Resumo
O albinismo é uma desordem genética recessiva em que a produção de melanina é reduzida ou ausente, o que interfere na pigmentação da pele, pelos e olhos dos indivíduos. É considerada de rara ocorrência natural, principalmente em animais selvagens. Indivíduos albinos são altamente suscetíveis a injúrias na pele causadas pelo sol, já que a exposição aos raios ultravioletas (UV) de forma cumulativa pode ser prejudicial. Este relato discorre sobre a ocorrência de seborreia seca em uma anta albina (Tapirus terrestris), mantida sob cuidados humanos. A seborreia seca é uma enfermidade cutânea de caráter crônico em que ocorre falha na queratinização da epiderme, formando excessivamente escamas e alterando a oleosidade da pele e pelos. O tratamento clínico instituído foi baseado na aplicação tópica de solução dermatológica hidratante spray e em mudanças realizadas no recinto a fim de diminuir a incidência de luz solar no indivíduo. O resultado foi satisfatório e teve como auxílio um microscópio digital portátil que foi utilizado periodicamente até a recuperação do animal.(AU)
Albinism is a recessive genetic disorder in which melanin prodution is reduced or absent, interfering with pigmentation of the skin, hair and eyes of individuals. It is considered to be of rare natural occurrence, mainly in wild animals. Albino individuals are highly susceptible to skin damage caused by the sun, once cumulative exposure to ultraviolet (UV) rays can be harmful. This report discusses the occurrence of dry seborrhea in an albino lowland tapir (Tapirus terrestris), kept under human care. Dry seborrhea is a chronic skin disease in which there is a failure in the keratinization of the epidermis, forming excessive scales and altering the oiliness of the skin and hair. The clinical treatment instituted was based on topical application of a moisturizing dermatological spray solution and on changes made to the enclosure in order to reduce the incidence of sunlight on the individual. The result was satisfactory and had as na aid a portable digital microscope that was used periodically until the recovery of the animal.(AU)
El albinismo es una anomalía genética recesiva en la que la produccíon de la melanina está reducida o ausente, lo que interfiere com la pigmentación de la piel, pelaje y los ojos de los individuos. Se considera un fenómeno natural raro, principalmente en animales salvajes. Los albinos son muy susceptibles al daño de la piel por el sol, ya que la exposición acumulada a los rayos ultravioleta (UV) puede ser dañina. Este reporte discute la ocurrencia de seborrea seca en un tapir albino (Tapirus terrestris), mantenida bajo cuidado humano. La seborrea seca es una enfermedad crónica de la piel en la que falla la queratinización de la epidermis, formándose descamaciones excesivas y alterando la oleosidad de la piel y la pelaje. El tratamiento clínico instituido se basó en la aplicación tópica de uma solución dermatológica hidratante en spray y em la modificación del recinto para reducir la incidencia de la luz solar sobre el individuo. El resultado fue satisfactorio y tuvo como ayuda un miscroscopio digital portátil que se utilizó periódicamente hasta la recuperación del animal.(AU)
Assuntos
Animais , Perissodáctilos/genética , Albinismo/diagnóstico , Dermatite Seborreica/diagnóstico , Animais Selvagens/genéticaResumo
Background: Melanosis is a blackened pigmentation resulting from the accumulation of melanocytes in tissues that are not normally pigmented. This change in the color of the organs occurs due to the agglomeration of melanocytes originating from abnormal migration during embryogenesis and does not cause dysfunction to the affected organ. Although melanosis frequently occurs in several species and affects several organs such as the brain and spinal cord leptomeninges, involvement in the thalamus region is unusual. The objective of this work was to report 2 cases of thalamic melanosis in goats, determining the pathological and histochemical aspects that assist in the diagnosis of this condition. Cases: Two cases of thalamic melanosis in goats were diagnosed. In both cases, the animals had no nervous history disease and clinical signs. The cause of death in cases 1 and 2 was established based on anatomopathological findings and clinical signs being diagnosed with mycoplasmosis and asphyxia, respectively. After fixing and making cross-sections of the brain, a focal lengthy blackened area was observed on the thalamus surface in both cases. Microscopically, lesions in the brain were similar in both cases and exclusively affected the thalamus. These cells had abundant cytoplasm, well delimited with brownish granular pigment. The nuclei were difficult to visualize and in some cells, it was rounded, well-defined, morphologically compatible with melanocytes. Melanocytes were mainly distributed around neurons and often distended the perivascular space of multiple blood vessels. In Fontana Masson staining, the granules in the cytoplasm of these cells stained strongly black. The Prussian Blue, Periodic Acid- Schiff's, Von Kossa, and Giemsa stains were negative, and the pigment remained brown. In the unstained slides, assembled after the deparaffinization and clarification process, it was observed the permanence of cells with blackish-brown pigment in the cytoplasm. In immunohistochemistry, strong immunostaining of pigmented cells with the Anti-MelanA antibodies was observed in both cases. Discussion: The diagnosis of thalamic melanosis in goats was carried out based on the characteristic pathological findings, in which melanin pigments were demonstrated and identified through HE, Fontana-Masson staining, and unstained slides and confirmed by the IHC. The use of complementary histochemical techniques was fundamental for the classification of the pigment as melanin, demonstrating to be an accessible and reliable tool for the diagnosis of pathological processes that lead to the accumulation of pigments and or material in the tissues. The occurrence of melanin in the thalamus may be associated with a failure in the migration of melanoblasts, which would go to the optical pathways or to the thalamus. This erratic migration of melanoblasts can be explained by the fact that the forebrain is the embryogenic origin of the optic and diencephalon pathways. Macroscopically, thalamic melanosis must be differentiated mainly from neoplastic processes such as melanoma and hemangiosarcoma, pigmented fungus infections, Phalaris angusta poisoning, listeriosis, neurocutaneous melanosis, and neuromelanin. It was concluded that thalamic melanosis is an uncommon alteration in goats and although it has been diagnosed as an incidental necropsy finding, should be included in the differential diagnosis of diseases that affect the central nervous system, especially those that have a color change associated with the deposition of pigments in the tissues.
Assuntos
Animais , Doenças Talâmicas/veterinária , Tálamo/patologia , Ruminantes , Melaninas/análise , Melanose/veterinária , Imuno-Histoquímica/veterináriaResumo
Organisms with source-populations restricted to the subterranean biotope (troglobites) are excellent models for comparative evolutionary studies, due to their specialization to permanent absence of light. Eye and dark pigment regression are characteristics of most troglobites. In spite of the advance in knowledge on the mechanisms behind eye regression in cave fishes, very little is known about pigmentation changes. Studies were focused on three species of the genus Pimelodella. Exemplars of the troglobitic P. spelaea and P. kronei were compared with the epigean (surface) P. transitoria, putative sister-species of the latter. Melanophore areas and densities are significantly lower in the troglobitic species. Evaluating the in vitro response of these cells to adrenaline, acetylcholine and MCH, we observed a reduced response in both troglobites to adrenaline. The same trend was observed with MCH, but not statistically significant. No response to acetilcholine was detected in all the three. Contrary to expectations, even though eye-regression in P. spelaea was much lower than in P. kronei, pigmentation regression was more advanced. Multiple mechanisms of loss showing a mosaic of traits in troglobitic fishes are discussed here.(AU)
Organismos com populações-fonte restritas ao biótopo subterrâneo (troglóbios) são excelentes modelos para estudos evolutivos comparativos, devido à especialização resultante do isolamento sob um regime seletivo particular, com ênfase na permanente falta de luz. A regressão do olho e da pigmentação são características dos troglobites. Apesar do avanço do conhecimento sobre os mecanismos subjacentes à regressão ocular em peixes de caverna, pouco se sabe sobre mudanças de pigmentação. Os estudos foram focados em três espécies do gênero Pimelodella. Exemplares das espécies troglóbias P. spelaea e P. kronei foram comparados com a epígea P. transitoria, provável espécie-irmã dessa última. As áreas e densidades dos melanóforos são significativamente menores nas espécies troglóbias. Avaliando a resposta in vitro dessas células à adrenalina, acetilcolina e MCH, observamos uma resposta reduzida em ambos os troglóbios à adrenalina. A mesma tendência foi observado com o MCH, mas não estatisticamente. Nenhuma resposta à acetilcolina foi detectada três. Contrariamente às expectativas, embora a regressão ocular em P. spelaea seja bem menor do que em P. kronei, a regressão na pigmentação foi mais acentuada. Múltiplos mecanismos de regressão, mostrando um mosaico de características em peixes troglóbios, são discutidos aqui.(AU)
Assuntos
Animais , Peixes-Gato/fisiologia , Pigmentação , Cor , Neurotransmissores , Hormônios , PeixesResumo
ABSTRACT Organisms with source-populations restricted to the subterranean biotope (troglobites) are excellent models for comparative evolutionary studies, due to their specialization to permanent absence of light. Eye and dark pigment regression are characteristics of most troglobites. In spite of the advance in knowledge on the mechanisms behind eye regression in cave fishes, very little is known about pigmentation changes. Studies were focused on three species of the genus Pimelodella. Exemplars of the troglobitic P. spelaea and P. kronei were compared with the epigean (surface) P. transitoria, putative sister-species of the latter. Melanophore areas and densities are significantly lower in the troglobitic species. Evaluating the in vitro response of these cells to adrenaline, acetylcholine and MCH, we observed a reduced response in both troglobites to adrenaline. The same trend was observed with MCH, but not statistically significant. No response to acetilcholine was detected in all the three. Contrary to expectations, even though eye-regression in P. spelaea was much lower than in P. kronei, pigmentation regression was more advanced. Multiple mechanisms of loss showing a mosaic of traits in troglobitic fishes are discussed here.
RESUMO Organismos com populações-fonte restritas ao biótopo subterrâneo (troglóbios) são excelentes modelos para estudos evolutivos comparativos, devido à especialização resultante do isolamento sob um regime seletivo particular, com ênfase na permanente falta de luz. A regressão do olho e da pigmentação são características dos troglobites. Apesar do avanço do conhecimento sobre os mecanismos subjacentes à regressão ocular em peixes de caverna, pouco se sabe sobre mudanças de pigmentação. Os estudos foram focados em três espécies do gênero Pimelodella. Exemplares das espécies troglóbias P. spelaea e P. kronei foram comparados com a epígea P. transitoria, provável espécie-irmã dessa última. As áreas e densidades dos melanóforos são significativamente menores nas espécies troglóbias. Avaliando a resposta in vitro dessas células à adrenalina, acetilcolina e MCH, observamos uma resposta reduzida em ambos os troglóbios à adrenalina. A mesma tendência foi observado com o MCH, mas não estatisticamente. Nenhuma resposta à acetilcolina foi detectada três. Contrariamente às expectativas, embora a regressão ocular em P. spelaea seja bem menor do que em P. kronei, a regressão na pigmentação foi mais acentuada. Múltiplos mecanismos de regressão, mostrando um mosaico de características em peixes troglóbios, são discutidos aqui.
Resumo
Melanoblastos podem migrar de forma errática durante a embriogênese, gerando um quadro conhecido como melanose. São raros os estudos envolvendo melanose com acometimento múltiplo dos órgãos. Objetivou-se descrever um caso de melanose multicêntrica em frango de corte que gerou condenação do animal ao abate. Foram encaminhadas ao Laboratório de Patologia Animal da Universidade Federal do Espírito Santo para avaliação histopatológica amostras de diversos órgãos de uma ave de corte da linhagem Cobb de 48-49 dias de idade. Esse animal foi condenado na linha de inspeção por apresentar áreas multifocais enegrecidas. Ao exame microscópico, observou-se melanina multifocal variando de moderada a intensa quantidade em todos os órgãos acometidos com lesões enegrecidas na macroscopia. As áreas pigmentadas foram negativas para a coloração especial de azul da Prússia e não foram encontradas células neoplásicas. A pigmentação da pele em aves comercializadas no Ocidente é rara, pois a característica de pele clara foi selecionada por meio de melhoramento genético, mas pouco se sabe sobre quais mutações desencadeiam melanose nas linhagens selecionadas para não apresentar pigmentação. A ave apresentou melanose multicêntrica e tal alteração não compromete a função dos órgãos acometidos nem representa risco para a saúde humana, no entanto, devido ao aspecto macroscópico, os órgãos que apresentam tal lesão foram condenados para consumo humano.(AU)
Melanoblasts can enter an erratic migratory pathway during embryogenesis and it creates a clinical condition known as melanosis. Studies involving melanosis in multiple organs are rare. The aim of this paper is to describe a case of multicentric melanosis in a broiler resulting in animal condemnation at slaughter. Samples from diverse organs originating from a Cobb broiler, 48-49 days of age, were sent to Laboratório de Patologia Animal from Universidade Federal do Espírito Santo for histopathological avaliation. This animal was condemned in line inspection due to multifocal black areas of pigmentation. At microcopic avaliation, multifocal melanin in moderate-intense amount in all the organs stricken with macroscopic black lesions was noted. Sections of pigmented areas were negative for Prussian Blue and no neoplasic cells were found. Pigmentation of the skin in a broiler from the Ocident is rare because the white/yellow skin was selected through genetic enhancement, but there is some data about which mutations unleash melanosis in lineages selected to not have pigmentation. The broiler had multicentric melanosis and this alteration doesn't change functional activity of the stricken organs and doesn't represent any risk for human health, but the organs with this lesion were condemned for human consumption due to their macroscopic appearance.(AU)
Assuntos
Animais , Galinhas/anormalidades , Hiperpigmentação/veterinária , Melanose/veterinária , Melaninas , Dermatopatias/veterináriaResumo
Melanoblastos podem migrar de forma errática durante a embriogênese, gerando um quadro conhecido como melanose. São raros os estudos envolvendo melanose com acometimento múltiplo dos órgãos. Objetivou-se descrever um caso de melanose multicêntrica em frango de corte que gerou condenação do animal ao abate. Foram encaminhadas ao Laboratório de Patologia Animal da Universidade Federal do Espírito Santo para avaliação histopatológica amostras de diversos órgãos de uma ave de corte da linhagem Cobb de 48-49 dias de idade. Esse animal foi condenado na linha de inspeção por apresentar áreas multifocais enegrecidas. Ao exame microscópico, observou-se melanina multifocal variando de moderada a intensa quantidade em todos os órgãos acometidos com lesões enegrecidas na macroscopia. As áreas pigmentadas foram negativas para a coloração especial de azul da Prússia e não foram encontradas células neoplásicas. A pigmentação da pele em aves comercializadas no Ocidente é rara, pois a característica de pele clara foi selecionada por meio de melhoramento genético, mas pouco se sabe sobre quais mutações desencadeiam melanose nas linhagens selecionadas para não apresentar pigmentação. A ave apresentou melanose multicêntrica e tal alteração não compromete a função dos órgãos acometidos nem representa risco para a saúde humana, no entanto, devido ao aspecto macroscópico, os órgãos que apresentam tal lesão foram condenados para consumo humano.(AU)
Melanoblasts can enter an erratic migratory pathway during embryogenesis and it creates a clinical condition known as melanosis. Studies involving melanosis in multiple organs are rare. The aim of this paper is to describe a case of multicentric melanosis in a broiler resulting in animal condemnation at slaughter. Samples from diverse organs originating from a Cobb broiler, 48-49 days of age, were sent to Laboratório de Patologia Animal from Universidade Federal do Espírito Santo for histopathological avaliation. This animal was condemned in line inspection due to multifocal black areas of pigmentation. At microcopic avaliation, multifocal melanin in moderate-intense amount in all the organs stricken with macroscopic black lesions was noted. Sections of pigmented areas were negative for Prussian Blue and no neoplasic cells were found. Pigmentation of the skin in a broiler from the Ocident is rare because the white/yellow skin was selected through genetic enhancement, but there is some data about which mutations unleash melanosis in lineages selected to not have pigmentation. The broiler had multicentric melanosis and this alteration doesn't change functional activity of the stricken organs and doesn't represent any risk for human health, but the organs with this lesion were condemned for human consumption due to their macroscopic appearance.(AU)
Assuntos
Animais , Galinhas/anormalidades , Melanose/veterinária , Hiperpigmentação/veterinária , Dermatopatias/veterinária , MelaninasResumo
The tongue is regarded as a key organ for bats, since the specialized characters are used for taxonomic and systematic purposes, cladistic studies, and elucidation of patterns of eating habits. This study aimed to characterize morphologically the tongue in the species Artibeus lituratus, Artibeus planirostris, Artibeus obscurus, and Dermanura cinerea, and to report the first evidence of melanin in the lingual epithelium of bats. We used 20 specimens collected in the municipalities of Vitória de Santo Antão and Sirinhaém, in Pernambuco State, Brazil. The tongues were extracted and submitted to routine histological techniques, stained with hematoxylin and eosin (HE) and Fontana-Masson. In the four species, the keratinized stratified pavement epithelium was observed, but with the presence of melanin granules on the basal layer only in the species A. lituratus, A. planirostris, and A. obscurus, evidenced through the Fontana-Masson staining technique. The melanin found in the tongue of these species is characterized as the first record for the order Chiroptera and it may be related to oral asepsis, and/or inhibition of toxic substances observed in plants. Therefore, there is a need for further studies, aiming to improve our knowledge of the function of pigment in this organ.
A língua é considerada um órgão-chave para os morcegos, pois os caracteres especializados são utilizados para fins taxonômicos e sistemáticos, estudos cladísticos e elucidação dos padrões dos hábitos alimentares. Objetivou-se caracterizar morfologicamente a língua das espécies Artibeus lituratus, Artibeus planirostris, Artibeus obscurus e Dermanura cinerea e relatar a primeira evidência de melanina no epitélio lingual de morcegos. Foram utilizados 20 exemplares coletados nos municípios de Vitória de Santo Antão e Sirinhaém, em Pernambuco. As línguas foram extraídas e submetidas a técnicas histológicas de rotina, coradas com hematoxilina e eosina (HE) e Fontana-Masson. Nas quatro espécies, foi observado o epitélio estratificado pavimentoso queratinizado, porém com presença de grânulos de melanina na camada basal somente nas espécies A. lituratus, A. planirostris e A. obscurus, evidenciados por meio da técnica de coloração por Fontana-Masson. A melanina encontrada na língua dessas espécies caracteriza-se como o primeiro registro para a ordem Chiroptera e pode estar relacionada à assepsia oral e/ou à inibição de substâncias tóxicas presentes em vegetais. Portanto, há necessidade de novos estudos, visando aprimorar o conhecimento acerca da função do pigmento nesse órgão.
Assuntos
Animais , Língua/anatomia & histologia , Melaninas/análise , Quirópteros/anatomia & histologia , Amarelo de Eosina-(YS)/administração & dosagem , Hematoxilina/administração & dosagemResumo
The tongue is regarded as a key organ for bats, since the specialized characters are used for taxonomic and systematic purposes, cladistic studies, and elucidation of patterns of eating habits. This study aimed to characterize morphologically the tongue in the species Artibeus lituratus, Artibeus planirostris, Artibeus obscurus, and Dermanura cinerea, and to report the first evidence of melanin in the lingual epithelium of bats. We used 20 specimens collected in the municipalities of Vitória de Santo Antão and Sirinhaém, in Pernambuco State, Brazil. The tongues were extracted and submitted to routine histological techniques, stained with hematoxylin and eosin (HE) and Fontana-Masson. In the four species, the keratinized stratified pavement epithelium was observed, but with the presence of melanin granules on the basal layer only in the species A. lituratus, A. planirostris, and A. obscurus, evidenced through the Fontana-Masson staining technique. The melanin found in the tongue of these species is characterized as the first record for the order Chiroptera and it may be related to oral asepsis, and/or inhibition of toxic substances observed in plants. Therefore, there is a need for further studies, aiming to improve our knowledge of the function of pigment in this organ.(AU)
A língua é considerada um órgão-chave para os morcegos, pois os caracteres especializados são utilizados para fins taxonômicos e sistemáticos, estudos cladísticos e elucidação dos padrões dos hábitos alimentares. Objetivou-se caracterizar morfologicamente a língua das espécies Artibeus lituratus, Artibeus planirostris, Artibeus obscurus e Dermanura cinerea e relatar a primeira evidência de melanina no epitélio lingual de morcegos. Foram utilizados 20 exemplares coletados nos municípios de Vitória de Santo Antão e Sirinhaém, em Pernambuco. As línguas foram extraídas e submetidas a técnicas histológicas de rotina, coradas com hematoxilina e eosina (HE) e Fontana-Masson. Nas quatro espécies, foi observado o epitélio estratificado pavimentoso queratinizado, porém com presença de grânulos de melanina na camada basal somente nas espécies A. lituratus, A. planirostris e A. obscurus, evidenciados por meio da técnica de coloração por Fontana-Masson. A melanina encontrada na língua dessas espécies caracteriza-se como o primeiro registro para a ordem Chiroptera e pode estar relacionada à assepsia oral e/ou à inibição de substâncias tóxicas presentes em vegetais. Portanto, há necessidade de novos estudos, visando aprimorar o conhecimento acerca da função do pigmento nesse órgão.(AU)
Assuntos
Animais , Quirópteros/anatomia & histologia , Língua/anatomia & histologia , Melaninas/análise , Hematoxilina/administração & dosagem , Amarelo de Eosina-(YS)/administração & dosagemResumo
Abstract The tongue is regarded as a key organ for bats, since the specialized characters are used for taxonomic and systematic purposes, cladistic studies, and elucidation of patterns of eating habits. This study aimed to characterize morphologically the tongue in the species Artibeus lituratus, Artibeus planirostris, Artibeus obscurus, and Dermanura cinerea, and to report the first evidence of melanin in the lingual epithelium of bats. We used 20 specimens collected in the municipalities of Vitória de Santo Antão and Sirinhaém, in Pernambuco State, Brazil. The tongues were extracted and submitted to routine histological techniques, stained with hematoxylin and eosin (HE) and Fontana-Masson. In the four species, the keratinized stratified pavement epithelium was observed, but with the presence of melanin granules on the basal layer only in the species A. lituratus, A. planirostris, and A. obscurus, evidenced through the Fontana-Masson staining technique. The melanin found in the tongue of these species is characterized as the first record for the order Chiroptera and it may be related to oral asepsis, and/or inhibition of toxic substances observed in plants. Therefore, there is a need for further studies, aiming to improve our knowledge of the function of pigment in this organ.
Resumo A língua é considerada um órgão-chave para os morcegos, pois os caracteres especializados são utilizados para fins taxonômicos e sistemáticos, estudos cladísticos e elucidação dos padrões dos hábitos alimentares. Objetivou-se caracterizar morfologicamente a língua das espécies Artibeus lituratus, Artibeus planirostris, Artibeus obscurus e Dermanura cinerea e relatar a primeira evidência de melanina no epitélio lingual de morcegos. Foram utilizados 20 exemplares coletados nos municípios de Vitória de Santo Antão e Sirinhaém, em Pernambuco. As línguas foram extraídas e submetidas a técnicas histológicas de rotina, coradas com hematoxilina e eosina (HE) e Fontana-Masson. Nas quatro espécies, foi observado o epitélio estratificado pavimentoso queratinizado, porém com presença de grânulos de melanina na camada basal somente nas espécies A. lituratus, A. planirostris e A. obscurus, evidenciados por meio da técnica de coloração por Fontana-Masson. A melanina encontrada na língua dessas espécies caracteriza-se como o primeiro registro para a ordem Chiroptera e pode estar relacionada à assepsia oral e/ou à inibição de substâncias tóxicas presentes em vegetais. Portanto, há necessidade de novos estudos, visando aprimorar o conhecimento acerca da função do pigmento nesse órgão.
Resumo
Cryptococcus spp. são agentes etiológicos da criptococose. Para estabelecer a infecção, essas leveduras expressam fatores de virulência como a melanina e o biofilme. Esta tese foi dividida em três objetivos: 1. Avaliar os efeitos dos inibidores da bomba de prótons (IBPs) sobre o crescimento e a produção de melanina de Cryptococcus spp.; 2. Investigar a produção de melanina pelo complexo de espécies C. neoformans/C. gattii na presença de diferentes precursores da melanogênese, avaliando o efeito da melanização na sensibilidade antifúngica; 3. Avaliar a atividade de paraquat (PQ) contra Cryptococcus spp. nas formas planctônica e biofilme, bem como o efeito protetor de agentes antioxidantes sobre essa atividade. Buscou-se avaliar ainda a cinética da produção de melanina diante o PQ. As concentrações inibitórias mínimas (CIMs) de IBPs foram determinadas por microdiluição. O efeito dos IBPs na produção de melanina foi avaliado na presença de sulfato de cobre ou glutationa. Foram utilizados como substratos para a melanogênese, a epinefrina, norepinefrina, dopamina, ácido cafeico e L-dopa, sendo em seguida avaliada a sensibilidade in vitro. A atividade da anfotericina B em cepas melanizadas foi investigada no ensaio de time kill. A sensibilidade ao PQ foi avaliada e, em seguida, as cepas expostas ao PQ foram cultivadas em meio com ou sem ácido ascórbico (AA) e glutationa (GSH). Ademais, a produção de melanina foi avaliada na presença de L-dopa + PQ. Os IBPs mostraram CIMs variando de 125-1000 g/mL e redução da melanização em células de Cryptococcus. O sulfato de cobre e a glutationa restauraram a melanogênese das cepas na presença de IBPs. Adicionalmente, a presença de IBPs diminuiu a toxicidade do sulfato de cobre (1 mM). As cepas produziram melanina, em escalas diferenciada, de acordo com o substrato testado. As células melanizadas foram mais tolerantes à anfotericina B. No tocante ao efeito do PQ, observou-se CIM variando de 8-256 g/mL e uma inibição na formação do biofilme. O efeito inibitório planctônico foi restaurado por AA e GSH. Além disso, L-dopa + PQ alterou a cinética da produção de melanina. Em conclusão, observou-se que IBPs inibem o crescimento planctônico e a melanogênese em Cryptococcus spp., sendo este último efeito dependente da quelação do cobre ou inibição do transporte de cobre ATPase. Ademais, os dados em conjunto, evidenciaram que a melanina contribui para a maior resiliência de Cryptococcus spp. a drogas antifúngicas, como a anfotericina B, e agentes agressores ambientais, como o paraquat.
Cryptococcus spp. are etiological agents of cryptococcosis. To establish infection, these yeasts produce virulence factors such as melanin and biofilm. This thesis was divided into three aims: 1. Evaluate the effects of proton pump inhibitors (PPIs) on growth and melanin production by Cryptococcus spp.; 2. Investigate the production of melanin by the C. neoformans/C. gattii species complex in the presence of different precursors of melanogenesis, evaluating the effect of melanization on antifungal susceptibility. 3. Evaluate the activity of paraquat (PQ) against Cryptococcus spp. in planktonic and biofilm forms, as well as the protective role of antioxidant agents against PQ. We also sought to evaluate the kinetics of melanin production in the presence of PQ. Minimum inhibitory concentrations (MICs) of PPIs were determined by microdilution. The effect of PPIs on melanin production was evaluated in the presence of copper sulfate or glutathione. As substrates for melanogenesis, epinephrine, norepinephrine, dopamine, caffeic acid and L-dopa were used, then, in vitro susceptibility was evaluated. Amphotericin B activity against melanized strains was investigated by the time kill assay. The susceptibility to PQ was evaluated and the strains exposed to the PQ were cultivated in medium with or without ascorbic acid (AA) and glutathione (GSH). Furthermore, melanin production was evaluated in the presence of L-dopa + PQ. PPIs showed MICs ranging from 125-1000 g/mL and reduced melanization of Cryptococcus cells. Copper sulfate and glutathione restored the melanogenesis of the strains in the presence of PPIs. Additionally, the presence of PPIs decreased copper sulphate toxicity (1 mM). The strains produced melanin, at different levels, according to the tested substrate. Melanized cells were more tolerant to amphotericin B. Regarding the effect of PQ, MICs ranged from 8-256 g/mL and biofilm formation was inhibited. The inhibitory effect of PQ was hampered by AA and GSH. Furthermore, L-dopa + PQ altered the kinetics of melanin production. In conclusion, it was observed that PPIs inhibit planktonic growth and melanogenesis of Cryptococcus spp., with the latter being dependent on copper chelation or inhibition of copper ATPase transport. Furthermore, altogether, the data showed that melanin contributes to reduced susceptibility of Cryptococcus spp. to the antifungal drug amphotericin B, and the environmental aggressor paraquat.
Resumo
Melaninas formam um grupo diverso de pigmentos sintetizados na maioria dos organismos por meio da hidroxilação e polimerização de compostos orgânicos. Nos fungos, a melanina exerce um importante papel na proteção contra as intempéries ambientais, a radiação ultravioleta, extremos de temperaturas, além de aumentar a virulência e a patogenicidade destes organismos. Assim, buscou-se descrever a síntese de melanina em Duddingtonia flagrans, fungo nematófago, e a relação da melanização sobre a cinética de predação do nematoide Panagrellus spp. Para tal foram testados diferentes meios de cultura na presença e na ausência de precursores L-DOPA, na adição de glicose e do inibidor tricyclazol. As análises foram realizadas por espectroscopia de infravermelho, ressonância paramagnética eletrônica (RPE) e microscopia eletrônica de transmissão. O melhor crescimento e a melanização do fungo ocorreram em meio Sabouraud dextrose quando comparado aos demais meios utilizados, após 21 dias incubados a 30°C. O acréscimo de glicose nas concentrações de 2% a 10% (v/w) não inibiu o processo de melanização em D. flagrans. Entretanto acréscimos de 2% de glicose em pH 5,0 observou-se um aumento na coloração em relação aos demais tratamentos. Nas concentrações de glicose acima de 10% ocorreu a inibição completa do crescimento. Como conclusão pode-se confirmar a presença do pigmento melanina e atribuir os valores obtidos por RPE (g=2.0051 0.0001) a produção de feomelanina pelo fungo. Ainda, pode-se verificar a deposição dos grânulos de melanina sobre a parede celular. A síntese da melanina ocorreu em melanossomos e sua gênese é análoga a de melanossomos de células de mamíferos. Contudo, a presença de melanina não influenciou de forma significativa a cinética de predação entre o fungo e nematoide.
Melanins form a diverse group of pigments synthesized in most organisms through the hydroxylation and polymerization of organic compounds.In the fungi, melanin has an important role in protecting against environmental inclemencies, ultraviolet radiation, temperature extremes, virulence and pathogenicity of these organisms. Thus, we attempted to describe the melanin synthesis in Duddingtonia flagrans, nematophagous fungus, and the relationship between melanization and predation kinetics of Panagrellus spp. nematode. For this, differents culture media were tested in presence and in absence of L-DOPA precursors, in addition of glucose and tricyclazole inhibitor. The analysis were realized by infrared spectroscopy, electronic paramagnetic resonance (EPR) and transmission electron microscopy. The better growth and melanization of the fungus occurred in Sabouraud dextrose medium when compared to other media used after 21 days incubated at 30°C. The addition of glucose at 2% to 10% (v/w) concentrations did not inhibit the melanization process in D. flagrans. However, the addition of glucose at 2% at pH 5.0, it was observed an increase staining in relation to others treatments. In the glucose concentrations above 10% occurred complete inhibition of growth. It was confirmed the presence of melanin pigment and to assign the values obtained by RPE (g=2.0051 0.0001) to production of pheomelanin by the fungus. And it was observed the deposition of the melanin granules on the cell wall. Melanin synthesis has occurred in melanosomes and its genesis is analogous to that of mammalian cell melanosomes. However, the presence of melanin did not significantly influence the kinetics of predation between the fungus and the nematode.
Resumo
O Lobo-marinho-sul-americano (Arctocephalus australis) é um mamífero marinho anfíbio distribuído ao longo da Costa do Atlântico e do Pacífico da América do Sul. Esta espécie está bem adaptada a diferentes habitats devido à morfologia dos membros em forma de nadadeira e de seu sistema tegumentar. Estudos imuno-histoquímicos são importantes para avaliar os mecanismos de adaptação da pele devido a diferencial expressão dos antígenos presentes no tecido dependendo da região da superfície corporal. Entretanto, sua epiderme altamente pigmentada (melanina) impede a visualização dos marcadores cromógenos utilizados na imunohistoquímica. Neste trabalho foi desenvolvido um método de clarear a melanina para permitir a visualização dos cromógenos sem alterar a afinidade antígeno-anticorpo para a imuno-histoquímica. A análise do índice do PCNA (proliferating cell nuclear antigen) na epiderme de A. australis, com diaminobenzidina (DAB) como cromógeno foi usada para testar o método. O clareamento da melanina permitiu obter o índice de proliferação celular na epiderme e evitar resultados falso-positivos sem afetar os resultados imuno-histoquímicos.(AU)
The South American fur seal (Arctocephalus australis) is an amphibious marine mammal distributed along the Atlantic and Pacific coasts of South America. The species is well adjusted to different habitats due to the morphology of its fin-like members and due to some adaptations in their integumentary system. Immunohistochemical studies are very important to evaluate the mechanisms of skin adaptation due the differential expression of the antigens present in the tissue depending of the region of the body surface. However, its strongly pigmented (melanin) epidermis prevents the visualization of the immunohistochemical chromogens markers. In this study a melanin bleaching method was developed aimed to allow the visualization of the chromogens without interfering in the antigen-antibody affinity for immunohistochemistry. The analysis of PCNA (proliferating cell nuclear antigen) index in the epidermis of A. australis by immunohistochemistry with diaminobenzidine (DAB) as chromogen was used to test the method. The bleaching of the melanin allowed to obtain the cell proliferation index in epidermis and to avoid false positive results without affecting the immunohistochemical results.(AU)
Assuntos
Animais , Otárias/classificação , Melaninas/genética , Epiderme/anatomia & histologia , Proliferação de CélulasResumo
Um dos principais motivos pelos quais cães e gatos são levados ao consultório ou clínica veterinária é a percepçãopor parte dos proprietários da alopecia. Diversas dermatopatias podem levar a este sintoma, em variados graus,e, acompanhados ou não de outros tipos de lesões. O objetivo deste trabalho é relatar um caso clínico de alopeciapor diluição da cor (ADC) e um caso de displasia folicular dos pelos pretos (DFPP), duas doenças consideradasraras. Os cães foram atendidos na Clínica Veterinária Animais em Pessoa, na cidade de João Pessoa PB (AU)
One of the main reasons why dogs and cats are taken to the clinic or veterinary clinic is the perceptionby the owners of alopecia. Various skin diseases can lead to this symptom, in varying degrees, and withor without other lesions. The objective of this study is to report a clinical case of color dilution alopecia(CDA) and a case of black hair follicular dysplasia (BHFD), both considered rare diseases. The dogs weretreated at Animais em Pessoa Veterinary Clinic in the city of João Pessoa - PB. (AU)
Assuntos
Animais , Cães , Cães , DermatologiaResumo
Um dos principais motivos pelos quais cães e gatos são levados ao consultório ou clínica veterinária é a percepçãopor parte dos proprietários da alopecia. Diversas dermatopatias podem levar a este sintoma, em variados graus,e, acompanhados ou não de outros tipos de lesões. O objetivo deste trabalho é relatar um caso clínico de alopeciapor diluição da cor (ADC) e um caso de displasia folicular dos pelos pretos (DFPP), duas doenças consideradasraras. Os cães foram atendidos na Clínica Veterinária Animais em Pessoa, na cidade de João Pessoa PB
One of the main reasons why dogs and cats are taken to the clinic or veterinary clinic is the perceptionby the owners of alopecia. Various skin diseases can lead to this symptom, in varying degrees, and withor without other lesions. The objective of this study is to report a clinical case of color dilution alopecia(CDA) and a case of black hair follicular dysplasia (BHFD), both considered rare diseases. The dogs weretreated at Animais em Pessoa Veterinary Clinic in the city of João Pessoa - PB.
Assuntos
Animais , Cães , Cães , DermatologiaResumo
Relata-se o caso de um cão mestiço macho, malhado de preto e branco, com idade de 18 meses, atendidoem função de alopecia restrita às áreas de pelagem preta. O proprietário informou que o cão nasceu normal e começou a apresentar alterações de pelagem por volta dos três meses de idade, com afecção somente das áreas pretas. A perda de pelos persistiu, e por volta dos oito meses de idade opaciente já apresentava ausência total de todos os pelos pretos, e o histórico revelou que corticoterapia oral não surtiu efeito. O exame físico revelou pele e pelagem brancas normais circundando manchas pretas de alopecia, onde a pele apresentava oleosidade e descamação. Sob diagnóstico presuntivo dedisplasia folicular, amostras de pele foram colhidas por meio de biópsia com punch, e enviadas para exame histopatológico. A microscopia revelou moderada hiperceratose ortoceratótica da epiderme e folículos pilosos atrófi cos, em cujo interior existia somente grande quantidade de restos de ceratina,e apenas alguns pelos de aparência distorcida. Havia displasia pigmentar importante, com presença de grandes agregados de melanina tanto nos folículos pilosos quanto no epitélio folicular. Não se observaram alterações de cunho infl amatório, e as lesões histológicas eram consistentes, confi rmando o diagnóstico clínico de displasia congênita de pelos pretos. Trata-se de uma enfermidade rara, e este relato contribui para seu registro no Brasil, resgatando um caso originalmente apresentado em 1998,no XVI Congresso Panamericano de Ciências Veterinárias (Santa Cruz de la Sierra, Bolivia). (AU)
A male black and white spotted mongrel dog with 18 months of age, with clinical history of alopecia restricted to the black areas of the coat was examined because of dermatological disease. The owner informed that the dog was normal at birth and started to show the coat changes by 2-3 months of age,only the black areas being affected. The hair loss continued and by 8 months of age the animal had total black hair alopecia. The dog had being treated with oral steroids without clinical results. Physical examination revealed normal white hair and skin surrounding black patches of alopecia. In these areas the skin was greasy and scaly. A tentative diagnosis of black hair follicular dysplasia was made and samples of skin were collected by punch biopsy. Histological examination of the samples revealed moderate orthokeratotic hyperkeratosis, atrophy of the epidermis and atrophic hair follicles, which had only occasional and distorted hair shafts and abundant keratin remnants in their interiors. Pigmentary incontinence was prominent, with large aggregates of melanin being present both within the hair follicles and in the follicular epithelium. Inflammatory changes were not present at the samples. The histological lesions were consistent and confirmed the tentative clinical diagnosis of congenital black hair dysplasia. It is a rare disorder and this report contributes to its diagnosisin Brazil, recovering a case originally presented in 1998, at the XVI Pan-American Congress of Veterinary Sciences (Santa Cruz de la Sierra, Bolivia). (AU)
Assuntos
Animais , Masculino , Cães , Cães , Alopecia/veterinária , Biópsia/veterináriaResumo
Relata-se o caso de um cão mestiço macho, malhado de preto e branco, com idade de 18 meses, atendidoem função de alopecia restrita às áreas de pelagem preta. O proprietário informou que o cão nasceu normal e começou a apresentar alterações de pelagem por volta dos três meses de idade, com afecção somente das áreas pretas. A perda de pelos persistiu, e por volta dos oito meses de idade opaciente já apresentava ausência total de todos os pelos pretos, e o histórico revelou que corticoterapia oral não surtiu efeito. O exame físico revelou pele e pelagem brancas normais circundando manchas pretas de alopecia, onde a pele apresentava oleosidade e descamação. Sob diagnóstico presuntivo dedisplasia folicular, amostras de pele foram colhidas por meio de biópsia com punch, e enviadas para exame histopatológico. A microscopia revelou moderada hiperceratose ortoceratótica da epiderme e folículos pilosos atrófi cos, em cujo interior existia somente grande quantidade de restos de ceratina,e apenas alguns pelos de aparência distorcida. Havia displasia pigmentar importante, com presença de grandes agregados de melanina tanto nos folículos pilosos quanto no epitélio folicular. Não se observaram alterações de cunho infl amatório, e as lesões histológicas eram consistentes, confi rmando o diagnóstico clínico de displasia congênita de pelos pretos. Trata-se de uma enfermidade rara, e este relato contribui para seu registro no Brasil, resgatando um caso originalmente apresentado em 1998,no XVI Congresso Panamericano de Ciências Veterinárias (Santa Cruz de la Sierra, Bolivia).
A male black and white spotted mongrel dog with 18 months of age, with clinical history of alopecia restricted to the black areas of the coat was examined because of dermatological disease. The owner informed that the dog was normal at birth and started to show the coat changes by 2-3 months of age,only the black areas being affected. The hair loss continued and by 8 months of age the animal had total black hair alopecia. The dog had being treated with oral steroids without clinical results. Physical examination revealed normal white hair and skin surrounding black patches of alopecia. In these areas the skin was greasy and scaly. A tentative diagnosis of black hair follicular dysplasia was made and samples of skin were collected by punch biopsy. Histological examination of the samples revealed moderate orthokeratotic hyperkeratosis, atrophy of the epidermis and atrophic hair follicles, which had only occasional and distorted hair shafts and abundant keratin remnants in their interiors. Pigmentary incontinence was prominent, with large aggregates of melanin being present both within the hair follicles and in the follicular epithelium. Inflammatory changes were not present at the samples. The histological lesions were consistent and confirmed the tentative clinical diagnosis of congenital black hair dysplasia. It is a rare disorder and this report contributes to its diagnosisin Brazil, recovering a case originally presented in 1998, at the XVI Pan-American Congress of Veterinary Sciences (Santa Cruz de la Sierra, Bolivia).
Assuntos
Masculino , Animais , Cães , Alopecia/veterinária , Cães , Biópsia/veterináriaResumo
Frankia são microrganismos capazes de fixar N2 quando em simbiose com espécies arbóreas, denominadas plantas actinorrízicas. Este estudo foi conduzido para caracterizar morfologicamente, fisiologicamente e avaliar a nodulação de quatro estirpes referência de Frankia (HFPCcI3, JCT287, KB5 e F59) e 12 estirpes(IPRF) isoladas de nódulos de Casuarina. Todas as estirpes (Referência e IPRF) foram Gram-positivas e 50% foram acid-fast. As estirpes de Frankia alcalinizaram o meio de cultura, exceto IPRF006, IPRF008e IPRF010. As colônias das estirpes F59, IPRF002, IPRF004, IPRF005 e IPRF011, produziram melanina. Entre as estirpes referência, apenas a JCT287 cresceu no meio de cultura com pH 5,5, enquanto no meio com pH 6,0 as duas, JCT287 e KB5, apresentaram crescimento. A análise de regressão mostrou uma relação linear (Y = 67,56+ 3,88X e R2=0,5862, p<0,05) e coeficiente de correlação de Pearson (r=0,766,p<0,05) entre número de esporos e hifas (120 a 480 UFC mL-1) e proteína total (18 a 145 µg mL-1). Foi observado que a estirpe F59 apresentou uma maior proporção de proteína total (50%) do que a JCT287(7,0%) e, que as estirpes IPRF mostraram valores entre 17,5 e 29,3%. Todas as estirpes produziram compostos indólicos com valores variando de 5,9 a 98,8 µM.(AU)
Frankia are soil microorganisms that form symbiosis with roots of tree species called actinorhizal plants and are capable of fixing atmospheric N2. This study was carried out to characterize morphologically, physiologically and to assess the nodulation of four Frankia reference strains (HFPCcI3, JCT287, KB5and F59) and 12 (IPRF) isolated from root nodules of Casuarina plants. All strains (Reference and IPRF)were characterized as Gram-positive and 50% as acid-fast. The Frankia strains produced alkali in the culture medium, except the IPRF006, IPRF008 and IPRF010. The colonies of strains F59, IPRF002, IPRF004,IPRF005, and IPRF011 produced melanin. Among reference strains, only JCT287 grew in culture mediawith pH 5.5, while with pH 6.0 both strains JCT287 and KB5 presented growth. The regression analysis showed a linear relationship (Y = 67.56+ 3.88X and R2=0.5862, p<0.05) and Pearsons correlation coefficient(r=0.766, p<0.05) between number of spores and hyphae (120 to 480 UFC mL-1) and total protein (18 to 145µg mL-1). It was observed that the strains F59 had a higher proportion of total protein 50.0% than JCT287with 7.0% and that the IPRF strains showed values between 17.5 and 29.3%. All strains presented ability to produce indolic compounds in growth media with values ranging from 5.9 to 98.8 µM.
Assuntos
Actinobacteria , Frankia , Fixação de NitrogênioResumo
Cryptococcus neoformans is an important opportunistic fungal pathogen that causes life-threatening infection of the central nervous system. A major virulence factor for C. neoformans is the production of melanin in the cell wall. Using transmission electron microscopy, we studied the cell walls of three pairs of isolates obtained from patients with dual cryptococcal infections, where a melanotic and an albino strain were isolated from the CSF of each patient. Transmission Electron Microscopy revealed that the albino strains lacked a melanin layer whereas a melanin layer was associated with the cell wall of the melanotic strains, comprising approximately 75% of the cell wall area. The cell wall size of the melanin producing cells was approximately double the size the albino isolates' cell walls (p value = 0.003). In this study TEM revealed that the differences in the ultrastructure of the melanin lacking and melanin producing isolates were associated to the cell wall and the melanin layer.
Cryptococcus neoformans é um importante fungo oportunista patogênico que causa infecção no sistema nervoso central, e que pode levar o paciente à morte. Um dos principais fatores de virulência do C. neoformans é a produção de melanina na parede celular. Utilizando microscopia eletrônica de transmissão, nós estudamos as paredes celulares de três pares de isolados obtidos de pacientes com dupla infecção pelo fungo, onde um isolado melanizado e um albino foram isolados do líquor de cada paciente. A microscopia eletrônica de transmissão revelou que as cepas albinas não apresentavam a camada de melanina enquanto que uma camada de melanina estava associada com a parede celular de cepas melanóticas, constituindo aproximadamente 75% da área da parede celular. O tamanho da parede celular das células produtoras de melanina foi aproximadamente o dobro do tamanho da parede celular dos isolados albinos (p 0,003). Neste estudo, a microscopia eletrônica de transmissão revelou que as diferenças na estrutura dos isolados albinos sem melanina e dos isolados produtores de melanina estava associada à parede celular e a camada de melanina.
Resumo
A mutant (407-P) of Bacillus thuringiensis subsp. thuringiensis strain 407 producing a melanin was obtained after treatment with the mutagenic agent ethyl-methane-sulfonate. Several microbiological and biochemical properties of the two strains were analyzed and the results were similar. The mutant 407-P was also incorporated into non-sterilized soil samples, recovered, easily identified, and quantified, what enables its use in ecology of B. thuringiensis.
Um mutante (407-P) da linhagem Bacillus thuringiensis subsp. thuringiensis 407 produtor de melanina foi obtido após tratamento com o agente mutagênico etil-metano-sulfonato. Diversas propriedades microbiológicas e bioquímicas das duas linhagens foram analisadas e os resultados foram similares. O mutante 407-P foi incorporado em amostras de solo não esterilizado, recuperado, facilmente identificado e quantificado, possibilitando seu uso em estudos de ecologia de B. thuringiensis.