Freezing goat embryos at different developmental stages and quality using ethylene glycol and a slow cooling rate / Congelação de embriões caprinos em diferentes estádios de desenvolvimento e qualidade utilizando etileno glicol e taxa de resfriamento lenta

The efficiency of an alternative freezing protocol for goat embryos of different morphology and quality was tested. Fifty-eight embryos on Day 6-7 stage were transferred as fresh or after freeze-thawing (n=29/group). For freezing, embryos were placed into 1.5M ethylene-glycol solution for 10min. During this time, they were loaded in the central part of 0.25mL straw, separated by air bubble from columns containing PBS/BSA 0.4% plus 20% BFS. Straws were then frozen using a freezing machine from 20ºC to -6ºC at a cooling rate of 3ºC/min, stabilization for 15min (seeding after 5min), from -6 C to -32ºC at 0.6 C/min,and plunged into liquid nitrogen. Frozen embryos were thawed for 30s at 37ºC in a water bath. Embryos subjected to fresh transfer were maintained in holding medium (37ºC). Fresh and frozen-thawed embryos were transferred at day 7 post-estrus to 30 recipients. Kidding and kid born rates were similar (P> 0.05), respectively, for recipients receiving fresh (66.7% or 10/15; 55.2% or 16/29) or frozen-thawed (60% or 9/15; 51.7% or 15/29) embryos. The cryopreservation of goat embryos using slow-freezing protocol and 1.5MEG resulted in similar efficiency rates of fresh embryos.(AU)

Este estudo testou a eficiência de protocolo alternativo de criopreservação de embriões caprinos de diferentes qualidades morfológicas. Foram utilizados 58 embriões, coletados entre o sexto e o sétimo dia do ciclo estral (n=29/grupo). Embriões congelados passaram por solução 1,5M etilenoglicol por 10min e foram aspirados durante esse tempo para parte central de palheta 0,25mL, separada por bolhas de ar de colunas contendo PBS 0,4% BSA e 20% SFB. As palhetas foram congeladas em máquina de congelação de 20ºC a -6ºC, com taxa de resfriamento de 3ºC/min, estabilização por 15min (seeding após 5min), -6ºC a -32ºC a 0,6ºC/min, e imersas em nitrogênio líquido. Os embriões foram descongelados por 30s a 37ºC, em água. Embriões frescos foram mantidos em solução de manutenção (37ºC). Embriões frescos e congelados/descongelados foram transferidos para 30 receptoras no sétimo dia do ciclo estral. A taxa de partos e a de crias nascidas (respectivamente) foram similares (P>0,05) para receptoras recebendo embriões frescos (66,7% ou 10/15; 55,2% ou 16/29) ou congelados/descongelados (60,0% ou 9/15; 51,7% ou 15/29). O protocolo de criopreservação de embriões utilizado no presente estudo resultou em índices de eficiência semelhantes aos de embriões frescos.(AU)

Freezing goat embryos at different developmental stages and quality using ethylene glycol and a slow cooling rate / Congelação de embriões caprinos em diferentes estádios de desenvolvimento e qualidade utilizando etileno glicol e taxa de resfriamento lenta

The efficiency of an alternative freezing protocol for goat embryos of different morphology and quality was tested. Fifty-eight embryos on Day 6-7 stage were transferred as fresh or after freeze-thawing (n=29/group). For freezing, embryos were placed into 1.5M ethylene-glycol solution for 10min. During this time, they were loaded in the central part of 0.25mL straw, separated by air bubble from columns containing PBS/BSA 0.4% plus 20% BFS. Straws were then frozen using a freezing machine from 20ºC to -6ºC at a cooling rate of 3ºC/min, stabilization for 15min (seeding after 5min), from -6 C to -32ºC at 0.6 C/min,and plunged into liquid nitrogen. Frozen embryos were thawed for 30s at 37ºC in a water bath. Embryos subjected to fresh transfer were maintained in holding medium (37ºC). Fresh and frozen-thawed embryos were transferred at day 7 post-estrus to 30 recipients. Kidding and kid born rates were similar (P> 0.05), respectively, for recipients receiving fresh (66.7% or 10/15; 55.2% or 16/29) or frozen-thawed (60% or 9/15; 51.7% or 15/29) embryos. The cryopreservation of goat embryos using slow-freezing protocol and 1.5MEG resulted in similar efficiency rates of fresh embryos.(AU)

Este estudo testou a eficiência de protocolo alternativo de criopreservação de embriões caprinos de diferentes qualidades morfológicas. Foram utilizados 58 embriões, coletados entre o sexto e o sétimo dia do ciclo estral (n=29/grupo). Embriões congelados passaram por solução 1,5M etilenoglicol por 10min e foram aspirados durante esse tempo para parte central de palheta 0,25mL, separada por bolhas de ar de colunas contendo PBS 0,4% BSA e 20% SFB. As palhetas foram congeladas em máquina de congelação de 20ºC a -6ºC, com taxa de resfriamento de 3ºC/min, estabilização por 15min (seeding após 5min), -6ºC a -32ºC a 0,6ºC/min, e imersas em nitrogênio líquido. Os embriões foram descongelados por 30s a 37ºC, em água. Embriões frescos foram mantidos em solução de manutenção (37ºC). Embriões frescos e congelados/descongelados foram transferidos para 30 receptoras no sétimo dia do ciclo estral. A taxa de partos e a de crias nascidas (respectivamente) foram similares (P>0,05) para receptoras recebendo embriões frescos (66,7% ou 10/15; 55,2% ou 16/29) ou congelados/descongelados (60,0% ou 9/15; 51,7% ou 15/29). O protocolo de criopreservação de embriões utilizado no presente estudo resultou em índices de eficiência semelhantes aos de embriões frescos.(AU)

Transferência de embriões como ferramenta para formação de rebanho experimental ovino e análise dos fatores que podem maximizar a multiplicação do plantel / Embryo transfer as a tool to experimental sheep flock formation and stock multiplication factors analyses

Visando ao aumento do plantel de ovinos da raça Black Belly na estação experimental do Institut Scientifique de Recherche Agronomique (INRA) de Bourges, França, foram utilizadas 32 ovelhas da raça Black Belly superovuladas com FSH suíno nos últimos três dias de tratamento progestágeno de 14 dias. Após coleta cirúrgica, obtiveram-se 264 embriões transferíveis (8,2 ± 6,0/doadoras), sendo transferidos 232 a 88 receptoras da raça Romane pluríparas e 23 da raça Suffolk nulíparas. As taxas de parição e de sobrevivência embrionária foram 83,6 e 63%, respectivamente, sendo os melhores resultados observados em receptoras da raça Romane pluríparas do que nas nulíparas da raça Suffolk. O número de ovulações, de embriões transferidos e o estádio de desenvolvimento embrionário causaram efeito sobre a taxa de sobrevivência embrionária. As melhores taxas de parição e de sobrevivência embrionária foram obtidas de receptoras com mais de duas ovulações que receberam dois embriões no estádio de blastocisto.(AU)

With the purpose of increase the breeding of Black Belly sheep breed at the experimental station of the Institut Scientifique de Recherche Agronomique (INRA), Bourges, France, thirty-two Black Belly sheep were super ovulated with swine FSH on the last three days of a progesterone treatment. After surgical collect 264 embryos transferable were recovered (8.2 ± 6.0/ donor) and 232 were transferred to 88 multiparous Romane sheep receptors and 23 nulliparous Suffolk sheep. Birth rate and survival rate were 83.6 and 63% respectively, though the results form multiparous Romane sheep receptors were better than from nulliparous Suffolk sheep. The ovulations number, transferred embryos and development stage had an effect on embryo survival rate. The best birth and embryo survival rates were from receptors that had more than two ovulations and had two embryos implanted at the stage of blastocyst.(AU)

Transferência de embriões como ferramenta para formação de rebanho experimental ovino e análise dos fatores que podem maximizar a multiplicação do plantel / Embryo transfer as a tool to experimental sheep flock formation and stock multiplication factors analyses

Visando ao aumento do plantel de ovinos da raça Black Belly na estação experimental do Institut Scientifique de Recherche Agronomique (INRA) de Bourges, França, foram utilizadas 32 ovelhas da raça Black Belly superovuladas com FSH suíno nos últimos três dias de tratamento progestágeno de 14 dias. Após coleta cirúrgica, obtiveram-se 264 embriões transferíveis (8,2 ± 6,0/doadoras), sendo transferidos 232 a 88 receptoras da raça Romane pluríparas e 23 da raça Suffolk nulíparas. As taxas de parição e de sobrevivência embrionária foram 83,6 e 63%, respectivamente, sendo os melhores resultados observados em receptoras da raça Romane pluríparas do que nas nulíparas da raça Suffolk. O número de ovulações, de embriões transferidos e o estádio de desenvolvimento embrionário causaram efeito sobre a taxa de sobrevivência embrionária. As melhores taxas de parição e de sobrevivência embrionária foram obtidas de receptoras com mais de duas ovulações que receberam dois embriões no estádio de blastocisto.

With the purpose of increase the breeding of Black Belly sheep breed at the experimental station of the Institut Scientifique de Recherche Agronomique (INRA), Bourges, France, thirty-two Black Belly sheep were super ovulated with swine FSH on the last three days of a progesterone treatment. After surgical collect 264 embryos transferable were recovered (8.2 ± 6.0/ donor) and 232 were transferred to 88 multiparous Romane sheep receptors and 23 nulliparous Suffolk sheep. Birth rate and survival rate were 83.6 and 63% respectively, though the results form multiparous Romane sheep receptors were better than from nulliparous Suffolk sheep. The ovulations number, transferred embryos and development stage had an effect on embryo survival rate. The best birth and embryo survival rates were from receptors that had more than two ovulations and had two embryos implanted at the stage of blastocyst.