Technique proposition and material comparison for surgery rope making / Proposição de técnica e comparação de materiais para confecção de corda cirúrgica

The most tension resistant, nonmetallic, surgical suture is 5 polyester. Comparing its resistance to those of the dogs cranial cruciate ligament and the canine gastrocnemius tendons up until they rupture, its possible to detect a considerably inferior resistance on the implants part. With the goal of achieving high mechanical resistances from sutures, these were grouped and twisted, resulting in a surgical rope that is adjustable to the patients needs. We analyzed manufacturing methodology, final conformation and tension resistance, based on three sutures models: A (1 polyglactin 910), B (1 polyester) and C (5 polyester). Considering averages of thickness and final load, the B implants obtained lower values than A, indicating that polyglactin 910 ropes are more resistant than those of polyester. Moreover, the C implants resulted in the highest values of load and thickness, indicating that final thickness is predictive towards tension resistance. Size 1 Polyester was the only one to generate linear regression for supported load, ensuring the 25,34 Newtons (N) increment to every suture added to the implant, which suggests its use for the creation of non absorbable ropes. The use of 1 polyglatctin 910 promotes load averages superior to 1 polyester;therefore, it is indicated for making absorbable surgical ropes.(AU)

O fio cirúrgico não metálico com maior resistência à tração é o poliéster nº 5. Comparando a sua resistência com a do ligamento cruzado cranial de cães e do tendão gastrocnêmico canino até suas rupturas, é possível perceber uma resistência consideravelmente inferior da parte do implante. Com objetivo de alcançar grandes resistências mecânicas a partir de fios de sutura, estes foram agrupados e torcidos, resultando em uma corda cirúrgica ajustável de acordo com a necessidade do paciente. Foram analisadas a metodologia de confecção, a conformação final e a resistência à tração, baseados em três modelos de fios: A (poliglactina 910 nº 1), B (poliéster nº 1) e C (poliéster nº 5). Considerando as médias de espessura e carga final, os implantes B obtiveram menores valores do que A, indicando que cordas de poliglactina 910 são mais resistentes que as de poliéster. Ademais, os implantes C resultaram nos maiores valores de carga e espessura, indicando que a espessura final é preditiva para resistência à tração. O poliéster nº 1 foi o único a gerar regressão linear para carga suportada, garantindo o incremento de 25,34 Newtons (N) a cada fio acrescido ao implante, o que sugere seu uso para criação de cordas não absorvíveis. A utilização da poliglactina 910 nº 1 promove médias de carga superiores ao poliéster nº 1, portanto, é indicada para confecção de cordas cirúrgicas absorvíveis.(AU)

Efeito de diferentes sistemas de maturação e cultivo sobre a produção in vitro de embriões bovinos / Effect of different maturation and growth systems on in vitro production of bovine embryos

O objetivo desse estudo foi comparar dois diferentes sistemas de incubação (incubadora convencional – CONV e minibancada – MINI) sobre a produção in vitro de embriões (PIVE) de bovinos. Para tanto, complexos cumulusoócito (CCOs) foram submetidos a maturação in vitro e posterior fecundação e cultivo in vitro em ambos os sistemas. As estruturas foram avaliadas pós-maturação e pós-cultivo, para avaliação de maturação nuclear e quantidade de células/blastocisto, respectivamente. Não foram observadas diferenças estatísticas (p>0,05) nos diferentes parâmetros estudados. Concluímos que ambos os sistemas testados demonstraram ser eficientes para PIVE de bovinos.

The objective of this study was to compare two different incubation systems (conventional incubator - CONV and minibank - MINI) on the in vitro production of bovine embryos (PIVE). For this purpose, cumulus cytotoxic complexes (CCOs) were submitted to in vitro maturation and subsequent fertilization and in vitro culture in both systems. The structures were evaluated post-maturation and post-culture, for evaluation of nuclear maturation and amount of cells / blastocyst, respectively. No statistical differences (p>0.05) were observed in the different parameters studied. We conclude that both tested systems proved to be efficient for bovine PIVE.

Efeito de diferentes sistemas de maturação e cultivo sobre a produção in vitro de embriões bovinos / Effect of different maturation and growth systems on in vitro production of bovine embryos

O objetivo desse estudo foi comparar dois diferentes sistemas de incubação (incubadora convencional CONV e minibancada MINI) sobre a produção in vitro de embriões (PIVE) de bovinos. Para tanto, complexos cumulusoócito (CCOs) foram submetidos a maturação in vitro e posterior fecundação e cultivo in vitro em ambos os sistemas. As estruturas foram avaliadas pós-maturação e pós-cultivo, para avaliação de maturação nuclear e quantidade de células/blastocisto, respectivamente. Não foram observadas diferenças estatísticas (p>0,05) nos diferentes parâmetros estudados. Concluímos que ambos os sistemas testados demonstraram ser eficientes para PIVE de bovinos.(AU)

The objective of this study was to compare two different incubation systems (conventional incubator - CONV and minibank - MINI) on the in vitro production of bovine embryos (PIVE). For this purpose, cumulus cytotoxic complexes (CCOs) were submitted to in vitro maturation and subsequent fertilization and in vitro culture in both systems. The structures were evaluated post-maturation and post-culture, for evaluation of nuclear maturation and amount of cells / blastocyst, respectively. No statistical differences (p>0.05) were observed in the different parameters studied. We conclude that both tested systems proved to be efficient for bovine PIVE.(AU)

First report of the production of a potent biosurfactant with ,-trehalose by Fusarium fujikuroi under optimized conditions of submerged fermentation

Abstract Biosurfactants have many advantages over synthetic surfactants but have higher production costs. Identifying microorganisms with high production capacities for these molecules and optimizing their growth conditions can reduce cost. The present work aimed to isolate and identify a fungus with high biosurfactant production capacity, optimize its growth conditions in a low cost culture medium, and characterize the chemical structure of the biosurfactant molecule. The fungal strain UFSM-BAS-01 was isolated from soil contaminated with hydrocarbons and identified as Fusarium fujikuroi. To optimize biosurfactant production, a PlackettBurman design and a central composite rotational design were used. The variables evaluated were pH, incubation period, temperature, agitation and amount of inoculum in a liquid medium containing glucose. The partial structure of the biosurfactant molecule was identified by nuclear magnetic resonance spectrometry. F. fujikuroi reduced surface tension from 72 to 20 mN m1 under the optimized conditions of pH 5.0, 37 °C and 7 days of incubation with 190 rpm agitation. The partial identification of the structure of the biosurfactant demonstrated the presence of an ,-trehalose. The present study is the first report of the biosynthesis of this compound by F. fujikuroi, suggesting that the biosurfactant produced belongs to the class of trehalolipids.

First report of the production of a potent biosurfactant with alfa, beta-trehalose by Fusarium fujikuroi under optimized conditions of submerged fermentation

Biosurfactants have many advantages over synthetic surfactants but have higher production costs. Identifying microorganisms with high production capacities for these molecules and optimizing their growth conditions can reduce cost. The present work aimed to isolate and identify a fungus with high biosurfactant production capacity, optimize its growth conditions in a low cost culture medium, and characterize the chemical structure of the biosurfactant molecule. The fungal strain UFSM-BAS-01 was isolated from soil contaminated with hydrocarbons and identified as Fusarium fujikuroi. To optimize biosurfactant production, a Plackett–Burman design and a central composite rotational design were used. The variables evaluated were pH, incubation period, temperature, agitation and amount of inoculum in a liquid medium containing glucose. The partial structure of the biosurfactant molecule was identified by nuclear magnetic resonance spectrometry. F. fujikuroi reduced surface tension from 72 to 20 mN m−1 under the optimized conditions of pH 5.0, 37 °C and 7 days of incubation with 190 rpm agitation. The partial identification of the structure of the biosurfactant demonstrated the presence of an α,β-trehalose. The present study is the first report of the biosynthesis of this compound by F. fujikuroi, suggesting that the biosurfactant produced belongs to the class of trehalolipids.(AU)

Lumber efficiency of Eucalyptus species / Rendimento de madeira serrada de espécies de Eucalyptus

The yield of lumber is one of the main parameters of evaluation of log sawing. Using this information, you can judge the quality of the conversion of logs into sawed parts. This variable indicates the percentage of the original volume of the log that has been transformed into lumber. Therefore, this study aimed to expand knowledge of the mechanical processing of Eucalyptus wood. For this, we employed 72 logs of three species: Eucalyptus dunnii, Eucalyptus grandis and Eucalyptus saligna. We compared the income of lumber of the three species, as well as three diameter classes per species. Additionally we evaluated some characteristics of the shape of the stem and phenomena that occurred during the sawing. The results showed that the larger diameter logs from E. saligna and E.grandis obtained the best performances in income, then the logs of the two intermediate species. The logs from E. dunnii had the worst performance among the three diameter classes, due to the shape of the logs and the manifestation of growth stresses during sawing.

O rendimento é uma informação relevante, pois indica a porcentagem do volume original da tora que foi efetivamente transformada em madeira serrada e, portanto, reflete a qualidade da operação de conversão de toras. O presente estudo teve por objetivo ampliar os conhecimentos sobre o processamento mecânico da madeira do gênero Eucalyptus. Foi conduzido o desdobro de 72 toras de três espécies: Eucalyptus dunnii, Eucalyptus grandis e Eucalyptus saligna, as quais foram comparadas quanto ao rendimento do processo em função da espécie e em função da separação das toras em três classes de diâmetro. Adicionalmente avaliaram-se algumas características relacionadas à qualidade do fuste e aquelas atribuídas a manifestação das tensões de crescimento para verificar sua influência sobre o rendimento. Os resultados apontaram que as toras de maior diâmetro das espécies E. saligna e E. grandis foram as que forneceram os maiores rendimentos, seguidas das toras de classe de diâmetro intermediário. Já as toras de E. dunnii apresentaram os piores desempenhos para as três classes diamétricas avaliadas, o que pode ser atribuído a forma das toras e também por conta da manifestação de tensões de crescimento durante o processo de desdobro.

Lumber efficiency of Eucalyptus species / Rendimento de madeira serrada de espécies de Eucalyptus

The yield of lumber is one of the main parameters of evaluation of log sawing. Using this information, you can judge the quality of the conversion of logs into sawed parts. This variable indicates the percentage of the original volume of the log that has been transformed into lumber. Therefore, this study aimed to expand knowledge of the mechanical processing of Eucalyptus wood. For this, we employed 72 logs of three species: Eucalyptus dunnii, Eucalyptus grandis and Eucalyptus saligna. We compared the income of lumber of the three species, as well as three diameter classes per species. Additionally we evaluated some characteristics of the shape of the stem and phenomena that occurred during the sawing. The results showed that the larger diameter logs from E. saligna and E.grandis obtained the best performances in income, then the logs of the two intermediate species. The logs from E. dunnii had the worst performance among the three diameter classes, due to the shape of the logs and the manifestation of growth stresses during sawing.(AU)

O rendimento é uma informação relevante, pois indica a porcentagem do volume original da tora que foi efetivamente transformada em madeira serrada e, portanto, reflete a qualidade da operação de conversão de toras. O presente estudo teve por objetivo ampliar os conhecimentos sobre o processamento mecânico da madeira do gênero Eucalyptus. Foi conduzido o desdobro de 72 toras de três espécies: Eucalyptus dunnii, Eucalyptus grandis e Eucalyptus saligna, as quais foram comparadas quanto ao rendimento do processo em função da espécie e em função da separação das toras em três classes de diâmetro. Adicionalmente avaliaram-se algumas características relacionadas à qualidade do fuste e aquelas atribuídas a manifestação das tensões de crescimento para verificar sua influência sobre o rendimento. Os resultados apontaram que as toras de maior diâmetro das espécies E. saligna e E. grandis foram as que forneceram os maiores rendimentos, seguidas das toras de classe de diâmetro intermediário. Já as toras de E. dunnii apresentaram os piores desempenhos para as três classes diamétricas avaliadas, o que pode ser atribuído a forma das toras e também por conta da manifestação de tensões de crescimento durante o processo de desdobro.(AU)

AVALIAÇÃO DA PRODUÇÃO, QUALIDADE E CRIOTOLERÂNCIA DE EMBRIÕES CULTIVADAS EM SOFaaci TRADICIONAL E SEQUENCIAL EM TRÊS ATMOSFERAS DE OXIGÊNIO

O presente estudo avalia a produção, qualidade, criotolerância e estresse oxidativo de embriões bovinos desenvolvidos em dois meios de cultivo, SOFaaci tradicional e SOFaaci sequencial, em diferentes atmosferas de cultivo. Um total de 11640 cumulus oócitos foram maturados em meio de maturação (TCM 199) por 24h. Após os oócitos foram co-incubados com sêmen em meio Talp-FIV por aproximadamente 20h. Logo, os presumíveis zigotos foram cultivados em meio SOFaaci tradicional ou SOFaaci sequencial. Seis grupos experimentais foram formados, MT20= meio tradicional a 20% de O2; MT12= meio tradicional a 12% de O2; MT5= meio tradicional a 5% de O2; MS20= meio sequencial a 20% de O2; MS12 = meio sequencial em 12% de O2 e MS5= meio sequencial em 5% de O2. O cultivo dos embriões com o meio sequencial foi iniciado com SOFaaci A, às 96 e 120hpf era feito a substituição de 75% do volume das gotas de CIV com o meio SOFaaci B. Nos grupos em que foi feito o CIV com meio SOFaaci tradicional, a renovação era realizada da mesma maneira, porém com o próprio SOFaaci tradicional. Ao se completarem sete dias de CIV os embriões foram vitrificados em hastes de vitrificação. Os resultados foram analisados com ANOVA e posterior Teste de Tukey e Teste de X2 com nível de significância à 5%. Na produção embrionária, os grupos em que foi utilizado o meio SOFaaci tradicional foram superiores ao meio SOFaaci sequencial (P=0.028) e a redução na atmosfera de O2 também teve efeito benéfico na taxa de embriões produzidos MT20= 45,3%; MT12= 49,7%; MT5= 53,9%; MS20= 40,2%; MS12= 41,6%; MS5= 45,0%, o número de células totais foi maior nos grupos cultivados em meio tradicional e atmosfera controlada (P<0.05) (MT20=114; MT12= 128; MT5=131; MS20=98; MS12=110; MS5= 112;), tendo, também um maior estresse oxidativo em embriões produzidos em atmosfera controlada (P<0.01) (MT20=4,10; MT12=5,30; MT5=7,46; MS20=4,23; MS12=8,27; MS5=5,93). Os embriões vitrificados e reaquecidos que foram cultivados em SOFaaci tradicional não diferiram entre si na taxa de recuperação nas três atmosferas utilizadas MT20= 60,2%; MT12= 66,6%; MT5= 60,6%. Por outro lado, os embriões cultivados em SOFaaci sequencial apresentaram maior taxa de recuperação na atmosfera de 5% de O2 (P<0,05) MS20= 42,3%, MS12= 53,0%; MS5= 80,1%. Entretanto, a taxa de eclosão dos embriões vitrificados e reaquecidos cultivados em meio SOFaaci tradicional nas atmosferas de 20% e 12% de O2 apresentaram as maiores taxas de eclosão (P<0,05) MT20= 70,7%; MT12= 81,2% e semelhante aos embriões cultivados em SOFaaci sequencial na atmosfera de 12% de O2 MT12= 70,9%. O estresse oxidativo de embriões vitrificados, não diferiu entre os grupos. Concluímos que embriões cultivados em SOFaaci tradicional em atmosferas controladas, apresentam maior produção, número de células e concentrações de espécies reativas de oxigênio. A recuperação após o reaquecimento foi melhor no SOFaaci sequencial na atmosfera de 5% de O2, mas as maiores taxas de eclosão foram obtidas em SOFaaci tradicional e sequencial na atmosfera de 12% de O2.

This study evaluates bovine embryos production, quality, cryotolerance and oxidative stress when developed in two culture medias, traditional SOFaaci and sequential SOFaaci in different culture atmospheres. A total of 11.640 cumulus oocytes were matured in maturation medium (TCM 199) for 24h. Afterwards, the oocytes were co-incubated with semen in Talp-FIV medium for approximately 20h. Therefore, presumptive zygotes were cultured in traditional SOFaa or sequential SOFaaci medium. Six experimental groups were formed, TM20= traditional medium at 20% O2; TM12= traditional medium at 12% O2; TM5= traditional medium at 5% O2; SM20= Sequential medium at 20% O2; SM12 = sequential medium in 12% O2 and SM5= sequential medium in 5% O2. The cultivation of embryos with the sequential medium was started with SOFaaci A, at 96 and 120hpf, 75% of the volume of the CIV drops was replaced with SOFaaci B medium. In groups where the CIV was carried out with traditional SOFaa, the renovation was carried out in the same way, but with the traditional SOFaa itself. At the end of seven days of CIV, the embryos were vitrified in vitrification rods. The results were analyzed with ANOVA and subsequent Tukey Test, and X2 Test with a 5% significance level. In embryo production, the groups in which the traditional medium was used were superior to the sequential medium (P=0.028) and the reduction in the O2 atmosphere also had a beneficial effect on the rate of embryos produced (TM20=45%; TM12=49%; TM5=53%; SM20= 40%; SM12=41%; SM5: 45%), the number of total cells was higher in the groups cultivated in traditional medium and controlled atmosphere (P=0.5) (TM20=114; TM12= 128; TM5=131; SM20= 98; SM12= 110; SM5= 112;), also having a higher oxidative stress in sequential medium and atmosphere embryos controlled (P=0.001) (TM20=4,10; TM12=5.30; TM5=7.46; SM20=4.23; SM12=8.27; SM5=5.93). The vitrified and reheated embryos that were cultivated in traditional SOFaaci did not differ from each other in the recovery rate in the three atmospheres used TM20 = 60.2%; TM12 = 66.6%; TM5 = 60.6%. On the other hand, embryos cultured in sequential SOFaaci higher rate of recovery in atmosphere 5% O2 (P < 0.05) SM20 = 42.3%, SM12 = 53.0%; SM5 = 80.1%. However, the hatch rate of vitrified and rewarmed embryos cultured in traditional SOFaaci medium in 20% and 12% O2 atmospheres outside the highest hatch rates (P <0.05) TM20 = 70.7%; TM12 = 81.2% and similar to embryos cultured in sequential SOFaaci in the atmosphere of 12% O2 SM12 = 70.9%. Oxidative stress of vitrified embryos did not differ between groups. We concluded that embryos cultivated in traditional SOFaaci in controlled atmospheres present greater production, number of cells and groups of reactive oxygen species. Recovery after reheat was better in sequential SOFaaci in 5% O2 atmosphere, but higher hatch rates were upgraded in traditional and sequential SOFaaci in 12% O2 atmosphere.

Oxygen tension and oocyte density during in vitro maturation affect the in vitro fertilization of bovine oocytes / A tensão de oxigênio e a densidade de oócitos durante a maturação in vitro afeta a fecundação in vitro de oócitos bovinos

Oocyte maturation is the key factor affecting the fertilization and embryonic development. Factors such as oocyte density and oxygen tension can directly influence the IMV. Thus, the objective of this study was to evaluate the effect of the association of oxygen tensions (5% or 20%) with different oocyte densities (1:10μl or 1:20μl) in the in vitro maturation (IVM) of bovine oocytes on maturation and fertilization rates, ROS production and antioxidant activity. Three experiments were performed with bovine oocytes that were obtained from slaughterhouse ovaries. After selection, the oocytes were randomly distributed in four treatments: 1:10/5%; 1:10/20%; 1:20/5%and 1:20/20% for each experiment. In experiment I, nuclear maturation status and cytoplasmic maturation were evaluated through detection of the first polar body by immunofluorescence and the mitochondrial reorganization assay. In experiment II, ROS production and antioxidant activity were analyzed in oocytes and IVM medium after 24 h of maturation through detection of ROS, reduced glutathione (GSH) and Superoxide dismutase activity by spectrofluorimetric methods. In experiment III, fertilization was evaluated through pronucleus formation, sperm penetration with or without decondensation and polyspermy rates by immunofluorescence. In experiment I, the nuclear maturation and cytoplasmic maturation were similar among treatments (P>0.05). In experiment II, reactive oxygen species in oocytes were elevated in treatments with low oxygen tension which was independent of oocyte density (P<0.05). Additionally, ROS levels in IVM medium were higher in treatments with high oocyte density by volume of medium, which was independent of oxygen tension (P<0.05). In Experiment III, the fertilization and penetration rates were higher in the treatment with 20% oxygen tension and high oocyte density (P<0.05). (AU)

A maturação dos oócitos é o fator chave que afeta a fecundação e o desenvolvimento embrionário. Fatores como a densidade de oócitos e a tensão de oxigênio podem influenciar diretamente a maturação in vitro (MIV) de oócitos bovinos. O objetivo do presente estudo foi avaliar o efeito da associação da tensão de oxigênio (5% ou 20%) com diferentes densidades de oócitos (1:10μl ou 1:20μl) MIV de oócitos bovinos, na taxa de maturação, fecundação, produção de espécies reativas ao oxigênio (ROS) e defesas antioxidantes. Três experimentos foram conduzidos com oócitos obtidos de ovários de abatedouro. Após a seleção, os oócitos foram distribuídos homogeneamente em quatro tratamentos: 1:10/5%; 1:10/20%; 1:20/5% e 1:20/20%. No experimento I, o status da maturação nuclear e citoplasmática foram avaliados pela detecção do primeiro corpúsculo polar por epifluorescência e avaliação da reorganização das mitocôndrias. No experimento II, a produção de EROs e atividade antioxidante foram analisadas nos oócitos e no meio de MIV após 24h de maturação pela detecção de ROS, redução da glutationa (GSH) e atividade da Superoxido Dismutase por métodos de espectrofluorometria. No experimento III, foram avaliadas as taxas de fecundação pela formação dos pro-núcleos, penetração com ou sem descondensação espermática e poliespermia por epifluorescência. No experimento I, a maturação nuclear e citoplasmática foi similar entre os tratamentos (P>0,05). No experimento II, os níveis de ROS nos oócitos foram elevados nos tratamentos com baixa tensão de oxigênio (5%) independente da densidade de oócitos (P<0,05). Adicionalmente os níveis de ROS no meio de MIV foram maiores nos tratamentos com alta densidade de oócitos por volume de meio, independente da tensão de oxigênio (P<0,05). No experimento III, a taxa de fecundação e penetração espermática foi maior nos tratamentos com 20% de oxigênio e alta densidade de oócitos (P<0,05).(AU)

Oxygen tension and oocyte density during in vitro maturation affect the in vitro fertilization of bovine oocytes / A tensão de oxigênio e a densidade de oócitos durante a maturação in vitro afeta a fecundação in vitro de oócitos bovinos

Oocyte maturation is the key factor affecting the fertilization and embryonic development. Factors such as oocyte density and oxygen tension can directly influence the IMV. Thus, the objective of this study was to evaluate the effect of the association of oxygen tensions (5% or 20%) with different oocyte densities (1:10μl or 1:20μl) in the in vitro maturation (IVM) of bovine oocytes on maturation and fertilization rates, ROS production and antioxidant activity. Three experiments were performed with bovine oocytes that were obtained from slaughterhouse ovaries. After selection, the oocytes were randomly distributed in four treatments: 1:10/5%; 1:10/20%; 1:20/5%and 1:20/20% for each experiment. In experiment I, nuclear maturation status and cytoplasmic maturation were evaluated through detection of the first polar body by immunofluorescence and the mitochondrial reorganization assay. In experiment II, ROS production and antioxidant activity were analyzed in oocytes and IVM medium after 24 h of maturation through detection of ROS, reduced glutathione (GSH) and Superoxide dismutase activity by spectrofluorimetric methods. In experiment III, fertilization was evaluated through pronucleus formation, sperm penetration with or without decondensation and polyspermy rates by immunofluorescence. In experiment I, the nuclear maturation and cytoplasmic maturation were similar among treatments (P>0.05). In experiment II, reactive oxygen species in oocytes were elevated in treatments with low oxygen tension which was independent of oocyte density (P<0.05). Additionally, ROS levels in IVM medium were higher in treatments with high oocyte density by volume of medium, which was independent of oxygen tension (P<0.05). In Experiment III, the fertilization and penetration rates were higher in the treatment with 20% oxygen tension and high oocyte density (P<0.05).

A maturação dos oócitos é o fator chave que afeta a fecundação e o desenvolvimento embrionário. Fatores como a densidade de oócitos e a tensão de oxigênio podem influenciar diretamente a maturação in vitro (MIV) de oócitos bovinos. O objetivo do presente estudo foi avaliar o efeito da associação da tensão de oxigênio (5% ou 20%) com diferentes densidades de oócitos (1:10μl ou 1:20μl) MIV de oócitos bovinos, na taxa de maturação, fecundação, produção de espécies reativas ao oxigênio (ROS) e defesas antioxidantes. Três experimentos foram conduzidos com oócitos obtidos de ovários de abatedouro. Após a seleção, os oócitos foram distribuídos homogeneamente em quatro tratamentos: 1:10/5%; 1:10/20%; 1:20/5% e 1:20/20%. No experimento I, o status da maturação nuclear e citoplasmática foram avaliados pela detecção do primeiro corpúsculo polar por epifluorescência e avaliação da reorganização das mitocôndrias. No experimento II, a produção de EROs e atividade antioxidante foram analisadas nos oócitos e no meio de MIV após 24h de maturação pela detecção de ROS, redução da glutationa (GSH) e atividade da Superoxido Dismutase por métodos de espectrofluorometria. No experimento III, foram avaliadas as taxas de fecundação pela formação dos pro-núcleos, penetração com ou sem descondensação espermática e poliespermia por epifluorescência. No experimento I, a maturação nuclear e citoplasmática foi similar entre os tratamentos (P>0,05). No experimento II, os níveis de ROS nos oócitos foram elevados nos tratamentos com baixa tensão de oxigênio (5%) independente da densidade de oócitos (P<0,05). Adicionalmente os níveis de ROS no meio de MIV foram maiores nos tratamentos com alta densidade de oócitos por volume de meio, independente da tensão de oxigênio (P<0,05). No experimento III, a taxa de fecundação e penetração espermática foi maior nos tratamentos com 20% de oxigênio e alta densidade de oócitos (P<0,05).

Anel de tensão capsular isolado e associado à lente intraocular acrílica dobrável na opacidade de cápsula posterior após facoemulsificação em cães / Capsular tension ring alone and associated with acrylic foldable intraocular lens in posterior capsular opacification after phacoemulsification in dogs

O objetivo do estudo foi determinar se o anel de tensão capsular (ATC), isoladamente ou associado à implantação de uma lente intraocular, poderia diminuir a ocorrência de opacificação da cápsula posterior (OCP) após a cirurgia de catarata por facoemulsificação em cães. Para tanto, cães portadores de catarata imatura ou madura foram avaliados, perfazendo um total de vinte olhos. Em todos os animais, foram excluídas quaisquer doenças oftálmicas e sistêmicas concomitantes. Os olhos foram selecionados aleatoriamente para receber o anel (ATC) isolado ou em associação com a lente. Flaremetria a laser e avaliações clínicas foram realizadas aos 2, 7, 14, 21, e 28 dias de pós-operatório. Fotografias foram tomadas aos 28 e a seguir a cada 30 dias, até os 180 dias. Os resultados mostraram inflamação mais importante nos olhos com IOL, embora, entre os parâmetros avaliados, apenas nas sinéquias houve diferença estatisticamente significativa. No entanto, em ambas as técnicas, quase nenhuma OCP ocorreu até o momento final das avaliações. Tais resultados sugerem que os anéis de tensão capsular (ATC) podem ser úteis na prevenção da opacidade capsular pós-operatória, sem complicações decorrentes.(AU)

The purpose of the study was to determine whether capsular tension ring (CTR) alone or associated with the implantation of an intraocular lens (IOL) could decrease the occurrence of posterior capsular opacification (PCO) after phacoemulsification cataract surgery in dogs. Twenty eyes of client-owned dogs with immature or mature cataracts were included in this study. In all the animals, any ophthalmic or systemic concurrent disease was excluded. The eyes were randomly selected to receive CTR alone or in association with the IOL. Laser flaremetry and clinical evaluations were conducted on post-operative days 2, 7, 14, 21 and 28. Fundus photographs were taken at the 28th and then every 30 days, up to 180 days. The results showed more inflammatory response on eyes with IOLs, although among the parameters evaluated, solely the synechiae showed significant statistical differences. Nevertheless, in both techniques almost no PCOs occurred at the end of the evaluations. These results suggest that the CTRs can be useful in the prevention of the post-operative capsular opacities, with minor complications.(AU)

Use of Triticum aestivum in open wound healing: a clinical, pathological, and tensiometric assessment in the rabbit model / Uso de Triticum aestivum na cicatrização de feridas: um ensaio clínico, histopatológico e tensiométrico em coelhos

While Triticum sp. has been shown to act in wound healing, stimulating collagen synthesis by fibroblasts, the use of this plant extract has yet to be assessed in vivo, in commercially viable presentations. This study used rabbits and assessed, on days seven, 14, and 21, the presence or absence of granulation tissue and epithelialization, histopathological structures, and scar quality through the breaking and tension strength. Treatments, performed for 21 days, were aqueous extract of T. aestivum at a concentration of 2mg/mL (group I) and 10mg/mL (group II) and a nonionic cream (control group). We demonstrate that the formation of granulation tissue was not significantly different between treatments. In the analysis of epithelial tissue, wounds in group II differed from other treatments by day 7. On days 14 and 21 there was no significant clinical difference between groups. In the histopathological evaluation, scar quality and rupture strength did not differ between the groups in the studied period. In the tension strength evaluation, group I differed from the others, presenting a higher tension strength overall. The studied treatments did not differ regarding healing evolution of the skin wounds, but T. aestivum extract, at 2mg/mL, presents better results in the tension strength evaluation.(AU)

O extrato de trigo (Triticum sp.) vem sendo usado na cicatrização de feridas por estimular a síntese de fibroblastos, entretanto a sua aplicabilidade in vivo em apresentações comercialmente viáveis ainda tem de ser demonstrada. Neste estudo, avaliaram-se feridas cutâneas de coelhos tratadas com extrato aquoso de T. aestivum quanto à presença de tecido de granulação e epitelização, estruturas histológicas, qualidade cicatricial, além de ensaio tensiométrico. As feridas foram tratadas diariamente, por 21 dias, com diferentes concentrações do extrato (grupo I = 2mg/mL; grupo II = 10mg/mL) ou apenas o veículo (grupo controle = creme não iônico), e avaliadas nos dias sete, 14 e 21. A formação de tecido de granulação não diferiu entre os tratamentos. A epitelização aconteceu em menor tempo em feridas do grupo II, mas aos 14 dias já não havia diferença neste parâmetro. Na avaliação histopatológica, a qualidade cicatricial e a força de ruptura não diferiram no período estudado, entretanto a resistência tensiométrica das feridas do grupo I foi maior que a dos demais tratamentos. Dessa forma, conclui-se que, mesmo não havendo diferença na evolução cicatricial de feridas tratadas ou não com extrato aquoso de T. aestivum, o uso desse composto, a 2mg/mL, resultou em tecidos cicatriciais mais resistentes à tração.(AU)

Proposição de Técnica para Confecção de Corda Cirúrgica

O fio cirúrgico não metálico com maior resistência à tração é o poliéster nº 5. Ainda assim, sua carga representa 9,32% da resistência do ligamento cruzado cranial de cães e 5,86% do tendão gastrocnêmico canino até suas rupturas. Neste estudo, fios cirúrgicos foram agrupados e torcidos, resultando em uma corda com alta resistência mecânica. Foram analisadas a metodologia de confecção, a conformação final e a resistência à tração, baseados em três modelos de fios: A (poliglactina 910 nº 1), B (poliéster nº 1) e C (poliéster nº 5). Considerando as médias de espessura e carga final, os implantes B obtiveram menores valores do que A, indicando que cordas de poliglactina 910 são mais resistentes que as de poliéster. Ademais, os implantes C resultaram nos maiores valores de carga e espessura, indicando que a espessura final é preditiva para resistência à tração. O poliéster nº 1 foi o único a gerar regressão linear para carga suportada, garantindo o incremento de 25,34 N a cada fio acrescido ao implante, o que sugere seu uso para criação de cordas não absorvíveis. A utilização da poliglactina 910 nº 1 promove médias de carga superiores ao poliéster nº 1, portanto, é indicada para confecção de cordas cirúrgicas absorvíveis

The most tension resistant, non-metallic, surgical suture is 5 polyester. Still, its load represents 9,32% of canine cranial cruciate ligaments resistance and 5,86% of canine gastrocnemius tendons up until it ruptures. In this study, surgical sutures were grouped and twisted, resulting in a rope with high mechanical resistance. We analyzed manufacturing methodology, final conformation and tension resistance, based on three sutures models: A (1 polyglactin 910), B (1 polyester) and C (5 polyester). Considering averages of thickness and final load, the B implants obtained lower values than A, indicating that polyglactin 910 ropes are more resistant than those of polyester. Moreover, the C implants resulted in the highest values of load and thickness, indicating that final thickness is predictive towards tension resistance. Size 1 Polyester was the only one to generate linear regression for supported load, ensuring the 25,34 Newtons (N) increment to every suture added to the implant, wich suggests its use for the creation of non-absorbable ropes. The use of 1 polyglatctin 910 promotes load averages superior to 1 polyester, therefore, it is indicated for making absorbable surgical ropes.

INVESTIGAÇÃO DO EFEITO DA ATMOSFERA GASOSA NA MATURAÇÃO E FECUNDAÇÃO IN VITRO SOBRE O METABOLISMO CELULAR E EPIGENÉTICO DE EMBRIÕES BOVINOS

As tecnologias de reprodução assistida ou ARTs (Assisted Reproductive Technology) são amplamente utilizadas na reprodução humana e animal. Para estes procedimentos, gametas e embriões são expostos a um ambiente artificial que mimetiza o trato reprodutivo. Um dos fatores mais discrepantes neste contexto é a atmosfera gasosa, visto que in vivo a concentração de O2 encontrada no trato reprodutivo é menor do que a utilizada no ambiente in vitro, sendo comumente utilizada a concentração de 20% de oxigênio neste sistema artificial. Altas concentrações deste gás provocam estresse oxidativo e aumento das concentrações de espécies reativas de oxigênio (EROs) e, consequente maior proporção de células apoptóticas em oócitos e embriões. Entretanto, pouco se sabe sobre as consequências da mudança de atmosfera gasosa durante as fases iniciais da produção in vitro de embriões e as possíveis consequências no remodelamento epigenético. Para validar a hipótese de que diferentes concentrações de oxigênio durante a maturação e a fecundação in vitro modulam a transcrição de genes envolvidos no estresse oxidativo e modeladores epigenéticos em oócitos, células do cumulus e embriões bovinos. Além disso, o estresse oxidativo gerado nos embriões exerce efeito sobre os níveis globais de metilação do DNA e marcas de histonas, cinco experimentos foram realizados com objetivo de investigar o papel da atmosfera gasosa nos passos iniciais da produção in vitro de embriões bovinos. Para diferenciar os efeitos da tensão de oxigênio nas etapas iniciais da PIVE o desenvolvimento embrionário foi analisado, testando a tensão de oxigênio atmosférica (20% O2) e a baixa tensão de oxigênio (5% O2) na maturação e fecundação in vitro de embriões bovinos. Os grupos formados foram: baixa tensão de O2 na maturação e fecundação in vitro (M5F5), baixa tensão de O2 na maturação e alta tensão na fecundação in vitro (M5F20), alta tensão de O2 na maturação e fecundação in vitro (M20F20) e alta tensão de O2 na maturação e baixa tensão na fecundação in vitro (M20F5). No primeiro experimento, analisou-se o efeito da tensão de oxigênio na maturação in vitro por meio da análise da metáfase II, quantificação da concentração intracelular de EROs e glutationa reduzida (GSH), assim como expressão de mRNAs relacionados a vias de resposta ao estresse oxidativo e remodelamento epigenético em oócitos e células do cumulus. Os resultados iniciais indicaram que oócitos maturados em alta e baixa tensão de O2 não apresentam diferença na maturação nuclear. Oócitos maturados em alta tensão de O2 geram maior concentração de EROs e GSH comparado ao ambiente de baixa tensão de oxigênio. As células do cumulus de oócitos submetidos a alta tensão de oxigênio na maturação in vitro, apresentaram níveis de transcritos maiores para o gene SOD1 relacionado a via de resposta ao estresse oxidativo celular. No segundo experimento, analisou-se o efeito da tensão de oxigênio na fecundação in vitro por meio da análise da taxa de fecundação. A partir dos dados obtidos neste experimento, foi constatado que zigotos expostos a um ambiente de baixa tensão de O2 na FIV não resultam em maior taxa de polispermia. Todos os presumíveis zigotos foram cultivados em baixa tensão de oxigênio até atingirem o estágio de blastocisto. No terceiro experimento, avaliou-se o efeito da tensão de oxigênio na maturação e fecundação in vitro e sua influência no desenvolvimento embrionário. Na taxa de blastocisto, quando houve interação entre ambos os fatores (tensão de oxigênio na MIV e FIV) (one way ANOVA, p0.05), a produção de embriões demonstrou que o grupo M20F20 apresentou uma maior produção (50.63 ± 4.55) em relação aos grupos M20F5 (29.66 ± 2.81), M5F5 (32.00 ± 3.27) e M5F20 (31.88 ± 3.99). No entanto, na análise dos efeitos dos fatores (two way ANOVA, p0.05), a alta tensão de oxigênio mostrou um efeito benéfico na MIV e FIV através das taxas de desenvolvimento. Na análise de expressão gênica dos blastocistos não houve interação (p>0.05), de modo que os efeitos principais de MIV (p<0.05) diferiram. Alguns genes analisados apresentaram um aumento nos transcritos de embriões que foram maturados em baixa tensão de oxigênio e relacionados a via de resposta ao estresse oxidativo (NRF2, SOD1, SOD2) e remodelamento epigenético (KDM5A e TET1). No quarto experimento deste estudo, demonstrou-se o efeito da tensão de oxigênio a nível intracelular de GSH e EROs em blastocistos. Embriões coletados no dia 7 do desenvolvimento embrionário demonstraram que os níveis intracelulares de GSH foram maiores nos grupos M20F20 e M5F5, em relação aos grupos M20F5 e M5F20. As concentrações intracelulares de EROs foram menores nos grupos M20F20 e M5F5, não existindo diferença entre esses grupos. Já os grupos M20F5 e M5F20 tiveram maior acúmulo de EROs e diferiram entre si. No último experimento deste estudo (V), observou-se o efeito da tensão de oxigênio nos padrões globais de metilação do DNA e marcas de histonas específicas em blastocistos. Na análise dos níveis globais de metilação do DNA, foi encontrado maiores níveis de 5mC nos grupos M5F20 e M5F5, em relação aos grupos M20F5 e M20F20, todos os grupos diferiram entre si. Os níveis de 5hmC foram analisados e a média da intensidade de fluorescência foi superior em embriões do grupo M20F5 e M5F5 comparado aos grupos M5F20 e M20F20, existindo diferença entre os grupos. Na marcação das histonas ambas se comportaram de maneira semelhante, sendo encontrada maiores níveis de H3K9me2/me3 em embriões dos grupos M5F5 e M20F20, em relação a M5F20 e M20F5, existindo diferença entre os grupos. Em conclusão, este estudo elucidou as diferenças que a alta e a baixa tensão de oxigênio podem provocar nas fases iniciais da produção in vitro de embriões bovinos e possíveis consequências na homeostase celular. Contribuiu para o entendimento dos mecanismos básicos da interação ambiente e genoma, além da aplicação dos conhecimentos adquiridos para a melhoria de biotecnologias nas etapas iniciais da produção in vitro de embriões bovinos.

Assisted Reproductive Technology (ARTs) are widely used in human and animal reproduction. For these procedures, gametes and embryos are exposed to an artificial environment that mimics the reproductive tract. One of the most discrepant factors in this context is the gaseous atmosphere, since in vivo the O2 concentration found in the reproductive tract is lower than that used in the in vitro environment, and the concentration of 20% oxygen in this artificial system is commonly used. High concentrations of this gas cause oxidative stress and increased concentrations of reactive oxygen species (ROS) and, consequently, higher proportion of apoptotic cells in oocytes and embryos. However, little is known about the consequences of gaseous atmosphere change during the early stages of in vitro embryo production and the possible consequences on epigenetic remodeling. To validate the hypothesis that different oxygen concentrations during maturation and in vitro fertilization modulate the transcription of genes involved in oxidative stress and epigenetic modelers in oocytes, cumulus cells and bovine embryos. In addition, oxidative stress generated in embryos has an effect on global DNA methylation and histone tagging levels. Five experiments were carried out to investigate the role of the gaseous atmosphere in the initial steps of in vitro production of bovine embryos. To differentiate the effects of oxygen tension in the early stages of IVPE, embryonic development was analyzed by testing atmospheric oxygen tension (20% O2) and low oxygen tension (5% O2) on in vitro maturation and fertilization of bovine embryos. The groups formed were: low tension O2 at in vitro maturation and fertilization (M5F5), low tension O2 at maturation and high in vitro fertilization (M5F20), high tension O2 at in vitro maturation and fertilization (M20F20) and high tension O2 at maturation and low tension at in vitro fertilization (M20F5). In the first experiment, the effect of oxygen tension on in vitro maturation was analyzed by metaphase II analysis, quantification of intracellular concentration of ROS and reduced glutathione (GSH), as well as expression of stress response pathway-related mRNAs. Oxidative and epigenetic remodeling in oocytes and cumulus cells. Initial results indicated that oocytes matured at high and low O2 tension do not differ in nuclear maturation. Oocytes matured at high tension O2 generate higher concentration of ROS and GSH compared to the low oxygen tension environment. Cumulus cells from oocytes subjected to high oxygen tension at in vitro maturation showed higher transcript levels for the SOD1 gene related to the cellular oxidative stress response pathway. In the second experiment, the effect of oxygen tension on in vitro fertilization was analyzed by analyzing the fertilization rate. From the data obtained in this experiment, it was found that zygotes exposed to a low tension O2 environment in IVF do not result in higher polyspermia rate. All presumed zygotes were cultured at low oxygen tension until they reached the blastocyst stage. In the third experiment, the effect of oxygen tension on in vitro maturation and fertilization and its influence on embryonic development was evaluated. In the blastocyst rate, when there was interaction between both factors (oxygen tension in IVM and IVF) (one way ANOVA, p0.05), embryo production showed that the M20F20 group had a higher production (50.63 ± 4.55) in for the groups M20F5 (29.66 ± 2.81), M5F5 (32.00 ± 3.27) and M5F20 (31.88 ± 3.99). However, in the analysis of factor effects (two way ANOVA, p0.05), high oxygen tension showed a beneficial effect on IVM and IVF through developmental rates. In the gene expression analysis of blastocysts there was no interaction (p> 0.05), so that the main effects of IVM (p <0.05) differed. Some genes analyzed showed an increase in embryo transcripts that were matured at low oxygen tension and related to the oxidative stress response pathway (NRF2, SOD1, SOD2) and epigenetic remodeling (KDM5A and TET1). In the fourth experiment of this study, the effect of intracellular oxygen tension of GSH and ROS on blastocysts was demonstrated. Embryos collected on day 7 of embryonic development showed that intracellular GSH levels were higher in groups M20F20 and M5F5 than in groups M20F5 and M5F20. Intracellular ROS concentrations were lower in groups M20F20 and M5F5, with no difference between these groups. The M20F5 and M5F20 groups had higher ROS accumulation and differed among themselves. In the last experiment of this study (V), the effect of oxygen tension on global DNA methylation patterns and specific histone marks in blastoc was observed. In the last experiment of this study (V), we observed the effect of oxygen tension on global DNA methylation patterns and specific histone markings in blastocysts. In the analysis of global DNA methylation levels, higher levels of 5mC were found in groups M5F20 and M5F5, compared to groups M20F5 and M20F20, all groups differed. The 5hmC levels were analyzed and the mean fluorescence intensity was higher in M20F5 and M5F5 embryos compared to M5F20 and M20F20, with differences between groups. In histone marking both behaved similarly, with higher levels of H3K9me2 / me3 found in embryos of groups M5F5 and M20F20, compared to M5F20 and M20F5, with differences between groups. In conclusion, this study elucidated the differences that high and low oxygen tension may cause in the early stages of in vitro production of bovine embryos and possible consequences on cellular homeostasis. It contributed to the understanding of the basic mechanisms of environment and genome interaction, as well as the application of the knowledge acquired to the improvement of biotechnologies in the early stages of in vitro production of bovine embryos.

EFEITO DE DIFERENTES SISTEMAS DE MATURAÇÃO E CULTIVO IN VITRO SOBRE A PRODUÇÃO QUANTI-QUALITATIVA DE EMBRIÕES BOVINOS

Embora a produção in vitro de embriões (PIVE) tenha sido uma ferramenta muito utilizada para a multiplicação de bovinos geneticamente superiores, vários estudos já demonstraram que as condições de cultivo podem influenciar o sucesso da técnica. Além disso, em condições de campo torna-se interessante equipamentos portáteis que possam facilitar o transporte de oócitos/embriões nas condições mais favoráveis. Assim, este trabalho teve por objetivo verificar a eficiência da PIVE bovina em três diferentes sistemas de incubação: incubadora convencional de bancada (CONV), mini-incubadora de bancada (MINI) e mini-incubadora portátil (PORT). Para tanto, complexos cumulus- oócito (CCOs) foram obtidos de ovários de abatedouros e divididos aleatoriamente em três grupos: CONV com oxigênio elevado (5% CO2), MINI e PORT, ambas com baixa tensão de oxigênio (5% CO2, 5% O2 e 90% N2), e submetidos à maturação in vitro (MIV) por 22 h. Após a MIV, parte dos CCOs foi submetida à marcação com Hoechst 33342 para avaliação da taxa de maturação. As estruturas restantes foram submetidas à fecundação in vitro (FIV) por 6 h seguido de cultivo in vitro (CIV) por 8 dias. A taxa de clivagem foi avaliada no dia dois (D2) e a taxa de blastocistos nos dias sete (D7) e oito (D8) de cultivo. Adicionalmente, oócitos pós-MIV e embriões (D2 e D7) foram corados com H2DCFDA para avaliação dos níveis de espécies reativas de oxigênio (EROs) pela avaliação das unidades arbitrárias de fluorescência (UAFs). As taxas de maturação oocitária, clivagem, blastocistos expandidos/eclodidos e o número total de células por blastocisto foram avaliadas por ANOVA one-way, enquanto os níveis de EROs pelo teste de Kruskal-Wallis. O nível de significância foi de 5%. Não foi observada diferença significativa (P > 0,05) quanto à taxa de maturação (70,4%, 50,8% e 57,6% para CONV, MINI e PORT, respectivamente). Quanto à taxa de clivagem, o sistema CONV (74.0%) resultou na maior porcentagem (P < 0,05) quando comparado ao sistema PORT (59,5%), mas similar ( P > 0,05%) ao sistema MINI (65,0%). O mesmo padrão e diferença significativa foi observado para taxa de blastocistos em D7: CONV (33,3%), MINI (32,3%) e PORT (21,9%). Em relação aos níveis de EROs (UAFs EPM), os oócitos pós-MIV não mostraram diferença significativa (P > 0,05) quando da comparação dos grupos CONV (35,6 ± 4,5), MINI (29,4 ± 4,0) e PORT (35,6 ± 4,5). Para embriões D2, os níveis de EROs foram mais altos (P < 0,05) no grupo MINI (44,2± 3,1) em comparação ao CONV (27,7 ± 3,7) e PORT (33,3 ± 3,2). Todavia, nenhumadiferença significativa (P > 0.05) foi observada em embriões D7: 45,0 ± 3,5; 48,1 ± 3,9 e 43,3 ± 3,3 para CONV, MINI e PORT, respectivamente. Concluindo, o sistema PORT foi capaz de obter embriões de PIVE embora não eficientemente como o CONV. Adicionalmente, embora um elevado nível de EROs foi observado em embriões D2 do sistema MINI, este foi tão eficiente quanto o CONV na produção de blastocistos. Tal sistema pode ser uma opção mais econômica para a indústria de embriões bovinos produzidos in vitro.

Although embryo in vitro production (IVP) has been a widely used tool for the multiplication of genetically superior cattle, several studies have already shown that culture conditions may influence the success of the technique. Moreover, in field conditions it becomes interesting portable equipment that can facilitate the transport of oocytes / embryos under the most favorable conditions. The objective of this study was to verify the efficiency of bovine IVP in three different incubation systems: conventional bench incubator (CONV), bench mini-incubator (MINI) and portable mini-incubator (PORT). The cumulus-oocyte complexes (COCs) were obtained from slaughterhouses ovaries and randomly divided into three groups: CONV with high oxygen (5% CO2), MINI and PORT, both with low oxygen tension (5% CO2, 5% O2 and 90% N2), and submitted to in vitro maturation (IVM) for 22 h. After IVM, part of the COCs was subjected to Hoechst 33342 labeling to evaluate the maturation rate. The remaining structures were submitted to in vitro fertilization (IVF) for 6 h followed by in vitro culture (IVC) for 8 days. The cleavage rate was assessed on day two (D2) and the rate of blastocysts on days seven (D7) and eight (D8) culture. The cleavage rate was assessed on day two (D2) and the rate of blastocysts on days seven (D7) and eight (D8) culture. In addition, post-IVM oocytes and embryos (D2 and D7) were stained with H2DCFDA to evaluate the levels of reactive oxygen species (ROS) by the evaluation of arbitrary fluorescence units (AFUs). The rates of oocyte maturation, cleavage, expanded/hatched blastocysts and the total number of cells per blastocyst were evaluated by one-way ANOVA, while the levels of ROS by the Kruskal-Wallis test. The level of significance was 5%. No significant difference (P > 0.05) was observed in the maturation rate (70.4%, 50.8% and 57.6% for CONV, MINI and PORT, respectively). Regarding the cleavage rate, the CONV system (74.0%) resulted in the highest percentage (P < 0.05) when compared to the PORT system (59.5%), but similar (P > 0.05%) to the MINI system (65.0%). The same pattern and significant difference was observed for the rate of blastocysts in D7: CONV (33.3%), MINI (32.3%) and PORT (21.9%). Regarding the ROS levels (AFUs ± SEM), post-IVM oocytes did not show a significant difference (P > 0.05) when comparing CONV (35.6 ± 4.5), MINI (29.4 ± 4.0) and PORT (35.6 ± 4.5). For D2 embryos, ROS levels were higher (P < 0.05) in the MINI group (44.2 ± 3.1) compared to CONV (27.7 ± 3.7) and PORT (33.3± 3.2). However, no significant difference (P > 0.05) was observed in D7 embryos: 45.0 ± 3.5; 48.1 ± 3.9 and 43.3 ± 3.3 for CONV, MINI and PORT, respectively. In conclusion, the PORT system was able to obtain IVP embryos although not efficiently as the CONV. In addition, although a high level of ROS was observed in D2 embryos of the MINI system, it was as efficient as the CONV in the production of blastocysts. Such a system may be a more economical option for the in vitro produced bovine embryo industry.

Florestas estacionais e áreas de ecótono no estado do Tocantins, Brasil: parâmetros estruturais, classificação das fitofisionomias florestais e subsídios para conservação / Seasonal forests and ecotone areas in the state of Tocantins, Brazil: structure, classification and guidelines for conservation

The purpose of this study was to describe the richness, structure and diversity of tree species occurring in seasonally dry forests and some ecotone areas (Seasonal Forest/Ombrophilous Forest) in the state of Tocantins (Brazil). We aimed to provide information for conservation, management, environmental compensation and restoration strategies, and discuss their phytogeography identities in relation to other Brazilian forests. We selected 22 areas in 18 hydrogeographic basins and performed an inventory of all trees species (DHB > 5 cm) occurring in 477 plots of 400 m². We conducted a classification analysis of the vegetation using the TWINSPAN method in two different scales. The first assessed the beta diversity among plots within the state of Tocantins, and the second analysed similarities between these forests and other forests ecosystems in the Cerrado ecoregion and related ecotones in Central Brazil. A wide variation of species richness (33 to 243 species), density (486 to 1179 trees.ha-1), basal area (14.04 to 37.49 m². ha-1), diversity indexes (H’ = 2.75 to 4.59) and evenness (J’ = 0.72 to 0.86) across the sites was found. Based on floristic and structural aspects, classification analyses identified four major forests types: Seasonal Deciduous Forest, Seasonal Semi-deciduous Forest, and two ecotones Seasonal Semideciduous Forest/Ombrophilous Forest and ecotone Seasonal Deciduous Forest / Ombrophilous Forest. In order to maintain plant and habitat diversity in the Amazon/Cerrado transition zone, the creation of conservation areas should be intensified using biogeographical patterns as site selection criteria.

O objetivo deste estudo foi descrever a riqueza, estrutura e diversidade de espécies arbóreas em áreas de Floresta Estacional e ecótono (Floresta Estacional/Floresta Ombrófila) no estado do Tocantins, buscando subsídios para a conservação, manejo florestal, compensação de reserva legal e recuperação ambiental, além de discutir as identidades fitogeográficas em comparação com outras florestas do Brasil. Em 18 bacias hidrográficas, conduziu-se amostragem da vegetação arbórea (DAP > 5 cm) de 22 áreas (amostras) por meio do inventário de 477 parcelas de 400 m². Foram elaboradas análises de classificação pelo método TWINSPAN, em duas escalas distintas. A primeira avaliou a diversidade beta entre as parcelas amostradas no estado do Tocantins e a segunda buscou analisar a similaridade das florestas do Tocantins em relação a outras florestas do bioma Cerrado e suas áreas de tensão ecológica. As florestas amostradas apresentaram ampla variação em termos de riqueza (33 a 243 espécies), densidade (486 a 1.179 ind.ha-1), área basal (14,04 e 37,49 m².ha-1), índices de diversidade (H´ = 2,75 a 4,59) e de equabilidade (J´= 0,72 a 0,86). As análises de classificação convergiram para resultados comuns, identificando quatro ambientes dissimilares em termos florísticos e estruturais no estado do Tocantins: Floresta Estacional Decidual, Floresta Estacional Semidecidual, ecótono Floresta Estacional Semidecidual/Floresta Ombrófila e ecótono Floresta Estacional Decidual/Floresta Ombrófila. A fim de manter a diversidade de plantas e de ambientes na região de transição Floresta Amazônica e Cerrado, sugere-se que o processo de criação de unidades de conservação no estado do Tocantins deva ser intensificado e tenha como base para seleção das áreas critérios biogeográficos.

Florestas estacionais e áreas de ecótono no estado do Tocantins, Brasil: parâmetros estruturais, classificação das fitofisionomias florestais e subsídios para conservação / Seasonal forests and ecotone areas in the state of Tocantins, Brazil: structure, classification and guidelines for conservation

The purpose of this study was to describe the richness, structure and diversity of tree species occurring in seasonally dry forests and some ecotone areas (Seasonal Forest/Ombrophilous Forest) in the state of Tocantins (Brazil). We aimed to provide information for conservation, management, environmental compensation and restoration strategies, and discuss their phytogeography identities in relation to other Brazilian forests. We selected 22 areas in 18 hydrogeographic basins and performed an inventory of all trees species (DHB > 5 cm) occurring in 477 plots of 400 m². We conducted a classification analysis of the vegetation using the TWINSPAN method in two different scales. The first assessed the beta diversity among plots within the state of Tocantins, and the second analysed similarities between these forests and other forests ecosystems in the Cerrado ecoregion and related ecotones in Central Brazil. A wide variation of species richness (33 to 243 species), density (486 to 1179 trees.ha-1), basal area (14.04 to 37.49 m². ha-1), diversity indexes (H = 2.75 to 4.59) and evenness (J = 0.72 to 0.86) across the sites was found. Based on floristic and structural aspects, classification analyses identified four major forests types: Seasonal Deciduous Forest, Seasonal Semi-deciduous Forest, and two ecotones Seasonal Semideciduous Forest/Ombrophilous Forest and ecotone Seasonal Deciduous Forest / Ombrophilous Forest. In order to maintain plant and habitat diversity in the Amazon/Cerrado transition zone, the creation of conservation areas should be intensified using biogeographical patterns as site selection criteria.(AU)

O objetivo deste estudo foi descrever a riqueza, estrutura e diversidade de espécies arbóreas em áreas de Floresta Estacional e ecótono (Floresta Estacional/Floresta Ombrófila) no estado do Tocantins, buscando subsídios para a conservação, manejo florestal, compensação de reserva legal e recuperação ambiental, além de discutir as identidades fitogeográficas em comparação com outras florestas do Brasil. Em 18 bacias hidrográficas, conduziu-se amostragem da vegetação arbórea (DAP > 5 cm) de 22 áreas (amostras) por meio do inventário de 477 parcelas de 400 m². Foram elaboradas análises de classificação pelo método TWINSPAN, em duas escalas distintas. A primeira avaliou a diversidade beta entre as parcelas amostradas no estado do Tocantins e a segunda buscou analisar a similaridade das florestas do Tocantins em relação a outras florestas do bioma Cerrado e suas áreas de tensão ecológica. As florestas amostradas apresentaram ampla variação em termos de riqueza (33 a 243 espécies), densidade (486 a 1.179 ind.ha-1), área basal (14,04 e 37,49 m².ha-1), índices de diversidade (H´ = 2,75 a 4,59) e de equabilidade (J´= 0,72 a 0,86). As análises de classificação convergiram para resultados comuns, identificando quatro ambientes dissimilares em termos florísticos e estruturais no estado do Tocantins: Floresta Estacional Decidual, Floresta Estacional Semidecidual, ecótono Floresta Estacional Semidecidual/Floresta Ombrófila e ecótono Floresta Estacional Decidual/Floresta Ombrófila. A fim de manter a diversidade de plantas e de ambientes na região de transição Floresta Amazônica e Cerrado, sugere-se que o processo de criação de unidades de conservação no estado do Tocantins deva ser intensificado e tenha como base para seleção das áreas critérios biogeográficos.(AU)

Work of adhesion of dairy products on stainless steel surface

The adhesion of the solids presents in food can difficult the process of surface cleaning and promotes the bacterial adhesion process and can trigger health problems. In our study, we used UHT whole milk, chocolate based milk and infant formula to evaluate the adhesion of Enterobacter sakazakii on stainless steel coupons, and we determine the work of adhesion by measuring the contact angle as well as measured the interfacial tension of the samples. Inaddition we evaluated the hydrophobicity of stainless steel after pre-conditioning with milk samples mentioned. E. sakazakii was able to adhere to stainless steel in large numbers in the presence of dairy products. The chocolate based milk obtained the lower contact angle with stainless steel surface, higher interfacial tension and consequently higher adhesion work. It was verified a tendency of decreasing the interfacial tension as a function of the increasing of protein content. The pre-conditioning of the stainless steel coupons with milk samples changed the hydrophobic characteristics of the surfaces and became them hydrophilic. Therefore, variations in the composition of the milk products affect parameters important that can influence the procedure of hygiene in surface used in food industry.(AU)

Obtenção, caracterização, encapsulação e aplicação do extrato de vitex (Vitex agnus castus L.)

ECHALAR-BARRIENTOS, M. A. Obtenção, caracterização, encapsulação e aplicação do extrato de vitex (Vitex agnus castus L.) 2017. 127 f. Dissertação (Mestrado) Faculdade de Zootecnia e Engenharia de Alimentos, Universidade de São Paulo, Pirassununga, 2017. O fruto de vitex (Vitex agnus castus L.) é muito aromático, picante e amargo pelo alto teor de compostos fenólicos. É utilizado como pimenta na gastronomia e seu extrato como medicamento fitoterápico para combater os sintomas da tensão pré-menstrual (TPM), síndrome que acomete cerca de 80% das mulheres na idade reprodutiva. Assim, para a aplicação do extrato, com vistas à obtenção de um chocolate funcional para o público feminino, foi proposta sua encapsulação por spray drying visando mascarar ou atenuar o seu sabor desagradável e proteger os compostos fenólicos da oxidação. Portanto, o objetivo deste projeto foi à obtenção em condições otimizadas, caracterização, encapsulação por spray drying e aplicação em chocolate meio amargo do extrato concentrado dos frutos secos e maduros de vitex. O extrato foi obtido por maceração com solução 60 % etanol, a 60 C e 12 h. Após a concentração do extrato, este foi encapsulado por spray dryer com 4 concentrações de carreador goma arábica e 2 temperaturas de ar de entrada diferentes. Os pós foram caracterizados fisicamente e em relação ao teor dos compostos bioativos. O tratamento com melhores propriedades (T6) foi aplicado em chocolate meio amargo e foi realizada a caracterização do produto. (I) Foi possível obter um extrato rico em compostos fenólicos, com alta atividade antioxidante. (II) A encapsulação foi possível, protegeu os compostos fenólicos da degradação, porém não foi eficiente para mascarar o sabor do extrato. Contudo, (III) a aplicação desse extrato, na forma livre e encapsulada, em chocolate meio amargo foi bem sucedida, pois os produtos obtidos tiveram uma boa aceitação sensorial e a casticina, um dos compostos bioativos responsáveis pela ação terapêutica do extrato, (IV) manteve-se estável durante o período de estocagem. Neste contexto, este trabalho representou uma (V) inovação na área de alimentos funcionais com apelo à manutenção da qualidade de vida de mulheres em período reprodutivo. Ainda, destaca-se a relevância deste trabalho devido à escassez de trabalhos acadêmicos que abordam a encapsulação e aplicação deste extrato em alimentos.

ECHALAR-BARRIENTOS, M. A. Obtention, characterization, encapsulation and application of chasteberry extract (Vitex agnus castus L.) 2017. 127 f. M.Sc. Dissertation Faculdade de Zootecnia e Engenharia de Alimentos, Universidade de São Paulo, Pirassununga, 2017. Chasteberry (Vitex agnus castus L.) is very aromatic, spicy and bitter by the content of phenolic compounds. It is used as pepper in gastronomy and its extract as an herbal medicine to combat the symptoms of premenstrual syndrome (PMS), syndrome that affects 80% of women in reproductive age. Thus, for an application of the extract, with goal to obtain a functional chocolate for the female public, its encapsulation was proposed by spray-drying in order to mask or attenuate its unpleasant taste and to protect the phenolic compounds from oxidation. Therefore, the aim of this project was to obtain an extract of chasteberry in optimized conditions, its characterization, encapsulation by spray drying and application in semisweet chocolate. The extract was obtained by maceration with a 60% ethanol solution, at 60 ° C for 12 h. After the extract concentration, it was encapsulated by spray drier with 4 different concentrations of gum arabic charcoal and 2 different inlet air temperatures. The powder was characterized physically and in relation to the content of the bioactive compounds. The treatment with better properties (T6) was applied to the semisweet chocolate and a characterization of the product was carried out. (I) It was possible to obtain an extract rich in phenolic compounds, with high antioxidant activity. (II) Encapsulation was possible, it protected the phenolic compounds from degradation, but was not efficient to mask the flavor of the extract. However, (III) the application of the extract in the free and encapsulated form in semisweet chocolate was successful, the products obtained had a good sensory acceptance and casticina, one of the bioactive compounds responsible for the therapeutic action of the extract, (IV) remained stable during the storage period. In this context, this work represents an (V) innovation in the area of functional foods with maintenance in the quality of life of women in the reproductive period. Still, a relevance of this work is highlighted due to the lack of academic papers that approach the encapsulation or application of chasteberry extract in foods.

Produção de massa seca e nutrição de cultivares de arroz de terras altas sob condição de déficit hídrico e adubação silicatada / Dry matter and plant nutrition of upland rice under water deficit and silicon fertilization

Embora não seja considerado elemento essencial para o crescimento e desenvolvimento das plantas, o silício tem proporcionado diversos efeitos benéficos para cultura do arroz, em especial sob condições de estresse biótico e abiótico. O objetivo deste trabalho foi avaliar os teores de macronutrientes e de silício, em cultivares de arroz de terras altas sob condição de déficit hídrico e adubação silicatada. O experimento foi desenvolvido em casa de vegetação, em delineamento em blocos casualizados, em esquema fatorial 2 x 2 x 2, com duas cultivares: Maravilha (grupo moderno), e Caiapó (grupo tradicional), duas doses de silício (0 e 350 kg ha-1) e duas tensão de água no solo (-0,025 MPa e -0,050 MPa). A cultivar Maravilha produziu maior quantidade de massa seca do que a cultivar Caiapó. O aumento da tensão de água reduziu a produção de massa seca e os teores de macronutrientes nas plantas de arroz Os cultivares de arroz apresentam resposta diferentes a tensão de água no solo e adubação silicatada quanto ao teor de silício.

Although silicon has not been considered an essential element for plant growth and development, it has provided several benefits for the rice crop, especially under biotic and abiotic stress. The objective of this work was to evaluate macronutrient and silicon levels in upland rice cultivars cropped under water deficit and silicon fertilization. The experiment was carried out in greenhouse and the design was the completely randomized block, analyzed as a 2 x 2 x 2 factorial, which consisted of two cultivars, 'Maravilha' (modern group) and 'Caiapó' (traditional group), two silicon rates (0 and 350 kg ha-1) and two soil water tensions (-0.025 MPa and -0.050 MPa). Plant dry matter of the 'Maravilha' cultivar was higher compared to the other material. Higher soil water tensions decreased plant dry matter and macronutrient levels. Upland rice cultivars respond distinctively to soil water tensions and silicon rates.