Fatal and disseminated infection by Entamoeba invadens in a red-footed tortoise (Chelonoidis carbonaria)

Amebiasis is an important parasitosis that can affect reptiles, specially caused by protozoas of the genus Entamoeba, which include pathogenic or commensal species. Entamoeba invadens is the most common amoeba to cause serious disease and death in reptiles. This paper aims to report a case of a sudden death due to a disseminated infection by Entamoeba invadens in a red-footed tortoise (Chelonoidis carbonaria). The animal was brought to the Center for Management and Conservation of Wild Animals of the Fauna Division and found dead after being kept in an enclousure with other captive tortoises for 11 months. Macroscopic findings evidenced necrotizing typhlitis and proctitis and round yellow areas in the right lobe of liver parenchyma. In the histological examination, necrotizing and heterophilic enteritis and necrotizing hepatitis with macrovesicular degeneration of hepatocytes, associated with mixed inflammatory infiltrate were present. Both organs revealed numerous amoebic trophozoites, morphologically suggestive of the genus Entamoeba, and bacterial colonies. The agent was confirmed by PCR and Sanger DNA sequencing, which leads this study to be the first confirmed case report of E. invadens infection in Brazil in a red-footed tortoise.(AU)

Macro- and microscopic brain anatomy of the amazon lava lizard (Tropidurus torquatus) (WIED, 1820) / Anatomia macro- e microscópica do encéfalo do calango (Tropidurus torquatus) (WIED, 1820)

Reptiles have a key role in understanding amniotes' reproductive independence of water. Many adaptations arose, including in locomotor patterns and behaviours, and the nervous system adapted to those new habits.We have described the macroscopic anatomy and cytoarchitecture of the Amazon Lava Lizard brain (Tropidurus torquatus), an abundant lizard in South America. Fifteen specimens were captured, euthanized and their brains were dissected, eight of these were processed and stained in haematoxylineosin. Their main areas of the brain are the telencephalon and diencephalon, in the forebrain, tectum and tegmentum, in the midbrain and bulbota and cerebellum, in the hindbrain. The main and accessory olfactory bulbs are the most rostral structure of the brain and are composed of six layers. Brain hemispheres compose the telencephalon and are divided in pallium and subpallium. Medial, dorsomedial, lateral and dorsal cortices are part of the pallium. Striatum, pallidum and septum compose the subpallium. The diencephalon is composed of thalamus, epithalamus and hypothalamus. The midbrain has a ventral tegmentum, composed of torus semicircularis and a dorsal 14 layered optic tectum. Most part of the hindbrain is composed of the bulbo, and the cerebellum arises from it, forming a three-layered plate like structure. In general, the brain of Tropidurus torquatusresembles those of other lizards, with its own adaptations

Os répteis têm um papel fundamental para a compreensão da independência reprodutiva da água que surgiu nos amniotas. Várias adaptações ocorreram, inclusive em padrões e comportamentos locomotores, e o sistema nervoso se adaptou a esses novos hábitos. Descrevemos a anatomia macroscópica e a citoarquitetura do encéfalo do calango (Tropidurus torquatus), um lagarto abundante na América do Sul. Quinze espécimes foram capturados, eutanasiados e seus encéfalos dissecados, oito destes foram processados e corados em hematoxilina-eosina. As principais áreas do cérebro são o telencéfalo e o diencéfalo, na parte anterior do encéfalo, teto e tegmento, no mesencéfalo e bulbo e cerebelo, na parte posterior do encéfalo. Os bulbos olfatórios principais e acessórios são as estruturas mais rostrais do cérebro e são compostos por seis camadas. Os hemisférios cerebrais compõem o telencéfalo e são divididos em pálio e subpálio. Os córtices medial, dorsomedial, lateral e dorsal fazem parte do pálio. Estriado, pálido e septo compõem o subpálio. O diencéfalo é composto pelo tálamo, epitálamo e hipotálamo. O mesencéfalo possui um tegmento ventral, composto de torus semicircularis e um tecto óptico dorsal com 14 camadas. A maior parte da parte posterior do encéfalo é composta pelo bulbo, e o cerebelo surge como uma projeção dessa estrutura, em formato plano, com três camadas. Em geral, o encéfalo de Tropidurus torquatusse assemelha ao de outros lagartos, com suas próprias adaptações.

Parasites in feces of the endemic rattlesnake, Crotalus triseriatus (Serpentes: Viperidae), from Mexican highlands

There are few studies about parasitic infections in Crotalus triseriatus (Wagler, 1830), an endemic rattlesnake from the highlands of central Mexico. This species occupies several habitats, from conserved forested regions to heavily impacted landscapes. To increase the parasitological knowledge of this reptile species without impacting populations, we obtained fecal samples of 16 rattlesnakes between 2012 and 2014 from Toluca Valley, Mexico. By using flotation technique, we found oocysts of Eimeria sp. and eggs of Capillariidae sp. The most frequent parasite was Eimeria sp. (62.5%). This study provides the first records of occurrence of parasites in reptilian feces from Mexico. Our results may be important for wildlife conservation purposes, for example, they could indicate of the population health of this species during processes of translocation.

Parasites in feces of the endemic rattlesnake, Crotalus triseriatus (Serpentes: Viperidae), from Mexican highlands

There are few studies about parasitic infections in Crotalus triseriatus (Wagler, 1830), an endemic rattlesnake from the highlands of central Mexico. This species occupies several habitats, from conserved forested regions to heavily impacted landscapes. To increase the parasitological knowledge of this reptile species without impacting populations, we obtained fecal samples of 16 rattlesnakes between 2012 and 2014 from Toluca Valley, Mexico. By using flotation technique, we found oocysts of Eimeria sp. and eggs of Capillariidae sp. The most frequent parasite was Eimeria sp. (62.5%). This study provides the first records of occurrence of parasites in reptilian feces from Mexico. Our results may be important for wildlife conservation purposes, for example, they could indicate of the population health of this species during processes of translocation.(AU)

Tear meniscometry test in wild animals / Teste de meniscometria lacrimal em animais silvestres

This study aimed to describe strip meniscometry test values for Amazona aestiva (turquoise-fronted amazon), Ara ararauna (blue-and-yellow macaw) and Caiman latirostris (broad-snouted caiman). Twenty-one Amazona aestiva and 11 Ara ararauna, healthy, adults of unknown sex, and 37 healthy adult Caiman latirostris (27 males and 10 females), were used in this investigation. All animals were manually restrained and I-Tear® Test strip was inserted for 5 s at the edge of the lower tear meniscus, without touching the eyelid or ocular surface, immediately followed by measurement (millimeter per 5 seconds). No differences were reported between left and right eyes for Amazona aestiva (P = 0.824), Ara ararauna (P = 0.262) and Caiman latirostris (P = 0.679). Median and confidence interval were 2.0 (2.25-3.56) mm/5s for Amazona aestiva, 3.0 (2.93-4.15) mm/5s for Ara ararauna and 3.0 (2.55-4.90) mm/5 s for Caiman latirostris. These values for strip meniscometry tear test can be used as parameters for each species and may be helpful for diagnosis and treatment of tear-production disorders in birds and reptiles.(AU)

O objetivo deste estudo foi descrever os valores do teste de meniscometria lacrimal para Amazona aestiva (papagaio-verdadeiro), Ara ararauna (arara-canindé) e Caiman latirostris (jacaré-de-papo-amarelo). Vinte e um Amazona aestiva, 11 Ara ararauna adultos, de sexo desconhecido, e 37 Caiman latirostris adultos (27 machos e 10 fêmeas), foram utilizados nesta investigação. Todos os animais foram contidos manualmente e uma tira do I-Tear® test foi inserida por 5 segundos na borda do menisco inferior, sem tocar a pálpebra ou a superfície ocular, e imediatamente mensurada (milímetro por 5 segundos). Não foram encontradas diferenças entre os olhos esquerdos e direitos para Amazona aestiva (P = 0,824), Ara ararauna (P = 0,262) e Caiman latirostris (P = 0,679). Mediana e intervalo de confiança foram de 2,0 (2,25-3,56) mm/5 s para Amazona aestiva, 3,0 (2,93-4,15) mm/5 s para Ara ararauna e 3,0 (2,55-4,90) mm/5 s para Caiman latirostris. Estes valores para o teste de meniscometria podem ser utilizados como parâmetros para estas espécies e podem ser úteis para diagnosticar e tratar distúrbios de produção lacrimal em aves e répteis.(AU)

The Herpetofauna from Ilha Grande (Angra dos Reis, Rio de Janeiro, Brazil): updating species composition, richness, distribution and endemisms

Ilha Grande is a large continental island (total area of 19,300 ha) situated at the southern coast of the state of Rio de Janeiro, in southeast Brazil, within the Atlantic Forest Biome. Here we provide an update to the previous knowledge of the fauna of amphibians and reptiles occurring in Ilha Grande, based on primary data from our own fieldwork and on secondary data (from institutional collections and from the literature). We report the occurrence at Ilha Grande of a total of 74 species, being 34 amphibians (all of them anurans) and 40 reptiles (27 snakes, 11 lizards, one amphisbaenian and one crocodylian). Our survey added 14 species to the herpetofaunal list of Ilha Grande (three of amphibians and eleven of reptiles) and removed one species (the amphibian Cycloramphus fuliginosus) from the previous list. The data indicated that Ilha Grande houses a considerable portion of the Atlantic Forest amphibian and reptile diversity (ca. 6% and 19%, respectively, of the species occurring in this biome) together with high occurrence of species endemic to this biome plus a few amphibian species endemic to this island. Ilha Grande is thus an important reservoir of both biodiversity and endemism of amphibians and reptiles of the Atlantic Forest of Brazil, which highlights the importance of the conservation of the island and of its different habitats along the insular landscape.(AU)

The Herpetofauna from Ilha Grande (Angra dos Reis, Rio de Janeiro, Brazil): updating species composition, richness, distribution and endemisms

Ilha Grande is a large continental island (total area of 19,300 ha) situated at the southern coast of the state of Rio de Janeiro, in southeast Brazil, within the Atlantic Forest Biome. Here we provide an update to the previous knowledge of the fauna of amphibians and reptiles occurring in Ilha Grande, based on primary data from our own fieldwork and on secondary data (from institutional collections and from the literature). We report the occurrence at Ilha Grande of a total of 74 species, being 34 amphibians (all of them anurans) and 40 reptiles (27 snakes, 11 lizards, one amphisbaenian and one crocodylian). Our survey added 14 species to the herpetofaunal list of Ilha Grande (three of amphibians and eleven of reptiles) and removed one species (the amphibian Cycloramphus fuliginosus) from the previous list. The data indicated that Ilha Grande houses a considerable portion of the Atlantic Forest amphibian and reptile diversity (ca. 6% and 19%, respectively, of the species occurring in this biome) together with high occurrence of species endemic to this biome plus a few amphibian species endemic to this island. Ilha Grande is thus an important reservoir of both biodiversity and endemism of amphibians and reptiles of the Atlantic Forest of Brazil, which highlights the importance of the conservation of the island and of its different habitats along the insular landscape.

Avaliação ultrassonográfica e radiográfica das serpentes ilhoas ex-situ: aspectos clínicos e reprodutivos

As serpentes ilhoas Bothrops insularis e B. alcatraz são animais ameaçados de extinção encontrados apenas na Ilha da Queimada Grande e na Ilha de Alcatraz, respectivamente (litoral de São Paulo, Brasil). São serpentes peçonhentas da família Viperidae. As fêmeas são maiores que os machos. Elas são vivíparas, ou seja, todo o desenvolvimento embrionário ocorre dentro do oviduto. Há pouca informação sobre essas serpentes devido à dificuldade de localização e deslocamento para pesquisas científicas in situ. Dessa forma, os parâmetros biológicos clínicos normais dessas espécies são escassos. Como o exame físico para o diagnóstico clínico em répteis é limitado, o uso de métodos diagnósticos como a ultrassonografia e a radiografia permite uma avaliação precisa do tamanho, localização anatômica e padrões de normalidade de todos os órgãos em um determinado momento. Diante disso, o objetivo deste trabalho foi avaliar aspectos clínicos e reprodutivos das serpentes Bothrops insularis e B. alcatraz por meio de ultrassonografia e radiografia. Entre 2014 e 2020, avaliamos 58 serpentes (46 B. insularis e 12 B. alcatraz) pertencentes ao Laboratório de Ecologia e Evolução do Instituto Butantan. Para o exame ultrassonográfico, as serpentes foram contidas em um tubo de acrílico e o transdutor foi posicionado no dorso (nos lados direito e esquerdo) e no ventre do animal. Para o exame radiográfico, as serpentes foram colocadas dentro de um tubo de acrílico e posicionadas sobre o chassi em posição látero-lateral e ventro-dorsal. Os animais foram avaliados ultrassonograficamente em cada estação do ano e radiograficamente uma única vez. Nas avaliações ultrassonográficas das fêmeas, diferenciamos as serpentes sexualmente maduras das imaturas, identificamos as fases foliculares (pré- vitelogênese e vitelogênese), caracterizamos três fases gestacionais e identificamos a contração da musculatura da junção útero-vaginal. Nos machos, caracterizamos os testículos e os hemipênis. Além disso, identificamos alterações no fígado no período gestacional e alterações nos órgãos das serpentes doentes. Na radiografia, observamos os folículos vitelogênicos no ovário, o final da gestação, os ovos atrésicos, o fígado, o crânio, as caudas (nas duas espécies) e avaliamos toda a coluna vertebral e suas alterações patológicas. Avaliamos também os hemipênis dos machos de ambas as espécies e os hemiclitóris das fêmeas de B. insularis. Também foi possível avaliar todo o processo reprodutivo nas duas espécies, determinando as épocas de vitelogênese, embriogênese, nascimentos e a duração da gestação. Nos machos, pudemos descrever as mudanças sazonais no tamanho dos testículos. Nossos resultados indicam que as duas espécies têm ciclo bienal, que B. insularis se acasala no fim do verão e no outono, com gestação de oito-nove meses, e que B. alcatraz se acasala no fim do outono e inverno, com gestação de sete-oito meses. Concluímos que a ultrassonografia e a radiografia foram eficazes na avaliação dos órgãos propostos e na caracterização dos padrões reprodutivos e das alterações patológicas que causam óbitos no plantel de serpentes.

The island snakes Bothrops insularis and B. alcatraz are endangered animals found only on the Queimada Grande Island and the Alcatraz Island, respectively (coast of São Paulo, Brazil. They are venomous snakes of the family Viperidae. Females are larger than males. They are viviparous, that is, embryonic development occurs entirely within the oviduct. There is little information about these snakes due to the difficulty in locating them and logistics for scientific research in situ. The normal clinical biological parameters of these species are scarce. As the physical examination for clinical diagnosis in reptiles is limited, the use of diagnostic methods such as ultrasound and radiography allow an accurate assessment of the size, anatomical location, and normal patterns of all organs at any given time. Therefore, this work aimed to evaluate the clinical and reproductive aspects of the snakes B. insularis and B. alcatraz using ultrasound and radiography. Between 2014 and 2020, we evaluated 58 snakes (46 B. insularis and 12 B. alcatraz) belonging to the Laboratory of Ecology and Evolution of the Butantan Institute. For ultrasound examination, snakes were restrained in an acrylic tube and the transducer was placed dorsally (on the right and left side) and ventrally. For the radiographic examination, snakes were placed inside an acrylic tube and positioned on the chassis in a laterolateral and ventrodorsal position. The animals were assessed ultrasonographically in each season and radiographically once. In the ultrasound evaluations of females, we distinguished between sexually mature and immature snakes, identified the follicular phases (pre-vitellogenesis and vitellogenesis), characterized three gestational phases, and identified the coiling of the utero-vaginal junction. In males, we characterized the testes and the hemipenis. Moreover, we identified changes in the liver during pregnancy and changes in the organs of sick snakes. On the radiograph, we observed the vitellogenic follicles in the ovaries, late pregnancy, atretic eggs, liver, skull, tails (in both species), and assessed the entire vertebral column and its pathological changes. We also evaluated the male hemipenis of both species and the female hemiclitoris of B. insularis. It was also possible to evaluate the entire reproductive process in both species, determining the timing of vitellogenesis, embryogenesis, birth, and gestation time. In males, we described seasonal changes in testis size. Our results indicate that the two species have a biennial cycle, B. insularis mates in late summer and autumn, gestation lasts eight-nine months, and that B. alcatraz mates in late autumn and winter and gestation lasts seven-eight months. We conclude that ultrasound and radiography were effective in evaluating the examined organs and in characterizing reproductive patterns and pathological changes that cause deaths in captive snakes.

Descrição morfológica do coração e dos vasos da base do jacaré-do-pantanal (Caiman yacare Daudin, 1802) proveniente de zoocriadouro / Morphological description of heart and large vessels of the jacaré-do-pantanal (Caiman yacare Daudin, 1802) from a crocodile breeding Center

Com este estudo objetivou-se descrever os aspectos anatômicos e histológicos do coração do jacaré-do-pantanal (Caiman yacare), proveniente de zoocriadouro. Para tanto, estudou-se 13 exemplares da espécie, os quais foram perfundidos, conservados em solução de formaldeído a 10% e submetidos às técnicas anatômicas específicas. O coração foi separado e amostras foram colhidas e submetidas à avaliação histológica. Macroscopicamente o coração é tetracavitário, e além de dois átrios e dois ventrículos, apresenta uma estrutura denominada cone arterial, do qual emergem os vasos da base do coração. Foram identificadas duas aortas, direita e esquerda, sendo que a esquerda emerge do ventrículo direito e se comunica com o tronco sistêmico direito por meio do forame de Panizza. Histologicamente o coração possui epicárdio, miocárdio e endocárdio típicos. Concluímos que a histologia do coração, no jacaré-do-pantanal, é semelhante à de outras espécies de répteis. Contudo, anatomicamente apresenta particularidades importantes, as quais representam, possivelmente, adaptações que permitiram a perpetuação da espécie.(AU)

The aim of this study was to describe anatomical and histological aspects of the heart of Caiman yacare from a crocodile breeding center. For this purpose, we have chosen and further studied 13 specimens which were perfused and preserved in a 10% formaldehyde solution and they were subjected to the specific anatomical techniques. The heart was separated and samples were collected and submitted to the specific histological procedures. Macroscopically, the heart is four-chambered and besides two atria and two ventricles, has a structure called arterial cone from which the large vessels of the heart emerge. Two aortas, left and right, were identified. The left aorta emerges from the right ventricle and communicates with the systemic trunk through the Foramen of Panizza. From a histological point of view, the heart is typically composed of epicardium, myocardium and endocardium. According to these observations, it is assumed that the histology of the heart of "Jacaré-do-Pantanal" is similar to other species of reptiles. However, there are some anatomic particularities, which possibly represent the adaptations allowing the perpetuation of the species.(AU)

Descrição morfológica do coração e dos vasos da base do jacaré-do-pantanal (Caiman yacare Daudin, 1802) proveniente de zoocriadouro / Morphological description of heart and large vessels of the jacaré-do-pantanal (Caiman yacare Daudin, 1802) from a crocodile breeding Center

Com este estudo objetivou-se descrever os aspectos anatômicos e histológicos do coração do jacaré-do-pantanal (Caiman yacare), proveniente de zoocriadouro. Para tanto, estudou-se 13 exemplares da espécie, os quais foram perfundidos, conservados em solução de formaldeído a 10% e submetidos às técnicas anatômicas específicas. O coração foi separado e amostras foram colhidas e submetidas à avaliação histológica. Macroscopicamente o coração é tetracavitário, e além de dois átrios e dois ventrículos, apresenta uma estrutura denominada cone arterial, do qual emergem os vasos da base do coração. Foram identificadas duas aortas, direita e esquerda, sendo que a esquerda emerge do ventrículo direito e se comunica com o tronco sistêmico direito por meio do forame de Panizza. Histologicamente o coração possui epicárdio, miocárdio e endocárdio típicos. Concluímos que a histologia do coração, no jacaré-do-pantanal, é semelhante à de outras espécies de répteis. Contudo, anatomicamente apresenta particularidades importantes, as quais representam, possivelmente, adaptações que permitiram a perpetuação da espécie.(AU)

The aim of this study was to describe anatomical and histological aspects of the heart of Caiman yacare from a crocodile breeding center. For this purpose, we have chosen and further studied 13 specimens which were perfused and preserved in a 10% formaldehyde solution and they were subjected to the specific anatomical techniques. The heart was separated and samples were collected and submitted to the specific histological procedures. Macroscopically, the heart is four-chambered and besides two atria and two ventricles, has a structure called arterial cone from which the large vessels of the heart emerge. Two aortas, left and right, were identified. The left aorta emerges from the right ventricle and communicates with the systemic trunk through the Foramen of Panizza. From a histological point of view, the heart is typically composed of epicardium, myocardium and endocardium. According to these observations, it is assumed that the histology of the heart of "Jacaré-do-Pantanal" is similar to other species of reptiles. However, there are some anatomic particularities, which possibly represent the adaptations allowing the perpetuation of the species.(AU)

Descrição anatômica das artérias da base do coração da tartaruga verde (Chelonia mydas) / Anatomical description of the base of the artery of green turtle heart (Chelonia mydas)

Este estudo descreve anatomicamente as artérias da base do coração da tartaruga-verde (Chelonia mydas), proveniente do Centro de Estudos Marinhos da UFPR. Um exemplar da espécie foi perfundido e conservado em formaldeído 10% e submetido a técnicas anatômicas específicas. O coração da tartaruga possui três câmaras, dois átrios e um ventrículo. Deste último partem, da direita para a esquerda: o arco aórtico, de onde surge o tronco braquiocefálico que ramifica-se nas artérias subclávias e carótidas comuns; a aorta esquerda, que forma a anastomose com a direita, em seu sentido caudal; e o tronco pulmonar, que dá origem as artérias pulmonares. (AU)

This study describes anatomically the arteries at the base of the heart of the green turtle (Chelonia mydas), from the UFPR Marine Studies Center. A specimen of the species was perfused and preserved in 10% formaldehyde and subjected to specific anatomical techniques. The heart of the turtle has three chambers, two atria and one ventricle. Of this last depart, right to left: the aortic arch, where arises the innominate artery that branches off the subclavian and common carotid arteries; the left aorta, forming the anastomosis with the right, in the flow rate direction; and the pulmonary branch, which gives rise the pulmonary arteries. (AU)

MORFOLOGIA DO ENCÉFALO E NEUROTOXICOLOGIA EMBRIONÁRIA DO 2,4-D EM Tropidurus torquatus (SQUAMATA: TROPIDURIDAE)

Agrotóxicos são utilizados desde a antiguidade, porém, apenas no século passado teve início a produção sintética desses produtos, sendo o Brasil um dos maiores consumidores estas substâncias. O 2,4-D é um herbicida seletivo para ervas daninhas de folhas largas, amplamente utilizado em vários tipos de cultura. Em condições normais em animais, o 2,4-D é eliminado na urina, mas se a taxa de depuração renal for ultrapassada surgem efeitos adversos, inclusive neurotóxicos. Poucos estudos avaliam o efeito do 2,4-D sobre o desenvolvimento embrionário, sendo estes necessários pois organismos jovens são mais sensíveis que adultos. Com isso em mente visamos avaliar o efeito do 2,4-D DMA® 806 BR no desenvolvimento embrionário do encéfalo de Tropidurus torquatus. Também objetivamos descrever o encéfalo de Tropidurus torquatus como base para o estudo toxicológico. Esta espécie é abundante e por habitar lavouras pode contaminar-se com agrotóxicos naturalmente, fazendo-a um bom modelo animal. Animais adultos foram capturados e eutanaziados para a descrição macro- e microscópica do encéfalo. Fêmeas grávidas foram coletadas e mantidas em terrários até a oviposição. Os ovos foram distribuídos aleatoriamente em dois grupos, controle e 2,4-D. O substrato do grupo 2,4-D foi contaminado logo após a oviposição com uma dose correspondente à 1,5L p.c./ha, e no controle o substrato foi regado com a mesma quantidade de água destilada. De ambos os grupos foram coletados embriões nos dias 15, 30 e 60 após a oviposição. Os encéfalos dos embriões foram submetidos a inclusão em parafina para coloração com H.E. e foi estimado o volume do teto óptico através da técnica de estereologia, comparando-se os dois grupos. Foi observado um decréscimo do volume no grupo 2,4-D do dia 15, mas não foram encontradas diferenças do dia 30, sugerindo que o 2,4-D tem um leve efeito neurotóxico na dose recomendada, mas que pode ser reversível.

Pesticides have been used since antiquity, nevertheless synthetic products emerged only last century and currently Brazil is the biggest consumer of these substances. 2,4- D is a selective herbicide for broad-leaved weeds, used in several types of crops. Usually 2,4-D is eliminated in urine in animals, but when the renal clearance rate is exceeded, adverse effects, including neurotoxic ones, appear. Few studies evaluate the effect of 2,4-D on embryonic development, which is necessary because young organisms are more sensitive than adults. With this in mind we aim to evaluate the effect of 2,4-D DMA® 806 BR on the embryonic development of the brain of Tropidurus torquatus. We also aimed to describe the brain of Tropidurus torquatus as the basis for the toxicological study. This species is abundant and by inhabiting crops it can naturally contaminate itself with pesticides, making it a good animal model. Adult animals were captured and euthanized for the macro- and microscopic description of the brain. Pregnant females were collected and kept in terrariums until oviposition. Eggs were randomly distributed into two groups, control and 2,4-D. The substrate of the 2,4-D group was contaminated shortly after oviposition with a dose corresponding to 1.5L/ha, and the controls substrate was watered with the same quantity of water. Embryos were collected on days 15, 30 and 60 after oviposition. The embryos' brains were submitted to paraffin inclusion for H.E. staining and the volume of the optical tectum was estimated using stereology to compare both groups. A decrease in volume was observed in the 2,4-D group on day 15, but no differences were found on day 30, suggesting that 2,4-D has a mild neurotoxic effect at the recommended dose, which may be reversible.

Descrição anatômica das artérias da base do coração da tartaruga verde (Chelonia mydas) / Anatomical description of the base of the artery of green turtle heart (Chelonia mydas)

Este estudo descreve anatomicamente as artérias da base do coração da tartaruga-verde (Chelonia mydas), proveniente do Centro de Estudos Marinhos da UFPR. Um exemplar da espécie foi perfundido e conservado em formaldeído 10% e submetido a técnicas anatômicas específicas. O coração da tartaruga possui três câmaras, dois átrios e um ventrículo. Deste último partem, da direita para a esquerda: o arco aórtico, de onde surge o tronco braquiocefálico que ramifica-se nas artérias subclávias e carótidas comuns; a aorta esquerda, que forma a anastomose com a direita, em seu sentido caudal; e o tronco pulmonar, que dá origem as artérias pulmonares.

This study describes anatomically the arteries at the base of the heart of the green turtle (Chelonia mydas), from the UFPR Marine Studies Center. A specimen of the species was perfused and preserved in 10% formaldehyde and subjected to specific anatomical techniques. The heart of the turtle has three chambers, two atria and one ventricle. Of this last depart, right to left: the aortic arch, where arises the innominate artery that branches off the subclavian and common carotid arteries; the left aorta, forming the anastomosis with the right, in the flow rate direction; and the pulmonary branch, which gives rise the pulmonary arteries.

Mandibular osteosynthesis in a Boa constrictor snake / Osteossíntese mandibular em jiboia (Boa constrictor)

Tem-se observado um aumento do achado de determinados animais selvagens em áreas urbanas,em função das alterações ambientais provocadas pelo desmatamento e uso econômico de áreasnaturais. Isso causa o desaparecimento das presas usuais e força esses animais, inclusive serpentes, amigrar para áreas urbanizadas, tornando-os vulneráveis aos traumatismos provocados por agressões,atropelamentos e acidentes de captura. As fraturas de mandíbula e maxila são comuns em diversasespécies animais, representando cerca de 3 a 6% de todas as fraturas ósseas em cães e gatos. Otrauma mandibular ocorre geralmente em consequência de lutas, acidentes veiculares e manejoe/ou contenção inadequados. A mandíbula é um osso chato com diferenças em relação aos ossoslongos que devem ser levadas em consideração para o sucesso do tratamento, e a necessidade demanutenção da oclusão e a cobertura muscular mínima são fatores que influenciam a definiçãodo melhor método de redução. Entre os métodos de estabilização se destacam a utilização de fiometálico, pino intramedular, fixador esquelético externo, placa de compressão dinâmica e resinaacrílica. A utilização de placas ósseas convencionais é eficiente, mas está relacionada a diversascomplicações, tais como a necessidade de elevação da musculatura para sua aplicação e alto riscode lesão às estruturas mandibulares. Este artigo descreve os resultados satisfatórios da aplicação deplaca de compressão dinâmica e parafusos na redução de fratura mandibular em uma serpente jiboia(Boa constrictor) do sexo feminino, com peso de 8,0 kg e comprimento de 1,80 m, atendida naFundação RIOZOO (Rio de Janeiro, RJ, Brasil).(AU)

Nowadays are observed an increase in the finding of certain wild animals in urban areas, dueto environmental changes caused by deforestation and economic use of natural areas. It causesdisappearance of usual prey and forces these animals, including snakes, to migrate to urban areas,becoming vulnerable to injuries caused by aggressions, car accidents and capture. Mandibular andmaxillar fractures are common in many animal species, representing about 3-6% of all bone fracturesin dogs and cats. Mandibular trauma usually occurs as a result of fights, car accidents and improperhandling and/or restraint, and fractures can be closed or open, clean or contaminated. The jaw is aflat bone with differences from the long bones that should be taken into consideration for successfultreatment, being minimal muscle coverage and need to maintain occlusion factors that influence thedefinition of the best ostheosynthesis method. The methods of stabilization include using intramedullarypins, wires, external skeletal fixation, bone plate, and acrylic resin. Conventional bone plates are efficientbut related to some complications, such as the necessity of muscular elevation and high risk of injuriesto mandibular structures. This article describes the successful results of the application of plate andscrews in the ostheosynthesis of a mandibular fracture in a female Boa constrictor snake with weight of8.0 kg and length of 1.80 m, at the RIOZOO Foundation (Rio de Janeiro, RJ, Brazil).(AU)

Determinação das concentrações plasmáticas de proteínas e metabólitos de cascavéis em cativeiro / Determination of proteins and metabolites concentrations in plasma of rattlesnakes in captivity

Para determinar as concentrações plasmáticas de proteínas e metabólitos de cascavéis em cativeiro, foram utilizadas 60 serpentes adultas, sendo 30 machos e 30 fêmeas. O sangue foi coletado através de punção do seio venoso paravertebral cervical e armazenado em tubos com heparina. As análises bioquímicas foram processadas colorimetricamente em Analisador Automático de Bioquímica Chemwell (Awareness Technology®, Inc). Foram calculadas as médias e desvios padrão dos seguintes constituintes: proteínas totais, albumina, globulinas, relação albumina/globulinas, ácido úrico, creatinina, ureia, colesterol, colesterol HDL e triglicérides. Os valores obtidos foram semelhantes aos descritos na literatura para repteis e serpentes, sendo as diferenças observadas provavelmente decorrentes da diferença entre espécies, clima, estação do ano e metodologia utilizada. Não houve diferenças significativas entre machos e fêmeas para os parâmetros estudados. Estes resultados podem ser úteis no estabelecimento de valores de referência para planos de conservação destes ofídios em cativeiro.(AU)

For determining plasma concentrations of proteins and metabolites of rattlesnakes in captivity, 60 adult snakes, 30 males and 30 females were used. Blood was collected by puncture of the cervical paravertebral venous sinus and stored in tubes with heparin. Biochemical analyzes were colorimetrically processed using an Automatic Biochemistry Analyzer Chemwell (Awareness Technology®, Inc). The mean and standard deviation were calculated for the following constituents: total protein, albumin, globulin, albumin/globulin ratio, uric acid, creatinine, urea, cholesterol, HDL cholesterol and triglycerides. The values were similar to those previously reported for reptiles and snakes, with the differences observed probably due to the difference between species, climate, season and the methodology used. There were no significant differences between males and females for the parameters studied. These results may be useful in establishing normal biochemical values for conservation plans for these snakes in captivity.(AU)

Histologia e histoquímica do tubo digestório de Phrynops geoffroanus (Testudines, Chelidae) / Histology and histochemistry of the digestive tract of Phrynops geoffroanus (Testudines, Chelidae)

Phrynops geoffroanus is the omnivorous chelonian with widest geographical distribution in South America. This work describes the histology and histochemistry of the digestive tube of this species, to relate the characteristics of these organs to the species' eating habit. The esophagus, stomach and intestine of four specimens were fixed in 10% formal and embedded in paraffin by routine histological techniques. Afterwards, 5-µm sections were stained with hematoxylin-eosin (HE), periodic acid-Schiff (PAS) and alcian blue (AB) pH 0.4 and 2.5. The tube is formed by the mucosa, submucosa, muscular and adventitia or serosa layers. The mucosa layer of the esophagus and stomach is lined with a simple cylindrical epithelium with mucus-secreting cells, where are intraepithelial glands inserted in the portion of the esophagus and gastric fossettes emptying into glands in the stomach. The stomach is divided into an anterior, middle and posterior region, according to the depth of the fossettes and the concentration of gastric glands. The intestine is lined by a simple cylindrical epithelium with striated boundaries and goblet cells and is divided into an anterior and posterior regions, according to the pattern of folds of the mucosa layer and the number of goblet cells. Reactivity to PAS and AB is observed in the entire tube. Smooth muscle fibers are present in mucosa layer of all the segments. The muscular layer is formed by two sub-layers of smooth muscle, except for the posterior stomach. This study will help understanding of the digestive physiology of P. geoffroanus and provide data for comparative analyzes with other turtles.(AU)

Phrynops geoffroanus é o quelônio onívoro com mais ampla distribuição geográfica na América do Sul. Este trabalho descreve a histologia e histoquímica do tubo digestório desta espécie, relacionando as características dos órgãos com seu hábito alimentar. O esôfago, estômago e intestino de quatro espécimes foram fixados em formol 10% e incluídos em parafina por técnica histológica de rotina. Depois, cortes de 5 µm de espessura foram corados com hematoxilina-eosina (HE), ácido periódico de Schiff (PAS) e alcian blue (AB) pH 0.4 e 2.5. O tubo é formado pelas camadas mucosa, submucosa, muscular e adventícia ou serosa. A mucosa do esôfago e do estômago é revestida pelo epitélio simples cilíndrico com células mucossecretoras, onde estão inseridas glândulas intraepiteliais na porção do esôfago e fossetas gástricas desembocando em glândulas no estômago. O estômago divide-se em anterior, médio e posterior, de acordo com a profundidade das fossetas e a concentração de glândulas gástricas. O intestino é revestido pelo epitélio simples cilíndrico com borda estriada e células caliciformes e divide-se em anterior e posterior, de acordo com o padrão de dobramentos da mucosa e o número de células caliciformes. Reatividade ao PAS e AB é observada em todo o tubo. Fibras musculares lisas estão presentes na camada mucosa de todos os segmentos. A camada muscular é formada por duas subcamadas de músculo liso, exceto na porção posterior do estômago. Este estudo ajudará no entendimento da fisiologia digestiva da espécie investigada e fornecerá dados para análises comparativas com outros quelônios.(AU)

Histologia e histoquímica do tubo digestório de Phrynops geoffroanus (Testudines, Chelidae) / Histology and histochemistry of the digestive tract of Phrynops geoffroanus (Testudines, Chelidae)

Phrynops geoffroanus is the omnivorous chelonian with widest geographical distribution in South America. This work describes the histology and histochemistry of the digestive tube of this species, to relate the characteristics of these organs to the species' eating habit. The esophagus, stomach and intestine of four specimens were fixed in 10% formal and embedded in paraffin by routine histological techniques. Afterwards, 5-µm sections were stained with hematoxylin-eosin (HE), periodic acid-Schiff (PAS) and alcian blue (AB) pH 0.4 and 2.5. The tube is formed by the mucosa, submucosa, muscular and adventitia or serosa layers. The mucosa layer of the esophagus and stomach is lined with a simple cylindrical epithelium with mucus-secreting cells, where are intraepithelial glands inserted in the portion of the esophagus and gastric fossettes emptying into glands in the stomach. The stomach is divided into an anterior, middle and posterior region, according to the depth of the fossettes and the concentration of gastric glands. The intestine is lined by a simple cylindrical epithelium with striated boundaries and goblet cells and is divided into an anterior and posterior regions, according to the pattern of folds of the mucosa layer and the number of goblet cells. Reactivity to PAS and AB is observed in the entire tube. Smooth muscle fibers are present in mucosa layer of all the segments. The muscular layer is formed by two sub-layers of smooth muscle, except for the posterior stomach. This study will help understanding of the digestive physiology of P. geoffroanus and provide data for comparative analyzes with other turtles.

Phrynops geoffroanus é o quelônio onívoro com mais ampla distribuição geográfica na América do Sul. Este trabalho descreve a histologia e histoquímica do tubo digestório desta espécie, relacionando as características dos órgãos com seu hábito alimentar. O esôfago, estômago e intestino de quatro espécimes foram fixados em formol 10% e incluídos em parafina por técnica histológica de rotina. Depois, cortes de 5 µm de espessura foram corados com hematoxilina-eosina (HE), ácido periódico de Schiff (PAS) e alcian blue (AB) pH 0.4 e 2.5. O tubo é formado pelas camadas mucosa, submucosa, muscular e adventícia ou serosa. A mucosa do esôfago e do estômago é revestida pelo epitélio simples cilíndrico com células mucossecretoras, onde estão inseridas glândulas intraepiteliais na porção do esôfago e fossetas gástricas desembocando em glândulas no estômago. O estômago divide-se em anterior, médio e posterior, de acordo com a profundidade das fossetas e a concentração de glândulas gástricas. O intestino é revestido pelo epitélio simples cilíndrico com borda estriada e células caliciformes e divide-se em anterior e posterior, de acordo com o padrão de dobramentos da mucosa e o número de células caliciformes. Reatividade ao PAS e AB é observada em todo o tubo. Fibras musculares lisas estão presentes na camada mucosa de todos os segmentos. A camada muscular é formada por duas subcamadas de músculo liso, exceto na porção posterior do estômago. Este estudo ajudará no entendimento da fisiologia digestiva da espécie investigada e fornecerá dados para análises comparativas com outros quelônios.

Determinação das concentrações plasmáticas de proteínas e metabólitos de cascavéis em cativeiro

Abstract: For determining plasma concentrations of proteins and metabolites of rattlesnakes in captivity, 60 adult snakes, 30 males and 30 females were used. Blood was collected by puncture of the cervical paravertebral venous sinus and stored in tubes with heparin. Biochemical analyzes were colorimetrically processed using an Automatic Biochemistry Analyzer Chemwell (Awareness Technology®, Inc). The mean and standard deviation were calculated for the following constituents: total protein, albumin, globulin, albumin/globulin ratio, uric acid, creatinine, urea, cholesterol, HDL cholesterol and triglycerides. The values were similar to those previously reported for reptiles and snakes, with the differences observed probably due to the difference between species, climate, season and the methodology used. There were no significant differences between males and females for the parameters studied. These results may be useful in establishing normal biochemical values for conservation plans for these snakes in captivity.

Resumo: Para determinar as concentrações plasmáticas de proteínas e metabólitos de cascavéis em cativeiro, foram utilizadas 60 serpentes adultas, sendo 30 machos e 30 fêmeas. O sangue foi coletado através de punção do seio venoso paravertebral cervical e armazenado em tubos com heparina. As análises bioquímicas foram processadas colorimetricamente em Analisador Automático de Bioquímica Chemwell (Awareness Technology®, Inc). Foram calculadas as médias e desvios padrão dos seguintes constituintes: proteínas totais, albumina, globulinas, relação albumina/globulinas, ácido úrico, creatinina, ureia, colesterol, colesterol HDL e triglicérides. Os valores obtidos foram semelhantes aos descritos na literatura para repteis e serpentes, sendo as diferenças observadas provavelmente decorrentes da diferença entre espécies, clima, estação do ano e metodologia utilizada. Não houve diferenças significativas entre machos e fêmeas para os parâmetros estudados. Estes resultados podem ser úteis no estabelecimento de valores de referência para planos de conservação destes ofídios em cativeiro.

Avaliação de técnicas de diluição, preservação seminal e inseminação artificial em jararacas-ilhoas (Bothrops insularis).

RESUMO SILVA, K. B. Avaliação de técnicas de diluição, preservação seminal e inseminação artificial em jararacas-ilhoas (Bothrops insularis). [Semen preservation and artificial insemination protocols in golden lancehead (Bothrops insularis)]. 2018. 71 f. Tese (Doutorado em Ciências) Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia, Universidade de São Paulo, 2018. A jararaca-ilhoa (Bothrops insularis) é uma serpente endêmica e criticamente ameaçada de extinção que atualmente possui uma população estimada de 2.100 indivíduos restritos a uma única ilha no Estado de São Paulo, a Ilha da Queimada Grande. Esta vulnerabilidade levou à criação de um programa de reprodução em cativeiro para a espécie que, entre outras ações, propõe o desenvolvimento e aplicação de biotécnicas reprodutivas, tais como avaliação e preservação seminal e inseminação artificial. Este trabalho teve como objetivos: (1) avaliar três diluidores (HAM F-10, ACP-120® e BWW) em três diluições diferentes (1:100, 1:200 e 1:500 L) e determinar qual o melhor protocolo de incubação para o sêmen de B. insularis; (2) avaliar um protocolo de inseminação artificial na espécie e (3) avaliar três diferentes sistemas de refrigeração (geladeira, banho-maria em geladeira e isopor tipo BotuFLEX®)a fim de determinar qual deles é capaz de preservar melhor a motilidade do sêmen da jararaca-ilhoa por um período de até 48 h. Verificamos que as amostras de sêmen diluídas com o meio HAM F-10 na diluição 1:100 L apresentaram os melhores resultados para motilidade e motilidade progressiva e, desta forma, foi o protocolo de diluição seminal eleito para a inseminação artificial realizada. O protocolo de inseminação artificial foi realizando de maneira segura e minimamente invasiva nos animais, no entanto, até o momento não houve detecção de prenhez nas fêmeas inseminadas. A refrigeração se mostrou um método eficiente para a manutenção da motilidade e motilidade progressiva do sêmen de B. insularis por até 48 h pois, no período de duração do experimento, não foi verificada queda significativa nos parâmetros avaliados em nenhum dos sistemas de refrigeração. Foi observada, ao longo deste trabalho, uma alta incidência de decapitações nos espermatozoides de boa parte dos machos, o que pode comprometer seriamente a fertilidade do plantel estudado. Acreditamos, com os resultados deste projeto, ter elucidado questões fundamentais acerca do melhor diluidor e diluição a ser utilizada na manipulação do sêmen de B. insularis, assim como ter demonstrado que protocolos de refrigeração seguros e versáteis são capazes de manter a motilidade seminal por até 48 h, permitindo a troca de material genético entre diferentes plantéis no Brasil ou até mesmo com a população nativa da Ilha da Queimada Grande. O conhecimento gerado a partir deste estudo também servirá como base para estudos que visem o estabelecimento e aprimoramento de outras biotécnicas reprodutivas e a criação, em um futuro breve, de um banco de germoplasma da espécie. Palavras-chave: Répteis. Serpentes. Reprodução. Espermatozoide. Conservação

ABSTRACT SILVA, K. B. Semen preservation and artificial insemination protocols in golden lancehead (Bothrops insularis). [Avaliação de técnicas de diluição, preservação seminal e inseminação artificial em jararacas-ilhoas (Bothrops insularis) ]. 2018. 71 f. Tese (Doutorado em Ciências) Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia, Universidade de São Paulo, 2018. The golden lancehead (Bothrops insularis) is a venomous pitviper endemic from Ilha da Queimada Grande, a small island located 40 miles off the coast of southeastern Brazil. Due to its small population (about 2000 individuals), highly restricted range, continuous decrease in habitat quality and illegal trading, B. insularis is currently listed as critically endangered in the IUCN Red List. As a consequence, efforts have been directed towards the development of a captive breeding program that involves both natural and assisted reproduction. Nonetheless, successful application of assisted reproductive technologies such as artificial insemination and semen cryopreservation in B. insularis requires a clear understanding of the reproductive physiology of this species, particularly aspects of sperm quality and production, and conservation. Thus, this study aims on: (1) determining which extenders (ACP-120, BWW and HAM-F10) and dilutions are better suited for maintenance of sperm motility; (2) testing an artificial insemination protocol in B. insularis maintained in captivity; (3) evaluating three different cooling systems (refrigerator, water bath on refrigerator and BotuFLEX®) to determine which one is able to preserve the semen motility of the golden lancehead for a period up to 48 hours. We found that semen samples diluted with HAM F-10 medium at a 1: 100L dilution had the best motility and progressive motility results. To date, no pregnancies have been detected in inseminated females. Therefore, further studies and the improvement of this protocol for the species are required. We observed that all three cooling methods work successfully, maintaining the motility and progressive semen motility without significant changes for 48h, which demonstrates versatility in the preservation and transportation of this material, including from field work. With our results, we have elucidated fundamental questions about both the best diluent and dilution to be used, as well as refrigeration systems that ensure the maintenance of semen motility up to 48 hours. This is crucial for allowing the exchange of genetic material between different Brazilian Institutions and the income of material from Ilha da Queimada Grande, what may minimize problems due to consanguinity, besides serving as a basis for future studies on seminal cryopreservation protocols and the creation of germplasm banks. Key words: snakes, reproduction, preservation, semen, reptile.

Reproductive indices in natural nests of giant Amazon river turtles Podocnemis expansa (Schweigger, 1812) (Testudines, Podocnemididae) in the Environmental Protection Area Meanders of the Araguaia river / Índices reprodutivos em ninhos naturais de tartarugas da Amazônia Podocnemis expansa (Schweigger, 1812) (Testudines, Podocnemididae), na Área de Proteção Ambiental Meandros do Rio Araguaia

A count was made of unhatched eggs and hatchling live and dead Podocnemis expansa turtles in 327 natural nests located on the beaches of the Environmental Protection Area (EPA) Meanders of the Araguaia River, to determine the percentage of hatching (94.63 percent), non-hatching (5.37 percent), survival (94.24 percent) and hatchling mortality (5.76 percent), and the average percentage of dead hatchlings during the 15 days in the nursery (0.97 percent). The mean number of hatchlings per nest was determined from the sum of the number of live and dead hatchlings divided by the total number of nests, while the mean number of eggs per nest was determined from the sum of live and dead hatchlings and unhatched eggs divided by the number of nests. These calculations yielded the following mean values: live hatchlings (88.98 ± 23.94), dead hatchlings (0.37 ± 0.93), unhatched eggs (5.07 ± 9.57), and total number of eggs (94.42 ± 21.30). The reproductive efficiency of the wild population of P. expansa can be affected by many environmental factors such as temperature, humidity and rainfall. In addition, man-made factors like the presence of chemicals in the water and the potential for infectious disease also have significant impact. The reproductive indices data obtained from this study are indispensable for future investigations of hatching anomalies.

Realizou-se a contagem dos ovos não eclodidos, dos filhotes vivos e mortos de Podocnemis expansa oriundos de 327 ninhos naturais, localizados nas praias da Área de Proteção Ambiental (APA) - Meandros do Rio Araguaia, onde se determinou a porcentagem de eclosão dos ovos (94,63 por cento); não eclosão (5,37 por cento); sobrevivência (94,24 por cento) e mortalidade dos filhotes (5,76 por cento), e a média de filhotes mortos durante os 15 dias no berçário (0,97 por cento). A média do total de filhotes por ninho foi determinada pela soma do número de filhotes vivos e mortos divididos pelo total de ninhos, enquanto que a média do total de ovos por ninho foi determinada pela soma do número de filhotes vivos, mortos e ovos não eclodidos divididos pelo total de ninhos. Com isso, obtiveram-se os valores médios do número de filhotes vivos (88,98 ± 23,94); mortos (0,37 ± 0,93); ovos não eclodidos (5,07 ± 9,57), e total de ovos (94,42 ± 21,30). A eficiência reprodutiva da população selvagem de P. expansa pode ser afetada por muitos fatores ambientais, como temperatura, umidade e precipitação. Além disso, fatores influenciados pelo homem, como a presença de produtos químicos na água e a possibilidade de doenças infecciosas, também têm impacto significativo. Os dados dos índices reprodutivos obtidos neste estudo são indispensáveis para futuras investigações de anomalias de incubação.