Cryptosporidium sp. in cultivated oysters and the natural oyster stock of the state of Maranhão, Brazil / Detecção de Cryptosporidium sp. em ostras de cultivo e estoque natural no estado do Maranhão, Brasil

ABSTRACT: This study detected Cryptosporidium spp. in cultivated oysters and the natural oyster stock of the state of Maranhão and determine the elective tissue(s) to examine this protozoan. For this purpose, 200 cultivated oysters were purchased from the municipality of Raposa and another 100 from Paço do Lumiar. Additionally, 100 oysters were extracted from the natural stock of the municipality of Primeira Cruz, thus making up a total of 400 oysters. They were grouped into 80 pools consisting of 5 oysters each. From each pool, the gills and visceral mass were removed to obtain 160 pools, 80 pools for the gill group and another 80 for the visceral mass group. Then, DNA was extracted from each pool using a commercial kit with modifications. Subsequently, the protozoan DNA was detected using nested polymerase chain reaction. With this technique, the DNA of the protozoan under investigation was detected in 2.5% (n = 2/80) of the pools containing gills, with 1.25% of the pools (n = 1/80) belonging to the cultivation group of oysters and the other 1.25% (n = 1/80) to the natural stock. With the results obtained in this study, it was concluded that the analyzed oysters of the genus Crassostrea, from cultivation and natural stock groups, found in the state of Maranhão, were contaminated by Cryptosporidium spp. and may become potential sources of infection in humans and other animals. In addition, the gills are the elective tissue for the study of Cryptosporidium spp. in oysters.

RESUMO: Objetivou-se com o estudo detectar Cryptosporidium sp. em ostras de cultivo e estoque natural no estado do Maranhão e determinar o(s) tecido(s) eletivo(s) para pesquisa desse protozoário. Para a realização do estudo foram adquiridas 200 ostras de cultivo do município de Raposa e 100 de Paço do Lumiar, além de 100 ostras extraídas de estoque natural do município de Primeira Cruz, totalizando 400 ostras. Estas foram agrupadas em 80 pools constituídos por cinco animais. De cada pool, as brânquias e a massa visceral foram removidas totalizando 160 pools, sendo 80 para o grupo das brânquias e 80 para o grupo de massa visceral. Na sequência, procedeu-se à extração de DNA de cada pool com a utilização de kit comercial com modificações. Posteriormente, realizou-se a detecção do DNA do protozoário por meio da técnica de Nested-PCR. Com a técnica utilizada, foi detectado o DNA do protozoário pesquisado em 2,5% (n=2/80) pools apenas de brânquias, sendo 1,25% pools (n=1/80) oriundos de cultivo e os outros 1,25% (n=1/80) de estoque natural. Com os resultados obtidos nesse estudo, conclui-se que as ostras analisadas do gênero Crassostrea sp., oriundas de cultivo e estoque natural no estado do Maranhão, estavam contaminadas por Cryptosporidium sp. e podem se reverter em fontes potenciais para seres humanos e outros animais. Para a pesquisa de Cryptosporidium sp. em ostras, as brânquias são o tecido eletivo.

Cryptosporidium sp. in cultivated oysters and the natural oyster stock of the state of Maranhão, Brazil / Detecção de Cryptosporidium sp. em ostras de cultivo e estoque natural no estado do Maranhão, Brasil

This study detected Cryptosporidium spp. in cultivated oysters and the natural oyster stock of the state of Maranhão and determine the elective tissue(s) to examine this protozoan. For this purpose, 200 cultivated oysters were purchased from the municipality of Raposa and another 100 from Paço do Lumiar. Additionally, 100 oysters were extracted from the natural stock of the municipality of Primeira Cruz, thus making up a total of 400 oysters. They were grouped into 80 pools consisting of 5 oysters each. From each pool, the gills and visceral mass were removed to obtain 160 pools, 80 pools for the gill group and another 80 for the visceral mass group. Then, DNA was extracted from each pool using a commercial kit with modifications. Subsequently, the protozoan DNA was detected using nested polymerase chain reaction. With this technique, the DNA of the protozoan under investigation was detected in 2.5% (n = 2/80) of the pools containing gills, with 1.25% of the pools (n = 1/80) belonging to the cultivation group of oysters and the other 1.25% (n = 1/80) to the natural stock. With the results obtained in this study, it was concluded that the analyzed oysters of the genus Crassostrea, from cultivation and natural stock groups, found in the state of Maranhão, were contaminated by Cryptosporidium spp. and may become potential sources of infection in humans and other animals. In addition, the gills are the elective tissue for the study of Cryptosporidium spp. in oysters.

Objetivou-se com o estudo detectar Cryptosporidium sp. em ostras de cultivo e estoque natural no estado do Maranhão e determinar o(s) tecido(s) eletivo(s) para pesquisa desse protozoário. Para a realização do estudo foram adquiridas 200 ostras de cultivo do município de Raposa e 100 de Paço do Lumiar, além de 100 ostras extraídas de estoque natural do município de Primeira Cruz, totalizando 400 ostras. Estas foram agrupadas em 80 pools constituídos por cinco animais. De cada pool, as brânquias e a massa visceral foram removidas totalizando 160 pools, sendo 80 para o grupo das brânquias e 80 para o grupo de massa visceral. Na sequência, procedeu-se à extração de DNA de cada pool com a utilização de kit comercial com modificações. Posteriormente, realizou-se a detecção do DNA do protozoário por meio da técnica de Nested-PCR. Com a técnica utilizada, foi detectado o DNA do protozoário pesquisado em 2,5% (n=2/80) pools apenas de brânquias, sendo 1,25% pools (n=1/80) oriundos de cultivo e os outros 1,25% (n=1/80) de estoque natural. Com os resultados obtidos nesse estudo, conclui-se que as ostras analisadas do gênero Crassostrea sp., oriundas de cultivo e estoque natural no estado do Maranhão, estavam contaminadas por Cryptosporidium sp. e podem se reverter em fontes potenciais para seres humanos e outros animais. Para a pesquisa de Cryptosporidium sp. em ostras, as brânquias são o tecido eletivo.

First molecular description of autochthonous urban cases of canine visceral leishmaniasis in the city of Belém, Pará, Brazil / Primeira descrição molecular de casos autóctones urbanos de leishmaniose visceral canina na cidade de Belém, Pará, Brasil

Leishmaniasis is an anthropozoonosis transmitted by vectors, with dogs being the main domestic reservoirs. Brazil is one of the countries most affected by this disease, and it has been described in humans and dogs in every region in the country. In the northern region leishmaniasis cases in humans have been described in more than 100 municipalities in the State, including the capital, Belém. This study involves two cases of canine visceral leishmaniasis in which the animals developed clinical signs compatible with the disease in urban areas in Belém, the Pará state capital. The diagnosis was confirmed via polymerase chain reaction (PCR) to detect SSUr-rDNA and kDNA of Leishmania sp. and Leishmania infantum, respectively. In one of the cases the animal died and in the other the animal underwent treatment with medicines prescribed for dogs. Through this treatment, parasitemia in the second animal has been kept under control and is being monitored through molecular tests. Previously, no canine cases had been notified from urban neighborhoods in the city of Belém, but only on the island of Cotijuba, at a distance of 29 kilometers from the city. Cases of canine and human leishmaniasis have been recorded close to the capital, Belém, which has areas of conserved vegetation and where the presence of disease vectors has been described. Thus, as has been done in several other Brazilian cities, this study uses clinical and laboratory findings to confirm the presence of autochthonous cases of canine visceral leishmaniasis in the city of Belém.

A leishmaniose é uma antropozoonose transmitida por vetores, sendo os cães os principais reservatórios domésticos. O Brasil é um dos países mais acometidos por esta doença, sendo descrita em humanos e cães em todas as regiões do país. Na região norte casos de leishmaniose em humanos foram descritos em mais de 100 municípios do Estado, incluindo a capital, Belém. Este estudo envolve dois casos de leishmaniose visceral canina em que os animais desenvolveram sinais clínicos compatíveis com a doença em áreas urbanas de Belém, capital do estado do Pará. O diagnóstico foi confirmado pela reação em cadeia da polimerase (PCR) para detectar o SSUr-rDNA e kDNA de Leishmania sp e Leishmania infantum, respectivamente. Em um dos casos o animal veio a óbito e no outro o animal foi submetido a tratamento com medicamentos prescritos para cães. Por meio desse tratamento, a parasitemia no segundo animal foi mantida sob controle e está sendo monitorada por meio de testes moleculares. Anteriormente, nenhum caso canino havia sido notificado em bairros urbanos da cidade de Belém, apenas na ilha de Cotijuba, distante 29 quilômetros da cidade. Casos de leishmaniose canina e humana foram registrados próximo à capital, Belém, que possui áreas de vegetação conservada e onde foi descrita a presença de vetores de doenças. Assim, como tem sido registrado em várias outras cidades brasileiras, este estudo utiliza achados clínicos e laboratoriais para confirmar a presença de casos autóctones de leishmaniose visceral canina na cidade de Belém.

Aeromonas from farmed tambaqui from North Brazil: molecular identification and pathogenic potential / Aeromonas de tambaqui de cultivo do norte do Brasil: identificação molecular e potencial patogênico

ABSTRACT: The aim of this study was to molecularly identify different species of Aeromonas isolated from farmed tambaqui (Colossoma macropomum) from North Brazil, and evaluate their pathogenic potential by the presence of virulence genes. From the extraction of bacterial DNA, PCR (polymerase chain reaction) of the primers 16S rDNA, aerA (cytolytic enterotoxin), ast (cytotoxic enterotoxin) and act (cytotoxic enterotoxin) were performed. Of 24 isolates evaluated, eight amplified the ast gene, one amplified the act gene, but the areA gene was not amplified in any isolate. Sequencing of the 16S rRNA primer revealed a predominance of Aeromonas jandaei specie (92%). Aeromonas taiwanensis (4%), for the first time isolated from fish in Brazil, and Aeromonas hydrophila (4%) each appeared as just one isolate. Results showed that 32% of Aeromonas isolated from farmed tambaqui have considerable pathogenic potential for systemic damage, since the selected PCR primers are encoding the most common virulence genes in Aeromonas with high pathogenic intensity.

RESUMO: O objetivo deste estudo foi identificar molecularmente diferentes espécies de Aeromonas isoladas de tambaqui (Colossoma macropomum) de cultivo do norte do Brasil e avaliar seu potencial patogênico pela presença de genes de virulência. A partir da extração do DNA bacteriano, foi realizada a PCR (reação em cadeia da polimerase) dos primers 16S rDNA, aerA (enterotoxina citolítica), ast (enterotoxina citotóxica) e act (enterotoxina citotóxica). Dos 24 isolados avaliados, oito amplificaram o gene ast, um amplificou o gene act, mas o gene areA não foi amplificado em nenhum isolado. O sequenciamento do primer 16S rRNA revelou uma predominância da espécie Aeromonas jandaei (92%). Aeromonas taiwanensis (4%), pela primeira vez isolada em peixes no Brasil, e Aeromonas hydrophila (4%) apareceram cada uma como apenas um isolado. Os resultados mostram que 32% das Aeromonas isoladas de tambaqui de cultivo apresentam considerável potencial patogênico para danos sistêmicos, uma vez que os primers de PCR selecionados estão codificando os genes de virulência mais comuns em Aeromonas com alta intensidade patogênica.

Aeromonas from farmed tambaqui from North Brazil: molecular identification and pathogenic potential / Aeromonas de tambaqui de cultivo do norte do Brasil: identificação molecular e potencial patogênico

The aim of this study was to molecularly identify different species of Aeromonas isolated from farmed tambaqui (Colossoma macropomum) from North Brazil, and evaluate their pathogenic potential by the presence of virulence genes. From the extraction of bacterial DNA, PCR (polymerase chain reaction) of the primers 16S rDNA, aerA (cytolytic enterotoxin), ast (cytotoxic enterotoxin) and act (cytotoxic enterotoxin) were performed. Of 24 isolates evaluated, eight amplified the ast gene, one amplified the act gene, but the areA gene was not amplified in any isolate. Sequencing of the 16S rRNA primer revealed a predominance of Aeromonas jandaei specie (92%). Aeromonas taiwanensis (4%), for the first time isolated from fish in Brazil, and Aeromonas hydrophila (4%) each appeared as just one isolate. Results showed that 32% of Aeromonas isolated from farmed tambaqui have considerable pathogenic potential for systemic damage, since the selected PCR primers are encoding the most common virulence genes in Aeromonas with high pathogenic intensity.

O objetivo deste estudo foi identificar molecularmente diferentes espécies de Aeromonas isoladas de tambaqui (Colossoma macropomum) de cultivo do norte do Brasil e avaliar seu potencial patogênico pela presença de genes de virulência. A partir da extração do DNA bacteriano, foi realizada a PCR (reação em cadeia da polimerase) dos primers 16S rDNA, aerA (enterotoxina citolítica), ast (enterotoxina citotóxica) e act (enterotoxina citotóxica). Dos 24 isolados avaliados, oito amplificaram o gene ast, um amplificou o gene act, mas o gene areA não foi amplificado em nenhum isolado. O sequenciamento do primer 16S rRNA revelou uma predominância da espécie Aeromonas jandaei (92%). Aeromonas taiwanensis (4%), pela primeira vez isolada em peixes no Brasil, e Aeromonas hydrophila (4%) apareceram cada uma como apenas um isolado. Os resultados mostram que 32% das Aeromonas isoladas de tambaqui de cultivo apresentam considerável potencial patogênico para danos sistêmicos, uma vez que os primers de PCR selecionados estão codificando os genes de virulência mais comuns em Aeromonas com alta intensidade patogênica.

Performance of the tetra-primer PCR technique compared to PCR-RFLP in the search for rs12979860 (C/T) and rs8099917 (T/G) single nucleotide polymorphisms (SNPs) in the IFNL4 gene / Desempenho da técnica tetra-primer PCR em relação a PCR-RFLP na pesquisa de polimorfismos de nucleotídeos únicos (SNPs) rs12979860 (C/T) e rs8099917 (T/G) no gene IFNL4

Single nucleotide polymorphisms (SNPs, rs12979860 e rs8099917) in the Interferon Lambda 4 gene (IFNL4, formerly IFNL3and/or IL28B) has been associated with failure in the innate immune response, sustained virological response in hepatitis C, and HTLV-1-associated myelopathy (HAM) development. To search for these polymorphisms several methodologies can be employed, such as sequencing, real-time or quantitative polymerase chain reaction (qPCR), restriction fragment length polymorphism analysis in PCR products (PCR-RFLP), and tetra-primer PCR. The present study compared the performance of the tetra-primer PCR in relation to the PCR-RFLP, both optimized in the Research HTLV Laboratory of the Center of Immunology of Instituto Adolfo Lutz in São Paulo. One hundred DNA samples obtained from patients of STD/Aids Reference Centre in São Paulo, previously analyzed for IL28B SNPs by PCR-RFLP were selected for analysis, after confirming that they represent all IL28B SNPs patterns described in the literature. The results obtained showed concordance between the PCR-RFLP and the tetra-primer PCR SNPs results, and because of the low cost, easy to perform, and minor employment of biological specimen and reagents, the tetra-primer PCR is of choice to be used in routine. (AU)

Polimorfismos de nucleotídeos únicos (single nucleotide polymorphisms, SNPs rs12979860 e rs8099917) no gene que codifica o Interferon Lambda 4 (IFNL4, antigamente IFNL3 e/ou IL28B) têm sido associados às falhas na resposta imune inata e resposta virológica sustentada na hepatite C, e a mielopatia associada ao HTLV-1 (HTLV-1-associated myelopathy, HAM). A pesquisa destes polimorfismos pode empregar diversas metodologias: sequenciamento, reação em cadeia da polimerase em tempo real ou quantitativa (quantitative polymerase chain reaction, qPCR), análise de fragmentos de restrição enzimática em produtos de PCR (restriction fragment length polymorphism in PCR products, PCR-RFLP) e a tetra-primer PCR. Este estudo comparou o desempenho da tetra-primer PCR em relação a PCR-RFLP, ambas otimizadas no Laboratório de Pesquisa em HTLV do Centro de Imunologia do Instituto Adolfo Lutz de São Paulo. Foram selecionadas 100 amostras de DNA obtidas de pacientes do Centro de Referência e Treinamento em DST/Aids de São Paulo cujos SNPs na IL28B foram anteriormente determinados por PCR-RFLP e representaram todos os perfis descritos em literatura. Os resultados obtidos mostraram concordância entre elas, e pelo fato da tetra-primer PCR ter menor custo, ser de fácil execução, empregar menos tempo, insumos e material biológico, é a técnica de escolha para uso em rotina. (AU)

Cell culture and variations in the comet assay do not affect the genomic integrity of adipose-derived stem cells

The application of quality control tests, such as the comet assay, are essential when adipose-derived stem cells are cultured for therapeutic purposes. However, the steps involved in the development of this assay should be investigated, in order to reduce their influence on genomic damage in cells. The study aimed to evaluate if the cell culture process causes DNA damage, and if variations in the lysis time and pH of the electrophoresis buffer interfere in the genotoxicity results. Four different comet assay protocols were evaluated, and the effects of lysis time and pH conditions of the electrophoresis buffer solution were stated as follows: 2 hours and pH 12; 24 hours and pH 12; 2 hours and pH ≥ 13 and 24 hours and pH ≥ 13. The tail moment was analyzed, and results indicated that at the time cells were detached from the flasks, there was little damage to the DNA in the adipose-derived stem cells, which was confirmed by evaluation of the expression of mRNA genes involved in damage and repair processes of genetic material. Also, the tail moment values ​​did not show significant differences among the four evaluated protocols (p < 0.05), with no indication of damage when compared to the positive control (p < 0.05). Thus, any of the tested protocols can be applied in genotoxicity tests with adipose-derived stem cells, without causing damage to them.(AU)

Investigation of the parasitoid Ixodiphagus hookeri (Hymenoptera: Encyrtidae) in Amblyomma sculptum (Acari: Ixodidae) ticks in the municipality of Salto, São Paulo, Brazil

The presence of capybaras (Hydrochoerus hydrochaeris) in urban and periurban areas has caused increased numbers of cases of Brazilian spotted fever. With the aim of investigating the presence of the parasitoid Ixodiphagus hookeri in Amblyomma sculptum ticks in the municipality of Salto, state of São Paulo, samples were collected monthly from 14 sites. Thirty samples were placed in containers for observation of the emergence of microhymenopterans and 88 samples were subjected to molecular testing to identify the presence of I. hookeri DNA. Neither dissections nor observation of emergence indicated any presence of I. hookeri larvae in ticks. Samples subjected to polymerase chain reaction (PCR) amplification of the mCOX I region of I. hookeri did not reveal its presence, although fragments corresponding to mRNA 16S of Amblyomma sculptum ticks were amplified in all samples tested.

Validation of a one-tube nested real-time PCR assay for the detection of Cryptosporidium spp. in avian fecal samples / Validação da nested PCR em tempo real em um tubo para detecção de Cryptosporidium spp. em amostras fecais de aves

Abstract The aim of this study was to validate a one-tube nested real-time PCR assay followed by genetic sequencing to detect and identify Cryptosporidium species and genotypes in birds. A total of 443 genomic DNA extracted from avian fecal samples were analyzed by one-tube nested real-time PCR and conventional nested PCR. By one-tube nested real-time PCR, 90/443 (20.3%) samples were positive for Cryptosporidium spp. In contrast, 36/443 (8.1%) samples were positive for Cryptosporidium spp. by conventional nested PCR. The analytical sensitivity test showed that one-tube nested real-time PCR detects approximately 0.5 oocyst (2 sporozoites) per reaction. An evaluation of analytical specificity did not reveal amplification of microorganisms that commonly present nonspecific amplification with primers used for the diagnosis of Cryptosporidium spp. The repeatability analysis showed the same result in 27 out of 30 samples (90%). As for the reproducibility of one-tube nested real-time PCR, 24 of the 30 samples examined (80%) showed the same result. All the 90 samples amplified by one-tube real-time nested PCR were successfully sequenced, leading to the identification of C. baileyi, C. galli, C. meleagridis, C. proventriculi, and Cryptosporidium avian genotype I. Genetic sequencing of conventional nested PCR amplicons was successful in 10/36 (27.8%) of positive samples.

Resumo O objetivo deste trabalho foi validar um protocolo de nested PCR em tempo real em um tubo (nPCR-TR-1T) seguida de sequenciamento genético para detectar e caracterizar as espécies e genótipos de Cryptosporidium em aves. Um total de 443 amostras de DNA genômico, extraído de amostras fecais de aves, foi analisado pela nPCR-TR-1T e pela nested PCR convencional. Pela nPCR-TR-1T, foi observada positividade para Cryptosporidium spp. de 20,3% (90/443), em contraste com a nested PCR convencional, que apresentou positividade de 8,1% (36/443). O teste de sensibilidade analítica mostrou que a nPCR-TR-1T detecta aproximadamente 0,5 oocisto (2 esporozoítos) por reação. A avaliação da especificidade analítica não revelou amplificação de microrganismos que comumente apresentam amplificação inespecífica com primers utilizados para o diagnóstico de Cryptosporidium spp. O cálculo da repetibilidade evidenciou o mesmo resultado em 27 de 30 amostras (90%). Em relação à reprodutibilidade da nPCR-TR-1T, foi observado o mesmo resultado em 80% (24/30) das amostras examinadas. Foi possível realizar o sequenciamento em todas as 90 amostras amplificadas pela nPCR-TR-1T, com identificação de C. baileyi, C. galli, C. meleagridis, C. proventriculi e Cryptosporidium genótipo I em aves. O sequenciamento dos fragmentos amplificados pela nested PCR convencional foi possível em 10/36 (27,8%) das amostras positivas.

Marek's disease in roosters in the Potiguar semi-arid region

Background: Marek's disease (MD) is a transmissible disease in chickens caused by Gallid alphaherpesvirus 2 (GaHV-2). The infection is characterized by lymphocyte cellular infiltrates in peripheral nerves and other organs and tissues, including the skin; which can lead to dysfunction causing progressive asymmetric paresis and complete spastic paralysis of body extremities. Dermatitis and cardiac myositis caused by GaHV-2 in free-range chickens has rarely been described in Brazil. This reports the occurrence of the disease with a confirmatory molecular diagnosis in free-range poultry showing signs of dermatitis, poor performance, and cachexia and no mortality in the semi-arid Potiguar region. Cases: Twenty roosters of the Shamo lineage, among a brood of 42 birds, had a history of progressive weight loss and skin lesions. Two birds with poor body condition, erythema, and scaling of the skin in the head and cervical regions were sent for clinical care. All birds were between 12 and 18 months of age and were vaccinated against Newcastle disease and Fowlpox with only a few receiving vaccines against MD and Gumboro disease. According to the owner's report, some birds were previously kept outdoors, and when they were transferred to a small shed with little air circulation, they began to develop clinical signs after approximately 15 days. The first signs of the disease were also reported to have appeared 2.5 months before clinical care and, in the meantime, several treatments were instituted without success. Owing to the general condition of the animals and inconclusive clinical suspicion, the birds were subjected to euthanasia and necropsy. Tissue samples were collected for histopathological and polymerase chain reaction analyses to search for the GaHV-2 DNA meq gene. The main clinicopathological findings were erythema (47%, 20/42) and desquamation of skin and mild, prominent white multifocal areas in the heart. Histopathology revealed infiltration of pleomorphic lymphoblastic cells in the skin, heart, and sciatic nerve. The amplification of the L-meq and meq oncoprotein genes in these organs and in the liver, confirmed the infection by GaHV-2, consistent with that of a field strain. Discussion: MD was confirmed based on the macroscopic and histological lesions, and with the detection of GaHV-2 DNA in the affected tissues. The unusual clinical presentation represented an initial challenge for diagnosis. The clinical history was important to lead to the suspicion of MD, as roosters initiated clinical signs 15 days after they were transferred to a small shed with poor air circulation. This probably favored the high viral concentration and disease transmission among susceptible birds in the brood because the feather follicle is the primary site of viral replication for transmission; and desquamation of infected epithelial cells favor airborne horizontal transmission to susceptible chickens. The roosters had not been vaccinated against MD, which probably favored the infection, as vaccination is known to be a fundamental approach for MD control for effective growth of the poultry industry. Clinical findings and lesions, together with viral molecular detection, were fundamental for the diagnosis, a premise for the application of adequate prevention and control measures for the disease in breeding. This is the first report of MD with a confirmatory molecular diagnosis in northeastern Brazil.

Presence of HPV in prostate tissue from patients submitted to prostate biopsy

Purpose: Prostate cancer (PCa) is the second most frequent cancer among men in the Western population. Infections, such as the one caused by the human papillomavirus (HPV), have been shown to promote inflammation that can lead to the appearance of neoplasms. This study aimed to verify the presence of HPV in neoplastic and non-neoplastic prostate tissue in patients undergoing prostate biopsy and its possible relationship with PCa. Methods: Prostate tissue fragments were collected by prostate biopsy and subjected to polymerase chain reaction with primers for the HPV L1 gene to identify the presence of the virus. Results: Among 162 patients, 10 (6.2%) had HPV and in 152 (93.8%) HPV was not identified in prostate biopsies. HPV was detected in 7/95 (7.4%) of patients with PCa, in 2/55 (3.6%) of patients without PCa, and in no patient with an inconclusive diagnosis of PCa. There was no significant difference (p = 0.487) of HPV presence in the tissue of patients with PCa. Conclusions: There were no significant levels of HPV L1 protein in prostate tissue. The findings suggest the absence of HPV oncogenic activity in the prostate tissue of patients with PCa.

Occurrence of ticks and tick-borne mixed parasitic microbiota in cross-bred cattle in District Lahore, Pakistan / Ocorrência de carrapatos e microbiota parasitária mista transmitida por carrapatos em bovinos mestiços no distrito de Lahore, Paquistão

The present study was focused on the incidence of ticks and tick-borne diseases (TTBD) in cross-bred cattle (Friesian x Sahiwal) of two farms (n = 2548) in district Lahore, Pakistan. We collected total of 572 ticks (adults and nymphs) and blood samples (10 ml) for microscopic i.e., blood smear test ­ Giemsa Stain (BST) and molecular analysis; Reverse Line Blot-General Primer-PCR (RLB-PCR) and Specie Specific Primer PCR (SP-PCR) from infested cattle (n = 100) from months of April to September. Results: The tick specie identified was Rhipicephalus microplus at both farms, with significant difference in infestations rate amongst both farms (p< 0.0001). The cross-bred cattle having higher ratio of Friesian blood and lower ratio of Sahiwal blood were mostly infested by ticks (p < 0.0458) and haemoparasites (p <0.474) and vice versa. The SP-PCR showed higher number of haemoparasites infection than BST, which revealed 16% T. annulata (p < 0.0001 and k value 0.485, 0.0001), 51% B. bigemina (p < 0.0001 and k value 0.485, 0.0001) and 15% A. marginale (p < 0.001 and k value 0.207, 0.001), respectively. The single infection with B. bigemina was 34% (n = 34/100) and A. marginale 6% (n = 6/100). The double infection with T. annulata/B. bigemina was 8% (n = 8/100) and B. bigemina/A. marginale 1% (n = 1/100). Whereas the triple infection with T. annulata/B. bigemina/A .marginale was 8% (n = 8/100). The phylogenetic study of isolated sequence of T. annulata revealed close homology to isolates from Iran (87%), B. bigemina to isolates from Cuba (94 to 100%) and A. marginale with isolates from Pakistan (99 to 98%).

O presente estudo foi enfocado na incidência de carrapatos e doenças transmitidas por carrapatos (TTBD) em bovinos mestiços (Friesian x Sahiwal) de duas fazendas (n = 2.548) no distrito de Lahore, Paquistão. Foram coletados 572 carrapatos (adultos e ninfas) e amostras de sangue (10 ml) para microscopia, ou seja, esfregaço sanguíneo ­ coloração de Giemsa (BST) e análise molecular; Reverse Line Blot-General Primer-PCR (RLB-PCR) e Specific Primer PCR (SP-PCR) ­, de bovinos infestados (n = 100) nos meses de abril a setembro. Resultados: A espécie de carrapato identificada em ambas as fazendas foi Rhipicephalus microplus, com diferença significativa na taxa de infestação nos dois locais (p < 0,0001). Os bovinos mestiços Friesian, com maior proporção de sangue, e Sahiwal, com menor proporção de sangue, foram principalmente infestados por carrapatos (p < 0,0458) e hemoparasitos (p < 0,474), e vice-versa. O SP-PCR mostrou maior número de infecção por hemoparasitos do que a BST, revelando 16% de Theileria annulata (p < 0,0001; k valor 0,485; 0,0001), 51% de Babesia bigemina (p < 0,0001; k valor 0,485; 0,0001) e 15% de Anaplasma marginale (p < 0,001; valor de k 0,207; 0,001). A infecção única com B. bigemina foi de 34% (n = 34/100), e com A. marginale, de 6% (n = 6/100). A dupla infecção com T. annulata/B. bigemina foi de 8% (n = 8/100), e com B. bigemina/A. marginale, de 1% (n = 1/100). Já a tripla infecção com T. annulata/B. bigemina/A. marginale foi de 8% (n = 8/100). O estudo filogenético da sequência isolada de T. annulata revelou estreita homologia com isolados do Irã (87%), de B. bigemina com isolados de Cuba (94 a 100%) e de A. marginale com isolados do Paquistão (98 a 99%).

Results of a sample-to-cutoff ratio using Abbott Architect rHTLV-I/II assay allow to predict detection of HTLV-1 and HTLV-2 proviral DNA by real-time PCR / Resultados da razão sinal da amostra sobre o cutoff da reação no ensaio Abbott Architect rHTLV-I/II permite prever a detecção de DNA proviral por PCR em tempo real

The present study aims to correlate the sample-to-cutoff ratios (S/CO) distributions of reactive results for HTLV-1/2 antibodies with the detection of proviral DNA in a population of blood donor candidates. It was carried out a retrospective data search of 632 HTLV-1/2 reactive samples, submitted to confirmatory testing from January 2015 to December 2019. Serological screening was performed by chemiluminescent microparticle immunoassay Architect rHTLV-I/II, whereas confirmatory testing was performed by in-house real-time polymerase chain reaction method. 496 out of 632 samples (78%) had undetectable HTLV-1/2 proviral DNA and 136 (22%) had detectable proviral DNA. HTLV infection was not confirmed in any individual for whom the S/CO ratio value was <4, and proviral DNA detection rates gradually escalated as S/CO ratio values increased. The sensitivity and predictive positive value found for the Architect rHTLV-I/II was 100% and 22%, respectively. The receiver operating characteristic (ROC) curve analysis showed that the optimal S/CO ratio value for predicting the presence of HTLV-1/2 was 18.11. High S/CO ratios were more associated with the detection of proviral DNA. The S/CO ratio value <4 suggests excluding true HTLV infection and the risk of blood transmission (AU).

O estudo tem como objetivo correlacionar às distribuições das razões sample-to-cutoff (S/CO) de resultados reagentes para anticorpos HTLV-1/2 com a detecção de DNA proviral em uma população de candidatos à doação de sangue. Realizou-se uma busca retrospectiva de dados de 632 amostras reagentes para HTLV-1/2 submetidas à testagem confirmatória entre janeiro de 2015 a dezembro de 2019. A triagem sorológica foi realizada pelo imunoensaio quimioluminescente de micropartículas Architect rHTLV-I/II, enquanto o teste confirmatório foi realizado pelo método de PCR em tempo real in-house. 496 de 632 amostras (78%) apresentaram DNA proviral indetectável e 136 (22%) apresentaram DNA proviral detectável. A infecção por HTLV não foi confirmada em nenhum indivíduo com valor de S/CO <4 e as taxas de detecção de DNA proviral escalonaram gradualmente à medida que as razões S/CO aumentaram. A sensibilidade e valor preditivo positivo encontrados para o Architect rHTLV-I/II foram 100% e 22%, respectivamente. Utilizando análise de curva ROC, o valor de razão S/CO ideal para predizer a presença de DNA proviral foi de 18,11. Razões S/CO elevadas foram mais associadas à detecção de DNA proviral. Em suma, o valor de S/CO <4 sugere a exclusão de infecção por HTLV e o risco de transmissão pelo sangue (AU).

Occurrence of tick-borne diseases in domestic dogs in Belém, Pará, Brazil / Ocorrência de doenças transmitidas por carrapatos em cães domésticos em Belém do Pará, Brasil

Tick-borne blood cell pathogens, which are challenging to diagnose, are primarily detected using molecular techniques. Therefore, this study aimed to detect the main infectious agents involved in 50 cases of suspected hemoparasitosis in dogs treated at the Veterinary Hospital Mário Dias Teixeira of the Federal Rural University of the Amazon. Hematological parameters were evaluated, and blood samples were subjected to polymerase chain reaction (PCR) assays for DNA amplification of the following species: Ehrlichia canis, Anaplasma platys, and Babesia canis. The PCR test results indicated that the most prevalent infectious agent was E. canis, present in 12% (6/50) infected animals, followed by A. platys and B. canis, present in 8% (4/50) and 2% (1/50) infected animals, respectively. Regarding hematological analysis, the most relevant changes were anemia, lymphopenia, thrombocytopenia, leukocytosis, and leukopenia. The availability of molecular techniques allows the management of the most appropriate treatment to infected animals in a rapid and specific way.

Patógenos de células sanguíneas transmitidos por carrapatos, cujo diagnóstico é desafiador, são detectados princi-palmente por meio de técnicas moleculares. Dessa forma, este estudo teve como objetivo detectar os principais agentes infec-ciosos envolvidos em 50 casos de suspeita de hemoparasitose em cães atendidos no Hospital Veterinário Mário Dias Teixeira da Universidade Federal Rural da Amazônia. Parâmetros hematológicos foram avaliados e amostras de sangue foram subme-tidas a ensaios de reação em cadeia da polimerase (PCR) para amplificação de DNA das seguintes espécies: Ehrlichia canis, Anaplasma platys e Babesia canis. Os resultados do teste de PCR indicaram que o agente infeccioso mais prevalente foi E. canis, presente em 12% (6/50) dos animais infectados, seguido por A. platys e B. canis, presente em 8% (4/50) e 2% (1/50) animais infectados, respectivamente. Em relação à análise hematológica, as alterações mais relevantes foram anemia, linfopenia, trom-bocitopenia, leucocitose e leucopenia. A disponibilidade de técnicas moleculares permite o manejo do tratamento mais ade-quado aos animais infectados de forma rápida e específica.

Occurrence of tick-borne diseases in domestic dogs in Belém, Pará, Brazil / Ocorrência de doenças transmitidas por carrapatos em cães domésticos em Belém do Pará, Brasil

Tick-borne blood cell pathogens, which are challenging to diagnose, are primarily detected using molecular techniques. Therefore, this study aimed to detect the main infectious agents involved in 50 cases of suspected hemoparasitosis in dogs treated at the Veterinary Hospital Mário Dias Teixeira of the Federal Rural University of the Amazon. Hematological parameters were evaluated, and blood samples were subjected to polymerase chain reaction (PCR) assays for DNA amplification of the following species: Ehrlichia canis, Anaplasma platys, and Babesia canis. The PCR test results indicated that the most prevalent infectious agent was E. canis, present in 12% (6/50) infected animals, followed by A. platys and B. canis, present in 8% (4/50) and 2% (1/50) infected animals, respectively. Regarding hematological analysis, the most relevant changes were anemia, lymphopenia, thrombocytopenia, leukocytosis, and leukopenia. The availability of molecular techniques allows the management of the most appropriate treatment to infected animals in a rapid and specific way.(AU)

Patógenos de células sanguíneas transmitidos por carrapatos, cujo diagnóstico é desafiador, são detectados princi-palmente por meio de técnicas moleculares. Dessa forma, este estudo teve como objetivo detectar os principais agentes infec-ciosos envolvidos em 50 casos de suspeita de hemoparasitose em cães atendidos no Hospital Veterinário Mário Dias Teixeira da Universidade Federal Rural da Amazônia. Parâmetros hematológicos foram avaliados e amostras de sangue foram subme-tidas a ensaios de reação em cadeia da polimerase (PCR) para amplificação de DNA das seguintes espécies: Ehrlichia canis, Anaplasma platys e Babesia canis. Os resultados do teste de PCR indicaram que o agente infeccioso mais prevalente foi E. canis, presente em 12% (6/50) dos animais infectados, seguido por A. platys e B. canis, presente em 8% (4/50) e 2% (1/50) animais infectados, respectivamente. Em relação à análise hematológica, as alterações mais relevantes foram anemia, linfopenia, trom-bocitopenia, leucocitose e leucopenia. A disponibilidade de técnicas moleculares permite o manejo do tratamento mais ade-quado aos animais infectados de forma rápida e específica.(AU)

Occurrence of Lawsonia intracellularis in horses raised in three regions of the state of Paraná, Brazil / Ocorrência de Lawsonia intracellularis em equinos criados em três regiões do estado do Paraná, Brasil

Lawsonia intracellularis is a bacterium already described in several species and most prevalent in pigs, in which it causes enteric problems. Horses can also be affected, developing a disease known as equine proliferative enteropathy, which results from the proliferation of intestinal crypt cells in response to infection by the bacterium. Despite the existence of reports of the disease in several countries, including Brazil, there are still no reports of the disease or epidemiological studies of its occurrence in symptomatic or asymptomatic horses in the state of Paraná. Thus, the present study was conducted to examine the occurrence of L. intracellularis in asymptomatic horses raised in the west, northwest and north regions of Paraná by means of serological testing and the real-time polymerase chain reaction (qPCR) technique. In the serological approach, the immunoperoxidase monolayer assay (IPMA) technique was employed. Feces were processed and subjected to qPCR. In total, samples were collected from 162 animals from 20 farms. Of these, 9/162 (5.55%) showed specific antibodies against L. intracellularis. Real-time PCR, on the other hand, identified 7/162 (4.32%) fecal samples positive for the presence of the bacterium. When the techniques were compared, none of the samples was positive by both, demonstrating that, for a better diagnosis, they must be performed together. In contrast to most reports in horses, the present studyde scribes higher serological and molecular occurrence in animals older than two years. These results are of great epidemiological relevance, as they indicate that the bacterium is present in the sampled regions of the state of Paraná. Therefore, the disease must be included in the differential diagnosis of diseases with similar clinical manifestations.

Lawsonia intracellularis é uma bactéria já descrita em várias espécies, sendo mais comum em suínos, ocasionando problemas entéricos nesses animais. Dentre estes, equinos podem ser acometidos, levando à uma doença conhecida como Enteropatia Proliferativa Equina que é decorrente da proliferação das células da cripta intestinal em reação à infecção pela bactéria. Apesar de existirem relatos da doença em diversos países, inclusive no Brasil, no estado do Paraná ainda não se tem relatos da doença e estudos epidemiológicos da ocorrência em equinos sintomáticos ou assintomáticos. O objetivo do presente estudo foi avaliar a ocorrência de L. intracellularis em equinos assintomáticos criados nas regiões Oeste, Noroeste e Norte do estado do Paraná através de sorologia e qPCR. Para a sorologia, utilizou-se a técnica da Imunoperoxidase em Monocamadas (IPMA). As fezes foram processadas e submetidas à técnica de Reação em Cadeia pela Polimerase em Tempo Real (qPCR). Ao todo, foram coletadas amostras de 162 animais de 20 propriedades. Destas, 9/162 (5,55%) apresentaram anticorpos específicos contra L. intracellularis. Já a qPCR, identificou 7/162 (4,32%) amostras de fezes positivas para a presença da bactéria. Ao se comparar as técnicas, nenhuma amostra foi positiva em ambas, demonstrando que, para um melhor diagnóstico, as mesmas devem ser realizadas em conjunto. Em contraste à grande parte dos relatos em equinos, o presente estudo encontrou uma maior ocorrência sorológica e molecular em animais com mais de dois anos de idade. Esses resultados são de grande relevância epidemiológica, pois indicam que a bactéria está presente nas regiões amostradas do estado do Paraná, levando à necessidade de incluir a doença no diagnóstico diferencial de enfermidades que cursam com manifestações clínicas semelhantes.

Prevalence of autosomal dominant polycystic kidney disease in Persian and Persian-related cats in Brazil / Prevalência da doença renal policística autossômica dominante em gatos Persas e raças relacionadas no Brasil

Autosomal dominant polycystic kidney disease (ADPKD) is the most common genetic disease in cats. However, scarce data on its prevalence are available in Brazil. Persian cats and Persian-related breeds were assessed by molecular genotyping for a C to A transversion in exon 29 of PKD1 gene to determine ADPKD prevalence in a Brazilian population. Genomic DNA extracted from peripheral whole blood or oral swabs samples was used to amplify exon 29 of PKD1 gene employing a PCR-RFLP methodology. From a total of 616 animals, 27/537 Persian and 1/17 Himalayan cats showed the single-nucleotide variant (C to A) at position 3284 in exon 29 of feline PKD1. This pathogenic variation has been identified only in heterozygous state. The prevalence of ADPKD in Persian cats and Persian-related breeds was 5.03% and 1.6%, respectively. There was no significant association between feline breed, gender or age with ADPKD prevalence. Of note, the observed ADPKD prevalence in Persian cats and Persian-related breeds in Brazil was lower than the ones reported in other parts of the world. This finding may be related to genetic counseling and consequent selection of ADPKD-free cats for reproduction.

A doença renal policística autossômica dominante (DRPAD) é a doença genética mais comum em gatos. No entanto, poucos dados sobre sua prevalência estão disponíveis no Brasil. Gatos Persas e de raças relacionadas foram avaliados por genotipagem molecular para a transversão C→A no exon 29 do gene PKD1 felino para determinar a prevalência de DRPAD. DNA genômico extraído de sangue total periférico ou amostras de swabs orais foram utilizados para amplificar o exon 29 do gene PKD1 pela técnica de PCR-RFLP. De um total de 616 gatos, 27/537 Persas e 1/17 Himalaia mostraram a variante de nucleotídeo único (C→A) na posição 3284 no exon 29 do gene PKD1. Esta variante patogênica foi identificada apenas em heterozigose. A prevalência de DRPAD em gatos Persas e raças relacionadas foram de 5,03% e 1,6%, respectivamente. Não houve associações significativas entre raça, gênero ou idade dos felinos e incidência de DRPAD. A prevalência de DRPAD em gatos Persas e raças relacionadas no Brasil foi menor do que em outras partes do mundo, o que pode estar relacionado ao aconselhamento genético e consequente seleção de gatos sem ADPKD para reprodução.

Prevalence of autosomal dominant polycystic kidney disease in Persian and Persian-related cats in Brazil / Prevalência da doença renal policística autossômica dominante em gatos Persas e raças relacionadas no Brasil

Autosomal dominant polycystic kidney disease (ADPKD) is the most common genetic disease in cats. However, scarce data on its prevalence are available in Brazil. Persian cats and Persian-related breeds were assessed by molecular genotyping for a C to A transversion in exon 29 of PKD1 gene to determine ADPKD prevalence in a Brazilian population. Genomic DNA extracted from peripheral whole blood or oral swabs samples was used to amplify exon 29 of PKD1 gene employing a PCR-RFLP methodology. From a total of 616 animals, 27/537 Persian and 1/17 Himalayan cats showed the single-nucleotide variant (C to A) at position 3284 in exon 29 of feline PKD1. This pathogenic variation has been identified only in heterozygous state. The prevalence of ADPKD in Persian cats and Persian-related breeds was 5.03% and 1.6%, respectively. There was no significant association between feline breed, gender or age with ADPKD prevalence. Of note, the observed ADPKD prevalence in Persian cats and Persian-related breeds in Brazil was lower than the ones reported in other parts of the world. This finding may be related to genetic counseling and consequent selection of ADPKD-free cats for reproduction.(AU)

A doença renal policística autossômica dominante (DRPAD) é a doença genética mais comum em gatos. No entanto, poucos dados sobre sua prevalência estão disponíveis no Brasil. Gatos Persas e de raças relacionadas foram avaliados por genotipagem molecular para a transversão CA no exon 29 do gene PKD1 felino para determinar a prevalência de DRPAD. DNA genômico extraído de sangue total periférico ou amostras de swabs orais foram utilizados para amplificar o exon 29 do gene PKD1 pela técnica de PCR-RFLP. De um total de 616 gatos, 27/537 Persas e 1/17 Himalaia mostraram a variante de nucleotídeo único (CA) na posição 3284 no exon 29 do gene PKD1. Esta variante patogênica foi identificada apenas em heterozigose. A prevalência de DRPAD em gatos Persas e raças relacionadas foram de 5,03% e 1,6%, respectivamente. Não houve associações significativas entre raça, gênero ou idade dos felinos e incidência de DRPAD. A prevalência de DRPAD em gatos Persas e raças relacionadas no Brasil foi menor do que em outras partes do mundo, o que pode estar relacionado ao aconselhamento genético e consequente seleção de gatos sem ADPKD para reprodução.(AU)

Occurrence of Lawsonia intracellularis in horses raised in three regions of the state of Paraná, Brazil / Ocorrência de Lawsonia intracellularis em equinos criados em três regiões do estado do Paraná, Brasil

Lawsonia intracellularis is a bacterium already described in several species and most prevalent in pigs, in which it causes enteric problems. Horses can also be affected, developing a disease known as equine proliferative enteropathy, which results from the proliferation of intestinal crypt cells in response to infection by the bacterium. Despite the existence of reports of the disease in several countries, including Brazil, there are still no reports of the disease or epidemiological studies of its occurrence in symptomatic or asymptomatic horses in the state of Paraná. Thus, the present study was conducted to examine the occurrence of L. intracellularis in asymptomatic horses raised in the west, northwest and north regions of Paraná by means of serological testing and the real-time polymerase chain reaction (qPCR) technique. In the serological approach, the immunoperoxidase monolayer assay (IPMA) technique was employed. Feces were processed and subjected to qPCR. In total, samples were collected from 162 animals from 20 farms. Of these, 9/162 (5.55%) showed specific antibodies against L. intracellularis. Real-time PCR, on the other hand, identified 7/162 (4.32%) fecal samples positive for the presence of the bacterium. When the techniques were compared, none of the samples was positive by both, demonstrating that, for a better diagnosis, they must be performed together. In contrast to most reports in horses, the present studyde scribes higher serological and molecular occurrence in animals older than two years. These results are of great epidemiological relevance, as they indicate that the bacterium is present in the sampled regions of the state of Paraná. Therefore, the disease must be included in the differential diagnosis of diseases with similar clinical manifestations.(AU)

Lawsonia intracellularis é uma bactéria já descrita em várias espécies, sendo mais comum em suínos, ocasionando problemas entéricos nesses animais. Dentre estes, equinos podem ser acometidos, levando à uma doença conhecida como Enteropatia Proliferativa Equina que é decorrente da proliferação das células da cripta intestinal em reação à infecção pela bactéria. Apesar de existirem relatos da doença em diversos países, inclusive no Brasil, no estado do Paraná ainda não se tem relatos da doença e estudos epidemiológicos da ocorrência em equinos sintomáticos ou assintomáticos. O objetivo do presente estudo foi avaliar a ocorrência de L. intracellularis em equinos assintomáticos criados nas regiões Oeste, Noroeste e Norte do estado do Paraná através de sorologia e qPCR. Para a sorologia, utilizou-se a técnica da Imunoperoxidase em Monocamadas (IPMA). As fezes foram processadas e submetidas à técnica de Reação em Cadeia pela Polimerase em Tempo Real (qPCR). Ao todo, foram coletadas amostras de 162 animais de 20 propriedades. Destas, 9/162 (5,55%) apresentaram anticorpos específicos contra L. intracellularis. Já a qPCR, identificou 7/162 (4,32%) amostras de fezes positivas para a presença da bactéria. Ao se comparar as técnicas, nenhuma amostra foi positiva em ambas, demonstrando que, para um melhor diagnóstico, as mesmas devem ser realizadas em conjunto. Em contraste à grande parte dos relatos em equinos, o presente estudo encontrou uma maior ocorrência sorológica e molecular em animais com mais de dois anos de idade. Esses resultados são de grande relevância epidemiológica, pois indicam que a bactéria está presente nas regiões amostradas do estado do Paraná, levando à necessidade de incluir a doença no diagnóstico diferencial de enfermidades que cursam com manifestações clínicas semelhantes.(AU)

Molecular Evidence of Rickettsia felis in Phereoeca sp / Evidência Molecular de Rickettsia felis em Phereoeca sp

Rickettsia felis is an obligate intracellular bacterium capable of infecting ticks, fleas, lice, and other arthropods. This bacterium is classified as a member of the Transitional Group (TRG) Rickettsia. It is known the evidence of R. felis mutualistic and obligatory relationship with some eukaryote organisms. However, there arent scientific accounts of R. felis and moths of the order Lepidoptera association. The current work reports the first identification of the bacteria R. felis in Phereoeca sp. For that, a polymerase chain reaction (PCR) assay using gltA, ompA, and ompB genes was used. The nucleotide sequences showed 100% of identity with other Rickettsia felis sequences. The genus-level identification of the moth larvae was performed by morphological taxonomic keys and PCR analysis of the cytochrome oxidase I (COI) gene. The nucleotide sequenced showed 94.94% similarity with the species Phereoeca praecox. However, with the low number of sequences deposited in the databases, the species was classified as Phereoeca sp. The results suggest that R. felis may develop in an organism without blood-feeding behavior (Lepidoptera), as it has been demonstrated for booklice (Psocoptera). Further investigation is necessary in order to confirm pathogenic or mutualistic association with moths.(AU)

Rickettsia felis é uma bactéria intracelular obrigatória capaz de infectar carrapatos, pulgas, piolhos e outros artrópodes. Essa bactéria é classificada como um membro do Grupo de Transição (TRG). Há evidência de que R. felis está relacionada a alguns organismos eucariotos em um relacionamento mutualístico e obrigatório. No entanto, nenhum relato científico mostra alguma relação entre R. felis e traças da ordem Lepidoptera. O presente trabalho relata a primeira identificação da bactéria R. felis em Phereoeca sp. Para isso, empregou-se um ensaio de reação em cadeia da polimerase (PCR) utilizando-se os genes gltA, ompA e ompB. As sequências nucleotídicas mostraram 100% de identidade com outras sequências de Rickettsia felis. Utilizando-se chaves taxonômicas morfológicas e análise por PCR do gene da citocromo oxidase I (COI) foi feita a identificação em nível de espécie da forma jovem das traças. O nucleotídeo sequenciado mostrou 94,94% de similaridade com a espécie Phereoeca praecox. Entretanto, com o baixo número de sequências depositadas nos bancos de dados, a espécie foi classificada como Phereoeca sp. Os resultados sugerem que R. felis pode se desenvolver em um organismo sem alimentação de sangue (Lepidoptera), assim como tem sido demonstrado para a espécie Liposcelis bostrychophila (Psocoptera). Mais investigações são necessárias para confirmar uma possível associação patogênica ou mutualística com traças.(AU)