Clinical and therapeutic aspects of an outbreak of canine trypanosomiasis / Aspectos clínicos e terapêuticos de um surto de tripanossomíase canina

Trypanosomiasis caused by Trypanosoma evansi can seriously affect both domestic and wild animals. This article reports on an outbreak of canine trypanosomiasis on a farm in the Pantanal region of Brazil. The farm had 38 dogs, 20 of which died before receiving veterinary care. The remaining 18 dogs were underwent anamnesisn, clinical examination, hematological and biochemical evaluations. Blood smears and PCR analysis were performed for the diagnosis. The treatment protocols used according to the clinical recovery or parasitological cure of the dogs, using diminazene diaceturate, isometamidium chloride or quinapyramine sulfate. Post-treatment parasitological evaluation was performed by the microhematocrit technique. 7/18 dogs were PCR positive for T. evansi (confirmed by sequencing). There was clinical findings, which were consistent with both the acute and chronic stages of the disease in dogs. The infected dogs all exhibited at least one clinical sign of the disease. The hematological findings were compatible with trypanosomiasis, highlighting the hypochromic microcytic anemia as the main outcome. No treatment protocol was fully effective and the prolonged use of diminazene diaceturate caused the death of an animal. The trypanosomiasis can cause high rates of morbidity and mortality in dogs and difficulty in establishment an effective and safe therapeutic protocol.(AU)

A tripanossomíase causada por Trypanosoma evansi pode acometer gravemente os animais domésticos e selvagens. Este artigo relata um surto de tripanossomíase canina em uma fazenda na região do Pantanal, Brasil. Na fazenda havia 38 cães, 20 dos quais morreram antes de receber cuidados veterinários. Os 18 cães restantes foram submetidos a anamnese, exame clínico, avaliação hematológica e bioquímica. Esfregaços de sangue e análise da PCR foram realizados para o diagnóstico. Os protocolos de tratamento foram utilizados de acordo com a recuperação clínica ou cura parasitológica dos cães, utilizando diaceturato de diminazeno, cloreto de isometamídio ou sulfato de quinapiramina. A avaliação parasitológica pós-tratamento foi realizada pela técnica de microhematócrito. 7/18 cães foram PCR positivos para T. evansi (confirmado por sequenciamento). Os achados clínicos encontrados, foram consistentes com os estágios agudo e crônico da doença em cães. Todos os cães infectados exibiram pelo menos um sinal clínico da doença. Os achados hematológicos foram compatíveis com a tripanossomíase, destacando a anemia microcítica hipocrômica como principal consequência. Nenhum protocolo de tratamento foi totalmente eficaz e o uso prolongado de diaceturato de diminazeno causou a morte de um animal. A tripanossomíase pode causar altas taxas de morbidade e mortalidade em cães e dificultar o estabelecimento de um protocolo terapêutico eficaz e seguro.(AU)

Molecular detection of Trypanosoma evansi (Kinetoplastida: Trypanosomatidae) in procyonids (Carnivora: Procyonidae) in Eastern Amazon, Brazil / Detecção molecular de Trypanosoma evansi (Kinetoplastida: Trypanosomatidae) em procionídeos (Carnivora: Procyonidae) na Amazônia Oriental, Brasil

The present study aimed to diagnose the natural infection of captive and free-living procyonids with Trypanosoma evansi in the states of Amapá and Pará, Brazil. From February 2012 to August 2013, whole blood samples and blood smears were obtained from 45 free-living procyonids and from nine procyonids kept in captivity in wild life refuges and zoobotanical parks in the states of Amapá and Pará. Whole blood samples were collected and kept at -20ºC for the detection of T. evansi DNA by PCR using the RoTat 1.2 forward and RoTat 1.2 reverse primers. In addition, the blood smears were processed and examined for the presence of trypomastigote forms of T. evansi. T. evansi DNA was detected in 18.52% (10/54) of the procyonids, namely, in captive crab-eating raccoons and captive and free-living coatis in Pará State. No trypomastigote forms were observed in the blood smears. DNA from T. evansi was detected in P. cancrivorus and N. nasua in Pará State, being this the first such report in P. cancrivorus.(AU)

O objetivo do presente trabalho foi realizar o diagnóstico da infecção natural por Trypanosoma evansi em procionídeos de vida livre e de cativeiro dos estados do Amapá e Pará, Brasil. Durante o período de fevereiro de 2012 a agosto de 2013, amostras de sangue total e esfregaços sanguíneos foram obtidos de 45 procionídeos de vida livre e de nove mantidos em cativeiro em mantenedores e Parques Zoobotânicos dos estados do Amapá e Pará. As amostras de sangue total foram coletadas e mantidas a -20ºC para pesquisa de DNA de T. evansi pela PCR utilizando-se os iniciadores RoTat 1.2 forward e RoTat 1.2 reverse. Os esfregaços sanguíneos também foram processados e examinados para a pesquisa de formas tripomastigotas do agente. DNA de T. evansi foi detectado em 18,52% (10/54) dos procionídeos, ocorrendo em mãos-peladas de cativeiro e quatis de vida livre e de cativeiro no estado do Pará. Não foram observadas formas tripomastigotas nos esfregaços sanguíneos. DNA de T. evansi foi detectado em P. cancrivorus e N. na sua no estado do Pará, sendo este o primeiro relato em P. cancrivorus.(AU)

TABANÍDEOS, DA FLORESTA OMBRÓFILA MISTA NA REGIÃO DE LAGES, SC. Análise proteômica da glândula salivar e prospecção de tripanossomatídeos.

Tabanídeos são insetos onde somente a fêmea é hematófaga, e além do incômodo provocado por sua picada, em animais de produção, companhia e humanos, podem também transmitir agentes causadores de enfermidades. Devido ao hábito alimentar, esses animais possuem em sua saliva componentes com poder anti-hemostático, vasodilatador, inibidor de imunoglobulinas, entre outros. Além disso, são também vetores mecânicos de uma série de agentes patogênicos importantes, como os tripanossomatídeos. Tendo em vista estas características, foi realizado um estudo de bioprospecção de componentes da glândula salivar de tabanídeos da floresta ombrófila mista (Sul do Brasil) e pesquisa da presença de Trypanosoma evansi e Trypanosoma vivax no aparelho bucal destes insetos, além do levantamento populacional e estudo de preferência anatômica para repasto. Foram capturados, semanalmente, entre as 15h e 18h, em quatro sítios na região de Lages, tabanídeos (Diptera, Tabanidae) no período de fevereiro de 2018 a fevereiro de 2019. As capturas com iscas usando um equino de coloração escura ocorreram durante três horas. Quatro observadores munidos de copos de vidro coletaram as moscas que pousaram no cavalo, este permanecia em estação para os procedimentos de coleta, e a cada 30 minutos era colocado em marcha, durante 5 minutos. Os exemplares capturados foram armazenados conforme localização do repasto, no dispositivo SECTAB e foram escolhidas as espécies mais abundantes e de maior tamanho, para facilitar a dissecação e fornecer material em quantidade suficiente para análise. Os insetos coletados foram mortos em frascos mortíferos contendo clorofórmio. Após, foi procedida a identificação taxonômica, sendo as glândulas salivares e os aparelhos bucais extraídos logo após a coleta. As glândulas salivares foram dissecadas sob um estereomicroscópio e transferidas para microtubo contendo tampão fosfato - salina (PBS pH 7.2), foram armazenados em TNE. O DNA do aparelho bucal e proteínas das glândulas salivares foram extraídos e analisados especificamente para a prospecção dos tripanossomatídeos e para a análise proteômica. O número de espécies de tabanídeos variou de zero no outono/inverno a sete no verão (dezembro a fevereiro). Dichelacera (D.) alcicornis Wied. (276) foi a espécie mais abundante seguida de Chrysops fusciapex Lutz (94) e C. patricia Pechuman (56). As capturas de pico ocorreram durante o verão (dezembro a fevereiro). O comportamento de pouso para repasto sanguíneo variou de acordo com os gêneros e espécies: Chrysops sp. (98,93%) preferiram a cabeça, Fidena nigipes (100%) tórax e abdomen, já Dichelacera sp. (73,91%), Poeciloderas sp. (95,65%) e Acanthocera kroeberi (100%) preferiram os membros. No material do aparelho bucal do gênero Dichelacera spp. e da espécie Dichelacera (D.) alcicornis foi encontrado DNA de T. evansi. Nas glândulas salivares das espécies D. (D.) alcicornis, D. (D.) januarii e Fidena nigripes foram identificadas 70 proteínas com funções nos processos metabólicos dos ácidos carboxílicos, proteínas, carboidratos, bem como funções estruturais, oxirredutoras, de transporte.

Tabanids are insects, in which only the female is hematophagous. In addition to the irritation caused by its bite in farm animals, as well as in humans, tabanids can also transmit disease-causing agents. Due to tabanids feeding habits, their saliva contains anti-hemostatic agents, vasodilators, immunoglobulin inhibitors, among other components. Besides that, they also act as mechanical vectors of several important pathogens, such as trypanosomatids. Due to these facts, a bioprospecting study on the salivary gland components from the mixed ombrophilous forest (Southern Brazil) tabanids was performed. It was also investigated the presence of Trypanosoma evansi and Trypanosoma vivax in the oral tract of these insects, in addition to a population survey as well as assessment of anatomical preference for repast. Tabanids (Diptera, Tabanidae) were captured, weekly, between February 2018 to February 2019 at 3 to 6 pm in four different farms in Lages. The capture occurred for three hours and used a dark-colored horse as a bait. We collected the horse landed flies using a glass cup. The horses exercised every 30 minutes, for 5 minutes, and remained in station for collection procedures. The captured specimens were stored according to repast location, in a SECTAB device. The most abundant and larger specimens were chosen to facilitate dissection and provide sufficient material for analysis. The collected insects were killed in chloroform containing flasks. After that, a taxonomic identification was performed, with salivary glands and oral appliances extracted soon after the collection. The salivary glands were dissected under a stereomicroscope and transferred to a microtube containing phosphate - saline buffer (PBS pH 7.2), and stored in TNE. The oral DNA and salivary gland proteins were extracted and analyzed specifically for trypanosomal prospection and proteomic analysis. The number of tabanid species fluctuated from zero in the fall/winter to seven in the summer (December to February). Dichelacera (D.) alcicornis Wied. (276) was the most abundant species followed by Chrysops fusciapex Lutz (94) and C. patricia Pechman (56). Peak catches occurred during the summer (December to February). The landing behavior for blood repast varied according to genera and species: Chrysops spp. (98.93%) preferred the head, Fidena nigipes (100%) thorax and abdomen, while Dichelacera spp. (73.91%), Poeciloderas sp. (95.65%) and Acanthocera kroeberi (100%) preferred the members. In the mouthpiece material of the genus Dichelacera spp. and from the species Dichelacera (D.) alcicornis was found DNA of T. evansi. In the salivary glands of the species D. (D.) alcicornis, D. (D.) januarii and Fidena nigripes, 70 proteins with functions in the metabolic processes of carboxylic acids, proteins, carbohydrates, as well as structural, oxidoreductive, transport functions were identified.

Trypanocidal activity of human plasma on Trypanosoma evansi in mice / Atividade tripanocida do plasma humano sobre Trypanosoma evansi em camundongos

This study aimed to test an alternative protocol with human plasma to control Trypanosoma evansi infection in mice. Plasma from an apparently 27-year-old healthy male, blood type A+, was used in the study. A concentration of 100 mg.dL-1 apolipoprotein L1 (APOL1) was detected in the plasma. Forty mice were divided into four groups with 10 animals each. Group A comprised uninfected animals. Mice from groups B, C and D were inoculated with a T. evansi isolate. Group B was used as a positive control. At three days post-infection (DPI), the mice were administered intraperitoneally with human plasma. A single dose of 0.2 mL plasma was given to those in group C. The mice from group D were administered five doses of 0.2 mL plasma with a 24 hours interval between the doses. Group B showed high increasing parasitemia that led to their death within 5 DPI. Both treatments eliminated parasites from the blood and increased the longevity of animals. An efficacy of 50 (group C) and 80% (group D) of human plasma trypanocidal activity was found using PCR. This therapeutic success was likely achieved in the group D due to their higher levels of APOL1 compared with group C.(AU)

Este estudo teve como objetivo testar um protocolo alternativo com plasma humano para controlar a infecção por Trypanosoma evansi em camundongos. O plasma foi oriundo de um homem aparentemente saudável, com idade entre 27 anos e tipo de sangue A+. Foi detectada uma concentração de 100 mg.dL -1 de apolipoproteína L1 (APOL1) no plasma. Quarenta camundongos foram divididos em quatro grupos, contendo dez animais cada. Grupo A, composto de animais não infectados. Os roedores dos grupos B, C e D foram inoculados intraperitonealmente com um isolado de T. evansi. O Grupo B foi usado como um controle positivo. Três dias pós-infecção (DPI), os camundongos foram tratados com plasma humano. Uma dose única de 0,2 mL de plasma foi administrada nos roedores do grupo C. Os ratos do grupo D receberam cinco doses de 0,2 mL de plasma em intervalos de 24 horas. Os ratos do grupo B apresentaram parasitemia crescente, o que ocasionou a morte dos animais em 5 DPI. Ambos os tratamentos foram capazes de eliminar o parasito do sangue e aumentar a longevidade dos animais. O método da PCR detectou uma eficácia de 50% (grupo C) e 80% (grupo D) no tratamento com plasma humano. Este sucesso terapêutico obtido nos animais do grupo D provavelmente foi por receber maiores níveis de APOL1, comparado ao grupo C.(AU)

DESENVOLVIMENTO DE BIBLIOTECAS DE PHAGE DISPLAY PARA A OBTENÇÃO DE MARCADORES E/OU INIBIDORES BIOLÓGICOS CONTRA Trypanosoma evansi

MORAES, Julio Cesar. Desenvolvimento de bibliotecas de phage display para a obtenção de marcadores e/ou inibidores biológicos contra Trypanosoma evansi. 2017. 115 f. Tese (Doutorado em Ciência Animal). Universidade do Estado de Santa Catarina. Programa de Pós-graduação em Ciência Animal, Lages, 2017. Trypanosoma evansi é um hemoprotozoário parasito, causador da doença conhecida como Surra ou Mal das Cadeiras, tendo sido descrito em várias espécies, como cães, capivaras, quatis, bovinos, búfalos, sendo os equinos a espécie mais acometida. É responsável por prejuízos diretos no setor de equinocultura e, indiretos no setor pecuário que utilizam essa espécie no manejo de outros animais de produção. O T. evansi é transmitido de maneira acíclica por insetos (Tabanidae e Stomoxydae) e morcegos hematófagos e, de maneira iatrogênica (vacinações e coleta de sangue). Com o objetivo de identificar novos alvos para o controle e ou diagnóstico do T. evansi, utilizamos a tecnologia de phage display associada à técnica Kunkel de mutagênese direcionada para construir uma biblioteca de proteínas com diversidade superior a um milhão de proteínas distintas e mesmo após a diversificação, a biblioteca manteve como base estrutural o esqueleto protéico de uma toxina atenuada com Domínio Kunitz presente no veneno do escorpião Mesobuthus tamulus As mutações foram direcionadas, com auxílio da estrutura cristalográfica da toxina, para resíduos específicos na porção C-terminal da -hélice e no loop menor da proteína. O DNA mutante foi purificado e amplificado pela técnica de Círculo Rolante Seletivo. Clones da biblioteca foram sequenciados, onde foi evidenciado uma taxa próxima de 100% de inserções de mutações resíduo específicas. Em seguida a biblioteca foi utilizada em seleções de afinidade contra o T. evansi para busca de ligantes específicos ao parasito. Após um round in vivo e dois in vitro, seis clones foram selecionados para estudos individuais de potência, especificidade de ligação e toxicidade. Entre todos os clones, em especial, os clones 5 e 1 apresentaram um maior potencial de ligação ao T. evansi e ausência de ligação contra outros tripanosomatídeos (T. cruzi e T. rangeli). Os clones 1, 2 e 5 demostraram ser tóxicos para o T. evansi causando uma mortalidade de 13%, 31,5% e 19,7%, respectivamente. O DNA dos clones 1, 2 e 5 foram sequenciados, demonstrando que houve a inserção de mutações. A biblioteca derivada de toxinas, bem como os clones 1 e 5 identificados demonstraram possuir potencial para o desenvolvimento de novos testes para o diagnóstico direto de T. evansi. Os clones 1, 2 e 5 que demonstraram atividade tóxica, poderão servir como base para outros estudos, visando o desenvolvimento de novas drogas com atividade tripanocida.

MORAES, Julio Cesar. Development of phage display libraries for obtaining markers and/or biological inhibitors against Trypanosoma evansi. 2017. 115 f. Thesis (DSc in Animal Science). Universidade do Estado de Santa Catarina. Programa de Pós-graduação em Ciência Animal, Lages, 2017. Trypanosoma evansi is a parasitic hemoprotozoan, which causes the disease known as "surra" or "mal das cadeiras" and has been described in several species, such as dogs, capybaras, quatis, cattle, buffaloes, and horses are the most affected species. It is responsible for direct losses in the equinoculture sector and indirect in the livestock sector that use this species in the handling of other production animals. T. evansi is transmitted acyclically by insects (Tabanidae and Stomoxydae) and hematophagous bats and iatrogenically (vaccinations, collection of blood). With the objective of identify new compounds for the control and / or diagnosis of T. evansi, We used phage display technology associated with Kunkel's mutagenesis technique aimed at constructing a protein library with diversity of more than one million distinct proteins and even after diversification, the library retained as a structural basis the protein skeleton of an attenuated toxin with Kunitz Domain present in the venom of Mesobuthus tamulus scorpion The mutations were directed, with the support of the crystallographic structure of the toxin, to specific residues in the C-terminal portion of the -helix and in the smaller loop of the protein. The mutant DNA was purified and amplified by the Selective Rolling Circle technique. Clones from the library were sequenced, where a close to 100% rate of insertions of specific residue mutations was evidenced. Then the library was used in affinity selections against T. evansi to search for specific ligands to the parasite. After one round in vivo and two in vitro, six clones were selected for individual studies of potency, binding specificity and toxicity. Among all clones, in particular, clones 5 and 1 showed a greater potential for binding to T. evansi and lack of binding against other trypanosomatids (T. cruzi and T. rangeli). Clones 1, 2 and 5 proved to be toxic to T. evansi causing a mortality of 13%, 31.5% and 19.7%, respectively. DNA from clones 1, 2 and 5 were sequenced, demonstrating that mutations were inserted. The toxin-derived library as well as clones 1 and 5 identified has potential for the development of new tests for the direct diagnosis of T. evansi. Clones 1, 2 and 5 that demonstrated toxic activity may serve as the basis for other studies aimed at the development of new drugs with trypanocidal activity.

INFECÇÃO POR Trypanosoma evansi EM MAMÍFEROS DE RIO BRANCO/ AC ALESSANDRA FILGUEIRAS GONZALEZ ARAUJO SANTOS Rio de

Trypanosoma (Trypanozoon) evansi foi o primeiro tripanossoma patogênico de mamífero a ser descrito. É a espécie de Trypanosoma mais dispersa e a que infecta a maior variedade de hospedeiros no mundo. T. evansi é um parasito de grande importância médico-veterinária, exclusivo de sangue de mamíferos e sua transmissão se dá através de vetores mecânicos. Sua primeira descrição no Brasil foi feita em 1830 na Ilha de Marajó/PA e desde então não houve mais relatos da presença do parasito na Região Norte do país. No ano de 2014, um cão de Rio Branco/AC recebeu um diagnóstico sugestivo da infecção por T. evansi, dada a sintomatologia apresentada e a presença de parasitos flagelados, sem cinetoplasto evidente, em esfregaço sanguíneo. O objetivo do trabalho foi investigar a ocorrência de T. evansi em cães, morcegos e capivaras provenientes de Rio Branco/AC através de abordagens parasitológicas, sorológicas e moleculares. Nossa hipótese é que há neste local uma transmissão ainda não reportada deste parasito. Foi coletado sangue de 78 cães de áreas próximas ao Parque Zoobotânico (PZ), pertencente ao campus da Universidade Federal do Acre (UFAC). O diagnóstico parasitológico dos cães foi realizado por hemocultivo (buscando detectar infecção por T. cruzi como diagnóstico diferencial), exame à fresco de capa leucocitária e análise de esfregaço sanguíneo e todos foram negativos. O diagnóstico sorológico por Reação de Imunofluorescência Indireta (RIFI) detectou a presença de anticorpos anti-T.evansi e anti-T.cruzi em 20,5% e 26,0% dos animais avaliados, respectivamente. Também foi possível detectar a presença de DNA de T. evansi em um cão através de Reação em Cadeia da Polimerase (PCR) utilizando um alvo específico de DNA nuclear satélite de Trypanosoma (Trypanozoon) sp. Para os morcegos foi realizado diagnóstico molecular utilizando o mesmo alvo em 182 amostras de baço coletadas em quatro expedições realizadas durante os anos de 2014 e 2015 no PZ, sendo detectados dois morcegos (um Carollia perspicillata e um Artibeus lituratus) positivos. As sequências de DNA obtidas nas reações de PCR do cão e do morcego C. perspicillata mostraram similaridade com DNA satélite de T. brucei (K00392.1), com cobertura de 90% e identidade de 89%. Esfregaços sanguíneos e/ou RIFI anti-T. evansi foram realizadas em 51 capivaras de áreas rurais e urbanas da região coletadas em 2015. Todos os esfregaços sanguíneos (n=43) foram negativos, mas a infecção por T. evansi foi sorologicamente confirmada em 17,4% dos 46 roedores avaliados utilizando-se um conjugado anti-Cavia sp. Com os resultados obtidos no presente estudo foi possível confirmar a hipótese de transmissão silenciosa de T. evansi em Rio Branco/AC e a participação de ao menos três espécies de mamíferos (cães, morcegos e capivaras) neste ciclo. Trata-se da primeira descrição de T. evansi na região norte do país desde sua detecção em 1830 e a primeira confirmada através de diagnóstico molecular e sequenciamento de produto amplificado.

Alessandra Filgueiras Gonzalez Araujo Santos Trypanosoma (Trypanozoon) evansi was the first pathogenic mammalian trypanosome ever described. It is the most dispersed Trypanosoma species and the one that infects the highest variety of hosts worldwide. T. evansi is a parasite of great medical-veterinary importance, exclusive of mammalian blood and its transmission occurs through mechanical vectors. The first description of this parasite in Brazil was performed in the Marajo Island/ PA and, since then, no reports of the parasites presence in the Northern Region of Brazil was done. In 2014, a dog from Rio Branco/AC was suspected of T. evansi infection, due to the its symptoms and the observation of flagellated parasites, without evident kinetoplast, in dogs blood smear. The aim of this work was to investigate the occurrence of T. evansi in dogs, bats and capybaras from Rio Branco/AC through parasitological, serological and molecular approaches. Our hypothesis was the existence of an unreported transmission of the parasite in the area. Blood was collected from 78 dogs from areas near the Zoobotanical Park (PZ), which belongs to the Federal University of Acre (UFAC). The parasitological diagnosis made in dogs consisted in blood cultures (searching for T. cruzi infection as differential diagnosis), fresh buffy coat examination and blood smear analysis, and all of them were negative. The serological diagnosis by Indirect Fluorescent Antibody Test (IFAT) detected the presence of anti-T. evansi and anti-T. cruzi antibodies in 20.5% and 26% of the evaluated animals, respectively. It was also possible to detect the presence of T. evansi DNA in one dogs blood through Polymerase Chain Reaction (PCR) using a specific nuclear DNA target of Trypanosoma (Trypanozoon) sp. The molecular diagnosis in bats was performed using the same above-mentioned molecular target in 182 spleen samples collected in four expeditions during 2014 and 2015 in PZ. Two bats (one Carollia perspicillata and one Artibeus lituratus) were positive. The DNA sequences obtained in the PCR reactions from the dog and the C. persipicillata bat showed similarity with T. brucei satellite DNA (K00392.1), with 90% of coverage and 89% of identity. Blood smears and/or anti-T.evansi IFAT were carried out in 51 capybaras collected in 2015 in rural and urban areas of the region. All blood smears (n=43) were negative, but T. evansi infection was serologically confirmed in 17.4% of the 46 evaluated rodents using anti-Cavia sp. conjugate. We herein confirmed the hypothesis of silent transmission of T. evansi in Rio Branco/AC, which includes at least three mammal species (dogs, bats and capybaras) in its transmission cycle. This is the first description of T. evansi in the Northern Region of Brazil since 1830 and the first one that confirmed the infection using molecular diagnosis and analysis of the sequenced amplified products

Experimental Infection by Tripanossoma evansi in Rabbits: Levels of Sodium, Potassium, Calcium and Phosphorus in Serum

Background: Trypanosoma evansi is the most widely distributed of the pathogenic African animal trypanosomes, affecting domestic livestock and wildlife in country. The animals presented clinical sings as anemia, emaciation, apathy, recurrent fever , enlarged lymph nodes, edema and abortion The minerals have different functions in the organism, and an imbalance, either by excess or deficiency, or a pathological condition, causes alterations in the respective serum levels, as well as in trypanosomosis. Therefore, the aim of this study was to evaluate the concentrations of sodium, potassium, calcium and phosphorus in blood serum of rabbits experimentally infected with Trypanosoma evansi. Materials, Methods & Results: Twelve adult female Oryctolagus cuniculus, weighing average 3.9 kg, were used. Rabbits were divided into two groups, a control group with six animals (rabbits 1-6) and an infected group with six animals (rabbits 7-12). Animals from trypanosome-infected groups were inoculated intraperitoneally with 0.5 mL of rat blood containing 10 8 trypanosomes (Day 1). Control group received physiological solution by the same route. Parasitemia was estimated daily for 118 days post- inoculation (PI) by microscopic examination of smears. Blood samples for hematology and evaluation of serum minerals were collected at days 1, 5, 20, 35, 50, 80 and 118 PI. Hematocrit was evaluated for monitoring of the disease. Inductively coupled plasma optical emission spectrometry (ICP OES) was used to measure the levels of sodium, potassium, calcium and phosphorus. Hyporexia, edema and fever were clinical signs associated with change in the levels of the minerals. A decrease in the number of red blood cells was only observed at day 5 post-inoculation. Significant differences were observed among groups (P < 0.05) in minerals levels. Sodium and calcium were reduced at days 35, 50, 80 and 118 PI. [...]

Experimental Infection by Tripanossoma evansi in Rabbits: Levels of Sodium, Potassium, Calcium and Phosphorus in Serum

Background: Trypanosoma evansi is the most widely distributed of the pathogenic African animal trypanosomes, affecting domestic livestock and wildlife in country. The animals presented clinical sings as anemia, emaciation, apathy, recurrent fever , enlarged lymph nodes, edema and abortion The minerals have different functions in the organism, and an imbalance, either by excess or deficiency, or a pathological condition, causes alterations in the respective serum levels, as well as in trypanosomosis. Therefore, the aim of this study was to evaluate the concentrations of sodium, potassium, calcium and phosphorus in blood serum of rabbits experimentally infected with Trypanosoma evansi. Materials, Methods & Results: Twelve adult female Oryctolagus cuniculus, weighing average 3.9 kg, were used. Rabbits were divided into two groups, a control group with six animals (rabbits 1-6) and an infected group with six animals (rabbits 7-12). Animals from trypanosome-infected groups were inoculated intraperitoneally with 0.5 mL of rat blood containing 10 8 trypanosomes (Day 1). Control group received physiological solution by the same route. Parasitemia was estimated daily for 118 days post- inoculation (PI) by microscopic examination of smears. Blood samples for hematology and evaluation of serum minerals were collected at days 1, 5, 20, 35, 50, 80 and 118 PI. Hematocrit was evaluated for monitoring of the disease. Inductively coupled plasma optical emission spectrometry (ICP OES) was used to measure the levels of sodium, potassium, calcium and phosphorus. Hyporexia, edema and fever were clinical signs associated with change in the levels of the minerals. A decrease in the number of red blood cells was only observed at day 5 post-inoculation. Significant differences were observed among groups (P < 0.05) in minerals levels. Sodium and calcium were reduced at days 35, 50, 80 and 118 PI. [...](AU)

CLONAGEM DO GENE DA PROTEÍNA DE CHOQUE TÉRMICO DE 70 kDa (HSP70) DE Trypanosoma evansi

BOAVENTURA, Bruna Larissa. CLONAGEM DO GENE DA PROTEÍNA DE CHOQUE TÉRMICO DE 70 kDa (HSP70) de Trypanosoma evansi.66f. Tripanossomoses são doenças causadas por protozoários pertencentes ao gênero Trypanosoma que podem infectar uma ampla gama de animais, inclusiveo homem. OTrypanosoma evansi é um hemoparasito que acomete várias espécies de animais, principalmente equinos, sendo responsável pela enfermidade conhecida como tripanossomose equina, tendo relato também de sua ocorrência em humanos,sendo, por tanto uma zoonose. Possui ampla distribuição geográfica, e é importante causa de prejuízos econômicos em criações de equinos. O controle do agente é feito por meio da utilização de tripanocidas, porém, ao longo dos anos têm sido descritas cepas resistentes às drogas atualmente disponíveis. As proteínas de choque térmico da família HSP 70 são componentes centrais da rede celular, auxiliando em diversas funções como dobramento de proteínas e se destacando como importantes alvos para terapias gênicas e biomarcadores por serem proteínas altamente conservadas em diversos parasitos. A realização deste trabalho teve como objetivo clonar o gene codificante para a proteína HSP70 de T. evansi (TEHSP70) e realizar estudos in silico com a proteína TEHSP70. A clonagem do gene TEHSP70 em pGEM- T easy®, foi bem sucedida e a partir do seu sequenciamento obteve-se a sequencia de nucleotídeos que, traduzida, forneceu a sequencia primária da proteína alvo TEHSP70. A sequência de TEHSP70 foi comparada com de ortólogos de genes de Trypanosomas disponíveis em banco de dados públicos e os resultados mostraram que TEHSP70 possui alta similaridade filogenética com as espécies de Trypanosomas de maior ocorrência. A análise de bioinformática realizada na HSP70 e sua co-chaperona HSP40 demonstrou que a região C-terminal da HSP70 pode atuar como um potente alvo para interrupção do ciclo biológico do parasito.O estudo de proteínas funcionais, envolvidas no metabolismo do parasito, pode servir de base para o desenvolvimento de novas drogas.

BOAVENTURA, Bruna Larissa. CLONING OF HEAT SHOCK PROTEIN HSP70 GENE IN Trypanosoma evansi. 2016. 66p. Trypanosomes are diseases caused by protozoa belonging to the genus Trypanosoma that can infect a wide range of animals, including man.Trypanosoma evansi is a hemoparasite that affects several species of animals, mainly equines, being responsible for the disease known as equine trypanosomiasis, and also reports of its occurrence in humans, being, therefore, a zoonosis.It has a wide geographical distribution, and is an important cause of economic losses in equine breeding. Control of the agent is done through the use oftrypanocides, however, over the years, resistant strains of drugs currently available have been described.The heat shock proteins of the HSP 70 family are central components of the cellular network, assisting in several functions such as protein folding and stand out as important targets for gene therapies and biomarkers because they are proteins highly conserved in several parasites.The objective of this work was to clone the gene coding for the HSP70 protein of T. evansi (TEHSP70) and to perform in silico studies with the TEHSP70 protein.Cloning of the TEHSP70 gene in pGEM-T easy® was successful and from its sequencing the nucleotide sequence was obtained which translated gave the primary sequence of the target protein TEHSP70. The sequence of TEHSP70 was compared with that of orthologs of Trypanosome genes available in public database and the results showed that TEHSP70 has high phylogenetic similarity with the most frequent species of Trypanosomes.The bioinformatics analysis performed on HSP70 and its HSP40 co-chaperone demonstrated that the C-terminal region of HSP70 may act as a potent target for disruption of the parasite's life cycle.The study of functional proteins, involved in the metabolism of the parasite, can serve as the basis for the development of new drugs.

Tripanossomose em equinos na região sul do Brasil / Trypanosomosis in equines in southern Brazil

Trypanosoma evansi (T. evansi) is a protozoan which causes trypanosomosis in livestock in many countries of Southeast Asia, Africa and South America. Patterns of disease vary from acute epidemics with high case-fatality rates to subclinical and/or chronic disease in endemic animal populations. It is a problem of great economic importance due to the death of sick animals and high cost of treatment. This article aims to review the outbreaks of the infection by T. evansi in horses that occurred in southern Brazil.

Tripanossomose em equinos na região sul do Brasil / Trypanosomosis in equines in southern Brazil

Trypanosoma evansi (T. evansi) is a protozoan which causes trypanosomosis in livestock in many countries of Southeast Asia, Africa and South America. Patterns of disease vary from acute epidemics with high case-fatality rates to subclinical and/or chronic disease in endemic animal populations. It is a problem of great economic importance due to the death of sick animals and high cost of treatment. This article aims to review the outbreaks of the infection by T. evansi in horses that occurred in southern Brazil.(AU)

Plasma imune de coelho com infecção aguda no controle da parasitemia por Trypanosoma evansi em ratos infectados experimentalmente / Immune plasma of rabbits with acute infection in the control of Trypanosoma evansi parasitemia in experimentally infected rats

O objetivo deste estudo foi comparar o efeito do plasma imune in natura e congelado de coelhos com infecção aguda no controle profilático e curativo do Trypanosoma evansi em ratos parasitados. Foram utilizados, um coelho e 30 ratos adultos. O coelho foi infectado com 0,5 ml de sangue contendo tripomastigotas. Ao apresentar o parasita na corrente sanguínea, foi coletado o sangue e deste obtido o plasma, o qual foi armazenado em tubos de criopreservação e congelado, "plasma congelado" e a outra metade foi mantida a 37°C por 30 minutos, "plasma in natura". Os ratos foram separados em seis grupos homogêneos, sendo todos infectados intraperitonialmente com 4,5 x 104 tripomastigotas de um isolado de T. evansi. Foram administrados 0,8ml de plasma nos tratamentos profilático (grupos A e B), dois dias antes da inoculação do parasito, e curativo (grupos C e D), dois dias após inoculação do T. evansi. O grupo E recebeu apenas solução fisiológica, grupo controle. O plasma congelado foi administrado nos grupos A e C e o plasma "in natura" nos grupos B e D. Os efeitos do plasma de coelhos com infecção aguda foi avaliado através do período pré-patente, sobrevida e cura dos ratos. Não houve diferença entre os períodos pré-patente. Foi observada uma longevidade superior dos ratos do grupo B que foi tratado com plasma "in natura" profilaticamente. Nenhum animal obteve a cura da infecção, porém podemos concluir que a terapêutica com plasma imune de coelhos aumenta a sobrevida de ratos infectados com T. evansi.

This study was aimed to compare the effect of fresh and frozen immune plasma of rabbits with acute infection in the prophylactic and curative control of Trypanosoma evansi-infected rats. Thirty adult rats and a rabbit were used. The rabbit was infected with 0.5ml of blood containing trypomastigotes. Showing the parasite in the bloodstream, plasma was obtained and divided in frozen and fresh plasma. Frozen plasma was stored in cryopreservation tubes and frozen. Fresh plasma was kept at 37°C for 30 minutes. The rats were separated into six equal groups, all infected intraperitoneally with 4.5 x 104 trypomastigotes of the T. evansi strain. Each rat from prophylatic (A and B) and curative(C and D) groups received 0.8ml of plasma. Animals from group E(control group) received only saline. Frozen plasma was administered in groups A and C and the fresh plasma in groups B and D. The effects of rabbits plasma with acute infection was estimated by evaluation of the prepatency period, longevity and curative effects of rats. No difference was observed in the prepatency period. The longevity of the animals treated prophylactically with fresh plasma (group B) was superior than the other groups. No curative effect was observed in the animals, but based upon the results it is concluded that the treatment with immune plasma of rabbits increases the longevity ofT. evansi-infected rats.

Plasma imune de coelho com infecção aguda no controle da parasitemia por Trypanosoma evansi em ratos infectados experimentalmente / Immune plasma of rabbits with acute infection in the control of Trypanosoma evansi parasitemia in experimentally infected rats

O objetivo deste estudo foi comparar o efeito do plasma imune in natura e congelado de coelhos com infecção aguda no controle profilático e curativo do Trypanosoma evansi em ratos parasitados. Foram utilizados, um coelho e 30 ratos adultos. O coelho foi infectado com 0,5 ml de sangue contendo tripomastigotas. Ao apresentar o parasita na corrente sanguínea, foi coletado o sangue e deste obtido o plasma, o qual foi armazenado em tubos de criopreservação e congelado, “plasma congelado” e a outra metade foi mantida a 37°C por 30 minutos, “plasma in natura”. Os ratos foram separados em seis grupos homogêneos, sendo todosinfectados intraperitonialmente com 4,5 x 104 tripomastigotas de um isolado de T. evansi. Foram administrados 0,8ml de plasma nos tratamentos profilático (grupos A e B), dois dias antes da inoculação do parasito, e curativo (grupos C e D), dois dias após inoculação do T. evansi. O grupo E recebeu apenas solução fisiológica, grupo controle. O plasma congelado foi administrado nos grupos A e C e o plasma “in natura” nos grupos B e D. Os efeitos do plasma de coelhos com infecção aguda foi avaliado através do período pré-patente, sobrevida e cura dos ratos. Não houve diferença entre os períodos pré patente. Foi observada uma longevidade superior dos ratos do grupo B que foi tratado com plasma “in natura” profilaticamente. Nenhum animal obteve a cura da infecção, porém podemos concluir que a terapêutica com plasma imune de coelhos aumenta a sobrevida de ratos infectados com T. evansi.(AU)

This study was aimed to compare the effect of fresh and frozen immune plasma of rabbits with acute infection in the prophylactic and curative control of Trypanosoma evansi-infected rats. Thirty adult rats and a rabbit were used. The rabbit was infected with 0.5ml of blood containing trypomastigotes. Showing the parasite in the bloodstream, plasma was obtained and divided in frozen and fresh plasma. Frozen plasma was stored in cryopreservation tubes and frozen. Fresh plasma was kept at 37°C for 30 minutes. The rats were separated into six equal groups, all infected intraperitoneally with 4.5 x 104 trypomastigotes of the T. evansi strain. Each rat from prophylatic (A and B) and curative(C and D) groups received 0.8ml of plasma. Animals from group E (control group) received only saline. Frozen plasma was administered in groups A and C and the fresh plasma in groups B and D. The effects of rabbits plasma with acute infection was estimated by evaluation of the prepatency period, longevity and curative effects of rats. No difference was observed in the prepatency period. The longevity of the animals treated prophylactically with fresh plasma (group B) was superior than the other groups. No curative effect was observed in the animals, but based upon the results it is concluded that the treatment with immune plasma of rabbits increases the longevity of T. evansi-infected rats.(AU)

Antigenic characterization of Trypanosoma evansiusing sera from experimentally and naturally infected bovines, equines, dogs, and coatis / Caracterização antigênica do Trypanosoma evansi usando soros de bovinos, equinos, cães e quatis experimentalmente e naturalmente infectados

O trabalho de pesquisa investigou a presença de anticorpos anti- T. evansi em animais da sub-região da Nhecolândia, no Pantanal sul-mato-grossense, pelo ensaio imunoenzimático (ELISA) e a reação de imunofluorescência indireta (RIFI). O reconhecimento de polipeptídeos de T. evansi foi realizado pela técnica de “Western blotting”, utilizando soros de animais experimentalmente e naturalmente infectados. As amostras de soro foram obtidas de bovinos (n = 102), cavalos (n = 98) e cães (n = 55) e de 32 quatis de vida livre (Nasua nasua) do pantanal mato-grossense. Todos os soros dos bovinos foram negativos, enquanto soros de 16 cães (29%) e 23 cavalos (23,4%) foram positivos pelo ELISA. Soros de oito quatis (25%) foram positivos pela RIFI. Pelo “Western-blotting” foi possível revelar polipeptídeos de T. evansi, com peso molecular variando de 74 a 38 kDa. Os polipeptídeos de 66, 48-46 e 38 kDa foram identificados por soros de bovinos, cavalos, cães e quatis experimentalmente infectados. As bandas de 48-46 e 38 kDa foram reconhecidas principalmente na fase crônica da infecção. O antígeno com peso molecular aparente de 66 kDa, revelado por anticorpos de todos os animais experimentais, também foi reconhecido por soros de cavalos e cães do Pantanal. O polipeptídeo de 48-46 kDa foi identificado por anticorpos de todos os animais naturalmente infectados, devendo ser avaliado para o diagnóstico específico da infecção pelo T. evansi.(AU)

The present research investigated the presence of T. evansi antibodies in animals from the subregion of Nhecolandia, in the Pantanal Sul-mato-grossense, by means of an enzyme linked immunosorbent assay (ELISA) and indirect immunofluorescence antibody test (IFAT), and the pattern of polypeptide recognition by sera from experimentally and naturally infected hosts using Western blotting. Serum samples were obtained from bovines (n = 102), horses (n = 98), and dogs (n = 55), and from 32 free-ranging coatis (Nasua nasua). None of the bovines were found positive, while sera from 16 dogs (29%) and 23 horses (23.4%) were positive by ELISA. Sera from 8 coatis (25%) were found positive using IFAT. Western blotting revealed major polypeptides of T. evansi with molecular weight ranging from 74 to 38 kDa. The polypeptides of 66, 48-46, and 38 kDa were identified by sera from experimentally infected bovines, donkeys, dogs, and coatis. The 48-46 and 38 kDa bands were mainly recognized in chronic phase of infection. The antigen with apparent molecular weight of 66 kDa, revealed by antibodies from all experimental animals, was also recognized in sera of horses and dogs from the Pantanal. The 48-46 kDa polypeptide was identified by antibodies from all naturally infected animals and must be further evaluated for use in specific diagnosis of T. evansi infection.(AU)

Trypanosoma evansi: Ultrastructural Cardiac Muscle and Cardiac Microvasculature Changes in Experimental Murine Infections

Background: Trypanosoma evansi is the etiologic agent of the equine trypanosomosis, a disease related to the detriment of the extensive bovine farming in the Venezuelan grasslands. Even though macroscopic pathologies such as anemia, pale mucosa, icteric tissues, generalized edema, splenomegaly, liver and renal hypertrophy, abortion, anoestrus, emaciation, lymphadenopathies, striated muscle atrophy as well as epicardiac and endocardiac hemorrhages have been described for infections with the agent, no reports of any heart ultrastructural change in experimental or natural infections induced by Venezuelan T. evansi isolates are available. So, a transmission electron microscopic approach to the problem was needed. This work describes cell features of the cardiac myocyte and the cardiac microvasculature ultrastructure in mice experimentally infected with an equine local isolate of T. evansi, also providing an account of the infection with the mice’s survival. Materials, Methods & Results: NMRI Mus musculus were inoculated with a Venezuelan T. evansi isolate derived from a naturally infected Equus caballus. From day three post-infection, and every other day until the mice’s death, one rodent was randomly killed, the heart apex was isosmotically removed and cut in symmetrical blocks, which were fixed, post-fixed, dehydrated, infiltrated, included, sectioned, contrasted and studied by means of transmission electron microscopy, with the subsequent characterization of the cardiac myocyte and the cardiac microvasculature transformations. The evaluation of the micrographs demonstrated ultrastructural time-increasing harmful mitochondrial alterations that included reduction in the number of mitochondria per cell, decrease in mitochondrial dimensions and lessening of the number of cristae per mitochondrion. Myofibrillar destruction, myofilament loss and atrophy were also evident.(...)

Trypanosoma evansi: Ultrastructural Cardiac Muscle and Cardiac Microvasculature Changes in Experimental Murine Infections

Background: Trypanosoma evansi is the etiologic agent of the equine trypanosomosis, a disease related to the detriment of the extensive bovine farming in the Venezuelan grasslands. Even though macroscopic pathologies such as anemia, pale mucosa, icteric tissues, generalized edema, splenomegaly, liver and renal hypertrophy, abortion, anoestrus, emaciation, lymphadenopathies, striated muscle atrophy as well as epicardiac and endocardiac hemorrhages have been described for infections with the agent, no reports of any heart ultrastructural change in experimental or natural infections induced by Venezuelan T. evansi isolates are available. So, a transmission electron microscopic approach to the problem was needed. This work describes cell features of the cardiac myocyte and the cardiac microvasculature ultrastructure in mice experimentally infected with an equine local isolate of T. evansi, also providing an account of the infection with the mices survival. Materials, Methods & Results: NMRI Mus musculus were inoculated with a Venezuelan T. evansi isolate derived from a naturally infected Equus caballus. From day three post-infection, and every other day until the mices death, one rodent was randomly killed, the heart apex was isosmotically removed and cut in symmetrical blocks, which were fixed, post-fixed, dehydrated, infiltrated, included, sectioned, contrasted and studied by means of transmission electron microscopy, with the subsequent characterization of the cardiac myocyte and the cardiac microvasculature transformations. The evaluation of the micrographs demonstrated ultrastructural time-increasing harmful mitochondrial alterations that included reduction in the number of mitochondria per cell, decrease in mitochondrial dimensions and lessening of the number of cristae per mitochondrion. Myofibrillar destruction, myofilament loss and atrophy were also evident.(...)(AU)

Antigenic characterization of Trypanosoma evansi using sera from experimentally and naturally infected bovines, equines, dogs, and coatis

The present research investigated the presence of T. evansi antibodies in animals from the subregion of Nhecolandia, in the Pantanal Sul-mato-grossense, by means of an enzyme linked immunosorbent assay (ELISA) and indirect immunofluorescence antibody test (IFAT), and the pattern of polypeptide recognition by sera from experimentally and naturally infected hosts using Western blotting. Serum samples were obtained from bovines (n = 102), horses (n = 98), and dogs (n = 55), and from 32 free-ranging coatis (Nasua nasua). None of the bovines were found positive, while sera from 16 dogs (29%) and 23 horses (23.4%) were positive by ELISA. Sera from 8 coatis (25%) were found positive using IFAT. Western blotting revealed major polypeptides of T. evansi with molecular weight ranging from 74 to 38 kDa. The polypeptides of 66, 48-46, and 38 kDa were identified by sera from experimentally infected bovines, donkeys, dogs, and coatis. The 48-46 and 38 kDa bands were mainly recognized in chronic phase of infection. The antigen with apparent molecular weight of 66 kDa, revealed by antibodies from all experimental animals, was also recognized in sera of horses and dogs from the Pantanal. The 48-46 kDa polypeptide was identified by antibodies from all naturally infected animals and must be further evaluated for use in specific diagnosis of T. evansi infection.

O trabalho de pesquisa investigou a presença de anticorpos anti- T. evansi em animais da sub-região da Nhecolândia, no Pantanal sul-mato-grossense, pelo ensaio imunoenzimático (ELISA) e a reação de imunofluorescência indireta (RIFI). O reconhecimento de polipeptídeos de T. evansi foi realizado pela técnica de "Western blotting", utilizando soros de animais experimentalmente e naturalmente infectados. As amostras de soro foram obtidas de bovinos (n = 102), cavalos (n = 98) e cães (n = 55) e de 32 quatis de vida livre (Nasua nasua) do pantanal mato-grossense. Todos os soros dos bovinos foram negativos, enquanto soros de 16 cães (29%) e 23 cavalos (23,4%) foram positivos pelo ELISA. Soros de oito quatis (25%) foram positivos pela RIFI. Pelo "Western-blotting" foi possível revelar polipeptídeos de T. evansi, com peso molecular variando de 74 a 38 kDa. Os polipeptídeos de 66, 48-46 e 38 kDa foram identificados por soros de bovinos, cavalos, cães e quatis experimentalmente infectados. As bandas de 48-46 e 38 kDa foram reconhecidas principalmente na fase crônica da infecção. O antígeno com peso molecular aparente de 66 kDa, revelado por anticorpos de todos os animais experimentais, também foi reconhecido por soros de cavalos e cães do Pantanal. O polipeptídeo de 48-46 kDa foi identificado por anticorpos de todos os animais naturalmente infectados, devendo ser avaliado para o diagnóstico específico da infecção pelo T. evansi.

Patogenicidade de um isolado de Trypanosoma evansi em ratos inoculados com o parasito em sangue in natura e criopreservado

This study aimed to evaluate the Trypanosoma evansi strain pathogenicity (LPV-2005) in rats under passive immunity influence, of different concentrations and media preservation. Thirty six adult female Rattus norvergicus were separated in six equal groups. Groups A and B were inoculated with 10(5) T. evansi and groups C and D with 10(6) blood trypomastigotes per animal. Groups E and F were used as negative control in which the animals were inoculated with fresh and cryopreserved blood, without the parasite. Group A were composed of T. evansi infected born rats and cured females. Groups B, C and D were composed with animals never exposed to the LPV-2005 strain. All groups B and C animals received different doses of blood trypomastigotes kept in Wistar rats, while animals from group D were infected with cryopreserved blood kept in liquid nitrogen. The the strain pathogenicity was estimated by prepatency evaluation period, levels of parasitemia and animals longevity. Group D showed a longer prepatency period in comparison with other groups. The longevity of group D (27.8 days) was significantly different (P 0.05) from group C (4.8 days). Rats of the control group were euthanized 50 days postinfection. In conclusion, the tested inoculum-preservation methods and the infective dose of T. evansi influenced the pathogenicity of the LPV-2005 strain in rats. The presence of maternal antibodies did not prevent the infection and mortality of the rats by T. evansi.

O objetivo deste estudo foi investigar a patogenicidade do isolado de Trypanosoma evansi (LPV-2005), em ratos (Rattus norvergicus), sob influência da imunidade passiva, de diferentes concentrações e de meios de conservação. Para tanto, foram utilizados 36 Rattus norvergicus, fêmeas, separados em seis grupos homogêneos. Os roedores dos grupos A e B foram infectados com 10(5) T. evansi, e os animais dos grupos C e D foram infectados com 10(6) tripomastigotas/animal. Os grupos E e F foram utilizados como grupo controle negativo, isto é, inoculados com sangue in natura e criopreservado sem o parasito, respectivamente. O grupo A foi formado por ratos filhos de fêmeas infectadas com protozoário, mas curadas após tratamento. Os grupos B, C e D continham roedores que nunca tiveram contato com o isolado LPV-2005. Os grupos B e C diferiram quanto à dose inoculada do flagelado mantida em cultura viva (ratos Wistar). Já os ratos do grupo D foram infectados com sangue criopreservado em nitrogênio líquido. A patogenicidade do isolado foi avaliada a partir do período pré-patente, da evolução da parasitemia e da longevidade dos animais. O grupo D apresentou um período pré-patente superior aos demais grupos. Em relação à longevidade dos animais de cada grupo, foi verificada diferença estatística significativa (P 0,05). O grupo D apresentou um período de vida de 27,8 dias, e o grupo C, de apenas 4,8 dias. Os ratos de ambos os grupos controle mantiveram-se vivos por 50 dias, quando foram eutanasiados. Portanto, a preservação do inóculo testado e a dose infectante de T. evansi influenciam a patogenicidade do isolado LPV-2005 para ratos. A presença de anticorpos maternos em ratos não impede a infecção e mortalidade por T. evansi.

Patogenicidade de um isolado de Trypanosoma evansi em ratos inoculados com o parasito em sangue in natura e criopreservado

This study aimed to evaluate the Trypanosoma evansi strain pathogenicity (LPV-2005) in rats under passive immunity influence, of different concentrations and media preservation. Thirty six adult female Rattus norvergicus were separated in six equal groups. Groups A and B were inoculated with 10(5) T. evansi and groups C and D with 10(6) blood trypomastigotes per animal. Groups E and F were used as negative control in which the animals were inoculated with fresh and cryopreserved blood, without the parasite. Group A were composed of T. evansi infected born rats and cured females. Groups B, C and D were composed with animals never exposed to the LPV-2005 strain. All groups B and C animals received different doses of blood trypomastigotes kept in Wistar rats, while animals from group D were infected with cryopreserved blood kept in liquid nitrogen. The the strain pathogenicity was estimated by prepatency evaluation period, levels of parasitemia and animals longevity. Group D showed a longer prepatency period in comparison with other groups. The longevity of group D (27.8 days) was significantly different (P 0.05) from group C (4.8 days). Rats of the control group were euthanized 50 days postinfection. In conclusion, the tested inoculum-preservation methods and the infective dose of T. evansi influenced the pathogenicity of the LPV-2005 strain in rats. The presence of maternal antibodies did not prevent the infection and mortality of the rats by T. evansi.

O objetivo deste estudo foi investigar a patogenicidade do isolado de Trypanosoma evansi (LPV-2005), em ratos (Rattus norvergicus), sob influência da imunidade passiva, de diferentes concentrações e de meios de conservação. Para tanto, foram utilizados 36 Rattus norvergicus, fêmeas, separados em seis grupos homogêneos. Os roedores dos grupos A e B foram infectados com 10(5) T. evansi, e os animais dos grupos C e D foram infectados com 10(6) tripomastigotas/animal. Os grupos E e F foram utilizados como grupo controle negativo, isto é, inoculados com sangue in natura e criopreservado sem o parasito, respectivamente. O grupo A foi formado por ratos filhos de fêmeas infectadas com protozoário, mas curadas após tratamento. Os grupos B, C e D continham roedores que nunca tiveram contato com o isolado LPV-2005. Os grupos B e C diferiram quanto à dose inoculada do flagelado mantida em cultura viva (ratos Wistar). Já os ratos do grupo D foram infectados com sangue criopreservado em nitrogênio líquido. A patogenicidade do isolado foi avaliada a partir do período pré-patente, da evolução da parasitemia e da longevidade dos animais. O grupo D apresentou um período pré-patente superior aos demais grupos. Em relação à longevidade dos animais de cada grupo, foi verificada diferença estatística significativa (P 0,05). O grupo D apresentou um período de vida de 27,8 dias, e o grupo C, de apenas 4,8 dias. Os ratos de ambos os grupos controle mantiveram-se vivos por 50 dias, quando foram eutanasiados. Portanto, a preservação do inóculo testado e a dose infectante de T. evansi influenciam a patogenicidade do isolado LPV-2005 para ratos. A presença de anticorpos maternos em ratos não impede a infecção e mortalidade por T. evansi.

Canine trypanosomiasis: etiology of infection and implications for public health

Canine trypanosomiasis, caused by protozoans of the genus Trypanosoma, is divided into two primary types: the American form (Chagas disease), due to Trypanosoma cruzi infection, and the African form (sleeping sickness or surra), provoked by Trypanosomaevansi. This disease was originally enzootic and affected only wild animals, including mammals and birds, which served as reservoirs. Later, it spread to domestic animals such as horses, cattle and dogs. The disease became a zoonosis when contact between rural inhabitants and natural Trypanosoma foci occurred, due to ecological imbalances and increasing migration. Dogs are significantly involved in this context, because they are the main domestic animals and participate in the transmission and maintenance cycles of these parasites. This article reports etiological, epidemiological and public health aspects of canine trypanosomiasis, and the most important peculiarities of this zoonosis in dogs.(AU)