Resumo

The objective of this study was to evaluate characteristics of the testicular parenchyma and vascular parameters of the pampiniform plexus obtained by ultrasound, semen quality parameters, and sperm freezability in Nellore bulls classified based on residual feed intake (RFI). Twenty-seven bulls (21.82±0.88 months of age) evaluated for feed efficiency were sampled for the study, including 15 with low RFI (−0.592±0.09 kg dry matter/day) and 12 with high RFI (0.792±0.10 kg dry matter/day). In ultrasound and Doppler assessment, the most efficient animals (low RFI) showed higher pulsatility and resistive indexes, as well as a tendency towards greater heterogeneity of the testicular parenchyma (0.625±0.032 vs. 0.508±0.032, 1.012±0.072 vs. 0.802±0.072, and 12.9±0.96 vs. 10.2±0.96, respectively, for low vs. high RFI). However, these animals tended to have lower peak diastolic velocity (5.19±0.50 for low RFI vs. 6.54±0.50 for high RFI). Analysis of fresh semen showed a lower percentage of minor defects in low RFI animals (2.67±1.19%) compared with high RFI animals (8.10±1.19%), without differences in the other parameters in fresh or thawed semen and after thermoresistance testing. Evaluation of flow cytometry parameters showed a higher quality of mitochondrial respiration in semen samples of low RFI animals (22.04±2.50%) compared with high RFI animals (12.29±2.71%). Therefore, although RFI exerts an effect on the Doppler parameters of the pampiniform plexus, it is not sufficient to affect the quality of fresh or thawed semen.(AU)

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A ultrassonografia é um método de diagnóstico por imagem que permite a avaliação de diferentes órgãos e estruturas corpóreas de maneira não invasiva. No entanto, a avaliação subjetiva das imagens caracteriza um dos grandes entraves na utilização desta técnica de diagnóstico, havendo necessidade de mecanismos que minimizem a subjetividade do exame e a divergência na interpretação dos achados ultrassonográficos. Desta forma este trabalho objetivou caracterizar a ecogenicidade do parênquima e mediastino testicular de ovinos utilizando a técnica do histograma escala-cinza. Foram utilizados 30 animais divididos em três grupos de acordo com a faixa etária (FE): de três a seis meses (FE1), sete a 12 meses (FE2), 13 a 18 meses (FE3) e realizadas varreduras testiculares nos planos frontal, sagital e transversal, elaborando ao final um histograma a partir das imagens ultrassonográficas. Observou-se que tanto a ecogenicidade do parênquima quanto a do mediastino testicular aumentaram gradativamente com a progressão das idades dos animais, com média e desvio-padrão de 95,00±19,05 e 94,35±18,82 para a ecogenicidade do parênquima do antímero direito e esquerdo, respectivamente, e 127,95±12,97 para o mediastino direito e 126,59±11,78 para o esquerdo. A técnica do histograma escala-cinza demonstrou ser um método eficiente na determinação da ecogenicidade testicular, possibilitando o estabelecimento de padrões de normalidade que venham a auxiliar pesquisas futuras no monitoramento do desenvolvimento testicular bem como na detecção de patologias. Para a regimes exclusivos de criação extensiva, como na baixada maranhense, representa ferramenta valiosa para sua utilização em projetos sociais do Estado que atendem a agricultura familiar.

Ultrasound is a diagnostic imaging method that allows a no invasive evaluation of different organs and body structures. However, the personal evaluation of images is one of the major hampers in using this technique. In order to reduce this drawback, it is necessary to find out tools that can help diminish the divergence in the interpretation of sonographic findings. Therefore, this study aimed to identify features of the parenchyma's and mediastinum's testis of sheep echogenicity using the technique of gray scale histogram. 30 animals were divided into three groups according to age (FE): three to six months (FE1), seven to 12 months (FE2), 13 to 18 months (FE3). The testicular scans were performed in the frontal, sagital and transverse views, and the gray scale histograms were analyzed. It was observed that such parenchymal as the mediastinum testis echogenicity gradually increased with the aging of the animals, with mean and standard deviation of 95.00±19.05 and 94.35±18.82 for the echogenicity parenchyma of the right and left antimere, respectively, and 127.95±12.97 to 126.59±11.78, for the right and the left mediastinum. The technique of gray scale histogram was an efficient method for determination of testicular echogenicity, enabling the establishment of normal standards that may assist future research in monitoring testicular development as well as for detecting pathologies. For exclusive regimes of extensive farming, as the western lowland region of Maranhão, is a valuable tool for use in social projects of the State to attend the family farm.

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The aim of this study was to establish a standard ultrasound echogenicity of the testicular stroma in prepubertal sheep correlating with testicular biometry. Eight Santa Ines rams aging 6 months were evaluated. It was used an Aquila Vet ultrasound with 6 MHz linear transducer using acoustic gel on the previously shaved scrotal region. Sagittal, frontal and transverse images of right and left testicles were recorded to evaluate the image echogenicity (gray scale) on selected predetermined areas of the testicular stroma. The biometric evaluations were performed according to to the standard method. The testicular stroma was homogeneous, with echogenicity 53.95 ± 6.5%, 55.70 ± 6.4% and 55.68 ± 6.4% for the right, left and the testis mean, respectively. There was also a high correlation between echogenicity and scrotal circumference (P = 0.0027, r= 0.80, r2 = 0.75). The study showed a contribution to andrological findings, showing accurately and practical the echogenicity of the testicular parenchyma of prepubertal ram, optimizing the early breeding evaluation.

O objetivo deste estudo foi estabelecer um padrão ultrassonográfico da ecogenicidade do estroma testicular em ovinos pré-púberes correlacionando com a biometria testicular. Foram avaliados 8 carneiros de 6 meses de idade e raça Santa Inês. Foi utilizado um aparelho Áquila Vet, ligado ao transdutor linear 6 MHz, utilizando gel acústico sobre a bolsa testicular previamente tricotomizada nas regiões de aferição. Foram feitas imagens em planos sagitais, transversais e frontais nos testículos direito e esquerdo. Com a função de aferição de ecogenicidade da imagem (escala de cinza), no próprio aparelho foram selecionadas áreas predeterminadas do estroma testicular. As avaliações biométricas foram realizadas de acordo com o método padrão. O estroma testicular apresentou-se, de uma forma geral, homogêneo, com ecogenicidade 53,95±6,5%, 55,70±6,4% e 55,68± 6,4% para o testículo direito, esquerdo e a média dos testículos, respectivamente. Também se verificou uma correlação entre a ecogenicidade e a circunferência escrotal (P= 0,0027, r= 0,80, r2 = 0,75), sendo uma correlação alta. O estudo apresentou uma contribuição para os achados andrológicos, mostrando com precisão e de maneira prática a ecogenicidade do parênquima testicular de carneiros pré-púberes, otimizando a avaliação precoce de reprodutores.

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O presente estudo propõe avaliar o efeito do tratamento oral com pentoxifilina sobre a qualidade seminal, morfometria, histologia e expressão gênica testicular de garanhões submetidos ao estresse térmico escrotal. Além disso, objetiva testar a eficiência de novo método de aquecimento escrotal na espécie equina. Para isso 14 garanhões foram divididos em três grupos: Controle (CT, n=4), Degenerado (DG, n=5) e Degenerado Tratado (PTX, n=5). O insulto térmico escrotal foi realizada utilizando uma bolsa térmica acoplada a uma fonte de ar aquecido a 50º C, durante uma hora no início da manhã e uma hora no final da tarde, no D-1 e D0. Um dia após o insulto (D1), o tratamento com 17 mg/kg pentoxifilina oral, a cada 12 h, foi iniciado e conduzido por 30 dias. Os animais foram coletados duas vezes por semana do D-24 ao D60 e o sêmen avaliado quanto a cinética, morfologia espermática, integridade de membrana plasmática, geração do ânion superóxido intracelular e mitocondrial, índice de peroxidação lipídica e índice de caspases ativadas 3 e 7. No D30 e D60 biópsias testiculares foram realizadas e as amostras destinadas a histopatologia, e ao RT-qPCR, quanto a resposta a apoptose, choque térmico e estresse oxidativo. As medidas testiculares de comprimento, altura e largura foram mensuradas utilizando paquímetro, e o volume testicular relativo foi calculado, uma vez por semana do D-5 ao D60. Dentre os resultados obtidos, o método de estresse térmico escrotal utilizado se mostrou eficiente em induzir degeneração testicular em garanhões. O tratamento com a pentoxifilina apresentou efeito benéfico no sêmen quanto a motilidade total e porcentagem de espermatozoides rápidos. Além disso, minimizou a peroxidação lipídica, previniu a ativação de mecanismos de apoptose nos espermatozoides, e reduziu o número de defeitos espermáticos (defeitos totais, maiores, de cabeça, presença de células germinativas e formas teratológicas). Na avaliação histológica, o fármaco promoveu redução dos danos causados pelo calor no D60, como uma menor presença de ondulação da lâmina basal refletindo uma menor atrofia dos túbulos seminíferos no entanto, não foi eficiente em prevenir o aparecimento de lesões, como o edema intesticial, vacuolizaçao de células germinativas, ausência de espermatozoides e aumento da luz dos túbulos seminíferos. Os efeitos benéficos da pentoxifilina podem ser atribuídos à inibição da apoptose em células germinativas observada aos 30 e 60 dias pós-insulto térmico e à ativação de mecanismos de proteção celular em resposta ao choque térmico. No entanto, mais estudos, quanto a dose e tempo de uso da pentoxifilina, são necessários para se alcançar melhores respostas no tratamento da degeneração testicular em equinos.

The objectives of this study are to evaluate the effect of oral treatment with pentoxifylline on seminal quality, morphometry, histology, and gene expression in the testicle of stallions thermal-induced. In addition, it aims to investigate the efficiency of a new method of scrotal heating. For this, 14 stallions were divided into three groups: Control (CT, n = 4), Degenerate (DG, n = 5) and Degenerate Treated (PTX, n = 5). The scrotal heating was induced by a thermal bag attached to an air source at 50 ° C, for an hour in the early morning and an hour in the late afternoon, on D-1 and D0. One day after the insult (D1), treatment with oral pentoxifylline (17mg/Kg) every 12 hours was initiated and carried out for 30 days. Twice-a-week semen collections were performed from D24 to D60 and semen was evaluated for kinetics, morphology, plasma membrane integrity, generation of intracellular and mitochondrial superoxide anion, lipid peroxidation index and activated caspase 3 and 7 index. In D30 and D60 testicular biopsies were carried out and the samples destined to histopathology and to RT-qPCR, regarding the response to apoptosis, heat-shock and oxidative stress. Testicular length, height and width were measured, using a caliper, and the relative testicular volume were calculated once a week from D5 to D60. Among the results obtained, the scrotal thermal stress method used was efficient in inducing testicular degeneration in stallions. Treatment with pentoxifylline showed a beneficial effect on semen in terms of total motility and percentage of rapid sperm. In addition, it minimized the lipid peroxidation, the activation of apoptosis mechanisms in sperm and caused decreased number of sperm defects (total, major and head defects, the presence of germ cells and teratological forms). In the histological evaluation, the drug led to a reduction of heat damage in D60, as a lower presence of basal membrane undulation - reflecting less atrophy of the seminiferous tubules - however, the drug was not effective in preventing the onset of lesions such as interstitial edema, germ cell vacuolation, absence of sperm, and increased lumen of the seminiferous tubules. These effects can be related to the inhibition of apoptosis in germ cells at 30 and 60 days after thermal insult and the activation of the cellular protection mechanism in response to heat shock. However, more studies about the dose and time of the use of pentoxifylline are needed to achieve better responses in the treatment of testicular degeneration in horses.

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Objetivou-se com esta pesquisa avaliar a ecotextura testicular e suas correlações com a espermatogênese de touros Nelore. Utilizaram-se 41 touros púberes com idade variando de 3 a 5 anos e peso corporal médio de 510,2 21,61kg. Os exames ultrassonográficos foram realizados com auxílio de um aparelho de ultrassonografia portátil acoplado a um transdutor linear com frequência de 7,5 MHz. Para avaliação da ecotextura uma camada de gel foi aplicada sobre a área de leitura do transdutor, que foi posicionado verticalmente na face caudal do escroto, paralelo ao maior eixo de cada testículo. Imediatamente após esse exame os animais foram orquidectomizados e em seguida, os testículos foram fixados por perfusão tecidual com solução de fixadora de Karnovsky. Em seguida, os fragmentos foram incluídos com glicolmetacrilato e corados com solução de azul de toluidina - borato de sódio a 1%. A média da intensidade de pixel da área de 1600mm2 do parênquima testicular direito, esquerdo e média de intensidade de pixel entre os dois testículos em cada animal foram respectivamente, 105,22±13,58, 107,95±12,82 e 106,59±11,43. A media do coeficiente de eficiência de mitoses espermatogoniais: razão entre o número de espermatócitos primários em (PL/L) e o número de espermatogônias A foi de 19,74. O rendimento meiótico: razão entre o número de espermátides arredondadas e o número de espermatócitos primários em paquíteno foi de 2,63. O rendimento geral da espermatogênese: razão entre o número de espermátides arredondadas e o número de espermatogônias A foi de 52,0. Não houve correlação (p > 0,05) entre a ecotextura testicular e nenhum dos parâmetros morfométricos da espermatogênese mensurados. Concluiu-se que a ecotextura testicular não é um método viável para a avaliação indireta da população celular do epitélio seminífero, do rendimento intrínseco da espermatogênese e do índice de células de Sertoli de touros Nelore.

The aim of this research was to evaluate the testicular echotexture and their correlation with spermatogenesis of Nellore bulls. We used 41 pubertal bulls aged 3-5 years and mean body weight of 510.2 ± 21,61kg. The ultrasound examinations were performed with aid of a portable ultrasound device attached to a linear transducer with a frequency of 7.5 MHz. For echotexture evaluation a gel layer was applied on the transducer reading area, which was positioned vertically in the face scrotum flow parallel to the major axis of each testis. Immediately after this test animals were orchidectomized and then the testes were fixed by tissue perfusion with Karnovsky solution. Then the fragments were included with glycolmethacrylate stained with toluidine blue solution - Sodium borate 1% .The average pixel intensity of the area of 1600 mm 2 of testicular parenchyma and pixel intensity averaging both testicles in each animal were respectively 105.22 ± 13.58, 107.95 ± 12.82 and 106.59 ± 11.43. The average of the coefficient mitosis spermatogonial efficiency ratio: ratio of the number of primary spermatocytes (PL / L) and the number of spermatogonia A was 19.74. The meiotic yield: ratio of the number of round spermatids and the number of primary pachytene spermatocytes was 2.63. The spermatogenesis efficiency: ratio between the number of round spermatids and the number of spermatogonia A was 52.0. There was no correlation (p > 0.05) between the testicular echotexture with any of the morphometric parameters measured spermatogenesis. It was concluded that the testicular echotexture is not a viable method for the indirect evaluation of the cell population of the seminiferous epithelium, the intrinsic efficiency of spermatogenesis and Sertoli cell index of Nellore bulls.