Diagnosis of Brachyspira pilosicoli, Brachyspira hyodysenteriae and Brachyspira intermedia in hens and laying hens in the western region of Paraná through bacterial isolation and identification in qPCR / Diagnóstico de Brachyspira pilosicoli, Brachyspira hyodysenteriae e Brachyspira intermedia em aves de postura e matrizes de corte na região oeste do Paraná através do isolamento bacteriano e identificação na qPCR

Bacteria of the genus Brachyspira can cause enteric diseases in poultry causing a decrease in productivity. The occurrence of this disease in chickens has already been verified in countries such as Australia, Italy, and the United States, but in Brazil, until now, epidemiological studies about Brachyspira sp. frequency were only carried out on pig farms. The objective of this study was to evaluate the presence of bacteria of the genus Brachyspira sp. through isolation and confirmation of the species Brachyspira pilosicoli, Brachyspira hyodysenteriae and Brachyspira intermedia using the qPCR technique. Samples from 110 hens aged from 35 to 82 weeks were collected, 40 were from commercial egg farms and 70 were from laying hens matrices. For the first evaluation, bacterial isolation was performed from the feces. Positive samples were submitted to qPCR to identify the three species proposed. Cecum fragments of the birds were collected and fixed in formaldehyde for histological evaluation and counting of goblet cells. Of the 110 samples, 48 characteristic isolates of Brachyspira (43.6%) were obtained and of these in qPCR 13 identified as B. hyodysenteriae (11.8%) and 5 all from the same farm as Brachyspira intermedia (4.5%), 2 samples were positive for both agents (1.8%) and 28 were not characterized by qPCR (25.5%). None histopathological lesions were observed in the chicken cecum and no significant statistical difference was noticed in the count of goblet cells of the positive hens. It can be evidenced by the occurrence of Brachyspira sp. in laying farms and hens in Brazil, with special relevance to Brachyspira intermedia that can be potentially pathogenic for these animals.(AU)

Bactérias do gênero Brachyspira podem ocasionar enfermidades entéricas em aves acarretando a queda de produtividade. A ocorrência desta enfermidade em galinhas já foi verificada em países como a Austrália, Itália e Estados Unidos, porém no Brasil, até o momento, trabalhos epidemiológicos sobre a frequencia de Brachyspira sp. só foram realizados em granjas de suínos. O objetivo deste estudo foi avaliar a presença de bactérias do gênero Brachyspira sp. através do isolamento e confirmação das espécies Brachyspira pilosicoli, Brachyspira hyodysenteriae e Brachyspira intermedia utilizando a técnica de qPCR. Foram coletadas amostras de 110 aves com idade entre 35 e 82 semanas, sendo 40 de granjas de postura comercial e 70 de granjas de matrizes de corte. Para avaliação primeiramente procedeu-se o isolamento bacteriano a partir das fezes. As amostras positivas foram submetidas a qPCR para identificação das três espécies propostas. Fragmentos de ceco das aves foram coletados e fixados em formol para avaliação histológica e contagem de células caliciformes. Das 110 amostras foram obtidos 48 isolamentos característicos de Brachyspira (43,6%) e destes na qPCR 13 identificadas como B. hyodysenteriae (11,8%) e 5 sendo todas da mesma granja (4,5%) como B. intermedia, 2 amostras foram positivas para ambos os agentes (1,8%) e 28 não foram caracterizadas através da qPCR (25,5%). Não foram observadas alterações histopatológicas no ceco e diferença estatística significativa na contagem de células caliciformes das aves positivas. Conclui-se que a Brachyspira sp. é frequente em granjas de poedeiras e matrizes de corte no Brasil, com especial relevância para a B. intermedia que possui potência patogênico para estas aves.(AU)

Diagnosis of Brachyspira pilosicoli, Brachyspira hyodysenteriae and Brachyspira intermedia in hens and laying hens in the western region of Paraná through bacterial isolation and identification in qPCR / Diagnóstico de Brachyspira pilosicoli, Brachyspira hyodysenteriae e Brachyspira intermedia em aves de postura e matrizes de corte na região oeste do Paraná através do isolamento bacteriano e identificação na qPCR

Bacteria of the genus Brachyspira can cause enteric diseases in poultry causing a decrease in productivity. The occurrence of this disease in chickens has already been verified in countries such as Australia, Italy, and the United States, but in Brazil, until now, epidemiological studies about Brachyspira sp. frequency were only carried out on pig farms. The objective of this study was to evaluate the presence of bacteria of the genus Brachyspira sp. through isolation and confirmation of the species Brachyspira pilosicoli, Brachyspira hyodysenteriae and Brachyspira intermedia using the qPCR technique. Samples from 110 hens aged from 35 to 82 weeks were collected, 40 were from commercial egg farms and 70 were from laying hens matrices. For the first evaluation, bacterial isolation was performed from the feces. Positive samples were submitted to qPCR to identify the three species proposed. Cecum fragments of the birds were collected and fixed in formaldehyde for histological evaluation and counting of goblet cells. Of the 110 samples, 48 characteristic isolates of Brachyspira (43.6%) were obtained and of these in qPCR 13 identified as B. hyodysenteriae (11.8%) and 5 all from the same farm as Brachyspira intermedia (4.5%), 2 samples were positive for both agents (1.8%) and 28 were not characterized by qPCR (25.5%). None histopathological lesions were observed in the chicken cecum and no significant statistical difference was noticed in the count of goblet cells of the positive hens. It can be evidenced by the occurrence of Brachyspira sp. in laying farms and hens in Brazil, with special relevance to Brachyspira intermedia that can be potentially pathogenic for these animals.(AU)

Bactérias do gênero Brachyspira podem ocasionar enfermidades entéricas em aves acarretando a queda de produtividade. A ocorrência desta enfermidade em galinhas já foi verificada em países como a Austrália, Itália e Estados Unidos, porém no Brasil, até o momento, trabalhos epidemiológicos sobre a frequencia de Brachyspira sp. só foram realizados em granjas de suínos. O objetivo deste estudo foi avaliar a presença de bactérias do gênero Brachyspira sp. através do isolamento e confirmação das espécies Brachyspira pilosicoli, Brachyspira hyodysenteriae e Brachyspira intermedia utilizando a técnica de qPCR. Foram coletadas amostras de 110 aves com idade entre 35 e 82 semanas, sendo 40 de granjas de postura comercial e 70 de granjas de matrizes de corte. Para avaliação primeiramente procedeu-se o isolamento bacteriano a partir das fezes. As amostras positivas foram submetidas a qPCR para identificação das três espécies propostas. Fragmentos de ceco das aves foram coletados e fixados em formol para avaliação histológica e contagem de células caliciformes. Das 110 amostras foram obtidos 48 isolamentos característicos de Brachyspira (43,6%) e destes na qPCR 13 identificadas como B. hyodysenteriae (11,8%) e 5 sendo todas da mesma granja (4,5%) como B. intermedia, 2 amostras foram positivas para ambos os agentes (1,8%) e 28 não foram caracterizadas através da qPCR (25,5%). Não foram observadas alterações histopatológicas no ceco e diferença estatística significativa na contagem de células caliciformes das aves positivas. Conclui-se que a Brachyspira sp. é frequente em granjas de poedeiras e matrizes de corte no Brasil, com especial relevância para a B. intermedia que possui potência patogênico para estas aves.(AU)

Diagnosis of Brachyspira pilosicoli, Brachyspira hyodysenteriae and Brachyspira intermedia in hens and laying hens in the western region of Paraná through bacterial isolation and identification in qPCR

ABSTRACT: Bacteria of the genus Brachyspira can cause enteric diseases in poultry causing a decrease in productivity. The occurrence of this disease in chickens has already been verified in countries such as Australia, Italy, and the United States, but in Brazil, until now, epidemiological studies about Brachyspira sp. frequency were only carried out on pig farms. The objective of this study was to evaluate the presence of bacteria of the genus Brachyspira sp. through isolation and confirmation of the species Brachyspira pilosicoli, Brachyspira hyodysenteriae and Brachyspira intermedia using the qPCR technique. Samples from 110 hens aged from 35 to 82 weeks were collected, 40 were from commercial egg farms and 70 were from laying hens matrices. For the first evaluation, bacterial isolation was performed from the feces. Positive samples were submitted to qPCR to identify the three species proposed. Cecum fragments of the birds were collected and fixed in formaldehyde for histological evaluation and counting of goblet cells. Of the 110 samples, 48 characteristic isolates of Brachyspira (43.6%) were obtained and of these in qPCR 13 identified as B. hyodysenteriae (11.8%) and 5 all from the same farm as Brachyspira intermedia (4.5%), 2 samples were positive for both agents (1.8%) and 28 were not characterized by qPCR (25.5%). None histopathological lesions were observed in the chicken cecum and no significant statistical difference was noticed in the count of goblet cells of the positive hens. It can be evidenced by the occurrence of Brachyspira sp. in laying farms and hens in Brazil, with special relevance to Brachyspira intermedia that can be potentially pathogenic for these animals.

RESUMO: Bactérias do gênero Brachyspira podem ocasionar enfermidades entéricas em aves acarretando a queda de produtividade. A ocorrência desta enfermidade em galinhas já foi verificada em países como a Austrália, Itália e Estados Unidos, porém no Brasil, até o momento, trabalhos epidemiológicos sobre a frequencia de Brachyspira sp. só foram realizados em granjas de suínos. O objetivo deste estudo foi avaliar a presença de bactérias do gênero Brachyspira sp. através do isolamento e confirmação das espécies Brachyspira pilosicoli, Brachyspira hyodysenteriae e Brachyspira intermedia utilizando a técnica de qPCR. Foram coletadas amostras de 110 aves com idade entre 35 e 82 semanas, sendo 40 de granjas de postura comercial e 70 de granjas de matrizes de corte. Para avaliação primeiramente procedeu-se o isolamento bacteriano a partir das fezes. As amostras positivas foram submetidas a qPCR para identificação das três espécies propostas. Fragmentos de ceco das aves foram coletados e fixados em formol para avaliação histológica e contagem de células caliciformes. Das 110 amostras foram obtidos 48 isolamentos característicos de Brachyspira (43,6%) e destes na qPCR 13 identificadas como B. hyodysenteriae (11,8%) e 5 sendo todas da mesma granja (4,5%) como B. intermedia, 2 amostras foram positivas para ambos os agentes (1,8%) e 28 não foram caracterizadas através da qPCR (25,5%). Não foram observadas alterações histopatológicas no ceco e diferença estatística significativa na contagem de células caliciformes das aves positivas. Conclui-se que a Brachyspira sp. é frequente em granjas de poedeiras e matrizes de corte no Brasil, com especial relevância para a B. intermedia que possui potência patogênico para estas aves.

Salmonella Enteritidis detection and immunological cellular response to experimental inoculation in day-old turkeys / Detecção e resposta imunológica celular à inoculação experimental de Salmonella Enteritidis em perus de um dia

The purpose of this research is to clarify aspects of the pathogenesis of Salmonella Enteritidis in experimentally inoculated day-old turkeys. Three treatments were conducted among a total of 120 turkeys; one control group and two treatment groups in which 6 x 102 CFU mL-1 and 7 x 105 CFU mL-1, respectively, of Salmonella Enteritidis was inoculated in the crops. Two birds from each treatment were sacrificed and necropsied at 1, 3, 4, 12, 18, and 24 hours, and 3, 4, 38, and 49 days post-inoculation. We re-isolated Salmonella, measured lymphocytes, and conducted immunohistochemical tests. Six hours post-inoculation, Salmonella was found in the investigated organs (yolk sac, cecum, fragments of spleen, and bursa of Fabricius) with conventional bacteriology and immunohistochemistry, and was continuously detected in almost all analyzed organs until turkeys were four-days old. Further, Salmonella was detected after 38 days in cecum, when the concentration 7 x 105 CFU mL-1 was given. At both inoculation concentrations, the number of lymphocytes was similar; larger quantities were found in the first hour post-inoculation, followed by a gradual reduction, reaching the lowest levels at 24 hours after inoculation. Afterwards, lymphocytes increased discreetly, remaining at the same level until 49 days after inoculation. In conclusion, inoculation concentration influences mitigation...

O presente trabalho foi desenvolvido com o objetivo elucidar aspectos que envolvem a patogênese da Salmonella Enteritidis em perus de um dia experimentalmente inoculados. Foram conduzidos três tratamentos, constituídos de 120 perus, sendo um grupo controle e outros dois tratamentos onde se inoculou via inglúvio 6,0x102 UFC mL-1 e 7,0x105 UFC mL-1 de Salmonella Enteritidis, respectivamente. Após a inoculação, duas aves de cada tratamento foram submetidas à eutanásia e ao exame necroscópico para realizar a colheita amostras (saco vitelínico, ceco, fragmentos de baço e bursa de Fabricius) com uma, três, seis, 12, 18 e 24 horas e aos três, quatro, 38 e 49 dias. Foi realizado pesquisa da Salmonella, contagem de linfócitos e imuno-histoquímica. Após seis horas da inoculação, Salmonella foi identificada nos órgãos estudados, tanto pelo teste bacteriológico quanto pelo imunoistoquímico e permaneceu até quatro dias de idade em quase todos os órgãos analisados, e até 38 dias no ceco, quando se utilizou 7,0x105 UFC mL-1. Em ambas as concentrações do inóculo, os valores da contagem de linfócitos foram semelhantes, iniciando com maior número de linfócitos na primeira hora pós-inoculação, com redução lenta atingindo menor número às 24h pós-inoculação, e, a partir daí, o número de linfócitos aumentou discretamente, se mantendo até os 49 dias pós-inoculação. Conclui-se que a dose infectante...

Salmonella Enteritidis detection and immunological cellular response to experimental inoculation in day-old turkeys / Detecção e resposta imunológica celular à inoculação experimental de Salmonella Enteritidis em perus de um dia

The purpose of this research is to clarify aspects of the pathogenesis of Salmonella Enteritidis in experimentally inoculated day-old turkeys. Three treatments were conducted among a total of 120 turkeys; one control group and two treatment groups in which 6 x 102 CFU mL-1 and 7 x 105 CFU mL-1, respectively, of Salmonella Enteritidis was inoculated in the crops. Two birds from each treatment were sacrificed and necropsied at 1, 3, 4, 12, 18, and 24 hours, and 3, 4, 38, and 49 days post-inoculation. We re-isolated Salmonella, measured lymphocytes, and conducted immunohistochemical tests. Six hours post-inoculation, Salmonella was found in the investigated organs (yolk sac, cecum, fragments of spleen, and bursa of Fabricius) with conventional bacteriology and immunohistochemistry, and was continuously detected in almost all analyzed organs until turkeys were four-days old. Further, Salmonella was detected after 38 days in cecum, when the concentration 7 x 105 CFU mL-1 was given. At both inoculation concentrations, the number of lymphocytes was similar; larger quantities were found in the first hour post-inoculation, followed by a gradual reduction, reaching the lowest levels at 24 hours after inoculation. Afterwards, lymphocytes increased discreetly, remaining at the same level until 49 days after inoculation. In conclusion, inoculation concentration influences mitigation...(AU)

O presente trabalho foi desenvolvido com o objetivo elucidar aspectos que envolvem a patogênese da Salmonella Enteritidis em perus de um dia experimentalmente inoculados. Foram conduzidos três tratamentos, constituídos de 120 perus, sendo um grupo controle e outros dois tratamentos onde se inoculou via inglúvio 6,0x102 UFC mL-1 e 7,0x105 UFC mL-1 de Salmonella Enteritidis, respectivamente. Após a inoculação, duas aves de cada tratamento foram submetidas à eutanásia e ao exame necroscópico para realizar a colheita amostras (saco vitelínico, ceco, fragmentos de baço e bursa de Fabricius) com uma, três, seis, 12, 18 e 24 horas e aos três, quatro, 38 e 49 dias. Foi realizado pesquisa da Salmonella, contagem de linfócitos e imuno-histoquímica. Após seis horas da inoculação, Salmonella foi identificada nos órgãos estudados, tanto pelo teste bacteriológico quanto pelo imunoistoquímico e permaneceu até quatro dias de idade em quase todos os órgãos analisados, e até 38 dias no ceco, quando se utilizou 7,0x105 UFC mL-1. Em ambas as concentrações do inóculo, os valores da contagem de linfócitos foram semelhantes, iniciando com maior número de linfócitos na primeira hora pós-inoculação, com redução lenta atingindo menor número às 24h pós-inoculação, e, a partir daí, o número de linfócitos aumentou discretamente, se mantendo até os 49 dias pós-inoculação. Conclui-se que a dose infectante...(AU)

Micro-organismos isolados em superfícies de mesas de exames e procedimentos descontaminadas de hospital veterinário e a inativação in vitro por desinfetantes / Microorganismos aislados en superficies de mesas de exámenes y procedimientos descontaminadas de hospital veterinario, y su inactivación in vitro por desinfectantes / Microorganisms isolated from decontaminated surfaces of exam and procedure tables of veterinary hospital and their in vitro inactivation by disinfectants

Superfícies fixas de hospitais e clínicas veterinárias podem servir como locais de infecção para micro-organismos, muitos potencialmente patogênicos comuns entre animais e seres humanos, promovendo riscos para a saúde tanto dos pacientes quanto dos profissionais veterinários. O presente estudo teve como objetivos isolar e identificar a microbiota presente em superfícies inox de mesas de exames e procedimentos de áreas do setor de pequenos animais de um hospital veterinário de ensino, sobre as quais rotineiramente é procedida a descontaminação (desinfecção sem prévia limpeza), e verificar in vitro a capacidade de inativação microbiana dos grupos químicos desinfetantes ácido peracético, iodóforo, hipoclorito de sódio, quaternário de amônio, fenol sintético, clorhexidina e álcool. Quinze coletas, em três dias de meses diferentes, procederam-se com swabs rolados sobre as superfícies, de onde foram isolados Staphylococcus spp. coagulase (+) e (-), Sphingomonas paucimobilis, Streptococcus spp. (não grupo D), Enterobacter spp., Acinetobacter Iwoffii, Bacillus cereus, Pseudomonas spp., Micrococcus spp., Enterococcus spp., Cocobacilo não fermentador, Bacillus spp., Citrobacter spp. e Candida guilliermondii. O método da avaliação desinfetante foi o de diluição, pela técnica de suspensão microbiana, composta por três pools de bactérias (um por dia de coleta) e uma cultura de levedura, em três concentrações dos desinfetantes nos tempos de contato 1, 5 e 10 minutos. Observou-se que todos os desinfetantes inativaram todos os micro-organismos, tendo quaternário de amônio, fenol sintético, clorhexidina e álcool inativado nas menores concentrações e tempos de contato testados. Concluiu-se que nas superfícies das mesas de todos os ambientes puderam ser isolados micro-organismos, muitos destes de importância à saúde humana e animal; os testes in vitro evidenciaram que todos os grupos químicos avaliados podem ser usados no procedimento de desinfecção para inativar os isolados; a descontaminação, adotada como único procedimento de higienização de rotina nas superfícies onde os veterinários e seus pacientes entram em contato, pareceu não ser segura para proteger a saúde dos animais e dos profissionais de saúde animal.

Inanimate surfaces of hospitals and veterinary clinics can be a source of infection by microorganisms, many potentially pathogenic common between animals and humans, promoting the health risks of both patients and veterinary professionals. The aims of the present study were to isolate and identify the microbiota found on stainless steel surfaces of exam and procedure tables of the small animal ward of a veterinary teaching hospital, on which decontamination (disinfection without prior cleaning) is carried out on a routine basis, and to check in vitro inactivation by chemical disinfectants. Fifteen collections in three days of different months, we proceeded with swabs rolled over the surfaces of which were isolated coagulase-positive and coagulase-negative Staphylococcus spp., Sphingomonas paucimobilis, (non-group D) Streptococcus spp., Enterobacter spp., Acinetobacter Iwoffii, Bacillus cereus, Pseudomonas spp., Micrococcus spp., Enterococcus spp., non-fermenting coccobacilli, Bacillus spp., Citrobacter spp. and Candida guilliermondii. The inactivation capacity of peracetic acid, iodophor, sodium hypochlorite, quaternary ammonium, synthetic phenol, chlorhexidine and alcohol was assessed. The dilution method by microbial suspension test was performed using an experimental design consisting of three pools of bacteria (one per collection day) and a yeast culture at three disinfectant concentrations at 1, 5 and 10 minutes. All disinfectants inactivate all microorganisms, with quaternary ammonium, synthetic phenol, chlorhexidine and alcohol inactivated at lower concentration and contact times. It may be concluded that microorganisms - many of them deleterious to human and animal health - could be isolated from all of the sampled surfaces; the in vitro tests showed that all of the assessed chemicals can be used to inactivate the isolates; decontamination, as a unique hygiene routine procedure used on surfaces in direct contact with health professionals and patients, did not seem to safely protect the health of animals and health professionals.

Superficies fijas de hospitales y clínicas veterinarias pueden servir de fuente de infección por microorganismos, muchos potencialmente patogénicos comunes entre animales y seres humanos, promoviendo riesgos para la salud tanto de los pacientes como de los profesionales veterinarios. El presente estudio tuvo como objetivos aislar e identificar la microbiota presente en superficies inox de mesas de exámenes y procedimientos de áreas del sector de pequeños animales de un hospital veterinario de enseñanza, sobre las cuales rutinariamente es procedida la descontaminación (desinfección sin previa limpieza), y verificar in vitro la capacidad de inactivación microbiana de los grupos químicos desinfectantes ácido peracético, yodóforo, hipoclorito de sodio, cuaternario de amonio, fenol sintético, clorhexidina y alcohol. Fueron realizadas quince colectas, en tres días de meses diferentes, con swabs rodados sobre las superficies, de donde fueron aislados Staphylococcus spp. coagulasa (+) y (-), Sphingomonas paucimobilis, Streptococcus spp. (no grupo D), Enterobacter spp., Acinetobacter Iwoffii, Bacillus cereus, Pseudomonas spp., Micrococcus spp., Enterococcus spp., Cocobacilo no fermentador, Bacillus spp., Citrobacter spp. y Candida guilliermondii. El método de la evaluación desinfectante fue el de dilución, por la técnica de suspensión microbiana, compuesta por tres pools de bacterias (uno por día de colecta) e una cultura de levadura, en tres concentraciones de los desinfectantes en los tiempos de contacto 1, 5 y 10 minutos. Fue observado que todos los desinfectantes inactivaron todos los microorganismos, teniendo el cuaternario de amonio, fenol sintético, clorhexidina y alcohol inactivado con las menores concentraciones y tiempos de contacto. Se concluye que en las superficies de las mesas de todos los ambientes pudieron aislarse microorganismos, muchos de los cuales de importancia para la salud humana y animal; las pruebas in vitro evidenciaron que todos los grupos químicos evaluados pueden ser usados en el procedimiento desinfección para inactivar los aislados; la descontaminación, adoptada como único procedimiento de higienización de rutina en las superficies donde los veterinarios y sus pacientes entran en contacto, pareció no ser seguro para proteger la salud de los animales y de los profesionales de salud animal.

PREVALÊNCIA E SUSCEPTIBILIDADE ANTIMICROBIANA DE ESCHERICHIA COLI DIARREIOGÊNICA E SALMONELLA SPP. EM EQUINOS NO MUNICÍPIO DE ARAGUAÍNA-TO.

RESUMO Os equinos possuem estreita relação com o ser humano, sendo utilizados nas mais diversas atividades. Com isso, torna-se essencial o conhecimento das afecções que acometem esta espécie e, sobretudo, as que apresentam potencial zoonótico. As bactérias da família Enterobacteriacea são gram-negativas, tendo como principais agentes Salmonella spp. e Escherichia coli, que são patógenos comuns a vários animais e ao ser humano sendo, portanto, temas de relevância em saúde pública e animal em todo o mundo. Por isso, esse estudo se mostra de suma importância para a compreensão da epidemiologia destes agentes na saúde equina e humana bem como no reconhecimento de resistência bacteriana e susceptibilidade antimicrobiana. Tendo em vista a escassez de trabalhos publicados no Brasil quanto a situação da E. coli e Salmonella spp. na espécie equina, com esse trabalho objetivou-se verificar a prevalência desses agentes em equinos da cidade Araguaína bem como verificar a susceptibilidade dos mesmos a diferentes antimicrobianos. Foram coletadas fezes da ampola retal de 72 cavalos clinicamente sadios e realizou-se isolamento bacteriano iniciando-se com enriquecimento em caldo seletivo, seguindo-se com plaqueamento em meio semi-sólido, provas bioquímicas e soroaglutinação. Após confirmação, realizou-se o teste de susceptibilidade antimicrobiana frente aos principais antibióticos utilizados na terapia humana e veterinária. A prevalência encontrada neste estudo para E.coli diarreiogênica e Salmonella spp. foi de 47,06% e 4,17%, respectivamente. Quanto à susceptibilidade antimicrobiana, a ciprofloxacina foi a mais eficiente para ambos os agentes, seguida do meropenem (E.coli) e sulfa/trimetropim (Salmonella spp.). Conclui-se que os equinos avaliados podem ser portadores assintomáticos de Salmonella spp. e albergar cepas patogênicas de E. coli e, que a identificação do agente bem como a realização do antibiograma é fundamental para a instituição de medidas profiláticas e de terapêutica adequada, respectivamente.

Equines are closely related to humans, being used in many different activities. With this, it is essential to know the affections that affect this species and, especially, those with zoonotic potential. The bacteria of the family Enterobacteriacea are gram-negative, having as main agents Salmonella spp. and Escherichia coli, which are pathogens common to several animals and to humans, and are therefore of relevance in public and animal health throughout the world. Therefore, this study is extremely important for understanding the epidemiology of these agents in equine and human health as well as in the recognition of bacterial resistance and antimicrobial susceptibility. In view of the scarcity of studies published in Brazil regarding the situation of E. coli and Salmonella spp. in the equine species, this work aimed to verify the prevalence of these agents in horses of Araguaína city as well as verify their susceptibility to different antimicrobials. Feces were collected from the rectal ampulla of 72 healthy horses and bacterial isolation was performed, starting with selective broth enrichment, followed by plating in semi-solid medium, biochemical tests and serum agglutination. After confirmation, the antimicrobial susceptibility test was carried out against the main antibiotics used in human and veterinary therapy. The prevalence found in this study for diarrheogenic E.coli and Salmonella spp. was 47.06% and 4.17%, respectively. As for antimicrobial susceptibility, ciprofloxacin was the most efficient for both agents, followed by meropenem (E.coli) and sulfa / trimetropim (Salmonella spp.). It is concluded that the horses evaluated can be asymptomatic carriers of Salmonella spp. and harbor pathogenic strains of E. coli, and that the identification of the agent as well as the performance of the antibiogram is fundamental for the institution of prophylactic measures and appropriate therapy, respectively.

Amostras de Escherichia coli diarreiogênicas isoladas de carcaças de bovinos de um frigorífico da região de Londrina-PR

A contaminação de alimentos por bactérias patogênicas é uma preocupação mundial para a saúde pública. Cepas de Escherichia coli diarreiogênica (DEC) oriundas de carnes bovinas tem causado surtos de infecção em diversas partes do mundo, principalmente as produtoras de toxinas, como a Shiga. Assim, o objetivo deste estudo foi observar aspectos microbiológicos de DEC, assim como padronizar a técnica de coleta e isolamento de DEC, em carcaças de bovinos, em um frigorífico da região de Londrina-PR. As amostras foram coletadas com swab de 90 carcaças bovinas, sendo 57 na linha de abate após evisceração, e 33 na linha de abate após o processo de lavagem.Para isolamento foi utilizado o meio MacConkey. A identificação de E. coli foi realizada por meio de série bioquímica, e os patotipos de DEC foram determinados pela reação em cadeia da polimerase. Do total de 57 carcaças, 46 (80,7%) apresentaram crescimento bacteriano antes da lavagem, sendo 37 (64,9%) positivas para E. coli ., senda 4(12,12%) positivas para E. coli diarreiogênica Do total de 33 carcaças após a lavagem, 12 (36,3%) apresentaram crescimento, sendo 8 (24,2%) positivas para E. coli , 2 (6,06%) positivas paraE. coli diarreiogênica. Dentre os isolados de E. coli foram encontrados os patotipos de DEC, com E. coli (EPEC) enteropatogênica e E. coli produtoras de toxina Shiga (STEC). Após o processo de lavagem das carcaças apenas dois isolados foram identificados como STEC.Estes resultados mostraram que o processo de lavagem reduziu a carga bacteriana, incluindo de E. coli , porém, cepas de STEC ainda foram encontrados após o processo, mostrando a importância do monitoramento microbiológico e o estudo epidemiológico em carcaças bovinas.

Contamination of food by pathogenic bacteria is a worldwide concern for public health. Escherichia coli (DEC) strains from bovine meat have caused outbreaks of infection in several parts of the world, especially those which produce toxins such as Shiga. Thus, the aim of this study was to observe microbiological aspects of DEC, as well as to standardize the technique for collecting and isolating DEC in bovine carcasses in a fridge in the region of Londrina-PR. The samples were collected with swabs of 90 bovine carcasses, 57 in the slaughter line after evisceration and 33 in the slaughter line after the washing process. MacConkey was used for DEC isolation. Identification of E. coli as performed using biochemical series and DEC pathology was determined by the polymerase chain reaction. From the total of 57 carcases, 46 (80.7%) presented bacterial growth before washing, 37 (64.9%) positive for E. coli., Path 4 (12.12%) positive for E.coli diarrheagenic . From the total of 33 carcasses after washing, 12 (36.3%) presented growth, 8 (24.2%) positive for E. coli . And 2 (6.06%) positive for E. coli diarrheagenic. Among the E. coli isolated were found DEC pathology, as enteropathogenic E. coli (EPEC) and Shiga-producing E.coli (STEC). Following the carcass washing process, only two isolated were identified as STEC. These results showed that the washing process reduced the bacterial load, including E . coli . However, STEC strains were still found after analysing the whole process, showing the importance of microbiological monitoring and the epidemiological study in bovine carcasses

EFFECTS OF Salmonella Enteritidis IN INCUBATION OF EMBRYONATED TURKEY EGGS / EFEITOS DA INOCULAÇÃO DE Salmonella Enteritidis NA INCUBAÇÃO DE OVOS EMBRIONADOS DE PERUS

This study aimed to evaluate the incubation performance, the Salmonella Enteritidis capacity of penetration through the eggshell and the ability of colonization of the gastrointestinal tract. Four hundred turkey eggs were incubated and distributed into four treatments with 100 experimental units each: CC and CCA (inoculation with placebo in eggshell and air chamber, respectively), IC and ICA (inoculation with 4.2 X 104 CFU/mL of Salmonella Enteritidis in eggshell and air chamber, respectively). The parameters of incubation were fertility, total hatchability and hatchability of fertile eggs, and relative chick weight to egg weight. Salmonella was investigated in shell, membrane, albumen/yolk and embryo of two eggs per treatment at one, seven, 14, 21 and 28 days. After birth, the frequency of recovery of the pathogen in meconium of all birds was determined. The variables were analyzed by ?-square test (?²) and Fischer test. During the whole incubation period, the agent has remained viable in 87.5% and 100% of eggshell samples in treatments IC and ICA, respectively. There was migration into eggs in 33.33% and 95.45% of the samples in treatments IC and ICA, respectively. The parameters of incubation were not affected when the pathogen was inoculated in the eggshell. It was also observed that inoculation of Salmonella Enteritidis in air chamber determined low hatchability with highe

Objetivou-se avaliar o rendimento de incubação, a capacidade de penetração de Salmonella Enteritidis através da casca do ovo e a sua habilidade de colonização do trato gastrintestinal. Foram incubados 400 ovos embrionados de perus da linhagem BUT, distribuídos em quatro tratamentos de 100 unidades experimentais: CC e CCA (inoculação com placebo na casca e na câmara de ar, respectivamente); IC e ICA (inoculação com 4,2 X 104 UFC/mL de Salmonella Enteritidis na casca e na câmara de ar, respectivamente). Os parâmetros de incubação calculados foram: fertilidade, eclodibilidade total e de ovos férteis, relação peso do peruzinho pelo peso do ovo. A presença de Salmonella foi pesquisada na casca, membrana, albume/gema e embrião de dois ovos por tratamento com um, sete, 14, 21 e 28 dias. Após o nascimento, foi determinada a frequência de recuperação do patógeno no mecônio de todas as aves. As variáveis foram analisadas pelos testes de ?² e de Fischer. Constatou-se que, durante todo o período de incubação, o agente manteve-se viável em 87,5% e 100% das amostras de casca dos tratamentos IC e ICA, respectivamente. Houve migração para o interior dos ovos em 33,33% das amostras analisadas no tratamento IC e em 95,45% das amostras analisadas no tratamento ICA. Os parâmetros de incubação não foram afetados quando o patógeno foi inoculado na casca. Constatou-se também que a inoculação do place

Avaliação microbiológica e molecular de líquidos articulares e peri-articulares de suínos / Microbiological and molecular evaluation of articulares and peri-articulares fluids of pigs

No presente estudo coletaram-se 115 amostras de líquido articular e peri-articular de suínos com suspeita clínica de doença articular oriundos de maternidade (30,43 por cento), creche (44,35 por cento) e crescimento/terminação (25,22 por cento) de Sistemas Intensivos de Produção de Suínos (SIPs) para avaliação microbiológica e molecular. Observaram-se 57 (49,5 por cento) amostras positivas em pelo menos uma das técnicas. No isolamento microbiano, 39,13 por cento das amostras foram positivas, sendo Streptococcus spp. (19,72 por cento), Arcabobacterium pyogenes (18,13 por cento) e Escherichia coli (12,68 por cento) os mais frequentes, havendo também a presença de Candida sp. (2,6 por cento). Na técnica de Reação em Cadeia da Polimerase (PCR), em 20 por cento das amostras foram detectados microrganismos com uma maior ocorrência de Mycoplasma hyosinoviae (34,09 por cento), Erysipelotrix tonsilarum (20,45 por cento) e Haemophilus parasuis (15,90 por cento). Os microrganismos mais frequentemente isolados em animais com artrite, apresentaram distribuição em todas as faixas etárias, entretanto a fase de crescimento/terminação apresentou maior percentual (69 por cento) de amostras positivas. Streptococcus spp. ocorreu em todas as fases sendo o microrganismo mais detectado. M. hyosinoviae foi observado principalmente em animais de creche. Na fase de crescimento/terminação as bactérias predominantes foram A. pyogenes, H. parasuis e E. tonsilarum. Aproximadamente metade dos casos foi negativo o que indica a provável ocorrência de processos degenerativos como a osteocondrose, embora a participação de infecções articulares e peri-articulares possam representar grandes perdas com menor ou maior impacto dependendo da fase de criação. Problemas articulares e/ou peri-articulares de origem infecciosas foram encontrados em todas as propriedades estudadas. O principal agente foi M. hyosynoviae, principalmente na creche, porém não se pode descartar o envolvimento de problemas degenerativos em associação.(AU)

In this study, 115 samples of articular and peri-articular liquid from swine with clinical suspected disease were collected from farrow (30.43 percent), nursery (44.35 percent) and growing-finishing (25.22 percent) phases of Intensive Pig Production Systems (IPPSs) for microbiological and molecular evaluation. A total of 57 (49.5 percent) samples was positive for at least one test. In bacterial isolation, 39.13 percent were positive, with highest frequency of Streptococcus spp. (19.72 percent), Arcanobacterium pyogenes (18.13 percent) and Escherichia coli (12.68 percent), and in some cases the fungus Candida sp. (2.6 percent). In the polymerase chain reaction test, 20 percent of the samples were positive mostly for Mycoplasma hyosinoviae (34.09 percent), Erysipelotrix tonsilarum (20.45 percent) and Haemophilus parasuis (15.90 percent). Almost all microorganisms were distributed over every growth phase, with a higher percentage of cases in the growing-finishing phase (69 percent). Streptococcus spp. were the principal microorganisms detected and were frequent in all phases. M. hyosinoviae was predomiant in the nursery phase. In the growing-finishing phase, A. pyogenes, H. parasuis and E. tonsilarum were predominant. About half of the cases were negative, what probably indicates degenerative processes like osteochondrosis; however articular and peri-articular infections still represent great economic losses with more or less impact depending on the growing phase of the pigs. Articular and peri-articular infectious problems were found in all herds analyzed. M. hyosinoviae mainly in nursery phase, however associated with degenerative processes, could not be excluded.(AU)

Comparação do isolamento microbiológico e da reação em cadeia da polimerase no diagnóstico de salmonelose em bezerros infectados experimentalmente com Salmonella Typhimurium / Comparison of microbiological culture and polymerase chain reaction in the diagnosis of salmonellosis in Salmonella Typhimurium-infected calves

The efficiency of microbiological culture and polymerase chain reaction (PCR) for detection of Salmonella Typhimurium is compared in fecal samples of Holstein calves experimentally infected with 10(9) CFU of Salmonella Typhimurium. Seventy-two fecal samples were analyzed by microbiological culture and PCR associated with selenite cystine (SC) and Muller-Kauffmann tethrationate (TMK) selective enrichment broths. Regardless of the selective enrichment broth, the microbiological culture was significantly better than PCR for detection of positive samples of Salmonella Typhimurium. The selective enrichment broths SC and TMK had no effect on the efficiency of the microbiological culture. The SC broth was the best option as selective enrichment associated to PCR.(AU)

FREQUÊNCIA DE Brachiyspira hyobysenteriae Brachiyspira pilosicoli EM SUÍNOS DE TERMINAÇÃO NA MESORREGIÃO OESTE DO ESTADO DO PARANÁ, BRASIL

RESUMO As bactérias do gênero Brachyspira estão entre as principais causas de diarreia em suínos de recria e terminação. Apesar da sua relevância são raros os estudos de frequência e prevalência desses agentes no rebanho nacional. Este estudo tem por objetivo avaliar a frequência de Brachyspira hyodysenteriae e Brachyspira pilosicoli por meio da técnica do isolamento bacteriano e da reação em cadeia da polimerase (PCR) de cepas cultivadas de amostras de fezes oriundas de rebanhos comerciais de suínos da mesorregião Oeste do estado do Paraná. Foram coletadas fezes em 15 granjas de terminação, com histórico de diarreia, em três municípios distintos. Foram coletados 15 animais por granja totalizando 225 amostras. O cultivo bacteriano objetivando o isolamento microbiológico de bactérias do gênero Brachyspira sp. resultou positivo em 97,7% (n=225) das amostras. Foram selecionadas 100 amostras positivas no cultivo bacteriano para a PCR duplex para B. hyodysenteriae e B. pilosicoli que resultou em 39% (n=100) amostras positivas, sendo 61,5% (n=39) positivas para B. hyodysenteriae, 28,2% (n=39) para B. pilosicoli e 10,3% (n=39) amostras foram positivas para ambos os agentes. Observou-se que 61% (n=100) amostras foram negativas na PCR. Foram realizadas avaliações necroscópicas e histopatológicas de três animais, que revelaram lesões compatíveis com B. hyodysenteriae e B. pilosicoli. O diagnóstico das infecções foi firmado com base nas observações epidemiológica e clínica, lesões macroscópicas e histopatológicas, cultivo bacteriano e PCR duplex. A associação cultivo bacteriano e PCR duplex demonstrou ser eficiente na identificação de B. hyodysenteriae e B. pilosicoli. O isolamento bacteriano evidenciou que existe um grande número de bactérias do gênero Brachyspira sp. na microbiota intestinal dos suínos estudados. A frequência de B. hyodysenteriae foi de 24% (n=100), de B. pilosicoli foi 11% (n=100) e 4% (n=100) com detecção de ambas bactérias em suínos comerciais da mesorregião Oeste do estado do Paraná.

Brachyspira sp. genus bacteria are among the main causes of diarrhea in growing and finishing pigs. Despite its relevance, the frequency and prevalence studies are uncommon in the brazilian herd. This study aims to assess the frequency of Brachyspira hyodysenteriae and Brachyspira pilosicoli by bacterial isolation and polymerase chain reaction (PCR) of faeces stool obtained from commercial swines farms in the western region of Paraná state. Stool from 15 finishing farms, with diarrhea history, were collected of three distinct municipalities. Were collected 15 animals per farm totaling 225 samples. The bacterial culture aiming microbiologic isolation of bacteria of the genus Brachyspira sp. were positive in 97.7% (n=225) of the samples. Of the amount of positive bacterial culture, 100 samples were selected for duplex PCR aiming B. hyodysenteriae and B. pilosicoli, resulting in 39% (n=100) positive samples. Of these 61.5% (n=39) were positive for B. hyodysenteriae, 28.2% (n=39) positive for B. pilosicoli, and 10 3% (n=39) samples were positive for both agents. It was observed that 61% (n=100) samples were negative in the PCR. Necropsy and histological results of three animals were held, which identified lesions compatible with B. hyodysenteriae and B. pilosicoli. The diagnosis of infections were signed based on epidemiological and clinical observations, gross and histopathological lesions, bacterial culture and duplex PCR. The bacterial culture in association with duplex PCR proved to be efficient in identifying B. hyodysenteriae and B. pilosicoli. The bacterial culture revealed that there is a large number of bacteria of the genus Brachyspira sp. present in the intestinal tract of studied swines. The frequency of B. hyodysenteriae was 24% (n=100), of B. pilosicoli was 11% (n=100) and 4% (n=100) indicated the presence of both agents in the western region of Paraná state.

Manejo dentário em leitões: efeitos no ganho de peso na maternidade e creche, prevalência de avscessos periapicais e isolamento dos agentes bacterianos envolvidos

O corte ou desgaste dos dentes dos leitões recém nascidos é uma prática comum na suinocultura, com o objetivo de reduzir lesões cutâneas na face dos leitões e no aparelho mamário das matrizes. Para avaliação da presença de lesões dentárias, foram analisados após eutanásia 280 animais que apresentavam sinais clínicos de definhamento (refugagem) compatíveis com uma forma de infecção por circovírus (síndrome da refugagem multissistêmica). Entre esses, 58 leitões (21%) apresentaram ao menos um abscesso periapical (total de 70 abscessos), onde: 3  os incisivos superiores, 3os incisivos inferiores, caninos superiores e caninos inferiores foram respectivamente responsáveis por 31%, 23%, 6%, e 33% dos abscessos. Outros dentes foram responsáveis por 7% do total de abscessos. A prevalência de abscessos predominantemente nos dentes 3os incisivos e caninos inferiores sugere que estes dentes sofreram maior área de corte/desgaste, refletindo em superior prevalência de abscessos periapicais. Dentre as bactérias classificadas, o Streptococcus sp. foi a mais isolada (21,48% dos isolados em aerobiose e 27,7% em anaerobiose). Houve um isolamento significativamente maior de bactérias corineformes em atmosfera anaeróbica, quando comparado com isolamentos em aerobiose. Houve preponderância de isolamentos de bactérias Gram positivas. Através de um experimento a campo em granja de produção de leitões,

EFFECTS OF Salmonella Enteritidis IN INCUBATION OF EMBRYONATED TURKEY EGGS / EFEITOS DA INOCULAÇÃO DE Salmonella Enteritidis NA INCUBAÇÃO DE OVOS EMBRIONADOS DE PERUS

This study aimed to evaluate the incubation performance, the Salmonella Enteritidis capacity of penetration through the eggshell and the ability of colonization of the gastrointestinal tract. Four hundred turkey eggs were incubated and distributed into four treatments with 100 experimental units each: CC and CCA (inoculation with placebo in eggshell and air chamber, respectively), IC and ICA (inoculation with 4.2 X 104 CFU/mL of Salmonella Enteritidis in eggshell and air chamber, respectively). The parameters of incubation were fertility, total hatchability and hatchability of fertile eggs, and relative chick weight to egg weight. Salmonella was investigated in shell, membrane, albumen/yolk and embryo of two eggs per treatment at one, seven, 14, 21 and 28 days. After birth, the frequency of recovery of the pathogen in meconium of all birds was determined. The variables were analyzed by ?-square test (?²) and Fischer test. During the whole incubation period, the agent has remained viable in 87.5% and 100% of eggshell samples in treatments IC and ICA, respectively. There was migration into eggs in 33.33% and 95.45% of the samples in treatments IC and ICA, respectively. The parameters of incubation were not affected when the pathogen was inoculated in the eggshell. It was also observed that inoculation of Salmonella Enteritidis in air chamber determined low hatchability with highe

Objetivou-se avaliar o rendimento de incubação, a capacidade de penetração de Salmonella Enteritidis através da casca do ovo e a sua habilidade de colonização do trato gastrintestinal. Foram incubados 400 ovos embrionados de perus da linhagem BUT, distribuídos em quatro tratamentos de 100 unidades experimentais: CC e CCA (inoculação com placebo na casca e na câmara de ar, respectivamente); IC e ICA (inoculação com 4,2 X 104 UFC/mL de Salmonella Enteritidis na casca e na câmara de ar, respectivamente). Os parâmetros de incubação calculados foram: fertilidade, eclodibilidade total e de ovos férteis, relação peso do peruzinho pelo peso do ovo. A presença de Salmonella foi pesquisada na casca, membrana, albume/gema e embrião de dois ovos por tratamento com um, sete, 14, 21 e 28 dias. Após o nascimento, foi determinada a frequência de recuperação do patógeno no mecônio de todas as aves. As variáveis foram analisadas pelos testes de ?² e de Fischer. Constatou-se que, durante todo o período de incubação, o agente manteve-se viável em 87,5% e 100% das amostras de casca dos tratamentos IC e ICA, respectivamente. Houve migração para o interior dos ovos em 33,33% das amostras analisadas no tratamento IC e em 95,45% das amostras analisadas no tratamento ICA. Os parâmetros de incubação não foram afetados quando o patógeno foi inoculado na casca. Constatou-se também que a inoculação do place

Manejo dentário em leitões: efeitos no ganho de peso na maternidade e creche, prevalência de avscessos periapicais e isolamento dos agentes bacterianos envolvidos

O corte ou desgaste dos dentes dos leitões recém nascidos é uma prática comum na suinocultura, com o objetivo de reduzir lesões cutâneas na face dos leitões e no aparelho mamário das matrizes. Para avaliação da presença de lesões dentárias, foram analisados após eutanásia 280 animais que apresentavam sinais clínicos de definhamento (refugagem) compatíveis com uma forma de infecção por circovírus (síndrome da refugagem multissistêmica). Entre esses, 58 leitões (21%) apresentaram ao menos um abscesso periapical (total de 70 abscessos), onde: 3  os incisivos superiores, 3os incisivos inferiores, caninos superiores e caninos inferiores foram respectivamente responsáveis por 31%, 23%, 6%, e 33% dos abscessos. Outros dentes foram responsáveis por 7% do total de abscessos. A prevalência de abscessos predominantemente nos dentes 3os incisivos e caninos inferiores sugere que estes dentes sofreram maior área de corte/desgaste, refletindo em superior prevalência de abscessos periapicais. Dentre as bactérias classificadas, o Streptococcus sp. foi a mais isolada (21,48% dos isolados em aerobiose e 27,7% em anaerobiose). Houve um isolamento significativamente maior de bactérias corineformes em atmosfera anaeróbica, quando comparado com isolamentos em aerobiose. Houve preponderância de isolamentos de bactérias Gram positivas. Através de um experimento a campo em granja de produção de leitões,

Manejo dentário em leitões: efeitos no ganho de peso na maternidade e creche, prevalência de avscessos periapicais e isolamento dos agentes bacterianos envolvidos

O corte ou desgaste dos dentes dos leitões recém nascidos é uma prática comum na suinocultura, com o objetivo de reduzir lesões cutâneas na face dos leitões e no aparelho mamário das matrizes. Para avaliação da presença de lesões dentárias, foram analisados após eutanásia 280 animais que apresentavam sinais clínicos de definhamento (refugagem) compatíveis com uma forma de infecção por circovírus (síndrome da refugagem multissistêmica). Entre esses, 58 leitões (21%) apresentaram ao menos um abscesso periapical (total de 70 abscessos), onde: 3  os incisivos superiores, 3os incisivos inferiores, caninos superiores e caninos inferiores foram respectivamente responsáveis por 31%, 23%, 6%, e 33% dos abscessos. Outros dentes foram responsáveis por 7% do total de abscessos. A prevalência de abscessos predominantemente nos dentes 3os incisivos e caninos inferiores sugere que estes dentes sofreram maior área de corte/desgaste, refletindo em superior prevalência de abscessos periapicais. Dentre as bactérias classificadas, o Streptococcus sp. foi a mais isolada (21,48% dos isolados em aerobiose e 27,7% em anaerobiose). Houve um isolamento significativamente maior de bactérias corineformes em atmosfera anaeróbica, quando comparado com isolamentos em aerobiose. Houve preponderância de isolamentos de bactérias Gram positivas. Através de um experimento a campo em granja de produção de leitões,

Avaliação da microbiota vaginal de cadelas usando como diagnóstico o isolamento e a colpocitologia

O objetivo deste estudo foi demonstrar a aplicação da colpocitologia vaginal como método de diagnóstico reprodutivo preventivo em cadelas. Para tal foram caracterizadas as variáveis pertinentes ao animal e ao manejo, relacionando os dados com a observação do esfregaço vaginal e com os resultados do isolamento microbiológico. Foram utilizadas 40 cadelas hígidas, provenientes de canis domiciliares e comerciais. Questionários foram aplicados aos responsáveis que responderam sobre o manejo, histórico reprodutivo e clínico das cadelas, e em seguida realizado a coleta de muco vaginal para o isolamento bacteriano e fungico, bem como a citologia das mesmas. Para o isolamento bacteriano, procedeu-se à coleta com swab estéril da mucosa vaginal, que foi acondicionado em Ágar Nutriente e posteriormente semeado nos meios Ágar MacConkey, Ágar Seletivo para Estreptococos, Ágar EMB, Ágar Sangue e Ágar Manitol Vermelho de Fenol. Em seguida foram realizadas as provas bioquímicas necessárias para a identificação das bactérias. No isolamento fúngico, utilizou-se um swab estéril, acondicionando-o em Água Peptonada a 1%, e semeado após incubação em Ágar Sabouraud a 2% com e sem acréscimo de cloranfenicol. Para o exame colpocitológico foram utilizadas escovas ginecológicas estéreis e o esfregaço obtido foi corado pela técnica do Panótico Rápido. Observou-se quanto ao perfil das cadelas que 35,0% estavam na faixa etária de 6 a 24 meses, 60,0% eram criadas em canis comerciais com acesso a terra, 65,0% eram nulíparas e 42,5% estavam em anestro. Quanto ao isolamento bacteriano houve maior freqüência de isolamento de Micrococcus spp (24,6%), Streptococcus spp (13,24%), Streptococcus schleiferi coagulans (9,56%) e Escherichia coli (9,56%) e o isolamento fúngico de maior freqüência foi Cladosporum spp (20,0%), seguido do Fusarium spp (16,3%) e Curvularia spp (10,9%). Quando todas as variáveis foram associadas, concluiu-se que a citologia vaginal foi um bom indicativo para a observação da presença de bactérias e leveduras, bem como para a identificação da fase do ciclo estral, mas não foi um bom indicativo para a identificação de fungos filamentosos, quando comparada ao isolamento microbiológico