Resumo
Reprodutores que possuem espermograma normal podem ser classificados como subférteis ou passarem por períodos de subfertilidade. As alterações na descompactação da cromatina dos espermatozoides em bovinos são possíveis explicações encontradas para tais comportamentos. Diante disso, conduziu-se este trabalho com o objetivo de correlacionar dois métodos de identificação de alterações na cromatina em espermatozoides de bovinos, sendo eles: análise computacional de esfregaços de sêmen corados com azul de toluidina (AT) e o SCSA (sperm chromatin structure assay). Quatorze amostras de sêmen de bovinos sabidamente subférteis foram avaliadas utilizando-se os dois métodos. Nos esfregaços de sêmen corados com AT foram avaliadas a descompactação e heterogeneidade da cromatina. Com o SCSA avaliou-se a proporção de cabeças de espermatozoides coradas em vermelho (com alterações na cromatina) e em verde (normais). Posteriormente foi realizado o teste de correlação de Pearson entre as características avaliadas. A heterogeneidade da cromatina identificada por AT não possui qualquer correlação com as alterações identificadas por SCSA. Já a descompactação identificada por AT possui correlação positiva significativa com as alterações identificadas por SCSA. Concluiu-se que a descompactação cromatínica identificada pela avaliação computacional de esfregaços de sêmen corados com AT é semelhante à alteração identificada por SCSA, porém não idêntica. O método SCSA considerado padrão para avaliação da cromatina espermática possui alto custo, ao contrário da avaliação computacional de esfregaços de sêmen corados com AT, que como demonstrado no presente trabalho pode ser um método alternativo.
Assuntos
Animais , DNA , Cromatina/genética , Espermatozoides/citologia , Bovinos , Contagem de EspermatozoidesResumo
Reprodutores que possuem espermograma normal podem ser classificados como subférteis ou passarem por períodos de subfertilidade. As alterações na descompactação da cromatina dos espermatozoides em bovinos são possíveis explicações encontradas para tais comportamentos. Diante disso, conduziu-se este trabalho com o objetivo de correlacionar dois métodos de identificação de alterações na cromatina em espermatozoides de bovinos, sendo eles: análise computacional de esfregaços de sêmen corados com azul de toluidina (AT) e o SCSA (sperm chromatin structure assay). Quatorze amostras de sêmen de bovinos sabidamente subférteis foram avaliadas utilizando-se os dois métodos. Nos esfregaços de sêmen corados com AT foram avaliadas a descompactação e heterogeneidade da cromatina. Com o SCSA avaliou-se a proporção de cabeças de espermatozoides coradas em vermelho (com alterações na cromatina) e em verde (normais). Posteriormente foi realizado o teste de correlação de Pearson entre as características avaliadas. A heterogeneidade da cromatina identificada por AT não possui qualquer correlação com as alterações identificadas por SCSA. Já a descompactação identificada por AT possui correlação positiva significativa com as alterações identificadas por SCSA. Concluiu-se que a descompactação cromatínica identificada pela avaliação computacional de esfregaços de sêmen corados com AT é semelhante à alteração identificada por SCSA, porém não idêntica. O método SCSA considerado padrão para avaliação da cromatina espermática possui alto custo, ao contrário da avaliação computacional de esfregaços de sêmen corados com AT, que como demonstrado no presente trabalho pode ser um método alternativo.(AU)
Assuntos
Animais , Cromatina/genética , Espermatozoides/citologia , DNA/sangue , Bovinos , Contagem de EspermatozoidesResumo
Investigou-se a correlação entre a morfometria da cabeça e a intensidade da condensação e heterogeneidade da cromatina em espermatozoides de coelho (Oryctolagus cuniculus). Para tal, utilizaram-se 35 esfregaços de sêmen de coelhos da raça Nova Zelândia, corados com azul de toluidina e avaliados por análise de imagem computacional. As imagens foram obtidas digitalmente em tons de cinza e avaliadas por algoritmos desenvolvidos em ambiente de programação Scilab. As mensurações obtidas da cabeça dos espermatozoides foram área, perímetro, comprimento, largura, relação comprimento largura, elipsidade, fator de forma, descritores Fourier e simetria lateral e anteroposterior. Também foram avaliadas a intensidade da compactação e a heterogeneidade da cromatina espermática. Os espermatozoides de coelho apresentaram compactação e heterogeneidade cromatínica mais intensas do que os de touro e observou-se correlação significativa entre características morfométricas da cabeça e compactação e heterogeneidade cromatínica. Conclui-se que a cromatina é importante para a constituição morfológica da cabeça de espermatozoides de coelho e que a cromatina espermática de coelho é naturalmente mais heterogênea e menos compactada que a de touro.(AU)
The correlation between the head morphometry and the intensity of condensation and heterogeneity of sperm chromatin were investigated in rabbit (Oryctolagus cuniculus). To this, 35 semen smears from New Zealand rabbits were stained with toluidine blue and evaluated by computer image analysis. The images were obtained in digital grayscale and analyzed by algorithms developed in the Scilab programming environment. The measurements obtained from the sperm heads were area, perimeter, length, width, length:width ratio, ellipticity, shape factor, lateral and anterior-posterior symmetries, and Fourier descriptors. The intensity and heterogeneity of the compaction of sperm chromatin was also evaluated. The rabbit spermatozoa showed chromatin heterogeneity and condensation more intense than the bull spermatozoa, and it was observed correlation between morphometric characteristics of the head and chromatin compaction and heterogeneity. The results suggest that chromatin is important for the morphological constitution of the head morphology spermatozoa head, as well as, rabbit sperm chromatin is inherently more heterogeneous and less condensed than the bull sperm chromatin.(AU)