzima cicloxigenase (COX).
Resumo
Os objetivos da pesquisa foram caracterizar a ocorrência de infecções uterinas pós-puerperais em vacas leiteiras e avaliara eficiência do cloprostenol sódico para tratamento de infecções uterinas pós-puerperais em vacas leiteiras, sem atividade ovariana luteal. Foram usadas 111 vacas de diferentes rebanhos com infecção uterina, associada ao útero totalmente involuído.O diagnóstico e classificação das endometrites foram baseados na característica da descarga vaginal por vaginoscopia. A mesma medida foi utilizada para avaliação da evolução do processo e eficiência do tratamento. De acordo com o grau de infecção, os animais foram divididos aleatoriamente em quatro grupos e receberam via IM os seguintes tratamentos. T1 (n=15): 2 ml de solução salina; T2 (n=32): uma dose de 0,530mg de Cloprostenol; T3 (n=32): duas doses de 0,530mg de Cloprostenol com 24 horas de intervalo e T4 (n=32) duas doses de 0,530mg de Cloprostenol com 48 horas de intervalo. As vacas foram novamente avaliadas por vaginoscopia 15 a 20 dias mais tarde. A eficiência dos tratamentos foi comparada pelo teste de qui-quadrado (χ2). A eficiência geral dos tratamentos, considerada a cura dos sinais clínicos foi de 6,67; 31,25; 50,00 e 37,50% para os grupos T1, T2, T3 e T4, respectivamente, sendo que todos os tratamentos foram igualmente eficientes (P<0,05) em relação ao controle. Os resultados mostram que o cloprostenol pode ser utilizado no tratamento de infecções uterinas pós-puerperais em vacas sem corpo lúteo,estimulando diretamente a imunidade uterina.(AU)
The research aims to characterize the occurrence of uterine post-puerperal infections in dairy cows and evaluate the efficiency ofprotocols of Cloprostenol administration for the treatment of clinical post puerperal uterine infections in dairy cows with and without luteal ovarian activity. 111 cows of different herds were used, all presenting clinical endometritis, associated with an involuted uterus. The diagnosis and classification of the endometritis was based on vaginal discharge characteristic by vaginoscopy. The same measure was used to evaluate the evolution of the process and efficiency of treatment. According to the infection degree the animals had been randomized in four groups, and received IM treatments: T1 (n=15): 2ml of saline solution; T2 (n=32): only onedose of 0.530mg of Cloprostenol; T3 (n=32): 2 doses of 0.530mg of Cloprostenol 24 hours apart and T4 (n=32): 2 doses 0.530mg of Cloprostenol with interval of 48 hours. The cows were evaluated by vaginoscopy 15 to 20 days later. The treatments efficiency was compared by the chi-square test (χ2). The general efficiency of treatments regarded as the healing of clinical signs was 6.67;31.25; 50.00 e 37.50 for groups T1, T2, T3 and T4, respectively. In relation to the Control group T1 (not treated), all groups were more efficient (P<0.05). The Cloprostenol can act in a direct way, in this case of animals without corpora lutea stimulating the uterine immunity. The results demonstrate that cloprostenol can be used in post puerperal uterine infections treatment in cows with absence of corpus luteum, directly stimulating uterine immunity.(AU)