Resumo
O Mesoclemmys vanderhaegei (Testudines: Chelidae) é um quelônio de água doce cuja ocorrência é descrita nas bacias dos rios Amazonas, Tocantins, Paraguai, Paraná e Uruguai. Consta na lista vermelha de espécies ameaçadas da International Union for Conservation of Nature, como espécie de baixo risco, mas que poderá se tornar ameaçada, sendo necessário a atualização de seus dados ecológicos e biológicos. Considerando que planos de manejo e conservação de espécies dependem também de vasto conhecimento sobre a biologia reprodutiva, apresentamos a primeira descrição macroscópica dos órgãos genitais de fêmeas jovens e adultas de M. vanderhaegei correlacionando esses achados ao tamanho do espécime e ao período do ano. Exemplares de M. vanderhaegei foram coletados no município de Chapada dos Guimarães, área de ampla ocorrência natural da espécie. A descrição dos órgãos genitais foi realizada a partir de 17 fêmeas fixadas em formol a 10% e dissecadas para evidenciação de particularidades relacionadas à anatomia externa e interna. Os órgãos genitais M. vanderhaegei jovens e adultas são constituídos por pares de ovários e ovidutos que desembocam dorsolateralmente na cloaca, formando junto com o ureter a papila urogenital. Os ovários são órgãos alongados, com a extremidade cranial mais larga e caudal afunilada, já os ovidutos são longos e localizados lateralmente aos ovários, sendo em adultas, muito diferenciado na sua forma e tamanho em relação ao das jovens. Em ambas faixas etárias, os órgãos genitais são sustentados por pregas de membrana celomática que emergem do teto da cavidade, constituindo os mesovário e mesoviduto. De acordo com a forma e o padrão de mucosa do oviduto em fêmeas adultas, o segmento cranial corresponde as regiões do infundíbulo e magnum, o segmento médio, ao istmo e no caudal identificam-se as regiões útero e vagina. No assoalho do urodeum aloja-se o clitóris. O comprimento retilíneo de carapaça e massa corpórea entre fêmeas imaturas e adultas variam, respectivamente, entre 134-155,6mm e 134,43-365g. A maioria das fêmeas jovens foram capturadas no período chuvoso e as adultas sem e com ovos no período seco. As características macroscópicas dos órgãos genitais observadas em M. vanderhaegei são compartilhadas com outros Testudines, exceto pela papila urogenital e presença do clitóris.(AU)
Mesoclemmys vanderhaegei (Testudines: Chelidae) is a freshwater turtle with occurrence in Amazon, Tocantins, Paraguai, Paraná and Uruguai rivers basins. Although according to International Union for Conservation of Nature, it has low risk of extinction, there is an uptade necessity of ecological and biological data. Considering that the management and conservation plans are related to a wide knowledge of reproductive biology, a first macroscopic description about the young and adults females of M. vanderhaegei is important. These points were correlated to the specimens size and period of the year. The samples of M. vanderhaegei were collected in Chapada dos Guimarães county, Mato Grosso, Brazil, an area of large natural occurrence of the specimens. Genital organs of seventeen females were fixed in 10% formalin and then dissected to demonstrate the particularities related to external and internal anatomy. The young and adult M. vanderhaegei genitals organs are composed of ovaries and oviducts pairs that dorsolaterally discharge into the cloaca, forming with the ureter, the urogenital papilla. The ovaries are elongated organs with larger cranial and elongated caudal portions. The oviducts, which are in adults very differentiated in its shape and size compared to the young, are long and located laterally to the ovaries. In both age groups, the genital organs are supported by celomatic membrane folds that emerge from the ceiling of the cavity, constituting the mesovary and mesoviduct. In adult females, according to the shape and pattern of the oviduct mucosa, the cranial segment corresponds to the regions of the infundibulum and magnum; the middle segment, the isthmus and the caudal segment identify the uterus and vagina regions. The clitoris is sited on the floor of the urodeum. The carapace linear length and body mass between immature and adult females vary to 134-155.6mm e 134.43-365g respectively. The main part of young females was captured in rainy period and the adults, with and without eggs, at dry period. The macroscopic characteristics of the M. vanderhaegei genital organs are also observed in others Testudines, with the exception of urogenital papilla and by the clitoris presence.(AU)
Assuntos
Animais , Feminino , Tartarugas/anatomia & histologia , Genitália Feminina/anatomia & histologiaResumo
O Mesoclemmys vanderhaegei (Testudines: Chelidae) é um quelônio de água doce cuja ocorrência é descrita nas bacias dos rios Amazonas, Tocantins, Paraguai, Paraná e Uruguai. Consta na lista vermelha de espécies ameaçadas da International Union for Conservation of Nature, como espécie de baixo risco, mas que poderá se tornar ameaçada, sendo necessário a atualização de seus dados ecológicos e biológicos. Considerando que planos de manejo e conservação de espécies dependem também de vasto conhecimento sobre a biologia reprodutiva, apresentamos a primeira descrição macroscópica dos órgãos genitais de fêmeas jovens e adultas de M. vanderhaegei correlacionando esses achados ao tamanho do espécime e ao período do ano. Exemplares de M. vanderhaegei foram coletados no município de Chapada dos Guimarães, área de ampla ocorrência natural da espécie. A descrição dos órgãos genitais foi realizada a partir de 17 fêmeas fixadas em formol a 10% e dissecadas para evidenciação de particularidades relacionadas à anatomia externa e interna. Os órgãos genitais M. vanderhaegei jovens e adultas são constituídos por pares de ovários e ovidutos que desembocam dorsolateralmente na cloaca, formando junto com o ureter a papila urogenital. Os ovários são órgãos alongados, com a extremidade cranial mais larga e caudal afunilada, já os ovidutos são longos e localizados lateralmente aos ovários, sendo em adultas, muito diferenciado na sua forma e tamanho em relação ao das jovens. Em ambas faixas etárias, os órgãos genitais são sustentados por pregas de membrana celomática que emergem do teto da cavidade, constituindo os mesovário e mesoviduto. De acordo com a forma e o padrão de mucosa do oviduto em fêmeas adultas, o segmento cranial corresponde as regiões do infundíbulo e magnum, o segmento médio, ao istmo e no caudal identificam-se as regiões útero e vagina. No assoalho do urodeum aloja-se o clitóris. O comprimento retilíneo de carapaça e massa corpórea entre fêmeas imaturas e adultas variam, respectivamente, entre 134-155,6mm e 134,43-365g. A maioria das fêmeas jovens foram capturadas no período chuvoso e as adultas sem e com ovos no período seco. As características macroscópicas dos órgãos genitais observadas em M. vanderhaegei são compartilhadas com outros Testudines, exceto pela papila urogenital e presença do clitóris.(AU)
Mesoclemmys vanderhaegei (Testudines: Chelidae) is a freshwater turtle with occurrence in Amazon, Tocantins, Paraguai, Paraná and Uruguai rivers basins. Although according to International Union for Conservation of Nature, it has low risk of extinction, there is an uptade necessity of ecological and biological data. Considering that the management and conservation plans are related to a wide knowledge of reproductive biology, a first macroscopic description about the young and adults females of M. vanderhaegei is important. These points were correlated to the specimens size and period of the year. The samples of M. vanderhaegei were collected in Chapada dos Guimarães county, Mato Grosso, Brazil, an area of large natural occurrence of the specimens. Genital organs of seventeen females were fixed in 10% formalin and then dissected to demonstrate the particularities related to external and internal anatomy. The young and adult M. vanderhaegei genitals organs are composed of ovaries and oviducts pairs that dorsolaterally discharge into the cloaca, forming with the ureter, the urogenital papilla. The ovaries are elongated organs with larger cranial and elongated caudal portions. The oviducts, which are in adults very differentiated in its shape and size compared to the young, are long and located laterally to the ovaries. In both age groups, the genital organs are supported by celomatic membrane folds that emerge from the ceiling of the cavity, constituting the mesovary and mesoviduct. In adult females, according to the shape and pattern of the oviduct mucosa, the cranial segment corresponds to the regions of the infundibulum and magnum; the middle segment, the isthmus and the caudal segment identify the uterus and vagina regions. The clitoris is sited on the floor of the urodeum. The carapace linear length and body mass between immature and adult females vary to 134-155.6mm e 134.43-365g respectively. The main part of young females was captured in rainy period and the adults, with and without eggs, at dry period. The macroscopic characteristics of the M. vanderhaegei genital organs are also observed in others Testudines, with the exception of urogenital papilla and by the clitoris presence.(AU)
Assuntos
Animais , Feminino , Tartarugas/anatomia & histologia , Genitália Feminina/anatomia & histologiaResumo
ABSTRACT: Mesoclemmys vanderhaegei (Testudines: Chelidae) is a freshwater turtle with occurrence in Amazon, Tocantins, Paraguai, Paraná and Uruguai rivers basins. Although according to International Union for Conservation of Nature, it has low risk of extinction, there is an uptade necessity of ecological and biological data. Considering that the management and conservation plans are related to a wide knowledge of reproductive biology, a first macroscopic description about the young and adults females of M. vanderhaegei is important. These points were correlated to the specimens size and period of the year. The samples of M. vanderhaegei were collected in Chapada dos Guimarães county, Mato Grosso, Brazil, an area of large natural occurrence of the specimens. Genital organs of seventeen females were fixed in 10% formalin and then dissected to demonstrate the particularities related to external and internal anatomy. The young and adult M. vanderhaegei genitals organs are composed of ovaries and oviducts pairs that dorsolaterally discharge into the cloaca, forming with the ureter, the urogenital papilla. The ovaries are elongated organs with larger cranial and elongated caudal portions. The oviducts, which are in adults very differentiated in its shape and size compared to the young, are long and located laterally to the ovaries. In both age groups, the genital organs are supported by celomatic membrane folds that emerge from the ceiling of the cavity, constituting the mesovary and mesoviduct. In adult females, according to the shape and pattern of the oviduct mucosa, the cranial segment corresponds to the regions of the infundibulum and magnum; the middle segment, the isthmus and the caudal segment identify the uterus and vagina regions. The clitoris is sited on the floor of the urodeum. The carapace linear length and body mass between immature and adult females vary to 134-155.6mm e 134.43-365g respectively. The main part of young females was captured in rainy period and the adults, with and without eggs, at dry period. The macroscopic characteristics of the M. vanderhaegei genital organs are also observed in others Testudines, with the exception of urogenital papilla and by the clitoris presence.
RESUMO: O Mesoclemmys vanderhaegei (Testudines: Chelidae) é um quelônio de água doce cuja ocorrência é descrita nas bacias dos rios Amazonas, Tocantins, Paraguai, Paraná e Uruguai. Consta na lista vermelha de espécies ameaçadas da International Union for Conservation of Nature, como espécie de baixo risco, mas que poderá se tornar ameaçada, sendo necessário a atualização de seus dados ecológicos e biológicos. Considerando que planos de manejo e conservação de espécies dependem também de vasto conhecimento sobre a biologia reprodutiva, apresentamos a primeira descrição macroscópica dos órgãos genitais de fêmeas jovens e adultas de M. vanderhaegei correlacionando esses achados ao tamanho do espécime e ao período do ano. Exemplares de M. vanderhaegei foram coletados no município de Chapada dos Guimarães, área de ampla ocorrência natural da espécie. A descrição dos órgãos genitais foi realizada a partir de 17 fêmeas fixadas em formol a 10% e dissecadas para evidenciação de particularidades relacionadas à anatomia externa e interna. Os órgãos genitais M. vanderhaegei jovens e adultas são constituídos por pares de ovários e ovidutos que desembocam dorsolateralmente na cloaca, formando junto com o ureter a papila urogenital. Os ovários são órgãos alongados, com a extremidade cranial mais larga e caudal afunilada, já os ovidutos são longos e localizados lateralmente aos ovários, sendo em adultas, muito diferenciado na sua forma e tamanho em relação ao das jovens. Em ambas faixas etárias, os órgãos genitais são sustentados por pregas de membrana celomática que emergem do teto da cavidade, constituindo os mesovário e mesoviduto. De acordo com a forma e o padrão de mucosa do oviduto em fêmeas adultas, o segmento cranial corresponde as regiões do infundíbulo e magnum, o segmento médio, ao istmo e no caudal identificam-se as regiões útero e vagina. No assoalho do urodeum aloja-se o clitóris. O comprimento retilíneo de carapaça e massa corpórea entre fêmeas imaturas e adultas variam, respectivamente, entre 134-155,6mm e 134,43-365g. A maioria das fêmeas jovens foram capturadas no período chuvoso e as adultas sem e com ovos no período seco. As características macroscópicas dos órgãos genitais observadas em M. vanderhaegei são compartilhadas com outros Testudines, exceto pela papila urogenital e presença do clitóris.
Resumo
Foram realizados dois estudos objetivando ajustar protocolos de inseminação artificial em tempo fixo (IATF) para incrementar a prenhez por IA (P/IA) de touros Nelore de menor fertilidade e predizer a fertilidade a campo de touros Holandês. No primeiro estudo, vacas Nelore (n = 1133) foram submetidas a um protocolo de IATF, iniciando no Dia -10, com a inserção de um dispositivo intravaginal de progesterona (P4, 1,0 g) e aplicação de benzoato de estradiol (BE, 2,0 mg). No Dia -2, o dispositivo de P4 foi removido e as vacas receberam cloprostenol sódico (PGF, 0,5 mg), eCG (300 UI) e cipionato de estradiol (CE, 1,0 mg). No Dia -0,5 ou 0 as vacas foram submetidas aos tratamentos com GnRH (G- 16 = GnRH 16 h antes da IA ou G0 = GnRH na AI). No Dia 0 as vacas foram inseminadas e distribuídas no tratamento de categoria de fertilidade de touros [A = uma dose de sêmen de touro de fertilidade mais alta (n = 3); B1 = uma dose de sêmen de touro de fertilidade mais baixa (n = 3); B2 = duas doses de sêmen de touro B (n = 3)]. Além disso, foi realizado o teste de ligação espermática em agregados de células do oviduto. Foi utilizado sêmen de touros A (n = 3) e B (n = 3) da raça Nelore. Para isso, foram coletados tratos reprodutivos de vacas em abatedouro e utilizou-se a região do istmo do oviduto para coletar as células no laboratório. As células foram cultivadas por 24 h para a formação de agregados celulares, seguindo por coincubação com espermatozoides por 36 h. A motilidade espermática foi avaliada pelo sistema CASA e a integridade das membranas foi avaliada por microscopia de fluorescência e citometria de fluxo. A fertilidade dos touros A e B foi semelhante (P > 0,10), independente do ajuste do momento da ovulação com GnRH e do número de doses de sêmen. Entretanto, apesar de a P/IA das vacas inseminadas com touros A ter sido similar independente do ECC das vacas, vacas de ECC < 3,0 tiveram menor P/IA quando inseminadas com touros B [ECC < 3,0: 50,5% (166/329); ECC 3,0: 60,6% (254/419); P < 0,05]. O número de espermatozoides ligados por mm de agregado celular não diferiu em 0,5 h (P = 0,10), mas em 12 h, 24 h e 36 h houve maior número de espermatozoides/mm de touros A (P > 0,05). Espermatozoides A tiveram maior motilidade total e progressiva do que espermatozoides B. As características de membranas analisadas não diferiram entre os touros. No segundo estudo, foi utilizado sêmen de touros A (n = 3) e B (n = 4) da raça Holandês. Avaliou-se o número de espermatozoides/mm de agregado celular. Além disso, a motilidade espermática foi avaliada pelo CASA e a integridade das membranas espermáticas por citometria de fluxo. Com 0,5 h de coincubação houve tendência para maior número de espermatozoides A ligados por mm de agregado, e a partir de 12 h de coincubação a ligação de espermatozoides nos agregados foi maior para A. Com 24 h e 36 h o número de espermatozoides ligados por agregado foi mantido, sendo maior para espermatozoides de touros A, e com 36 h houve uma alta correlação entre a fertilidade de campo e o número de espermatozoides ligados por mm de agregado (r = 0,89). Dos padrões de motilidade avaliados pelo CASA, apenas a velocidade retilínea foi maior para touros A. Das características de membranas espermáticas analisadas, touros B tiveram maior porcentagem de células com membranas plasmática e acrossomal íntegras (80,3% vs. 74,5%; P = 0,01) e maior potencial mitocondrial de células com membrana plasmática íntegra (P = 0,004). Sendo assim, o ECC das vacas, tempo de ovulação e características espermáticas influenciaram a fertilidade a campo de touros. Associadas às análises convencionais de motilidade e integridade de membranas espermáticas, a menor capacidade de se ligar às células do oviduto pode ser a causa da menor fertilidade de touros B, possibilitando o uso da técnica pela indústria como uma nova estratégia de predição da fertilidade a campo de touros.
Two studies were carried out aiming to adjust timed-artificial insemination (TAI) protocols to increase pregnancy per AI (P/AI) of Nelore bulls of lower fertility and to predict the field fertility of Holstein bulls. In the first study, Nelore cows (n = 1133) underwent a TAI protocol, starting on Day -10, with insertion of an intravaginal progesterone device (P4, 1.0 g) and treatment with estradiol benzoate (EB, 2.0 mg). On Day -2, the P4 device was removed, and cows received cloprostenol sodium (PGF, 0.5 mg), eCG (300 IU) and estradiol cypionate (EC, 1.0 mg). On Day -0.5 or 0 cows were subjected to GnRH treatments (G-16 = GnRH 16 h before AI or G0 = GnRH at AI). On Day 0 cows were inseminated and assigned to the fertility category bull treatment (H = one dose of higher fertility bull semen [n = 3]; L1 = one dose of lower fertility bull semen [n = 3]); L2 = two doses of semen from bull L [n = 3]). In addition, the sperm binding test was performed on oviduct cell aggregates. Semen from H (n = 3) and L (n = 3) Nelore bulls was used. For this, reproductive tracts of cows in slaughterhouse were collected and the region of the isthmus of the oviduct was used to collect the cells in the laboratory. Cells were cultured for 24 h to form cell explants, followed by co-incubation with sperm for 36 h. In addition, sperm motility was assessed by the CASA system and the integrity of membranes was assessed by fluorescence microscopy and flow cytometry. The fertility of bulls H and L was similar (P > 0.10), regardless of the adjustment of time of ovulation with GnRH and number of semen doses. However, despite P/AI of cows inseminated with H bulls was similar regardless of the BCS, cows with BCS < 3.0 had lower P/AI when inseminated with L bulls (BCS < 3.0: 50.5% [166/329]; BCS 3.0: 60.6% [254/419]; P < 0.05). The number of sperm bound per mm of cell explant did not differ at 0.5 h (P = 0.10), but at 12 h, 24 h and 36 h there was a greater number of sperm/mm of H bulls (P > 0.05). H sperm had greater total and progressive motility than L sperm. The membrane characteristics analyzed did not differ between H and L groups. In the second study, semen from H (n = 3) and L (n = 4) Holstein bulls was used. The number of sperm/mm of cell aggregate was evaluated. In addition, sperm motility was assessed by CASA and the integrity of sperm membranes by flow cytometry. With 0.5 h of co-incubation there was a tendency for a greater number of H sperm bound per mm of aggregate, and from 12 h of co-incubation on the binding of sperm in aggregates was greater for H. With 24 h and 36 h the number of spermatozoa bound per aggregate was maintained, being greater for sperm from bulls H, and at 36 h there was a high correlation between field fertility and the number of sperm bound per mm of explant (r = 0.89). Out of the motility patterns evaluated by CASA, only the straight velocity was higher for bulls H. Out of the sperm membrane characteristics analyzed, L bulls had the greatest percentage of cells with intact plasma and acrosomal membranes (80.3% vs. 74.5%; P = 0.01) and greater mitochondrial potential of cells with an intact plasma membrane (P = 0.004). Thus, the BCS of cows, timing of ovulation and sperm characteristics influenced field fertility of bulls. Combined with conventional analyzes of sperm motility and membrane integrity, the lower ability to bind to oviduct cells may be the cause of lower fertility in L bulls, allowing the industry to use this technique as a new strategy for predicting field fertility of bulls.
Resumo
No presente estudo, utilizou-se a melatonina e a proteína específica do oviduto (pOSP) nos meios de maturação in vitro. Foram avaliadas a expansão do complexo cumulus-ovócito (CCOs), as concentrações intracelulares de espécies reativas de oxigênio (ROS) e o desenvolvimento embrionário nos diferentes grupos (C = controle; T1 = somente com melatonina; T2 = com melatonina e pOSP e T3 somente com pOSP). No tocante à expansão do CCOs, houve diferença (P<0,05) dos valores obtidos no grupo C em relação aos valores médios dos grupos T1, T2 e T3, porém não houve diferença entre os valores obtidos nos tratamentos (P>0,05). Na dosagem de ROS, não houve diferença entre os valores médios obtidos no grupo C (26,4±10,9) e o valor verificado no grupo T1 (23,4±7,8), porém no grupo T2 (21,3±9,7) o valor médio mostrou-se satisfatório em relação ao valor do grupo C. No entanto, o valor médio do grupo T3 (16,6±10,5) foi o que demonstrou resultado mais satisfatório quando comparado aos demais grupos (P<0,05). A produção de embriões foi avaliada por meio da taxa de clivagem. Não houve diferença (P >0,05) entre os valores obtidos entre o grupo C (48,9 %) e os valores verificados nos grupos T1 (51,5 %), T2 (50 %), T3 (57,7 %), nem destes entre si. Este estudo permitiu concluir que a proteína específica do oviduto recombinante e a melatonina foram eficientes em melhorar a expansão dos CCOs. Além disso, as células tratadas com pOSP mostraram-se com menor quantidade de ROS, podendo a pOSP ser considerada um antioxidante proteico.(AU)
The present study used melatonin and recombinant oviduct specific protein (pOSP) in in vitro maturation medium (IVM). The expansion of the cumulus-oocyte complexes (COCs), the intracellular concentrations of reactive oxygen species (ROS) and embryo development of the different groups were evaluated (C = control; T1 = melatonin; T2 = melatonin and pOSP and T3 = pOSP). Regarding the COCs expansion, the groups T1, T2 and T3 showed satisfactory results compared with group C (P<0.05), but there was no difference between treatments (P>0.05). In the ROS dosage, there was no difference between the mean values obtained in group C (26.4 ± 10.9) and group 1 (23.4 ± 7.8). However, in group 2 (21.3 ± 9.7), the average value was found to be satisfactory in relation group C. Despite that, the average value of treatment 3 (16.6 ± 10.5) was the most satisfactory result found compared to the other groups (P<0.05). The production of embryos was evaluated by cleavage rate, there was no difference between the values obtained in group C and the values recorded in groups T1 (51.5 %), T2 (50 %), T3 (57.7 %), and among them. This study showed that the pOSP and the melatonin were effective in the improvement of the expansion of COCs cells. In addition, the cells that were treated with pOSP presented a lower amount of ROS, allowing the pOSP to be considered a proteic antioxidant.(AU)
Assuntos
Animais , Feminino , Desenvolvimento Embrionário , Tubas Uterinas/química , Melatonina/administração & dosagem , Suínos , Antioxidantes , Fase de Clivagem do Zigoto , Técnicas de Cultura Embrionária/veterinária , Técnicas In Vitro/veterináriaResumo
No presente estudo, utilizou-se a melatonina e a proteína específica do oviduto (pOSP) nos meios de maturação in vitro. Foram avaliadas a expansão do complexo cumulus-ovócito (CCOs), as concentrações intracelulares de espécies reativas de oxigênio (ROS) e o desenvolvimento embrionário nos diferentes grupos (C = controle; T1 = somente com melatonina; T2 = com melatonina e pOSP e T3 somente com pOSP). No tocante à expansão do CCOs, houve diferença (P<0,05) dos valores obtidos no grupo C em relação aos valores médios dos grupos T1, T2 e T3, porém não houve diferença entre os valores obtidos nos tratamentos (P>0,05). Na dosagem de ROS, não houve diferença entre os valores médios obtidos no grupo C (26,4±10,9) e o valor verificado no grupo T1 (23,4±7,8), porém no grupo T2 (21,3±9,7) o valor médio mostrou-se satisfatório em relação ao valor do grupo C. No entanto, o valor médio do grupo T3 (16,6±10,5) foi o que demonstrou resultado mais satisfatório quando comparado aos demais grupos (P<0,05). A produção de embriões foi avaliada por meio da taxa de clivagem. Não houve diferença (P >0,05) entre os valores obtidos entre o grupo C (48,9 %) e os valores verificados nos grupos T1 (51,5 %), T2 (50 %), T3 (57,7 %), nem destes entre si. Este estudo permitiu concluir que a proteína específica do oviduto recombinante e a melatonina foram eficientes em melhorar a expansão dos CCOs. Além disso, as células tratadas com pOSP mostraram-se com menor quantidade de ROS, podendo a pOSP ser considerada um antioxidante proteico.(AU)
The present study used melatonin and recombinant oviduct specific protein (pOSP) in in vitro maturation medium (IVM). The expansion of the cumulus-oocyte complexes (COCs), the intracellular concentrations of reactive oxygen species (ROS) and embryo development of the different groups were evaluated (C = control; T1 = melatonin; T2 = melatonin and pOSP and T3 = pOSP). Regarding the COCs expansion, the groups T1, T2 and T3 showed satisfactory results compared with group C (P<0.05), but there was no difference between treatments (P>0.05). In the ROS dosage, there was no difference between the mean values obtained in group C (26.4 ± 10.9) and group 1 (23.4 ± 7.8). However, in group 2 (21.3 ± 9.7), the average value was found to be satisfactory in relation group C. Despite that, the average value of treatment 3 (16.6 ± 10.5) was the most satisfactory result found compared to the other groups (P<0.05). The production of embryos was evaluated by cleavage rate, there was no difference between the values obtained in group C and the values recorded in groups T1 (51.5 %), T2 (50 %), T3 (57.7 %), and among them. This study showed that the pOSP and the melatonin were effective in the improvement of the expansion of COCs cells. In addition, the cells that were treated with pOSP presented a lower amount of ROS, allowing the pOSP to be considered a proteic antioxidant.(AU)
Assuntos
Animais , Feminino , Suínos , Tubas Uterinas/química , Melatonina/administração & dosagem , Desenvolvimento Embrionário , Técnicas de Cultura Embrionária/veterinária , Técnicas In Vitro/veterinária , Antioxidantes , Fase de Clivagem do ZigotoResumo
Objetivou-se caracterizar as variações morfométricas da tuba uterina de cabras durante o cicloestral. Para isso foram utilizados 20 cabras sem raça definida (SRD) adultas, divididas em 4 grupos: Grupo1(D3)M - 3 dias após ovulação; Grupo 2 (D12)D - dia 12º pós-ovulação (p.o); Grupo 3 (D18)P - dia 18º p.o eGrupo 4 (D22)E - dia 22º p.o., correspondendo as fases de metaestro, diestro, proestro e estro, respectivamente.Após o tratamento hormonal, os animais foram abatidos e tiveram as tubas uterinas coletadas para mensuraçãodo comprimento das regiões da tuba e fixados em formaldeído 10% por 24h, para análises histomorfométricas.Após esse período os fragmentos foram submetidos ao processamento histológico padrão. Dessa forma, foipossível mensurar a altura do epitélio e quantificar as células cilíndricas (CC) e células secretórias (CS). Nesseestudo, o comprimento das regiões da tuba variou conforme fase do ciclo, com menores valores aos 22 dias p.o.(grupo 4). Enquanto, a altura do epitélio aumentou nas regiões da tuba à medida que se distanciava do estro(grupo 4). Nas fimbrias e infundíbulo, a proporção de CC foi maior que CS, independente da fase do ciclo, commaior percentual no grupo 4. No istmo predominou as CS ao longo do ciclo, sendo significativamente maiortambém no grupo 4. Na ampola não houve diferença significativa entre a proporção de CC e CS, exceto nosgrupos 3 e 4, nos quais predominaram CC. Assim, a tuba uterina de cabras apresenta modificações morfológicase morfométricas ao longo do ciclo estral
This study aimed to characterize the changes in morphology and cell composition in goatsuterine tube during the estrous cycle. Twenty adult undefined breed goats were used: Group 1 (D3) M - 3rd daysafter ovulation; Group 2 (D12) D - 12th days after ovulation (p.o.); Group 3 (D18) P - 18th day and group 4 (D22)E - 22nd p.o., corresponding metestrus, diestrus, proestrus and estrus, respectively. After hormone treatment, theanimals were slaughtered, and their oviduct collected. The oviduct length was measured and fixed in 10%formaldehyde for 24h, for histomorphometric analysis. Afterward, the fragments were subjected to standardhistological processing. Thus, it was measured the epithelium height and quantified the ciliated cells (CC) andsecretory cells (SC). In this study, the lengths at the different regions of the goat oviduct varied according to thedifferent phases of the estrous cycle, with lower values at 22 days p.o. (group 4). While the epithelium heightincreased in regions of the oviduct as it departed from the estrus (group 4). All fimbriae and infundibulum, theproportion of CC was higher than SC, regardless of the phase of the cycle, with the highest percentage in group4. In the isthmus, SC prevailed throughout the cycle, being also significantly higher in group 4. In the ampulla,there was no significant difference between the CC and SC, except for groups 3 and 4, in which CCpredominated. So the goats uterine tube has morphological and morphometric alteration during the estrous cycle
Assuntos
Animais , Cabras/anatomia & histologia , Ciclo Estral/fisiologia , Tubas Uterinas/anatomia & histologia , Tubas Uterinas/fisiologia , Tamanho do Órgão , Técnicas Histológicas/veterináriaResumo
Objetivou-se caracterizar as variações morfométricas da tuba uterina de cabras durante o cicloestral. Para isso foram utilizados 20 cabras sem raça definida (SRD) adultas, divididas em 4 grupos: Grupo1(D3)M - 3 dias após ovulação; Grupo 2 (D12)D - dia 12º pós-ovulação (p.o); Grupo 3 (D18)P - dia 18º p.o eGrupo 4 (D22)E - dia 22º p.o., correspondendo as fases de metaestro, diestro, proestro e estro, respectivamente.Após o tratamento hormonal, os animais foram abatidos e tiveram as tubas uterinas coletadas para mensuraçãodo comprimento das regiões da tuba e fixados em formaldeído 10% por 24h, para análises histomorfométricas.Após esse período os fragmentos foram submetidos ao processamento histológico padrão. Dessa forma, foipossível mensurar a altura do epitélio e quantificar as células cilíndricas (CC) e células secretórias (CS). Nesseestudo, o comprimento das regiões da tuba variou conforme fase do ciclo, com menores valores aos 22 dias p.o.(grupo 4). Enquanto, a altura do epitélio aumentou nas regiões da tuba à medida que se distanciava do estro(grupo 4). Nas fimbrias e infundíbulo, a proporção de CC foi maior que CS, independente da fase do ciclo, commaior percentual no grupo 4. No istmo predominou as CS ao longo do ciclo, sendo significativamente maiortambém no grupo 4. Na ampola não houve diferença significativa entre a proporção de CC e CS, exceto nosgrupos 3 e 4, nos quais predominaram CC. Assim, a tuba uterina de cabras apresenta modificações morfológicase morfométricas ao longo do ciclo estral(AU)
This study aimed to characterize the changes in morphology and cell composition in goatsuterine tube during the estrous cycle. Twenty adult undefined breed goats were used: Group 1 (D3) M - 3rd daysafter ovulation; Group 2 (D12) D - 12th days after ovulation (p.o.); Group 3 (D18) P - 18th day and group 4 (D22)E - 22nd p.o., corresponding metestrus, diestrus, proestrus and estrus, respectively. After hormone treatment, theanimals were slaughtered, and their oviduct collected. The oviduct length was measured and fixed in 10%formaldehyde for 24h, for histomorphometric analysis. Afterward, the fragments were subjected to standardhistological processing. Thus, it was measured the epithelium height and quantified the ciliated cells (CC) andsecretory cells (SC). In this study, the lengths at the different regions of the goat oviduct varied according to thedifferent phases of the estrous cycle, with lower values at 22 days p.o. (group 4). While the epithelium heightincreased in regions of the oviduct as it departed from the estrus (group 4). All fimbriae and infundibulum, theproportion of CC was higher than SC, regardless of the phase of the cycle, with the highest percentage in group4. In the isthmus, SC prevailed throughout the cycle, being also significantly higher in group 4. In the ampulla,there was no significant difference between the CC and SC, except for groups 3 and 4, in which CCpredominated. So the goats uterine tube has morphological and morphometric alteration during the estrous cycle(AU)
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Animais , Cabras/anatomia & histologia , Ciclo Estral/fisiologia , Tubas Uterinas/anatomia & histologia , Tubas Uterinas/fisiologia , Técnicas Histológicas/veterinária , Tamanho do ÓrgãoResumo
The study aimed to evaluate the reproductive system regression of European quails (Coturnix coturnix) induced to molt by wheat bran fed ad libitum. A total of 16 birds, end-of-lay, was distributed in 4 groups: group C (quails fed by layier ration and water ad libitum, n = 4) group T8 (quails fed by meal by 8 days, n = 4); group T12 (quails fed by meal by 12 days, n = 4); group T16 (quails fed by meal by 16 days, n = 4). Upon reaching the prescribed period, the birds were euthanized for collection and measurement of the ovary and oviduct weight. Regarding the percentage of ovarian regression, absolute and relative weight of the ovary, the T12 group showed numerically better performance, obtaining the values 95.79%, 0.27 g and 0.15%, respectively, however, there was no significant differences (P > 0.05) between groups of birds submitted to molting. The oviduct results showed no significant differences (P > 0.05) among quail groups submitted to molt, excepting the oviduct regression rate, which group T8 showed significantly lower regression (P 0.05) then groups T12 and T16. The molt induced by the supply of fed meal feed composed of wheat bran provides satisfactory weight loss in european quails, causing a substantial regression of reproductive tract.
O objetivo deste trabalho foi avaliar a regressão do aparelho reprodutor de codornas europeias (Coturnix coturnix) induzidas a muda por dieta a base de farelo de trigo (FT) ad libitum. Um total de 16 aves, em fim de ciclo de produção, foi dividido em 4 grupos: grupo C (codornas alimentadas com ração de postura e água ad libitum, n=4); grupo T8 (codornas tratadas com FT durante 8 dias, n=4); grupo T12 (codornas tratadas com FT durante 12 dias, n=4); grupo T16 (codornas tratadas com FT durante 16 dias, n=4). Após o período estabelecido, as aves foram eutanasiadas para coleta e mensuração do peso do ovário e oviduto. Quanto ao percentual de regressão do ovário, peso absoluto e relativo do ovário, o grupo T12 apresentou numericamente o melhor desempenho, obtendo respectivamente os valores 95,79%, 0,27g e 0,15%, entretanto, sem diferenças significativas (P>0,05) entre os grupos de aves submetidas a muda. Os resultados relacionados ao oviduto não mostraram diferenças significativas (P > 0,05) entre os grupos de codornas submetidas a muda forçada, com exceção da taxa de regressão de oviduto, em que o grupo T8 apresentou taxa de regressão significativamente inferior (P < 0,05) aos grupos T12 e T16. A indução a muda pelo fornecimento de ração composta por farelo de trigo proporciona satisfatória perda de peso corporal em codornas europeias, ocasionando regressão considerável do aparelho reprodutor.
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Animais , Coturnix , Muda/fisiologia , Oviductos/fisiopatologia , Ração Animal , Redução de Peso , Dieta/veterinária , Ovário/fisiopatologiaResumo
The study aimed to evaluate the reproductive system regression of European quails (Coturnix coturnix) induced to molt by wheat bran fed ad libitum. A total of 16 birds, end-of-lay, was distributed in 4 groups: group C (quails fed by layier ration and water ad libitum, n = 4) group T8 (quails fed by meal by 8 days, n = 4); group T12 (quails fed by meal by 12 days, n = 4); group T16 (quails fed by meal by 16 days, n = 4). Upon reaching the prescribed period, the birds were euthanized for collection and measurement of the ovary and oviduct weight. Regarding the percentage of ovarian regression, absolute and relative weight of the ovary, the T12 group showed numerically better performance, obtaining the values 95.79%, 0.27 g and 0.15%, respectively, however, there was no significant differences (P > 0.05) between groups of birds submitted to molting. The oviduct results showed no significant differences (P > 0.05) among quail groups submitted to molt, excepting the oviduct regression rate, which group T8 showed significantly lower regression (P 0.05) then groups T12 and T16. The molt induced by the supply of fed meal feed composed of wheat bran provides satisfactory weight loss in european quails, causing a substantial regression of reproductive tract.(AU)
O objetivo deste trabalho foi avaliar a regressão do aparelho reprodutor de codornas europeias (Coturnix coturnix) induzidas a muda por dieta a base de farelo de trigo (FT) ad libitum. Um total de 16 aves, em fim de ciclo de produção, foi dividido em 4 grupos: grupo C (codornas alimentadas com ração de postura e água ad libitum, n=4); grupo T8 (codornas tratadas com FT durante 8 dias, n=4); grupo T12 (codornas tratadas com FT durante 12 dias, n=4); grupo T16 (codornas tratadas com FT durante 16 dias, n=4). Após o período estabelecido, as aves foram eutanasiadas para coleta e mensuração do peso do ovário e oviduto. Quanto ao percentual de regressão do ovário, peso absoluto e relativo do ovário, o grupo T12 apresentou numericamente o melhor desempenho, obtendo respectivamente os valores 95,79%, 0,27g e 0,15%, entretanto, sem diferenças significativas (P>0,05) entre os grupos de aves submetidas a muda. Os resultados relacionados ao oviduto não mostraram diferenças significativas (P > 0,05) entre os grupos de codornas submetidas a muda forçada, com exceção da taxa de regressão de oviduto, em que o grupo T8 apresentou taxa de regressão significativamente inferior (P < 0,05) aos grupos T12 e T16. A indução a muda pelo fornecimento de ração composta por farelo de trigo proporciona satisfatória perda de peso corporal em codornas europeias, ocasionando regressão considerável do aparelho reprodutor.(AU)
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Animais , Coturnix , Redução de Peso , Muda/fisiologia , Ração Animal , Oviductos/fisiopatologia , Dieta/veterinária , Ovário/fisiopatologiaResumo
The sperm-egg interaction was investigated during their reproductive life, in laying quails mated with males of different ages (Coturnix coturnix sp.). The experimental design was completely randomized in factorial scheme 4 x 4 (age of the females of age x male quail, 80,160,240 and 390 days), with 10 replicates and six birds each, in proportion to two females for a male. The results showed that there was a quadratic effect (P 0.05) the amount of sperm trapped in the vitelline membrane of the germinal disc, depending on the age of the females, with a reduction of this number over the old. The age of the females had no effect on egg weight, shell thickness, the percentage of shell and yolk and Haugh unit. As for the egg production was a quadratic effect. The incubation parameters evaluated chick weight, fertility, hatchability and mortality did not differ when analyzed in relation to age of males and females, as well as egg quality and performance of the of the resulting progenies. The chick weight, fertility, hatchability and mortality did not differ when analyzed in relation to age of males and females, as well as egg quality and performance of the of the resulting progenies. The morphology of the genital organs of males and females showed no difference in the age of the birds. Males and females of laying quails maintain reproductive ability up to 56 weeks. The age of the...(AU)
A interação espermatozóide-ovo foi analisada durante a sua vida reprodutiva, em codornas de postura acasaladas com machos de diferentes idades (Coturnix coturnix sp.). O delineamento experimental foi inteiramente casualizado, em esquema fatorial 4 x 4 (idade das fêmeas x idade dos machos de codorna, 80,160,240 e 390 dias), com 10 repetições e 6 aves por unidade experimental, na proporção duas fêmeas para um macho. Foram avaliados variáveis de qualidade e produção de ovos, fertilidade, eclodibilidade e mortalidade embrionária na incubação e desempenho e qualidade dos ovos da progênie nas fêmeas oriundas da incubação. A idade dos machos não apresentou efeito significativo para nenhuma das variáveis estudadas. A idade das fêmeas teve efeito significativo para postura das matrizes, efeito quadrático (P < 0,05) do número de espermatozóides/mm2 da camada perivitelínica sobre o disco germinativo, em função da idade das fêmeas, com redução desse número ao longo da idade. A idade das fêmeas não teve efeito no peso do ovo, na espessura da casca, na percentagem de casca e de gema e na unidade Haugh. Já para a porcentagem de postura, houve efeito quadrático. As variáveis de incubação avaliadas de peso do pintainho, fertilidade, eclodibilidade e mortalidade, não apresentaram diferença quando analisados em relação à idade dos machos e fêmeas, assim como a qualidade dos ovos e desempenho da...(AU)
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Animais , Coturnix , Ovos , Genitália/anatomia & histologia , Fatores Etários , ReproduçãoResumo
Avaliaram-se as características reprodutivas de duas raças puras de poedeiras semipesadas. Foram utilizadas 800 fêmeas, 400 da raça Plymouth Rock White (PRW) e 400 da raça Plymouth Rock Barred (PRB) no período compreendido entre a 16ª e a 24ª semanas de idade, quando todas as aves tiveram o mesmo manejo e receberam água e ração ad libitum. Semanalmente, foram mensurados os parâmetros peso corporal, consumo alimentar, taxa de postura, conversão alimentar, peso dos ovos, peso de oviduto e número de folículos ovarianos. Foi utilizado um delineamento inteiramente casualizado (DIC) com dois tratamentos (PRW e PRB) e cinco repetições de oitenta aves cada, sendo que os dados foram submetidos à análise de variância e as médias comparadas pelo teste "T" de Student a 5% de significância. Observou-se que na 24ª semana de idade as aves da raça PRW apresentaram uma maior taxa de postura (P=0,006) e melhor conversão alimentar (P=0,020), comparado às aves da raça PRB. As aves PRB apresentaram maior peso corporal, comparado ao peso das PRW, entretanto, o peso do oviduto em relação ao peso corporal na 24ª semana e o número de folículos grandes amarelos na 20ª semana de idade foram maiores nas aves da raça PRW, comparado com as aves da raça PRB (P=0,029). Aves poedeiras da raça PRW são mais eficientes nos parâmetros produtivos e apresentam o desenvolvimento do aparelho reprodutivo mais precoce em relação às aves da PRB.(AU)
It was evaluated the reproductive traits of two pure breed laying hens. There were used 800 females, 400 White Plymouth Rock (PRW) and 400 Barred Plymouth Rock pullets, from 16 to 24 week of age. Pullets were managed in the same manner and received water and feed ad libitum. Body weight, feed intake, hen-day egg production, feed conversion, egg weight, oviduct weight and number of ovarian follicles were weekly measured. It was used a completely randomized design with two breeds (PRW and PRB) and five replicates of 80 pullets. The data were submitted to ANOVA and means compared by Student's T test 5% of significance. At 24 weeks of age the PRW pullets had a higher egg production (P=0.006) and better feed conversion (P=0.020) than the PRBs. The PRBs presented higher body weight than the PRWs, however, the number of large yellow follicles at 20 weeks, and the relative oviduct weight at 24 weeks of age were greater in the PRW pullets (P=0.029). The PRW pullets were more efficient in the production parameters and were more precocious in the development of the reproductive tract than PRB pullets.(AU)
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Animais , Feminino , Fase Folicular , Reprodução , Maturidade Sexual , GalinhasResumo
DE ÁVILA, A.C.F.C.M. Efeitos da comunicação entre células do sistema reprodutivo feminino e oócitos bovinos mediada por vesículas extracelulares de diferentes estágios do ciclo estral. 2019. 194 f. Dissertação (Mestrado) Faculdade de Zootecnia e Engenharia de Alimentos, Universidade de São Paulo, Pirassununga, 2019. As técnicas de reprodução assistida (TRA) são alternativas para infertilidade e aumento da produção de animais de interesse. Apesar de amplamente utilizadas, as TRA podem causar consequências negativas aos indivíduos gerados desde o estabelecimento da gestação até a vida adulta. A tentativa de mimetizar o ambiente in vivo é uma opção para aprimorar as TRA. Vesículas extracelulares (VEs) secretadas por células são alvos de estudos recentes devido suas funções de comunicação intercelular no ambiente in vivo. As VEs são encontradas em fluidos corporais e possuem material bioativo, como miRNAs, que regulam o funcionamento de células a partir da modulação pós-transcricional. A hipótese deste estudo é que VEs pequenas secretadas por células foliculares e células do oviduto favoreçam a maturação e a fertilização in vitro de complexos cumulus-oócitos (CCOs). O objetivo do estudo foi caracterizar e avaliar os efeitos de VEs do fluido folicular (FF) e do oviduto obtidos em diferentes momentos do ciclo estral de bovinos durante a produção in vitro. Para isso, VEs foram isoladas de FF e do lavado de oviduto bovino, caracterizadas e utilizadas como suplementação durante a maturação e a fertilização in vitro, respectivamente. Os resultados demonstraram que as VEs do fluido de folículos em diferentes momentos do ciclo estral possuem diferentes perfis de miRNAs. A suplementação com VEs pequenas de FF durante a maturação in vitro (MIV) causou a internalização dessas VEs e do seu RNA pelos CCOs, mas não afetou as taxas de blastocistos. Porém, foi demonstrado que as VEs de diferentes origens foliculares modulam vias como PI3K-Akt e de transporte de RNA e processos biológicos relacionados à maturação oocitária, à ovulação e à resposta imune em células do cumulus. As VEs obtidas do oviduto em diferentes momentos do ciclo estral não afetaram as taxas de produção e a qualidade de blastocistos no modelo utilizado. Em conclusão, este estudo demonstrou que as VEs pequenas são modificadas de acordo com sua origem folicular e que impactam processos biológicos em células do cumulus de bovinos.
DE ÁVILA, A.C.F.C.M. The effects of communication between female reproductive system cells and bovine oocytes mediated by extracellular vesicles of different estrous cycle stages. 2019. 194f. M.Sc. Dissertation Faculdade de Zootecnia e Engenharia de Alimentos, Universidade de São Paulo, Pirassununga, 2019. Assisted reproductive techniques (ART) are alternatives to infertility and to increase animals production. Although these techniques are widely used, they can cause negative consequences since early pregnancy until adult life. Attempts to mimic in vivo environment are applied to improve ARTs. Extracellular vesicles (EVs) secreted by cells are targets of recent studies due to their function in intercellular communication. These vesicles are in body fluids and have bioactive material, as miRNAs, that regulate cell functions by post-transcriptional modulation. The hypothesis of this study is that small EVs secreted by follicular and oviductal cells improve the in vitro maturation and fertilization of cumulus-oocyte complexes (COCs). Our goal was to characterize and to evaluate the effects of small EVs from follicular and oviductal fluids obtained from different bovine estrous cycle stages during in vitro embryo production. For this, EVs were isolated from bovine follicular fluid (FF) and oviductal flushing, characterized and used as supplementation during in vitro maturation and fertilization, respectively. The results demonstrated that small EVs from follicles at different estrous cycle stage have different miRNA profile. The small EVs from FF and their RNA were taken up by COCs during in vitro maturation but did not change blastocyst production rates. However, we demonstrated that small EVs from different follicle origin modulate pathways such as PI3K-Akt and RNA transport and biological processes related to oocyte maturation, ovulation and immune responses in cumulus cells. Small EVs from oviduct at different estrous cycle stage did not improve embryo production rates and embryo quality in our model. Therefore, this study demonstrated that small EVs are modified according to their follicular origin and are able to impact biological processes in bovine cumulus cells.
Resumo
A extensa distribuição geográfica apresentada pelos grupos de espécies Bothrops asper, B. atrox e B. jararacussu sugere que as diferentes estratégias reprodutivas encontradas nestas espécies poderiam estar sendo moduladas pelos ritmos ambientais, principalmente temperatura e pluviosidade. As espécies de Crotalinae que habitam regiões frias ou temperadas possuem ciclos reprodutivos estritamente sazonais, os ciclos começam nos períodos mais quentes do ano. Embora vários estudos já tenham descrito as estratégias reprodutivas de diferentes espécies de Bothrops, nenhum deles teve como objetivo avaliar em conjunto os representantes do clado composto pelos grupos de espécies B. asper, B. atrox e B. jararacussu. Neste estudo, descrevemos aspectos da biologia reprodutiva, como a vitelogênese, a espermatogênese, a hipertrofia do segmento sexual renal (SSR) e o dimorfismo sexual das espécies seguintes: B. asper, B. atrox, B jararacussu, B. brazili e B. marajoenesis. Nossas análises indicam que machos de espécies distribuídas em regiões de clima equatorial, como B. atrox, B. asper, B. brazili e B. marajoenesis, tendem a apresentar o pico de espermatogênese principalmente na estação chuvosa. Por outro lado, B. jararacussu (espécie distribuída na região tropical e subtropical) apresenta alta freqüência de espermatogênese na estação seca e assincronia entre a espermiação e o nível máximo da hipertrofia do SSR (aumento de grânulos ricos em carboidratos neutros e ácidos). O crescimento dos folículos ovarianos em B. jararacussu e B. atrox ocorre no final da estação chuvosa ou no início da estação seca. Apenas B. asper apresenta vitelogênese ocorrendo principalmente durante a estação chuvosa. Considerando o período de vitelogênese secundária, as fêmeas de B. asper, B. atrox e B. jararacussu apresentam hipertrofia das glândulas do infundíbulo posterior e do útero, a qual regride durante a vitelogênese primária e prenhez. Essas variações morfológicas do oviduto podem estar diretamente associadas a estocagem e sobrevivência dos espermatozoides. Dentre as espécies do gênero Bothrops, B. jararacussu apresenta o maior índice de dimorfismo sexual (0,6), com fêmeas significativamente maiores que os machos.
The extensive geographic distribution presented by the species groups Bothrops asper, B. atrox and B. jararacussu, may suggest that different environmental rhythms could be responsible for shaping different reproductive strategies for the species within these groups. Species of Crotalinae living in cold or temperate regions have strictly seasonal reproductive cycles, with cycles beginning in the hottest periods of the year. Although several studies have already described the reproductive strategies of different species of Bothrops, none of them was focused on the clade composed by the B. asper, B. atrox and B. jararacussu species groups. Here we describe aspects of the reproductive biology, such as vitellogenesis, spermatogenesis, the hypertrophy of the sexual segment of the kidney (SSK) and the presence and degree of sexual dimorphism for the following five species: B. atrox, B. asper, B. jararacussu, B. brazili and B. marajoenesis. Our analyses indicate that males of species distributed on regions with an equatorial climate, as B. atrox, B. asper, B. brazili and B. marajoenesis, tend to present the peak of spermatogenesis mainly in the rainy season. On the other hand, B. jararacussua species distributed on tropical and subtropical regionshows a high frequency of spermatogenesis in the dry season, and an asynchrony between spermiation and the maximum level of the hypertrophy of the SSK (increase of granules rich in neutral and acidic carbohydrates). The growth of the ovarian follicles in B. jararacussu and B. atrox occurs at the end of the rainy season or early in the dry season. Only B. asper presents vitellogenesis mainly occurring during the rainy season. Considering the period of secondary vitellogenesis, females of B. asper, B. atrox, and B. jararacussu present hypertrophy of the posterior infundibulum glands and the uterus glands, which regress during primary vitellogenesis and pregnancy. These morphological variations of the oviduct are supposed to be directly associated with the storage and survival of spermatozoa. Among all species of Bothrops, B. jararacussu presents the highest sexual dimorphism index (0.6), with females significantly larger than males.
Resumo
The present work was carried out to evaluate the in vitro development of bovine embryo co-cultured in granulosa, oviduct, BRL or VERO cells co-cultures, supplemented with 5% or 10% of Fetal Calf Serum (FCS). Cummulus oocyte complexes were aspirated, matured and fertilized in vitro. Embryonic structures were divided into eight treatments. They were placed in culture media TCM 199 containing granulosa, oviduct, BRL or VERO cells, each of them added with 5% or 10% FCS. The conditions for the co-culture were 38.5 ºC, 5% CO2 in air and high humidity for ten consecutive days. Cleavage, blastocyst and hatching rates did not differ (p > 0.05) in co-culture with primary cells (granulosa and oviduct) when FCS concentration increased from 5 to 10%. However, in continuous cells co-culture (BRL and VERO), when FCS concentration increased from 5% to 10%, the blastocyst development rate decreased significantly (p < 0.05) from 33.6 to 16.3% and from 40 to 16.5% in embryo co-culture with BRL and VERO cells, respectively. (AU)
O presente trabalho foi realizado com o objetivo de avaliar o desenvolvimento in vitro de embriões bovinos co-cultivados em células da granulosa, do oviduto, BRL e VERO, suplementados com 5% ou 10% de Soro Fetal Bovino (SFB). Os complexos cummulus oócitos foram aspirados, maturados e fecundados in vitro. As estruturas embrionárias foram divididas em oito tratamentos: co-cultivo em TCM 199 contendo células da granulosa, do oviduto, BRL ou VERO adicionadas com 5% ou 10% de SFB. As condições de cultivo foram 38.5 ºC, 5% CO2 em ar e alta humidade por dez dias consecutivos. Os índices de clivagem, blastocisto e eclosão não diferiram (p > 0,05) no co-cultivo com células primárias (granulosa e oviduto) quando a concentração de SFB aumentou de 5 para 10%. Entretanto, no co-cultivo com células de linhagens contínuas (BRL e VERO), quando a concentração de SFB aumentou de 5% para 10%, os índices de blastocistos diminuíram significativamente (p < 0,05) de 33,6 para 16,3 % e de 40 para 16,5% nos embriões bovinos co-cultivados com células VERO e BRL, respectivamente. (AU)
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Animais , Bovinos , Bovinos/embriologia , Blastocisto , Células Vero , Células da Granulosa , Tubas Uterinas , Técnicas de CoculturaResumo
Algumas serpentes necessitam obrigatoriamente estocar espermatozoides nos ovidutos para que os oócitos sejam fecundados, isso porque nessas espécies o período de cópula é distinto do período de ovulação. Em geral essa estocagem ocorre em receptáculos de estocagem encontrados na região infundibular. Em Crotalíneos a estocagem tem sido descrita como ocorrendo na região caudal dos ovidutos (junção útero-vaginal) em uma estrutura chamada de Uterine Muscular Twisting (UMT). Essa estrutura tem sido descrita como um twisting que se forma após a cópula e permanece presente até o momento da ovulação. Aqui demonstramos que a UMT não é formado por uma torção (twist) do oviduto e sim por uma helicoide formada pelas camadas internas da junção útero-vaginal. A UMT está presente em fêmeas ao longo de todo o ano, e não somente no período pós-cópula. Nós observamos que a UMT tem diferentes graus de formação, podendo ser forte, fraca ou ausente. A UMT forte é encontrada no periodo reprodutivo da fêmea (outono e inverno austrais) e está presente independentemente de haver espermatozoides nessa região. A UMT fraca é encontrada em todas as fêmeas maduras fora do período reprodutivo. Já a ausencia de UMT é encontrada nas fêmeas prenhes e nas imaturas. Nossos resultados mostram que a UMT é formada mesmo em fêmeas ovariectomizadas com níveis basais de estradiol e que a progesterona é responsável pelo relaxamento da musculatura lisa do oviduto tornando a UMT ausente nas fêmeas.
Some snakes need must store sperm in the oviduct so that the oocytes are fertilized, that because these species the mating period is distinct from ovulation period. Usually this occurs in receptacles found in the infundibular region. In pitvipers the storage has been described as occurring in the caudal region of oviduct (uterus-vaginal junction) in a structure named Uterine Muscular Twisting (UMT). This structure has been described as a twisting formed after mating and remains present until the time of ovulation. Here we demonstrate that the UMT is not formed by a twist (rotation around its own axis) of the oviduct but by a helicoid formed by the inner layers of the uterus-vaginal junction. The UMT is present in females throughout the whole year, not only in the post-copulation period. We note that the UMT has different degrees of shaping, can be strong, weak or absent. Strong UMT is found in the female reproductive period (austral autumn and winter) and is present regardless of whether sperm cells in this region. Weak UMT is found in all mature females outside the breeding season. Already the absence of UMT is found in pregnant females and the immature ones. Our results show that the UMT is formed even in ovariectomized with basal levels of estradiol and progesterone is responsible for relaxation of smooth muscle of the oviduct making UMT absent in females.
Resumo
The comparative analysis of sperm-host glands of infundibulum-magnum and uterus-vagina junctions of Nothura maculosa quail oviduct was done during the reproductive phase. The birds were euthanized with ethyl ether after weight data were taken. After abdominal laparotomy and cranial displacement of the breastbone, two centimeters samples of infundibulum-magnum and uterus-vagina junctions were collected. The samples were fixed in Bouin's solution for twenty four hours and later, successive baths of alcohol 70% were applied on samples and soon afterwards dehydrated in a series of grow concentration alcohols (80, 90, 95 and 3x100%), diaphanized in xylol and included on paraffin. Histological sections with seven micrometers thickness were obtained and stained on Haematoxylin-Eosin (HE) technique, then they were analyzed and photomicrographed in a photomicroscope Olympus BX-50. For the morphometry analysis, infundibulum-magnum junctions and uterus-vagina sperm host gland images were captured through a computacional program Image Pro Plus 4.1", Cibernetics Brazil, making it possible to quantify them. The mucosa of the infundibulum-magnum junction presented very narrow folds in the infundibulum and too large in the magnum, while in the uterus-vagina junction was observed widely folds mucous in the vagina and smoother in the uterine portion. The average of sperm host gland in the infundibulum-magnum junction was higher (11.7 glands) (P 0.01) compared to the uterus-vagina junction (7.5 glands). It is supposed that the abundance number of sperm host glands in infundibulum-magnum junction allows faster access of the oocyte, after the ovulation of the host spermatozoid ensuring the fertilization.
A análise comparativa das glândulas armazenadoras de espermatozóides das junções infundíbulo-magno e útero-vagina do oviduto da codorna Nothura maculosa foi realizada durante a fase reprodutiva. As aves foram eutanasiadas por inalação com éter etílico, após a pesagem. Após a laparotomia e o deslocamento cranial do esterno, foram coletadas amostras de dois centímetros da junção infundíbulo-magno e útero-vagina. Os fragmentos foram fixados em solução de Bouin por 24 horas e, posteriormente, banhos sucessivos de álcool 70% foram aplicados sobre as amostras. Em seguida, as amostras foram desidratadas em uma série de concentração crescente de alcoóis (80, 90, 95 e 3x100%), diafanizadas em xilol e incluídas em parafina. Cortes histológicos de sete micrômetros de espessura foram obtidos e corados pela técnica da Hematoxilina-eosina (HE), que foram analisados e fotomicrografados em um fotomicroscópio Olympus BX-50. Para a análise morfométrica, foram capturadas imagens das glândulas armazenadoras de espermatozóides da junção infundíbulo-magno e útero-vagina mediante o programa computacional "Image Pro Plus 4.1" da Cibernetics do Brasil, tornando-se possível a quantificação das mesmas. A mucosa da junção infundíbulo-magno apresentou pregas estreitas no infundíbulo e largas no magno, enquanto na junção útero-vagina mostrou-se amplamente pregueada na vagina e mais lisa na porção uterina. O número médio de glândulas armazenadoras de espermatozóides na junção infundíbulo-magno foi maior (11,7 glândulas) (P 0,01) que na junção útero-vagina (7,5 glândulas). Supõe-se que a abundância de glândulas armazenadoras de espermatozóides na junção infundíbulo-magno permite acesso mais rápido do ovócito, após a oocitação, ao espermatozóide armazenado, garantindo a fertilização.
Resumo
The comparative analysis of sperm-host glands of infundibulum-magnum and uterus-vagina junctions of Nothura maculosa quail oviduct was done during the reproductive phase. The birds were euthanized with ethyl ether after weight data were taken. After abdominal laparotomy and cranial displacement of the breastbone, two centimeters samples of infundibulum-magnum and uterus-vagina junctions were collected. The samples were fixed in Bouin's solution for twenty four hours and later, successive baths of alcohol 70% were applied on samples and soon afterwards dehydrated in a series of grow concentration alcohols (80, 90, 95 and 3x100%), diaphanized in xylol and included on paraffin. Histological sections with seven micrometers thickness were obtained and stained on Haematoxylin-Eosin (HE) technique, then they were analyzed and photomicrographed in a photomicroscope Olympus BX-50. For the morphometry analysis, infundibulum-magnum junctions and uterus-vagina sperm host gland images were captured through a computacional program Image Pro Plus 4.1", Cibernetics Brazil, making it possible to quantify them. The mucosa of the infundibulum-magnum junction presented very narrow folds in the infundibulum and too large in the magnum, while in the uterus-vagina junction was observed widely folds mucous in the vagina and smoother in the uterine portion. The average of sperm host gland in the infundibulum-magnum junction was higher (11.7 glands) (P 0.01) compared to the uterus-vagina junction (7.5 glands). It is supposed that the abundance number of sperm host glands in infundibulum-magnum junction allows faster access of the oocyte, after the ovulation of the host spermatozoid ensuring the fertilization.
A análise comparativa das glândulas armazenadoras de espermatozóides das junções infundíbulo-magno e útero-vagina do oviduto da codorna Nothura maculosa foi realizada durante a fase reprodutiva. As aves foram eutanasiadas por inalação com éter etílico, após a pesagem. Após a laparotomia e o deslocamento cranial do esterno, foram coletadas amostras de dois centímetros da junção infundíbulo-magno e útero-vagina. Os fragmentos foram fixados em solução de Bouin por 24 horas e, posteriormente, banhos sucessivos de álcool 70% foram aplicados sobre as amostras. Em seguida, as amostras foram desidratadas em uma série de concentração crescente de alcoóis (80, 90, 95 e 3x100%), diafanizadas em xilol e incluídas em parafina. Cortes histológicos de sete micrômetros de espessura foram obtidos e corados pela técnica da Hematoxilina-eosina (HE), que foram analisados e fotomicrografados em um fotomicroscópio Olympus BX-50. Para a análise morfométrica, foram capturadas imagens das glândulas armazenadoras de espermatozóides da junção infundíbulo-magno e útero-vagina mediante o programa computacional "Image Pro Plus 4.1" da Cibernetics do Brasil, tornando-se possível a quantificação das mesmas. A mucosa da junção infundíbulo-magno apresentou pregas estreitas no infundíbulo e largas no magno, enquanto na junção útero-vagina mostrou-se amplamente pregueada na vagina e mais lisa na porção uterina. O número médio de glândulas armazenadoras de espermatozóides na junção infundíbulo-magno foi maior (11,7 glândulas) (P 0,01) que na junção útero-vagina (7,5 glândulas). Supõe-se que a abundância de glândulas armazenadoras de espermatozóides na junção infundíbulo-magno permite acesso mais rápido do ovócito, após a oocitação, ao espermatozóide armazenado, garantindo a fertilização.
Resumo
The comparative analysis of sperm-host glands of infundibulum-magnum and uterus-vagina junctions of Nothura maculosa quail oviduct was done during the reproductive phase. The birds were euthanized with ethyl ether after weight data were taken. After abdominal laparotomy and cranial displacement of the breastbone, two centimeters samples of infundibulum-magnum and uterus-vagina junctions were collected. The samples were fixed in Bouin's solution for twenty four hours and later, successive baths of alcohol 70% were applied on samples and soon afterwards dehydrated in a series of grow concentration alcohols (80, 90, 95 and 3x100%), diaphanized in xylol and included on paraffin. Histological sections with seven micrometers thickness were obtained and stained on Haematoxylin-Eosin (HE) technique, then they were analyzed and photomicrographed in a photomicroscope Olympus BX-50. For the morphometry analysis, infundibulum-magnum junctions and uterus-vagina sperm host gland images were captured through a computacional program Image Pro Plus 4.1", Cibernetics Brazil, making it possible to quantify them. The mucosa of the infundibulum-magnum junction presented very narrow folds in the infundibulum and too large in the magnum, while in the uterus-vagina junction was observed widely folds mucous in the vagina and smoother in the uterine portion. The average of sperm host gland in the infundibulum-magnum junction was higher (11.7 glands) (P 0.01) compared to the uterus-vagina junction (7.5 glands). It is supposed that the abundance number of sperm host glands in infundibulum-magnum junction allows faster access of the oocyte, after the ovulation of the host spermatozoid ensuring the fertilization.
A análise comparativa das glândulas armazenadoras de espermatozóides das junções infundíbulo-magno e útero-vagina do oviduto da codorna Nothura maculosa foi realizada durante a fase reprodutiva. As aves foram eutanasiadas por inalação com éter etílico, após a pesagem. Após a laparotomia e o deslocamento cranial do esterno, foram coletadas amostras de dois centímetros da junção infundíbulo-magno e útero-vagina. Os fragmentos foram fixados em solução de Bouin por 24 horas e, posteriormente, banhos sucessivos de álcool 70% foram aplicados sobre as amostras. Em seguida, as amostras foram desidratadas em uma série de concentração crescente de alcoóis (80, 90, 95 e 3x100%), diafanizadas em xilol e incluídas em parafina. Cortes histológicos de sete micrômetros de espessura foram obtidos e corados pela técnica da Hematoxilina-eosina (HE), que foram analisados e fotomicrografados em um fotomicroscópio Olympus BX-50. Para a análise morfométrica, foram capturadas imagens das glândulas armazenadoras de espermatozóides da junção infundíbulo-magno e útero-vagina mediante o programa computacional "Image Pro Plus 4.1" da Cibernetics do Brasil, tornando-se possível a quantificação das mesmas. A mucosa da junção infundíbulo-magno apresentou pregas estreitas no infundíbulo e largas no magno, enquanto na junção útero-vagina mostrou-se amplamente pregueada na vagina e mais lisa na porção uterina. O número médio de glândulas armazenadoras de espermatozóides na junção infundíbulo-magno foi maior (11,7 glândulas) (P 0,01) que na junção útero-vagina (7,5 glândulas). Supõe-se que a abundância de glândulas armazenadoras de espermatozóides na junção infundíbulo-magno permite acesso mais rápido do ovócito, após a oocitação, ao espermatozóide armazenado, garantindo a fertilização.
Resumo
Devido à escassez de estudos sobre muda forçada em aves alternativas de produção, este experimento teve o objetivo de realizar a muda forçada em galinhas DAngola avaliando as perdas de peso corpóreo (PPC) que promovessem os melhores índices produtivos pós-muda. Com este propósito foram utilizadas 110 galinhas Dangola alojadas individualmente em gaiolas de poedeiras comerciais e, posteriormente, submetidas à muda forçada com 20000 ppm de óxido de zinco na ração. Estas passaram 21 dias recebendo ração e água ad libitum. Para análise da PPC relacionada à produtividade pós-muda foram utilizados 60 aves organizadas nos seguintes grupos: 24% (n=18); 26% (n=18); 28% (n=12) e acima de 30% (n=12). As outras 50 aves foram sacrificadas para o estudo do aparelho reprodutor, onde se verificou o tamanho e peso do oviduto e peso do ovário com PPC de 0% e sua regressão à medida que atingiam os níveis de PPC: 24%; 26%; 28% e acima de 30%. A média de retorno produtivo foi 60%, sendo o grupo com PPC de 24% com o melhor índice (100%), no entanto, este apresentou índice de produção insatisfatório juntamente com o grupo de PPC acima de 30%. A muda forçada em Galinhas DAngola foi viável com índices de PPC em torno de 26% a 28% e inviáveis com níveis abaixo de 24% e acima de 30%. Em relação à regressão do aparelho reprodutor, os melhores resultados produtivos foram em torno de 65,15%, 90,49% e 94,27% para tamanho e peso do oviduto e peso do ovário, respectivamente.(AU)
Due to scarcity of studies on forced molt in alternative production birds, this experiment had the objective of performing an induced molt in Guinea Fowls observing the best body weight losses (BWL) that could promote good post-molt productions. With this purpose, 110 Guinea fowls were housed in individual commercial cages and were submitted to induced molt through the addition of zinc oxide in feed with the concentration of 20000 ppm during 21 days and received drinking water ad libitum. In the analysis of BWL related to post-molt productivity, 60 birds were organized in the groups, according to the percentage of BWL: 24% (n=18), 26% (n=18), 28% (n=12) and more than 30% (n=12). The other 50 birds were sacrificed for analyses of the reproductive organs, in which the oviduct size and weight of oviduct and ovary were measured with 0% of BWL and since then the regression of these organs were calculated to 24%, 26%,28% and more than 30% of BWL. The medium of post-molt return to production was 60% and the group of 24% of BWL presented the best productive return (100%), however this group presented an insufficient production rate as the birds with 30% of BWL. In this way, the induced molt in Guinea fowls was viable with BWL around 26 and 28% and unviable with less than 24% or more than 30%. In relation to regression of the reproductive organs the best productive results were 65,15%,90,49% and 94,27% to oviduct size and weight and ovary weight, respectively.(AU)