Epidemiological aspects of the occurrence of anti-Sarcocystis spp. andanti-Toxoplasma gondii antibodies in dogs in the Northern region of Brazil / Aspectos epidemiológicos da ocorrência de anticorpos anti-Sarcocystisspp. e anti-Toxoplasma gondii em cães da região norte do Brasil

We conducted aseroepidemiological study on the occurrence of anti-Sarcocystisspp. and anti-Toxoplasma gondii antibodies in dogs from family farming properties in the municipality of Ji-Paraná, Rondônia.Blood samples were collected from apparently healthy dogs between September 2012 and November 2013. In total, 181 blood serum samples were analyzed using an indirect immunofluorescence assay, among which 57 (31.49%) and 20 (11.04%) were positive for anti-T. gondii and anti-Sarcocystis spp., respectively. Statistical analyses showed that the type of food fed to the dogs was associated with the occurrence of anti-Sarcocystisspp. antibodies. In contrast, age and access to bovine carcasses were the risk factors for anti-T. gondii.The high occurrence of seropositive dogs for Sarcocystis spp. and T. gondii evidences the wide distribution of these agents in the studied area, possibly due to human and animal exposure to these protozoan species. In addition, anti-T. gondii antibodies were directly proportional to dog age. The increase in the number of positive animals with age was statistically significant. Furthermore, high antibody titers (up to 800) against Sarcocystis spp. in dogs suggest the possibility of recent exposure, in addition to environmental contamination by oocysts/sporocysts eliminated by the feces of these animals.

Conduzimos um estudo soroepidemiológico sobre a ocorrência de anticorpos anti- Sarcocystis spp. e anti-Toxoplasma gondiiem cães de propriedades de agricultura familiar no município de Ji-Paraná, Rondônia. Amostras de sangue foram coletadas de cães aparentemente saudáveis, entre setembro de 2012 e novembro de 2013. Ao todo, foram analisados 181 soros sanguíneos por meio do ensaio de imunofluorescência indireta, sendo positivas 57 (31,49%) e 20 (11,04%) amostras para anticorpos anti-T. gondii e anti-Sarcocystis spp., respectivamente. As análises estatísticas demonstraram que o tipo de alimentação fornecida aos cães esteve associado à ocorrência de anticorpos anti-Sarcocystis spp. Em contraste a idade e o acesso à carcaça bovina foram fatores de risco para a presença de anticorpos anti-T. gondii. A alta ocorrência de cães soropositivos para Sarcocystis spp. e T. gondii evidencia a ampla distribuição desses agentes na área estudada, possivelmente devido à exposição humana e animal a essas espécies de protozoários. Além disso, o resultado dos anticorpos anti-T. gondii relacionados a idade do cão mostraram diferença estatística, com aumento significativo no número de animais positivos com a idade. Além disso, altos títulos de anticorpos (até 800) contra Sarcocystis spp. em cães sugerem a possibilidade de exposição recente, além da contaminação ambiental por oocistos/esporocistos eliminados pelas fezes desses animais.

Avaliação de dois métodos de estocagem de amostras teciduais para diagnóstico molecular de Sarcocystis spp

No Brasil existem três espécies de gambás, Didelphis aurita, Didelphis albiventris e Didelphis marsupialis. Entre os diversos agentes patológicos que estes hospedeiros albergam, estão os protozoários do gênero Sarcocystis de grande interesse na medicina veterinária por causar a Mieloencefalite Protozoária Equina (EPM). Com a evolução dos métodos de diagnóstico a biologia molecular possibilitou a identificação de espécies em hospedeiros diferentes. Com isso o presente trabalho tem por objetivo avaliar dois métodos de conservação tecidual com a finalidade de melhorar o diagnóstico molecular. Para tanto, foram utilizados cinco gambás D. aurita para a obtenção dos esporocistos contidos na lâmina própria do intestino delgado. Estes foram extraídos da mucosa após digestão da mesma com hipoclorito de sódio 10%. Após a contagem e morfometria dos esporocistos, cada amostra foi padronizada em inóculos contendo 60 e 120 esporocistos em 1 mL, que foram inoculados em periquitos australianos (Melopsittacus undulatus). Dois periquitos foram inoculados com solução de soro fisiológico, perfazendo um total de 12 periquitos. De todos os periquitos que morreram ou foram eutanasiados no período de quatro meses, foram coletadas amostras de tecidos e conservadas a temperatura de -20 ºC com e sem a imersão em álcool absoluto. Foi realizada a biologia molecular dos esporocistos com o primer ITS 18S 9L/1H. Utilizando este mesmo primer foi realizado o diagnóstico molecular dos seguintes tecidos: coração, língua, coxa, peito, fígado, pulmão e cérebro, com o intuito de comparar a eficiência dos métodos de conservação. Como resultado dos valores morfométricos em micrômetros dos esporocistos obtivemos o comprimento médio de 11,2 ± 0,9 (7-15,6) e largura média de 7,7 ± 0,6 (3,8-10,9). Todas as amostras de raspado de mucosa contendo os esporocistos foram positivas para a PCR utilizando o primer ITS. O método de conservação a -20°C sem e com imersão em álcool absoluto apresentaram eficiência na preservação do DNA dos tecidos, embora não foram encontradas diferenças estatísticas significativas entre os dois métodos avaliados. Nas infecções agudas foram observadas lesões histopatológicas em região hepática e pulmonar, com formação de merontes nos pulmões. Nas infecções crônicas foram encontrados 20 cistos maduros e imaturos nos tecidos do peito, coxa e da língua que mensurados tiveram valores em micrômetros de 25,4 ± 7,1 (12,7-34,8) de largura e 45,9 ± 24,6 (16,8-113,0) de comprimento. Com os resultados obtidos podemos inferir que os gambás D. aurita estão parasitados com espécies de Sarcosystis spp. que tem aves como hospedeiro intermediário.

In Brazil there are three species of possums, Didelphis aurita, Didelphis albiventris and Didelphis marsupialis. Among the various pathological agents that these hosts harbor, protozoa of the genus Sarcocystis is object of great interest in veterinary medicine for causing Equine Protozoan Myeloencephalitis (EPM). With the evolution of diagnostic methods, molecular biology has enabled to identify species in different hosts. Thus, the present work aims to evaluate two methods of tissue conservation in order to improve the molecular diagnosis. For this purpose, five D. aurita possums were used to obtain the sporocysts contained in the small intestine lamina propria. These were extracted from the mucosa after digestion with 10% sodium hypochlorite. After sporocyst counting and morphometry, each sample was standardized on inocula containing 60 and 120 sporocysts in 1 mL, which were inoculated into budgerigars (Melopsittacus undulatus). Two parakeets were inoculated with saline solution, making a total of 12 parakeets. From all the parakeets that died or were euthanized in the period of four months, tissue samples were collected and kept at -20 ºC with and without immersion in absolute alcohol. Molecular biology of the sporocysts was performed with the ITS 18S 9L / 1H primer. Using this same primer, the molecular diagnosis of the following tissues was performed: heart, language, thigh, chest, liver, lung and brain, in order to compare the efficiency of conservation methods. As a result of the morphometric values in micrometers of the sporocysts, we obtained an average length of 11.2 ± 0.9 (7-15.6) and an average width of 7.7 ± 0.6 (3.8-10.9). All mucosa scrape samples containing sporocysts were positive for PCR using the ITS primer. The method of conservation at -20 ° C without and with immersion in absolute alcohol showed efficiency in the preservation of DNA tissue, although no statistically significant differences were found between the two methods evaluated. In acute infections, histopathological lesions were observed in the hepatic and pulmonary regions, with formation of merons in the lungs. In chronic infections, 20 mature and immature cysts were found in the chest thigh and tongue tissues, which were measured with micrometers values of 25.4 ± 7.1 (12.7-34.8) in width and 45.9 ± 24.6 (16.8-113.0) in length. With the results obtained, its possible to infer that D. aurita possums are parasitized with Sarcosystis spp. species that have birds as an intermediate host.

Fatal sarcosporidiosis in a passerine of species Gnorimopsar chopi chopi / Sarcosporidiose fatal em pássaro-preto (Gnorimopsar chopi chopi)

Relata-se um caso fatal de sarcosporidiose em pássaro-preto (melro), Gnorimopsar chopi chopi, caracterizado por intensa prostração, respiração superficial e decúbito lateral. Embora nao tenham sido observadas alterações significativas no sistema respiratório, o quadro clínico confundia-se com doença nesse sistema, em decorrência do comprometimento dos músculos ligados à respiração.(AU)