Pseudomonas aeruginosa isolated from the environment of a Veterinary Academic Hospital in Brazil - resistance profile

Background: The presence of resistant and potentially virulent bacterial strains in a veterinary hospital environment is a neglected problem. Pseudomonas aeruginosa is an opportunistic microorganism present and circulating in the veterinary hospital environment, of clinical importance and zooanthroponotic transmission of P. aeruginosa has also been reported. The aim of this study was to characterize the population of P. aeruginosa present in a veterinary hospital environment by evaluating their resistance profile and biofilm production. Materials, Methods & Results: A total of 306 samples were collected from the veterinary hospital environment (swabs from consultation tables, surgical tables, door handles, hospitalization cages, stethoscopes, thermometers, and muzzles). The isolates were biochemically identified as belonging to the species Pseudomonas aeruginosa through nitrate to nitrite reduction, motility and oxidase test, growth at 42°C, pigment production, and alkalinization of acetamide. Antimicrobial resistance was tested using the minimum inhibitory concentration (MIC) test. Twenty seven isolates of P. aeruginosa were obtained, with a frequency of 8.8%. The detection of beta-lactamase production and biofilm formation genes by polymerase chain reaction (PCR). Two multidrug resistant (MDR) and 3 single-drug resistant (SDR) strains of P. aeruginosa were identified. Furthermore, it was observed that the strains carried genes related to beta-lactamase production (TEM and CTX-M group 25) and biofilm production (pelA, pslA, ppyR). Discussion: Pseudomonas aeruginosa is considered a major cause of opportunistic hospital infections, as it causes significant morbidity and mortality in immunosuppressed individuals, both in...

Pseudomonas aeruginosa isolated from the environment of a Veterinary Academic Hospital in Brazil - resistance profile

Background: The presence of resistant and potentially virulent bacterial strains in a veterinary hospital environment is a neglected problem. Pseudomonas aeruginosa is an opportunistic microorganism present and circulating in the veterinary hospital environment, of clinical importance and zooanthroponotic transmission of P. aeruginosa has also been reported. The aim of this study was to characterize the population of P. aeruginosa present in a veterinary hospital environment by evaluating their resistance profile and biofilm production. Materials, Methods & Results: A total of 306 samples were collected from the veterinary hospital environment (swabs from consultation tables, surgical tables, door handles, hospitalization cages, stethoscopes, thermometers, and muzzles). The isolates were biochemically identified as belonging to the species Pseudomonas aeruginosa through nitrate to nitrite reduction, motility and oxidase test, growth at 42°C, pigment production, and alkalinization of acetamide. Antimicrobial resistance was tested using the minimum inhibitory concentration (MIC) test. Twenty seven isolates of P. aeruginosa were obtained, with a frequency of 8.8%. The detection of beta-lactamase production and biofilm formation genes by polymerase chain reaction (PCR). Two multidrug resistant (MDR) and 3 single-drug resistant (SDR) strains of P. aeruginosa were identified. Furthermore, it was observed that the strains carried genes related to beta-lactamase production (TEM and CTX-M group 25) and biofilm production (pelA, pslA, ppyR). Discussion: Pseudomonas aeruginosa is considered a major cause of opportunistic hospital infections, as it causes significant morbidity and mortality in immunosuppressed individuals, both in...(AU)

Susceptibilidade de Staphylococcus aureus isolados de leite cru a antibióticos comerciais / Susceptibility of Staphylococcus aureus isolated from raw milk to commercial antibiotics

O leite possui extremo valor na dieta humana e constitui um excelente substrato para o crescimento de grande diversidade de microrganismos, dentre eles o Staphylococcus aureus, frequentemente encontrado no leite cru, e que se destaca como um dos microrganismos mais prevalentes em casos de mastite bovina no mundo. Objetivou-se avaliar a sensibilidade de cepas de S. aureus isoladas de leite cru à antimicrobianos comerciais. Para isso, selecionaram-se antibióticos com base em pesquisas junto a estabelecimentos comerciais de medicamentos veterinários no município de Zé Doca, Estado do Maranhão, Brasil. Esses antibióticos foram identificados por associação à base de penicilina, estreptomicina, isoniazida e prednisolona (BPC), oxitetraciclina base (TOR), associação à base de penicilina e estreptomicina (MPP) e cloridrato de tetraciclina (TCA). Posteriormente, realizou-se contagem de Staphylococcus spp., com isolamento e identificação bioquímica das cepas de S. aureus as quais, em seguida, foram submetidas à antibiogramas com identificação de ce,pas produtoras de beta-lactamase. Os resultados demonstraram contaminação em todas as amostras por Staphylococcus spp., com contagens de 1,9 x 103 a 5,24 x 106 UFC/mL. Dentre os antibióticos testados, o TOR apresentou maior eficiência na eliminação ou redução de todas as cepas de S. aureus. Verificou-se que 50% das cepas de S. aureus isoladas produziram enzima beta-lactamase. Torna-se necessário a criação de medidas de combate ao surgimento de novas cepas bacterianas e atuação das autoridades públicas, fiscalizando a comercialização de medicamentos veterinários.

Milk is extremelly valuable to the human diet and an excellent substrate for the growth of a wide range of microorganisms, including Staphylococcus aureus, frequently found in raw milk and one of the most prevalent microorganisms in cases of bovine mastitis in the world. The objective of this study was to evaluate the sensitivity of S. aureus strains isolated from raw milk to commercial antimicrobials. For this end, antibiotics based on research were selected from commercial establishments of veterinary drugs in the municipality of Zé Doca (Maranhão State, Brazil). The antibiotics were identified by association with penicillin, streptomycin, isoniazid and prednisolone (PCB), oxytetracycline base (TOR), a combination of penicillin and streptomycin (MPP), and tetracycline hydrochloride (TCA). Subsequently, Staphylococcus spp. counting was perfomed, with isolation and biochemical identification of strains of S. aureus, which were then submitted to antibiograms with identification of beta-lactamase producing strains. The results showed contamination in all samples by Staphylococcus spp., with counts ranging from 1.9 x 103 to 5.24 x 106 CFU/mL. Among the antibiotics tested, TOR showed the highest efficiency in elimination or reduction of all S. aureus strains. We found that 50% of S. aureus strains isolated produced the enzyme beta-lactamase. It is necessary to create measures to combat the emergence of new bacterial strains and to promote action by public authorities, supervising the commercialization of veterinary drugs.

Susceptibilidade de Staphylococcus aureus isolados de leite cru a antibióticos comerciais / Susceptibility of Staphylococcus aureus isolated from raw milk to commercial antibiotics

O leite possui extremo valor na dieta humana e constitui um excelente substrato para o crescimento de grande diversidade de microrganismos, dentre eles o Staphylococcus aureus, frequentemente encontrado no leite cru, e que se destaca como um dos microrganismos mais prevalentes em casos de mastite bovina no mundo. Objetivou-se avaliar a sensibilidade de cepas de S. aureus isoladas de leite cru à antimicrobianos comerciais. Para isso, selecionaram-se antibióticos com base em pesquisas junto a estabelecimentos comerciais de medicamentos veterinários no município de Zé Doca, Estado do Maranhão, Brasil. Esses antibióticos foram identificados por associação à base de penicilina, estreptomicina, isoniazida e prednisolona (BPC), oxitetraciclina base (TOR), associação à base de penicilina e estreptomicina (MPP) e cloridrato de tetraciclina (TCA). Posteriormente, realizou-se contagem de Staphylococcus spp., com isolamento e identificação bioquímica das cepas de S. aureus as quais, em seguida, foram submetidas à antibiogramas com identificação de ce,pas produtoras de beta-lactamase. Os resultados demonstraram contaminação em todas as amostras por Staphylococcus spp., com contagens de 1,9 x 103 a 5,24 x 106 UFC/mL. Dentre os antibióticos testados, o TOR apresentou maior eficiência na eliminação ou redução de todas as cepas de S. aureus. Verificou-se que 50% das cepas de S. aureus isoladas produziram enzima beta-lactamase. Torna-se necessário a criação de medidas de combate ao surgimento de novas cepas bacterianas e atuação das autoridades públicas, fiscalizando a comercialização de medicamentos veterinários.(AU)

Milk is extremelly valuable to the human diet and an excellent substrate for the growth of a wide range of microorganisms, including Staphylococcus aureus, frequently found in raw milk and one of the most prevalent microorganisms in cases of bovine mastitis in the world. The objective of this study was to evaluate the sensitivity of S. aureus strains isolated from raw milk to commercial antimicrobials. For this end, antibiotics based on research were selected from commercial establishments of veterinary drugs in the municipality of Zé Doca (Maranhão State, Brazil). The antibiotics were identified by association with penicillin, streptomycin, isoniazid and prednisolone (PCB), oxytetracycline base (TOR), a combination of penicillin and streptomycin (MPP), and tetracycline hydrochloride (TCA). Subsequently, Staphylococcus spp. counting was perfomed, with isolation and biochemical identification of strains of S. aureus, which were then submitted to antibiograms with identification of beta-lactamase producing strains. The results showed contamination in all samples by Staphylococcus spp., with counts ranging from 1.9 x 103 to 5.24 x 106 CFU/mL. Among the antibiotics tested, TOR showed the highest efficiency in elimination or reduction of all S. aureus strains. We found that 50% of S. aureus strains isolated produced the enzyme beta-lactamase. It is necessary to create measures to combat the emergence of new bacterial strains and to promote action by public authorities, supervising the commercialization of veterinary drugs.(AU)

Correlation of phenotypic tests with the presence of the blaZ gene for detection of beta-lactamase

Staphylococcus aureus and Staphylococcus saprophyticus are the most common and most important staphylococcal species associated with urinary tract infections. The objective of the present study was to compare and to evaluate the accuracy of four phenotypic methods for the detection of beta-lactamase production in Staphylococcus spp. Seventy-three strains produced a halo with a diameter ≤ 28 mm (penicillin resistant) and all of them were positive for the blaZ gene. Among the 28 susceptible strain (halo ≥ 29 mm), 23 carried the blaZ gene and five did not. The zone edge test was the most sensitive (90.3%), followed by MIC determination (85.5%), but the specificity of the former was low (40.0%). The nitrocefin test was the least sensitive (28.9%). However, the nitrocefin test together with the disk diffusion method showed the highest specificity (100%). The present results demonstrated that the zone edge test was the most sensitive phenotypic test for detection of beta-lactamase, although it is still not an ideal test to detect this type of resistance since its specificity was low. However, the inhibition halo diameter of the penicillin disk can be used together with the zone edge test since the same disk is employed in the two tests. Combined analysis of the two tests shows a sensitivity of 90.3% and specificity of 100%, proving better sensitivity, especially for S. saprophyticus. This is a low-cost test of easy application and interpretation that can be used in small and medium-sized laboratories where susceptibility testing is usually performed by the disk diffusion method.(AU)

Antimicrobial multiple resistance index, minimum inhibitory concentrations, and extended-spectrum beta-lactamase producers of Proteus mirabilis and Proteus vulgaris strains isolated from domestic animals with various clinical manifestations of infection / Índice de resistência múltipla aos antimicrobianos, concentração inibitória mínima e ESBL fenotípica em linhagens de Proteus mirabilis e Proteus vulgaris isoladas de diferentes afecções em animais domésticos

Proteus spp. are opportunistic multidrug resistant enterobacteria associated with diverse clinical diseases in domestic animals. However, Proteus infections in domestic animals are often misdiagnosed or considered contaminants in microbiological cultures rather than a primary agent of disease. Descriptions of Proteus infections in domestic animals are typically restricted to case reports, retrospective studies, or surveillance of other microorganisms. The present study investigated multiple antibiotic resistance indices, minimum inhibitory concentrations (MICs), and ESBL production in 73 strains of Proteus mirabilis (n = 69) and Proteus vulgaris (n = 4) isolated from domestic animals with various clinical manifestations. In dogs, the pathogen was most commonly associated with cystitis (48.21), enteritis (21.42%), otitis (14.29%), and conjunctivitis (3.57%). In bovines, the microorganism was predominant in cases of enteritis (22.22%), abscess (11.11%), otitis (11.11%), omphalitis (11.11%), and peritonitis (11.11%), and in organ fragments (11.11%). In equines (50.0%) and cats (100.0%), diarrhea was the main clinical sign. In vitro standard disk diffusion assay showed that the most effective antimicrobials against the isolates were imipenem (98.63), norfloxacin (95.89), amikacin (95.89), levofloxacin (90.41), ceftriaxone (87.64), and florfenicol (87.67). In contrast, the isolates commonly showed resistance to novobiocin (95.89), azithromycin (57.53), and trimethropim/sulfamethoxazole (39.73). Among the 73 isolates, the efficacy of amoxicillin/clavulanic acid, gentamicin, ceftriaxone, and ciprofloxacin according to MICs was 87.67%, 86.30%, 84.93%, and 82.19%, respectively. The MIC50 values of amoxicillin/clavulanic acid, ceftriaxone, ciprofloxacin, and gentamicin were, respectively, 1.0, 0.004, 0.03, and 1.0 µg/mL. [...](AU)

Proteus spp. são enterobactérias oportunistas, multirresistentes aos antimicrobianos, associadas a diversas infecções em animais domésticos. No entanto, as infecções por Proteus em animais de produção e de companhia são negligenciadas ou, por vezes, o patógeno é considerado “contaminante”, ainda que em infecções como agente primário. Os registros de infecções por Proteus sp. em animais domésticos estão restritos aos relatos de casos, estudos retrospectivos ou compondo estudos com outros microorganismos. O presente estudo investigou o índice de resistência múltipla (IRMA) e a concentração inibitória mínima (CIM) de 73 Proteus mirabilis (n=69) e Proteus vulgaris (n=4) a diferentes antimicrobianos, bem com a produção fenotípica de ESBL, em isolados obtidos de várias manifestações clínicas em animais domésticos. Em cães, o micro-organismo foi identificado predominantemente em casos de cistite (48,21%), enterite (21,42%), otite (14,29%) e conjuntivite (3,57%). Nos bovinos, o agente foi isolado predominantemente de casos enterite (22,22%), abscesso (11,11%), otite (11,11%), onfalite (11,11%), peritonite (11,11%), metrite (11,11%) e em fragmento de órgão (11,11%). Nos equinos (50,0%) e felinos (100,0%) o micro-organismo foi isolado principalmente de enterite. A maior sensibilidade dos isolados no teste “in vitro” de difusão com discos foi observada para imipeném (98,63%), norfloxacino (95,89%), amicacina (95,89%), levofloxacino (90,41%), ceftriaxona (87,64%) e florfenicol (87,67%), enquanto a maior resistência das linhagens foi observada para novobiocina (95,89%), azitromicina (57,53%) e sulfametoxazole-trimetropim (39,73%). Dentre as 73 linhagens, a eficácia da amoxicilina/ácido clavulânico, gentamicina, ceftriaxona e ciprofloxacino utilizando o teste de CIM foi, respectivamente, 87,67%, 86,30%, 84,93% e 82,19%. [...](AU)

Beta-lactamase detection in Staphylococcus aureus and coagulase-negative Staphylococcus isolated from bovine mastitis / Detecção de beta-lactamase em Staphylococcus aureus e Staphylococcus coagulase negativa isolados de mastite bovina

The objectives of the study were to evaluate the presence/production of beta-lactamases by both phenotypic and genotypic methods, verify whether results are dependent of bacteria type (Staphylococcus aureus versus coagulase-negative Staphylococcus - CNS) and verify the agreement between tests. A total of 200 bacteria samples from 21 different herds were enrolled, being 100 CNS and 100 S. aureus. Beta-lactamase presence/detection was performed by different tests (PCR, clover leaf test - CLT, Nitrocefin disk, and in vitro resistance to penicillin). Results of all tests were not dependent of bacteria type (CNS or S. aureus). Several S. aureus beta-lactamase producing isolates were from the same herd. Phenotypic tests excluding in vitro resistance to penicillin showed a strong association measured by the kappa coefficient for both bacteria species. Nitrocefin and CLT are more reliable tests for detecting beta-lactamase production in staphylococci.(AU)

Os objetivos do presente estudo foram avaliar a presença/produção de beta-lactamases por ambos os métodos fenotípicos e genotípicos, verificar se os resultados são dependentes do tipo de bactéria (Staphylococcus aureus contra Staphylococcus coagulase negativa - CNS) e verificar a concordância entre os testes. Um total de 200 amostras bactérianas oriundas de 21 rebanhos distintos foram incluídos, sendo 100 CNS e 100 S. aureus. A presença/detecção de beta-lactamase foi realizada por diferentes testes (PCR, teste trevo (clover leaf test) - CLT, disco Nitrocefin e resistência in vitro à penicilina). Os resultados de todos os testes não foram dependentes do tipo de bactérias (CNS ou S. aureus). Vários isolados de S. aureus produtores de beta-lactamase eram de um mesmo rebanho. Testes fenotípicos excluindo resistência in vitro à penicilina mostraram uma forte associação medida pelo coeficiente kappa para ambas as espécies de bactérias. Nitrocefina e CLT são testes mais confiáveis para detectar a produção de beta-lactamase em estafilococos.(AU)

Drug resistance profiles and clonality of sporadic Shigella sonnei isolates in Ankara, Turkey

The aims of this study were to investigate drug resistance rates, types of extended spectrum beta lactamases (ESBLs), and molecular epidemiological characteristics of 43 Shigella sonnei isolates. Ampicillin-sulbactam, amoxicillin-clavulanate, chloramphenicol, and ciprofloxacin were the most active antibiotics. Five isolates harbored blaSHV-12, blaTEM-1 and blaCTX-M-15. More than 90% of the isolates had an indistinguishable pulsotype.

Incidence and transferability of antibiotic resistance in the enteric bacteria isolated from hospital wastewater

This study reports the occurrence of antibiotic resistance and production of -lactamases including extended spectrum beta-lactamases (ESL) in enteric bacteria isolated from hospital wastewater. Among sixty-nine isolates, tested for antibiotic sensitivity, 73.9% strains were resistant to ampicillin followed by nalidixic acid (72.5%), penicillin (63.8%), co-trimoxazole (55.1%), norfloxacin (53.6%), methicillin (52.7%), cefuroxime (39.1%), cefotaxime (23.2%) and cefixime (20.3%). Resistance to streptomycin, chloramphenicol, nitrofurantoin, tetracycline, and doxycycline was recorded in less than 13% of the strains. The minimum inhibitory concentration (MIC) showed a high level of resistance (800-1600 µg/mL) to one or more antibiotics. Sixty three (91%) isolates produced -lactamases as determined by rapid iodometric test. Multiple antibiotic resistances were noted in both among ESL and non-ESL producers. The -lactamases hydrolyzed multiple substrates including penicillin (78.8% isolates), ampicillin (62.3%), cefodroxil (52.2%), cefotoxime (21.7%) and cefuroxime (18.8%). Fifteen isolates producing ESLs were found multidrug resistant. Four ESL producing isolates could transfer their R-plasmid to the recipient strain E. coli K-12 with conjugation frequency ranging from 7.0 x 10-3 to 8.8 x 10-4. The findings indicated that ESL producing enteric bacteria are common in the waste water. Such isolates may disseminate the multiple antibiotic resistance traits among bacterial community through genetic exchange mechanisms and thus requires immediate attention.(AU)

ANÁLISE DOS PERFIS GENOTÍPICO E FENOTÍPICO DE RESISTÊNCIA A BETA-LACTÂMICOS EM Staphylococcus spp. ISOLADOS DE MASTITE EM RUMINANTES

O leite é considerado uma importante fonte de contaminação por bactérias patogênicas e multirresistentes, especialmente quando este alimento é proveniente de rebanhos com mastite. Neste estudo, objetivou-se caracterizar os perfis genotípico e fenotípico de resistência aos beta-lactâmicos e outros antimicrobianos em Staphylococcus spp. isolados de mastite em ruminantes na região Nordeste do Brasil. Foram analisados 161 Staphylococcus aureus isolados de vacas, 52 Staphylococcus coagulase negativa (SCN) de búfalas, 66 de cabras e 72 de ovelhas. Realizou-se a detecção dos genes de resistência blaZ, mecA e mecC por PCR e para os testes de resistência antimicrobiana utilizaram-se os métodos de disco-difusão e concentração inibitória mínima (CIM). O gene blaZ foi detectado em 68,9% (111/161) dos S. aureus bovinos e em 42,3% (22/52), 43,9% (29/66) e 23,6% (17/72) dos SCN isolados de búfalas, cabras e ovelhas, respectivamente. Todos os isolados testados foram negativos para os genes mecA e mecC. Amoxicilina, ampicilina e penicilina foram os antimicrobianos com maiores índices de resistência na técnica de disco-difusão e o maior percentual de resistência detectado na CIM foi para a amoxicilina, entre os isolados de todas as espécies animais. A multirresistência detectada foi de 9,3% (15/161) em S. aureus de bovinos, 30,8% (16/52) em SCN de bubalinos, 25,8% (17/66) em SCN de caprinos e 25,0% (18/72) em SCN de ovinos. A resistência a beta-lactâmicos está presente em altas frequências entre S. aureus e SCN isolados de leite de vaca, búfala, cabra e ovelha na região Nordeste do Brasil, sendo a ação de betalactamases o principal mecanismo determinante desta resistência. Medidas corretivas de manejo devem ser adotadas para reduzir a circulação destas bactérias no ambiente agropecuário e diminuir os riscos de transmissão de Staphylococcus spp. resistentes a beta-lactâmicos a outros animais dos rebanhos e ao homem.

Milk is considered an important source of contamination by pathogenic and multiresistant bacteria, especially when this food comes from herds with mastitis. In this study, we aimed to characterize the genotypic and phenotypic profiles to beta-lactam and other antimicrobial resistance in Staphylococcus spp. isolates from ruminants mastitis in the Northeast of Brazil. For this purpose, 161 Staphylococcus aureus isolated from cows, 52 coagulase-negative Staphylococcus (CoNS) from buffaloes, 66 from goats and 72 from sheep were analyzed. BlaZ, mecA and mecC resistance genes were detected by PCR and anti-microbial resistance was tested by disk-diffusion and minimum inhibitory concentration (MIC) methods. BlaZ gene was detected in 68.9% (111/161) of bovine S. aureus and in 42.3% (22/52), 43.9% (29/66) and 23.6% (17/72) of CoNS isolated from buffaloes, goats and sheep, respectively. All isolates tested were negative for mecA and mecC genes. Amoxicillin, ampicillin and penicillin were the antimicrobials with the highest indices of resistance in the disk-diffusion technique and the highest percentage of resistance detected in MIC was for amoxicillin among isolates of all animal species. Multiresistance detected was 9.3% (15/161) in bovine S. aureus, 30.8% (16/52) in buffalo CoNS, 25.8% (17/66) in goats CoNS and 25.0% (18/72) in sheep CoNS. Resistance to beta-lactams is present at high frequencies between S. aureus and CoNS isolated from cow, buffalo, goat and sheep milk in the Northeast region of Brazil, with betalactamases action being the main determinant of this resistance. Corrective management measures should be provided to reduce this bacteria circulation in the agricultural environment and to reduce beta-lactam resistant Staphylococcus spp. transmission risk to other animals of from the herds and to humans.

DETECCAO E IDENTIFICACAO DE GENES ESBLs E DE RESISTENCIA AS QUINOLONAS EM ENTEROBACTERIACEA ISOLADAS DE CARNES DE FRANGO, SUINA E BOVINA DESTINADAS AO CONSUMO HUMANO

Introdução: A resistência bacteriana aos antimicrobianos é um importante problema de saúde pública, que prolonga o período de tratamento, aumenta as taxas de mortalidade e custos da assistência à saúde. Este fenômeno pode ter considerado consequência do uso indiscriminado de antimicrobianos na medicina humana e veterinária, e ao longo da cadeia produtiva de alimentos. Nos últimos anos tem sido observado o frequente isolamento de bactérias resistentes a partir de animais de produção e alimentos de origem animal. Neste contexto, têm-se destacado a resistência aos beta-lactâmicos, devido à produção de beta-lactamase de espectro estendido (ESBL) e às quinolonas pela aquisição de genes qnr que codificam proteínas que interferem na ação das quinolonas sobre a DNA-girase e a topoisomerase IV. Diversas espécies bacterianas apresentando resistência aos antimicrobianos têm sido isoladas a partir de animais de produção. Objetivo: Este estudo teve como objetivo isolar enterobactérias resistentes aos beta-lactâmicos e quinolonas e detectar os genes blaCTX-M, blaSHV, blaTEM, qnrA, qnrB, qnrS e oqxAB em Enterobacteriaceae resistentes isoladas de carnes resfriadas de frango, suína e bovina comercializadas no município de São José do Rio Preto-SP, adquiridas entre novembro de 2010 e agosto de 2012. Material e Métodos: A suscetibilidade aos antimicrobianos foi determinada por disco-difusão de acordo com as normas do CLSI. As cepas resistentes aos beta-lactâmicos e às quinolonas foram submetidas à PCR com primers específicos para a detecção destes genes e ao sequenciamento para a identificação dos mesmos. Resultados: Um total de 75 isolados apresentou resistência aos beta-lactâmicos e 125 às quinolonas. Entre estes, 6,6% blaCTX-M, 6,6% blaTEM, 16% blaSHV, 21,6% apresentaram variantes de qnr e 13,6% oqxAB. Em uma cepa de Aeromonas sobria foi detectada a coexistência dos genes qnrA e qnrS; o gene qnrB foi detectado em cinco cepas de E. coli, cinco K.pneumoniae, duas Salmonella spp. e 12 Citrobacter spp. O gene qnrB19 foi detectado em duas K. pneumoniae, duas E. coli e uma Citrobacter braakii. qnrB2 foi detectado em três K. pneumoniae. O gene qnrS1 foi detectado em uma cepa de K. pneumoniae. O sequenciamento de blaCTX-M revelou blaCTX-M-2, sendo que todas foram provenientes de amostras de carne de frango. Conclusão: Esses dados revelam que pode haver associação entre o excessivo uso de antimicrobianos em animais de produção e o isolamento de bactérias resistentes aos mesmos. A presença de bactérias resistentes aos antimicrobianos em carnes destinadas ao consumo humano consiste em um problema de saúde pública e pode afetar as relações comerciais do país, já que o Brasil é um dos maiores exportadores de carne do mundo.

Introduction: Bacterial resistance to antimicrobials is an important public health problem, which results in increased treatment period, increase in mortality and in health care costs. This phenomenon is considered a result of the indiscriminate use of antimicrobials in human and veterinary medicine, and along the food chain. In recent years, it has been observed the frequent isolation of resistant bacteria from animal production and food of animal origin. In this context, have been highlighted the resistance to beta-lactâmicos and to quinolones, the first, due to extended-spectrum beta-lactamase (ESBL) production and the second, resultant from the acquisition of qnr genes encoding proteins that interfere in quinolone action on DNA gyrase and topoisomerase IV. Several bacterial species with antimicrobial resistance have been isolated from farm animals. Objective: This study evaluated the antimicrobial susceptibility profile and the presence of resistance genes blaCTX-M, blaSHV, blaTEM, qnrA, qnrB, qnrS and oqxAB in Enterobacteriaceae isolated from meat market in the municipality of São José do Rio Preto- SP, acquired between November 2010 and August 2012. Material and Methods: The antimicrobial susceptibility was determined by disk diffusion according to CLSI. Strains resistant to beta-lactams and quinolones were submitted to PCR using specific primers for detection and sequencing of these genes for identification. Results: A total of 75 isolates were resistant to beta-lactam and 125 to quinolones. Among these, 6.6% blaCTX-M, 6.6% blaTEM, 16% blaSHV, 21.6% had qnr variants and 13.6% oqxAB. In a strain of Aeromonas sobria was detected the coexistence of qnrA and qnrS genes; the qnrB gene was detected in five strains of E. coli, five K.pneumoniae, two Salmonella spp. and 12 Citrobacter spp. The qnrB19 gene was detected in two K. pneumoniae, duas E. coli and one Citrobacter braakii. qnrB2 was detected in three K. pneumoniae. The qnrS1 gene was detected in a strain of K. pneumoniae. The sequencing blaCTX-M revealed blaCTX-M-2, all of which were derived from chicken meat samples. Conclusion: These data demonstrate there nay be association between excessive use of antimicrobials in animal production and isolation of bacteria resistant to these antimicrobials. The presence of bacteria resistant to antimicrobials in meat intended for human consumption consists in a public health problem and can affect commercials relationships of the country, since it the Brazil is one of the world's largest meat exporters.

ÍNDICE DE RESISTÊNCIA MÚLTIPLA AOS ANTIMICROBIANOS, CONCENTRAÇÃO INIBITÓRIA MÍNIMA E BETA-LACTAMASES DE ESPECTRO ESTENDIDO EM LINHAGENS DE PROTEUS MIRABILIS E PROTEUS VULGARIS ISOLADAS DE DIFERENTES AFECÇÕES EM ANIMAIS DOMÉSTICOS

Nas últimas décadas é crescente o número de infecções por enterobactérias oportunistas multidroga resistentes em animais domésticos e humanos, em geral secundárias ao uso abusivo de antimicrobianos, incluindo pelo gênero Proteus. No entanto, as infecções por linhagens do gênero Proteus em animais domésticos são negligenciadas, relegadas ao segundo plano ou, por vezes, o micro-organismo é considerado ¿contaminante¿, ainda que em infecções como agente primário. Os registros de infecções por Proteus sp. em animais domésticos estão praticamente restritos aos relatos de casos, estudos retrospectivos ou compondo estudos com outros micro-organismos. São restritos no Brasil os estudos sistematizados envolvendo os principais aspectos clínico-epidemiológicos das afecções pelo gênero Proteus em grande número de animais domésticos, tampouco da presença de linhagens multirresistentes e/ou produtoras de beta-lactamases de espectro estendido (ESBL). O presente estudo investigou o índice de resistência múltipla (IRMA) e a concentração inibitória mínima (CIM) de 73 isolados de Proteus mirabilis (n=69) e Proteus vulgaris (n=4) a diferentes antimicrobianos, bem com a produção fenotípica de ESBL, em isolados obtidos de várias manifestações clínicas em animais domésticos. Em cães, o micro-organismo foi identificado predominantemente em casos de cistite (48,21%), enterite (21,42%), otite (14,29%), conjuntivite (3,57%), dermatite (1,79%), artrite (1,79%) e em secreção de ferida cirúrgica (1,79%). Nos bovinos, o agente foi isolado de casos enterite (22,22%), abscesso (11,11%), otite (11,11%), onfalite (11,11%), peritonite (11,11%), metrite (11,11%) e em fragmento de órgão (11,11%). Nos equinos, enterite (50,0%), artrite (22,22%) e abscesso (16,67%) foram as principais afecções clínicas, enquanto nos felinos o agente foi isolado exclusivamente de casos de enterite (100,0%). A maior sensibilidade dos isolados no teste de sensibilidade microbiana ¿in vitro¿ utilizando o método padrão de difusão com discos foi observada para imipeném (98,63%), norfloxacino (95,89%), amicacina (95,89%), levofloxacino (90,41%), ceftriaxona (87,64%) e florfenicol (87,67%). Em contraste, a maior resistência das linhagens foi observada para novobiocina (95,89%), azitromicina (57,53%) e sulfametoxazole-trimetropim (39,73%). Dentre as 73 linhagens, a eficácia da amoxicilina/ácido clavulânico, gentamicina, ceftriaxona e ciprofloxacino utilizando o teste de CIM foi, respectivamente, 87,67%, 86,30%, 84,93% e 82,19%. A CIM50 para amoxicilina/ácido clavulânico, ceftriaxona, ciprofloxaicno e gentamicina foi, respectivamente, 1,0 µg/mL, 0,004 µg/mL, 0,03 µg/mL e 1,0 µg/mL. O índice de resistência múltipla aos antimicrobianos (IRMA ¿0,3) foi observado em 33 (45,21%) linhagens. O IRMA dos isolados variou entre 0,1 a 1. Dentre os isolados com perfis de multirresistência, a maior ocorrência foi observada em cães (n=25; 75,76%), particularmente em animais com cistite (n=13; 52,0%), seguido pelos bovinos (n=4; 12,12%), equinos (n=2; 6,06%) e felinos (n=2; 6,06%). A presença fenotípica de ESBL foi identificada em dois (2,7%) dos isolados obtidos de dermatite e fezes de cães. Infere-se o comportamento oportunista das espécies de Proteus nas infecções em animais domésticos em razão da diversidade de manifestações clínicas, a presença de isolados ESBL-positivos e a ocorrência de isolados multirresistentes aos antimicrobianos, reforçando a importância da instituição do tratamento do patógeno com respaldo em testes ¿in vitro¿ de sensibilidade microbiana e do uso racional de antimicrobianos no tratamento de infecções em animais domésticos.

In the last decades have been highlighted the increase number of infections in domestic animals and humans caused by opportunistic multidrug resistant enterobacteria, commonly associated to improper use of antimicrobials, including by Proteus species. However, Proteus infections in domestic animals have been misdiagnosed or the microorganism is considered a contaminant of microbiological cultures, besides to be a primary agent of diseases. Descriptions of Proteus infections in domestic animals usually are restricted to case reports, retrospective studies or part of studies involving other microorganisms. In Brazil, are restricted the comprehensive studies involving the main clinical and epidemiologic aspects of Proteus infections in a great number of domestic animals, as well as multiple drug resistant strains to conventional antimicrobials, and extended-spectrum beta-lactamase producers (ESBL). The present study investigated multiple antibiotic resistance index, minimum inhibitory concentration (MIC), and ESBL production in 73 strains of Proteus mirabilis (n=69) and Proteus vulgaris (n=4) isolated from different clinical manifestations in domestic animals. In dogs, the pathogen was identified most commonly causing cystitis (48.21), enteritis (21.42%), otitis (14.29%), conjuntivitis (3.57%), dermatitis (1.79%), arthritis (1.79%), and from surgical wound secretion (1.79%). In bovines, the microorganism occurred predominantly in enteritis (22.22%), abscesses (11.11%), otitis (11.11%), omphalitis (11.11%), peritonitis (11.11%), and in organ fragments (11.11%). Among equines, diarrhea (50.0%), arthritis (22.22%), and abscesses (16.67%) were the most common clinical manifestations, whereas in domestic cats the agent was identified exclusively in two cases of enteritis. In vitro standard disk diffusion method showed that the most effective antimicrobials against strains were imipenem (98.63), norfloxacin (95.89), amikacin (95.89), levofloxacin (90.41), ceftriaxone (87.64), and florfenicol (87.67). In contrast, the most common resistance of isolates was observed to novobiocin (95.89), azithromycin (57.53) and trimethropim/sulfamethoxazole (39.73). Among 73 isolates, efficacy of amoxicillin/clavulanic acid, gentamicin, ceftriaxone, and ciprofloxacin on basis in MIC was 87.67%, 86.30%, 84.93%, and 82.19%, respectively. MIC50 of amoxicillin/clavulanic acid, ceftriaxone, ciprofloxacin, and gentamicin was, respectively, 1.0 µg/mL, 0.004 µg/mL, 0.03 µg/mL, and 1.0 µg/mL. Thirty-three strains (45.21%) showed multiple antibiotic resistance (MAR) index (¿0.3). The MAR range of isolates was 0.1 to 1.0. Multidrug resistant profiles of isolates were observed most frequently in dogs (n=25; 75.76%), particularly in animals with cystitis (n=13; 52.0%), followed by bovines (n=4; 12.12%), equines (n=2; 6.06%), and cats (n=2; 6.06%). Phenotypic diagnosis identified two (2.7%) strains ESBL-producers obtained from canine skin and feces. Here, we observed a diversity of clinical manifestations in domestic animals caused by Proteus infections probably by typical opportunistic behavior of the microorganism. In addition, the presence of multidrug resistance isolates, and ESBL-producers highlights the need of adequate use of antimicrobials and in vitro antimicrobial tests to support therapy

Antibacterial activities of multi drug resistant Myroides odoratimimus bacteria isolated from adult flesh flies (Diptera: Sarcophagidae) are independent of metallo beta-lactamase gene

Flesh flies (Diptera: Sarcophagidae) are well known cause of myiasis and their gut bacteria have never been studied for antimicrobial activity against bacteria. Antimicrobial studies of Myroides spp. are restricted to nosocomial strains. A Gram-negative bacterium, Myroides sp., was isolated from the gut of adult flesh flies (Sarcophaga sp.) and submitted to evaluation of nutritional parameters using Biolog GN, 16S rRNA gene sequencing, susceptibility to various antimicrobials by disc diffusion method and detection of metallo -lactamase genes (TUS/MUS). The antagonistic effects were tested on Gram-negative and Gram-positive bacteria isolated from human clinical specimens, environmental samples and insect mid gut. Bacterial species included were Aeromonas hydrophila, A. culicicola, Morganella morganii subsp. sibonii, Ochrobactrum anthropi, Weissella confusa, Escherichia coli, Ochrobactrum sp., Serratia sp., Kestersia sp., Ignatzschineria sp., Bacillus sp. The Myroides sp. strain was resistant to penicillin-G, erythromycin, streptomycin, amikacin, kanamycin, gentamycin, ampicillin, trimethoprim and tobramycin. These strain showed antibacterial action against all bacterial strains except W. confusa, Ignatzschineria sp., A. hydrophila and M. morganii subsp. sibonii. The multidrug resistance of the strain was similar to the resistance of clinical isolates, inhibiting growth of bacteria from clinical, environmental and insect gut samples. The metallo -lactamase (TUS/MUS) genes were absent, and resistance due to these genes was ruled out, indicating involvement of other secretion machinery.

Moscas varejeiras (Diptera: Sarcophagidae) são causa conhecida de miíase e as bactérias de seus intestinos nunca foram estudadas quanto à atividade antibacteriana. Estudos antimicrobianos de Myroides spp restringem-se à cepas hospitalares. Uma bactéria Gram negativa, Myroides sp, foi isolada do intestino de moscas varejeiras adultas (Sarcophaga sp) e submetida à avaliação de parâmetros nutricionais pelo sistema BIOLOG GN, ao sequenciamento genético 16S rRNA, à sensibilidade a vários antimicrobianos pelo método de difusão de discos e à detecção dos genes de metalo beta lactamases (TUS/MUS). Os efeitos antagonistas foram testados contra bactérias Gram negativas e Gram positivas isoladas de material clínico humano, amostras ambientais e intestino do inseto. As espécies bacterianas incluíram Aeromonas hydrophila, A. culicicola, Morganella morganii subsp sibonii, Ochrobactrum anthropi, Weissella confusa, Escherichia coli, Ochrobactrum sp, Serratia sp, Kestersia sp, Ignatzschineria sp e Bacillus sp. A cepa Myroides sp foi resistente à penicilina G, eritromicina, estreptomicina, amicacina, canamicina, gentamicina, ampicilina, trimetoprim e tobramicina. Esta cepa apresentou atividade antimicrobiana contra todas as cepas exceto W.confusa, Ignatzschineria sp, A. hydrophila e M. morgani subsp sibonii. A resistência múltipla da cepa foi semelhante à de isolados clínicos, inibindo bactérias das amostras clínicas, ambientais e do intestino do inseto. Os genes de metalo beta lactamases (TUS/MUS) estavam ausentes, excluindo-se a resistência mediada por esses genes, o que indica o envolvimento de um mecanismo alternativo de secreção.

Extended-spectrum beta-lactamase production among ampicillin-resistant Escherichia coli strains from chicken in Enugu State, Nigeria

One hundred and seventy-two ampicillin-resistant E. coli strains isolated from commercial chickens in Enugu State, Nigeria, were screened for beta-lactamase production using the broth method with nitrocefin® as the chromogenic cephalosporin to detect enzyme production. Beta-lactamase producing strains were further examined for extended-spectrum beta-lactamase (ESBL) production using the Oxoid combination discs method. One hundred and seventy (98.8%) of the 172 ampicillin-resistant E. coli strains produced beta-lactamase enzyme. Sixteen (9.4%) beta-lactamase producers were phenotypically confirmed to produce ESBLs. Six of the ESBL producing strains were only detected with ceftazidime versus ceftazidime/clavulanate combination while ten of the ESBL producers were detected with cefotaxime versus cefotaxime/clavulanate combination. Chicken may serve as a reservoir of ESBL-producing E. coli strains which could be transferred to man and other animals.

Cento e setenta e duas cepas de Escherichia coli resistentes a ampicilina isoladas de frangos em Enugu State, Nigéria, foram avaliadas quanto à produção de beta-lactamase através do uso de método em caldo com nitrocefin® como indicador cromogênico da produção da enzima. Em seguida, as cepas produtoras de beta-lactamase foram examinadas quanto à produção de beta-lactamase de espectro expandido (ESBL) através do método de discos combinados Oxoid. Entre as cepas de Escherichia coli resistentes a ampicilina, cento e setenta (98,8%) produziram beta-lactamase. Testes fenotípicos indicaram que dezesseis (9,4%) das cepas produtoras de beta-lactamase produziram ESBL. Seis cepas produtoras de ESBL foram detectadas apenas com a combinação ceftazidima versus cefotaxime/clavulanato, enquanto dez cepas produtoras de ESBL foram detectadas com a combinação cefotaxime versus cefotaxime/clavulanato. Frangos podem ser reservatório de cepas de E.coli produtoras de ESBL, que podem ser transferidos para o homem e outros animais.

Ocurrence of blaSPM-1 and blaIMP-1 genes of metallo-beta-lactamases in clinical isolates of Pseudomonas aeruginosa from three universitary hospitals in the city of Porto Alegre, Brazil

We described the ocurrence of metallo-beta-lactamases (MBL) genes blaSPM-1 and blaIMP-1 in clinical isolates of Pseudomonas aeruginosa resistant to imipenem and/or ceftazidime obtained from three universitary hospitals in the city of Porto Alegre, Brazil. The MBL production was screened by phenotypic test and the genes were detected by PCR.

Descrevemos a ocorrência dos genes de metalo-beta-lactamases (MBL) blaSPM-1 e blaIMP-1 em isolados clínicos de Pseudomonas aeruginosa resistentes ao imipenem e/ou ceftazidima obtidos em três hospitais universitários de Porto Alegre, Brasil. A produção de MBL foi observada através de técnica fenotípica e os genes foram detectados pelo método de PCR.

Metallo-beta-lactamase producing Pseudomonas aeruginosa strains isolated in hospitals in Recife, PE, Brazil

Out of 24 nosocomial strains of Pseudomonas aeruginosa from Recife, Brazil, 15 (62%) were metallo-beta-lactamase producers. Such isolates were resistant to main antipseudomonas drugs, except polymixyn B and aztreonam. The enzyme responsible for the carbapenem-resistance belongs to SPM-1 class, and the gene involved, blaspm-1, is likely plasmid located.

De 24 linhagens hospitalares de Pseudomonas aeruginosa provenientes de Recife, Brasil, 15 (62%) produziram metalo-beta-lactamase. Tais isolados foram resistentes às principais drogas antipseudomonas, exceto polimixina B e aztreonam. A enzima responsável pela resistência aos carbapanêmicos pertence à classe SPM-1 e o gene envolvido, blaspm-1, provavelmente é plasmidial.

Conventional versus molecular tests (Multiplex PCR and PCR mecA gene) for detection of methicillin resistant Staphylococcus aureus

In this study, for detection of methicillin-resistant S. aureus (MRSA), a mecA multiplex PCR-based amplification was compared with the 1 µg oxacillin disk diffusion test, detection of minimal inhibitory concentration (MIC), and screening in agar with 4% NaCl and 6 µg/mL oxacillin. Among 24 isolates obtained from blood, mecA gene was detected in only 16 (66.7%) isolates by multiplex PCR. The MIC test showed a range of resistance to oxacillin from 0.19 to 512 µg/mL, among these isolates. Data obtained by screening and dilution tests showed that sensitivity to methicillin was 80.0% and 72.8%, respectively, when compared with the presence of mecA gene (multiplex). All isolates, including the negatives, when revaluated for mecA gene by PCR were positive. beta-lactamase production was positive for 20/25 isolates (80.0%). About » of patients died dispite most of them (83.3%) were adequately treated. The simultaneous identification of the bacteria and determination of this susceptibility to antibiotics are necessary for the choice of empiric antibiotic therapy in suspected staphylococcal sepse, but is important to considering the sensibility, specificity and validation of the available kits.

Nesse estudo, para detecção de S. aureus resistente à meticilina (MRSA), a amplificação do gene mecA baseada no multiplex PCR foi comparada com os testes de difusão com disco para 1 µg/mL de oxacilina, detecção da concentração inibitória mínima (CIM), meio de triagem com 4% de NaCl e 6 µg/mL de oxacilina. Na investigação de 24 isolados obtidos de sangue, o genótipo mecA foi detectado em apenas 16 (66,7%) dos isolados pelo multiplex PCR. A CIM apresentou valores variando de 0,19 a 512 µg/mL entre os isolados de MRSA. Os dados obtidos pelos testes de triagem e diluição em ágar apresentaram sensibilidades de 80,0% e 72,8% respectivamente, quando comparados com a presença do gene mecA (multiplex). Todos os isolados, incluindo os negativos, quando reavaliados com a técnica de PCR exclusivo para este gene, o resultado foi positivo. A produção de beta-lactamase foi positiva em 20/25 (80,0%) dos isolados. Cerca de » dos pacientes evoluiu para óbito apesar da maioria (83,3%) ter sido tratada adequadamente. A identificação simultânea da bactéria e sua susceptibilidade aos antibióticos é necessária para a escolha de uma terapia adequada para casos de sepse estafilocócica, mas é importante considerar a sensibilidade, especificidade e validação dos kits disponíveis.

Conventional versus molecular tests (Multiplex PCR and PCR mecA gene) for detection of methicillin resistant Staphylococcus aureus

In this study, for detection of methicillin-resistant S. aureus (MRSA), a mecA multiplex PCR-based amplification was compared with the 1 µg oxacillin disk diffusion test, detection of minimal inhibitory concentration (MIC), and screening in agar with 4% NaCl and 6 µg/mL oxacillin. Among 24 isolates obtained from blood, mecA gene was detected in only 16 (66.7%) isolates by multiplex PCR. The MIC test showed a range of resistance to oxacillin from 0.19 to 512 µg/mL, among these isolates. Data obtained by screening and dilution tests showed that sensitivity to methicillin was 80.0% and 72.8%, respectively, when compared with the presence of mecA gene (multiplex). All isolates, including the negatives, when revaluated for mecA gene by PCR were positive. beta-lactamase production was positive for 20/25 isolates (80.0%). About » of patients died dispite most of them (83.3%) were adequately treated. The simultaneous identification of the bacteria and determination of this susceptibility to antibiotics are necessary for the choice of empiric antibiotic therapy in suspected staphylococcal sepse, but is important to considering the sensibility, specificity and validation of the available kits.

Nesse estudo, para detecção de S. aureus resistente à meticilina (MRSA), a amplificação do gene mecA baseada no multiplex PCR foi comparada com os testes de difusão com disco para 1 µg/mL de oxacilina, detecção da concentração inibitória mínima (CIM), meio de triagem com 4% de NaCl e 6 µg/mL de oxacilina. Na investigação de 24 isolados obtidos de sangue, o genótipo mecA foi detectado em apenas 16 (66,7%) dos isolados pelo multiplex PCR. A CIM apresentou valores variando de 0,19 a 512 µg/mL entre os isolados de MRSA. Os dados obtidos pelos testes de triagem e diluição em ágar apresentaram sensibilidades de 80,0% e 72,8% respectivamente, quando comparados com a presença do gene mecA (multiplex). Todos os isolados, incluindo os negativos, quando reavaliados com a técnica de PCR exclusivo para este gene, o resultado foi positivo. A produção de beta-lactamase foi positiva em 20/25 (80,0%) dos isolados. Cerca de » dos pacientes evoluiu para óbito apesar da maioria (83,3%) ter sido tratada adequadamente. A identificação simultânea da bactéria e sua susceptibilidade aos antibióticos é necessária para a escolha de uma terapia adequada para casos de sepse estafilocócica, mas é importante considerar a sensibilidade, especificidade e validação dos kits disponíveis.

Conventional versus molecular tests (Multiplex PCR and PCR mecA gene) for detection of methicillin resistant Staphylococcus aureus

In this study, for detection of methicillin-resistant S. aureus (MRSA), a mecA multiplex PCR-based amplification was compared with the 1 µg oxacillin disk diffusion test, detection of minimal inhibitory concentration (MIC), and screening in agar with 4% NaCl and 6 µg/mL oxacillin. Among 24 isolates obtained from blood, mecA gene was detected in only 16 (66.7%) isolates by multiplex PCR. The MIC test showed a range of resistance to oxacillin from 0.19 to 512 µg/mL, among these isolates. Data obtained by screening and dilution tests showed that sensitivity to methicillin was 80.0% and 72.8%, respectively, when compared with the presence of mecA gene (multiplex). All isolates, including the negatives, when revaluated for mecA gene by PCR were positive. beta-lactamase production was positive for 20/25 isolates (80.0%). About » of patients died dispite most of them (83.3%) were adequately treated. The simultaneous identification of the bacteria and determination of this susceptibility to antibiotics are necessary for the choice of empiric antibiotic therapy in suspected staphylococcal sepse, but is important to considering the sensibility, specificity and validation of the available kits.

Nesse estudo, para detecção de S. aureus resistente à meticilina (MRSA), a amplificação do gene mecA baseada no multiplex PCR foi comparada com os testes de difusão com disco para 1 µg/mL de oxacilina, detecção da concentração inibitória mínima (CIM), meio de triagem com 4% de NaCl e 6 µg/mL de oxacilina. Na investigação de 24 isolados obtidos de sangue, o genótipo mecA foi detectado em apenas 16 (66,7%) dos isolados pelo multiplex PCR. A CIM apresentou valores variando de 0,19 a 512 µg/mL entre os isolados de MRSA. Os dados obtidos pelos testes de triagem e diluição em ágar apresentaram sensibilidades de 80,0% e 72,8% respectivamente, quando comparados com a presença do gene mecA (multiplex). Todos os isolados, incluindo os negativos, quando reavaliados com a técnica de PCR exclusivo para este gene, o resultado foi positivo. A produção de beta-lactamase foi positiva em 20/25 (80,0%) dos isolados. Cerca de » dos pacientes evoluiu para óbito apesar da maioria (83,3%) ter sido tratada adequadamente. A identificação simultânea da bactéria e sua susceptibilidade aos antibióticos é necessária para a escolha de uma terapia adequada para casos de sepse estafilocócica, mas é importante considerar a sensibilidade, especificidade e validação dos kits disponíveis.

Concentração mínima inibitória de dez antimicrobianos para amostras de Staphylococcus aureus isoladas de infecção intramamária bovina

The minimum inhibitory concentrations (MIC) for ampicillin, cephalothin, erythromycin, gentamicin, neomycin, norfloxacin, oxacillin, penicillin G, tetracycline and tylosin against 112 Staphylococcus aureus strains isolated from bovine intramammary infections were determined. The strains were originated from 33 dairy herds located in the Zona da Mata, Minas Gerais State. Twenty-four strains were isolated from clinical cases of mastitis, 66 from subclinical infections and 22 from chronic infections. The chronic infection strains were isolated from the same mammary quarters of nine cows of one herd over a period of 13 months. The MIC was performed on Mueller Hinton agar and concentrations, ranging from 0.015 to 128µgml-1, were evaluated for each antimicrobial agent. The American Type Culture Collection (ATCC) recommended quality control strains, S. aureus ATCC 29213, Escherichia coli ATCC 25922 and Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853, were included on each batch of test. All strains were susceptible to cephalothin, erythromycin, gentamicin, norfloxacin and oxacillin, 91% were susceptible to tetracycline (MIC50: 0.5µgml-1) and tylosin (MIC50: 2.0µgml-1), 65% to ampicillin (MIC50: 0.125µgml-1) and penicillin G (MIC50: 0.06µgml-1). All strains but one in the intermediate pattern, were susceptible to neomycin (MIC50: 0.5µgml-1). The resistance levels to ampicillin and penicillin were higher in strains isolated from clinical and subclinical (positive scores on CMT) cases (P 0.02). The resistance level to tylosin was also higher among the strains isolated from clinical infections (P 0.02). The strains with MIC > or = 0.125µgml-1 to penicillin were positive for ß-lactamase production.

Determinou-se a concentração mínima inibitória (CMI) de ampicilina, cefalotina, eritromicina, gentamicina, neomicina, norfloxacina, oxacilina, penicilina G, tetraciclina e tilosina para 112 amostras de Staphylococcus aureus isoladas de infecções intramamárias bovina, em 33 rebanhos leiteiros da Zona da Mata do Estado de Minas Gerais. Foram isoladas 24 amostras de infecção clínica, 66 de subclínica e 22 de infecção crônica. As amostras de infecção crônica foram isoladas repetidas vezes dos mesmos quartos mamários de nove vacas de um rebanho, no período de 13 meses. A CMI foi realizada em ágar Mueller Hinton, com concentrações entre 0,015 e 128µgml-1 de cada antimicrobiano. As amostras da American Type Culture Collection (ATCC) recomendadas para controle de qualidade, S. aureus ATCC 29213, Escherichia coli ATCC 25922 e Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853, foram incluídas em cada teste. Cem por cento das amostras foram susceptíveis à cefalotina, eritromicina, gentamicina, norfloxacina e oxacilina, 91% à tetraciclina (CMI50: 0,5µgml-1) e à tilosina (CMI50: 2,0µgml-1), 65% à ampicilina (CMI50: 0,125µgml-1) e à penicilina G (CMI50: 0,06µgml-1). Todas foram susceptíveis à neomicina (CMI50: 0,5µgml-1) exceto uma amostra que apresentou um padrão intermediário. O nível de resistência para ampicilina e penicilina foi maior nas amostras isoladas de casos clínicos e nas de infecção subclínica com escores positivos no CMT (P 0,02). Nas isoladas de infecção clínica, o nível de resistência à tilosina foi maior (P 0,02). As amostras que apresentaram CMI > ou = 0,125µgml-1 para penicilina foram positivas para produção de beta-lactamase.