Detection of Treponema spp. in bovine digital dermatitis in the Amazon biome, Brazil / Detecção de Treponema spp. em dermatite digital bovina no bioma amazônico, Brasil

Bovine digital dermatitis (BDD) is a polybacterial claw disease that is endemic to dairy cattle kept in loose house systems, and treponemas are the main bacteria implicated in this disease. The objective of this study was to report the occurrence of Treponema spp. in BDD from crossbred dairy cattle (Holstein x Zebu) kept in a pasture in the Brazilian Amazon biome. The diagnostic of BDD was performed by inspecting the distal extremities of cattle during milking in one or more visits comprising 15 farms. In total, it could be inspected 1,847 cows from August 2016 to July 2017, and 25 lesions of BDD were diagnosed. The feet were scored (System M: M0 = no lesion, M1 = ulcer stage <2cm, M2 = ulcer stage >2cm, M3 = healing stage, M4 = chronic stage, M4.1 = chronic stage with ulcer area). Twenty four biopsy samples were taken from feet with BDD and five biopsy samples from feet with no lesions. The histopathology of stained tissues was performed by hematoxylin and eosin and Warthin-Starry method. The samples were also tested by nested PCR for the three previously isolated BDD Treponema phylogroups (T. medium/T. vincentii-like, T. phagedenis-like and T. putidum/T. denticola-like). Spirochetes were observed in 54.2% (13/24) of the lesions, and in 91.7% (22/24) of the samples were detected the DNA of this spirochete belonging to the treponema phylogroups implicated in BDD. In 25% (6/24) of the lesions were detected all the phylogroups. Forty percent (40%, 2/5) of the M0 samples were also positive for the nested Polymerase Chain Reaction (nested-PCR), as 8.3% (2/24) of the lesions were negative in both techniques employed. Treponema putidum/T. denticola-like was the most detected bacterial in all the stages, and active lesions (M2 and M4.1) presented a greater proportion of T. medium/T. vincentii-like and T. phagedenis-like, but no statistical differences were observed (p>0.05). It could be concluded that BDD lesions in crossbred dairy cattle kept to pasture in the Amazon biome were classified as "polytreponemal" infections and the phylogroup T. putidum/T. denticola-like was the most frequent in the lesions.(AU)

Dermatite digital bovina (DDB) é uma enfermidade polibacteriana dos dígitos endêmica em vacas leiteiras criadas em estábulos e as treponemas são as principais bactérias envolvidas. Este estudo teve como objetivo relatar a ocorrência de Treponema spp. em DDB em bovinos leiteiros mestiços (Holandês x Zebu) criados a pasto no bioma amazônico brasileiro. O diagnóstico da DDB foi realizado pela inspeção, em uma ou mais visitas, das extremidades distais das vacas durante a ordenha em 15 propriedades. No total, foram inspecionadas 1.847 vacas de agosto de 2016 a julho de 2017 e diagnosticou-se 25 lesões de DDB. As extremidades distais inspecionadas foram classificadas em escores (M0 = sem lesão, M1 = estágio ulcerado <2cm, M2 = estágio ulcerado >2cm, M3 = estágio em cicatrização, M4 = estágio crônico, M4.1 = estágio crônico com área ulcerada) e realizada 24 biópsias de dígitos com DDB e cinco biópsias de dígitos em estágio M0. Foram realizadas a histopatologia pelas colorações de hematoxilina e eosina e pelo método de Warthin-Starry, e a nested de reação em cadeia de polimerase (nested-PCR) para os três filogrupos de treponemas previamente isolados de DDB (Treponema medium/T. vincentii-like, T. phagedenis-like e T. putidum/T. denticola-like). Espiroquetas foram observadas em 54,2% (13/24) das lesões e em 91,7% (22/24) detectou-se o DNA de, pelo menos, um dos filogrupos de treponemas pesquisados. Em 25% (6/24) das lesões foram detectados o DNA dos três filogrupos. Em 40% (2/5) das amostras em estágio M0 também foram positivas na nested-PCR, assim como 8,3% (2/24) das lesões foram negativas em ambas as técnicas empregadas. T. putidum/T. denticola-like foi o filogrupo mais detectado em todos os estágios e lesões ativas (M2 e M4.1) apresentaram uma maior proporção para Treponema medium/T. vincentii-like e T. phagedenis-like, mas não se obteve diferença estatística na ocorrência dos filogrupos entre os estágios das lesões (P>0,05). Conclui-se que lesões de DDB em rebanhos leiteiros mestiços criados a pasto no bioma amazônico brasileiro são "politreponemais" e o filogrupo T. putidum/T. denticola-like é o mais frequente nas lesões.(AU)

Detection of Treponema spp. in bovine digital dermatitis in the Amazon biome, Brazil / Detecção de Treponema spp. em dermatite digital bovina no bioma amazônico, Brasil

Bovine digital dermatitis (BDD) is a polybacterial claw disease that is endemic to dairy cattle kept in loose house systems, and treponemas are the main bacteria implicated in this disease. The objective of this study was to report the occurrence of Treponema spp. in BDD from crossbred dairy cattle (Holstein x Zebu) kept in a pasture in the Brazilian Amazon biome. The diagnostic of BDD was performed by inspecting the distal extremities of cattle during milking in one or more visits comprising 15 farms. In total, it could be inspected 1,847 cows from August 2016 to July 2017, and 25 lesions of BDD were diagnosed. The feet were scored (System M: M0 = no lesion, M1 = ulcer stage <2cm, M2 = ulcer stage >2cm, M3 = healing stage, M4 = chronic stage, M4.1 = chronic stage with ulcer area). Twenty four biopsy samples were taken from feet with BDD and five biopsy samples from feet with no lesions. The histopathology of stained tissues was performed by hematoxylin and eosin and Warthin-Starry method. The samples were also tested by nested PCR for the three previously isolated BDD Treponema phylogroups (T. medium/T. vincentii-like, T. phagedenis-like and T. putidum/T. denticola-like). Spirochetes were observed in 54.2% (13/24) of the lesions, and in 91.7% (22/24) of the samples were detected the DNA of this spirochete belonging to the treponema phylogroups implicated in BDD. In 25% (6/24) of the lesions were detected all the phylogroups. Forty percent (40%, 2/5) of the M0 samples were also positive for the nested Polymerase Chain Reaction (nested-PCR), as 8.3% (2/24) of the lesions were negative in both techniques employed. Treponema putidum/T. denticola-like was the most detected bacterial in all the stages, and active lesions (M2 and M4.1) presented a greater proportion of T. medium/T. vincentii-like and T. phagedenis-like, but no statistical differences were observed (p>0.05). It could be concluded that BDD lesions in crossbred dairy cattle kept to pasture in the Amazon biome were classified as "polytreponemal" infections and the phylogroup T. putidum/T. denticola-like was the most frequent in the lesions.(AU)

Dermatite digital bovina (DDB) é uma enfermidade polibacteriana dos dígitos endêmica em vacas leiteiras criadas em estábulos e as treponemas são as principais bactérias envolvidas. Este estudo teve como objetivo relatar a ocorrência de Treponema spp. em DDB em bovinos leiteiros mestiços (Holandês x Zebu) criados a pasto no bioma amazônico brasileiro. O diagnóstico da DDB foi realizado pela inspeção, em uma ou mais visitas, das extremidades distais das vacas durante a ordenha em 15 propriedades. No total, foram inspecionadas 1.847 vacas de agosto de 2016 a julho de 2017 e diagnosticou-se 25 lesões de DDB. As extremidades distais inspecionadas foram classificadas em escores (M0 = sem lesão, M1 = estágio ulcerado <2cm, M2 = estágio ulcerado >2cm, M3 = estágio em cicatrização, M4 = estágio crônico, M4.1 = estágio crônico com área ulcerada) e realizada 24 biópsias de dígitos com DDB e cinco biópsias de dígitos em estágio M0. Foram realizadas a histopatologia pelas colorações de hematoxilina e eosina e pelo método de Warthin-Starry, e a nested de reação em cadeia de polimerase (nested-PCR) para os três filogrupos de treponemas previamente isolados de DDB (Treponema medium/T. vincentii-like, T. phagedenis-like e T. putidum/T. denticola-like). Espiroquetas foram observadas em 54,2% (13/24) das lesões e em 91,7% (22/24) detectou-se o DNA de, pelo menos, um dos filogrupos de treponemas pesquisados. Em 25% (6/24) das lesões foram detectados o DNA dos três filogrupos. Em 40% (2/5) das amostras em estágio M0 também foram positivas na nested-PCR, assim como 8,3% (2/24) das lesões foram negativas em ambas as técnicas empregadas. T. putidum/T. denticola-like foi o filogrupo mais detectado em todos os estágios e lesões ativas (M2 e M4.1) apresentaram uma maior proporção para Treponema medium/T. vincentii-like e T. phagedenis-like, mas não se obteve diferença estatística na ocorrência dos filogrupos entre os estágios das lesões (P>0,05). Conclui-se que lesões de DDB em rebanhos leiteiros mestiços criados a pasto no bioma amazônico brasileiro são "politreponemais" e o filogrupo T. putidum/T. denticola-like é o mais frequente nas lesões.(AU)

Associação à positividade da Lawsonia intracellularis com a expressão clínico-patológica da infecção em suínos da região metropolitana de Bucaramanga (Santander, Colômbia) / Association to positivity of Lawsonia intracellularis with the clinical and pathologic expression of infection in swine from the metropolitan area of Bucaramanga (Santander, Colombia)

Porções de íleo terminal foram coletados de 100 suínos com sinais de doença gastrointestinal na área metropolitana de Bucaramanga, a fim de se estudar a eficiência do diagnóstico de enteropatia proliferativa suína (PPE) pela técnica de PCR aninha (PCRa) empregando sequências específicas (primers) para L. intracellularis: 16S ARN região (270pb) e sua correlação com achados clínicos e patológicos. Todas as amostras foram processadas para se determinar a associação entre positividade por PCR, os sinais clínicos, os achados de necropsia e as lesões histológicas. Cinquenta e seis por cento das amostras foram positivas para L. intracellularis pela PCRa. Só 2% exibiram resultados positivos pela técnica Warthin-Starry. Trinta e um de 100 animais com sinais de anorexia resultaram positivos para PCRa (P>0,05). Não houve associação (P<0,05) entre diarreia e queda no crescimento, bem como associação (P<0,05) entre achados anatomopatológicos e histológicos com PCRa positivas.(AU)

Fragments of terminal ileum were collected from 100 pigs at slaughter from Bucaramanga Metropolitan Area (Santander, Colombia), to study the efficacy of the diagnosis of porcine proliferative enterophaty (PPE) through the technique of nested polymerase chain reaction (PCRa), employing specific sequences (primers) for L. intracellularis: 16S ARN region (270pb) and his correlation with clinic and pathological findings. All samples were processed by standard histological methods and stained with a Warthin-Starry technique. All samples were processed to determinate the association between positive PCRa results, clinical signs and necropsy findings. 56% of the 100 samples were positive for L. intracellularis through PCRa technic. Only 2% exhibited positive results through Warthin-Starry technique. A total of 31 (100) animals with anorexic symptoms were associated with positive results from PCRa (P>,05). No associations (P<0.05) were observed between diarrhea and delayed growth. No associations (P<0.05) were observed between anatomopathological and histological findings with positive PCRa.(AU)

Associação à positividade da Lawsonia intracellularis com a expressão clínico-patológica da infecção em suínos da região metropolitana de Bucaramanga (Santander, Colômbia) / Association to positivity of Lawsonia intracellularis with the clinical and pathologic expression of infection in swine from the metropolitan area of Bucaramanga (Santander, Colombia)

Porções de íleo terminal foram coletados de 100 suínos com sinais de doença gastrointestinal na área metropolitana de Bucaramanga, a fim de se estudar a eficiência do diagnóstico de enteropatia proliferativa suína (PPE) pela técnica de PCR aninha (PCRa) empregando sequências específicas (primers) para L. intracellularis: 16S ARN região (270pb) e sua correlação com achados clínicos e patológicos. Todas as amostras foram processadas para se determinar a associação entre positividade por PCR, os sinais clínicos, os achados de necropsia e as lesões histológicas. Cinquenta e seis por cento das amostras foram positivas para L. intracellularis pela PCRa. Só 2% exibiram resultados positivos pela técnica Warthin-Starry. Trinta e um de 100 animais com sinais de anorexia resultaram positivos para PCRa (P>0,05). Não houve associação (P<0,05) entre diarreia e queda no crescimento, bem como associação (P<0,05) entre achados anatomopatológicos e histológicos com PCRa positivas.(AU)

Fragments of terminal ileum were collected from 100 pigs at slaughter from Bucaramanga Metropolitan Area (Santander, Colombia), to study the efficacy of the diagnosis of porcine proliferative enterophaty (PPE) through the technique of nested polymerase chain reaction (PCRa), employing specific sequences (primers) for L. intracellularis: 16S ARN region (270pb) and his correlation with clinic and pathological findings. All samples were processed by standard histological methods and stained with a Warthin-Starry technique. All samples were processed to determinate the association between positive PCRa results, clinical signs and necropsy findings. 56% of the 100 samples were positive for L. intracellularis through PCRa technic. Only 2% exhibited positive results through Warthin-Starry technique. A total of 31 (100) animals with anorexic symptoms were associated with positive results from PCRa (P>,05). No associations (P<0.05) were observed between diarrhea and delayed growth. No associations (P<0.05) were observed between anatomopathological and histological findings with positive PCRa.(AU)

Interrelação entre frequência de anticorpos anti-leptospira Spp. e exames histopatológicos (hematoxilina-eosina e Warthin Starry) em suínos abatidos no semiárido paraibano / Interrelation between frequency of anti-leptospira spp. Antibodies and findings of histopathological examinations (hematoxylin-eosin and warthin-starry) in pigs slaughtered in the semiarid of Paraiba state, northeastern Brazil

Este trabalho foi realizado em suínos abatidos no Município de Patos, Estado da Paraíba, Brasil,com o objetivo de determinar a frequência de anticorpos anti-Leptospira spp., comparando os achados sorológicos com exames histopatológicos de rim, fígado, ovário e útero. A soroaglutinação microscópica foi realizada em 126 animais. Os exames histopatológicos realizados em cortes de fígado, rim, ovário e útero, corados pela hematoxilina-eosina (HE), foram realizados em 20 animaisescolhidos aleatoriamente, sendo 10 do grupo com títulos ≥ 100 e 10 do grupo com títulos < 100. Paralelamente, foi realizada pesquisa direta de leptospiras pela técnica de Warthin-Starry em amostras de rim de todos os animais soropositivos e nos 10 animais soronegativos submetidos à HE. Dos 126 animais examinados, 18 (14,6%) foram soropositivos, com predominância de reações para o sorovar Autumnalis (11 animais; 8,73%). Quatro animais soropositivos e dois animais soronegativosapresentaram infiltrado inflamatório e necrose de graus variados em um dos rins e no fígado. Os ovários e úteros examinados não apresentaram lesões. A pesquisa direta de leptospiras pela técnica de Warthin-Starry não revelou animais positivos em nenhuma amostra testada. Em face da soropositividade encontrada (14,6%), sugere-se a importância da conscientização por parte dos produtores acerca da implantação de medidas de prevenção adequadas com o objetivo de impedir, ou pelo menos diminuir, a disseminação das leptospiras em suínos e, consequentemente, bloquear a possível transmissão do agente para os seres humanos. (AU)

Interrelation between frequency of anti-leptospira spp. Antibodies and findings of histopathological examinations (hematoxylin-eosin and warthin-starry) in pigs slaughtered in the semiarid of paraiba state, northeastern brazil. This work was conducted in slaughtered pigs in Patos County, Paraiba State, Brazil, with the aim to determine the frequency of anti-leptospira antibodies and to compare the serological findings with the histopathological findings of kidney, liver, ovary and uterus. The microscopic agglutination test (MAT) was performed on 126 animals. The histopathological examination performed in sections of livers, kidneys, ovaries and uteruses stained with hematoxylin-eosin (HE) was conducted in 20 randomly chosen animals (10 from group with serological titer ≥ 100 and 10 from group < 100). Parallel to this, a direct search for leptospires was carried out by Warthin-Starry technique in kidney samples from all seropositive animals and in the 10 seronegative animals submitted to HE. In the 126 animals examined, 18 (14.6%) were seropositive, with prevalence of reactions to Autumnalis serovar (11 animals; 8.73%). Four seropositive and two seronegative animals showed different degrees of inflammatory infiltrate and necrosis in liver or kidney. The ovaries and uterus no showed lesions. Direct analysis of leptospires by the Warthin-Starry technique did not reveal positive animals in any sample tested. The rate of seropositivity found (14.6%) suggests the importance of awareness by producers about the implementation of preventive measures aimed at preventing, or at least reducing the spread of leptospiras in pigs and thereby blocking the possible transmission of the agent to humans. (AU)

Aspectos epidemiológicos, clinico-patológicos, moleculares e tratamento tópico com óleo de copaíba da dermatite digital bovina no bioma amazônico brasileiro

Este estudo teve por objetivo descrever os aspectos epidemiológicos, clínico-patológicos e relatar a ocorrência de Treponema spp. nas lesões de DDB em vacas mestiças leiteiras criadas a pasto no bioma amazônico brasileiro. Assim como, testar o tratamento tópico com o óleo de Copaifera reticulata. Para tanto, realizou-se a inspeção das extremidades distais das vacas em lactação, durante a ordenha, em uma a quatro visitas a 15 propriedades no período de agosto de 2016 a julho de 2017. A prevalência de DDB em 10 propriedades foi de 1,3% (22/1.664) e não se obteve diferença estatística entre os períodos chuvoso e não chuvoso (P = 0,72). As lesões observadas caracterizaram-se por ulceração (estágios M1 e M2), com superfície coberta por material crostoso ou hiperqueratótico (M3 e M4) e em estágio M4 com área de ulceração (M4.1). Pelos hipertrofiados nos bordos das lesões, larvas de moscas do gênero Cochliomyia spp. e alterações no tecido córneo também foram observados. Na histologia das lesões foram observados focos de ulceração com colônias bacterianas e infiltrados polimorfonucleares, na epiderme e na derme. Hiperqueratose paraqueratótica foi observada de forma acentuada nos estágios M3, M4 e M4.1. Em 24 biópsias, obtidas de 24 bovinos de 15 propriedades, em diferentes estágios das lesões de DDB, foram observadas espiroquetas em 54,2% (13/24) das lesões (método de Warthin-Starry) e em 91,7% (22/24) detectouse o DNA de pelo menos um dos filogrupos de treponemas pesquisados pela NestedReação em Cadeia de Polimerase. T. putidum/T. denticola-like foi o filogrupo mais detectado em todos os estágios (P = 0,048) e os filogrupos Treponema medium/T. vincentii-like e T. phagedenis-like apresentaram uma maior proporção nas lesões ativas (M2 e M4.1), mas não se obteve diferença estatística na ocorrência destes filogrupos entre os estágios das lesões (P = 0,408 e P = 0,279, respectivamente). O tratamento com o óleo de copaíba apresentou um índice de cura de 83,4% (5/6) e assemelhou-se com o ácido salicílico (tratamento controle), que foi de 75% (3/4). Ambos os tratamentos apresentaram um período médio de 7 semanas da retirada da bandagem até a recuperação do tecido normal. Conclui-se neste trabalho que a DDB no bioma amazônico é uma doença politreponemal com características macro e microscópicas semelhantes às lesões de vacas leiteiras criadas em estábulos, ocorre em baixa prevalência e não é sazonal. O óleo da copaíba pode ser utilizado como auxílio a medidas de controle da DDB no bioma amazônico.

This study aimed to describe the epidemiological, clinical-pathological aspects and to report the occurrence of Treponema spp. on bovine digital dermatitis (BDD) lesions in crossbred dairy cattle kept in the Brazilian Amazon biome. As well as, test the topical treatment with Copaifera reticulata oil. For this purpose, the inspection of the distal extremities of lactating cows was performed during milking in 15 farms (one to four visits) in the period from August 2016 to July 2017. The prevalence of BDD in 10 properties was 1.3% (22 / 1,664) and no statistical difference was obtained between rainy and non-rainy periods (P = 0.72). The lesions were characterized by ulceration (M1 and M2 stages), with surface covered by crust or hyperkeratotic material (M3 and M4) and in M4 stage with ulceration area (M4.1). Hypertrophied hair on lesion edges, larvae of flies of the genus Cochliomyia spp. and changes in corneal tissue were also observed. In the histology of the lesions ulceration foci with bacterial colonies and polymorphonuclear infiltrates were observed in the epidermis and in the dermis. Parakeratotic hyperkeratosis was observed markedly in the M3, M4 and M4.1 stages. In 24 biopsies obtained from 24 cattle were observed 15 different types of DDB lesions; spirochetes in 54.2% (13/24) of the lesions (Warthin-Starry method) and 91.7% (22 / 24) the DNA of at least one of the treponemal phylogenies screened by Nested-Reaction in Polymerase Chain was detected. T. putidum / T. denticola-like was the most detected phylogenetic in all stages (P = 0.048) and the filaments Treponema medium / T. vincentii-like e T. phagedenis-like presented a higher proportion of active lesions (M2 and M4.1), but no statistical difference was observed in the occurrence of phylogroups between the lesion stages (P = 0.408 and 0.279, respectively). The treatment with copaiba oil had a cure rate of 83.4% (5/6) and resembled with salicylic acid (control treatment), which was 75% (3/4). Both treatments had a mean period of 7 weeks from the removal of the bandage to recovery of normal tissue. It is concluded in this work that the BDD in the Amazon biome is a politreponemal disease with macro and microscopic characteristics similar to the lesions of dairy cows kept in stables, occurs in low prevalence and is not seasonal. Copaiba oil can be used as an aid to BDD control measures in the Amazon biome.