Introdução ao uso da seleção assistida por marcadores na aquicultura comercial

Com o crescimento nos estudos do melhoramento genético e análises de DNA, novas técnicas para a reprodução comercial foram inventadas. Com o advento dos marcadores moleculares, criou-se a possibilidade de selecionar genótipos superiores encontrando a associação do genótipo com o fenótipo desejado. Marcadores moleculares são ferramentas utilizadas para auxiliar na busca do loci de características quantitativas (QTL). O QTL são regiões cromossômicas no genoma animal, que definem características quantitativas. Características as quais, são de interesse comercial e difíceis de serem mensuradas. A localização do QTL é realizada por uma varredura no genoma animal, com o uso de diversos marcadores distribuídos por todo o genoma, para se localizar e avaliar associações com os fenótipos observados.  Com a localização do QTL no genoma de espécies da aquicultura, pode-se utilizar-se dessa informação para o uso da Seleção Assistida por Marcadores (SAM). A SAM consiste, através do uso de marcadores moleculares e a localização do QTL, selecionar características que são difíceis de mensurar e utilizar dessa informação na reprodução, para assim conseguir controlar características de interesse comercial como: tolerância a salinidade e temperatura, ganho de peso corporal e resistência a doenças. Através do uso da SAM na aquicultura comercial, possibilitou-se a criação de uma população de Paralic

Extrato bruto de inhame nas dietas para tambaqui (Colossoma macropomum)

Foram executados dois ensaios: in vitro e in vivo. No primeiro ensaio, objetivou-se avaliar o crescimento bacteriano in vitro com extrato bruto de inhame (EBI), em diferentes concentrações como potencial prebiótico. Dessa forma, utilizou-se o isolado de Lactobacillus spp., derivado de leite caprino e foi realizada a densidade óptica da suspensão celular, em seguida foram adicionadas diferentes concentrações (0, 2, 4, 6 e 8%), de EBI ao inóculo, incubou-se a 37 C por 48 horas. Após o crescimento, realizou-se diluições seriadas, utilizou-se aliquotas de 0,1 mL das diluições de 10-4 a 10-6, semeadas no meio de cultura MRS ágar pelo método de plaqueamento em superfície, incubadas a 37 C por 48 horas, posteriormente foram contadas as unidades formadoras de colônia. No segundo ensaio, avaliou-se in vivo o efeito das diferentes concentrações (0, 20, 40, 60 e 80 g.kg-¹) do EBI nas dietas para juvenis de tambaqui (Colossoma macropomum). Foram avaliados o desempenho produtivo, as respostas metabólicas, as atividades enzimáticas, produção de lactato no intestino e os índices hematológicos. A dieta foi ofertada duas vezes ao dia (8 e 16h) ad libitum, durante os 60 dias de experimento. Foram utilizados 70 animais em delineamento inteiramente casualizado (DIC), com cinco tratamentos e 14 repetições. Os tratamentos foram denominados como: I 0, I 20, I 40, I 60, I 80, correspondentes aos diferentes niveis de inclusão de EBI nas dietas experimentais. Os animais foram identificados com abraçadeira de nylon com cores diferentes e distribuídos em duas caixas dágua para cada tratamento (sete juvenis/caixa), com peso inicial de 55g±1,54g. Cada peixe correspondia a uma unidade experimental. As 10 caixas de polietileno possuíam capacidade de 500 litros, instaladas em um sistema de recirculação de água com uso de biofiltro e com aeração constante. No desempenho produtivo foram avaliados: Peso médio inicial (PI), Ganho de peso aos 30 dias (GP30), Ganho de peso final (GP60), Ganho de peso relativo (GPR), Comprimento Total (CT), Taxa de Crescimento Específico (TCE), Fator de Condição (FC), Consumo de ração aparente (CRA) e Conversão alimentar aparente (CAA). Os metabólitos analisados foram a Glicemia (GLI), Triglicerídeos (TRI), Proteínas totais (PROT), Colesterol (COLT), atividade da Lisozima (LISO), Glicogênio hepático (GLIH). Foram mensuradas as atividades da Amilase (AMI), Lipase (LIP), Protease alcalina inespecífica (PTAS) e aspartato aminotransferase (AST). Foram coletadas amostras dos intestinos para analisar o Lactato enzimático (LAC). Foram realizadas coletas de amostras sanguíneas para determinação hemoglobina, hematócrito, número de eritrócitos, volume corpuscular médio, hemoglobina corpuscular média, concentração de hemoglobina corpuscular média, trombóticos totais, leucócitos totais e proporções relativas de leucócitos entre os diferentes tratamentos. Os dados obtidos foram submetidos à análise de variância em nível de 5% de probabilidade e regressão. No ensaio in vitro não foram observadas diferenças significativas (p>0,05) no crescimento bacteriano. No ensaio in vivo os diferentes níveis de inclusão do EBI nas dietas apresentaram efeito significativo (p<0,05), sobre as variáveis de desempenho: GP30, GP60, GPR, CT, TCE, FC. Para as respostas metabólicas verificou-se um efeito significativo (p<0,05), apenas para COLT, LISO e GLIH. Não houve efeito significativo para a AST (p>0,05). O LAC apresentou efeito significativo (p<0,05). Os parâmetros hematológicos não apresentaram efeito significativos (p>0,05). As atividades das enzimas digestivas, somente LIP e PTAS foram significativas (p<0,05). Portanto, pode se inferir que a suplementação do EBI em até 80 g.kg-¹ nas dietas pode ser utilizada e não ocasiona danos a espécie em estudo.

Two tests were performed: in vitro and in vivo. In the first trial, the objective was to evaluate bacterial growth in vitro with crude yam extract (CYE), in different concentrations as a prebiotic potential. Thus, used or isolated from Lactobacillus spp., Derived from goat's milk and an optical density of cell suspension was performed, then different variables (0, 2, 4, 6 and 8%), from CYE were added to the inoculum, incubate at 37 °C for 48 hours. After growth, performed if serial dilutions, use 0.1 mL aliquots of the 10-4 to 10-6 dilutions, sown in the MRS culture medium, according to the surface coating method, incubated at 37 °C for 48 hours later were counted as colony forming units. In the second trial, the effect of different concentrations (0, 20, 40, 60 and 80 g.kg-¹) of CYE in the diets for tambaqui juveniles (Colossoma macropomum) was evaluated in vivo. Productive performance, metabolic responses, enzyme activities, lactate production in the intestine and hematological indexes were evaluated. The diet was offered twice a day (8 am and 4 pm) ad libitum, during the 60 days of the experiment. 70 animals were used in a completely randomized design, with five treatments and 14 repetitions. The treatments were called: I 0, I 20, I 40, I 60, I 80, corresponding to the different levels of inclusion of CYE in the experimental diets. The animals were identified with nylon clamps with different colors and distributed in two water boxes for each treatment (seven juveniles / box), with an initial weight of 55g ± 1.54g. Each fish corresponded to an experimental unit. The 10 polyethylene boxes had a capacity of 500 liters, installed in a water recirculation system using biofilter and with constant aeration. In terms of productive performance, the following were evaluated: Initial average weight (IW), Weight gain at 30 days (WG30), Final weight gain (WG60), Relative weight gain (RWG), Total length (TL), Specific growth rate (SGR), Condition factor (CF), Apparent feed consumption (CRA) and Apparent Feed Conversion (AFC). The metabolites analyzed were Glycemia (GLY), Triglycerides (TRI), Total Proteins (PROT), Cholesterol (CHOL), Lysozyme activity (LYSO), Hepatic glycogen (HGLI). The activities of Amylase (AMY), Lipase (LIP), nonspecific alkaline protease (NAP) and aspartate aminotransferase (AST) were measured. Intestinal samples were collected to analyze enzymatic lactate (LAC). Blood samples were collected to determine hemoglobin, hematocrit, number of erythrocytes, average corpuscular volume, average corpuscular hemoglobin, average corpuscular hemoglobin concentration, total thrombotics, total leukocytes and relative leukocyte proportions between different treatments. The data obtained were subjected to analysis of variance at the level of 5% probability and regression. In the in vitro test, no significant differences (p>0.05) were observed in bacterial growth. In the in vivo test, the different levels of inclusion of CYE in the diets showed a significant effect (p<0.05), on the performance variables: WG30, WG60, RWG, TL, SGR, CF. For metabolic responses, there was a significant effect (p<0.05), only for CHOL, LYSO and HGLI. There was no significant effect for AST (p>0.05). LAC had a significant effect (p<0.05). The hematological parameters had no significant effect (p>0.05). Digestive enzyme activities, only LIP and NAS, were significant (p<0.05). Therefore, it can be inferred that the inclusion of CYE in up to 80 g.kg-¹ in the diets can be used and does not cause damage to the species under study.

INTRODUÇÃO AO USO DA SELEÇÃO ASSISTIDA POR MARCADORES NA AQUICULTURA COMERCIAL

Com o crescimento nos estudos do melhoramento genético e análises de DNA, novas técnicas para a reprodução comercial foram inventadas. Com o advento dos marcadores moleculares, criou-se a possibilidade de selecionar genótipos superiores encontrando a associação do genótipo com o fenótipo desejado. Marcadores moleculares são ferramentas utilizadas para auxiliar na busca do loci de características quantitativas (QTL). O QTL são regiões cromossômicas no genoma animal, que definem características quantitativas. Características as quais, são de interesse comercial e difíceis de serem mensuradas. A localização do QTL é realizada por uma varredura no genoma animal, com o uso de diversos marcadores distribuídos por todo o genoma, para se localizar e avaliar associações com os fenótipos observados.  Com a localização do QTL no genoma de espécies da aquicultura, pode-se utilizar-se dessa informação para o uso da Seleção Assistida por Marcadores (SAM). A SAM consiste, através do uso de marcadores moleculares e a localização do QTL, selecionar características que são difíceis de mensurar e utilizar dessa informação na reprodução, para assim conseguir controlar características de interesse comercial como: tolerância a salinidade e temperatura, ganho de peso corporal e resistência a doenças. Através do uso da SAM na aquicultura comercial, possibilitou-se a criação de uma população de Paralic

Análise da Expressão Gênica diferencial em Gômada de Colossoma Macropomum (Tambaqui) do Amazonas

Este trabalho teve como objetivo identificar a expressão gênica capaz de diferenciar, por técnicas de biologia molecular, a sexagem em exemplares de tambaqui, Colossoma macropomum. Para isso, foi realizada a dentificação da expressões gênicas que se expressam diferencialmente entre tecido gonadal de machos e fêmeas, foi cirado e validado os oligonucleotídeos específicos de exemplares de tambaqui para genes que possibilitaram a determinação da sexagem antes do dimorfismo sexual e, por fim, foi analisada a expressão relativa dos oligonucleotídeos criados. Com os resultados obtidos pode concluir que: a expressão do gene cyp19 atua na determinação sexual da espécie em análise assim como ocorre em outros peixes teleósteos; a hibridização única do oligonucleotídeo Aro 01 permite afirmar uma satisfatória utilização do mesmo como específico na identificação da expressão gonadal; o conjunto de oligonucleotídeos Aro_01 gerado nesta pesquisa pode ser utilizado como ponto de referência da expressão do gene cyp19 para tambaqui e, é possível determinar a sexagem de tambaqui de acordo com análises da expressão gênica utilizando-se do conjunto de oligonucleotídeos denominado Aro_01 nas diversidades amostrais (Gônada masculina e Gônada feminina)

Análise da Expressão Gênica diferencial em Gômada de Colossoma Macropomum (Tambaqui) do Amazonas

Este trabalho teve como objetivo identificar a expressão gênica capaz de diferenciar, por técnicas de biologia molecular, a sexagem em exemplares de tambaqui, Colossoma macropomum. Para isso, foi realizada a dentificação da expressões gênicas que se expressam diferencialmente entre tecido gonadal de machos e fêmeas, foi cirado e validado os oligonucleotídeos específicos de exemplares de tambaqui para genes que possibilitaram a determinação da sexagem antes do dimorfismo sexual e, por fim, foi analisada a expressão relativa dos oligonucleotídeos criados. Com os resultados obtidos pode concluir que: a expressão do gene cyp19 atua na determinação sexual da espécie em análise assim como ocorre em outros peixes teleósteos; a hibridização única do oligonucleotídeo Aro 01 permite afirmar uma satisfatória utilização do mesmo como específico na identificação da expressão gonadal; o conjunto de oligonucleotídeos Aro_01 gerado nesta pesquisa pode ser utilizado como ponto de referência da expressão do gene cyp19 para tambaqui e, é possível determinar a sexagem de tambaqui de acordo com análises da expressão gênica utilizando-se do conjunto de oligonucleotídeos denominado Aro_01 nas diversidades amostrais (Gônada masculina e Gônada feminina) (AU)