Tomato fruit blotch virus cytopathology strengthens evolutionary links between plant blunerviruses and insect negeviruses

Tomato fruit blotch virus (ToFBV) is a blunervirus that causes blotches on mature tomato (Solanum lycopersicon L.) fruits in Italy and Australia in 2020, and was newly detected in Brazil. A cytological study on pericarp tissues from the blotched areas of infected fruits collected in Brasília, Brazil, revealed characteristic cell alterations. Small and slender bacilliform particles (ca. 25 nm wide × 100 nm long) were found accumulating in the perinuclear space and the lumen of the endoplasmic reticulum of the epidermis, peri- and mesocarp cells. No viroplasm-like inclusion was observed either in the nuclei or in the cytoplasm. Such cell alterations are reminiscent of those described in cultured mosquito cells infected by negeviruses, an unofficial group of insect viruses. Negeviruses and some other arthropod-borne viruses shared a common ancestor in the RdRp gene with kitavirids, including blunerviruses. Although additional detailed studies are required, we show evidence that ToFBV particles are enveloped and bacilliform, and that such similarity in cytopathology seems to support the evolutionary relationship between plant kitavirids and insect negeviruses.(AU)

Ocurrence of pepper yellow mosaic virus and cucumber mosaic virus on Capsicum chinense in the state of Amazonas, Brazil / Ocorrência do pepper yellow mosaic virus e cucumber mosaic virus em Capsicum chinense no estado do Amazonas, Brasil

The habanero chilli pepper, Capsicum chinense is an important crop in the Amazon Basin, mainly grown by small-scale producers. Capsicum chinense plants in an experimental field in the northern Brazilian state of Amazonas were found exhibiting characteristic symptoms of viral infection. Leaf sap from symptomatic plants examined under a transmission electron microscope revealed the presence of elongated flexuous particles and isometric particles. Using molecular assays, the viruses were identified as pepper yellow mosaic virus (PepYMV) and cucumber mosaic virus (CMV). Aphids, identified as Aphis gossypii, were found colonizing the C. chinense plants in the field and may be the vector for both PepYMV and CMV. We report the first occurrence of these viruses infecting C. chinense in the state of Amazonas.

A pimenta-de-cheiro, Capsicum chinense é uma cultura importante na Bacia Amazônica, cultivada principalmente por pequenos produtores. Plantas de C. chinense em um campo experimental localizado no norte do estado brasileiro do Amazonas, foram encontradas apresentando sintomas característicos de infecção viral. Extratos de amostras de folhas sintomáticas examinados ao microscópio eletrônico de transmissão revelaram a presença de partículas alongadas e flexuosas e de partículas isométricas. Análises moleculares permitiram identificar a presença do pepper yellow mosaic virus (PepYMV) e do cucumber mosaic virus (CMV). Pulgões, identificados como Aphis gossypii foram encontrados colonizando pimenteiras-de-cheiro neste campo experimental e podem representar o provável vetor de PepYMV e CMV. Este trabalho relata a primeira ocorrência desses vírus infectando C. chinense no estado do Amazonas.

Ocurrence of pepper yellow mosaic virus and cucumber mosaic virus on Capsicum chinense in the state of Amazonas, Brazil / Ocorrência do pepper yellow mosaic virus e cucumber mosaic virus em Capsicum chinense no estado do Amazonas, Brasil

The habanero chilli pepper, Capsicum chinense is an important crop in the Amazon Basin, mainly grown by small-scale producers. Capsicum chinense plants in an experimental field in the northern Brazilian state of Amazonas were found exhibiting characteristic symptoms of viral infection. Leaf sap from symptomatic plants examined under a transmission electron microscope revealed the presence of elongated flexuous particles and isometric particles. Using molecular assays, the viruses were identified as pepper yellow mosaic virus (PepYMV) and cucumber mosaic virus (CMV). Aphids, identified as Aphis gossypii, were found colonizing the C. chinense plants in the field and may be the vector for both PepYMV and CMV. We report the first occurrence of these viruses infecting C. chinense in the state of Amazonas.(AU)

A pimenta-de-cheiro, Capsicum chinense é uma cultura importante na Bacia Amazônica, cultivada principalmente por pequenos produtores. Plantas de C. chinense em um campo experimental localizado no norte do estado brasileiro do Amazonas, foram encontradas apresentando sintomas característicos de infecção viral. Extratos de amostras de folhas sintomáticas examinados ao microscópio eletrônico de transmissão revelaram a presença de partículas alongadas e flexuosas e de partículas isométricas. Análises moleculares permitiram identificar a presença do pepper yellow mosaic virus (PepYMV) e do cucumber mosaic virus (CMV). Pulgões, identificados como Aphis gossypii foram encontrados colonizando pimenteiras-de-cheiro neste campo experimental e podem representar o provável vetor de PepYMV e CMV. Este trabalho relata a primeira ocorrência desses vírus infectando C. chinense no estado do Amazonas.(AU)

Anatomical and biochemical changes associated with thedevelopment and germination of Araucaria angustifolia seeds

This study aimed at assessing the cell cycle, and anatomical and biochemical changes that the embryonic axis of Araucaria angustifolia undergoes during development, focusing on the maturation stage. During all development, cells exhibited intense metabolic activity with an abundance of mitochondria, lipid bodies, and vacuolated cells. The continued accumulation of starch and protein was observed by LM and TEM and indicated by spectra of FTIR. Cell differentiation of the procambium was observed with a thickening of the cell wall and the formation of resiniferous ducts. At Stage III and IV, cells exhibited structural changes such as altered or elongated mitochondria and presence of plastoglobules. These results suggest that there is a gradual transition from developmental metabolism to germination metabolism. Such changes can contribute to the rapid germination of seeds right after their dispersion, making it an ecological strategy to reduce post-dispersal exposure to predators and to avoid damage from reduced moisture.

Anatomical and biochemical changes associated with thedevelopment and germination of Araucaria angustifolia seeds

This study aimed at assessing the cell cycle, and anatomical and biochemical changes that the embryonic axis of Araucaria angustifolia undergoes during development, focusing on the maturation stage. During all development, cells exhibited intense metabolic activity with an abundance of mitochondria, lipid bodies, and vacuolated cells. The continued accumulation of starch and protein was observed by LM and TEM and indicated by spectra of FTIR. Cell differentiation of the procambium was observed with a thickening of the cell wall and the formation of resiniferous ducts. At Stage III and IV, cells exhibited structural changes such as altered or elongated mitochondria and presence of plastoglobules. These results suggest that there is a gradual transition from developmental metabolism to germination metabolism. Such changes can contribute to the rapid germination of seeds right after their dispersion, making it an ecological strategy to reduce post-dispersal exposure to predators and to avoid damage from reduced moisture.(AU)

Pathological Investigation of Infectious Diseases In Free-Ranging Black-Tufted Marmosets (Callitrix penicillata) and Implications For Public Health And Conservation in Brazil

Resumo em português: Várias infecções emergentes que se tornaram epidêmicas em humanos tiveram origem em não humanos primatas (PNHs). Esses eventos de transmissão de doenças podem ser causados por alterações feitas pelo homem para habitats animais e são essenciais para o ponto de vista de Saúde Única. Agentes etiológicos de doenças infecciosas fatais doenças podem ser diagnosticadas testes laboratoriais de tecidos, uma vez que tal necropsia é fundamental para melhorar reconhecimento de doenças infecciosas emergentes e reemergentes. A maioria dos estudos de doenças infecciosas doenças em PNHs são baseadas em levantamentos sorológicos ou moleculares, há dados limitados sobre doenças infecciosas e doenças como causa de óbitos em PNHs no Brasil. Doença infecciosa fatais natural como causa de óbito foram investigados no Laboratório de Patologia Veterinária da Universidade de Brasília como integrante do Programa Nacional de Vigilância das Epizootias de Febre Amarela na PNH do Brasil Ministério da Saúde. Esta investigação levou à identificação de outras doenças infecciosas fatais em NHPs; aqui nós descrevemos, a partir de 1.042 casos recuperados, achados histopatológicos, imunohistoquímicos, diagnóstico molecular e investigação epidemiológica da infecção fatal por Leptospira interrogans em um sagui-de-tufo-preto (Callithrix penicilatta) urbanizado, de vida livre, no Brasil. Leptospirose fatal em PNHs é rara, este é o primeiro relato de leptospirose fatal em um PNH de vida livre descrevendo achados essenciais para facilitar o diagnóstico post- mortem de leptospirose e compreensão da doença no PNH. A aplicação da perspectiva Saúde Única leva em consideração o possível papel dos NHPs na epidemiologia e dinâmica de transmissão de humanos e animais leptospirose e potencial de transmissaão de patógenos na interface humano-PNH em áreas antropizadas. Os PNH são importantes sentinelas de algumas doenças zoonóticas no Brasil, e esses animais também podem indicam riscos de leptospirose no meio ambiente. Outro aspecto da perspectiva de Uma Saúde é zoonoses reversas, onde doenças humanas podem se espalhar para populações vulneráveis de vida selvagem. Isto é uma preocupação para as populações de saguis. Aqui, descrevemos o clínico-patológico achados clínico-patológicos, imunohistoquímicos, moleculares e ultraestruturais de infecção fatal pelo vírus herpes simplex tipo 1 (HSV-1) em 13 saguis-detufo-preto de vida livre áreas urbanizadas, no Brasil. Meningoencefalite necrotizante, glossite ulcerativa, e hepatite necrotizante com inclusões virais intranucleares foram caracteristicas da doença. Antígenos de HSV-1 foram localizados por imunohistoquímica e partículas virais por transmissão de elétrons microscopia dentro das células neurais, epitélio da língua e hepatócitos. O teste de PCR confirmou o HSV-1 em todos os casos. Embora quase todos os relatos anteriores de infecção por HSV-1 em saguis sejam de animais de cativeiro, nossos resultados destacam o risco de transmissão de doenças infecciosas interespécies noainterface humanoanimal em ambientes antropizados e enfatiza a importância de uma abordagem de Saúde Única para vigilância de doenças infecciosas nesses locais.

Resumo na língua estrangeira: Several emerging infections that became epidemic in humans have originated in non-human primates (NHPs). These disease transmission events can be driven by man-made alterations to animal habitats and are essential for a One Health viewpoint. Etiologic agents of fatal infectious diseases can be diagnosed laboratory testing of tissues, as such necropsy is key for improving recognition of emerging and re-emerging infectious diseases. Most of the studies of infectious diseases in NHPs are based on serological or molecular assays, there are limited data on infectious diseases as the cause of deaths in NHPs in Brazil. Natural fatal infectious diseases as a cause of death were investigated in the Veterinary Pathology Laboratory at the University of Brasilia as part of the National Surveillance Program of Yellow Fever Epizootics in NHP of the Brazilian Ministry of Health. This investigation lead to the identification of other fatal infectious diseases in NHPs; herein we describe, from 1,042 cases retrieved, histopathological, immunohistochemical, molecular diagnosis, and epidemiological investigation of fatal Leptospira interrogans infection in an urbanized, freeranging, black-tufted marmoset (Callithrix penicilatta) in Brazil. Fatal leptospirosis in NHPs is rare, this is the first report of fatal leptospirosis in a free-ranging NHP describing findings essential to facilitate the postmortem diagnosis of leptospirosis and understanding the disease in NHP. Applying the One Health perspective brings into consideration the possible role of NHPs in the epidemiology and transmission dynamics of human and animal leptospirosis, and potential of pathogen spillover at the human-NHP interface in anthropized areas. NHP are important sentinels for some zoonotic diseases in Brazil, and these animals could also indicate leptospirosis risks in the environment. Another aspect on the One Health perspective is reverse zoonoses, where human diseases can be spread to vulnerable wildlife populations. This is a concern for marmoset populations. Herein we describe the clinicopathological clinicopathological, immunohistochemical, molecular, and ultrastructural findings of fatal human herpes simplex virus type 1 (HSV-1) infection in 13 urbanized, free-ranging, blacktufted marmosets (Callithrix penicilatta) in Brazil. Necrotizing meningoencephalitis, ulcerative glossitis, and necrotizing hepatitis with intranuclear viral inclusions were hallmarks of the disease. We localized HSV-1 antigens by immunohistochemistry and viral particles by transmission electron microscopy within neural cells, tongue epithelium, and hepatocytes. PCR testing confirmed HSV1 in all cases. While nearly all prior reports of HSV-1 infection in marmosets are from captive animals, our findings highlight the risk of interspecies infectious disease transmission at the human-animal interface in anthropized environments and emphasize the importance of a One Health approach to infectious disease surveillance in these settings.

Hiperplasia em túnicas de artérias coronárias de beijupirás criados em sistema offshore / Hyperplasia in tunics of coronary arteries in beijupirá farmed in offshore system

As lesões coronarianas já foram relatadas em espécies de peixes anádromos, com características semelhantes às observadas em aterosclerose humana, mas não em peixes cultivados sem interferência de padrões reprodutivos. Objetivou-se descrever lesões coronarianas em beijupirá (Rachycentron canadum) criado em sistema offshore, em 54 exemplares coletados ao longo do cultivo de oito meses. Amostras de tecido cardíaco de alevinos e juvenis foram submetidas à análise histopatológica e à microscopia eletrônica de transmissão (MET), para visualização de lesões coronarianas, sendo as lâminas histológicas coradas pela técnica de hematoxilina-eosina, ácido periódico de Schiff, alcian blue e reticulina de Gomori. Exames realizados pela fotomicroscopia de luz evidenciaram lesões arteriais caracterizadas por hiperplasia das túnicas íntima e média de artérias coronárias em, respectivamente, 29,63% e 79,63% dos animais, com redução do lúmen arterial. Na MET, foram observadas alterações na estrutura das coronárias com espessamento do endotélio e membrana basal, proliferação de fibroblastos e fibras colágenas, com acúmulo de material lipídico subendotelial, resíduos celulares aderidos à membrana basal e vesículas pinocitóticas com presença de lisossomos isolados. Constatou-se que os peixes da espécie Rachycentron canadum criados em cativeiro desenvolvem lesão arterial do tipo crônica degenerativa inflamatória(AU)

The coronary lesions have been reported in species of anadromous fish with similar characteristics as those observed in human atherosclerosis, but not in farmed fish without interference of reproductive patterns. This study aimed to describe coronary lesions in beijupirá (Rachycentron canadum) farmed in an offshore system, in 54 specimens collected along an eight month cultivation period. Samples of heart tissue of fry and juveniles were subjected to histopathological analysis and transmission electron microscopy (TEM) for visualization of coronary lesions, the histology slides were stained using hematoxylin-eosin, periodic acid Schiffh, alcian blue, and reticulin of Gomori. Examinations performed by light microscopy showed arterial lesions characterized by hyperplasia of the intima and media tunics, respectively in 29.63% and 79.63 % of the animals, with reduced lumen. In TEM changes in the structure of the coronary endothelium and thickening of the basement membrane, proliferation of fibroblasts and collagen fibers, with subendothelial accumulation of lipid material, cellular debris adhering to the basement membrane and presence of pinocytotics vesicles and isolated lysosomes were observed. It has been found that the Rachycentron canadum fish species farmed in captivity develop arterial lesion of the chronic inflammatory degenerative type(AU)

Alterações na morfologia e na viabilidade no desenvolvimento de embriões bovinos fecundados in vitro com sêmen contaminado experimentalmente à Escherichia coli produtora da toxina Shiga stx2 / Changes in morphology and viability on the development of bovine embryos in vitro fertilized with experimentally contaminated semen to Escherichia coli Shiga toxin producing stx2

O objetivo deste trabalho foi avaliar, por meio de microscopia óptica e eletrônica de transmissão, as alterações na morfologia e a viabilidade do desenvolvimento de embriões bovinos fecundados com sêmen contaminado experimentalmente à Escherichia coli produtora da toxina shiga stx2 (STEC). Para tanto, oócitos foram aspirados de ovários de vacas abatidas e selecionados para maturação in vitro. Após 20-24 horas de maturação, os oócitos foram divididos em 2 grupos. Sendo o primeiro grupo o controle (n = 418), fertilizado com sêmen testado e sem nenhum tipo de contaminante e o segundo, o grupo contaminado (n = 415), fertilizado com sêmen exposto a STEC. Cada sêmen foi tratado pela técnica de gradiente descontínuo de Percoll. Após o período de fecundação, os embriões foram avaliados quanto a sua morfologia e viabilidade, com o auxílio da microscopia óptica e eletrônica. Na ava liação morfológica, os oócitos fecundados com o sêmen contaminado apresentaram retração citoplasmática, falhas na divisão, assimetria de blastômeros, ooplasma granuloso, coloração castanho-escuro, formação de vacúolos, degeneração e rompimento da zona pelúcida. Essas alterações não foram observadas no grupo controle. A avaliação de todos oócitos incluídos mostrou taxas de clivagem de 70,3 e 52,8%, respectivamente, para embriões controle e contaminado (p = 0,0001). Após o 5° dia de desenvolvimento embrionário foram observadas 44,7% de mórulas no grupo controle e 22,4% no grupo contaminado, apresentando diferença significativa (p=0,0001). A presença da STEC interfere na taxa de clivagem dos embriões e também inviabiliza e provoca queda no desenvolvimento embrionário ao estádio de mórula, além de causar alterações morfológicas durante esse desenvolvimento.(AU)

The objective of this study was to evaluate by optical microscopy and transmission electron, changes in morphology and viability of the development of bovine embryos, fertilized with semen experimentally contaminated (STEC). Oocytes were aspirated from ovaries of slaughtered cows and the intact zona pellucida were selected and matured. After 20-24 hours of maturation, the oocytes were divided into 2 groups. The first, control group (n = 4l8),fertilized with semen tested and without any type of contaminant and the second, the infected group (n = 415), fertilized with sperm exposed to STEC. Both semen were treated by the technique of discontinuous Percoll gradient. After the period of fertilization, embryos were evaluated for their morphology and viability by optical and electron microscopy. In morphologic evaluation, the oocytes fertilized with contaminated semen showed cytoplasmic shrinkage, gaps in the division, asymmetry of blastomeres, ooplasm grainy, dark brown color, vacuoles formation, degeneration and zona pellucid disruption. These changes were not observed in the control group. The cleavage rate was 70.3 and 52.8%, respectively, for control and infected groups, significant differences (p = 0.0001). After the 5th day of embryonic development, where it was observed 44.7% of morula in the control group, and 22.4% in the contaminated group, showing a significant difference (p = 0.0001). The presence of STEC interferes with the cleavage rate of embryos and also prevents and causes a decline in embryonic development to the morula stage and cause morphological changes during this development.(AU)

Changes in morphology and viability on the development of bovine embryos in vitro fertilized with experimentally contaminated semen to Escherichia coli Shiga toxin producing stx2 / Alterações na morfologia e na viabilidade no desenvolvimento de embriões bovinos fecundados in vitro com sêmen contaminado experimentalmente à Escherichia coli produtora da toxina Shiga stx2

The objective of this study was to evaluate by optical microscopy and transmission electron, changes in morphology and viability of the development of bovine embryos, fertilized with semen experimentally contaminated (STEC). Oocytes were aspirated from ovaries of slaughtered cows and the intact zona pellucida were selected and matured. After 20-24 hours of maturation, the oocytes were divided into 2 groups. The first, control group (n = 418),fertilized with semen tested and without any type of contaminant and the second, the infected group (n =  415), fertilized with sperm exposed to STEC. Both semen were treated by the technique of discontinuous Percoll gradient. After the period of fertilization, embryos were evaluated for their morphology and viability by optical and electron microscopy. In  morphologic evaluation, the oocytes fertilized with contaminated semen showed cytoplasmic shrinkage, gaps in the division, asymmetry of blastomeres, ooplasm grainy, dark brown color, vacuoles formation, degeneration and zona pellucid disruption. These changes were not observed in the control group. The cleavage rate was 70.3 and 52.8%, respectively, for control and infected groups, significant differences (p = 0.0001). After the 5th day of embryonic development, where it was observed 44.7% of morula in the control group, and 22.4% in the contaminated group, showing a significant difference (p = 0.0001). The presence of STEC interferes with the cleavage rate of embryos and also prevents and causes a decline in embryonic development to the morula stage and cause morphological changes during this development.

O objetivo deste trabalho foi avaliar, por meio de microscopia óptica e eletrônica de transmissão, as alterações na morfologia e a viabilidade do desenvolvimento de embriões bovinos fecundados com sêmen contaminado experimentalmente à Escherichia coli produtora da toxina shiga stx2 (STEC). Para tanto, oócitos foram aspirados de ovários de vacas abatidas e selecionados para maturação in vitro. Após 20-24 horas de maturação, os oócitos foram divididos em 2 grupos. Sendo o primeiro grupo o controle (n = 418), fertilizado com sêmen testado e sem nenhum tipo de contaminante e o segundo, o grupo contaminado (n = 415), fertilizado com sêmen exposto a STEC. Cada sêmen foi tratado pela técnica de gradiente descontínuo de Percoll. Após o período de fecundação, os embriões foram avaliados quanto a sua morfologia e viabilidade, com o auxílio da microscopia óptica e eletrônica. Na avaliação morfológica, os oócitos fecundados com o sêmen contaminado apresentaram retração citoplasmática, falhas na divisão, assimetria de blastômeros, ooplasma granuloso, coloração castanho-escuro, formação de vacúolos, degeneração e rompimento da zona pelúcida. Essas alterações não foram observadas no grupo controle. A avaliação de todos oócitos incluídos mostrou taxas de clivagem de 70,3 e 52,8%, respectivamente, para embriões controle e contaminado (p = 0,0001). Após o 5º dia de desenvolvimento embrionário foram observadas 44,7% de mórulas no grupo controle e 22,4% no grupo contaminado, apresen tando diferença significativa (p=0,0001). A presença da STEC interfere na taxa de clivagem dos embriões e também inviabiliza e provoca queda no desenvolvimento embrionário ao estádio de mórula, além de causar alterações morfológicas durante esse desenvolvimento.

Alterações na morfologia e na viabilidade no desenvolvimento de embriões bovinos fecundados in vitro com sêmen contaminado experimentalmente à Escherichia coli produtora da toxina Shiga stx2

ABSTRACT:The objective of this study was to evaluate by optical microscopy and transmission electron, changes in morphology and viability of the development of bovine embryos, fertilized with semen experimentally contaminated (STEC). Oocytes were aspirated from ovaries of slaughtered cows and the intact zona pellucida were selected and matured. After 20-24 hours of maturation, the oocytes were divided into 2 groups. The first, control group (n = 4l8),fertilized with semen tested and without any type of contaminant and the second, the infected group (n = 415), fertilized with sperm exposed to STEC. Both semen were treated by the technique of discontinuous Percoll gradient. After the period of fertilization, embryos were evaluated for their morphology and viability by optical and electron microscopy. In morphologic evaluation, the oocytes fertilized with contaminated semen showed cytoplasmic shrinkage, gaps in the division, asymmetry of blastomeres, ooplasm grainy, dark brown color, vacuoles formation, degeneration and zona pellucid disruption. These changes were not observed in the control group. The cleavage rate was 70.3 and 52.8%, respectively, for control and infected groups, significant differences (p = 0.0001). After the 5th day of embryonic development, where it was observed 44.7% of morula in the control group, and 22.4% in the contaminated group, showing a significant difference (p = 0.0001). The presence of STEC interferes with the cleavage rate of embryos and also prevents and causes a decline in embryonic development to the morula stage and cause morphological changes during this development.

RESUMO:O objetivo deste trabalho foi avaliar, por meio de micros- copia óptica e eletrônica de transmissão, as alterações na morfologia e a viabilidade do desenvolvimento de embriões bovinos fecundados com sêmen contaminado experimentalmente à Escherichia coli produtora da toxina shiga stx2 (STEC). Para tanto, oócitos foram aspirados de ovários de vacas abatidas e selecionados para maturação in vitro. Após 20-24 horas de maturação, os oócitos foram divididos em 2 grupos. Sendo o primeiro grupo o controle (n = 418), fertilizado com sêmen testado e sem nenhum tipo de contaminante e o segundo, o grupo contaminado (n = 415), fertilizado com sêmen exposto a STEC. Cada sêmen foi tra tado pela técnica de gradiente descontínuo de Percoll. Após o período de fecundação, os embriões foram avaliados quanto a sua morfologia e viabilidade, com o auxílio da microscopia óptica e eletrônica. Na ava liação morfológica, os oócitos fecundados com o sêmen contaminado apresentaram retração citoplasmática, falhas na divisão, assimetria de blastômeros, ooplasma granuloso, coloração castanho-escuro, formação de vacúolos, degeneração e rompimento da zona pelúcida. Essas alte rações não foram observadas no grupo controle. A avaliação de todos oócitos incluídos mostrou taxas de clivagem de 70,3 e 52,8%, respec tivamente, para embriões controle e contaminado (p = 0,0001). Após o 5° dia de desenvolvimento embrionário foram observadas 44,7% de mórulas no grupo controle e 22,4% no grupo contaminado, apresen tando diferença significativa (p=0,0001). A presença da STEC interfere na taxa de clivagem dos embriões e também inviabiliza e provoca queda no desenvolvimento embrionário ao estádio de mórula, além de causar alterações morfológicas durante esse desenvolvimento.

Changes in morphology and viability on the development of bovine embryos in vitro fertilized with experimentally contaminated semen to Escherichia coli Shiga toxin producing stx2 / Alterações na morfologia e na viabilidade no desenvolvimento de embriões bovinos fecundados in vitro com sêmen contaminado experimentalmente à Escherichia coli produtora da toxina Shiga stx2

The objective of this study was to evaluate by optical microscopy and transmission electron, changes in morphology and viability of the development of bovine embryos, fertilized with semen experimentally contaminated (STEC). Oocytes were aspirated from ovaries of slaughtered cows and the intact zona pellucida were selected and matured. After 20-24 hours of maturation, the oocytes were divided into 2 groups. The first, control group (n = 418),fertilized with semen tested and without any type of contaminant and the second, the infected group (n =  415), fertilized with sperm exposed to STEC. Both semen were treated by the technique of discontinuous Percoll gradient. After the period of fertilization, embryos were evaluated for their morphology and viability by optical and electron microscopy. In  morphologic evaluation, the oocytes fertilized with contaminated semen showed cytoplasmic shrinkage, gaps in the division, asymmetry of blastomeres, ooplasm grainy, dark brown color, vacuoles formation, degeneration and zona pellucid disruption. These changes were not observed in the control group. The cleavage rate was 70.3 and 52.8%, respectively, for control and infected groups, significant differences (p = 0.0001). After the 5th day of embryonic development, where it was observed 44.7% of morula in the control group, and 22.4% in the contaminated group, showing a significant difference (p = 0.0001). The presence of STEC interferes with the cleavage rate of embryos and also prevents and causes a decline in embryonic development to the morula stage and cause morphological changes during this development.(AU)

O objetivo deste trabalho foi avaliar, por meio de microscopia óptica e eletrônica de transmissão, as alterações na morfologia e a viabilidade do desenvolvimento de embriões bovinos fecundados com sêmen contaminado experimentalmente à Escherichia coli produtora da toxina shiga stx2 (STEC). Para tanto, oócitos foram aspirados de ovários de vacas abatidas e selecionados para maturação in vitro. Após 20-24 horas de maturação, os oócitos foram divididos em 2 grupos. Sendo o primeiro grupo o controle (n = 418), fertilizado com sêmen testado e sem nenhum tipo de contaminante e o segundo, o grupo contaminado (n = 415), fertilizado com sêmen exposto a STEC. Cada sêmen foi tratado pela técnica de gradiente descontínuo de Percoll. Após o período de fecundação, os embriões foram avaliados quanto a sua morfologia e viabilidade, com o auxílio da microscopia óptica e eletrônica. Na avaliação morfológica, os oócitos fecundados com o sêmen contaminado apresentaram retração citoplasmática, falhas na divisão, assimetria de blastômeros, ooplasma granuloso, coloração castanho-escuro, formação de vacúolos, degeneração e rompimento da zona pelúcida. Essas alterações não foram observadas no grupo controle. A avaliação de todos oócitos incluídos mostrou taxas de clivagem de 70,3 e 52,8%, respectivamente, para embriões controle e contaminado (p = 0,0001). Após o 5º dia de desenvolvimento embrionário foram observadas 44,7% de mórulas no grupo controle e 22,4% no grupo contaminado, apresen tando diferença significativa (p=0,0001). A presença da STEC interfere na taxa de clivagem dos embriões e também inviabiliza e provoca queda no desenvolvimento embrionário ao estádio de mórula, além de causar alterações morfológicas durante esse desenvolvimento.(AU)

Alterações na morfologia e na viabilidade no desenvolvimento de embriões bovinos fecundados in vitro com sêmen contaminado experimentalmente à Escherichia coli produtora da toxina Shiga stx2

ABSTRACT:The objective of this study was to evaluate by optical microscopy and transmission electron, changes in morphology and viability of the development of bovine embryos, fertilized with semen experimentally contaminated (STEC). Oocytes were aspirated from ovaries of slaughtered cows and the intact zona pellucida were selected and matured. After 20-24 hours of maturation, the oocytes were divided into 2 groups. The first, control group (n = 4l8),fertilized with semen tested and without any type of contaminant and the second, the infected group (n = 415), fertilized with sperm exposed to STEC. Both semen were treated by the technique of discontinuous Percoll gradient. After the period of fertilization, embryos were evaluated for their morphology and viability by optical and electron microscopy. In morphologic evaluation, the oocytes fertilized with contaminated semen showed cytoplasmic shrinkage, gaps in the division, asymmetry of blastomeres, ooplasm grainy, dark brown color, vacuoles formation, degeneration and zona pellucid disruption. These changes were not observed in the control group. The cleavage rate was 70.3 and 52.8%, respectively, for control and infected groups, significant differences (p = 0.0001). After the 5th day of embryonic development, where it was observed 44.7% of morula in the control group, and 22.4% in the contaminated group, showing a significant difference (p = 0.0001). The presence of STEC interferes with the cleavage rate of embryos and also prevents and causes a decline in embryonic development to the morula stage and cause morphological changes during this development.

RESUMO:O objetivo deste trabalho foi avaliar, por meio de micros- copia óptica e eletrônica de transmissão, as alterações na morfologia e a viabilidade do desenvolvimento de embriões bovinos fecundados com sêmen contaminado experimentalmente à Escherichia coli produtora da toxina shiga stx2 (STEC). Para tanto, oócitos foram aspirados de ovários de vacas abatidas e selecionados para maturação in vitro. Após 20-24 horas de maturação, os oócitos foram divididos em 2 grupos. Sendo o primeiro grupo o controle (n = 418), fertilizado com sêmen testado e sem nenhum tipo de contaminante e o segundo, o grupo contaminado (n = 415), fertilizado com sêmen exposto a STEC. Cada sêmen foi tra tado pela técnica de gradiente descontínuo de Percoll. Após o período de fecundação, os embriões foram avaliados quanto a sua morfologia e viabilidade, com o auxílio da microscopia óptica e eletrônica. Na ava liação morfológica, os oócitos fecundados com o sêmen contaminado apresentaram retração citoplasmática, falhas na divisão, assimetria de blastômeros, ooplasma granuloso, coloração castanho-escuro, formação de vacúolos, degeneração e rompimento da zona pelúcida. Essas alte rações não foram observadas no grupo controle. A avaliação de todos oócitos incluídos mostrou taxas de clivagem de 70,3 e 52,8%, respec tivamente, para embriões controle e contaminado (p = 0,0001). Após o 5° dia de desenvolvimento embrionário foram observadas 44,7% de mórulas no grupo controle e 22,4% no grupo contaminado, apresen tando diferença significativa (p=0,0001). A presença da STEC interfere na taxa de clivagem dos embriões e também inviabiliza e provoca queda no desenvolvimento embrionário ao estádio de mórula, além de causar alterações morfológicas durante esse desenvolvimento.

Atividade de nucleação de gelo em Pantoea ananatis obtidos de lesões da mancha branca do milho / Ice nucleation activity in Pantoea ananatis obtained from maize white spot lesions

Lesões de mancha branca do milho causadas por Pantoea ananatis contribuiram substancialmente para a redução da produtividade nos cultivos de milho, em muitos países, incluindo o Brasil. Os sintomas iniciais da doença incluem lesões anasarcas nas folhas, que mais tarde tornam-se necróticas e de cor palha. O conhecimento básico sobre a biologia e os mecanismos de infecção deste patógeno são escassos. Neste estudo, 15 isolados de P. ananatis obtidos a partir de lesões da mancha branca do milho foram examinados quanto à sua atividade de nucleação de gelo (INA). A INA de isolados bacterianos individuais foi determinada por testes de nucleação em tubos. Isolados bacterianos foram cultivados em meio de caldo de soja tríptico e uma alíquota de 0,1 mL de cultura foi adicionada à tubos de ensaio contendo 1 mL de água destilada estéril. Os tubos foram colados em banho de gelo, o qual continha temperatura inferior a 10 ºC, por aproximadamente 2 min. A formação de gelo instantânea no tubo revelou um fenótipo INA positivo do isolado. Apenas 9 dos 15 isolados estudados apresentaram o fenótipo INA+. Testes de patogenicidade foram realizados com plantas inteiras e folhas destacadas. Os sintomas foram reproduzidos em ambos os testes, mas apenas para inoculações utilizando isolados INA+. A microscopia eletrônica permitiu a visualização de vesículas de proteínas sobre a parede celular externa de isolados caracterizados como INA+.(AU)

Maize white spot lesions caused by Pantoea ananatis has contributed substantially to yield reduction of maize crops in many countries, including Brazil. The initial symptoms of the disease include water-soaked lesions on the leaves, which later become necrotic and straw-colored. Basic knowledge regarding the biology and the infection mechanisms of this pathogen is lacking. In this study, 15 P. ananatis isolates obtained from maize white spot lesions were examined for their ice nucleation activity (INA). The INAs of individual bacterial isolates was determined by tube nucleation tests. Bacterial isolates were grown on tryptic soy broth medium and an aliquot of 0.1 mL of culture was added to test tubes containing 1 mL of sterile distilled water. The tubes were packed in an ice bath, which had a temperature below 10C, for approximately 2 min. Instantaneous formation of ice in the tube revealed a positive INA phenotype of the isolate. Only 9 of the 15 studied isolates showed the INA+ phenotype. Pathogenicity tests were performed using whole plants and detached leaves. Symptoms were reproduced in both tests, but only for the inoculations using INA+ isolates. Electron microscopy allowed visualization of protein vesicles under outer cell wall of isolates characterized as INA+.(AU)

IDENTIFICAÇÃO DOS PARÂMETROS IMUNOLÓGICOS DO CARAMUJO Pomacea lineata SPIX, 1827 (MOLLUSCA: PULMONATA) EXPOSTOS AO Schistosoma mansoni SAMBON, 1907

O objetivo deste trabalho foi obter dados relacionados à imunidade de caramujos Pomacea lineata quando expostos aos miracídios de Schistosoma mansoni, visto que estes caramujos coabitam no mesmo ambiente com os caramujos hospedeiros intermediários obrigatórios para este parasita e não são vetores. Para isso, a geração F1 P. lineata provenientes de um criadouro comercial foi utilizada neste estudo. Para tanto, coletou-se a hemolinfa de P. lineata sadios e expostos à miracídios de S. mansoni, em diferentes tempos, formando os seguintes grupos experimentais: I- Caramujos não infectados e analisados após 24 horas da exposição luminosa; II - Caramujos expostos aos miracídios de S. mansoni e analisados após 24 horas da exposição luminosa; III - Caramujos não infectados e analisados após 48 horas da exposição luminosa; IV- Caramujos expostos aos miracídios de S. mansoni e analisados após 48 horas da exposição luminosa. A exposição desses animais aos miracídios de S. mansoni demonstrou alterações significativas nas análises da contagem total de hemócitos, fenoloxidase, óxido nítrico e proteínas totais. Houve marcação positiva do TNF alfa nos agranulócitos e granulócitos. Foram descritos três tipos de hemócitos em P. lineata: agranulócitos, hialinócitos e granulócitos. Houve também alteração no tecido fibromuscular do músculo pedal com a presença de vários esporocistos circundados por tecido de granulação. Assim, podemos concluir que quando expostos ao S. mansoni, o sistema imune do P. lineata desencadeia uma série de mecanismos para protegê-lo do parasita e que essa proteção se dá com mais intensidade nas primeiras 24h após a exposição.

The objective of this work is to obtain data related to the immunity of Pomacea lineata snails when exposed to the miracidia of platelets Schistosoma mansoni, since these snails cohabit in the same environment with the host snails obligatory intermediates for this parasite. For this, the F1 generation of P. lineata from a commercial breeding site was used in this study. The hemolymph of these P. lineata snails were collected and exposed to the miracidia of S. mansoni, at different times, forming the following experimental groups: I - Uninfected snails and analyzed after 24 hours of light exposure; II - Snails exposed to S. mansoni miracidia and analyzed after 24 hours of light exposure; III - Uninfected snails and analyzed after 48 hours of light exposure; IV - Snails exposed to S. mansoni miracidia and analyzed after 48 hours of light exposure. The exposure of these animals to S. mansoni miracidia showed significant changes in the analysis of total hemocytes, phenoloxidase, nitric oxide and total proteins. There was positive labeling of TNF alpha in agranulocytes and granulocytes. Three types of hemocytes were described in P. lineata: agranulocytes, hyalinocytes and granulocytes. There was also alteration in the fibromuscular tissue of the pedal muscle with the presence of several sporocysts surrounded by granulation tissue. Thus, we can conclude that when exposed to S. mansoni, the immune system of P. lineata triggers a series of mechanisms to protect it from the parasite and that this protection occurs more intensely in the first 24 hours after exposure.

DESCRIÇÃO ULTRAESTRUTURAL DE ESPERMATOZOIDES A FRESCO E CRIOPRESERVADOS DE CATETOS (Pecari tajacu Linnaeus, 1758)

A presente dissertação teve por objetivo descrever a ultraestrutura de espermatozoides frescos e criopreservados de catetos por meio das microscopias eletrônicas de varredura (MEV) e transmissão (MET). Para tanto, três catetos machos adultos foram submetidos à eletroejaculação e o sêmen obtido foi imediatamente avaliado quanto à motilidade, integridade e funcionalidade da membrana, integridade da cromatina e morfologia por meio da microscopia de luz. Posteriormente, as amostras foram criopreservadas em diluente Tris acrescido de gema de ovo (20%) e glicerol (6%), descongeladas após uma semana e avaliadas. Amostras de sêmen fresco e descongelado foram combinadas em pools distintos de espermatozoides que foram processados para MEV e MET, sendo microfotografadas e avaliadas. Após a descongelação, observou-se um declínio na motilidade espermática, integridade e funcionalidade da membrana (P < 0,05), porém a morfologia espermática e a integridade da cromatina avaliadas pela microscopia de luz não foram significativamente afetadas. Por meio da MEV, identificou-se que os espermatozoides de catetos apresentam cabeça achatada em forma de pá, medindo 6,1 ± 0,1 m de comprimento e 3,8 ± 0,1 m de largura, com um vasto acrossomo (4,3 ± 0,1 m) apresentando uma clara demarcação entre a região pós-acrossomal, sendo delimitada por uma borda distendida, denominada de espessamento marginal. As caudas normais mediram 38,1 m, sendo formadas por uma extensa peça intermediária de 15,5 m de comprimento. Nas amostras descongeladas, tanto a MEV quanto a MET forneceram informações sobre crioinjúrias não detectadas através da microscopia de luz como a presença de vesículas no acrossomo, membrana plasmática frouxa, mitocôndrias vacuolizadas, fibras densas desorganizadas e cromatina descondensada. Em conclusão, o presente estudo fornece a primeira descrição da ultraestrutura dos espermatozoides de catetos. Além disso, a MEV e a MET contribuíram na identificação de alguns danos nanométricos provocados pelo processo de criopreservação, fornecendo informações valiosas para o aprimoramento de importantes protocolos usados para a formação de biobancos.

The objective of the present work was to describe the ultrastructure of fresh and cryopreserved spermatozoa from collared peccaries by scanning (SEM) and transmission electron microscopy (TEM). Three adult males were submitted to electroejaculation and semen was immediately evaluated for motility, membrane integrity and functionality, chromatin integrity and morphology. Subsequently, the samples were cryopreserved in Tris extender plus egg yolk (20%) and glycerol (6%), thawed after one week and evaluated. Samples of fresh and frozen-thawed semen were combined in distinct pools that were processed for SEM and TEM,. After thawing, there was a decline in sperm motility, membrane integrity and functionality (P < 0.05), sperm morphology and chromatin integrity assessed by light microscopy were not significantly affected. Analysis by SEM revealed that collared peccaries sperm presents a flattened head in a paddle format, measuring 6.1 ± 0.1 m in length and 3.8 ± 0.1 m in width. Collared peccaries sperm had a long acrosome (4.3 ± 0.1 m), presenting a clear demarcation across the post-acrosomal region, being delimited by a distended border, called the marginal thickening. Normal tails measured 38.1 m, formed by an extensive midpiece with 15.5 m in length. In frozen-thawed analysis by SEM and TEM detected presence of vesicles in the acrosome, loose plasma membrane, vacuolized mitochondria, dense fibers disorganized, and decondensed chromatin. In conclusion, we provide the first description of the ultrasctruture on sperm from collared peccaries. Moreover, SEM and TEM help us to identify some nanometric damage caused by freezing-thawing procedures, thus providing valuable information for the improvement of protocols used for biobanking formation.

ANÁLISE MORFOMÉTRICA, HISTOLÓGICA E DE COLÁGENO EM FERIDAS CUTÂNEAS DE COELHOS TRATADAS E NÃO TRATADAS COM PLASMA RICO EM PLAQUETAS DE EQUINO

O plasma rico em plaquetas autólogo é importante no processo cicatricial de cirurgias reconstrutivas, auxilia na estimulação da angiogênese, no entanto, o plasma heterólogo também se mostrou eficaz. O colágeno é sintetizado e segregado no espaço extracelular e organizados em fibrilas estriadas de acordo com o tipo de tecido. Com o objetivo de avaliar os aspectos macroscópicos, histológicos e a porcentagem de colágeno de feridas cutâneas de coelhos tratadas e não tratadas com plasma rico em plaquetas de equinos, utilizou-se 24 coelhos da raça Nova Zelândia, com idade de 12 meses e de aproximadamente 3,0Kg de peso corporal. Os animais foram separados em quadro grupos de igual número e submetidos a remoção de pele na linha média dorsal torácica (ferida tratada) e lombar (ferida controle). Nas tratadas foi aplicado plasma rico em plaqueta de equino e pomada contendo gentamicina, sulfanilamida, sulfadiazina, ureia e vitamina A, e nas do grupo controle somente pomada. Os do grupo I foi feita a colheita de tecido cutâneo para a avaliação histológica com três dias de pós-operatório, os do grupo II com sete dias, os do grupo III com 14 dias e os do grupo IV com 21 dias. Decorrido o período de avaliação de cada grupo foi retirado fragmento de pele para avaliação histológica, da porcentagem de colágeno e do diâmetro e densidade da fibrila de colágeno por microscopia eletrônica de transmissão. O uso associado do plasma rico em plaquetas heterólogo de equino com a pomada contendo gentamicina, sulfanilamida, sulfadiazina, ureia e vitamina A, em feridas de pele induzidas cirurgicamente mostrou-se eficaz na maturação das fibrilas colágenas e na antecipação do processo cicatricial.

Autologous platelet-rich plasma is important in the cicatricial process of reconstructive surgeries, aiding in the stimulation of angiogenesis. However, heterologous plasma has been shown to be more effective. Collagen is synthesized and secreted into the extracellular space and organized into striated fibrils according to the type of tissue. The objective was to evaluate the macroscopic and histological aspects of two dermal wounds on rabbits, one of which was treated with equines platelet-rich plasma. Additionally, we evaluated the percentage of collagen in these wounds. In order to achieve this, we used 24 New Zealand rabbits that were 12 months old and had a body weight of approximately 3.0 kg. The animals were separated into four groups of equal numbers and were subjected to skin removal on the thoracic dorsal midline (treated wound) and the lumbar region (control wound). To the wound receiving treatment, equine platelet-rich plasma and ointment containing gentamicin, sulfanilamide, sulfadiazine, urea, and vitamin A were applied. To the control wound, only the ointment was applied. Samples from group I were collected from the dermal tissue for histological evaluation three days postoperatively, from group II after seven days, from group III after 14 days and from group IV after 21 days. After the evaluation period of each group, a dermal fragment was collected for histological evaluation. The percentage of collagen and the diameter and density of the collagen fibril were assessed by transmission electron microscopy. The associated use of equine heterologous platelet-rich plasma with the ointment containing gentamicin, sulfanilamide, sulfadiazine, urea, and vitamin A in surgically induced dermal wounds, proved to be effective for the maturation of collagen fibrils and anticipation of the cicatricial process.

ESTUDO EPIDEMIOLÓGICO DA PARVOVIROSE CANINA E CARACTERIZAÇÃO GENOMICA DE UM ISOLADO DO TIPO 2C NO MUNICÍPIO DE CUIABÁ-MT. CUIABÁ-MT 2017

O parvovírus canino é um DNA vírus não envelopado de capsídeo icosaédrico responsável por quadros de enterite e miocardite em cães que foi identificado pela primeira vez nos anos 70 e rapidamente se espalhou pelo mundo. Até a presente data, três variantes antigênicas foram descritas (CPV- 2a / b / c). Este estudo foi conduzido com o objetivo de isolar o parvovírus canino de uma amostra de fezes de um cão infectado da região Centro-Oeste do Brasil seguindo de sequenciamento de todo o genoma e sua aplicabilidade em um ensaio de inibição de hemaglutinação para detectar anticorpos contra CPV em uma coleção de amostras de soro de uma população de cães. Foram detectadas em células de CRFK partículas virais icosaédricas, não envelopadas semelhantes ao Parvovirus. O Sequenciamento genômico seguido de análise filogenética do DNA posicionou o isolado em um grupo composto por estirpes de CPV-2c. A sequencia de aminoácidos deduzida da proteína do capsídeo VP2 mostrou as alterações comuns encontradas na variante de CVP-2c incluindo o aminoácido glutamato no resíduo 426. A reação de inibição de hemaglutinação (corte: 80) utilizando o isolado de CPV-2c como antígeno, apresentou alta ocorrência de anticorpos (97,2%, 310/320) quando testados em banco de soro sanguíneo. Tendência para a positividade foi observada entre os cães até a idade de 12 meses (p = 0,08). O presente estudo relata pela primeira vez um isolado de CPV-2c com a caracterização genômica no Brasil.

Canine parvovirus is a icosahedral non-enveloped DNA virus responsible for enteritis and myocarditis in dogs that was first identified in the 1970s and rapidly spread throughout the world. To date, three antigenic variants were described (CPV-2a/b/c). This study was conducted with the objective to isolate the canine parvovirus from a sample of feces of an infected dog from the Midwest region of Brazil following by the sequencing of the whole genome and it´s applicability in an hemagglutination inhibition assay to detect antibodies against CPV in a collection of serum samples of a population of dogs. Nonenveloped icosahedral Parvovirus-like were isolated in CRFK cells. Genomic sequence followed by phylogenetic analysis of DNA positioned our isolate in a clade comprised by strains of CPV-2c. The deduced amino acid sequence of the VP2 capsid protein showed the common changes found in CVP-2c variant including the glutamic acid amino acid in the residue 426. The hemagglutination inhibition assay (cut-off: 80) using the CPV-2c isolate as antigen showed a high occurrence (97.2%; 310/320) when tested in a sera bank. Tendency for positivity was observed among dogs until 12 months age (p=0.08). The present study reports for the first time an isolate of CPV-2c with the whole genomic characterization in Brazil.

Experimental poisoning of goats by Ipomoea carnea subsp. fistulosa in Argentina: a clinic and pathological correlation with special consideration on the central nervous system / Intoxicação experimental por Ipomoea carnea subsp. fistulosa em caprinos da Argentina: correlação clínico-patológica, com especial atenção ao sistema nervoso central

Ipomoea carnea subsp. fistulosa, aguapei or mandiyura, is responsible for lysosomal storage in goats. The shrub contains several alkaloids, mainly swansonine which inhibits lysosomal α-mannosidase and Golgi mannosidase II. Poisoning occurs by inhibition of these hydrolases. There is neuronal vacuolation, endocrine dysfunction, cardiovascular and gastrointestinal injury, and immune disorders. Clinical signs and pathology of the experimental poisoning of goats by Ipomoea carnea in Argentina are here described. Five goats received fresh leaves and stems of Ipomoea. At the beginning, the goats did not consume the plant, but later, it was preferred over any other forage. High dose induced rapid intoxication, whereas with low doses, the course of the toxicosis was more protracted. The goats were euthanized when they were recumbent. Cerebrum, cerebellum, medulla oblongata, pons and colliculi, were routinely processed for histology. In nine days, the following clinical signs developed: abnormal fascies, dilated nostrils and abnormal postures of the head, cephalic tremors and nystagmus, difficulty in standing. Subsequently, the goats had a tendency to fall, always to the left, with spastic convulsions. There was lack in coordination of voluntary movements due to Purkinje and deep nuclei neurons damage. The cochlear reflex originated hyperreflexia, abnormal posture, head movements and tremors. The withdrawal reflex produced flexor muscles hypersensitivity at the four legs, later depression and stupor. Abnormal responses to sounds were related to collicular lesions. Thalamic damage altered the withdrawal reflex, showing incomplete reaction. The observed cervical hair bristling was attributed to a thalamic regulated nociceptive response. Depression may be associated with agonists of lysergic acid contained in Ipomoea. These clinical signs were correlated with lesions in different parts of the CNS.(AU)

Ipomoea carnea subsp. fistulosa, aguapeí ou mandiyura, causa uma doença de depósito lisossomal em caprinos. A planta contém vários alcalóides, principalmente swansonine, que inibe uma α-mannosidase lisossomal e uma mannosidase II do Golgi. A intoxicação ocorre pela inibição dessas hidrolases. Há vacuolização neuronal, disfunção endócrina, lesões cardiovasculares e gastrointestinais e distúrbios imunológicos. No presente trabalho é descrita a intoxicação experimental por Ipomoea carnea subsp. fistulosa em caprinos da Argentina. Cinco cabras receberam folhas frescas e ramos de Ipomoea. No começo eles não consumiram a planta, mas depois ela foi preferida a qualquer outras forrageiras. Altas doses induziram uma intoxicação rápida, enquanto que com doses baixas demora mais tempo. As cabras foram sacrificadas quando ficavam em decúbito. Cérebro, cerebelo, medula oblonga, ponte e colículos foram processados rotineiramente para histologia. Aos nove dias, encontramos: fascie anormal, narinas dilatadas, posturas anormais da cabeça, tremores cefálicos e nistagmo, dificuldade para permanecer na estação. Posteriormente, presentearam a tendência de queda, sempre à esquerda, com convulsões espásticas. Os neurônios de Purkinje e os os núcleos profundos foram danificados. Como conseqüência, emergiu a falta de coordenação de movimentos voluntários. A hiper-reflexo coclear originou postura anormal, movimentos de cabeça e tremores. A retirada produz reflexos hipersensibilidade nos flexores dos quatro membros, depois depressão e letargia. As respostas anormais estão ligadas a lesões do colículo. Injurias no tálamo alteram o reflexo de retirada, mostrando uma reação incompleta. Os pelos eriçados da região cervical podem representar uma resposta nociceptiva também regulada pelo tálamo. A depressão pode estar associada com agonistas do ácido lisérgico presentes na Ipomoea. Esses sintomas estão relacionados com lesões em diferentes partes do SNC.(AU)

Pathological findings in fetuses of goats and cattle poisoned by Sida carpinifolia (Malvaceae) / Achados patológicos em fetos de caprinos e bovinos intoxicados por Sida carpinifolia (Malvaceae)

In Brazil, the consumption of Sida carpinifolia by livestock has been associated with neurological diseases linked to lysosomal storage disorders. This paper describes the pathological findings in two caprine fetuses from dams that were experimentally poisoned with S. carpinifolia. The goats were orally dosed with 10 and 13g/kg of a paste of green chopped S. carpinifolia for 30 days and were observed for an additional 15 days period after the last dosage with the plant; thereafter they were euthanized and necropsied. The dams showed only slight clinical signs. The study also includes the findings in one bovine fetus from a naturally S. carpinifolia poisoned cow which showed mild incoordination, generalized tremors, staggering, and frequent falls. The cow was euthanized and necropsied. While there were no significant histopathological changes in the goats, in the cow vacuolation of Purkinje neurons of the cerebellum, pancreatic acinar cells, and thyroid follicular cells were observed. The main microscopic changes observed in the caprine and bovine fetuses were vacuolation in the epithelium of renal tubules, thyroid follicular cells, and Purkinje neurons of the cerebellum. Transmission electron microscopy of sections from CNS of the cow and its fetus revealed vacuoles containing fine granular material surrounded by membrane. Lectin-histochemistry of CNS sections from goat fetuses marked lightly to sWGA lectins, WGA, and Con-A.(AU)

No Brasil, o consumo de Sida carpinifolia por animais de produção tem sido associada a doenças neurológicas relacionadas com doença de depósito lisossômico. Este trabalho descreve os achados patológicos observados em dois fetos caprinos de mães que foram experimentalmente intoxicadas por S. carpinifolia. As cabras foram intoxicadas experimentalmente com S. carpinifolia nas doses de 10 e 13g/kg durante 30 dias e foram acompanhadas durante 15 dias após o consumo da planta. Após este período foram eutanasiadas e necropsiadas. O estudo também inclui os achados patológicos encontrados em um feto de uma fêmea bovina intoxicada naturalmente pela planta, que mostrou leve incoordenação, tremores generalizados, andar desequilibrado e quedas frequentes. A vaca foi eutanasiada e necropsiada. Embora não houvesse alterações histológicas significativas nas cabras, vacuolização dos neurônios de Purkinje do cerebelo, das células acinares do pâncreas e nas células foliculares da tireoide foram observadas na vaca. As principais alterações histológicas observadas nos fetos caprinos e no feto bovino foram vacuolização no epitélio dos túbulos renais, nas células foliculares da tireoide e nos neurônios de Purkinje do cerebelo. Na microscopia eletrônica de transmissão do sistema nervoso central da vaca e de seu feto revelaram-se vacúolos contendo material finamente granulado e delimitado por membrana. Na técnica de lectina-histoquímica dos fetos caprinos houve marcação leve no SNC para as lectinas sWGA, WGA e para Con-A.(AU)

Ultrastructural study of the mycelial phase of clinical isolates of Sporothrix schenckii obtained from feline, canine and human cases of sporotrichosis

Using transmission electron microscopy, we studied the presence of melanin and cell wall thickness of clinical isolates of Sporothrix schenckii obtained from cats, dogs and humans as compared to reference strains. We detected differences regarding presence of the melanin among the clinical isolates of S. schenckii and a correlation between presence of melanin and cell wall thickness.