Manual collapse of blastocoels in not effective in increasing the viability of vitrified equine embryos / Colabamento manual da blastocele não foi efetivo para aumentar a viabilidade de embriões equinos vitrificados

Embryo cryopreservation methods have been used for commercialization and formation of genetic banks. Cryopreservation of equine embryos <300 µm in diameter, collected at days 6-6.5 after ovulation, allows satisfactory pregnancy rates. However, higher embryo collection rates in mares are obtained when uterine flush is performed between days 7 and 8 after ovulation when embryos are >300 µm in diameter, needing blastocoel collapse for satisfactory resistance to cryopreservation by vitrification. To evaluate the viability of simplified blastocoel collapse by embryo puncture with low technology and low-cost equipment, 22 embryos, collected at day 8 post-ovulation (D8), were allocated to the following groups: (1) micropuncture with a 30 G needle, assisted by a mechanical micromanipulator, before vitrification (n=4); (2) manual blade microsection before vitrification (n=6); (3) no manipulation prior to vitrification (n=8); and (4) freshly inovulated embryos (n=4). Despite the high re-expansion rates observed after vitrification, embryos manipulated prior to vitrification (groups MP and MS) did not result in pregnancy 25 days after transfer. On the other hand, embryos from groups NM (non-micromanipulated) and FR (freshly inovulated) resulted in pregnancies at 25 days. Under the conditions of the present study, manual blastocoel collapse was not efficient in increasing cryotolerance to vitrification among large embryos, requiring improvements to obtain pregnancies.(AU)

Métodos de criopreservação de embriões têm sido utilizados com diversos objetivos. Maiores taxas de coleta embrio-nária em éguas com lavagem uterina realizada 7 a 8 dias pós ovulação. A criopreservação de embriões equinos com diâmetro <300 µm (6-6,5 dias após a ovulação) permite a obtenção de taxas de prenhez satisfatórias. Embriões com diâmetro >300 µm (7º dia pós-ovulação) somente são adequadamente criopreservados quando submetidos a colabamento da blastocele. Objetivando avaliar a viabilidade da punção da blastocele com equipamento de baixa sofisticação e custo, 22 embriões coletados no 8º. dia pós-ovulação (D8) foram alocados aos seguintes grupos: (1) micropunção com uma agulha 30 G assistida por micromanipula-dor antes da vitrificação (n=4); (2) microssecção manual por lâmina antes da vitrificação (n=6); (3) sem manipulação anterior à vitrificação (n=8); e (4) transferidos a fresco (n=4). Apesar de altas taxas de reexpansão após a criopreservação, os embriões manipulados previamente a vitrificação não resultaram em prenhez aos 25 dias. Tanto os embriões não micromanipulados, quanto os transferidos a fresco resultaram em prenhezes aos 25 dias. A microssecção manual não se mostrou eficiente como método para aumento da criotolerância de embriões grandes, necessitando um aprimoramento visando a obtenção de prenhezes.(AU)

Cultivo in vitro de folículos pré-antrais bovinos: revisão, desafios, conquistas e perspectivas futuras / In vitro culture of bovine preantral follicles: review, challenges, achievements and future perspectives

A reprodução animal incide diretamente na eficiência e rentabilidade econômica de um rebanho, sendo considerada um dos fatores de maior importância para os sistemas de produção. Consequentemente, o desenvolvimento e a utilização de biotecnologia são indispensáveis para o aumento da eficiência reprodutiva, do melhoramento genético, da produção de alimentos e geração de riquezas. Nas últimas décadas várias foram as biotécnicas associadas à reprodução animal que apresentaram um grande potencial para a geração de genética, especialmente, ao que se referem aos avanços da reprodução assistida. Estes progressos possibilitaram a utilização de folículos pré-antrais como fonte de oócitos para biotecnologias reprodutivas. Deste modo, a técnica de cultivo in vitro proporciona a retomada do desenvolvimento dos folículos presente na reserva ovariana pela ativação in vitro forçada simulando a ocorrência de distúrbios na foliculogênesse. Até então, apenas a especie murina obteve descendentes vivos através dos folículos primordiais cultivados in vitro. Infelizmente, não há relatos de sucesso em outras espécies, tornando o desenvolvimento de sistemas ideias de cultivo in vitro um desafio. Portanto, o objetivo desta revisão é descrever e discutir os principais avanços da situação atual da pesquisa com folículos pré-antrais inclusos em folículos ovarianos.(AU)

Animal reproduction directly affects the efficiency and economic profitability of a herd, being considered one of the most important factors for production systems. Consequently, the development and use of biotechnology are indispensable for increasing reproductive efficiency, genetic improvement, food production and wealth generation. In the last few decades, biotechnologies associated with animal reproduction have shown great potential for the generation of genetics, especially with regard to advances in assisted reproduction. These advances have enabled the use of pre-antral follicles as a source of oocytes for reproductive biotechnologies. Thus, the in vitro culture technique provides the resumption of the development of follicles present in the ovarian reserve by forced in vitro activation, simulating the occurrence of disturbances in folliculogenesis. Until then, only the murine species obtained living descendants through primordial follicles cultivated in vitro. Unfortunately, there are no reports of success in other species, making the development of ideal in vitro culture systems a challenge.Therefore, the purpose of this review is to describe and discuss the main advances in the current research situation with preantral follicles included in ovarian follicles.(AU)

Cultivo in vitro de folículos pré-antrais bovinos: revisão, desafios, conquistas e perspectivas futuras / In vitro culture of bovine preantral follicles: review, challenges, achievements and future perspectives

A reprodução animal incide diretamente na eficiência e rentabilidade econômica de um rebanho, sendo considerada um dos fatores de maior importância para os sistemas de produção. Consequentemente, o desenvolvimento e a utilização de biotecnologia são indispensáveis para o aumento da eficiência reprodutiva, do melhoramento genético, da produção de alimentos e geração de riquezas. Nas últimas décadas várias foram as biotécnicas associadas à reprodução animal que apresentaram um grande potencial para a geração de genética, especialmente, ao que se referem aos avanços da reprodução assistida. Estes progressos possibilitaram a utilização de folículos pré-antrais como fonte de oócitos para biotecnologias reprodutivas. Deste modo, a técnica de cultivo in vitro proporciona a retomada do desenvolvimento dos folículos presente na reserva ovariana pela ativação in vitro forçada simulando a ocorrência de distúrbios na foliculogênesse. Até então, apenas a especie murina obteve descendentes vivos através dos folículos primordiais cultivados in vitro. Infelizmente, não há relatos de sucesso em outras espécies, tornando o desenvolvimento de sistemas ideias de cultivo in vitro um desafio. Portanto, o objetivo desta revisão é descrever e discutir os principais avanços da situação atual da pesquisa com folículos pré-antrais inclusos em folículos ovarianos.

Animal reproduction directly affects the efficiency and economic profitability of a herd, being considered one of the most important factors for production systems. Consequently, the development and use of biotechnology are indispensable for increasing reproductive efficiency, genetic improvement, food production and wealth generation. In the last few decades, biotechnologies associated with animal reproduction have shown great potential for the generation of genetics, especially with regard to advances in assisted reproduction. These advances have enabled the use of pre-antral follicles as a source of oocytes for reproductive biotechnologies. Thus, the in vitro culture technique provides the resumption of the development of follicles present in the ovarian reserve by forced in vitro activation, simulating the occurrence of disturbances in folliculogenesis. Until then, only the murine species obtained living descendants through primordial follicles cultivated in vitro. Unfortunately, there are no reports of success in other species, making the development of ideal in vitro culture systems a challenge.Therefore, the purpose of this review is to describe and discuss the main advances in the current research situation with preantral follicles included in ovarian follicles.

Criopreservação de sêmen em onças pintadas de cativeiro / Semen cryopreservation in captive jaguars

A onça-pintada é um dos principais animais da fauna brasileira e dentre todos os felinos, a onça-pintada (Panthera onca) somente é menor que o leão (Panthera leo) e o tigre (Panthera tigris), logo sendo classificada como o maior felino de todo o continente americano. Apesar de todo o reconhecimento e importância, a espécie vem sofrendo significativa redução no número de indivíduos. Já há bastante tempo essa espécie vem mantendo seu status de conservação como espécie vulnerável, segundo o Ministério do Meio Ambiente, e próximo de ameaçada, segundo classificação da Lista Vermelha da IUCN. As principais causas que levam à diminuição da população desta espécie estão ligadas à redução no número de suas presas naturais como cervos, queixadas e catetos, e principalmente devido à expansão de áreas urbanas, destruição dos habitats naturais, atropelamentos em rodovias e caça ilegal. Tais fatores capazes de reduzir a população desses animais vem se agravando constantemente devido principalmente as políticas públicas ineficazes para a proteção de espécies ameaçadas. Na contramão desta situação, pesquisadores trabalham visando o desenvolvimento de estratégias com o intuito de proteger a espécie. A estratégia de conservação de maior destaque e de resultado mais rápido a curto prazo são as biotécnicas reprodutivas, uma vez que tais técnicas são capazes de aumentar o número de indivíduos em um curto espaço de tempo. Nas biotécnicas reprodutivas, destaca-se a criopreservação (congelamento) de sêmen, técnica na qual se permite armazenar amostras sob temperaturas extremamente negativas, por um longo período de tempo e também deslocar o material para quaisquer localidades.

The jaguar is one of the main important animals of the Brazilian fauna and among all felines, the jaguar (Panthera onca) is only smaller than the lion (Panthera leo) and the tiger (Panthera tigris), soon being classified as the largest cat from all over the American continent. Despite all the recognition and importance, the species has undergone a significant reduction in the number of individuals. This species has been maintaining its conservation status as a vulnerable species for a long time, according to the Brazilian Ministry of the Environment, and close to threatened, according to the classification of the IUCN Red List. The main causes that lead to a decrease in the population of this species are related to the reduction in the number of natural prey such as deer, peccary and collared peccary, and mainly due to the expansion of urban areas, destruction of natural habitats, being hit by roads and illegal hunting. Such factors capable of reducing the population of these animals have been constantly worsening due mainly to ineffective public policies for the protection of endangered species. Against this background, researchers are working to develop strategies to protect the species. The conservation strategy of greater prominence and of quicker result in the short term is the reproductive biotechniques, since such techniques are able to increase the number of individuals in a short period of time. In reproductive biotechniques, semen cryopreservation (freezing) stands out, a technique in which samples can be stored under extremely negative temperatures for a long period of time and the material can also be moved to any location.

Criopreservação de sêmen em onças pintadas de cativeiro / Semen cryopreservation in captive jaguars

A onça-pintada é um dos principais animais da fauna brasileira e dentre todos os felinos, a onça-pintada (Panthera onca) somente é menor que o leão (Panthera leo) e o tigre (Panthera tigris), logo sendo classificada como o maior felino de todo o continente americano. Apesar de todo o reconhecimento e importância, a espécie vem sofrendo significativa redução no número de indivíduos. Já há bastante tempo essa espécie vem mantendo seu status de conservação como espécie vulnerável, segundo o Ministério do Meio Ambiente, e próximo de ameaçada, segundo classificação da Lista Vermelha da IUCN. As principais causas que levam à diminuição da população desta espécie estão ligadas à redução no número de suas presas naturais como cervos, queixadas e catetos, e principalmente devido à expansão de áreas urbanas, destruição dos habitats naturais, atropelamentos em rodovias e caça ilegal. Tais fatores capazes de reduzir a população desses animais vem se agravando constantemente devido principalmente as políticas públicas ineficazes para a proteção de espécies ameaçadas. Na contramão desta situação, pesquisadores trabalham visando o desenvolvimento de estratégias com o intuito de proteger a espécie. A estratégia de conservação de maior destaque e de resultado mais rápido a curto prazo são as biotécnicas reprodutivas, uma vez que tais técnicas são capazes de aumentar o número de indivíduos em um curto espaço de tempo. Nas biotécnicas reprodutivas, destaca-se a criopreservação (congelamento) de sêmen, técnica na qual se permite armazenar amostras sob temperaturas extremamente negativas, por um longo período de tempo e também deslocar o material para quaisquer localidades.(AU)

The jaguar is one of the main important animals of the Brazilian fauna and among all felines, the jaguar (Panthera onca) is only smaller than the lion (Panthera leo) and the tiger (Panthera tigris), soon being classified as the largest cat from all over the American continent. Despite all the recognition and importance, the species has undergone a significant reduction in the number of individuals. This species has been maintaining its conservation status as a vulnerable species for a long time, according to the Brazilian Ministry of the Environment, and close to threatened, according to the classification of the IUCN Red List. The main causes that lead to a decrease in the population of this species are related to the reduction in the number of natural prey such as deer, peccary and collared peccary, and mainly due to the expansion of urban areas, destruction of natural habitats, being hit by roads and illegal hunting. Such factors capable of reducing the population of these animals have been constantly worsening due mainly to ineffective public policies for the protection of endangered species. Against this background, researchers are working to develop strategies to protect the species. The conservation strategy of greater prominence and of quicker result in the short term is the reproductive biotechniques, since such techniques are able to increase the number of individuals in a short period of time. In reproductive biotechniques, semen cryopreservation (freezing) stands out, a technique in which samples can be stored under extremely negative temperatures for a long period of time and the material can also be moved to any location.(AU)

Programas de inseminação artificial com sêmen congelado de caprinos e ovinos por laparoscopia no Nordeste do Brasil / Programs of artificial insemination with frozen semen of goats and sheep by laparoscopy in Northeast of Brazil

Dentre as biotécnicas aplicadas a reprodução animal, a inseminação artificial (IA) consiste na aplicação do sêmen no aparelho reprodutor da fêmea por meio instrumental. A IA oferece vários benefícios aos criadores, como aceleração do melhoramento genético de animais de interesse econômico, maior controle de doenças sexualmente transmissíveis, facilita a realização do teste de progênie, viabiliza a utilização de sêmen congelado de reprodutores alojados em outras localidades e possibilita que machos com subfertilidade adquirida produzam descendentes. Suas limitações estão relacionadas com carência de mão de obra qualificada, principalmente quando se utiliza a inseminação artificial por laparoscopia, infraestrutura mínima na propriedade para a realização dos procedimentos e aumento dos custos com a aquisição de hormônios. Nesse contexto, a presente revisão de literatura relata os principais pontos que devem ser considerados a fim de superar algumas limitações, bem como, as vantagens da utilização e escolha da melhor técnica.(AU)

Artificial insemination (AI) through laparoscopic techniques has been an important alternative to minimize the difficulties observed in cervical AI in small ruminants. Artificial insemination by laparoscopy facilitates the deposition of the semen directly into the uterine horns of the female, and does not present the cervix as a barrier, especially in sheep that have high sinuosity of the cervical rings. Thus, the use of frozen semen with laparoscopic intrauterine deposition has been important to obtain better fertility indexes in goats and sheep. AI offers several benefits to breeders, such as accelerating the genetic improvement of animals of economic interest, greater control of sexually transmitted diseases, facilitating progeny testing, enabling the use of frozen semen from breeding animals housed in other locations and enabling males with acquired subfertility produce descendants.(AU)

Programas de inseminação artificial com sêmen congelado de caprinos e ovinos por laparoscopia no Nordeste do Brasil / Programs of artificial insemination with frozen semen of goats and sheep by laparoscopy in Northeast of Brazil

Dentre as biotécnicas aplicadas a reprodução animal, a inseminação artificial (IA) consiste na aplicação do sêmen no aparelho reprodutor da fêmea por meio instrumental. A IA oferece vários benefícios aos criadores, como aceleração do melhoramento genético de animais de interesse econômico, maior controle de doenças sexualmente transmissíveis, facilita a realização do teste de progênie, viabiliza a utilização de sêmen congelado de reprodutores alojados em outras localidades e possibilita que machos com subfertilidade adquirida produzam descendentes. Suas limitações estão relacionadas com carência de mão de obra qualificada, principalmente quando se utiliza a inseminação artificial por laparoscopia, infraestrutura mínima na propriedade para a realização dos procedimentos e aumento dos custos com a aquisição de hormônios. Nesse contexto, a presente revisão de literatura relata os principais pontos que devem ser considerados a fim de superar algumas limitações, bem como, as vantagens da utilização e escolha da melhor técnica.

Artificial insemination (AI) through laparoscopic techniques has been an important alternative to minimize the difficulties observed in cervical AI in small ruminants. Artificial insemination by laparoscopy facilitates the deposition of the semen directly into the uterine horns of the female, and does not present the cervix as a barrier, especially in sheep that have high sinuosity of the cervical rings. Thus, the use of frozen semen with laparoscopic intrauterine deposition has been important to obtain better fertility indexes in goats and sheep. AI offers several benefits to breeders, such as accelerating the genetic improvement of animals of economic interest, greater control of sexually transmitted diseases, facilitating progeny testing, enabling the use of frozen semen from breeding animals housed in other locations and enabling males with acquired subfertility produce descendants.

Characterization of the development of foals in natural mating and embryo transfer

Background: Several reproductive biotechnologies are used in horses and embryo transfer (ET) is one of the most frequent in countries like Brazil and the USA. It has been shown that animals originated by new reproductive technology can have compromised growth in extreme conditions, however there are still only a few researches on the influence of embryo transfer over lactating foals under different raising methods. Due to the lack of studies on ET products development and the need to understand the process and its relate with lactating foals growth, the aim of this study was to evaluate the influence of the embryo transfer and natural mate over the newborn foals. Materials, Methods & Results: From a group of 20 mares, 20 Quarter Horse lactating foals were used (10 natural matting + 10 embryo transfer). The mares werent given any concentrate feed during whole gestation and lactation. Foals were kept with the mare, however was used creep feeding to give commercial feed ad libitum. The foals biometric evaluation were made at the day of birth (day 0) and at 30th, 60th, 90th, 120th and 150th day (weaning) for the following parameters: body mass (BM), height at the withers (H), heart girth (HG), cannon bone girth (CBG) and fat mass percentage (FMP). The fat thickness percentage at rump it was determined by ultrasound device. All statistics were considered significant when a [...](AU)

Characterization of the development of foals in natural mating and embryo transfer

Background: Several reproductive biotechnologies are used in horses and embryo transfer (ET) is one of the most frequent in countries like Brazil and the USA. It has been shown that animals originated by new reproductive technology can have compromised growth in extreme conditions, however there are still only a few researches on the influence of embryo transfer over lactating foals under different raising methods. Due to the lack of studies on ET products development and the need to understand the process and its relate with lactating foals growth, the aim of this study was to evaluate the influence of the embryo transfer and natural mate over the newborn foals. Materials, Methods & Results: From a group of 20 mares, 20 Quarter Horse lactating foals were used (10 natural matting + 10 embryo transfer). The mares werent given any concentrate feed during whole gestation and lactation. Foals were kept with the mare, however was used creep feeding to give commercial feed ad libitum. The foals biometric evaluation were made at the day of birth (day 0) and at 30th, 60th, 90th, 120th and 150th day (weaning) for the following parameters: body mass (BM), height at the withers (H), heart girth (HG), cannon bone girth (CBG) and fat mass percentage (FMP). The fat thickness percentage at rump it was determined by ultrasound device. All statistics were considered significant when a [...]

Characterization of the Development of Foals in Natural Mating and Embryo Transfer

Background: Several reproductive biotechnologies are used in horses and embryo transfer (ET) is one of the most frequent in countries like Brazil and the USA. It has been shown that animals originated by new reproductive technology can have compromised growth in extreme conditions, however there are still only a few researches on the influence of embryo transfer over lactating foals under different raising methods. Due to the lack of studies on ET products development and the need to understand the process and its relate with lactating foals growth, the aim of this study was to evaluate the influence of the embryo transfer and natural mate over the newborn foals.Materials, Methods & Results: From a group of 20 mares, 20 Quarter Horse lactating foals were used (10 natural matting + 10 embryo transfer). The mares werent given any concentrate feed during whole gestation and lactation. Foals were kept with the mare, however was used creep feeding to give commercial feed ad libitum. The foals biometric evaluation were made at the day of birth (day 0) and at 30th, 60th, 90th, 120th and 150th day (weaning) for the following parameters: body mass (BM), height at the withers (H), heart girth (HG), cannon bone girth (CBG) and fat mass percentage (FMP). The fat thickness percentage at rump it was determined by ultrasound device. All statistics were considered significant when a P &

Maturação Oocitária Em Bovinos: Efeito Dos Ácidos Graxos Poli-Insaturados / Oocyte Maturation In Cattle: The Effect Of Polyunsaturated Fatty Acids / Maturación Oocitaria En Bovinos: Efecto De Los Ácidos Graxos Poliinsaturados

Objetivou-se com a presente revisão descrever os eventos que compõe a maturação de oócitos bovinos, pois esta é uma fase crucial da produção in vitro de embriões (PIVE) e o efeito da adição de ácidos graxos poli-insaturados (AGPI) nos meios de cultivo ou na alimentação de bovinos. Dentre os diversos, o ácido linolênico (C18:3; ômega-3) e linoléico (C18:2; ômega-6) são os mais importantes no contexto reprodutivo. A PIVE é uma biotécnica reprodutiva em que todo o processo ocorre mediante etapas sincrônicas, sendo maturação in vitro (MIV), fertilização in vitro (FIV) e cultivo de embriões in vitro (CIV) e para que todo o processo obtenha sucesso é necessária que haja interação e sincronismo entre as etapas cuja maturação oocitária é uma fase essencial e limitante para a PIVE, visto que é através da maturação nuclear e citoplasmática que ocorre o controle sistêmico de todo potencial de desenvolvimento oocitário e, consequentemente garantia do desenvolvimento embrionário.(AU)

The objective of this review was to describe the events that compose the maturation of bovine oocytes, as this is a crucial phase of in vitro embryo production (IVP) and the effect of the addition of polyunsaturated fatty acids (PUFAs) on culture media or in feed for cattle. Among them, linolenic acid (C18: 3; omega-3) and linoleic acid (C18: 2; omega-6) are the most important in the reproductive context. IVP is a reproductive biotechnology in which the whole process takes place through synchronic stages, being in vitro maturation (IVM), in vitro fertilization (IVF) and in vitro embryo culture (IVC) and for the whole process to be successful it is necessary that there is interaction and synchronism between the stages whose oocyte maturation is the essential and limiting phase for IVP since it is through nuclear and cytoplasmic maturation that the systemic control of any oocyte development potential occurs and consequently warranty of embryonic development.(AU)

En el presente trabajo se describen los eventos que componen la maduración de ovocitos bovinos, pues esta es una fase crucial de la producción in vitro de embriones (PIVE) y el efecto de la adición de ácidos grasos poliinsaturados (AGPI) en los medios de cultivo o En la alimentación de bovinos. Entre los diversos, el ácido linolénico (C18: 3, omega-3) y linoleico (C18: 2, omega-6) son los más importantes en el contexto reproductivo. La PIVE es una biotécnica reproductiva en que todo el proceso ocurre mediante etapas sincrónicas, siendo maduración in vitro (MIV), fertilización in vitro (FIV) y cultivo de embriones in vitro (CIV) y para que todo el proceso obtenga éxito es necesario que haya interacción y sincronismo entre las etapas cuya maduración oocitaria es la fase esencial y limitante para la PIVE, ya que es a través de la maduración nuclear y citoplasmática que ocurre el control sistémico de todo potencial de desarrollo oocitario y por consiguiente, garantía del desarrollo embrionario.(AU)

Maturação Oocitária Em Bovinos: Efeito Dos Ácidos Graxos Poli-Insaturados / Oocyte Maturation In Cattle: The Effect Of Polyunsaturated Fatty Acids / Maturación Oocitaria En Bovinos: Efecto De Los Ácidos Graxos Poliinsaturados

Objetivou-se com a presente revisão descrever os eventos que compõe a maturação de oócitos bovinos, pois esta é uma fase crucial da produção in vitro de embriões (PIVE) e o efeito da adição de ácidos graxos poli-insaturados (AGPI) nos meios de cultivo ou na alimentação de bovinos. Dentre os diversos, o ácido linolênico (C18:3; ômega-3) e linoléico (C18:2; ômega-6) são os mais importantes no contexto reprodutivo. A PIVE é uma biotécnica reprodutiva em que todo o processo ocorre mediante etapas sincrônicas, sendo maturação in vitro (MIV), fertilização in vitro (FIV) e cultivo de embriões in vitro (CIV) e para que todo o processo obtenha sucesso é necessária que haja interação e sincronismo entre as etapas cuja maturação oocitária é uma fase essencial e limitante para a PIVE, visto que é através da maturação nuclear e citoplasmática que ocorre o controle sistêmico de todo potencial de desenvolvimento oocitário e, consequentemente garantia do desenvolvimento embrionário.

The objective of this review was to describe the events that compose the maturation of bovine oocytes, as this is a crucial phase of in vitro embryo production (IVP) and the effect of the addition of polyunsaturated fatty acids (PUFAs) on culture media or in feed for cattle. Among them, linolenic acid (C18: 3; omega-3) and linoleic acid (C18: 2; omega-6) are the most important in the reproductive context. IVP is a reproductive biotechnology in which the whole process takes place through synchronic stages, being in vitro maturation (IVM), in vitro fertilization (IVF) and in vitro embryo culture (IVC) and for the whole process to be successful it is necessary that there is interaction and synchronism between the stages whose oocyte maturation is the essential and limiting phase for IVP since it is through nuclear and cytoplasmic maturation that the systemic control of any oocyte development potential occurs and consequently warranty of embryonic development.

En el presente trabajo se describen los eventos que componen la maduración de ovocitos bovinos, pues esta es una fase crucial de la producción in vitro de embriones (PIVE) y el efecto de la adición de ácidos grasos poliinsaturados (AGPI) en los medios de cultivo o En la alimentación de bovinos. Entre los diversos, el ácido linolénico (C18: 3, omega-3) y linoleico (C18: 2, omega-6) son los más importantes en el contexto reproductivo. La PIVE es una biotécnica reproductiva en que todo el proceso ocurre mediante etapas sincrónicas, siendo maduración in vitro (MIV), fertilización in vitro (FIV) y cultivo de embriones in vitro (CIV) y para que todo el proceso obtenga éxito es necesario que haya interacción y sincronismo entre las etapas cuya maduración oocitaria es la fase esencial y limitante para la PIVE, ya que es a través de la maduración nuclear y citoplasmática que ocurre el control sistémico de todo potencial de desarrollo oocitario y por consiguiente, garantía del desarrollo embrionario.

COMPORTAMENTO REPRODUTIVO E MANIPULAÇÃO FARMACOLÓGICA DO CICLO ESTRAL DE PACA (Cuniculus paca) COM UTILIZAÇÃO DE ACETATO DE MELENGESTROL (MGA) EM ANIMAIS MANTIDOS EM CATIVEIRO

As Pacas (Cuniculus paca) são roedores histricomorfos de grande porte, com distribuição geográfica exclusiva das américas, é um dos mamíferos mais procurado e abatido por caçadores devido seu rendimento de carcaça, e alta palatabilidade de sua carne. A caça descontrolada e a fragmentação de habitats em regiões mais antropizadas, ocasionam o declínio populacional da espécie. No Brasil é possível produzir estes animais de forma legalizada em cativeiro. Entretanto, apesar de haver muitos produtores interessados na produção de animais silvestres, estes são desencorajados quando se deparam com burocracias exacerbadas do órgão responsável pelo licenciamento, e pelos baixos índices reprodutivos da paca. Para viabilização da produção comercial é extremamente importante que estes animais sejam utilizados biotécnicas reprodutivas semelhante as já utilizadas em animais domésticos, e para isso, é necessário conhecer a biologia da espécie, com foco na fisiologia reprodutiva visando a elaboração protocolos de melhoramento reprodutivo para uma produção rentável e em grande escala para suprir o comécio de carnes de animais silvestres. Justificativa: Esta pesquisa foi desenvolvida com a finalidade de conhecer o comportamento reprodutivo e avaliar a aplicação de diferentes técnicas de manipulação farmacológicas do ciclo estral, frequentemente utilizadas em espécies domésticas. Metodologia: Foram estudados 18 animais adultos de comprovada eficiência reprodutiva (seis machos e 12 Fêmeas), onde na primeira etapa somente as fêmeas foram observadas por vídeo monitoramento para individualizar e definir os comportamentos e as fases do ciclo estral, que eram identificadas por meio da citologia vaginal. Posteriormente estes animais ficavam em baias contendo duas fêmeas e um macho separados por tela, onde eram monitorados 24 horas diárias por imagens de circuito fechado de TV, e a cada 48 horas era realizada a citologia vaginal nas fêmeas, onde foram observadas alterações comportamentais específicas em cada fase do ciclo estral. Para verificar a resposta dos animais a manipulação farmacológica estes foram utilizados oito fêmeas e quatro machos separados em dois grupos, cada grupo ocupava duas baias, cada baia continha duas fêmeas e um macho, as fêmeas do G1 receberam durante 8 dias (D0 a D8) 0,22 mg de MGA por via oral em alimento palatável para a espécie. No oitavo dia estas receberam por via IM 0,13mg de prostaglandina e 50 UI de eCG. No G2 denominado grupo controle, os animais recebiam alimentos nos mesmos horários e aplicação de soro fisiológico quando os demais animais dos outros grupos recebiam o tratamento hormonal, foram realizadas coletas de sangue nos dias D0, D4 e D8 para avaliar os níveis de P4. Resultados: As pacas apresentaram comportamentos diferenciáveis em cada fase do ciclo estral. A aproximação do macho após um período de três meses de afastamento não pareceu ter influência significativa sobre o ciclo estral das fêmeas. O uso do MGA aliado ao PGF2 não foi capaz de sincronizar o estro nestes animais, mas prolongou o ciclo estral. A aplicação do eCG na dosagem de 50 UI demonstrou eficiência para induzir a ovulação, onde um dos animais do G1 teve uma gestação com trigêmeos. Conclusão: Este trabalho demonstra que é possível aplicar biotecnologias reprodutivas menos invasivas nos animais silvestres, e reduzir o estresse de manipulação, mas necessita estudos aprofundados para estabelecer protocolos eficientes, seguros e de fácil aplicabilidade.

Pacas (Cuniculus paca) are large histricomorph rodents, geographically distributed exclusively in the Americas, it is one of the most sought after mammals and slaughtered by hunters due to its carcass yield and high meat palatability. Uncontrolled hunting and the fragmentation of habitats in more anthropized regions, lead to the population decline of the species. In Brazil it is possible to produce these animals legally in captivity. However, despite the fact that there are many producers interested in the production of wild animals, they are discouraged when they face the exacerbated bureaucracies of the body responsible for licensing, and the low reproductive rates of paca. In order to make commercial production viable, it is extremely important that these animals are produced in a similar way to domestic animals, and for this, it is necessary to know the reproductive biology of the species, and develop reproductive improvement protocols for profitable and large-scale production to supply the trade of wild animal meats. Justification: This research was developed with the purpose of knowing more about the reproductive behavior and application of some pharmacological manipulation techniques of the estrous cycle, frequently used in domestic species. Methodology: Eighteen adult animals of proven reproductive efficiency were studied (6 males and 12 females), where in the first stage only the females were observed by video monitoring to individualize and define the behaviors and phases of the estrous cycle, which were identified through the vaginal cytology. Subsequently, these animals were kept in pens containing 2 females and one male separated by a screen, where they were monitored 24 hours a day by closed-circuit TV images, and every 48 hours vaginal cytology was performed on females, where specific behavioral changes were observed in each phase of the estrous cycle. To check the response of the animals to pharmacological manipulation, they were separated into three groups, each group occupied two stalls, each stall contained two females and one male, females in G1 received for 8 days (D0 to D8) 0.22 mg of MGA orally in food palatable for the species. On the eighth day, they received 0.13mg of prostaglandin via IM and 50 IU of eCG. In G2 the control group, the animals received food at the same times and application of saline solution as the other animals in the other groups received hormonal treatment, blood samples were taken on days D0, D4 and D8 to assess P4 levels. Results: The pacas showed differentiable behaviors in each phase of the estrous cycle. The approach of the male after a period of three months of withdrawal did not seem to have a significant influence on the females' estrous cycle. The use of MGA combined with PGF2 was not able to synchronize estrus in these animals, but it prolonged the estrous cycle. The application of eCG at a dosage of 0.50 UI showed efficiency to induce ovulation, where one of the animals in a pregnancy with triplets. Conclusion: This work demonstrates that it is possible to apply less invasive reproductive biotechnologies in wild animals, and reduce handling stress, but it needs in-depth studies to establish efficient, safe and easily applicable protocols.

PROTOCOLO DE RELAXAMENTO CERVICAL PARA COLETA DE EMBRIÕES EM OVELHAS SANTA INÊS: EFICIÊNCIA, BEM ESTAR ANIMAL, QUALIDADE EMBRIONÁRIA E PROTEÔMICA DO LAVADO UTERINO

Este estudo teve como objetivos avaliar: a) um teste de triagem para seleção de doadoras de embrião aptas para coleta transcervical (TC); b) a eficiência das técnicas de coleta de embrião TC ou cirúrgica por laparotomia (LP) e seus efeitos sobre o bem estar animal; c) o efeito do protocolo hormonal de dilatação da cérvix sobre o ambiente uterino e embrião. No primeiro experimento, o resultado do teste de transposição da cérvix no estro foi correlacionado com o resultado do teste imediatamente antes da coleta de embriões, sendo este último, precedido pelo protocolo de dilatação cervical que consistiu em: benzoato de estradiol (100 µg, i.v.) e cloprostenol (0,12 mg, i.m.) 12 h antes da coleta de embriões, acrescido de ocitocina (100 UI, i.v.) 15 min antes da coleta. No segundo experimento, a frequência cardíaca, temperatura retal, concentrações séricas de proteínas totais, albumina, globulina, cortisol e glicose foram mensuradas em animais submetidos à TC ou LP. As taxas de recuperação de fluido e estruturas também foram mensuradas. No terceiro e quarto experimentos, os grupos foram formados por ovelhas tratadas com o protocolo de dilatação da cérvix (descrito acima) ou ovelhas controles (solução salina). No terceiro experimento, a função luteal foi analisada através de ultrassonografia Doppler e mensuração das concentrações de progesterona. Os embriões foram avaliados quanto à morfologia e expressão gênica. Uma análise proteômica do lavado uterino recuperado também foi realizada. No quarto experimento, os embriões recuperados foram fixados para o teste de TUNEL e outra parte foi cultivada in vitro e submetida à qRT-PCR. No primeiro experimento, o teste de transposição apresentou acurácia de 80,0% e índice kappa de 0,52. No segundo experimento, a coleta TC foi mais eficiente que LP (taxas de recuperação de fluido, P = 0.0002; e de estruturas, P = 0.0180). Durante e imediatamente após procedimentos, a temperatura retal foi maior na coleta TC, enquanto que a frequência cardíaca foi maior no pós-operatório tardio da coleta LP (P < 0.05). Houve um pico no decorrer e logo após os procedimentos nas mensurações de glicose (maior na coleta TC, P < 0.05) e cortisol (maior na coleta LP, P < 0.05). A técnica de coleta não afetou as concentrações de proteínas totais, albumina e globulina. Nos dois últimos experimentos, a qualidade morfológica, e índice apoptótico não foram afetados pelo protocolo, mas os corpos lúteos de animais controle tiveram maior perfusão sanguínea em relação a animais tratados (P = 0.002). As concentrações de progesterona foram reduzidas no grupo tratado às 6, 9 e 12 h após a administração do tratamento (P < 0.0001). A expressão dos genes BAX, BCL2, PRDX1, e HSP90 não foi afetada pelo protocolo. Contudo, os embriões do grupo tratado tiveram menos transcritos de NANOG e OCT4 que embriões do grupo controle (P = 0.008; P = 0.006, respectivamente). Após o cultivo, não houve diferenças entre os grupos em nenhum gene. No lavado uterino, o grupo tratado obteve 436 proteínas exclusivas, destas 16 foram significativamente mais expressas que no grupo controle (P < 0,05). No grupo controle, 126 proteínas exclusivas e cinco proteínas diferenciais foram encontradas (P < 0.05). Em conclusão, o teste de transposição cervical é uma opção de triagem para doadoras de embrião pela técnica TC, que é mais eficiente e, possivelmente, menos estressante que a técnica LP. Contudo, o protocolo hormonal para dilatação cervical promove luteólise e uma alteração temporária da expressão gênica dos embriões, além de um perfil proteico do fluido uterino modificado.

This study aimed to evaluate: a) a screening test to select suitable embryo donors for transcervical collection (TC); b) the efficiency of embryo collection techniques TC or surgical by laparotomy (LP), and their effects on animal welfare; c) the effect of the hormonal protocol for dilation of the cervix on the uterine environment and embryo. In the first experiment, the result of the cervix transposition test at estrus was correlated with the test result immediately before embryo collection, the latter was preceded by the cervical dilation protocol which consisted of: estradiol benzoate (100 µg, iv) and cloprostenol (0.12 mg, im) 12 h before embryo collection, plus oxytocin (100 IU, iv) 15 min before collection. In the second experiment, heart rate, rectal temperature, serum concentrations of total proteins, albumin, globulin, cortisol and glucose were measured in animals submitted to TC or LP. The rates of fluid recovery and structures were also measured. In the third and fourth experiments, the groups were formed by ewes treated with the cervix dilation protocol (described above) or ewes control (saline). In the third experiment, luteal function was analyzed using Doppler ultrasound and measurement of progesterone concentrations. The embryos were evaluated for morphology and gene expression. A proteomic analysis of the recovered uterine lavage was also performed. In the fourth experiment, the recovered embryos were fixed for the TUNEL test and another part was cultured in vitro and submitted to qRT-PCR. In the first experiment, the transposition test showed an accuracy of 80.0% and a kappa index of 0.52. In the second experiment, TC collection was more efficient than LP (fluid recovery rates, P = 0.0002; and structures, P = 0.0180). During and immediately after procedures, the rectal temperature was greater in the TC collection, while the heart rate was greater in the late postoperative period of the LP collection (P < 0.05). There was a peak during and after the procedures in the measurements of glucose (greater in the TC collection, P < 0.05) and cortisol (greater in the LP collection, P < 0.05). The collection technique did not affect the concentrations of total proteins, albumin and globulin. In the last two experiments, the morphological quality and apoptotic index were not affected by the protocol, but the corpora lutea of control animals had greater blood perfusion compared to treated animals (P = 0.002). Progesterone concentrations were reduced in the treated group at 6, 9 and 12 h after treatment administration (P < 0.0001). The expression of the BAX, BCL2, PRDX1, and HSP90 genes was not affected by the protocol. However, embryos in the treated group had fewer NANOG and OCT4 transcripts than embryos in the control group (P = 0.008; P = 0.006, respectively). After culture, there were no differences between groups in any gene. In the uterine lavage, the treated group obtained 436 exclusive proteins, which 16 were significantly more expressed than in the control group (P < 0.05). In control group, 126 exclusive proteins and five differential proteins were found (P < 0.05). In conclusion, the cervical transposition test is a screening option for embryo donors by TC technique, which is more efficient and, possibly less stressful than the LP technique. However, the hormonal protocol for cervical dilation promotes luteolysis and a temporary alteration in the gene expression of the embryos, as well as a modified uterine fluid protein profile.

Efeito de diferentes biotécnicas reprodutivas (IA, TE e FIV) no desempenho produtivo e reprodutivo de fêmeas da raça Holandesa

Resumo: Biotécnicas da reprodução como IA, TE-in vivo e TE-in vitro têm sido aplicadas como estratégias de manejo visando maior produtividade, ganho genético e eficiência reprodutiva na pecuária brasileira e mundial. O objetivo deste estudo foi avaliar o efeito das diferentes biotécnicas (IA, TE-in vivo e TE-in vitro) no desempenho reprodutivo de vacas da raça Holandesa em lactação, e avaliar o desempenho reprodutivo e produtivo de sua progênie. O estudo foi conduzido na Fazenda Santa Rita/Agrindus S.A. localizada em Descalvado, SP, Brasil. Foram analisadas as seguintes variáveis em vacas Holandesas lactantes que receberam as três biotecnologias contemporaneamente nos anos de 2013 a 2018: taxa de gestação aos 30 (TG30) e 60 (TG60) dias, taxa de perda gestacional entre 30 e 60 dias (TPG) e taxa de aborto (TA). Além disso, também foram analisadas as variáveis duração da gestação (DG), facilidade de parto (FP) e retenção de anexos fetais (RAF). Na progênie, foram avaliadas as seguintes variáveis: informação genômica (IG), peso ao nascimento (PN) e ao desmame (PD), mortalidade do nascimento ao desmame (MN-D) e idade à primeira cobertura (IP-COB), das bezerras nascidas entre os anos de 2013 a 2018. Ainda, foram avaliadas idade ao primeiro parto (IP-PAR) e a produção de leite total na primeira lactação (PLT-1), das bezerras nascidas entre os anos de 2013 a 2017, e a produção de leite total na segunda lactação (PLT-2), das bezerras nascidas entre os anos de 2013 a 2015. Os dados foram analisados por procedimentos do SAS. Houve interação biotécnica ano para as variáveis TG30 (P<0,0001), TG60 (P<0,0001) e TPG (P=0,03), porém, houve efeito de biotécnica (P=0,01) e de ano (P=0,03) para TA. Houve interação biotécnica ano para DG (P<0,0001). Houve efeito de biotécnica para FP (P<0,0001) e não houve efeito de biotécnica para RAF (P=0,14). Houve interação biotécnica ano para IG (P<0,0001). Não houve interação biotécnica ano (P=0,30), efeito de biotécnica (P=0,62) e de ano (P=0,82) para MN-D. Houve interação biotécnica ano para PN (P=0,01) e PD (P<0,0001). Entretanto, houve apenas efeito de ano para IP-COB (P<0,0001), IP-PAR (P=0,0002) e PLT-1 (P<0,0001). Não houve interação biotécnica ano (P=0,41), efeito de biotécnica (P=0,97) e de ano (P=0,92) para PLT-2. Nas progenitoras, a TE apresentou maior eficiência reprodutiva, com semelhantes perdas gestacionais quando comparada com a IA. Adicionalmente, a TE-in vivo apresentou semelhantes eficiência reprodutiva e perda gestacional do que a TE-in vitro. Na progênie, não houve efeito de biotecnologia na produtividade de fêmeas nascidas de IA, TE-in vivo e TE-in vitro.

Abstract: Reproductive biotechnologies as AI, ET-in vivo and ET-in vitro have been applied as manegement strategies to acomplish productivity, genetic gain and reproductive efficiency on Brazilian and worldwide livestock. However, there are differences on the efficiency of this biotechnologies that may compromises the reproductive and productive development of the farms. The objective of this study was to evaluate the effect of different reproductive technologies (AI, ET-in vivo and ET-in vitro) on reproductive development of lactating Holstein cows, and evaluate the reproductive and productive development of their progeny. The study was conducted at Santa Rita/Agrindus S.A. Farm, located in Descalvado, SP, Brazil. The following variables of the lactating Holstein cows that received the three biotechnologies contemporaneously from 2013 to 2018 were analyzed: gestation rate at 30 (GR30) and 60 (GR60) days, gestation lost between 30 and 60 days (GLO) and abortion rate (AR). Additionally, other variables were analyzed: gestation length (GLE), labor facility (LF) and retention of fetal attachments (RFA). The following variables were analyzed on the progeny: genomic information (GI), weight at birth (WB) and at weaning (WW), mortality from calve to weaning (MCW) and age at first conception (ACON) of calves born from 2013 to 2018. Also, were analyzed age at first calve (ACA) and milk production from the first lactation (MP1) of calves born from 2013 to 2017, and milk production from the second lactation (MP2) of calves born from 2013 to 2015. The data were analyzed by procedures of SAS. There was interaction biotechnology year to GR30 (P<0,0001), GR60 (P<0,0001) and GLO (P=0,03), however, there was effect of biotechnology (P=0,01) and effect of year (P=0,03) to AR. There was interaction biotechnology year to GLE (P<0,0001). There was effect of biotechnology to LF (P<0,0001), without effect of biotechnology to RFA (P=0,14). There was interaction biotechnology year to GI (P<0,0001). There was no interaction biotechnology year (P=0,30), effect of biotechnology (P=0,62) and effect of year (P=0,82) to MCW. There was interaction biotechnology year to WB (P=0,01) and WW (P<0,0001). However, there was only effect of year to ACON (P<0,0001), ACA (P=0,0002) and MP1 (P<0,0001). There was no interaction biotechnology year (P=0,41), effect of biotechnology (P=0,97) and effect of year (P=0,92) to MP2. On lactating cows ET presented better reproductive efficiency, with similar gestation lost than AI. Additionally, ET-in vivo presented similar reproductive efficiency and lower gestation lost than ET-in vitro. On progeny, there were no differences between productivity of females born from AI, ET-in vivo or ET-in vitro.

FATORES QUE INTERFEREM NA TAXA DE PRENHEZ EM VACAS ZEBUÍNAS E CRUZADAS SUBMETIDAS À INSEMINAÇÃO ARTIFICIAL EM TEMPO FIXO

Objetivou-se avaliar os fatores de interferência na taxa de prenhez de fêmeas zebuínas e cruzadas. Foram avaliados 15.425 animais e suas informações referentes à inseminação artificial em tempo fixo de fêmeas zebuínas e cruzadas, sendo 1.938 fêmeas nulíparas, 3.277 primíparas e 10.210 multíparas. Todos os animais foram mantidos em regime de pasto com suplementação mineral durante todo o ano. Foram utilizados sêmen de 59 touros, sendo 14.142 doses de touros da raça Nelore e 1.248 da raça Angus. A taxa de prenhez foi analisada como um evento binomial, com a probabilidade Pi das fêmeas emprenharem (sucesso), e a probabilidade Qi = 1 Pidas fêmeas não emprenharem (falha) após a utilização dos protocolos. Metodologia logística foi aplicada usando o procedimento CATMOD em SAS (Estatística Analysis System Institute, Cary, NC, EUA) para avaliar a taxa de prenhez. Metodologia de máxima verossimilhança foi utilizada para estimar os coeficientes de regressão e testar os efeitos sobre a taxa de prenhez das variáveis analisadas. As variáveis explicativas foram bioma, raça materna e paterna, escore de condição corporal, mês do último parto, categoria animal, quantidade de vezes do uso de dispositivo de sincronização e todas as interações entre as varáveis. Os intervalos para taxa de prenhez para cada variável explicativa foi de 49,50% no Cerrado e 51,98% no Cerrado/Caatinga; 44,94% para o uso do dispositivo 2 e 47,92% para o uso do dispositivo 3; na variável da raça do touro, 44,10% para raça Angus e 50,37% Nelore; 35,63% para o protocolo 6 e 65,63% para o protocolo 7; 49,86% com IATF e 56,67% com resincronização; na variável mês do parto, 45,63% no mês 9 e 56,83% no mês 11; raça materna 49,28% em zebuínas e 60,10% em cruzadas; 38,11% com escore de condição corporal 2 e 56,75% com escore de condição corporal 4; na categoria das fêmeas 41,59% para novilhas e 54,47% para multíparas. Conclui-se que a taxa de prenhez foi significativamente afetada pelo bioma, tipo do protocolo, mês de parto, escore de condição corporal e categoria animal.

The objective was to evaluate the interference factors in the pregnancy rate of zebu and crossbred females. A total of 15,425 animals and their information on fixed-time artificial insemination of zebu and crossbred females were evaluated, of which 1,938 nulliparous females, 3,277 primiparous females and 10,210 multiparous females were evaluated. All animals were kept under pasture with mineral supplementation throughout the year. Semen was used for 59 bulls, 14,142 of Nellore bulls and 1,248 of Angus bulls. The pregnancy rate was analyzed as a binomial event, with the Pi probability of the females plotting (success), and the probability Qi = 1 - Female pregnancies did not break (fail) after using the protocols. Logistic methodology was applied using the CATMOD procedure in SAS (Statistical Analysis System Institute, Cary, NC, USA) to assess the pregnancy rate. Maximum likelihood methodology was used to estimate the regression coefficients and to test the effects on the pregnancy rate of the analyzed variables. The explanatory variables were bioma, maternal and paternal race, body condition score, month of last childbirth, animal category, number of times the use of synchronization device and all interactions between variables. The intervals for pregnancy rate for each explanatory variable were 49.50% in the Cerrado and 51.98% in the Cerrado / Caatinga; 44.94% for use of device 2 and 47.92% for use of device 3; in the bull breed variable, 44.10% for Angus breed and 50.37% Nelore; 35.63% for protocol 6 and 65.63% for protocol 7; 49.86% with IATF and 56.67% with resynchronization; in the month of labor, 45.63% in month 9 and 56.83% in month 11; maternal race 49.28% in zebu and 60.10% in crossbreeding; 38.11% with body condition score 2 and 56.75% with body condition score 4; in the category of females 41.59% for heifers and 54.47% for multiparas. It was concluded that the pregnancy rate was significantly affected by the biome, protocol type, month of calving, body condition score and animal category.

AVALIAÇÃO DE PROTOCOLOS DE SUPEROVULAÇÃO EM CERVOS-DO-PANTANAL (Blastocerus dichotomus)

O cervo-do-pantanal (Blastocerus dichotomus) é uma espécie emblemática dentro dos cervídeos neotropicais. Nas últimas décadas, suas populações têm sofrido declínio notório devido, principalmente, à destruição do seu habitat. Isto causa a perda da diversidade genética, que junto à depressão endogâmica (pelo isolamento de pequenas populações) pode levar à espécie a extinções locais. Nesse contexto, as técnicas de reprodução assistida podem auxiliar no processo de manutenção da diversidade genética nestas populações isoladas. Desta forma, o objetivo deste estudo foi elaborar um protocolo de superovulação para cervo-do-pantanal em cativeiro. Assim, foram testados protocolos sucessivamente (A, B, C) até que fossem obtidos resultados satisfatórios. Para que se pudesse chegar a um protocolo viável, foram testadas três combinações farmacológicas. Tratamento A: CIDR® durante sete dias, seguido de 0,5 mg de BE e 0,11 mg de GnRH no dia 0, 800UI de eCG no dia 5 após inserção do CIDR®, 530 µg de PGF2 no dia 7 e 0,11 mg de GnRH logo após a detecção do estro, para a indução da ovulação. Tratamento B: CIDR® durante oito dias, seguido de 0,5 mg de BE e 0,11 mg de GnRH no dia 0, 1200UI de eCG no dia 5 após inserção do CIDR®, 530 µg de PGF2 no dia 8 e 0,11 mg de GnRH logo após a detecção do estro, para a indução da ovulação. Tratamento C: CIDR® durante oito dias, seguido de 0,5 mg de BE e 0,11 mg de GnRH no dia 0, 1200UI de eCG no dia 5 após inserção do CIDR®, 530 µg de PGF2 no dia 8 e 2,5 mg de LH, entre 12-18 horas após a detecção do estro para a indução da ovulação. A detecção de estro foi realizada com o auxílio de um macho, sendo permitida a cópula. Oito dias após a cópula foi realizada a contagem dos CL e folículos anovulatórios mediante laparotomia mediana ventral, assim como a colheita de embriões. O Tratamento A resultou em 2 CL. O Tratamento B resultou em 1 CL e 8 folículos anovulatórios. O Tratamento C resultou em 10, 3 e 11 CL, e 0, 1 e 5 folículos anovulatórios para as fêmeas 3, 4 e 5, respectivamente. Além disso foi realizada a colheita de 2, 2 e 5 embriões das fêmeas FBD3, FBD4 e FBD5, respectivamente. Obtendo uma taxa de recuperação de 37,5% (9/24), dos quais dois eram embriões viáveis para transferência. Todos os tratamentos foram efetivos na sincronização do estro. O Tratamento C, com a aplicação i.m. de 1200UI de eCG e de LH, como indutor da ovulação, teve a melhor resposta em termos de superovulação, assim como de colheita de embriões.

The marsh deer (Blastocerus dichotomus) is an emblematic species within the neotropical deer. In the last decades, their populations have suffered a notable decline due, mainly, to the destruction of their habitat. This causes loss of genetic diversity, which together with inbreeding depression (by the isolation of many small populations) can lead this species to local extinctions. In this context, assisted reproduction techniques can help in the process of maintaining genetic diversity in these isolated populations. Thus, the aim of this study was to elaborate a superovulation protocol for captive marsh deer. Therefore, protocols were successively tested (A, B, C) until satisfactory results were obtained. To be able to achieve a viable protocol, three pharmacological combination were tested. Treatment A: CIDR® for 7 days, followed by 0.5 mg of EB and 0.11 mg of GnRH on D0, 800IU of eCG on day 5 after CIDR® insertion, 530 µg PGF2 on day 7, and 0.11 mg of GnRH soon after estrus detection, for ovulation induction. Treatment B: CIDR® for 8 days, followed by 0.5 mg of EB and 0.11 mg of GnRH on D0, 1200IU of eCG on day 5 after CIDR® insertion, 530 µg PGF2 on day 8, and 0.11 mg of GnRH soon after estrus detection, for ovulation induction. Treatment C: CIDR® for 8 days, followed by 0.5 mg of EB and 0.11 mg of GnRH on D0, 1200IU of eCG on day 5 after CIDR® insertion, 530 µg PGF2 on day 8, and 0.25 mg of LH, between 12-18 hours post estrus detection, for ovulation induction. Estrus detection was performed with the aid of a male, and copulation was allowed. Eight days after copulation, CL and anovulatory follicles were counted through median ventral laparotomy, as well as the collection of embryos. Treatment A resulted in 2 CL. Treatment B resulted in 1 CL and 8 anovulatory follicles. Treatment C resulted in 10, 3 and 11 CL, and 0, 1 and 5 anovulatory follicles for hinds FBD3, FBD4, and FBD5, respectively. In addition, 2, 2 and 5 embryos were harvested from hinds FBD3, FBD4 and FBD5, respectively. Obtaining a recovery rate of 37.5% (9/24), of which two were viable embryos for transfer. All treatments were effective in synchronizing estrus. Treatment C, with an i.m. application of 1200IU of eCG and LH, as ovulation inducer, had the best response in terms of superovulation, as well as embryo collection.

Biotecnologias de reprodução como uma estratégia complementar à conservação in situ de primatas neotropicais ameaçados de extinção: perspectivas e desafios / Biotechnology of reproduction as a complementary strategy for in situ conservation of endangered neotropical primates: perspectives and challenges

A conservação da variabilidade genética de animais silvestres pode ser garantida pela proteção dos animais em seus habitats naturais (in situ), pela manutenção destes em cativeiro, em criatórios conservacionistas ou de pesquisa (ex situ vivos), bem como pela formação de bancos de germoplasma animal, nos quais gametas, embriões e células somáticas podem ser utilizados em programas de biotecnologia da reprodução. A conservação in situ consiste em uma estratégia de conservação elementar. Entretanto, é necessário considerar que a perda de material genético ocorre diariamente de forma acelerada, fazendo-se necessário lançar mão de técnicas para recuperar e preservar o potencial genético de animais mesmo após a sua morte. Desta forma, as biotecnologias de reprodução consistem em auxílio para projetos de conservação in situ.(AU)

Conservation of genetic material can be guaranteed by animal and natural habitat protection, i.e. in situ, by animal captivity in conservationists or research centers, i.e. ex situ in life, or by germplasm bank formation. Such a genetic bank can preserve gametes, embryos or somatic cells, which can be applied in reproductive programs. Conservation in situ consists in an elementary strategy to preserve biodiversity. However, we must bear in mind that genetic material losses occurs rapid and daily, which demands the urgent application of techniques to recover and preserve genetic material even after animal death. Consequently, reproductive biotechnologies will help to conserve genetic material from endangered non-domestic mammals in situ.(AU)

Biotecnologias de reprodução como uma estratégia complementar à conservação in situ de primatas neotropicais ameaçados de extinção: perspectivas e desafios / Biotechnology of reproduction as a complementary strategy for in situ conservation of endangered neotropical primates: perspectives and challenges

A conservação da variabilidade genética de animais silvestres pode ser garantida pela proteção dos animais em seus habitats naturais (in situ), pela manutenção destes em cativeiro, em criatórios conservacionistas ou de pesquisa (ex situ vivos), bem como pela formação de bancos de germoplasma animal, nos quais gametas, embriões e células somáticas podem ser utilizados em programas de biotecnologia da reprodução. A conservação in situ consiste em uma estratégia de conservação elementar. Entretanto, é necessário considerar que a perda de material genético ocorre diariamente de forma acelerada, fazendo-se necessário lançar mão de técnicas para recuperar e preservar o potencial genético de animais mesmo após a sua morte. Desta forma, as biotecnologias de reprodução consistem em auxílio para projetos de conservação in situ.

Conservation of genetic material can be guaranteed by animal and natural habitat protection, i.e. in situ, by animal captivity in conservationists or research centers, i.e. ex situ in life, or by germplasm bank formation. Such a genetic bank can preserve gametes, embryos or somatic cells, which can be applied in reproductive programs. Conservation in situ consists in an elementary strategy to preserve biodiversity. However, we must bear in mind that genetic material losses occurs rapid and daily, which demands the urgent application of techniques to recover and preserve genetic material even after animal death. Consequently, reproductive biotechnologies will help to conserve genetic material from endangered non-domestic mammals in situ.

Characterization of the Development of Foals in Natural Mating and Embryo Transfer

Background: Several reproductive biotechnologies are used in horses and embryo transfer (ET) is one of the most frequent in countries like Brazil and the USA. It has been shown that animals originated by new reproductive technology can have compromised growth in extreme conditions, however there are still only a few researches on the influence of embryo transfer over lactating foals under different raising methods. Due to the lack of studies on ET products development and the need to understand the process and its relate with lactating foals growth, the aim of this study was to evaluate the influence of the embryo transfer and natural mate over the newborn foals.Materials, Methods & Results: From a group of 20 mares, 20 Quarter Horse lactating foals were used (10 natural matting + 10 embryo transfer). The mares werent given any concentrate feed during whole gestation and lactation. Foals were kept with the mare, however was used creep feeding to give commercial feed ad libitum. The foals biometric evaluation were made at the day of birth (day 0) and at 30th, 60th, 90th, 120th and 150th day (weaning) for the following parameters: body mass (BM), height at the withers (H), heart girth (HG), cannon bone girth (CBG) and fat mass percentage (FMP). The fat thickness percentage at rump it was determined by ultrasound device. All statistics were considered significant when a P &