Atividade antimicrobiana da erva-mate (Ilex paraguariensis) contra microrganismos isolados da carne de frango / Antimicrobial activity of yerba mate (Ilex paraguariensis) extract against microorganisms isolated from chicken meat

A erva-mate vem sendo estudada devido às diversas atividades biológicas já evidenciadas. Este estudo teve como objetivo avaliar o efeito antimicrobiano, pelo método de difusão em disco, da adição de extratos de erva-mate frente à Escherichia coli e ao Proteus mirabilispreviamente isolados da carne de peito de frango. Foram utilizadas diferentes concentrações de extrato (125 mg/ml, 250 mg/mL, 550 mg/mLl de extrato de erva-mate, controle negativo com solução salina 0,85% e erva-mate pura) em triplicata e os resultados analisados pelo SAS® 5.1. Quanto maior a concentração de extrato aplicada, maior (P<0,0001) foi o halo de inibição formado para as duas bactérias avaliadas, sendo que para a E. coli os halos foram menores quando comparados com os halos para o P. Mirabilis. Foi possível estimar a concentração de 400 mg/mLl como sendo a mais eficiente frente ambas as bactérias avaliadas.(AU)

Yerba mate has been studied due to the biological activities already evidenced. This study aimed to evaluate the antimicrobial effect of the addition of yerba mate extracts against Escherichia coli and Proteus mirabilis previously isolated from chicken breast meat using the disk diffusion method. Different extract concentrations were applied (125 mg/ml, 250 mg/ml, 550 mg/ml of yerba mate extract, negative control with saline 0.85% and pure yerba mate) in triplicate and the results were analyzed by the SAS® 5.1. The increase in the concentration of the extract applied resulted in an increase (P<0.0001) in the inhibition zone formed for both bacteria, and it was evident that the inhibition zone for E. coli was smaller compared with the halos for P. mirabilis. It was possible to estimate the concentration of 400 mg/ml as the most efficient for both bacteria.(AU)

Atividade antimicrobiana da erva-mate (Ilex paraguariensis) contra microrganismos isolados da carne de frango / Antimicrobial activity of yerba mate (Ilex paraguariensis) extract against microorganisms isolated from chicken meat

A erva-mate vem sendo estudada devido às diversas atividades biológicas já evidenciadas. Este estudo teve como objetivo avaliar o efeito antimicrobiano, pelo método de difusão em disco, da adição de extratos de erva-mate frente à Escherichia coli e ao Proteus mirabilispreviamente isolados da carne de peito de frango. Foram utilizadas diferentes concentrações de extrato (125 mg/ml, 250 mg/mL, 550 mg/mLl de extrato de erva-mate, controle negativo com solução salina 0,85% e erva-mate pura) em triplicata e os resultados analisados pelo SAS® 5.1. Quanto maior a concentração de extrato aplicada, maior (P<0,0001) foi o halo de inibição formado para as duas bactérias avaliadas, sendo que para a E. coli os halos foram menores quando comparados com os halos para o P. Mirabilis. Foi possível estimar a concentração de 400 mg/mLl como sendo a mais eficiente frente ambas as bactérias avaliadas.

Yerba mate has been studied due to the biological activities already evidenced. This study aimed to evaluate the antimicrobial effect of the addition of yerba mate extracts against Escherichia coli and Proteus mirabilis previously isolated from chicken breast meat using the disk diffusion method. Different extract concentrations were applied (125 mg/ml, 250 mg/ml, 550 mg/ml of yerba mate extract, negative control with saline 0.85% and pure yerba mate) in triplicate and the results were analyzed by the SAS® 5.1. The increase in the concentration of the extract applied resulted in an increase (P<0.0001) in the inhibition zone formed for both bacteria, and it was evident that the inhibition zone for E. coli was smaller compared with the halos for P. mirabilis. It was possible to estimate the concentration of 400 mg/ml as the most efficient for both bacteria.

ATIVIDADE ANTIMICROBIANA DA ERVA-MATE (Ilex paraguariensis) CONTRA MICRORGANISMOS ISOLADOS DA CARNE DE FRANGO

Abstract Yerba mate has been studied due to the biological activities already evidenced. This study aimed to evaluate the antimicrobial effect of the addition of yerba mate extracts against Escherichia coli and Proteus mirabilis previously isolated from chicken breast meat using the disk diffusion method. Different extract concentrations were applied (125 mg/mL, 250 mg/mL, 550 mg/mL of yerba mate extract, negative control with saline 0.85% and pure yerba mate) in triplicate and the results were analyzed by the SAS® 5.1. The increase in the concentration of the extract applied resulted in an increase (P 0.0001) in the inhibition zone formed for both bacteria, and it was evident that the inhibition zone for E. coli was smaller compared with the halos for P. mirabilis. It was possible to estimate the concentration of 400 mg/mL as the most efficient for both bacteria.

Resumo A erva-mate vem sendo estudada devido às diversas atividades biológicas já evidenciadas. Este estudo teve como objetivo avaliar o efeito antimicrobiano, pelo método de difusão em disco, da adição de extratos de erva-mate frente à Escherichia coli e ao Proteus mirabilis previamente isolados da carne de peito de frango. Foram utilizadas diferentes concentrações de extrato (125 mg/mL, 250 mg/mL, 550 mg/mL de extrato de erva-mate, controle negativo com solução salina 0,85% e erva-mate pura) em triplicata e os resultados analisados pelo SAS® 5.1. Quanto maior a concentração de extrato aplicada, maior (P 0,0001) foi o halo de inibição formado para as duas bactérias avaliadas, sendo que para a E. coli os halos foram menores quando comparados com os halos para o P. Mirabilis. Foi possível estimar a concentração de 400 mg/mL como sendo a mais eficiente frente ambas as bactérias avaliadas.

Proteus mirabilis biofilm - Qualitative and quantitative colorimetric methods-based evaluation

Proteus mirabilis strains ability to form biofilm is a current topic of a number of research worldwide. In this study the biofilm formation of P. mirabilis strains derived from urine of the catheterized and non-catheterized patients has been investigated. A total number of 39 P. mirabilis strains isolated from the urine samples of the patients of dr Antoni Jurasz University Hospital No. 1 in Bydgoszcz clinics between 2011 and 2012 was used. Biofilm formation was evaluated using two independent quantitative and qualitative methods with TTC (2,3,5-triphenyl-tetrazolium chloride) and CV (crystal violet) application. The obtained results confirmed biofilm formation by all the examined strains, except quantitative method with TTC, in which 7.7% of the strains did not have this ability. It was shown that P. mirabilis rods have the ability to form biofilm on the surfaces of both biomaterials applied, polystyrene and polyvinyl chloride (Nelaton catheters). The differences in ability to form biofilm observed between P. mirabilis strains derived from the urine of the catheterized and non-catheterized patients were not statistically significant.

Detecção de Proteus mirabilis nas fezes de camundongos spf / /Detection of Proteus mirabilis in specifc pathogen free mice feces

O presente estudo teve como objetivo apresentar os resultados de pesquisa de positividade do microorganismo Proteus mirabilis em camundongos das linhagens C57BL/6, BALB/c e BALB/c Nude, originários do setor de criação de camundongos livres de patógenos específicos (SPF) do Centro de Bioterismo da Faculdade de Medicina da USP e relatar a importância do isolamento deste microorganismo em colônias de animais. Para tanto, amostras de fezes de 71 camundongos da linhagem C57BL/6, 48 camundongos da linhagem BALB/c e 26 camundongos da linhagem BALB/c Nude, foram semeadas em meios específicos para bactérias gram negativas e diagnosticado no Enterokit B da Probac do Brasil. Nossos resultados mostraram que, as linhagens de camundongos C57BL/6, BALB/c e BALB/c Nude apresentaram P.mirabilis nas fezes, nas porcentagens de 80,3%, 62,5% e 73,1% respectivamente, sendo inadequadas para utilização em protocolos experimentais das áreas de radiobiologia, imunologia, oncologia e cirurgias experimentais invasivas, por interferirem potencialmente nos resultados destas áreas. CEUA nº 251/11.

This study aimed to present the positive results of Proteus mirabilis research from strains inbred mice C57BL/6, BALB/c and BALB/c Nude, originating from the sector of Specific Pathogen Free (SPF) mice - Animal Facilities of Faculdade de Medicina (USP – University of São Paulo) and report the importance of isolation of this microorganism in colonies of animals. For this, stool samples from: 71 C57BL/6, 48 BALB/c and 26 BALB /c Nude inbred mice, were inoculated in cultural bacteria specific media and diagnosed in the B Enterokit Probac-Brasil. Our results showed that the strains of C57BL/6, BALB/c and BALB/c Nude presented P.mirabilis in stool, percentages of 80.3%, 62.5% and 73.1% respectively, being unsuitable for use in experimental protocols in the fields of radiobiology, immunology, oncology, and experimental invasive surgeries by interfering mainly on the results of these areas. CEUA No. 251/11.

Detecção de Proteus mirabilis nas fezes de camundongos spf / /Detection of Proteus mirabilis in specifc pathogen free mice feces

O presente estudo teve como objetivo apresentar os resultados de pesquisa de positividade do microorganismo Proteus mirabilis em camundongos das linhagens C57BL/6, BALB/c e BALB/c Nude, originários do setor de criação de camundongos livres de patógenos específicos (SPF) do Centro de Bioterismo da Faculdade de Medicina da USP e relatar a importância do isolamento deste microorganismo em colônias de animais. Para tanto, amostras de fezes de 71 camundongos da linhagem C57BL/6, 48 camundongos da linhagem BALB/c e 26 camundongos da linhagem BALB/c Nude, foram semeadas em meios específicos para bactérias gram negativas e diagnosticado no Enterokit B da Probac do Brasil. Nossos resultados mostraram que, as linhagens de camundongos C57BL/6, BALB/c e BALB/c Nude apresentaram P.mirabilis nas fezes, nas porcentagens de 80,3%, 62,5% e 73,1% respectivamente, sendo inadequadas para utilização em protocolos experimentais das áreas de radiobiologia, imunologia, oncologia e cirurgias experimentais invasivas, por interferirem potencialmente nos resultados destas áreas. CEUA nº 251/11.(AU)

This study aimed to present the positive results of Proteus mirabilis research from strains inbred mice C57BL/6, BALB/c and BALB/c Nude, originating from the sector of Specific Pathogen Free (SPF) mice - Animal Facilities of Faculdade de Medicina (USP University of São Paulo) and report the importance of isolation of this microorganism in colonies of animals. For this, stool samples from: 71 C57BL/6, 48 BALB/c and 26 BALB /c Nude inbred mice, were inoculated in cultural bacteria specific media and diagnosed in the B Enterokit Probac-Brasil. Our results showed that the strains of C57BL/6, BALB/c and BALB/c Nude presented P.mirabilis in stool, percentages of 80.3%, 62.5% and 73.1% respectively, being unsuitable for use in experimental protocols in the fields of radiobiology, immunology, oncology, and experimental invasive surgeries by interfering mainly on the results of these areas. CEUA No. 251/11.(AU)

ATIVIDADE ANTIOXIDANTE E ANTIMICROBIANA DA ERVA-MATE (Ilex paraguariensis St. Hil) EM CARNE DE PEITO DE FRANGO

Este estudo teve como objetivo avaliar o efeito antioxidante e antimicrobiano da adição de extrato liofilizado de erva-mate em carnes de peito de frango, para aumentar o tempo de prateleira. Os peitos de frango frescos foram divididos em cinco tratamentos: controle negativosem extrato (CN), 0,05% (0,05EM), 0,10% (0,1EM), 0,15% (0,15EM) e 0,20% (0,2EM) de extrato de erva-mate. Para avaliação da atividade antioxidante foi analisado periodicamente o acúmulo dos compostos secundários da oxidação lipídica através do método de TBARS (Thiobarbituric Acid Reactive Substances) nos dias 0, 2, 4, 6, 8 e 10 em almôndegas cozidas e armazenadas a 4ºC. No estudo da atividade antimicrobiana foram realizadas contagens de bactérias mesofílicas totais, psicotróficas e bolores e leveduras a cada dois dias (dia 1, 3, 5 e 7) na carne de peito de frango crua armazenada a 7ºC. Ainda foi realizado o teste de difusão em disco frente a E. coli e ao P. mirabilis previamente isolados da carne de frango, utilizando diferentes concentrações do extrato (125mg/ml, 250mg/ml, 550mg/ml, controle negativo (solução salina 0,85%) e erva-mate pura). A adição de 0.10%; 0.15% e 0.20% do extrato de erva-mate foi eficiente na proteção dos lipídios durante o cozimento, uma vez que não houve diferença significativa (P>0.05) nos valores de TBARS entre as almôndegas cruas e cozidas. A adição do extrato de erva-mate reduziu (P <0.0001) a produção de compostos secundários da oxidação lipídica, agindo como um antioxidante natural em almôndegas pré-cozidas durante 10 dias de armazenamento refrigerado, independente da concentração utilizada, quando comparado com o CN. Foi observada uma regressão quadrática (P<0,0001) entre os tratamentos, indicando que os valores de TBARS diminuíram à medida que a concentração de extrato aumentou, sendo possível estimar a concentração de 0,18% como a mais eficiente no controle da oxidação nas condições do estudo. A contagem de bactérias mesofílicas e psicotróficas foi reduzida (P< 0,05) com o aumento da inclusão do extrato somente no primeiro dia de armazenamento. Para bolores e leveduras, a contagem foi reduzida linearmente (P<0,05) quando armazenado por um dia e de forma quadrática (P<0,05) no terceiro dia a medida que a inclusão do extrato aumentou. A aplicação dos tratamentos no teste de difusão em disco apresentou regressão de segundo grau (P<0,0001) tanto para a E. coli quanto para o P. mirabilis, sendo que quanto maior a concentração de mate, maior o halo de inibição formado, sendo que o tratamento com o mate puro foi o mais eficiente contra ambas as bactérias. Em conclusão, a adição do extrato de erva mate mostrou efeito antimicrobiano in vitro frente às bactérias avaliadas, porém quando adicionado diretamente nas amostras de carne de peito de frango não exerceu controle do crescimento microbiano durante os 7 dias de armazenamento resfriado, não contribuindo para a extensão do tempo de prateleira.

The objective of this study was to investigate the antioxidant and antimicrobial effects of the addition of yerba mate extract on chicken breast meat to increase the shelf life. Fresh chicken breast meat was divided into five treatment: negative control with no extract (NC), 0.05% (0,05EM), 0.10% (0,1EM), 0,15% (0,15EM) and 0.20% (0,2EM) of yerba mate extract. In order to evaluate the antioxidant effect, TBARS method (Thiobarbituric Acid Reactive Substances) was applied in pre-cooked meatballs to measure the accumulation of secondary lipid oxidation compounds during cooking on days 0, 2, 4, 6, 8 and 10 of chilled storage (4 °C). The antimicrobial activity was evaluated in raw chicken meat stored at 7 °C by counting the amount of total mesophilic bacteria, psychrotrophic bacteria,molds and yeasts every two days (days 1, 3, 5 and 7). E. coli and P. mirabilis isolated from the chicken meat was used to perform a disc diffusion test using different extract concentrations (125mg/ml, 250mg/ml, 550mg/ml, negative control (solution saline 0.85%) and pure yerba mate). The addition of 0.10%; 0.15% and 0.20% yerba mate extract effectively protected lipids during cooking, since no differences (P>0.05) were found in TBARS values between raw and cooked samples. The addition of yerba mate extract to chicken meatballs reduced (P <0.0001) the production of secondary lipid oxidation compounds acting as a natural antioxidant in pre-cooked meatballs during 10 days of chilled storage regardless the concentration used, when compared to NC. It was observed a quadratic regression (P <0.0001) in which TBARS values reduced as the addition of yerba mate increased and it was possible to estimate that 0,18% of yerba mate was the most effective concentration to control lipid oxidation in this study. The total mesophilic and psychrotrophic bacteria count was statistically reduced (P <0.05) as the addition of yerba mate increased only on day 1. For molds and yeasts, increasing yerba mate addition reduced linearly (P<0,05) the count on day 1 and quadratically (P<0,05) on day 3. Increasing addition of yerba mate extract also increased (P<0,0001) inhibition for E. coli and P. mirabilis and the treatment with pure yerba mate showed the most effective treatment against both bacteria. The yerba mate extract showed in vitro antimicrobial activity against the studied bacteria, however, did not exhibited microbial growth control when added to raw chicken breast meat during 7 days of chilled storage, not contributing to the extent of shelf life.

Isolation and purification of complex II from proteus mirabilis strain ATCC 29245

A respiratory complex was isolated from plasma membrane of pathogenic Proteus mirabilis strain ATCC 29245. It was identified as complex II consisting of succinate:quinone oxidoreductase (EC 1.3.5.1) containing single heme b. The complex II was purified by ion-exchange chromatography and gel filtration. The molecular weight of purified complex was 116.5 kDa and it was composed of three subunits with molecular weights of 19 kDa, 29 kDa and 68.5 kDa. The complex II contained 9.5 nmoles of cytochrome b per mg protein. Heme staining indicated that the 19 kDa subunit was cytochrome b. Its reduced form showed absorptions peaks at 557.0, 524.8 and 424.4 nm. The -band was shifted from 557.0 nm to 556.8 nm in pyridine ferrohemochrome spectrum. The succinate: quinone oxidoreductase activity was found to be high in this microorganism.

Isolation and purification of complex II from proteus mirabilis strain ATCC 29245

A respiratory complex was isolated from plasma membrane of pathogenic Proteus mirabilis strain ATCC 29245. It was identified as complex II consisting of succinate:quinone oxidoreductase (EC 1.3.5.1) containing single heme b. The complex II was purified by ion-exchange chromatography and gel filtration. The molecular weight of purified complex was 116.5 kDa and it was composed of three subunits with molecular weights of 19 kDa, 29 kDa and 68.5 kDa. The complex II contained 9.5 nmoles of cytochrome b per mg protein. Heme staining indicated that the 19 kDa subunit was cytochrome b. Its reduced form showed absorptions peaks at 557.0, 524.8 and 424.4 nm. The -band was shifted from 557.0 nm to 556.8 nm in pyridine ferrohemochrome spectrum. The succinate: quinone oxidoreductase activity was found to be high in this microorganism.