Resumo
Blood parameters of 18 Nellore steers submitted to high concentrate diet in two sequential feeding regimes (phase 1: restriction and phase 2: ad libitum feeding) were evaluated. In the first phase, steers were fed for 56 days three intake levels of dry mat-ter (ad libitum, 75 g dry matter (DM)/kg metabolic body weight (BW0.75) or 60 g DM/kg BW(0.75). In the second phase, from the 57th day on feed, animals fed 60 g DM/kg BW(0.75) and 75 g DM/kg BW(0.75) were fed ad libitum until the 136th day. In the 8th, 27th, 55th (first phase), 71st, 84th, 112th and 132nd (second phase) day of experimental period, blood samples were collected and insulin-like growth factor I (IGF-I), triiodothyronine (T3), thyroxine (T4), glucose, plasma ureic nitrogen (PUN) and total protein (TP) were determined. In the first phase IGF-I, T4, glucose and total protein concentration was not different among treat-ments (P>0.05) and there was no interaction between treatment and time (P>0.05). There was an interaction among treatments and time on T3 and plasma ureic nitrogen (P0.05). For plasma ureic nitrogen concentration there was an interaction among treatments and time (P=0.02). Lower levels of diet intake can be used to improve animal performance in feedlot.
Foram avaliados parâmetros sanguíneos de 18 novilhos Nelore submetidos a dois regimes sequenciais de alimentação (fase 1: restrição e fase 2: alimento ad libitum) com dieta de alto teor de concentrado. Na primeira fase, os animais foram alimentados por 56 dias em três níveis de ingestão de matéria seca (MS) representando os tratamentos: ad libitum, 75 g MS/kg peso corporal metabólico (PV0,75) e 60 g MS/kg PV(0,75). Na segunda fase, a partir do 57º dia de confinamento, os animais alimentados com 60 g MS/kg PV(0,75) e 75 g MS/kg PV(0,75) receberam alimentação ad libitum até o 136º dia. No 8º, 27º, 55º, primeira fase, e 71º, 84º, 112º e 132º dia de confinamento, segunda fase, foram colhidas amostras de sangue para determinação das concentrações de fator de crescimento semelhante à insulina I (IGF-I), triiodotironina (T3), tiroxina (T4), glicose, nitrogênio ureico plasmático e proteína total. No período de restrição alimentar as concentrações plasmáticas de IGF-I, T4, glicose e proteína total não foram diferentes entre os tratamentos (P>0,05) e não houve interação entre tratamento e tempo (P>0,05). Foi observada interação entre tratamento e tempo para a concentração plasmática de T3 e nitrogênio ureico no plasma (P0,05). Para a concentração de nitrogênio ureico no plasma houve interação entre os fatores tratamentos e tempo (P=0,02). Níveis mais baixos de ingestão de dieta podem ser usados para melhorar o desempenho animal em confinamento.
Assuntos
Animais , Bovinos , Coleta de Amostras Sanguíneas/veterinária , Dieta/efeitos adversos , Dieta/métodos , Dieta/veterinária , Fator de Crescimento Insulin-Like I/análise , Testes Hematológicos/veterináriaResumo
Blood parameters of 18 Nellore steers submitted to high concentrate diet in two sequential feeding regimes (phase 1: restriction and phase 2: ad libitum feeding) were evaluated. In the first phase, steers were fed for 56 days three intake levels of dry mat-ter (ad libitum, 75 g dry matter (DM)/kg metabolic body weight (BW0.75) or 60 g DM/kg BW(0.75). In the second phase, from the 57th day on feed, animals fed 60 g DM/kg BW(0.75) and 75 g DM/kg BW(0.75) were fed ad libitum until the 136th day. In the 8th, 27th, 55th (first phase), 71st, 84th, 112th and 132nd (second phase) day of experimental period, blood samples were collected and insulin-like growth factor I (IGF-I), triiodothyronine (T3), thyroxine (T4), glucose, plasma ureic nitrogen (PUN) and total protein (TP) were determined. In the first phase IGF-I, T4, glucose and total protein concentration was not different among treat-ments (P>0.05) and there was no interaction between treatment and time (P>0.05). There was an interaction among treatments and time on T3 and plasma ureic nitrogen (P<0.01). In the second phase IGF-I, T3, T4, glucose and total protein concentration was not different among treatments and there was no interaction between treatment and time (P>0.05). For plasma ureic nitrogen concentration there was an interaction among treatments and time (P=0.02). Lower levels of diet intake can be used to improve animal performance in feedlot.(AU)
Foram avaliados parâmetros sanguíneos de 18 novilhos Nelore submetidos a dois regimes sequenciais de alimentação (fase 1: restrição e fase 2: alimento ad libitum) com dieta de alto teor de concentrado. Na primeira fase, os animais foram alimentados por 56 dias em três níveis de ingestão de matéria seca (MS) representando os tratamentos: ad libitum, 75 g MS/kg peso corporal metabólico (PV0,75) e 60 g MS/kg PV(0,75). Na segunda fase, a partir do 57º dia de confinamento, os animais alimentados com 60 g MS/kg PV(0,75) e 75 g MS/kg PV(0,75) receberam alimentação ad libitum até o 136º dia. No 8º, 27º, 55º, primeira fase, e 71º, 84º, 112º e 132º dia de confinamento, segunda fase, foram colhidas amostras de sangue para determinação das concentrações de fator de crescimento semelhante à insulina I (IGF-I), triiodotironina (T3), tiroxina (T4), glicose, nitrogênio ureico plasmático e proteína total. No período de restrição alimentar as concentrações plasmáticas de IGF-I, T4, glicose e proteína total não foram diferentes entre os tratamentos (P>0,05) e não houve interação entre tratamento e tempo (P>0,05). Foi observada interação entre tratamento e tempo para a concentração plasmática de T3 e nitrogênio ureico no plasma (P<0,01). No período de alimento ad libitum as concentrações de IGF-I, T3, T4, glicose e proteína total não foram diferentes entre os tratamentos e não houve interação entre tratamento e tempo (P>0,05). Para a concentração de nitrogênio ureico no plasma houve interação entre os fatores tratamentos e tempo (P=0,02). Níveis mais baixos de ingestão de dieta podem ser usados para melhorar o desempenho animal em confinamento.(AU)
Assuntos
Animais , Bovinos , Dieta/métodos , Dieta/veterinária , Fator de Crescimento Insulin-Like I/análise , Dieta/efeitos adversos , Coleta de Amostras Sanguíneas/veterinária , Testes Hematológicos/veterináriaResumo
Este trabalho investigou as principais alterações clínicas e dermatopatológicas de equinos intoxicados natural e experimentalmente por Leucaena leucocephala. Os surtos ocorreram nos estados de São Paulo e Goiás, onde seis cavalos após a ingestão de casca e/ou folhas de L. leucocephala apresentaram alopecia, principalmente na crina e cauda. Nesses animais o diagnóstico foi baseado na observação da ingestão da planta e dos sinais clínicos. Nos animais intoxicados experimentalmente, foi realizado o exame clínico, biópsias da pele das regiões de crina, dorso e cauda e foi feita dosagem sérica de tri-iodotironina (T3) e tiroxina (T4). Alopecia da crina e cauda foi o principal sinal clínico observado, seguido de anorexia, emagrecimento e apatia em todos os equinos. Os níveis de T3 e T4 total apresentaram redução significativa (p≤0,05) na terceira semana de ingestão da leucena quando comparado aos níveis basais. As alterações histológicas observadas nas biópsias de pele demonstram acentuada telogenização dos folículos pilosos ao final dos experimentos. Os achados clínico-patológicos em equinos intoxicados são semelhantes aos observados em ruminantes. A intoxicação experimental de equinos por L. leucocephala evidenciou o acentuado declínio dos níveis dos hormônios tireoideanos, sugerindo efeito bociogênico da mimosina e seus compostos derivados, com hipotireoidismo transitório e alopecia devido à acentuada redução da atividade folicular.(AU)
This paper reports the main clinical changes of natural and experimentally poisoning by Leucaena leucocephala in horses. Outbreaks of poisoning occurred in São Paulo and Goiás States, where six horses after ingestion of bark and/or leaves of the plant showed alopecia mainly in mane and tail. The diagnosis was based on the observation of plant intake and clinical signs. In horses experimentally poisoned, clinical examination was performed and skin biopsies were taken from mane, back and tail regions, and triiodothyronine (T3) and thyroxine (T4) serum levels were assayed. Alopecia in mane and tail was the main clinical sign, accompanied by anorexia, weight loss and lethargy in all horses. T3 and total T4 showed significant decrease in serum levels (p≤0.05) in the third week of leucaena intake compared with baseline levels. Marked telogenization of hair follicles at the end of the experiments were observed in skin biopsies. The clinical and pathological findings in poisoned horses are similar to those observed in ruminants. Experimental poisoning of horses by the plant highlights the marked decline in levels of thyroid hormones, suggesting goitrogenic effect of mimosine and its derived compounds, with transient hypothyroidism and alopecia due to accentuated reduction in follicular activity.(AU)
Assuntos
Animais , Intoxicação por Plantas/veterinária , Tiroxina , Tri-Iodotironina , Alopecia/veterinária , Cavalos , Hipotireoidismo/veterinária , Fabaceae/toxicidade , Plantas TóxicasResumo
Este trabalho investigou as principais alterações clínicas e dermatopatológicas de equinos intoxicados natural e experimentalmente por Leucaena leucocephala. Os surtos ocorreram nos estados de São Paulo e Goiás, onde seis cavalos após a ingestão de casca e/ou folhas de L. leucocephala apresentaram alopecia, principalmente na crina e cauda. Nesses animais o diagnóstico foi baseado na observação da ingestão da planta e dos sinais clínicos. Nos animais intoxicados experimentalmente, foi realizado o exame clínico, biópsias da pele das regiões de crina, dorso e cauda e foi feita dosagem sérica de tri-iodotironina (T3) e tiroxina (T4). Alopecia da crina e cauda foi o principal sinal clínico observado, seguido de anorexia, emagrecimento e apatia em todos os equinos. Os níveis de T3 e T4 total apresentaram redução significativa (p≤0,05) na terceira semana de ingestão da leucena quando comparado aos níveis basais. As alterações histológicas observadas nas biópsias de pele demonstram acentuada telogenização dos folículos pilosos ao final dos experimentos. Os achados clínico-patológicos em equinos intoxicados são semelhantes aos observados em ruminantes. A intoxicação experimental de equinos por L. leucocephala evidenciou o acentuado declínio dos níveis dos hormônios tireoideanos, sugerindo efeito bociogênico da mimosina e seus compostos derivados, com hipotireoidismo transitório e alopecia devido à acentuada redução da atividade folicular.(AU)
This paper reports the main clinical changes of natural and experimentally poisoning by Leucaena leucocephala in horses. Outbreaks of poisoning occurred in São Paulo and Goiás States, where six horses after ingestion of bark and/or leaves of the plant showed alopecia mainly in mane and tail. The diagnosis was based on the observation of plant intake and clinical signs. In horses experimentally poisoned, clinical examination was performed and skin biopsies were taken from mane, back and tail regions, and triiodothyronine (T3) and thyroxine (T4) serum levels were assayed. Alopecia in mane and tail was the main clinical sign, accompanied by anorexia, weight loss and lethargy in all horses. T3 and total T4 showed significant decrease in serum levels (p≤0.05) in the third week of leucaena intake compared with baseline levels. Marked telogenization of hair follicles at the end of the experiments were observed in skin biopsies. The clinical and pathological findings in poisoned horses are similar to those observed in ruminants. Experimental poisoning of horses by the plant highlights the marked decline in levels of thyroid hormones, suggesting goitrogenic effect of mimosine and its derived compounds, with transient hypothyroidism and alopecia due to accentuated reduction in follicular activity.(AU)
Assuntos
Animais , Intoxicação por Plantas/veterinária , Tiroxina , Tri-Iodotironina , Alopecia/veterinária , Cavalos , Hipotireoidismo/veterinária , Fabaceae/toxicidade , Plantas TóxicasResumo
ABSTRACT: This paper reports the main clinical changes of natural and experimentally poisoning by Leucaena leucocephala in horses. Outbreaks of poisoning occurred in São Paulo and Goiás States, where six horses after ingestion of bark and/or leaves of the plant showed alopecia mainly in mane and tail. The diagnosis was based on the observation of plant intake and clinical signs. In horses experimentally poisoned, clinical examination was performed and skin biopsies were taken from mane, back and tail regions, and triiodothyronine (T3) and thyroxine (T4) serum levels were assayed. Alopecia in mane and tail was the main clinical sign, accompanied by anorexia, weight loss and lethargy in all horses. T3 and total T4 showed significant decrease in serum levels (p0.05) in the third week of leucaena intake compared with baseline levels. Marked telogenization of hair follicles at the end of the experiments were observed in skin biopsies. The clinical and pathological findings in poisoned horses are similar to those observed in ruminants. Experimental poisoning of horses by the plant highlights the marked decline in levels of thyroid hormones, suggesting goitrogenic effect of mimosine and its derived compounds, with transient hypothyroidism and alopecia due to accentuated reduction in follicular activity.
RESUMO: Este trabalho investigou as principais alterações clínicas e dermatopatológicas de equinos intoxicados natural e experimentalmente por Leucaena leucocephala. Os surtos ocorreram nos estados de São Paulo e Goiás, onde seis cavalos após a ingestão de casca e/ou folhas de L. leucocephala apresentaram alopecia, principalmente na crina e cauda. Nesses animais o diagnóstico foi baseado na observação da ingestão da planta e dos sinais clínicos. Nos animais intoxicados experimentalmente, foi realizado o exame clínico, biópsias da pele das regiões de crina, dorso e cauda e foi feita dosagem sérica de tri-iodotironina (T3) e tiroxina (T4). Alopecia da crina e cauda foi o principal sinal clínico observado, seguido de anorexia, emagrecimento e apatia em todos os equinos. Os níveis de T3 e T4 total apresentaram redução significativa (p0,05) na terceira semana de ingestão da leucena quando comparado aos níveis basais. As alterações histológicas observadas nas biópsias de pele demonstram acentuada telogenização dos folículos pilosos ao final dos experimentos. Os achados clínico-patológicos em equinos intoxicados são semelhantes aos observados em ruminantes. A intoxicação experimental de equinos por L. leucocephala evidenciou o acentuado declínio dos níveis dos hormônios tireoideanos, sugerindo efeito bociogênico da mimosina e seus compostos derivados, com hipotireoidismo transitório e alopecia devido à acentuada redução da atividade folicular.
Resumo
The aim of this study was to investigate the interaction of human FSH (10ng/ml) with T4 (20ng/mL) on survival, activation and growth of preantral follicles cultured in vitro for 28 days. Fragments of non-cultured and cultured ovarian tissue were processed for classic histology and transmission electron microscopy. The results showed a reduction in the survival rate in all the media tested (one to 28 days) when compared to the fresh control. However the treatment with T4/hFSH for seven days of culture maintained the rate similar to the control. The media tested by one and 28 days reduced the percentage of primordial follicles in all periods of culture. However, T4/hFSH on day one of culture remained similar to the fresh control. None of the media were able to keep the percentage of the developing follicles. It was observed that the follicular diameter in the medium with T4/hFSH remained similar to the fresh control. The ultrastructural analysis confirmed the integrity of follicles cultured for seven days in a medium supplemented with T4/hFSH. In conclusion, the medium with T4/hFSH is able to maintain the survival, promote the activation, and the ultrastructural integrity of caprine preantral follicles for until seven days.
O objetivo deste estudo foi investigar a interação do FSH humano (10 ng/mL) com T4 (20 ng/mL) na sobrevivência, ativação e crescimento de folículos pré-antrais cultivados in vitro, por um período de longa duração (28 dias). Fragmentos de tecido ovariano não cultivado e cultivados foram processados para histologia clássica e microscopia eletrônica de transmissão. Os resultados mostraram uma redução na taxa de sobrevivência em todos os meios testados (um a 28 dias) quando comparado ao controle fresco. Entretanto, o tratamento com T4/hFSH por sete dias de cultivo resultou em taxa semelhante ao controle. Os meios testados por 28 dias reduziram o percentual de folículos primordiais em todos os períodos de cultivo. Contudo, T4/hFSH no dia um de cultivo manteve-se semelhante ao controle fresco. Nenhum dos meios foi capaz de manter o percentual dos folículos em desenvolvimento. Observou-se que o diâmetro folicular cultivado no meio com T4/hFSH manteve-se semelhante ao controle fresco. As análises ultraestruturais confirmaram a integridade de folículos cultivados por sete dias em meio suplementado com T4/hFSH. Em conclusão, o meio com T4/hFSH é capaz de manter a sobrevivência, promover a ativação e a integridade ultraestrutural de folículos pré-antrais caprinos, por até sete dias.
Assuntos
Animais , Hormônio Foliculoestimulante Humano/administração & dosagem , Ruminantes/embriologia , Tiroxina/administração & dosagem , Técnicas In Vitro/veterinária , Histologia/instrumentação , Métodos de Análise Laboratorial e de Campo , Taxa de SobrevidaResumo
The aim of this study was to investigate the interaction of human FSH (10ng/ml) with T4 (20ng/mL) on survival, activation and growth of preantral follicles cultured in vitro for 28 days. Fragments of non-cultured and cultured ovarian tissue were processed for classic histology and transmission electron microscopy. The results showed a reduction in the survival rate in all the media tested (one to 28 days) when compared to the fresh control. However the treatment with T4/hFSH for seven days of culture maintained the rate similar to the control. The media tested by one and 28 days reduced the percentage of primordial follicles in all periods of culture. However, T4/hFSH on day one of culture remained similar to the fresh control. None of the media were able to keep the percentage of the developing follicles. It was observed that the follicular diameter in the medium with T4/hFSH remained similar to the fresh control. The ultrastructural analysis confirmed the integrity of follicles cultured for seven days in a medium supplemented with T4/hFSH. In conclusion, the medium with T4/hFSH is able to maintain the survival, promote the activation, and the ultrastructural integrity of caprine preantral follicles for until seven days.(AU)
O objetivo deste estudo foi investigar a interação do FSH humano (10 ng/mL) com T4 (20 ng/mL) na sobrevivência, ativação e crescimento de folículos pré-antrais cultivados in vitro, por um período de longa duração (28 dias). Fragmentos de tecido ovariano não cultivado e cultivados foram processados para histologia clássica e microscopia eletrônica de transmissão. Os resultados mostraram uma redução na taxa de sobrevivência em todos os meios testados (um a 28 dias) quando comparado ao controle fresco. Entretanto, o tratamento com T4/hFSH por sete dias de cultivo resultou em taxa semelhante ao controle. Os meios testados por 28 dias reduziram o percentual de folículos primordiais em todos os períodos de cultivo. Contudo, T4/hFSH no dia um de cultivo manteve-se semelhante ao controle fresco. Nenhum dos meios foi capaz de manter o percentual dos folículos em desenvolvimento. Observou-se que o diâmetro folicular cultivado no meio com T4/hFSH manteve-se semelhante ao controle fresco. As análises ultraestruturais confirmaram a integridade de folículos cultivados por sete dias em meio suplementado com T4/hFSH. Em conclusão, o meio com T4/hFSH é capaz de manter a sobrevivência, promover a ativação e a integridade ultraestrutural de folículos pré-antrais caprinos, por até sete dias.(AU)
Assuntos
Animais , Hormônio Foliculoestimulante Humano/administração & dosagem , Tiroxina/administração & dosagem , Técnicas In Vitro/veterinária , Ruminantes/embriologia , Histologia/instrumentação , Taxa de Sobrevida , Métodos de Análise Laboratorial e de CampoResumo
The aim of this study was to investigate the interaction of human FSH (10ng/ml) with T4 (20ng/mL) on survival, activation and growth of preantral follicles cultured in vitro for 28 days. Fragments of non-cultured and cultured ovarian tissue were processed for classic histology and transmission electron microscopy. The results showed a reduction in the survival rate in all the media tested (one to 28 days) when compared to the fresh control. However the treatment with T4/hFSH for seven days of culture maintained the rate similar to the control. The media tested by one and 28 days reduced the percentage of primordial follicles in all periods of culture. However, T4/hFSH on day one of culture remained similar to the fresh control. None of the media were able to keep the percentage of the developing follicles. It was observed that the follicular diameter in the medium with T4/hFSH remained similar to the fresh control. The ultrastructural analysis confirmed the integrity of follicles cultured for seven days in a medium supplemented with T4/hFSH. In conclusion, the medium with T4/hFSH is able to maintain the survival, promote the activation, and the ultrastructural integrity of caprine preantral follicles for until seven days.
O objetivo deste estudo foi investigar a interação do FSH humano (10 ng/mL) com T4 (20 ng/mL) na sobrevivência, ativação e crescimento de folículos pré-antrais cultivados in vitro, por um período de longa duração (28 dias). Fragmentos de tecido ovariano não cultivado e cultivados foram processados para histologia clássica e microscopia eletrônica de transmissão. Os resultados mostraram uma redução na taxa de sobrevivência em todos os meios testados (um a 28 dias) quando comparado ao controle fresco. Entretanto, o tratamento com T4/hFSH por sete dias de cultivo resultou em taxa semelhante ao controle. Os meios testados por 28 dias reduziram o percentual de folículos primordiais em todos os períodos de cultivo. Contudo, T4/hFSH no dia um de cultivo manteve-se semelhante ao controle fresco. Nenhum dos meios foi capaz de manter o percentual dos folículos em desenvolvimento. Observou-se que o diâmetro folicular cultivado no meio com T4/hFSH manteve-se semelhante ao controle fresco. As análises ultraestruturais confirmaram a integridade de folículos cultivados por sete dias em meio suplementado com T4/hFSH. Em conclusão, o meio com T4/hFSH é capaz de manter a sobrevivência, promover a ativação e a integridade ultraestrutural de folículos pré-antrais caprinos, por até sete dias.
Resumo
Na medicina laboratorial veterinária, a dosagem de hormônios ainda utiliza as técnicas de radioimunoensaio (RIE) e embora essa técnica guarde qualidades na acurácia em seus resultados, ela exige uma série complexa de questões operacionais a serem observadas para sua execução além de possuir riscos ambientais. Dessa forma, estudos comparativos entre técnicas de determinação hormonal tem considerável valor no que se refere a indicar substitutos ao RIE. O ensaio imunofluorescente (ELFA) vem apontando como uma técnica candidata a substituição, por suplantar as desvantagens do RIE, entretanto são poucos os estudos do ELFA em veterinária. Destarte, decidiu-se utilizar um modelo animal, mais especificamente os equinos, para análises comparativas entre as técnicas, sendo a tetraiodotironina (T4) o hormônio proposto. A avaliação da tireoide é relevante pode permite um diagnóstico de aterações tireoidianas primárias e acompanhamento da função da tireóide. O estudo estatístico desenvolvido para integrar dois ou mais resultados sobre uma mesma questão de pesquisa é a metanálise. Nesse contexto, pretende-se demostrar se o ELFA possui equivalência de resultados através de análise de correlação, regressão e concordância estatísticas para a mensuração de T4 comparáveis ao RIE, uma vez que o ELFA já atende as tendências ecológicas desejáveis na atualidade. Assim, Analisou-se estatisticamente as dosagens de T4 produzidas por ambas as técnicas, bem como a precisão do ELFA. Foram encontradas uma correlação r = 0.88, divergência entre as médias de 10.43% e correspondência de 92.5% entre os valores dentro do intervalo de referência. O ELFA apresentou coeficientes de variação intra e interensaios de 4.94 e 7.73%, respectivamente e altas taxas de recuperação em diluições. A técnica imuno fluorescente mostrou-se aplicável para estudos de grupos de equinos e para trigem de animais com valores de T4 dentro do intervalo normal quando comparado ao RIE.
In veterinary laboratory medicine, hormone dosing still uses radioimmunoassay (RIA) techniques and although this technique maintains qualities in accuracy in its results, it requires a complex series of operational issues to be observed for its execution besides having environmental risks. Thus, comparative studies between hormonal determination techniques have considerable value in indicating substitutes for the RIE. The enzime-linked fluorescent assay (ELFA) has been pointed out as a candidate technique for substitution, since it overcomes the disadvantages of RIE, however, there are few studies of ELFA in veterinary medicine. Thus, it was decided to use an animal model, specifically the equines, for comparative analyzes among the techniques, with tetraiodothyronine (T4) being the proposed hormone. Thyroid evaluation is relevant may allow for a diagnosis of primary thyroidal aterations and monitoring of thyroid function. The statistical study developed to integrate two or more results on the same research question is the meta-analysis. In this context, we intend to demonstrate if the ELFA has equivalence of results through correlation analysis, regression and statistical concordance for the measurement of T4 comparable to RIA, once the ELFA already meets the current desirable ecological trends. Thus, the T4 dosages produced by both techniques, as well as the accuracy of ELFA, were statistically analyzed. We found a correlation r = 0.88, divergence between the means of 10.43% and correspondence of 92.5% among the values within the reference range. ELFA presented intra and interassay coefficients of variation of 4.94 and 7.73%, respectively, and high recovery rates at dilutions. The immuno-fluorescent technique has been shown to be applicable for studies of equine and trigeminal groups of animals with T4 values within the normal range when compared to RIA.
Resumo
Leucaena leucocephala (leucena) é uma leguminosa de alta qualidade e importância forrageira para a produção animal nos trópicos, apesar da presença do princípio tóxico mimosina nas folhas. Este aminoácido não-protéico tóxico tem o potencial de causar alopecia, emagrecimento, infertilidade, hiperplasia tireoidiana, hipotireoidismo e morte. Sua ação tóxica é descrita desde a década de 50, principalmente em ruminantes, e em 1980, a bactéria ruminal Synergistes jonesii foi descoberta e posteriormente distribuída em alguns países como um inóculo oral para superar esses efeitos tóxicos. No entanto, nos últimos tempos, uma série de fatores, incluindo: inquéritos sobre o estado da toxicidade em todo o mundo; melhor compreensão da química; modo de ação das toxinas; taxonomia e ecologia do filo de Synergistes; melhores métodos de inoculação e melhores soluções de manejo, além de atividades de extensão de conscientização têm elucidado dúvidas sobre ocorrência e importância da toxicidade em muitos países do mundo. Pesquisas em andamento são vitais para o sucesso futuro dos sistemas de alimentação de leucena. Este trabalho investigou as principais alterações clínicas e dermatopatológicas de equinos intoxicados natural e experimentalmente por Leucaena leucocephala. Os surtos ocorreram nos estados de SP e GO, onde seis cavalos após a ingestão de casca e/ ou folhas da planta apresentaram alopecia, principalmente na crina e cauda. Nesses animais o diagnóstico foi baseado na observação da ingestão da planta e dos sinais clínicos. Oito animais foram intoxicados experimentalmente, e neles foram realizados exames clínico, biópsias da pele das regiões de crina, dorso e cauda e feita a dosagem sérica de tri-iodotironina (T3) e tiroxina (T4). Alopecia da crina e cauda foi o principal sinal clínico observado, acompanhado de anorexia, emagrecimento e apatia em todos os animais. Os níveis de T3 e T4 total apresentaram queda significativa (p 0,05) na terceira semana de ingestão da leucena quando comparado aos níveis basais. As alterações histológicas observadas nas biópsias de pele demonstram acentuada telogenização dos folículos pilosos ao final dos experimentos. Os achados clínico-patológicos em equinos intoxicados são semelhantes aos observados em ruminantes. A intoxicação experimental de equinos pela planta evidenciou o acentuado declínio dos níveis dos hormônios tireoideanos, sugerindo efeito bociogênico da mimosina e seus compostos derivados, com hipotireoidismo transitório e alopecia devido à acentuada redução da atividade folicular.
Leucaena leucocephala (leucaena) is a high quality legumes and forage value for livestock production in the tropics, despite the presence of mimosine the leaves. This non-toxic amino acid protein has the potential to cause alopecia, weight loss, infertility, thyroid hyperplasia, hypothyroidism and death. Its toxic action is described since the 50s, especially in ruminants, and in 80s, ruminal bacteria Synergistes jonesii was discovered and subsequently distributed in some countries as an oral inoculum to overcome these toxic effects. However, in recent times, a number of factors, including: survey of the state of toxicity throughout the world; better understanding of chemistry; mode of action of toxins; taxonomy and ecology of synergistetes phylum; best inoculation methods and best management solutions, and awareness outreach activities have clarified doubts about the occurrence and importance of toxicity in many countries. Ongoing research is vital to the future success of leucaena supply systems. This paper investigated the main clinical changes of horses natural and experimentally intoxicated by Leucaena leucocephala. Outbreaks occurred in the SP and GO States, where six horses after eating bark and/ or leaves of the plant presented alopecia mainly in mane and tail. In these animals, the diagnosis was based on the observation of plant intake and clinical signs. Eight animals were experimentally intoxicated, clinical examination was performed and skin biopsies taken from mane, back and tail regions and triiodothyronine (T3) and thyroxine (T4) serum levels assayed. Alopecia in the mane and tail was the main clinical signs observed, accompanied by anorexia, weight loss and lethargy in all animals. T3 and total T4 showed significant decrease in the serum levels (p 0.05) in the third week of intake of leucaena compared to baseline levels. Marked telogenization of hair follicles at the end of the experiments were observed in skin biopsies. The clinical and pathological findings in intoxicated horses are similar to those observed in ruminant animals. Experimental poisoning of horses by the plant highlights the marked decline in levels of thyroid hormones, suggesting goitrogenic effect of mimosine and its derived compounds, with transient hypothyroidism and alopecia due to accentuated reduction in follicular activity.
Resumo
Historicamente, acreditava-se que a ceratoconjuntivite infecciosa bovina (CIB) estáva sob competência exclusiva de Moraxella bovis. Contudo, outras espécies do Gênero Moraxella também vêm sendo estudadas quanto à participação na patogenia da CIB, como Moraxella ovis e principalmente Moraxella bovoculi. Esta tese descreve análises filogenéticas e de dados genotípicos com base nos genes codificadores dos pili tipo IV dos tipos Q e I (TfpQ/I) de M. bovis e da citotoxina de M. bovis (MbxA), M. bovoculi (MbvA) e M. ovis (MovA). A diferenciação entre M. bovis, M. bovoculi e M. ovis foi previamente realizada por PCR (região intergenica 16S-23S) conforme protocolo estabelecido na literatura. Após, é descrita uma análise molecular com base na região 3' dos genes tfpQ/I (compreendendo subdomínio 1-C N-terminal e o domínio C-terminal) de 16 isolados de campo e cinco cepas vacinais de M. bovis, provenientes da América do Sul. Todas as 47 sequencias do gene tfp tipo Q e tipo I analisadas resultaram em 31 alelos designados de 1 até 31. A reconstrução filogenética resultou em uma distinção dos 31 alelos em onze grupos (designados de A até J e Epp). A análise da sequencia de aminoácidos (aa) deduzidos da região C-terminal mostrou níveis de similaridade entre 67 e 100% dentro dos grupos, enquanto a análise da região D (subunidade C-terminal) resultou níveis de similaridade entre 60 e 100%. Além disso, um estudo filogenético com base na região 3' dos genes da citotoxina foi realizado para investigar a relação genética entre os isolados de M. bovis (n = 17), M. bovoculi (n = 11) e M. ovis (n = 7) e cepas de referência. A reconstrução filogenética permitiu a diferenciação entre as espécies, sendo que os isolados mais antigos de M. bovoculi permaneceram em ramo mais próximos aos isolados de M. bovis. O nível de similaridade de aminoácidos entre as sequencias de MbxA ficou em 99.9% de média, enquanto entre as sequencias de MbvA e MovA foi respectivamente de 98.8% e 99.3%. A similaridade entre MbvA e MovA foi de 96.6%, enquanto MbxA em relação a MbvA e MovA foi de 77.6%. Assim, é possível concluir que o gene tfp pode ser adequado para inferir distinção entre os isolados de M. bovis originários da América do Sul, enquanto o gene codificador da citotoxina é adequado para classificação filogenéticas dos isolados de M. bovis, M. bovoculi e M. ovis, e, talvez para a compreensão das relações evolutivas entre e dentro de cada espécie.
Historically, infectious bovine keratoconjunctivitis (IBK) was believed to be under the exclusive competence of Moraxella bovis. However, the roles of other species of Genus Moraxella are also being considered in the pathogenesis of IBK, such as Moraxella ovis and particularly Moraxella bovoculi. This thesis describes phylogenetic and genotypic analysis based on the genes encoding type IV pili Q- and I-type (TfpQ/I) of M. bovis and cytotoxin of M. bovis (MbxA), M. bovoculi (MbvA) and M. ovis (MovA). The distinction between M. bovis, M. bovoculi and M. ovis was previously performed by PCR (16S-23S intergenic region) according to the protocol established in the literature. Then, there is described a molecular analysis based on the 3' region of genes tfpQ/I (including 1-C N-terminal subdomain and C-terminal domain) of 16 field strains and five vaccine strains of M. bovis from South America. All 47 sequences of tfp Q- and I-type genes analyzed resulted in 31 alleles designated 1 to 31. The phylogenetic reconstruction resulted in a distinction of 31 alleles in eleven groups (designated A through J and Epp). The analysis of the deduced amino acid sequence (aa) of the C-terminal region showed similarity levels between 67 and 100% within the groups, while the analysis of the D region (C-terminal subunit) resulted in levels of similarity between 60 and 100%. In addition, a phylogenetic analysis based on the 3' region of the cytotoxin gene was performed to investigate the genetic relationship among M. bovis (n = 17), M. bovoculi (n = 11) and M. ovis (n = 7) strains and reference strains. Phylogenetic reconstruction allowed the differentiation among species, and the older M. bovoculi strains remained in branch closer to M. bovis strains. The amino acid similarity level among the MbxA sequences stood at an average of 99.9%, while among the MbvA and MovA sequences the similarity was respectively 98.8% and 99.3%. The similarity between MbvA and MovA was 96.6%, while MbxA for MbvA and MovA was 77.6%. Thus, it is possible to conclude that the tfp gene may be inferred suitable for differentiate among M. bovis strains, while the cytotoxin-encoding gene is suitable for phylogenetic classification of M. bovis, M. bovoculi and M. ovis strains and perhaps for understanding the evolutionary relationships among three species
Resumo
O hipotireoidismo é uma doença endócrina muito comum em cães, entretanto o diagnóstico dessa enfermidade é difícil devido a falta de testes diagnósticos de alta sensibilidade e especificidade. Esse trabalho teve como objetivo comparar os níveis de T4 total por radioimunoensaio e T4 livre pela técnica de diálise de equilíbrio em cães sadios no Estado do Rio de Janeiro. Foram coletadas amostras de sangue de 131 cães clinicamente sadios, de raças variadas e faixa etária de 2 a 6 anos, para análises laboratoriais de rotina, que incluíam hemograma, uréia, creatinina, alanina aminotransferase, fosfatase alcalina, colesterol e triglicerídeos. As dosagens hormonais foram realizadas nos 75 cães (52 fêmeas e 23 machos) que apresentaram resultados hematológicos e bioquímicos sem alterações. O T4 total apresentou especificidade de 66,66%, média de 18,02ng/mL e valor de normalidade entre 0,1 e 38,08ng/mL. Em contrapartida, o T4 livre por diálise revelou especificidade de 78,66%, média de 1,32ng/dL e valor de normalidade entre 0,22 e 2,83ng/dL. Ao se comparar os níveis de T4 entre machos e fêmeas, observou-se que fêmeas em média apresentam T4 livre maior do que machos. Os resultados obtidos no presente trabalho revelaram ainda que T4 livre por diálise se mostrou mais específico que o T4 total e que a associação do T4 total e T4 livre por diálise diminui a ocorrência de resultados falso-positivos. É importante ressaltar que os valores de normalidade e especificidade estabelecidos neste trabalho foram muito abaixo daqueles sugeridos por diversos autores e usados na nossa rotina clínica, insinuando que diversos fatores podem ter influenciado nas concentrações hormonais tireoidianas desses animais. Palavras-chaves: T4 total; radioimunoensaio; T4 livre; diálise de equilíbrio; cães sadios