Treatment of chronic immunomediated thrombocytopenia with mesenquimal stem cells in dog: case report / Tratamento de trombocitopenia imunomediada crônica com células-tronco mesenquimais em cão: relato de caso

Immunomediated thrombocytopenia is a systemic metabolic disorder in which the platelet count falls below reference values, as the patient's immune system destroys them. The main clinical signs in thrombocytopenia are petechial, hemorrhages, ecchymoses and suffusions. Hematomas can also occur in coagulation disorders. The diagnosis is based on clinical findings and hematological examinations. The treatment consists of the use of corticosteroids and immunosuppressants, delaying cell destruction, and may last for months, not always obtaining a cure for the disease. The present work reports the use of therapy with allogeneic mesenchymal stem cells, derived from the adipose tissue of dogs, for the treatment of chronic immunomediated thrombocytopenia, with an evolution of more than one year, in a Pinscher dog. The alternative treatment showed a good evolution, keeping platelets within the reference values during the treatment, giving the patient quality of life and removing the need for continuous medication for homeostasis after treatment.

A trombocitopenia imunomediada é uma desordem metabólica sistêmica, na qual a contagem plaquetária fica abaixo dos valores de referência, pois o sistema imunológico do paciente a destrói. O principal sinal clínico na trombocitopenia são hemorragias, petequiais, equimoses e sufusões. Hematomas podem ocorrer também em alterações da coagulação. O diagnóstico baseia-se nos achados clínicos e nos exames hematológicos. O tratamento consiste na utilização de corticosteroides e imunossupressores, o que retarda a destruição celular, mas pode se prolongar por meses, nem sempre obtendo cura da doença. O presente trabalho relata a utilização da terapia com células-tronco mesenquimais alogênicas, oriundas do tecido adiposo de cães, para tratamento de trombocitopenia imunomediada crônica, com evolução de mais de um ano, em um cão da raça Pinscher. O tratamento alternativo revelou boa evolução, pois manteve as plaquetas dentro dos valores de referência durante o tratamento, o que proporcionou qualidade de vida ao paciente e tornou desnecessárias medicações de uso contínuo para a homeostase após o tratamento.

Effect of intrabronchial platelet rich plasma on the exercise-induced pulmonary hemorrhage endoscopic score in thoroughbred racehorses using furosemide: a preliminary study / [Efeito da instilação intrabronquial de plasma rico em plaquetas no escore endoscópico da hemorragia pulmonar induzida por exercício em cavalos Puro-Sangue Inglês de corrida e usuários de furosemida: um estudo preliminar]

The high prevalence of exercise-induced pulmonary hemorrhage (EIPH) in athletic horses constitutes to be a challenge to the racing industry and a source of major concern to animal welfare. Both experimental and clinical evidence indicate that the use of autologous platelet-rich plasma (PRP) is a promising effector of repair in a variety of pulmonary conditions. The present study evaluated the effect of intrabronchial instillation of PRP on EIPH endoscopic scores from 37 Thoroughbred racehorses. Inclusion criteria were for animals to be EIPH-positive in, at least, two consecutive post-exercise endoscopic exams and to receive 250mg of furosemide IV four hours before racing. Animals were randomly assigned into 3 groups: placebo, control, and PRP instillation. All 37 Thoroughbred racehorses included had EIPH endoscopic scores pre- and post- treatment compared by statistical analysis. The bleeding score from the group receiving PRP was significantly lower than in the control and placebo groups. No adverse effects were observed in any animal during or after the experiment. It was possible to conclude that the intrabronchial instillation of autologous PRP was effective in reducing EIPH scores in racehorses receiving furosemide and that this bioproduct can be considered as a promising coadjuvant in controlling EIPH in athletic horses.(AU)

A alta prevalência de hemorragia pulmonar induzida por exercício (HPIE) em cavalos atletas é um desafio de longa data para a indústria de corridas, além de figurar como grande preocupação sobre o bem-estar animal. As evidências experimentais e clínicas indicam que o uso do plasma rico em plaquetas (PRP) de fonte autógena é promissor na terapêutica de diversas lesões pulmonares. O presente estudo objetivou avaliar as mudanças após corrida no escore endoscópico de HPIE de 37 cavalos Puro-Sangue Inglês que receberam instilação intrabronquial de PRP autólogo. Os animais selecionados eram HPIE-positivos em, ao menos, dois exames endoscópicos consecutivos e recebiam 250mg de furosemida IV administrado quatro horas antes de cada corrida. Na comparação dos escores endoscópicos pré e pós-tratamento, verificou-se que o escore de HPIE do grupo tratado com PRP foi significantemente menor que o dos grupos controle e placebo. Nenhum efeito adverso foi observado nos animais durante ou após o experimento. Concluiu-se que a instilação intrabronquial de PRP autólogo foi efetiva na redução do escore de HPIE de cavalos de corrida usuários de furosemida e que este bioproduto pode ser considerado uma alternativa promissora no controle de HPIE em cavalos atletas.(AU)

In-vitro production and pre-validation of lyophilized canine platelet-rich plasma for therapeutic use

ABSTRACT: Platelet-rich plasma (PRP) has been considered a promising therapeutic alternative, since platelets are rich in growth factors that are used in the Regenerative Medicine field. However, fresh PRP cannot be stored for long periods. This study aimed to develop a protocol for obtaining lyophilized canine PRP capable of maintaining viability after its reconstitution. For that purpose, canine PRP extraction and lyophilization protocols were initially tested. Subsequently, assays were carried out to quantify the growth factors VEGF and TGF-, before and after the lyophilization process, gelation test and the three-dimensional gel structure analysis of the reconstituted lyophilized PRP by electron microscopy, as well as in vitro cell proliferation test in lyophilized PRP gel. Additionally, the immunogenicity test was performed, using allogeneic samples of lyophilized PRP. The results showed that the lyophilized PRP had adequate therapeutic concentrations of growth factors VEGF and TGF- (9.1pg/mL and 6161.6pg/mL, respectively). The reconstituted PRP gel after lyophilization showed an in vitro durability of 10 days. Its electron microscopy structure was similar to that of fresh PRP. In the cell proliferation test, an intense division process was verified in mesenchymal stem cells (MSCs) through the three-dimensional mesh structure of the lyophilized PRP gel. The immunogenicity test showed no evidence of an immune reaction. The findings were promising, suggesting the possibility of having a lyophilized canine PRP that can be marketed. New in vivo and in vitro studies must be carried out for therapeutic confirmation.

RESUMO: O plasma rico em plaquetas (PRP) é uma alternativa terapêutica promissora, pois as plaquetas são ricas em fatores de crescimento com ação na regeneração de tecidos. No entanto, o PRP fresco não pode ser armazenado por longos períodos. Esse trabalho teve como objetivo desenvolver um protocolo de obtenção de PRP liofilizado canino capaz de manter a viabilidade pós reconstituição. Portanto, foram testados diversos protocolos de extração e liofilização. Para validação do PRP canino liofilizado foi analisada a concentração dos fatores de crescimento VEGF e TGF- antes e após o processo de liofilização, a estrutura tridimensional do PRP liofilizado reconstituído em forma de gel por microscopia eletrônica e seu efeito in vitro na proliferação de células-tronco mesenquimais. Os resultados demonstraram que o PRP liofilizado apresentou concentrações terapêuticas adequadas dos fatores de crescimento VEGF e TGF- (9,1pg/ml e 6161,6pg/ml, respectivamente). O gel de PRP reconstituído após liofilização apresentou uma durabilidade in vitro de 10 dias, sua estrutura tridimensional mostrou-se semelhante ao PRP fresco e proporcionou intensa proliferação de células-tronco mesenquimais durante o cultivo. O teste de imunogenicidade não demonstrou evidências de reação imune. Os achados foram promissores, sugerindo a possibilidade de uso de PRP canino liofilizado para o mercado. Novos estudos in vivo e in vitro deverão ser conduzidos para comprovação terapêutica.

In-vitro production and pre-validation of lyophilized canine platelet-rich plasma for therapeutic use / Produção e validação de plasma rico em plaquetas canino liofilizado para fins de utilização terapêutica

Platelet-rich plasma (PRP) has been considered a promising therapeutic alternative, since platelets are rich in growth factors that are used in the Regenerative Medicine field. However, fresh PRP cannot be stored for long periods. This study aimed to develop a protocol for obtaining lyophilized canine PRP capable of maintaining viability after its reconstitution. For that purpose, canine PRP extraction and lyophilization protocols were initially tested. Subsequently, assays were carried out to quantify the growth factors VEGF and TGF-β, before and after the lyophilization process, gelation test and the three-dimensional gel structure analysis of the reconstituted lyophilized PRP by electron microscopy, as well as in vitro cell proliferation test in lyophilized PRP gel. Additionally, the immunogenicity test was performed, using allogeneic samples of lyophilized PRP. The results showed that the lyophilized PRP had adequate therapeutic concentrations of growth factors VEGF and TGF-β (9.1pg/mL and 6161.6pg/mL, respectively). The reconstituted PRP gel after lyophilization showed an in vitro durability of 10 days. Its electron microscopy structure was similar to that of fresh PRP. In the cell proliferation test, an intense division process was verified in mesenchymal stem cells (MSCs) through the three-dimensional mesh structure of the lyophilized PRP gel. The immunogenicity test showed no evidence of an immune reaction. The findings were promising, suggesting the possibility of having a lyophilized canine PRP that can be marketed. New in vivo and in vitro studies must be carried out for therapeutic confirmation.(AU)

O plasma rico em plaquetas (PRP) é uma alternativa terapêutica promissora, pois as plaquetas são ricas em fatores de crescimento com ação na regeneração de tecidos. No entanto, o PRP fresco não pode ser armazenado por longos períodos. Esse trabalho teve como objetivo desenvolver um protocolo de obtenção de PRP liofilizado canino capaz de manter a viabilidade pós reconstituição. Portanto, foram testados diversos protocolos de extração e liofilização. Para validação do PRP canino liofilizado foi analisada a concentração dos fatores de crescimento VEGF e TGF-β antes e após o processo de liofilização, a estrutura tridimensional do PRP liofilizado reconstituído em forma de gel por microscopia eletrônica e seu efeito in vitro na proliferação de células-tronco mesenquimais. Os resultados demonstraram que o PRP liofilizado apresentou concentrações terapêuticas adequadas dos fatores de crescimento VEGF e TGF- β (9,1pg/ml e 6161,6pg/ml, respectivamente). O gel de PRP reconstituído após liofilização apresentou uma durabilidade in vitro de 10 dias, sua estrutura tridimensional mostrou-se semelhante ao PRP fresco e proporcionou intensa proliferação de células-tronco mesenquimais durante o cultivo. O teste de imunogenicidade não demonstrou evidências de reação imune. Os achados foram promissores, sugerindo a possibilidade de uso de PRP canino liofilizado para o mercado. Novos estudos in vivo e in vitro deverão ser conduzidos para comprovação terapêutica.(AU)

In-vitro production and pre-validation of lyophilized canine platelet-rich plasma for therapeutic use / Produção e validação de plasma rico em plaquetas canino liofilizado para fins de utilização terapêutica

Platelet-rich plasma (PRP) has been considered a promising therapeutic alternative, since platelets are rich in growth factors that are used in the Regenerative Medicine field. However, fresh PRP cannot be stored for long periods. This study aimed to develop a protocol for obtaining lyophilized canine PRP capable of maintaining viability after its reconstitution. For that purpose, canine PRP extraction and lyophilization protocols were initially tested. Subsequently, assays were carried out to quantify the growth factors VEGF and TGF-β, before and after the lyophilization process, gelation test and the three-dimensional gel structure analysis of the reconstituted lyophilized PRP by electron microscopy, as well as in vitro cell proliferation test in lyophilized PRP gel. Additionally, the immunogenicity test was performed, using allogeneic samples of lyophilized PRP. The results showed that the lyophilized PRP had adequate therapeutic concentrations of growth factors VEGF and TGF-β (9.1pg/mL and 6161.6pg/mL, respectively). The reconstituted PRP gel after lyophilization showed an in vitro durability of 10 days. Its electron microscopy structure was similar to that of fresh PRP. In the cell proliferation test, an intense division process was verified in mesenchymal stem cells (MSCs) through the three-dimensional mesh structure of the lyophilized PRP gel. The immunogenicity test showed no evidence of an immune reaction. The findings were promising, suggesting the possibility of having a lyophilized canine PRP that can be marketed. New in vivo and in vitro studies must be carried out for therapeutic confirmation.(AU)

O plasma rico em plaquetas (PRP) é uma alternativa terapêutica promissora, pois as plaquetas são ricas em fatores de crescimento com ação na regeneração de tecidos. No entanto, o PRP fresco não pode ser armazenado por longos períodos. Esse trabalho teve como objetivo desenvolver um protocolo de obtenção de PRP liofilizado canino capaz de manter a viabilidade pós reconstituição. Portanto, foram testados diversos protocolos de extração e liofilização. Para validação do PRP canino liofilizado foi analisada a concentração dos fatores de crescimento VEGF e TGF-β antes e após o processo de liofilização, a estrutura tridimensional do PRP liofilizado reconstituído em forma de gel por microscopia eletrônica e seu efeito in vitro na proliferação de células-tronco mesenquimais. Os resultados demonstraram que o PRP liofilizado apresentou concentrações terapêuticas adequadas dos fatores de crescimento VEGF e TGF- β (9,1pg/ml e 6161,6pg/ml, respectivamente). O gel de PRP reconstituído após liofilização apresentou uma durabilidade in vitro de 10 dias, sua estrutura tridimensional mostrou-se semelhante ao PRP fresco e proporcionou intensa proliferação de células-tronco mesenquimais durante o cultivo. O teste de imunogenicidade não demonstrou evidências de reação imune. Os achados foram promissores, sugerindo a possibilidade de uso de PRP canino liofilizado para o mercado. Novos estudos in vivo e in vitro deverão ser conduzidos para comprovação terapêutica.(AU)

Optimized broad-range real-time PCR-based method for bacterial screening of platelet concentrates / Otimização de um método baseado em PCR em tempo real para rastreamento de bactérias em concentrados de plaquetas

Bacterial contamination of blood components remains a major challenge in transfusion medicine, particularly, platelet concentrates (PCs) due to the storage conditions that support bacterial proliferation. In this study, we develop a rapid, sensitive and specific real-time PCR protocol for bacterial screening of PCs. An internally controlled real-time PCR-based method was optimized and validated with our proprietary 16S Universal PCR Master Mix (IBMP/Fiocruz), which targets a conserved region of the bacterial 16S rRNA gene. Nonspecific background DNA was completely eliminated by treating the PCR Master Mix with ethidium monoazide (EMA). A lower limit of detection was observed for 10 genome equivalents with an observed Ct value of 34±1.07 in calibration curve generated with 10-fold serial dilutions of E. coli DNA. The turnaround time for processing, including microbial DNA purification, was approximately 4 hours. The developed method showed a high sensitivity with no non-specific amplification and a lower time-to-detection than traditional microbiological methods, demonstrating it to be an efficient means of screening pre-transfusion PCs.(AU)

A contaminação bacteriana dos componentes sanguíneos é um grande desafio na medicina transfusional, principalmente nos concentrados de plaquetas (PCs) devido às condições de armazenamento que favorecem a proliferação bacteriana. Neste estudo, desenvolvemos um protocolo de PCR em tempo real rápido, sensível e específico para a triagem bacteriana de PCs. Um método baseado em PCR em tempo real, controlado internamente, foi otimizado e validado com um Master Mix Universal PCR 16S (IBMP / Fiocruz), que detecta uma região conservada do gene 16S rRNA bacteriano. O background de DNA não específico foi completamente eliminado tratando a PCR Master Mix com monoazida de etídio (EMA). O limite de detecção inferior observado foi de 10 cópias equivalentes do genoma com um valor de Ct 34 ± 1,07, a curva de calibração foi gerada com diluições seriada de 10 vezes do DNA de E. coli. O tempo de processamento, incluindo a purificação microbiana do DNA, foi de aproximadamente 4 horas. O método desenvolvido mostrou alta sensibilidade sem amplificação inespecífica e menor tempo de detecção do que os métodos microbiológicos tradicionais, demonstrando ser um meio eficiente de triagem de PCs pré-transfusionais.(AU)

Allogenic platelet-rich plasma in induced ulcers in rat's cornea / [Plasma rico em plaquetas alogênico em úlceras de córnea induzidas em ratos]

The objective in this study was to evaluate the clinic effect of applying allogenic platelet-rich plasma (PRP) heated or not, for treating cornea ulcers, including the dosage of PDGF-BB in the cornea. The ulcers were induced, standardizing the left eye from 81 rats (Ratus norvegicus, albinus variety), assigned randomly into three groups (N=27): control group (CG) which did not receive any topic treatment; heated PRP group (GA) and PRP group (GP), which received topical treatment every eight hours for five days. Each group underwent evaluation at 24 hours (M1), three days (M3) and five days (M5). The clinical exam evaluated the opacity, vascularization and corneal repair. The corneal PDGF-BB was dosed through the ELISA method. The corneal opacity was decreased in PRP-treated animals (GA and GP) and corneal repair time reduced when compared to CG at M1 and M5. Furthermore, GP showed greater vascularization at M3 compared to M1. Applied allogenic PRP eye drops, heated or not, speed up corneal healing, and reduce corneal repair time. However, the corneal PDGF concentration was not altered in any of the treatments.(AU)

Objetivou-se avaliar o efeito clínico da aplicação de plasma rico em plaquetas alogênico (PRP) aquecido ou não, no tratamento de úlceras de córnea, como a dosagem de PDGF-BB na córnea. As úlceras foram induzidas, padronizando-se o olho esquerdo de 81 ratos (Rattus norvegicus, variedade albinus), aleatoriamente, nos três grupos (N = 27): grupo controle (CG), que não recebeu nenhum tratamento tópico; grupo PRP aquecido (GA) e grupo PRP (GP), que receberam tratamento tópico a cada oito horas, durante cinco dias. Cada grupo foi subdividido em 24 horas (M1), três dias (M3) e cinco dias (M5). O exame clínico avaliou a opacidade, a vascularização e o reparo corneano. O PDGF-BB corneano foi dosado pelo método Elisa. Houve diminuição da opacidade da córnea nos animais tratados com PRP (GA e GP) e diminuição do tempo de reparo da córnea em comparação com CG, M1 e M5. Além disso, foi observada maior vascularização no GP no momento M3 em relação ao M1. A aplicação de colírios de PRP alogênico, aquecidos ou não, acelera a cicatrização da córnea, além de reduzir o tempo de reparo da córnea. No entanto, a concentração de PDGF na córnea não se alterou em nenhum dos tratamentos.(AU)

Uso do plasma rico em plaquetas associado a colírios no tratamento de ceratite ulcerativa em equino / Use of rich plasma on platters associated with collieries in the treatment of ulcerative caeratitis in equine

A córnea é a primeira estrutura do olho a receber luz, sendo localizada na parte mais externado bulbo ocular. Devido a sua localização está sujeita, com maior frequência, a processos lesivos, como a úlcera de córnea, também chamada de ceratite ulcerativa. É a patologia com maior ocorrência dentre as afecções oftalmológicas em equinos, e caso não tenha o tratamento adequado, pode levar a perda da visão do animal. Diante desse contexto, objetivo do estudo foi relatar um caso clínico de ceratite ulcerativa em equino tratado com plasma rico em plaquetas (PRP) associado a colírios. Um equino, macho, de 3 anos de idade, raça Quarto de Milha, pelagem alazã foi encaminhado para atendimento veterinário por ter sofrido uma pancada em um caibro. Durante o exame clínico foi constatado que o cavalo apresentava quemose, epífora, blefaroespasmo e perda temporária da capacidade visual. Baseado nos sinais clínicos e histórico a suspeita clínica foi de ceratite ulcerativa. O tratamento indicado foi instilação de Ocucan® colírio, Ciprovet® e PRP, duas gotas de cada, duas vezes ao dia, além de lavagem com solução fisiológica. O animal apresentou evolução significativa ao tratamento e com 30 dias foi liberado para retornar a propriedade e as atividades físicas gradativamente. Dessa forma, podemos concluir que o uso de plasma rico em plaquetas constitui uma ferramenta importante e acessível no tratamento de ceratite ulcerativa em equinos, inclusive demonstrando bons resultados na caraterística da cicatrização e no tempo da mesma.

The cornea is the first structure of the eye receiving light, being located at the outermost part of the ocular bulb. Due to its location is subject, more often, the harmful processes such as corneal ulcer, also called keratitis Ulcerative. It is the disease with higher incidence among ophthalmologic diseases in horses, and if no proper treatment, can lead to the animal vision loss. In this context, objective of the study was to report a case of keratitis Ulcerative equinus treated with platelet-rich plasma (PRP) associated with eye drops. A horse, male, 3 years old, Quarter Horses, sorrel coat was referred to veterinary care after suffering a stroke on a rafter. During the clinical examination revealed that the horse had chemosis, epiphora blepharospasm and temporary loss of vision. Based on clinical signs and history clinical suspicion was keratitis Ulcerative. The treatment was Ocucan® instillation of eye drops, Ciprovet® PRP and two drops each, twice a day, and washing with saline solution. The animal showed evolution significant treatment and was released 30 days to return the property and physical activity gradually. Thus, we conclude that the use of platelet rich plasma is an important tool and accessible in the treatment of ulcerative keratitis in horses, including demonstrating good results in healing characteristic and time thereof.

Uso do plasma rico em plaquetas como adjuvante no tratamento de lesão meniscal e tendinose de calcâneo em um cão / Use of platelet-rich plasma as an adjuvant on treatment of meniscal lesion and tendinosis of calcaneus in a dog

O objetivo deste trabalho é relatar o caso de um cão com lesão meniscal associado à tendinose de calcâneo tratado com aplicação única de plasma rico em plaquetas (PRP) intraarticular e intratendínea. Foi atendido um cão da raça Boxer com dificuldade de deambulação há três meses. Observou-se claudicação grau II/IV em ambos os membros pélvicos, atrofia muscular bilateral, dor e leve crepitação em joelho esquerdo, discreta instabilidade aos testes de gaveta e tibial cranial, com intensa fibrose medial à articulação e espessamento/rigidez do tendão calcâneo direito. O estudo radiográfico demonstrou artrose moderada no joelho esquerdo e, ao exame ultrassonográfico, constatou-se áreas de hipoecogenicidade em menisco medial esquerdo e ruptura de fibras musculares do tendão calcâneo direito. Sendo assim, o paciente foi diagnosticado com insuficiência do ligamento cruzado cranial crônica, com estabilidade fibrótica periarticular, e lesão meniscal em joelho esquerdo e tendinose de calcâneo direito. Foram prescritos condroprotetores, diacereína, fisioterapia e uma aplicação de PRP intra-articular e intratendínea. Para a concentração do PRP, foram coletados 50mL de sangue autólogo, os quais foram depositados em frascos contendo citrato de sódio. Foi realizada dupla centrifugação, sendo a primeira com força de120g e a segunda 240g, ambas por dez minutos. Ao final, obteve-se 2mL de PRP com246.000 plaquetas/µL (antes da concentração o sangue tinha 141.000 plaquetas/µL). A aplicação ocorreu de forma asséptica, sob anestesia geral e guiada por ultrassom. Foram injetados 1ml intra-articular em joelho esquerdo, 0,25mL em região perilesional e 0,75mLintralesional em tendão calcâneo direito. Após 14 dias, notou-se grau de claudicação I/IV e discreto fortalecimento muscular. Foi mantido o tratamento clínico com fisioterapia e condroprotetores com retornos periódicos para acompanhamento da evolução. Conclui-se que o uso do PRP foi importante adjuvante na terapia clínica empregada.

The aim of this paper is to report the case of a dog with meniscal lesion associated with calcaneal tendinosis treated with single application of intra-articular and intratendinous platelet rich plasma (PRP). A dog of the Boxer racer with difficulty walking was treated three months ago. Grade II/IV lameness was observed in both pelvic limbs, bilateral muscle atrophy, pain and slight crepitation in the left knee, slight instability to the drawer and cranial tibial tests, with intense medial fibrosis to the joint and right calcaneal tendon thickening/stiffness. The radiographic study showed moderate arthrosis in the left knee, and ultrasound examination revealed areas of hypoechogenicity in the left medial meniscus and rupture of the right calcaneal tendon muscle fibers. Thus, the patient was diagnosed with chronic cranial cruciate ligament insufficiency, periarticular fibrotic stability, and left meniscal injury and right calcaneal tendinosis. Chondroprotectors, diacerein, physiotherapyand an application of intra-articular and intratendinous PRP were prescribed. For the PRP concentration, 50mL of autologous blood were collected and deposited in vials containing sodium citrate. A double centrifugation was performed, the first strength of 120g and the second 240g, both for ten minutes. At the end, 2mL of PRP was obtained with 246.000platelets/µL (before concentration the blood had 141.000 platelets/µL). The application occurred aseptically, under general anesthesia and guided by ultrasound. We injected 1mlintra-articular in the left knee, 0.25mL in the perilesional region and 0.75mL intralesional in the right calcaneal tendon. After 14 days, I/IV lameness and slight muscle strengthening were noted. Clinical treatment with physiotherapy and chondroprotectors was maintained, with periodic returns to follow the evolution. It was concluded that the use of PRP was an important adjuvant in the clinical therapy employed.

Associação de plasma rico em plaquetas de equino e pomada comercial no tratamento de feridas em pele de coelho / Rich plasma association in equine platform and commercial oil in writing of rabbit skin

Autologous platelet-rich plasma (PRP) is beneficial in the healing process of reconstructive surgeries, contributing to the stimulation of angiogenesis; however, heterologous plasma has been shown to be more effective. The objective of this study was to verify, by macro- and microscopic evaluation, whether PRP accelerates the healing process as compared to a commercial ointment containing gentamicin, sulfanilamide, sulfadiazine, urea, and vitamin A (study ointment). This study used 24 white New Zealand rabbits, aged 12 months, and each weighing approximately 3 kg. The animals were separated into 4 equal groups and underwent wound induction through skin removal in the thoracic (study wound) and lumbar (control wound) dorsal midline. Study wounds were co-treated with equine PRP and the study ointment. Control wounds were treated with only the study ointment. Group I underwent histological evaluation 3 days after the skin removal procedure, group II after 7 days, group III after 14 days, and group IV after 21 days. A skin fragment was collected from each animal for histological evaluation. The co-treatment with heterologous equine PRP and the study ointment accelerated the healing process in the surgically induced skin wounds, confirming the acceleratory effect of PRP on wound healing.

O plasma rico em plaquetas autólogo é importante no processo cicatricial de cirurgias reconstrutivas, auxiliando na estimulação da angiogênese; no entanto, o plasma heterólogo mostrou-se mais eficaz. Utilizou-se 24 coelhos da raça Nova Zelândia, com idade de 12 meses, com peso corporal cerca de 3,0 kg. Os animais foram separados em quatro grupos de igual número e submetidos a remoção de pele na linha média dorsal torácica (ferida tratada) e lombar (ferida controle). Nas tratadas, foi aplicado plasma rico em plaqueta de equino e pomada contendo gentamicina, sulfanilamida, sulfadiazina, ureia e vitamina A e, nas do grupo controle, somente a pomada. Nos do grupo I, foi coletado tecido cutâneo para a avaliação histológica com três dias de pós-operatório, nos do grupo II com sete dias, nos do grupo III com 14 dias e, nos do grupo IV, com 21 dias. Decorrido o período de avaliação de cada grupo, foi coletado fragmento de pele para avaliação histológica. O uso associado do plasma rico em plaquetas heterólogo de equino com a pomada contendo gentamicina, sulfanilamida, sulfadiazina, ureia e vitamina A, em feridas de pele induzidas cirurgicamente acelera o processo cicatricial.

Avaliação morfológica do concentrado autólogo de plaquetas em cães sob refrigeração e criopreservação em DMSO 6% / [Morphological evaluation of the autologous platelet concentrate in dogs under refrigeration and criopreservation in 6% DMSO]

The morphological characteristics of the autologous platelet concentrate (APC) of 31 dogs were evaluated after cooling and freezing in 6% DMSO. Blood from the jugular vein of each patient was collected and centrifuged at 191g for six minutes to obtain APC. In the fresh sample, the platelet count, MPV, PDW and cell morphology were evaluated. Four samples of each animal were sent for storage, one refrigerated at 4°C for seven days, another for 30 days and two more stored in a freezer at -80°C in the same time interval, using 6% DMSO as cryoprotectant. The conserved samples were submitted to the same laboratory analysis as the fresh sample. There was a difference between fresh and preserved samples for platelet count, cell concentration, MPV and PDW (P<0.05), except in the 30-day refrigerated group, which showed severe morphological changes. In the frozen group for seven days, no difference was observed in the percentage of activation (P>0.05). The results obtained lead to the conclusion that cryopreservation with 6% DMSO at -80°C for seven days is a favorable option for the maintenance of platelet concentrations and the morphological characteristics of APC in dogs.(AU)

Uso do plasma rico em plaquetas associado a colírios no tratamento de ceratite ulcerativa em equino / Use of rich plasma on platters associated with collieries in the treatment of ulcerative caeratitis in equine

A córnea é a primeira estrutura do olho a receber luz, sendo localizada na parte mais externado bulbo ocular. Devido a sua localização está sujeita, com maior frequência, a processos lesivos, como a úlcera de córnea, também chamada de ceratite ulcerativa. É a patologia com maior ocorrência dentre as afecções oftalmológicas em equinos, e caso não tenha o tratamento adequado, pode levar a perda da visão do animal. Diante desse contexto, objetivo do estudo foi relatar um caso clínico de ceratite ulcerativa em equino tratado com plasma rico em plaquetas (PRP) associado a colírios. Um equino, macho, de 3 anos de idade, raça Quarto de Milha, pelagem alazã foi encaminhado para atendimento veterinário por ter sofrido uma pancada em um caibro. Durante o exame clínico foi constatado que o cavalo apresentava quemose, epífora, blefaroespasmo e perda temporária da capacidade visual. Baseado nos sinais clínicos e histórico a suspeita clínica foi de ceratite ulcerativa. O tratamento indicado foi instilação de Ocucan® colírio, Ciprovet® e PRP, duas gotas de cada, duas vezes ao dia, além de lavagem com solução fisiológica. O animal apresentou evolução significativa ao tratamento e com 30 dias foi liberado para retornar a propriedade e as atividades físicas gradativamente. Dessa forma, podemos concluir que o uso de plasma rico em plaquetas constitui uma ferramenta importante e acessível no tratamento de ceratite ulcerativa em equinos, inclusive demonstrando bons resultados na caraterística da cicatrização e no tempo da mesma.(AU)

The cornea is the first structure of the eye receiving light, being located at the outermost part of the ocular bulb. Due to its location is subject, more often, the harmful processes such as corneal ulcer, also called keratitis Ulcerative. It is the disease with higher incidence among ophthalmologic diseases in horses, and if no proper treatment, can lead to the animal vision loss. In this context, objective of the study was to report a case of keratitis Ulcerative equinus treated with platelet-rich plasma (PRP) associated with eye drops. A horse, male, 3 years old, Quarter Horses, sorrel coat was referred to veterinary care after suffering a stroke on a rafter. During the clinical examination revealed that the horse had chemosis, epiphora blepharospasm and temporary loss of vision. Based on clinical signs and history clinical suspicion was keratitis Ulcerative. The treatment was Ocucan® instillation of eye drops, Ciprovet® PRP and two drops each, twice a day, and washing with saline solution. The animal showed evolution significant treatment and was released 30 days to return the property and physical activity gradually. Thus, we conclude that the use of platelet rich plasma is an important tool and accessible in the treatment of ulcerative keratitis in horses, including demonstrating good results in healing characteristic and time thereof.(AU)

Uso do plasma rico em plaquetas como adjuvante no tratamento de lesão meniscal e tendinose de calcâneo em um cão / Use of platelet-rich plasma as an adjuvant on treatment of meniscal lesion and tendinosis of calcaneus in a dog

O objetivo deste trabalho é relatar o caso de um cão com lesão meniscal associado à tendinose de calcâneo tratado com aplicação única de plasma rico em plaquetas (PRP) intraarticular e intratendínea. Foi atendido um cão da raça Boxer com dificuldade de deambulação há três meses. Observou-se claudicação grau II/IV em ambos os membros pélvicos, atrofia muscular bilateral, dor e leve crepitação em joelho esquerdo, discreta instabilidade aos testes de gaveta e tibial cranial, com intensa fibrose medial à articulação e espessamento/rigidez do tendão calcâneo direito. O estudo radiográfico demonstrou artrose moderada no joelho esquerdo e, ao exame ultrassonográfico, constatou-se áreas de hipoecogenicidade em menisco medial esquerdo e ruptura de fibras musculares do tendão calcâneo direito. Sendo assim, o paciente foi diagnosticado com insuficiência do ligamento cruzado cranial crônica, com estabilidade fibrótica periarticular, e lesão meniscal em joelho esquerdo e tendinose de calcâneo direito. Foram prescritos condroprotetores, diacereína, fisioterapia e uma aplicação de PRP intra-articular e intratendínea. Para a concentração do PRP, foram coletados 50mL de sangue autólogo, os quais foram depositados em frascos contendo citrato de sódio. Foi realizada dupla centrifugação, sendo a primeira com força de120g e a segunda 240g, ambas por dez minutos. Ao final, obteve-se 2mL de PRP com246.000 plaquetas/µL (antes da concentração o sangue tinha 141.000 plaquetas/µL). A aplicação ocorreu de forma asséptica, sob anestesia geral e guiada por ultrassom. Foram injetados 1ml intra-articular em joelho esquerdo, 0,25mL em região perilesional e 0,75mLintralesional em tendão calcâneo direito. Após 14 dias, notou-se grau de claudicação I/IV e discreto fortalecimento muscular. Foi mantido o tratamento clínico com fisioterapia e condroprotetores com retornos periódicos para acompanhamento da evolução. Conclui-se que o uso do PRP foi importante adjuvante na terapia clínica empregada.(AU)

The aim of this paper is to report the case of a dog with meniscal lesion associated with calcaneal tendinosis treated with single application of intra-articular and intratendinous platelet rich plasma (PRP). A dog of the Boxer racer with difficulty walking was treated three months ago. Grade II/IV lameness was observed in both pelvic limbs, bilateral muscle atrophy, pain and slight crepitation in the left knee, slight instability to the drawer and cranial tibial tests, with intense medial fibrosis to the joint and right calcaneal tendon thickening/stiffness. The radiographic study showed moderate arthrosis in the left knee, and ultrasound examination revealed areas of hypoechogenicity in the left medial meniscus and rupture of the right calcaneal tendon muscle fibers. Thus, the patient was diagnosed with chronic cranial cruciate ligament insufficiency, periarticular fibrotic stability, and left meniscal injury and right calcaneal tendinosis. Chondroprotectors, diacerein, physiotherapyand an application of intra-articular and intratendinous PRP were prescribed. For the PRP concentration, 50mL of autologous blood were collected and deposited in vials containing sodium citrate. A double centrifugation was performed, the first strength of 120g and the second 240g, both for ten minutes. At the end, 2mL of PRP was obtained with 246.000platelets/µL (before concentration the blood had 141.000 platelets/µL). The application occurred aseptically, under general anesthesia and guided by ultrasound. We injected 1mlintra-articular in the left knee, 0.25mL in the perilesional region and 0.75mL intralesional in the right calcaneal tendon. After 14 days, I/IV lameness and slight muscle strengthening were noted. Clinical treatment with physiotherapy and chondroprotectors was maintained, with periodic returns to follow the evolution. It was concluded that the use of PRP was an important adjuvant in the clinical therapy employed.(AU)

Associação de plasma rico em plaquetas de equino e pomada comercial no tratamento de feridas em pele de coelho / Rich plasma association in equine platform and commercial oil in writing of rabbit skin

Autologous platelet-rich plasma (PRP) is beneficial in the healing process of reconstructive surgeries, contributing to the stimulation of angiogenesis; however, heterologous plasma has been shown to be more effective. The objective of this study was to verify, by macro- and microscopic evaluation, whether PRP accelerates the healing process as compared to a commercial ointment containing gentamicin, sulfanilamide, sulfadiazine, urea, and vitamin A (study ointment). This study used 24 white New Zealand rabbits, aged 12 months, and each weighing approximately 3 kg. The animals were separated into 4 equal groups and underwent wound induction through skin removal in the thoracic (study wound) and lumbar (control wound) dorsal midline. Study wounds were co-treated with equine PRP and the study ointment. Control wounds were treated with only the study ointment. Group I underwent histological evaluation 3 days after the skin removal procedure, group II after 7 days, group III after 14 days, and group IV after 21 days. A skin fragment was collected from each animal for histological evaluation. The co-treatment with heterologous equine PRP and the study ointment accelerated the healing process in the surgically induced skin wounds, confirming the acceleratory effect of PRP on wound healing.(AU)

O plasma rico em plaquetas autólogo é importante no processo cicatricial de cirurgias reconstrutivas, auxiliando na estimulação da angiogênese; no entanto, o plasma heterólogo mostrou-se mais eficaz. Utilizou-se 24 coelhos da raça Nova Zelândia, com idade de 12 meses, com peso corporal cerca de 3,0 kg. Os animais foram separados em quatro grupos de igual número e submetidos a remoção de pele na linha média dorsal torácica (ferida tratada) e lombar (ferida controle). Nas tratadas, foi aplicado plasma rico em plaqueta de equino e pomada contendo gentamicina, sulfanilamida, sulfadiazina, ureia e vitamina A e, nas do grupo controle, somente a pomada. Nos do grupo I, foi coletado tecido cutâneo para a avaliação histológica com três dias de pós-operatório, nos do grupo II com sete dias, nos do grupo III com 14 dias e, nos do grupo IV, com 21 dias. Decorrido o período de avaliação de cada grupo, foi coletado fragmento de pele para avaliação histológica. O uso associado do plasma rico em plaquetas heterólogo de equino com a pomada contendo gentamicina, sulfanilamida, sulfadiazina, ureia e vitamina A, em feridas de pele induzidas cirurgicamente acelera o processo cicatricial.(AU)

Evaluation of platelet-rich plasma gel as an angiogenesis-inducing agent in canine advancement skin flaps / Avaliação do gel de plasma rico em plaquetas como agente indutor da angiogênese em flapes cutâneos de avanço em cães

This work aimed to evaluate the effect of platelet-rich plasma (PRP) on advancement skin flaps in dogs regarding improvement of vascularization, with focus on increasing its viable area, since there are reports that it is a potential angiogenesis stimulator. The experimental group was composed of eight adult bitches, in which two advancement skin flaps were made in the ventral abdominal region. No product was applied in the control flap (CF), while PRP was used in the contralateral flap, called treated flap (TF). The areas were clinically evaluated every two days until the 7th postoperative day regarding skin color and presence of necrosis. At 10 days, both flaps were removed and submitted to histological examination and blood vessel morphometry. The vessels counted in each group were statistically analyzed by the F-test at 1% probability. Results showed no significant difference in macroscopic changes in the wound, or CF and TF vascularization, thus suggesting that PRP gel did not improve advancement skin flap angiogenesis in bitches under the experimental conditions in which this research was developed.(AU)

Objetivou-se com o presente artigo avaliar a ação angiogênica do gel de plasma rico em plaquetas (PRP) em flapes cutâneos de avanço em animais da espécie canina, visando aumentar a viabilidade da pele após o procedimento, uma vez que existem relatos de que o produto é um potente estimulador da angiogênese. O grupo experimental foi composto por oito cadelas adultas, onde foram confeccionados dois flapes de avanço (de padrão subdérmico) na região abdominal ventral. Em um dos flapes, considerado controle (FC) não foi aplicado nenhum produto, enquanto que no flape contralateral, denominado tratado (FT), foi usado o gel de PRP. As áreas foram macroscopicamente avaliadas a cada dois dias até o 7º dia de pós-operatório em relação à coloração da pele e presença de área de necrose, e com 10 dias ambos os flapes foram coletados por biópsia e submetidos ao exame histológico e morfometria dos vasos sanguíneos. Os vasos contados em cada grupo foram estatisticamente analisados pelo teste de F ao nível de 1% de probabilidades. Os resultados demonstraram que não houve diferença significativa nas alterações macroscópicas das feridas e na morfometria vascular dos FC e FT, sugerindo dessa maneira que dentro das condições experimentais nas quais a pesquisa foi executada, que o gel de PRP não incrementou a angiogênese de flapes de avanço em cadelas.(AU)

Evaluation of platelet-rich plasma gel as an angiogenesis-inducing agent in canine advancement skin flaps / Avaliação do gel de plasma rico em plaquetas como agente indutor da angiogênese em flapes cutâneos de avanço em cães

This work aimed to evaluate the effect of platelet-rich plasma (PRP) on advancement skin flaps in dogs regarding improvement of vascularization, with focus on increasing its viable area, since there are reports that it is a potential angiogenesis stimulator. The experimental group was composed of eight adult bitches, in which two advancement skin flaps were made in the ventral abdominal region. No product was applied in the control flap (CF), while PRP was used in the contralateral flap, called treated flap (TF). The areas were clinically evaluated every two days until the 7th postoperative day regarding skin color and presence of necrosis. At 10 days, both flaps were removed and submitted to histological examination and blood vessel morphometry. The vessels counted in each group were statistically analyzed by the F-test at 1% probability. Results showed no significant difference in macroscopic changes in the wound, or CF and TF vascularization, thus suggesting that PRP gel did not improve advancement skin flap angiogenesis in bitches under the experimental conditions in which this research was developed.(AU)

Objetivou-se com o presente artigo avaliar a ação angiogênica do gel de plasma rico em plaquetas (PRP) em flapes cutâneos de avanço em animais da espécie canina, visando aumentar a viabilidade da pele após o procedimento, uma vez que existem relatos de que o produto é um potente estimulador da angiogênese. O grupo experimental foi composto por oito cadelas adultas, onde foram confeccionados dois flapes de avanço (de padrão subdérmico) na região abdominal ventral. Em um dos flapes, considerado controle (FC) não foi aplicado nenhum produto, enquanto que no flape contralateral, denominado tratado (FT), foi usado o gel de PRP. As áreas foram macroscopicamente avaliadas a cada dois dias até o 7º dia de pós-operatório em relação à coloração da pele e presença de área de necrose, e com 10 dias ambos os flapes foram coletados por biópsia e submetidos ao exame histológico e morfometria dos vasos sanguíneos. Os vasos contados em cada grupo foram estatisticamente analisados pelo teste de F ao nível de 1% de probabilidades. Os resultados demonstraram que não houve diferença significativa nas alterações macroscópicas das feridas e na morfometria vascular dos FC e FT, sugerindo dessa maneira que dentro das condições experimentais nas quais a pesquisa foi executada, que o gel de PRP não incrementou a angiogênese de flapes de avanço em cadelas.(AU)

Comparison of the protocols for obtaining platelet-rich plasma in dogs: a cellular study / Comparação entre protocolos para obtenção de plasma rico em plaquetas em cães: estudo celular

This study aimed to evaluate two protocols (PA and PB) that are used to obtain canine platelet-rich plasma (PRP) for cellularity. Twenty healthy dogs were used. Blood samples were collected and placed in two tubes of 3.2% sodium citrate. PA used double centrifugation at 210 x g, and 370 x g and PB used double centrifugation with 140 x g and 330 x g. The PRP samples from the protocols were examined in terms of their platelet, erythrocyte, and leukocyte count in the Neubauer chamber, differential leukocyte count and platelet morphological observation in blood smears. Data (mean and standard deviation) were analyzed with the 95% probability t-test (P <0.05) using Pearsons correlation to test the relationship between platelets and erythrocytes, platelets, and leukocytes, and the leukocyte count versus the erythrocytes. Very weak negative correlation between platelets and leukocytes (p= -0.03), weak negative correlation between platelets and erythrocytes (p= -0.3) and a strong positive correlation between leukocytes and erythrocytes (ρ = 0.75) were noted. Although, BP did not reach the desired mean of one million platelets (979300 ± 79631 cells / μL), both protocols, A and B (4.42 ± 1.61 and 3.85 ± 1.55 times more platelets than total blood, respectively) (p <0.05) were efficient in concentrating platelets. Platelet activation was present in 26.55 ± 6.72% of the PA platelets and 26.25 ± 7.03% in PB (p> 0.05). PA and PB presented low erythrocyte concentration (p> 0.05), and PA had more leukocytes (p <0.05) than PB, with higher concentrations of basophils that were segmented, and lymphocytes.(AU)

Foi proposto avaliar dois protocolos (PA e PB) para obtenção de plasma rico em plaquetas (PRP) canino quanto a celularidade. Foram utilizados 20 cães sadios e coletadas amostras sanguíneas, sendo acondicionados em dois tubos de citrato de sódio a 3,2%. O PA utilizando centrifugação dupla com 210 xG e 370 xG e PB utilizando centrifugação dupla com 140 xG e 330 xG. Amostras de PRP dos protocolos foram destinadas a contagem plaquetária, eritrocitária e leucocitária em câmara de Neubauer, contagem diferencial leucocitária e observação morfológica plaquetária em esfregaços sanguíneos. Analisou-se os dados (médias e desvios padrão) pelo Teste t com 95% de probabilidade (p<0,05) utilizando-se correlação de Pearson para testar a relação entre a contagem de plaquetas e eritrócitos, plaquetas e leucócitos e leucócitos em relação aos eritrócitos. Houve correlação negativa muito fraca entre plaquetas e leucócitos (ρ= -0,03), negativa fraca entre plaquetas e eritrócitos (ρ= -0,3) e correlação positiva forte entre leucócitos e eritrócitos (ρ=0,75). Embora o PB não tenha alcançando a média de um milhão de plaquetas desejado (979300 ± 79631 células/µL), ambos os protocolos, A e B (4,42 ± 1,61 e 3,85 ± 1,55 vezes mais plaquetas que o sangue total, respectivamente) (p<0,05), foram eficientes em concentrar plaquetas. A ativação plaquetária esteve presente em 26,55 ± 6,72 % das plaquetas do PA e 26,25 ± 7,03 % nas do PB (p>0,05). PA e PB apresentaram baixa concentração eritrocitária (p>0,05) e PA apresentou mais leucócitos (p<0,05) que PB, com maiores concentrações de basófilos, segmentados e linfócitos.(AU)

Optimized broad-range real-time PCR-based method for bacterial screening of platelet concentrates

Abstract Bacterial contamination of blood components remains a major challenge in transfusion medicine, particularly, platelet concentrates (PCs) due to the storage conditions that support bacterial proliferation. In this study, we develop a rapid, sensitive and specific real-time PCR protocol for bacterial screening of PCs. An internally controlled real-time PCR-based method was optimized and validated with our proprietary 16S Universal PCR Master Mix (IBMP/Fiocruz), which targets a conserved region of the bacterial 16S rRNA gene. Nonspecific background DNA was completely eliminated by treating the PCR Master Mix with ethidium monoazide (EMA). A lower limit of detection was observed for 10 genome equivalents with an observed Ct value of 34±1.07 in calibration curve generated with 10-fold serial dilutions of E. coli DNA. The turnaround time for processing, including microbial DNA purification, was approximately 4 hours. The developed method showed a high sensitivity with no non-specific amplification and a lower time-to-detection than traditional microbiological methods, demonstrating it to be an efficient means of screening pre-transfusion PCs.

Resumo A contaminação bacteriana dos componentes sanguíneos é um grande desafio na medicina transfusional, principalmente nos concentrados de plaquetas (PCs) devido às condições de armazenamento que favorecem a proliferação bacteriana. Neste estudo, desenvolvemos um protocolo de PCR em tempo real rápido, sensível e específico para a triagem bacteriana de PCs. Um método baseado em PCR em tempo real, controlado internamente, foi otimizado e validado com um Master Mix Universal PCR 16S (IBMP / Fiocruz), que detecta uma região conservada do gene 16S rRNA bacteriano. O background de DNA não específico foi completamente eliminado tratando a PCR Master Mix com monoazida de etídio (EMA). O limite de detecção inferior observado foi de 10 cópias equivalentes do genoma com um valor de Ct 34 ± 1,07, a curva de calibração foi gerada com diluições seriada de 10 vezes do DNA de E. coli. O tempo de processamento, incluindo a purificação microbiana do DNA, foi de aproximadamente 4 horas. O método desenvolvido mostrou alta sensibilidade sem amplificação inespecífica e menor tempo de detecção do que os métodos microbiológicos tradicionais, demonstrando ser um meio eficiente de triagem de PCs pré-transfusionais.

Thrombocytosis: a retrospective study of 573 dogs (2016-2017) / Trombocitose: um estudo retrospectivo em 573 cães (2016-2017)

Thrombocytosis refers to the increase in number of platelets per microliter (µL) of blood. Platelet counts greater than 1,000,000/µL may be associated with clinical signs of bleeding or thrombosis. Previous studies on underlying causes of thrombocytosis have aroused the interest of researchers about its clinical importance in dogs. The objective of this study was to analyze the blood cell counts in dogs in order to define the main diseases or clinical conditions that were associated with thrombocytosis, from 2016 to 2017. This was done to determine the incidence of thrombocytosis, and categorize the increase in platelet count with respect to severity. Of the 12,676 blood samples analyzed, 4.5% presented thrombocytosis (n = 573). Similar mean platelet counts were observed in all diagnosis or different categories of clinical conditions (neoplasms; gastrointestinal, endocrine, and ophthalmological diseases; trauma and surgery; dermatological, cardiac, neurological, infectious, respiratory, genitourinary, idiopathic, and multiple diseases; and pregnancy) with no significant difference (P ≥ 0.05). The disorders most commonly associated with thrombocytosis were gastrointestinal diseases, followed by neoplasms. Furthermore, increased platelet counts were observed in dogs treated with glucocorticoids and vincristine drugs. As for the degree of severity, extreme thrombocytosis occurred more frequently in the presence of gastrointestinal diseases.

A trombocitose é o aumento do número de plaquetas por microlitro (µL) de sangue e contagens maiores que 1.000.000/µL podem estar associadas a sinais clínicos de sangramento ou trombose. Estudos anteriores sobre as causas subjacentes da trombocitose tem despertado o interesse quanto a sua importância clínica em cães. O presente estudo teve como objetivo analisar hemogramas de cães, com a finalidade de definir as principais doenças ou condições clínicas associadas à trombocitose dentro do período de dois anos, determinar a incidência e ainda categorizar as contagens de acordo com a severidade do aumento de plaquetas. De 12.676 hemogramas analisados, observou-se incidência de trombocitose de 4,5% (n=573). As contagens médias de plaquetas em todas as categorias de diagnósticos ou condições clínica (neoplasias, doenças gastrointestinais, endócrinas, oftalmológicas, traumas e cirurgias, dermatológicas, cardíacas, neurológicas, infecciosas, respiratórias, geniturinárias, idiopáticas, múltiplas e gestação) foram semelhantes, não havendo diferença significativa entre elas (P≥0,05). Os distúrbios mais comumente associados à trombocitose foram as doenças gastrointestinais seguidas de neoplasias. Além disso, os aumentos na contagem de plaquetas foram observados em cães tratados com glicocorticoides e vincristina. Quanto ao grau de severidade, a trombocitose extrema ocorreu mais frequentemente nas doenças gastrointestinais.

Thrombocytosis: a retrospective study of 573 dogs (2016-2017) / Trombocitose: um estudo retrospectivo em 573 cães (2016-2017)

Thrombocytosis refers to the increase in number of platelets per microliter (µL) of blood. Platelet counts greater than 1,000,000/µL may be associated with clinical signs of bleeding or thrombosis. Previous studies on underlying causes of thrombocytosis have aroused the interest of researchers about its clinical importance in dogs. The objective of this study was to analyze the blood cell counts in dogs in order to define the main diseases or clinical conditions that were associated with thrombocytosis, from 2016 to 2017. This was done to determine the incidence of thrombocytosis, and categorize the increase in platelet count with respect to severity. Of the 12,676 blood samples analyzed, 4.5% presented thrombocytosis (n = 573). Similar mean platelet counts were observed in all diagnosis or different categories of clinical conditions (neoplasms; gastrointestinal, endocrine, and ophthalmological diseases; trauma and surgery; dermatological, cardiac, neurological, infectious, respiratory, genitourinary, idiopathic, and multiple diseases; and pregnancy) with no significant difference (P ≥ 0.05). The disorders most commonly associated with thrombocytosis were gastrointestinal diseases, followed by neoplasms. Furthermore, increased platelet counts were observed in dogs treated with glucocorticoids and vincristine drugs. As for the degree of severity, extreme thrombocytosis occurred more frequently in the presence of gastrointestinal diseases.(AU)

A trombocitose é o aumento do número de plaquetas por microlitro (µL) de sangue e contagens maiores que 1.000.000/µL podem estar associadas a sinais clínicos de sangramento ou trombose. Estudos anteriores sobre as causas subjacentes da trombocitose tem despertado o interesse quanto a sua importância clínica em cães. O presente estudo teve como objetivo analisar hemogramas de cães, com a finalidade de definir as principais doenças ou condições clínicas associadas à trombocitose dentro do período de dois anos, determinar a incidência e ainda categorizar as contagens de acordo com a severidade do aumento de plaquetas. De 12.676 hemogramas analisados, observou-se incidência de trombocitose de 4,5% (n=573). As contagens médias de plaquetas em todas as categorias de diagnósticos ou condições clínica (neoplasias, doenças gastrointestinais, endócrinas, oftalmológicas, traumas e cirurgias, dermatológicas, cardíacas, neurológicas, infecciosas, respiratórias, geniturinárias, idiopáticas, múltiplas e gestação) foram semelhantes, não havendo diferença significativa entre elas (P≥0,05). Os distúrbios mais comumente associados à trombocitose foram as doenças gastrointestinais seguidas de neoplasias. Além disso, os aumentos na contagem de plaquetas foram observados em cães tratados com glicocorticoides e vincristina. Quanto ao grau de severidade, a trombocitose extrema ocorreu mais frequentemente nas doenças gastrointestinais.(AU)